CN106591354A - 氨基酸转运基因OsAAP5在水稻选育中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了氨基酸转运基因OsAAP5在水稻选育中的应用,属于植物基因工程领域。OsAAP5基因编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,cDNA序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过构建水稻OsAAP5基因干扰植株,发现通过降低OsAAP5基因表达,可以使正常的水稻根长、根数、株高和鲜重增加,因此OsAAP5基因可用于水稻选育中促进水稻生长,提高水稻生物量。OsAAP5基因在阐述氨基酸运输影响植物生长及发育过程方面具有重要的应用价值。
Description
技术领域
本发明属于植物基因工程领域,具体涉及氨基酸转运基因OsAAP5在水稻选育中的应用。
背景技术
植物通过吸收土壤中的氨、硝酸根、氨基酸、可溶性肽等来获得氮素;氮的吸收和转运主要依靠铵根运输蛋白(AMT)、硝酸根运输蛋白(NRT)、氨基酸运输蛋白(AAT)、肽运输蛋白(PTR)等运输蛋白来完成(Williams L, Miller A. Transporters responsible forthe uptake and partitioning of nitrogenous solutes. Annu Rev Plant Biol andPlant Mol Biol, 2001, 52: 659-688.)。铵通过植物AMT吸收后再通过谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合酶(GOGAT)合成谷氨酰胺和谷氨酸,后者再进一步形成其它氨基酸(SonodaY, Ikeda A, Saiki S, et al. Feedback regulation of the ammonium transportergene family AMT1 by glutamine in rice. Plant Cell Physiol, 2003, 44: 1396-1402.)。植物可通过高亲和转运***(HATS)的NRT2和低亲和转运***(LATS)的NRT1吸收环境中的硝酸盐,由硝酸还原酶(NR)和亚硝酸还原酶(NiR)还原形成铵,再进一步形成氨基酸(Paungfoo-Lonhienne C, Lonhienne T G, Rentsch D, et al. Plants can useprotein as a nitrogen source without assistance from other organisms. PNAS,2008, 105: 4524-4529.)。
在高等植物中,AAT是一类跨膜蛋白,将氨基酸从胞外运至胞内,同时还在氨基酸远距离运输、病原反应和非生物胁迫等方面发挥着重要作用(Tegeder M. Transportersfor amino acids in plant cells: some functions and many unknowns. Curr OpinPlant Biol, 2012, 15: 1-7.)。AAT基因被分为两个超家族:APC(氨基酸、多胺和胆碱转运)超家族和AAAP(氨基酸/生长素透性酶)超家族。APC超家族分为三个亚家族:CATs(阳离子氨基酸转运蛋白)家族、ACTs(氨基酸/胆碱转运蛋白)家族和PHSs(多胺、H+协同转运蛋白)家族。AAAP超家族分为六个亚家族:AAPs(氨基酸透性酶)家族、LHTs(赖氨酸和组氨酸转运蛋白)家族、ProTs(脯氨酸转运蛋白)家族、GATs(γ-氨基酸丁酸,GABA)家族、AUXs(生长素转运蛋白)家族和ANTs(芳香族和中性氨基酸转运蛋白)家族(Fischer WN, Andre B,Rentsch D, et al. Amino acid transport in plants. Trends Plant Sci, 1998, 3:188-195.)。
水稻基因组中共找到85个AAT家族成员(Zhao H, Ma H, Yu L, et al. Genome-wide survey and expression analysis of amino acid transporter gene family inrice (Oryza sativa L.). PLoS ONE, 2012, 7: e49210.)。研究发现OsAAT5、OsAAT7、OsAAT24、OsAAT49和OsAAT60的T-DNA***突变体的稻米产量及植物体干重均下降,证明AAT对水稻的氮素积累及碳氮分配有着重要作用(Lu Y, Song Z, Lu K, et al. Molecularcharacterization, expression and functional analysis of the amino acidtransporter gene family (OsAATs) in rice. Acta physiol Plant, 2012, 34: 1943-1962.)。研究发现超量表达OsAAP6会增加水稻籽粒中储藏性蛋白和氨基酸含量,从而改善稻米营养和风味(Peng B, Kong H, Li Y, et al. OsAAP6 functions as an importantregulator of grain protein content and nutritional quality in rice. NatCommun, 2014, 5: doi:10.1038.)。氨基酸转运蛋白对水稻等各种植物体的氨基酸吸收、转运和储藏具有重要的作用。目前关于水稻AAP家族成员研究的报道很少,水稻氨基酸转运家族OsAAP5基因的蛋白对水稻的生长发育目前未有任何研究。本发明发现OsAAP5基因对水稻生物量影响有极其重要的作用,可应用于植物株型改良。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术中存在的问题,提供氨基酸转运基因OsAAP5在水稻选育中的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现:
本发明以水稻的氨基酸转运基因OsAAP5为对象,从水稻中花11中克隆了OsAAP5的cDNA序列。通过RNAi技术构建OsAAP5基因干扰表达载体,采用农杆菌EHA105介导的遗传转化方法,将干扰表达载体导入正常粳稻品种中花11中,得到OsAAP5基因表达量下降的干扰植株,干扰植株的根长、根数、株高和鲜重等生物量指标与对照野生型中花11相比显著提高。结果表明,OsAAP5基因在阐述氨基酸运输影响植物生长及发育过程方面具有重要的应用价值。
基于本发明发现的OsAAP5基因的功能,其可用于水稻选育中。所述的水稻选育为提高水稻根长、根数、株高和鲜重,从而能提高水稻生物量。具体可通过RNAi技术降低OsAAP5基因的表达或用CRISPR等基因编辑技术敲除OsAAP5基因,使水稻根长、根数、株高和鲜重增加,达到提高水稻生物量的目的。所述的OsAAP5基因编码的OsAAP5蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述的OsAAP5基因的cDNA序列优选如SEQ ID NO.2所示。
应该理解为,在不影响OsAAP5蛋白活性的前提下(即不在蛋白的活性中心),本领域技术人员可对SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列进行各种取代、添加和/或缺失一个或几个氨基酸获得具有同等功能的氨基酸序列。因此,OsAAP5蛋白还包括SEQ ID NO.1所示氨基酸序列经取代、替换和/或增加一个或几个氨基酸获得的具有同等活性的蛋白质。此外,应理解,考虑到密码子的简并性以及不同物种密码子的偏爱性,本领域技术人员可以根据需要使用适合特定物种表达的密码子。
本发明的优点和效果:
(1)本发明克隆的OsAAP5基因干扰表达后使水稻根长、根数、株高和鲜重增加,说明OsAAP5基因对提高水稻生物量较明显,因此,通过基因工程技术降低OsAAP5基因的表达能够提高植物生物量。这不仅有助于通过正常施氮条件下培育生长发育较好的水稻,还可以通过结合基因编辑技术和分子育种进行植物的品种改良。
(2)OsAAP5基因的成功克隆,进一步证实了氨基酸转运家族在氮吸收过程中的重要作用,对阐明氨基酸转运家族的生物学功能有重要的意义,另外对进一步了解植物氮代谢途径,提高氮吸收效率有极大的推动作用。
(3)尽管目前已克隆到了一些促进植物生长发育的基因,但对营养是如何通过关键基因影响植物生长发育的分子机制仍不清楚。而本发明克隆的OsAAP5基因能够提高水稻的生物量,对确定植物生长发育的关键因素有极大的推动作用。
附图说明
图1是对照中花11和OsAAP5基因干扰植株3个株系的整株表型图。
图2是对照中花11和OsAAP5基因干扰植株3个株系OsAAP5基因表达量的统计柱状图,数据采用SPSS软件进行变量分析(ANOVA),使用Duncan’s在0.05水平上进行差异显著性分析,不同组别星号(*)表示与对照相比具有差异显著。
图3是对照中花11和OsAAP5基因干扰植株3个株系根长的统计柱状图,数据采用SPSS软件进行变量分析(ANOVA),使用Duncan’s在0.05水平上进行差异显著性分析,不同组别星号(*)表示与对照相比具有差异显著。
图4是对照中花11和OsAAP5基因干扰植株3个株系根数的统计柱状图,数据采用SPSS软件进行变量分析(ANOVA),使用Duncan’s在0.05水平上进行差异显著性分析,不同组别星号(*)表示与对照相比具有差异显著。
图5是对照中花11和OsAAP5基因干扰植株3个株系株高的统计柱状图,数据采用SPSS软件进行变量分析(ANOVA),使用Duncan’s在0.05水平上进行差异显著性分析,不同组别星号(*)表示与对照相比具有差异显著。
图6是对照中花11和OsAAP5基因干扰植株3个株系鲜重的统计柱状图,数据采用SPSS软件进行变量分析(ANOVA),使用Duncan’s在0.05水平上进行差异显著性分析,不同组别星号(*)表示与对照相比具有差异显著。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细的说明,但本发明的实施方式不限于此。若未特别指明,下述实施例所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段;所用的实验方法均为常规方法,并可按照已描述的重组技术(参见分子克隆,实验室手册,第2版,冷泉港实验室出版社,冷泉港,纽约)完成;所用的材料、试剂等,均可从商业途径得到。
实施例1 OsAAP5基因干扰植株的构建
提取水稻中花11的RNA,并将其反转录成cDNA,利用引物对:
F1:5'-GGTACCGCGGAGAACAAGACGATGAA-3'(KpnI),
R1:5'-GGATCCATGGGCTGGCAGAACACC-3'(BamH I);
F2:5'-ACTAGTGCGGAGAACAAGACGATGAA-3'(SpeI),
R2:5'-GAGCTCATGGGCTGGCAGAACACC-3'(Sac I);
各自PCR扩增出OsAAP5基因的cDNA片段,通过上述相应的限制性内切酶酶切后连入pTCK303载体,构建出OsAAP5基因的干扰表达载体OsAAP5-pTCK303。采用农杆菌EHA105介导的遗传转化方法,将干扰表达载体导入正常粳稻品种中花11中。
将得到的所有转基因小苗移栽于带泥土的筐中,定期浇水,施肥,待小苗长高约10cm时,将50株水稻转基因小苗浸泡于蒸馏水制备的含浓度为50mg/L的500mL潮霉素溶液中48小时,之后叶子为绿色并舒张、生长状态良好的植株为阳性转基因植株;而叶子枯黄并卷曲的植株为阴性植株,随即死亡。阳性植株单株种植并收种,直至T2代鉴定出在上述潮霉素溶液中无任何叶子枯黄并卷曲的为纯合的转基因植株,即得到OsAAP5基因的干扰植株。
OsAAP5基因干扰植株的根长、根数、株高和鲜重均显著高于对照中花11植株,如图1、图3-6中所示,可以表明OsAAP5基因降低表达后可以促进水稻生长发育,提高生物量。
取OsAAP5基因干扰植株叶片,提取RNA并将其反转录成cDNA,通过实时荧光定量PCR检测OsAAP5基因在干扰植株的表达量,结果显示(图2)干扰植株中OsAAP5基因的表达量比对照中花11降低。实时荧光定量PCR所用引物对:
F3:5'-GCCACTGACTGTTTACTTCCC-3',
R3:5'-ACAGAGCCAATGCCCACT-3'。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 武汉生物工程学院
<120> 氨基酸转运基因OsAAP5在水稻选育中的应用
<130> 1
<160> 8
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 465
<212> PRT
<213> Oryza sativa
<400> 1
Met Asn Lys Asn Ala Ala Pro Glu Asp Val Glu Ser Gly Glu His Glu
1 5 10 15
Arg Thr Gly Thr Val Trp Thr Ala Thr Ala His Ile Val Thr Ala Val
20 25 30
Ile Gly Ser Gly Val Leu Ala Leu Ala Trp Ser Val Ala Gln Leu Gly
35 40 45
Trp Val Ala Gly Pro Leu Ala Leu Ala Gly Phe Ala Cys Val Thr Tyr
50 55 60
Tyr Thr Ser Thr Leu Leu Ala Asn Ala Tyr Arg Ala Pro His Pro Val
65 70 75 80
Thr Gly Thr Arg Asn Arg Thr Tyr Met Asp Ala Val Arg Ser Tyr Leu
85 90 95
Ser Pro Arg Glu Val Phe Met Cys Gly Ile Ala Gln Tyr Val Asn Leu
100 105 110
Trp Gly Thr Met Val Gly Tyr Thr Ile Thr Ala Thr Ile Ser Met Val
115 120 125
Ala Ile Arg Arg Ser Asp Cys Ile His Arg Asn Gly Ala Gly Ala Ala
130 135 140
Ala Arg Cys Asp Asn Thr Ser Ala Thr Val Leu Met Leu Ala Phe Ser
145 150 155 160
Ile Val Gln Val Val Leu Ser Gln Phe Pro Gly Leu Glu His Ile Thr
165 170 175
Trp Leu Ser Val Val Ala Ala Val Met Ser Phe Ala Tyr Ser Phe Ile
180 185 190
Gly Leu Gly Leu Ser Val Ala Glu Trp Val Ser His Gly Gly His Leu
195 200 205
Ser Gly Arg Ile Gln Gly Ala Thr Ala Ala Ser Ser Ser Lys Lys Leu
210 215 220
Trp Asn Val Leu Leu Ala Leu Gly Asn Ile Ala Phe Ala Tyr Thr Phe
225 230 235 240
Ala Glu Val Leu Ile Glu Ile Gln Asp Thr Leu Lys Pro Ser Pro Pro
245 250 255
Glu Asn Lys Thr Met Lys Lys Ala Ala Met Tyr Gly Ile Gly Ala Thr
260 265 270
Thr Ile Phe Tyr Ile Ser Val Gly Cys Ala Gly Tyr Ala Ala Phe Gly
275 280 285
Ser Asp Ala Pro Gly Asn Ile Leu Thr Ala Ser Gly Met Gly Pro Phe
290 295 300
Trp Leu Val Asp Ile Ala Asn Met Cys Leu Ile Leu His Leu Ile Gly
305 310 315 320
Ala Tyr Gln Val Tyr Ala Gln Pro Ile Phe Ala Thr Met Glu Arg Trp
325 330 335
Ile Ser Ser Arg Trp Pro Glu Ala Lys Phe Ile Asn Ser Glu Tyr Thr
340 345 350
Val Asn Val Pro Leu Ile Gln Arg Gly Ser Val Thr Val Ala Pro Tyr
355 360 365
Lys Leu Val Leu Arg Thr Val Val Val Ile Ala Thr Thr Val Val Ala
370 375 380
Met Met Ile Pro Phe Phe Asn Ala Val Leu Gly Leu Leu Gly Ala Phe
385 390 395 400
Ser Phe Trp Pro Leu Thr Val Tyr Phe Pro Ile Ser Met His Ile Ala
405 410 415
Gln Glu Lys Ile Thr Arg Gly Gly Arg Trp Tyr Leu Leu Gln Gly Leu
420 425 430
Ser Met Val Cys Leu Met Ile Ser Val Ala Val Gly Ile Gly Ser Val
435 440 445
Thr Asp Ile Val Asp Ser Leu Lys Val Ala Thr Pro Phe Lys Thr Val
450 455 460
Ser
465
<210> 2
<211> 1398
<212> DNA
<213> Oryza sativa
<400> 2
atgaacaaga acgccgcacc ggaagacgtc gagagcggcg agcacgagcg gacagggacg 60
gtatggacgg cgacggcgca cattgttacg gcggtgatcg gctccggcgt gctggcgctg 120
gcgtggagcg tggcgcagct gggttgggtg gccgggccgc tcgccctcgc cggcttcgcc 180
tgcgtcacct actacacctc cactctgctc gccaacgcct accgcgcgcc gcaccccgtc 240
accggcacca ggaaccgcac atacatggac gccgtcagat catacctcag tcctagagag 300
gtgttcatgt gcggaatcgc gcagtacgtc aacctgtggg gcaccatggt cggctacaca 360
atcaccgcaa ccataagcat ggtcgcgatc aggaggtcgg attgcatcca tcggaacggc 420
gccggcgccg ccgcgcggtg cgacaacacg tcggcgacgg tgctcatgct ggcgttcagc 480
atcgtgcagg tggtgctgtc ccagttcccg ggcctggagc acatcacctg gctgtccgtc 540
gtcgccgccg tcatgtcgtt cgcctactcc ttcatcggcc tcggcctgtc cgtggcggag 600
tgggtgtcgc acggcggcca cctcagcggc aggatccagg gcgccaccgc ggcgtcctcc 660
agcaagaagc tctggaacgt actgctcgca ctggggaaca tcgccttcgc ctacaccttt 720
gcagaagtgc taattgagat ccaggacaca ctgaaaccgt caccaccgga gaacaagacc 780
atgaagaagg cagcgatgta cgggattgga gccaccacca tcttctacat ctccgttggc 840
tgcgccgggt acgccgcgtt cggttcagat gctccgggca acatcctgac ggcgtccggt 900
atggggccct tctggctcgt cgacattgcc aacatgtgcc tcatcctcca tctcatcgga 960
gcatatcagg tttatgcaca gcccatattt gcgacaatgg agagatggat ctcctcccgg 1020
tggccggagg ccaagttcat caacagcgag tacaccgtaa acgtgccgct gatccagcga 1080
ggatcggtga ccgtggcgcc gtacaagctc gtcctccgga ccgtcgtagt catcgcgacg 1140
acggtggtgg cgatgatgat accgttcttc aacgcggtgc tggggctcct cggcgccttc 1200
agcttctggc cactgactgt ttacttcccc atcagcatgc acattgcgca ggagaagatc 1260
accaggggag ggaggtggta tctcctgcaa ggcctgagca tggtgtgctt gatgatctcg 1320
gtggcagtgg gcattggctc tgtcactgac attgttgata gcctgaaggt tgcaacccct 1380
ttcaaaactg tcagctaa 1398
<210> 3
<211> 26
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> 引物F1
<400> 3
ggtaccgcgg agaacaagac gatgaa 26
<210> 4
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> 引物R1
<400> 4
ggatccatgg gctggcagaa cacc 24
<210> 5
<211> 26
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> 引物F2
<400> 5
actagtgcgg agaacaagac gatgaa 26
<210> 6
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> 引物R2
<400> 6
gagctcatgg gctggcagaa cacc 24
<210> 7
<211> 21
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> 引物F3
<400> 7
gccactgact gtttacttcc c 21
<210> 8
<211> 18
<212> DNA
<213> Artificial
<220>
<223> 引物R3
<400> 8
acagagccaa tgcccact 18
Claims (5)
1.OsAAP5基因在水稻选育中的应用,其特征在于:所述的水稻选育为提高水稻生物量。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:通过降低OsAAP5基因的表达或敲除OsAAP5基因使水稻生物量增加。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述的水稻生物量包括水稻根长、根数、株高、鲜重。
4.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述的OsAAP5基因编码的OsAAP5蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;或OsAAP5蛋白为SEQ ID NO.1所示氨基酸序列经取代、替换和/或增加一个或几个氨基酸获得的具有同等活性的蛋白质。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述的OsAAP5基因的cDNA序列如SEQ IDNO.2所示。
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109486822A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-03-19 | 武汉生物工程学院 | 一种在水稻根中高表达的启动子的应用 |
CN111454345A (zh) * | 2020-05-18 | 2020-07-28 | 武汉艾迪晶生物科技有限公司 | 氨基酸转运基因OsATL4及其在水稻选育中的应用 |
CN112410309A (zh) * | 2020-11-27 | 2021-02-26 | 河南农业大学 | GmAAP蛋白和GmAAP基因在大豆育种中的应用 |
CN113105535A (zh) * | 2021-04-19 | 2021-07-13 | 贵州大学 | 一种水稻氨基酸转运基因及其应用以及水稻育种方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102597229A (zh) * | 2009-10-02 | 2012-07-18 | 先锋国际良种公司 | 下调acc合酶以改进植物性能 |
CN103074310A (zh) * | 2004-09-17 | 2013-05-01 | 先锋高级育种国际公司 | 异戊烯基转移酶序列及其使用方法 |
CN103602703A (zh) * | 2006-10-27 | 2014-02-26 | 孟山都巴西有限公司 | 改良植物构型并提高植物生物量和/或蔗糖产量的方法 |
CN104480119A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-04-01 | 中国农业科学院生物技术研究所 | 植物盐胁迫诱导基因OsSIR1及其编码蛋白和应用 |
-
2016
- 2016-12-02 CN CN201611096814.5A patent/CN106591354B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103074310A (zh) * | 2004-09-17 | 2013-05-01 | 先锋高级育种国际公司 | 异戊烯基转移酶序列及其使用方法 |
CN103602703A (zh) * | 2006-10-27 | 2014-02-26 | 孟山都巴西有限公司 | 改良植物构型并提高植物生物量和/或蔗糖产量的方法 |
CN102597229A (zh) * | 2009-10-02 | 2012-07-18 | 先锋国际良种公司 | 下调acc合酶以改进植物性能 |
CN104480119A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-04-01 | 中国农业科学院生物技术研究所 | 植物盐胁迫诱导基因OsSIR1及其编码蛋白和应用 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
BO PENG ET AL.: ""OsAAP6 functions as an important regulator of grain protein content and nutritional quality in rice"", 《NATURE COMMUNICATIONS》 * |
HEMING ZHAO ET AL.: ""Genome-Wide Survey and Expression Analysis of Amino Acid Transporter Gene Family in Rice (Oryza sativa L.)"", 《PLOS ONE》 * |
KIKUCHI,S. ET AL.: ""Oryza sativa Japonica Group cDNA clone:J033073B17, full insert sequence"", 《GENBANK》 * |
YONGEN LU ET AL.: ""Molecular characterization, expression and functional analysis of the amino acid transporter gene family (OsAATs) in rice"", 《ACTA PHYSIOL PLANT》 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109486822A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-03-19 | 武汉生物工程学院 | 一种在水稻根中高表达的启动子的应用 |
CN111454345A (zh) * | 2020-05-18 | 2020-07-28 | 武汉艾迪晶生物科技有限公司 | 氨基酸转运基因OsATL4及其在水稻选育中的应用 |
CN112410309A (zh) * | 2020-11-27 | 2021-02-26 | 河南农业大学 | GmAAP蛋白和GmAAP基因在大豆育种中的应用 |
CN112410309B (zh) * | 2020-11-27 | 2022-02-08 | 河南农业大学 | GmAAP蛋白和GmAAP基因在大豆育种中的应用 |
CN113105535A (zh) * | 2021-04-19 | 2021-07-13 | 贵州大学 | 一种水稻氨基酸转运基因及其应用以及水稻育种方法 |
CN113105535B (zh) * | 2021-04-19 | 2021-11-09 | 贵州大学 | 一种水稻氨基酸转运基因及其应用以及水稻育种方法 |
Also Published As
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