CN106578707B - 一种虹鳟用提高免疫力饲料 - Google Patents
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Abstract
本发明一种虹鳟用提高免疫力饲料,其特征在于按重量份数计包括如下组分:玉米蛋白粉10‑20份、大豆浓缩蛋白10‑15份、豆粕10‑15份、花生麸10‑15份、鱼粉10‑30份、鱼油2‑10份、豆油2‑10份、啤酒酵母3‑8份、复合维生素预混料0.5‑1.5份、矿物质预混料0.5‑1.0份、驱虫预混料0.1‑1份、蛋氨酸0.1‑0.5份、赖氨酸0.1‑0.5份、氯化胆碱0.2‑0.5份、磷酸二氢钙0.5‑1.5份、乙氧基喹啉0.01‑0.03份、微生态制剂0.1‑0.5份。使得提供的饲料配方营养更全面、均衡,抗病性强、能有效提升鱼体免疫力,从而能大幅提升养殖虹鳟的成活率及品质;同时因减少了大量抗生素的使用,极大程度的降低了抗生素带来的鱼体残留、环境污染等危害。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖技术中的水产饲料添加剂领域,具体涉及到一种提高虹鳟抗病能力的饲料添加剂。
背景技术
虹鳟,俗称鳟鱼,原产地北美西部,在中国为引进品种。因其肉里无刺,易于消化,富含维生素D、铁元素的含量、高度不饱和脂肪酸特别是22炭6烯酸和20炭5烯酸,前者具有助脑发育成长,活化脑细胞,延缓脑老化的功效,后者具有降低血脂,防止动脉硬化,心肌梗塞和脑中风的功效,鱼皮富含蛋白质,具有美容和强健筋骨的功效,除此还含有能供给人体必需的氨基酸、矿物质、维生素A和维生素D等人体所需元素,因此虹鳟常被称为水中人参,具有较高的营养价值。
虹鳟由于较适合人工集约化养殖,且产量高,养殖效率高,市场前景广阔。我国的虹鳟养殖主要分布在北京、黑龙江、山东、山西、辽宁、吉林、陕西等地,近年来产业发展迅速,但由于对其营养、病害防治研究滞后,养殖过程经常易出现投喂饵料营养成分不足导致的肝脂肪变性病、维生素缺乏症;由于水质喂养环境导致的寄生虫疾病如异尖线虫病、鱼虱病等,这不仅影响着成鱼的生长,也影响成鱼的质量和品相,最终影响养殖收入。因此,如何防治虹鳟鱼常见的寄生虫病害、提高其抗病免疫能力、同时提升其营养价值、促进其生长,以缩短养殖周期、降低成本已成为养殖环节中十分重要的一环。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处,提供了一种能有效提高虹鳟抗病免疫能力、营业全面均衡、能促其生长的喂养饲料,可提升虹鳟鱼的产量及品质。
本发明实现目的的技术方案如下:
一种虹鳟用提高免疫力饲料,按重量份数计包括如下组分:玉米蛋白粉10-20份、大豆浓缩蛋白10-15份、豆粕10-15份、花生麸10-15份、鱼粉10-30份、鱼油2-10份、豆油2-10份、啤酒酵母3-8份、复合维生素预混料0.5-1.5份、矿物质预混料0.5-1.0份、驱虫预混料0.1-1份、蛋氨酸0.1-0.5份、赖氨酸0.1-0.5份、氯化胆碱0.2-0.5份、磷酸二氢钙0.5-1.5份、乙氧基喹啉0.01-0.03份、微生态制剂0.1-0.5份;
进一步优选地,虹鳟用提高免疫力饲料,按重量份数计包括如下组分:玉米蛋白粉15份、大豆浓缩蛋白12份、豆粕12份、花生麸12份、鱼粉25份、鱼油7份、豆油7份、啤酒酵母5份、复合维生素预混料1份、矿物质预混料0.8份、驱虫预混料0.3份、蛋氨酸0.4份、赖氨酸0.4份、氯化胆碱0.3份、磷酸二氢钙0.8份、乙氧基喹啉0.02份、微生态制剂0.3份;
其中微生态制剂选自凝结芽孢杆菌、乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌中的一种或多种。
其中驱虫预混料按重量份数计由如下组分组成:β-1,3葡聚糖20-35份、低分子壳寡糖15-25份、维生素C 10-22份、柠檬酸5-10份、蛋氨酸锌3-6份、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯0.5-2份。
进一步地,驱虫预混料按重量份数计由如下组分组成:β-1,3葡聚糖30份、低分子壳寡糖20份、维生素C 12份、柠檬酸8份、蛋氨酸锌5份、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯7份。
此外,本发明还提供了上述驱虫预混料的制备方法,具体步骤包括将驱虫预混料各原料按组分称取,先将β-1,3葡聚糖、低分子壳寡糖、维生素C、蛋氨酸锌、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯分别研磨成粉、过100目筛后混合,加入柠檬酸,混合均匀后制得所述驱虫预混料。
虹鳟鱼养殖对技术要求和营养需求都是十分苛刻的,而且投资周期长,一般需要三年才能上市销售,因此通过改进饲喂的营养配方,提高其抗病免疫力、提高其生长速度,适当缩短养殖周期,提升养殖产量及品质显得尤为重要。
本发明所提供的配方中,鱼粉主要提供蛋白源与能量;玉米蛋白粉、大豆浓缩蛋白、豆粕、花生麸等的加入能有效地降低了鱼粉的用量,解决氨基酸平衡问题,降低了使用成本,并起到很好的诱食作用。其添加量受成本影响,含量过高时饲料转化率下降;鱼油、豆油则主要提供必需脂肪酸和能量,并起到诱食作用,当其添加过量时对产品的工艺要求、饲料储存等要求都会增加,而添加不足时,饲料的能量、诱食等功能均下降;啤酒酵母主要提供蛋白源,并有助消化的功能,当添加量过高时不利于饲料的水中稳定性;复合维生素预混料、矿物质、磷酸二氢钙、氯化胆碱等的添加,起到补充、优化营养的作用,提供虹鳟所必需的微量元素,促进鱼体新陈代谢,其添加量均不高,可有效预防鱼体维生素素缺乏症的发生;微生物制剂的添加,能使虹鳟肠道菌群更为优化,促进对饲料的消化吸收,也有利于进一步净化水质,提高养殖效率;上述各种原料组分均可在市场上采购。
此外为本发明还添加了驱虫预混料,其组分的复合添加可有效防治虹鳟鱼的寄生虫病,同时提升鱼体的免疫能力,有效促进虹鳟鱼的生长。驱虫预混料中添加了少量的5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯,可有效抑制虹鳟的寄生虫病。
5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯是一种已知的苯基噁唑类化合物,该化合物分子式为C14H15NO4,分子量为261.2,浅黄色固体,目前该化合物的应用研究多见于抗癌药物领域的研制,而未见在水产养殖尤其是在鳟鱼类疾病病害防治中应用的相关研究和报道。本发明人通过大量的实验发现在一定浓度添加范围内,5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯能迅速抑制寄生虫如鱼虱的活性,在24小时的测定中基本能完全杀死相应鱼虱,并对鱼体无害。
同时,驱虫预混料中还复合添加了β-1,3葡聚糖、低分子壳寡糖、维生素C等,β-1,3葡聚糖可以有效提升鱼体的免疫能力;添加低分子壳寡糖后虹鳟的吞噬活力等有所增强,同时增强了对杀鲑气单胞菌的抵抗力;维生素的添加不仅能提高饲料的营养成分,还对鱼类出血病、烂鳃病有一定的预防作用。
同时本发明的研究人员通过大量的实验验证,发现驱虫预混料仅需添加约为总饲料质量的0.3%添加量,就可获得较佳的驱虫、提升免疫力效果。
本发明通过上述原料的配伍,使得提供的饲料配方营养更全面、均衡,抗病性强、能有效提升鱼体免疫力,从而能大幅提升养殖虹鳟的成活率及品质;同时因减少了大量抗生素的使用,极大程度的降低了抗生素带来的鱼体残留、环境污染等危害。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详述,以下实施例只是描述性的,不是限定性的,不能以此限定本发明的保护范围。
实施例1
虹鳟用提高免疫力饲料,按重量份数计包括如下组分:玉米蛋白粉15kg、大豆浓缩蛋白12kg、豆粕12kg、花生麸12kg、鱼粉25kg、鱼油7kg、豆油7kg、啤酒酵母5kg、复合维生素预混料1kg、矿物质预混料0.8kg、驱虫预混料0.3kg、蛋氨酸0.4kg、赖氨酸0.4kg、氯化胆碱0.3kg、磷酸二氢钙0.8kg、乙氧基喹啉0.02kg、微生态制剂0.3kg;其中微生态制剂由凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌组成,质量比为1:1。
驱虫预混料按重量份数计由如下组分组成:β-1,3葡聚糖30kg、低分子壳寡糖20kg、维生素C 12kg、柠檬酸8kg、蛋氨酸锌5kg、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯7kg。
上述驱虫预混料的制备方法,具体步骤包括将驱虫预混料各原料按组分称取,先将β-1,3葡聚糖、低分子壳寡糖、维生素C、蛋氨酸锌、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯分别研磨成粉、过100目筛后混合,加入柠檬酸,混合均匀后制得所述驱虫预混料。
其中5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯可参照已有的合成方式制得:将适量乙酰乙酸乙酯溶于NaNO2的醋酸溶液中,搅拌冷却到5-7℃条件下,进行亚硝化反应,反应完成后加入***,过滤收集析出的结晶,用甲醇-***按体积比1:5再重结晶,得到α-羟亚氨基化合物;然后在氯化氢气体饱和的醋酸溶液中,α-羟亚氨基化合物与对甲氧基苯甲醛缩合,生成不稳定的中间体氮氧化合物;运用催化加氢还原中间体氮氧化合物,即可获得化合物:5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯。
实施例2
虹鳟用提高免疫力饲料,按重量份数计包括如下组分:玉米蛋白粉20kg、大豆浓缩蛋白15kg、豆粕15kg、花生麸15kg、鱼粉10kg、鱼油10kg、豆油2kg、啤酒酵母8kg、复合维生素预混料0.5kg、矿物质预混料0.5kg、驱虫预混料0.8kg、蛋氨酸0.3kg、赖氨酸0.3kg、氯化胆碱0.5kg、磷酸二氢钙1.5kg、乙氧基喹啉0.03kg、微生态制剂0.4kg;其中微生态制剂由凝结芽孢杆菌、乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌组成,质量比为1:1:1。
驱虫预混料按重量份数计由如下组分组成:β-1,3葡聚糖30kg、低分子壳寡糖20kg、维生素C 12kg、柠檬酸8kg、蛋氨酸锌5kg、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯7kg。
驱虫预混料的制备参照实施例1。
实验对比
1、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯毒性实验
5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯已见有在人体及动物体内进行抗癌实验的研究,研究表明其对细胞无毒性作用;而该化合物应用于水产养殖,尤其是应用于防治鱼虱病这种寄生虫病的研究还鲜见报道。下列实验是针对其对鱼虱尤其是海虱防治的体内实验及鱼体的耐受性实验。
取出9条在养殖场中被感染鱼虱的虹鳟,分成三组每组各3条,一组为空白组,其他两组为实验组,为每组虹鳟感染的鱼虱计数,将三组鱼转入充气良好的海水箱中,保持48小时以便适应环境,在加入5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯之前禁食24小时,两组对照组虹鳟中一组以添加5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯1.0ppm测试浓度进行处置,另一组以2ppm的浓度进行处置,饲喂后保持24小时,然后对死亡和存活的寄生虫进行计数。24小时后实验表明,空白组虹鳟感染鱼虱数量未见明显减少,而两组对比组感染鱼虱数量均接近0;同时采用5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯进行长效实验,对染病虹鳟体表鱼虱病达到了几乎100%的治愈,时效可保持到4个月左右的时间内,且无任何鱼死亡现象,被虹鳟很好的耐受,而实验中作为对照的空白组(即染病虹鳟,未加以治疗),长达4个月中出现了20%的死亡率,同时鱼体较大面积受损率高达70%。上述实验充分说明5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯能有效的控制虹鳟养殖中常见的鱼虱寄生虫病,并能被鱼体很好的耐受。
2、饲喂本发明饲料后虹鳟的免疫指标测定
选用60条健康虹鳟为三组(每组20条)进行对比实验,其中一组为空白组,即仅添加普通市售饲料,两组为试验组:一组添加实施例1所示饲料,另一组添加实施例2所示饲料添加剂,投喂时间持续60天后,测定虹鳟鱼血细胞的吞噬活性、溶菌酶活力、免疫指标测定:
1)采血
用MS-222(150mg/L)麻醉鱼体,1%肝素湿润的注射器尾部血管采血。将每尾鱼的血液分为2份,其中1份血液首先在室温下静置1h待其凝固,置冰箱4℃保存4h,4℃,4000r/min离心10min,收集血清用于溶菌酶测定;另1份用肝素抗凝,制备抗凝血,供测定白细胞吞噬活性。
2)吞噬细胞吞噬功能的测定
在抗凝血中加入0.25ml金黄色葡萄球菌悬液,充分混匀后于28℃下水浴1h,水浴期间每隔10min摇匀1次。再加入0.15mol/L冷NaCl溶液0.8ml,2000r/min离心4min,弃去上清液。然后用吸管吸取血细胞涂片,每个血样涂5片,甲醇固定5~7min,蒸馏水冲洗,Giemsa染色1~5h,水洗晾干后镜检。吞噬活性分别以吞噬百分比(PP)和吞噬指数(PI)表示:PP%=(100个吞噬细胞中参与吞噬的细胞数/100)×100%;PI%=(吞噬细胞内的细菌总数/参与吞噬的吞噬细胞数)×100%。
3)溶菌酶(LSZ)活力的测定
以溶壁微球菌为底物,用0.1mol/ml磷酸缓冲液(pH6.4)将溶壁微球菌配成0.3mg/ml的菌悬液,每个样品取3ml菌悬液,吸取0.04ml血清加入菌悬液中,混匀后立即用UV-2000分光光度计于570nm下测定AO值。然后在37℃水浴中温浴30min后,取出置于4℃水浴中10min以终止反应,测定其于570nm处的光密度值A,按下式计算溶菌酶活力:U=(AO-A)/AO。
测定结果详见下表1:结果表明添加了实施例1、实施例2所示饲料均能显著地提高虹鳟鱼的吞噬活力、血清溶菌酶活力也显著地提高,与空白对照组相比,尤其是吞噬活力指标值差异均极显著;且相较而言试验组1即添加实施例1饲料组的各项指标也明显好于试验组2。
组别 | PP% | PI% | 溶菌酶活性 |
空白组 | 42.15±4.12 | 4.13±0.21 | 1.97±0.021 |
试验组1 | 75.45±2.52 | 6.71±0.32 | 0.510±0.035 |
试验组1 | 62.56±3.15 | 5.67±0.58 | 0.391±0.016 |
表1
3、免疫保护实验
选用120条健康虹鳟为三组(每组40条)进行对比实验,其中一组为空白组,即仅添加普通市售饲料,两组为试验组:一组添加实施例1所示饲料,另一组添加实施例2所示饲料添加剂,虹鳟鱼养殖9周后,经迟钝爱德华氏菌活菌攻毒96h,试验结果见表2,空白组死亡率为90%,试验组的死亡率均有大幅降低,获得了较佳的免疫保护率,尤其是试验1组,死亡率仅为10%,免疫保护率达到88.9%。
免疫保护率=(空白组死亡率-试验组死亡率)/空白组死亡率*100%。
组别 | 死亡率 | 免疫保护率 |
空白组 | 90% | / |
试验组1 | 10% | 88.9% |
试验组2 | 20% | 77.8% |
表2
以上对本发明的较佳实施例进行了详细说明,但所述内容仅为本发明的较佳实施例,不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等,均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
Claims (1)
1.一种虹鳟用提高免疫力饲料,其特征在于按重量份数计包括如下组分:玉米蛋白粉15份、大豆浓缩蛋白12份、豆粕12份、花生麸12份、鱼粉25份、鱼油7份、豆油7份、啤酒酵母5份、复合维生素预混料1份、矿物质预混料0.8份、驱虫预混料0.3份、蛋氨酸0.4份、赖氨酸0.4份、氯化胆碱0.3份、磷酸二氢钙0.8份、乙氧基喹啉0.02份、微生态制剂0.3份;所述驱虫预混料按重量份数计由如下组分组成:β-1,3 葡聚糖30份、低分子壳寡糖20份、维生素C 12份、柠檬酸8份、蛋氨酸锌5份、5-甲基-2-(4-甲氧基苯基)-4-噁唑甲酸乙酯7份 ;其中微生态制剂由凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌组成,质量比为1:1。
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