CN106573958A - 用于制备催产素类似物的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明包括用于制备式(I)的催产素类似物的新型方法,其中R1是氢或C1‑7‑烷基并且R2是氢或C1‑7‑烷基;或R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成任选地被羟基或卤素取代的5元杂环;R3是C1‑7‑烷基。式I的催产素类似物充当催产素受体激动剂并且具有用于治疗神经性障碍的潜力。
Description
本发明涉及用于制备式I的催产素类似物和它的相应对映异构体和/或其旋光异构体的新方法,
其中
R1是氢或C1-7-烷基并且
R2是氢或C1-7-烷基;或
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成5元杂环,所述杂环任选地被羟基或卤素取代;
R3是C1-7-烷基。
式I的催产素类似物充当催产素受体激动剂并且具有用于治疗神经性障碍如自闭症(autism),应激(stress),包括创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder),焦虑症(anxiety),包括焦虑性障碍(anxiety disorder)和抑郁症(depression),精神***症(schizophrenia),精神障碍(psychiatric disorder)和记忆丧失(memory loss),酒精戒断(alcohol withdrawal),药物成瘾(drug addiction)和用于治疗普拉德-威利(Prader-Willi)综合征的潜力(PCT公开WO 2014/095773)。
催产素类似物根据PCT公开WO 2014/095773中描述的方法的制备的特征在于包括以下步骤:
x1)将Fmoc从式X的树脂结合的肽前体断开,
x2)所述烯丙基在随后的步骤中断开
x3)在所述树脂上的环环化
x4)全面脱保护和从所述树脂的断开
x5)纯化和分离。
发现这种现有技术中已知的方法具有低的总体收率和产品选择性的缺点。
因此本发明的目的在于提高所需催产素类似物的合成的收率和选择性方面。
该目的可以利用如以下后文中所概括的本发明的方法进行。
用于制备式I的催产素类似物和它的相应对映异构体和/或其旋光异构体的方法,
其中
R1是氢或C1-7-烷基,并且
R2是氢或C1-7-烷基;或
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成任选地被羟基或卤素取代的5元杂环;
R3是C1-7-烷基
包括:将式II的树脂结合的肽前体
其中
R1、R2和R3如上所述,并且
R4羟基保护基;
R5是Fmoc;
R6是烯丙基、叔丁基、1-金刚烷基、4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基或苯基异丙基;
R7是酰胺保护基;并且
R8是酰胺保护基
和它的相应对映异构体和/或其旋光异构体,
或者根据以下方法进行处理:
a)其中在R6是烯丙基或4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基的情况下,
a1)将所述烯丙基或所述4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基基团R6断开,在随后的步骤中
a2)将所述Fmoc基团R5断开,之后
a3)在所述树脂上进行环环化,在另一个步骤中
a4)进行全面脱保护和从所述树脂的断开,并且任选地
a5)纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物;
或者根据以下方法进行处理:
b)其中在R6是叔丁基、1-金刚烷基或苯基异丙基的情况下;
b1)将所述Fmoc基团R5断开,之后
b2)进行全面脱保护和从所述树脂的断开,在另一个步骤中
b3)在溶液中进行环环化,然后任选地
b4)纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物。
提供以下定义以举例说明和限定在本文中用来描述发明的多个术语的含义和范围。
术语“C1-7-烷基”涉及一至七个碳原子,优选地一至四个,更优选地一至二个碳原子的支链或直链一价饱和脂肪族烃基。此术语通过基团如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基、戊基及其异构体,己基及其异构体和庚基及其异构体进一步例示。
同样地,术语“C1-4-烷基”涉及一至四个碳原子的支链或直链一价饱和脂肪族烃基,其中优选和相应实例如上所述。
术语“C1-4-烷基氧基”涉及连接至氧原子的C1-4-烷基链。此术语通过基团如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基进一步例示。
术语“C1-4-烷基氧基羰基”涉及连接至羰基基团的C1-4-烷氧基链并且通过连接至羰基基团的以上列出的特定烷氧基基团进一步例示。
术语“C2-4-烯基”涉及含有至少一个双键的含有2至4个碳原子的不饱和直链或支链。此术语通过基团如乙烯基、烯丙基和丁烯基及其异构体进一步例示。
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
由R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成的术语“5元杂环”,代表:任选地被羟基或卤素取代的吡咯烷环,特别地代表脯氨酸的被羟基或氟取代的吡咯烷环。
术语“酰胺保护基”是指常规地用来阻碍酰胺基团的反应性的酸或路易斯酸敏感性取代基。适宜的酸或路易斯酸敏感性酰胺保护基描述于Isidro-Llobet A.,Alvarez,M.和Albericio F.,“Amino Acid-Protecting Groups”,Chem.Rev.2009,109,2455-2504.,Chan W.C.和White P.D.“Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis”,Oxford UniversityPress以及Green T.,“Protective Groups in Organic Synthesis”,第4版,由WileyInterscience编辑,2007,第7章,696及之后几页。适宜的酰胺保护基因此可以选自三苯甲基、Tmob(2,4,6-三甲氧基苄基)、Xan(9-呫吨基)、Cpd(环丙基二甲基甲基)、Mbh(4,4’-二甲氧基二苯甲基)或Mtt(4-甲基三苯甲基),
用于取代基R4的术语“羟基保护基”是指常规地用来阻碍羟基基团的反应性的任何取代基。适宜的羟基保护基描述于Isidro-Llobet A.,Alvarez,M.和Albericio F.,“Amino Acid-Protecting Groups”,Chem.Rev.2009,109,2455-2504.,Chan W.C.和WhitePD.“Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis”,Oxford University Press,Green T.,“Protective Groups in Organic Synthesis”,第1章,John Wiley and Sons,Inc.,1991,10-142,并且可以选自任选地被苯基或卤代苯基取代的C1-4-烷基;C2-4-烯基;任选地被C1-4-烷基或苯基取代的甲硅烷基,或C1-4-烷基氧基羰基。
螺旋键代表或代表因此指示分子的手性。
每当在化学结构中存在手性碳时,意图与该手性碳相关的所有立体异构体由所述结构涵盖,作为纯立体异构体以及它们的混合物。
在本发明的一个特别实施方案中,催产素类似物具有式Ia
其中R1、R2和R3如上所述。
R1特别地是氢或C1-4-烷基,更特别地是氢或甲基。
R2特别地是氢或C1-4-烷基,更特别地是氢。
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起特别地形成脯氨酸的吡咯烷环,所述吡咯烷环任选地被羟基或卤素取代,特别地被羟基或氟取代;
R3特别地代表正丁基或异丁基;
甚至更特别的催产素类似物在以下列出:
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Pro-Leu-Gly-NH2 (2)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Leu-Gly-NH2 (3)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Nle-Gly-NH2 (4)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-反式-4-氟-Pro-Leu-Gly-NH2 (5)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-反式-4-羟基-Pro-Leu-Gly-NH2 (6)。
式II的树脂结合的肽前体具有下式:
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8如上所述。
R1特别地是氢或C1-4-烷基,更特别地是氢或甲基。
R2特别地是氢或C1-4-烷基,更特别地是氢。
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起特别地形成脯氨酸的吡咯烷环,所述吡咯烷环任选地被羟基或卤素取代,特别地被羟基或氟取代;
R3特别地代表正丁基或异丁基;
R4特别地是叔丁基、烯丙基、三苯甲基、2-氯三苯甲基、叔丁基氧基羰基、叔丁基二苯基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基,但更特别地是叔丁基;
R5是Fmoc;
R6特别地是烯丙基1-金刚烷基、4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基、苯基异丙基或叔丁基,但更特别地是烯丙基;
R7特别地是三苯甲基、2-氯三苯甲基、4-甲基三苯甲基,但更特别地是三苯甲基;并且
R8特别地是三苯甲基、2-氯三苯甲基、4-甲基三苯甲基,但更特别地是三苯甲基。
式II的树脂结合的肽前体可以使用固相肽合成领域的技术人员已知的方法制备,通常通过所需的Fmoc保护的氨基酸的重复Fmoc断开和重复偶联进行。
一般说来,可以使用适用于固相肽合成,特别地适用于Fmoc固相肽合成的商购可得酰胺树脂。可用的树脂例如描述于Chan W.C.和White P.D.“Fmoc Solid Phase PeptideSynthesis”,Oxford University Press。例如,发现来自Agilent Technology的PL-Rink树脂(4-[(2,4-二甲氧基苯基)Fmoc-氨基甲基]苯氧基乙酰氨基甲基树脂)特别适合用于本发明的方法。
可以利用哌啶衍生物在适宜的有机溶剂中的溶液发生Fmoc断开。有利地,可以应用在N,N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮中的哌啶或4-甲基哌啶溶液。
利用Fmoc保护的氨基酸的在所述树脂上的偶联可以利用选自以下各项的偶联剂在有机胺碱和适宜的有机溶剂存在下发生:六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基鏻(PyBOP)、六氟磷酸(7-氮杂苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(PyAOP)、六氟磷酸溴三吡咯烷基鏻(PyBroP)、羟基苯并***(HOBt)和N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HBTU)、六氟磷酸O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HATU)、六氟磷酸O-(6-氯苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HCTU)、六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳(COMU)、六氟磷酸四甲基氟代甲脒(TFFH)、2-羟基-吡啶(HOPy)或氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉(DMTMM)。
已发现在作为有机胺碱的吡啶和作为有机溶剂的N,N’-二甲基甲酰胺存在下,HOBt、HOPy和DIC是优选的偶联剂。
式X的Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-树脂
可以例如通过以下Fmoc-保护的氨基酸以所描述的顺序的重复Fmoc断开和重复偶联在PL-Rink树脂构建:Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Glu(OAll)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH和Fmoc-Gly-OH。
如上概述的,本发明的方法可以依照方法a),其中R6是烯丙基或4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基。在这种情况下,所述方法的特征在于包括以下步骤:
a1)将所述烯丙基或4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基基团R6断开,在随后的步骤中
a2)将所述Fmoc基团R5断开,之后
a3)在所述树脂上进行环环化,在另一个步骤中
a4)进行全面脱保护和从所述树脂的断开,并且任选地
a5)纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物进行。
通常在钯或铑化合物存在下或在肼存在下进行在步骤a1)中的所述烯丙基或4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基基团断开。适宜的钯或铑化合物可以选自四(三苯基膦)钯、乙酸钯/三苯基膦、乙酸钯/亚膦酸三乙酯、二(三苯基膦)二氯化钯或三(三苯基膦)氯化铑。优选地使用钯化合物,甚至更优选地使用四(三苯基膦)钯。
另外,通常存在清除剂如苯基硅烷、吡咯烷、吗啉或N-甲基-N-三甲基甲硅烷基-三氟乙酰胺、特别地苯基硅烷。
反应通常在室温在适宜的有机溶剂如二氯甲烷、乙腈或四氢呋喃中发生。
可以利用在在适宜的有机溶剂中的哌啶或4-甲基-哌啶如上概述地进行步骤a2)中的Fmoc断开。
方便地使用选自以下各项的环化剂在所述树脂上在有机胺碱存在下进行步骤a3)中的环环化:六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基鏻(PyBOP)、六氟磷酸(7-氮杂苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(PyAOP)、六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(1H-苯并***-1-基)脲(HBTU)、六氟磷酸1-[二(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-***并[4,5-b]吡啶3-氧化物(HATU)、六氟磷酸O-(6-氯苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HCTU)、六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳(COMU)、2-羟基-吡啶(HOPy)或氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉(DMTMM)。
适宜的有机胺碱可以选自吡啶、咪唑、N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、N-甲基吗啉、N,N-二甲基-4-氨基吡啶、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯或1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷。
在一个优选实施方案中,可以在作为有机胺碱的N,N-二异丙基乙胺、咪唑或N-甲基吗啉存在下,在0℃至25℃之间的温度利用PyBOP或PyAOP进行环化步骤a3)。
可以在三氟乙酸/水和适宜的清除剂如茴香硫醚、茴香醚、苯酚、三异丙基硅烷、三乙基硅烷、乙二硫醇或二硫苏糖醇存在下,通常在0℃至25℃的温度进行步骤a4)中的全面脱保护和从所述树脂的断开。已发现三异丙基硅烷是优选的清除剂。
在步骤a5)中,粗制催产素类似物可以通过滤除所述树脂、通过从滤液去除溶剂以及进一步通过将残留物放入适宜的有机溶剂如在甲基叔丁基醚、2-甲基四氢呋喃中或在其混合物中以及通过最终的过滤和干燥来分离。
粗催产素类似物可以在具有适宜的有机溶剂如具有含水乙腈和适宜的添加剂如三氟乙酸、乙酸和乙酸铵的溶液中通过制备型HPLC纯化。
然后可以将获得的级分冻干以获得纯的式I的催产素类似物。
备选地,本发明的方法可以依照方法b),其中R6是叔丁基、1-金刚烷基或苯基异丙基。在这种情况下,所述方法的特征在于包括以下步骤:
b1)将所述Fmoc基团R5断开,之后
b2)进行全面脱保护和从所述树脂的断开,在另一个步骤中
b3)在溶液中进行环环化,然后任选地
b4)纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物。
可以如以上对于步骤a2)所述发生步骤b1)中的Fmoc断开。
可以如步骤a4)中的以上所述进行步骤b2)中的全面脱保护和从所述树脂的断开。对于步骤a4所描述的优选实施方案同样适用于步骤b2)。
步骤b3)中的环环化在溶液中进行,但可以利用以上对于步骤a3)所列举的环化剂和有机碱发生。对于步骤a3所描述的优选实施方案同样适用于步骤b3)。
步骤b4)中的分离和纯化可以以在步骤a5)中所述的相同方式发生。对于步骤a5所描述的优选实施方案同样适用于步骤b4)。
在本发明的一个特别实施方案中,方法备选b)相对于方法备选a)是有利的。
实施例
缩写:
SPPS=固相肽合成,PL-Rink树脂=4-[(2,4-二甲氧基苯基)Fmoc-氨基甲基]苯氧基乙酰氨基甲基树脂,来自Agilent Technology(PL1467-4749:0.32mmol/g 75-150-10-6m;PL1467-4799:0.55mmol/g 75-150-10-6m;PL1467-4689:0.96mmol/g 150-300-10-6m),Fmoc=9-芴基甲氧基羰基,Gly=甘氨酸,Leu=亮氨酸,Glu(OAll)=烯丙基-保护的谷氨酸,Glu(tBu)=叔丁基-保护的谷氨酸,Asn(Trt)=三苯甲基-保护的天冬酰胺,Gln(Trt)=三苯甲基-保护的谷氨酰胺,Ile=异亮氨酸,Tyr(tBu)=叔丁基-保护的酪氨酸,Sar=N-甲基甘氨酸,Pro=脯氨酸,Nle=正亮氨酸,DMF=N,N-二甲基甲酰胺,HOBt=1-羟基苯并***,HOPy=2-羟基-吡啶,DIC=N,N’-二异丙基碳二亚胺,NEP=N-乙基吡咯烷酮,PyBOP=六氟磷酸(苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻,DIPEA=二异丙基乙胺,MeOH=甲醇,CH2Cl2=二氯甲烷,MTBE=甲基叔丁基醚,MeTHF=2-甲基四氢呋喃,TFA=三氟乙酸,MeCN=乙腈,PyAOP=六氟磷酸(7-氮杂苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻,HBTU=六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(1H-苯并***-1-基)脲,HATU=六氟磷酸1-[二(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-***并[4,5-b]吡啶3-氧化物,HCTU=六氟磷酸O-(6-氯苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲,COMU=六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳,DMTMM=氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉,NMP=1-甲基-2-吡咯烷酮,DMSO=二甲亚砜,DMI=1,3-二甲基-2-咪唑啉酮,DMPU=1,3-二甲基-3,4,5,6-四氢-2(1H)-嘧啶酮,NMM=N-甲基吗啉,DMAP=N,N-二甲基-4-氨基吡啶,DIPEA=N,N-二异丙基乙胺,DBU=1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯,DABCO=1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷。
比较例
类似于WO2014/095773(固相环化)的合成描述并且如以下方案1中所概述的,进行比较实验用于制备
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
方案1:
合成性能已基于收率和产物(1)与以下方案2中所示式的二聚体副产物的比率进行测量:
方案2:
a)Fmoc-断开:
在SPPS反应器(100mL;肽合成器CS136XT ex CSBio)中装入PL-Rink树脂(加载0.55mmol/g,5.00g,2.75mmol)和在DMF(50.0mL)中的20%哌啶。然后将混合物在25℃搅拌10min。在排干溶剂之后,加入另一部分在DMF(50.0mL)中的20%哌啶并将混合物在25℃搅拌30min。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(8x50.0mL)洗涤,得到deFmoc-PL-Rink树脂。
b)与Fmoc-AA-衍生物偶联:
向deFmoc-PL-Rink树脂中,加入下列的溶液:在0.35M HOBt/DMF中的Fmoc-Gly-OH(32.0mL,11.2mmol)、在DMF中的0.92M DIC(16.0mL,14.7mmol)和在DMF中的10%吡啶(16.0mL,19.8mmol)并在25℃搅拌3h。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x50.0mL)洗涤,得到Fmoc-Gly-树脂。
代替Fmoc-Gly-OH,采用以下的Fmoc-氨基酸-衍生物,将Fmoc-断开和Fmoc-AA-衍生物偶联步骤重复8次:Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Glu(OAll)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH,得到Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-树脂。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):1211.8(M+H)+
c)Fmoc-断开:
末端Gly的Fmoc-断开如上所述进行,得到H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-树脂。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):989.8(M+H)+
d)烯丙基-断开:
向H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-树脂中,加入四(三苯基膦)钯(159mg,0.138mmol)和苯基硅烷(3.40mL,27.6mmol)在CH2Cl2(50.0mL)中的溶液并在25℃搅拌30min。在排干溶剂之后,将此步骤再重复一次并用DMF(2x50.0mL)洗涤。加入二硫代氨基甲酸钠(250mg)和DIPEA(0.250mL)在DMF(50.0mL)中的溶液并将混合物在25℃搅拌15min。在排干溶剂之后,将此步骤再重复一次。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x50.0mL)洗涤,得到H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-树脂。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):949.7(M+H)+
e)树脂上的环化:
将PyBOP(2.36g,4.54mmol)和DIPEA(2.40mL,13.8mmol)在NEP(60.0mL)中的溶液加入至H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-树脂中并将混合物在25℃搅拌4h。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x50.0mL)、CH2Cl2(3x50.0mL)和MeOH(3x50.0mL)洗涤。将该树脂在10毫巴在25℃干燥1天,得到c[Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu]-Gly-Leu-Gly-树脂(8.60g)。
f)全面脱保护和树脂断开:
向三异丙基硅烷(2.80mL)在TFA(40.0mL)和水(10.0mL)中的预冷(10-15℃)溶液中,加入c[Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu]-Gly-Leu-Gly-树脂(8.60g)并在25℃搅拌3h。将该树脂滤掉并将滤液在真空浓缩。将残余物加入至MTBE(100mL)中并将混合物在25℃搅拌15h。将混合物过滤并将滤饼用MTBE(50.0mL)洗涤,接着干燥,得到粗制c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH21(2.01g,测定11.3wt%,总计9%收率),为白色固体,具有15.9%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法,参见实施例1)。1/二聚体的比率为8.5。
表1:
实施例1(固相环化)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
方案3:
a)Fmoc-断开:
在SPPS反应器(100mL;肽合成器CS136XT ex CSBio)中装入PL-Rink树脂(加载0.55mmol/g,5.00g,2.75mmol)和在DMF(50.0mL)中的20%哌啶。然后将混合物在25℃搅拌10min。在排干溶剂之后,加入另一部分在DMF(50.0mL)中的20%哌啶并将混合物在25℃搅拌30min。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(8x50.0mL)洗涤,得到deFmoc-PL-Rink树脂。
b)与Fmoc-AA-衍生物偶联:
向deFmoc-PL-Rink树脂中,加入下列的溶液:在0.35M HOBt/DMF中的Fmoc-Gly-OH(32.0mL,11.2mmol)、在DMF中的0.92M DIC(16.0mL,14.7mmol)和在DMF中的10%吡啶(16.0mL,19.8mmol)并在25℃搅拌3h。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x50.0mL)洗涤,得到Fmoc-Gly-树脂。
代替Fmoc-Gly-OH,采用以下的Fmoc-氨基酸-衍生物,将Fmoc-断开和Fmoc-AA-衍生物偶联步骤重复8次:Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Glu(OAll)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH,得到X(Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-树脂)。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):1211.8(M+H)+
c)烯丙基-断开:
向X(Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-树脂)中,加入四(三苯基膦)钯(159mg,0.138mmol)和苯基硅烷(3.40mL,27.6mmol)在CH2Cl2(50.0mL)中的溶液并在25℃搅拌30min。在排干溶剂之后,将此步骤再重复一次并用DMF(2x50.0mL)洗涤。加入二硫代氨基甲酸钠(250mg)和DIPEA(0.250mL)在DMF(50.0mL)中的溶液并将混合物在25℃搅拌15min。在排干溶剂之后,将此步骤再重复一次。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x50.0mL)洗涤,得到Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-树脂。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):1171.8(M+H)+
d)Fmoc-断开:
末端Gly的Fmoc-断开如上所述进行,得到H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-树脂。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):949.7(M+H)+
e)树脂上的环化:
将PyBOP(2.36g,4.54mmol)和DIPEA(2.40mL,13.8mmol)在NEP(60.0mL)中的溶液加入至(H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-树脂中并将混合物在25℃搅拌4h。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x50.0mL),CH2Cl2(3x50.0mL)和MeOH(3x50.0mL)。将该树脂在10毫巴在25℃干燥1天,得到c[Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu]-Gly-Leu-Gly-树脂(9.17g)。
f)全面脱保护和树脂断开:
向三异丙基硅烷(2.50mL)在TFA(40.0mL)和水(10.0mL)中的预冷(10-15℃)溶液中,加入c[Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu]-Gly-Leu-Gly-树脂(9.17g)并在25℃搅拌3h。将该树脂滤掉并将滤液在真空浓缩。将残余物加入至MTBE(100mL)中并将混合物在25℃搅拌15h。将混合物过滤并将滤饼用MTBE(50.0mL)洗涤,接着干燥,得到粗制c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH21(2.39g,测定40.9wt%,总计38%收率),为白色固体,具有62.7%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法:Aquity UPLC BEH130 C18柱,150x2.1mm;流动相,A:在水中的0.05%TFA,B:在MeCN中的0.05%TFA;流速:0.13mL/min持续40min,0.25mL/min持续15min;等梯度90/10(A/B)持续3min,在37min内梯度从90/10(A/B)至62/38(A/B),在5min内梯度从62/38(A/B)至10/90(A/B),等梯度10/90(A/B)持续10min。温度:60℃,UV:214nm)。1/二聚体的比率为21.9。
保留时间:23.2min(c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2),18.8min(H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Gly-Leu-Gly-NH2),26.1min(二聚体)
g)纯化和分离:
将粗制c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2溶解于水-MeCN(10-1)并过滤。将滤液用相同体积的水稀释。该溶液通过制备型HPLC在Kromasil-C18-100柱(250x80mm,10um粒径,A:0.1%TFA-水,B:MeCN;流速300mL/min;等梯度95/5(A/B)上持续2min,在1min内梯度从95/5(A/B)至80/20(A/B),在17min内梯度从80/20(A/B)至77/23(A/B),在1min内梯度从77/23(A/B)至10/90(A/B),等梯度10/90(A/B)持续7min,在1min内梯度从10/90(A/B)至95/5(A/B),等梯度95/5(A/B)持续6min)上纯化。收集级分并冻干,得到纯的c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH21(0.708g),为白色粉末,具有99.2%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)。在纯的1中没有观察到二聚体。MS(m/z):931.0(M+H)+
实施例2(溶液相环化)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
方案4:
a)Fmoc-断开:
在SPPS反应器(100mL)中装入PL-Rink树脂(加载0.55mmol/g,5.00g,2.75mmol)和在DMF(50mL)中的20%哌啶。然后将混合物在25℃搅拌10min。在排干溶剂之后,加入另一部分在DMF(50.0mL)中的20%哌啶并将混合物在25℃搅拌30min。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(8x50.0mL)洗涤,得到deFmoc-PL-Rink-树脂。
b)Fmoc-AA-衍生物的偶联:
向deFmoc-PL-Rink-树脂中,加入下列的溶液:在0.35M HOBt/DMF中的Fmoc-Gly-OH(32.0mL,11.2mmol)、在DMF中的0.92M DIC(16.0mL,14.7mmol)和在DMF中的10%吡啶(16.0mL,19.8mmol)并在25℃搅拌3h。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x50.0mL)洗涤,得到Fmoc-Gly-树脂。
代替Fmoc-Gly-OH,采用以下的Fmoc-氨基酸-衍生物,将Fmoc-断开和Fmoc-AA-衍生物偶联步骤重复8次:Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Glu(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH,得到X(Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBu)-Pro-Leu-Gly-树脂)。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):1171.8(M+H)+
c)Fmoc-断开:
末端Gly的Fmoc-断开如上所述进行。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(8x50.0mL)、CH2Cl2(3x50.0mL)和MeOH(3x50.0mL)洗涤。将该树脂在10毫巴在25℃干燥1天,得到H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBu)-Gly-Leu-Gly-树脂(10.8g)。
d)全面脱保护和树脂断开:
向三异丙基硅烷(2.50mL)在TFA(40.0mL)和水(10.0mL)中的预冷(10-15℃)溶液中,加入H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBu)-Gly-Leu-Gly-树脂(10.8g)并在25℃搅拌3h。将该树脂滤掉并将滤液在真空浓缩。将残余物加入至MeTHF(100mL)并将混合物在25℃搅拌15h。将混合物过滤并将滤饼用MeTHF(50.0mL)洗涤,接着干燥,得到LP1(H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Gly-Leu-Gly-NH2)(3.60g),为白色固体,具有67.4%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)。MS(m/z):949.7(M+H)+
e)溶液中的环化:
向LP1(H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Gly-Leu-Gly-NH2)(3.50g)在NEP(60.0mL)和DIPEA(3.13mL,18.4mmol)中的混合物中加入PyBOP(1.92g,3.69mmol)并在25℃搅拌1h。为了完成转化,加入另一部分的PyBOP(0.960g,1.84mmol)并在相同温度搅拌1h。将所得的混合物加入至MTBE/MeTHF溶液(400mL/100mL)的溶液并在25℃搅拌15h。将混合物过滤并将滤饼用MTBE(50.0mL)洗涤,接着干燥,得到粗制c[Gly-Tyr-Leu-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH21(4.30g,测定18.0wt%,总计31%收率),为白色固体,具有56.6%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参见实施例1)。1/二聚体的比率为15.1.
f)纯化和分离:
将粗制c[Gly-Tyr-Leu-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2溶解于水-MeCN(10-1)并滤掉未溶解的物料。将滤液用相同体积的水稀释。将该溶液通过制备型HPLC在Kromasil-C18-100柱(250x80mm,10um粒径,A:0.1%TFA-水,B:MeCN;流速300mL/min;等梯度95/5(A/B)上持续2min,在1min内梯度从95/5(A/B)至80/20(A/B),在17min内梯度从80/20(A/B)至77/23(A/B),在1min内梯度从77/23(A/B)至10/90(A/B),等梯度10/90(A/B)持续7min,在1min内梯度从10/90(A/B)至95/5(A/B),等梯度95/5(A/B)持续6min)上纯化。收集级分并冻干,得到纯的c[Gly-Tyr-Leu-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH21(444mg),为白色粉末,具有99.7%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)。在纯的1中没有观察到二聚体。MS(m/z):931.0
实施例3a-g(偶联试剂的优化):
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
以与实施例2的类似方式,采用表2中所列的偶联试剂进行环化。
表2:
实施例4a-g(溶剂的优化):
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
以与实施例2的类似方式,采用表3中所列的溶剂进行环化。
表3:
实施例5a-g(碱的优化):
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
以与实施例2的类似方式,采用表4中所列的碱进行环化。
表4:
实施例6a-d(树脂加载/氨基酸当量的比较):
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Pro-Leu-Gly-NH2 (2)
方案5:
以与实施例2的类似方式,纯的环肽2采用Fmoc-AA-酸:Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Glu(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH合成
合成的规模:9.60mmol(加载:参见实施例6a-d;树脂30.0g)
收率:40%(纯化后)
纯度:98.2%(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)
保留时间:29.8min(HPLC方法参考实施例1)
MS(m/z):971.5(M+H)+
线性肽中间体LP2(H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Pro-Leu-Gly-NH2)的纯度和收率采用表5中所列的树脂加载/氨基酸当量确定。
表5:
实施例7
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Pro-Leu-Gly-NH2 (2)
实施例7以与实施例2的类似方式进行,除了采用N-甲基吗啉作为碱进行环化。
a)Fmoc-断开:
在SPPS反应器(250mL;肽合成器CS536XT ex CSBio)中装入PL-Rink树脂(加载0.55mmol/g,10.0g,5.50mmol)和在DMF中的20%哌啶(100mL)。然后将混合物在25℃搅拌10min。在排干溶剂之后,加入另一部分在DMF中的20%哌啶(100mL)并将混合物在25℃搅拌30min。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(8x100mL),得到deFmoc-PL-Rink-树脂。
b)Fmoc-AA-衍生物的偶联:
向deFmoc-PL-Rink-树脂中,加入下列的溶液:在0.35M HOBt/DMF中的Fmoc-Gly-OH(64.0mL,22.4mmol)、在DMF中的0.92M DIC(32.0mL,29.4mmol)和在DMF中的10%吡啶(32.0mL,39.6mmol)并在25℃搅拌3h。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(4x100mL),得到Fmoc-Gly-树脂。
代替Fmoc-Gly-OH,采用以下的Fmoc-氨基酸-衍生物,将Fmoc-断开和Fmoc-AA-衍生物偶联步骤重复8次:Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Pro-OH,Fmoc-Glu(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH,得到Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBu)-Pro-Leu-Gly-树脂。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):1211.1(M+H)+
c)Fmoc-断开:
末端Gly的Fmoc-断开如上所述进行。在排干溶剂之后,所得的树脂用DMF(8x100mL)、CH2Cl2(3x100mL)和MeOH(3x100mL)洗涤。将该树脂在10毫巴在25℃干燥1天,得到H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBu)-Pro-Leu-Gly-树脂(18.6g)。从该树脂断开样品(参见下文)以确认正确的质量。MS(m/z):989.7(M+H)+
d)全面脱保护和树脂断开:
向三异丙基硅烷(3.00mL)在TFA(48.0mL)和水(12.0mL)中的预冷(10-15℃)溶液中,加入H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBu)-Pro-Leu-Gly-树脂(6.00g)并在25℃搅拌3h。将该树脂滤掉并将滤液在真空浓缩。将残余物加入至MeTHF(120mL)中并将混合物在25℃搅拌15h。将混合物过滤并将滤饼用MeTHF(60.0mL)洗涤,接着干燥,得到H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Pro-Leu-Gly-NH2LP2(1.84g),为白色固体,具有87.3%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)。保留时间:23.9min(HPLC方法参考实施例1);MS(m/z):989.7(M+H)+
e)溶液中的环化:
向H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Pro-Leu-Gly-NH2LP2(300mg)在N-乙基吡咯烷酮(3.60mL)和NMM(0.167mL,1.52mmol)中的混合物中,加入PyBOP(237mg,0.455mmol)并在25℃搅拌1h。为了完成转化,加入另一部分的PyBOP(47.4mg,0.0910mmol)并在相同温度搅拌1h。将所得的混合物加入至MTBE(24.0mL)和MeTHF(6.00mL)的溶液中,然后在25℃搅拌15h。将混合物过滤并将滤饼用MTBE(15.0mL)洗涤。将滤饼溶解于水/MeCN(10/1,3.3mL)并滤掉未溶解的物料。将滤液冻干,得到粗制c[Gly-Tyr-Leu-Gln-Asn-Glu]-Pro-Leu-Gly-NH22(313mg,测定54.0wt%,总计60%收率),为白色固体,具有71.4%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参见实施例1)。MS(m/z):971.5(M+H)+
实施例8
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Leu-Gly-NH2 (3)
以与实施例2的类似方式,纯的环肽3采用Fmoc-AA-酸:Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Sar-OH,Fmoc-Glu(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH合成
合成的规模:9.60mmol(加载0.32mmol/g,树脂30.0g)
收率:41%(纯化后)
纯度:98.9%(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)
保留时间:27.6min(HPLC方法参考实施例1)
MS(m/z):945.5(M+H)+
实施例9
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Nle-Gly-NH2 (4)
以与实施例2的类似方式,纯的环肽4采用Fmoc-AA-酸:Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Nle-OH,Fmoc-Sar-OH,Fmoc-Glu(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH合成
合成的规模:9.60mmol(加载0.32mmol/g,树脂30.0g)
收率41%(纯化后)
纯度:99.2%(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)
保留时间:25.9min(HPLC方法参考实施例1)
MS(m/z):945.5(M+H)+
实施例10
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-反式-4-氟-Pro-Leu-Gly-NH2 (5)
以与实施例2的类似方式,纯的环肽5采用Fmoc-AA-酸:Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-反式-4-氟-Pro-OH,Fmoc-Glu(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH合成
合成的规模:9.60mmol(加载0.32mmol/g,树脂30.0g)
收率:39%(纯化后)
纯度:98.8%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)
保留时间:25.7min(HPLC方法参考实施例1)
MS(m/z):988.5(M+H)+
实施例11
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-反式-4-羟基-Pro-Leu-Gly-NH2 (6)
以与实施例2的类似方式,纯的环肽6采用Fmoc-AA-酸:Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-反式-4-tert丁氧基-Pro-OH,Fmoc-Glu(tBu)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH合成
合成的规模:9.60mmol(加载0.32mmol/g,树脂30.0g)
收率:22%(纯化后)
纯度:98.7%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)
保留时间:23.3min(HPLC方法参考实施例1)
MS(m/z):987.5(M+H)+。
实施例12(固相环化)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-反式-4-氟-Pro-Leu-Gly-NH2_(5)
以与实施例1的类似方式,采用来自CSBio的CS536XT肽合成器,纯的环肽5采用Fmoc-AA-酸:Fmoc-Gly-OH,Fmoc-Leu-OH,Fmoc-反式-4-氟-Pro-OH,Fmoc-Glu(OAll)-OH,Fmoc-Asn(Trt)-OH,Fmoc-Gln(Trt)-OH,Fmoc-Ile-OH,Fmoc-Tyr(tBu)-OH,Fmoc-Gly-OH合成。在整个合成中,对于Fmoc-断开,使用在DMF中的10%4-甲基-哌啶代替在DMF中的20%哌啶,并且在线性序列中的所有氨基酸偶联采用HOPy代替HOBt进行。在最后的PyBOP促进的在树脂上的环化步骤中,使用4-甲基吗啉代替DIPEA作为碱并且在作为溶剂的代替NEP的DMF中运行环化。粗制c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-反式-4-氟-Pro-Leu-Gly-NH2的制备型HPLC纯化在Kromasil-C18-100柱(250x4.6mm,10um粒径,A:20mM NH4OAc pH5,B:MeCN;流速1mL/min;等梯度90/10(A/B)持续1min,在1min内梯度从90/10(A/B)至80/20(A/B),在10min内梯度从80/20(A/B)至75/25(A/B),在1min内梯度从75/25(A/B)至10/90(A/B),内梯度从10/90(A/B)至持续5min,在0.1min内梯度从10/90(A/B)至90/10(A/B),等梯度90/10(A/B)持续6.9min)进行。收集的级分用水(1∶1)稀释并通过加载到经调节的(水/ACN 90/10)Kromasil C18-100-10柱(250x4.6mm)上浓缩/脱盐,之后用水/ACN(1∶1)洗脱。将收集的级分(UV 280nm,阈值1000mAu)旋转蒸发以除去ACN,之后冻干,得到纯的肽,为白色冻干(lyo)产品。
合成的规模:5.50mmol(加载0.55mmol/g,树脂10.0g)
收率:34%(纯化后)
纯度:98.8%纯度(HPLC面积-%,HPLC方法参考实施例1)
保留时间:25.3min(HPLC方法参考实施例1)
MS(m/z):989.5(M+H)+
实施例13(固相环化)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-反式-4-氟-Pro-Leu-Gly-NH2_(5)
以与实施例13的类似方式,在树脂上的线性肽的整个合成中,采用HOBt代替HOPy合成纯的环肽5。
合成的规模:5.50mmol(加载0.55mmol/g,树脂10.0g)
收率:25%(纯化后)。
Claims (12)
1.用于制备式I的催产素类似物和它的相应对映异构体和/或其旋光异构体的方法,
其中
R1是氢或C1-7-烷基,并且
R2是氢或C1-7-烷基;或者
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成任选地被羟基或卤素取代的5元杂环;
R3是C1-7-烷基,
所述方法包括:将式II的树脂结合的肽前体
其中
R1、R2和R3如上所述,并且
R4羟基保护基;
R5是Fmoc;
R6是烯丙基、叔丁基、1-金刚烷基、4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基或苯基异丙基;
R7是酰胺保护基;并且
R8是酰胺保护基
和它的相应对映异构体和/或其旋光异构体,
或者根据以下方法进行处理:
a)其中在R6是烯丙基或4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基的情况下
a1)将所述烯丙基基团或所述4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基基团R6断开,在随后的步骤中
a2)将所述Fmoc基团R5断开,之后
a3)在所述树脂上进行环环化,在另一个步骤中
a4)进行全面脱保护和从所述树脂的断开,并且任选地
a5)纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物;
或者根据以下方法进行处理:
b)其中在R6是叔丁基、1-金刚烷基或苯基异丙基的情况下;
b1)将所述Fmoc基团R5断开,之后
b2)进行全面脱保护和从所述树脂的断开,在另一个步骤中
b3)在溶液中进行环环化,然后任选地
b4)纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物。
2.权利要求1的方法,其中所述催产素类似物具有式Ia
其中R1、R2和R3如上所述,并且其中所述式II的树脂结合的肽前体具有下式
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8如上所述。
3.权利要求1或2的方法,其中
R1是氢或C1-4-烷基,并且
R2是氢或C1-4-烷基;或
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成脯氨酸的任选地被羟基或卤素取代的吡咯烷环;
R3代表正丁基或异丁基;
R4是叔丁基、烯丙基、三苯甲基、2-氯三苯甲基、叔丁基氧基羰基、叔丁基二苯基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基;
R5是Fmoc;
R6是烯丙基、1-金刚烷基、4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基、苯基异丙基或叔丁基;
R7是三苯甲基、2-氯三苯甲基、4-甲基三苯甲基;并且
R8是三苯甲基、2-氯三苯甲基、4-甲基三苯甲基。
4.权利要求1至3中任一项的方法,其中
R1是氢或甲基,并且
R2是氢,或
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成脯氨酸的任选地被羟基或氟取代的吡咯烷环;
R3代表正丁基或异丁基;
R4是叔丁基;
R5是Fmoc;
R6是烯丙基;
R7是三苯甲基;并且
R8是三苯甲基。
5.权利要求1至4中任一项的方法,其中所述式II的树脂结合的肽前体通过相应Fmoc保护的氨基酸的重复的Fmoc断开和偶联而在所述树脂上制备。
6.权利要求5的方法,其中利用哌啶或4-甲基-哌啶在适宜的有机溶剂中的溶液进行所述Fmoc断开。
7.权利要求5的方法,其中在有机胺碱和适宜的有机溶剂存在下使用选自以下各项的偶联剂进行所述Fmoc偶联:六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基鏻(PyBOP)、六氟磷酸(7-氮杂苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(PyAOP)、六氟磷酸溴三吡咯烷基鏻(PyBroP)、羟基苯并***(HOBt)和N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HBTU)、六氟磷酸O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HATU)、六氟磷酸O-(6-氯苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HCTU)、六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳(COMU)、六氟磷酸四甲基氟代甲脒(TFFH)、2-羟基-吡啶(HOPy)或氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉(DMTMM)。
8.权利要求1至7中任一项的方法,其中所述树脂是4-[(2,4-二甲氧基苯基)Fmoc-氨基甲基]苯氧基乙酰氨基甲基树脂。
9.权利要求1的方法,其中在所述步骤中,
a1)将所述烯丙基或所述4-{N-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代亚环己基)-3-甲基丁基]氨基}苄基基团R6在钯或铑化合物存在下或者在肼存在下断开;
a2)利用哌啶或4-甲基-哌啶在适宜的有机溶剂中的溶液将所述Fmoc基团R5断开;
a3)在有机胺碱存在下使用选自以下各项的环化剂在所述树脂上进行环环化:六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基鏻(PyBOP)、六氟磷酸(7-氮杂苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(PyAOP)、六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(1H-苯并***-1-基)脲(HBTU)、六氟磷酸1-[二(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-***并[4,5-b]吡啶3-氧化物(HATU)、六氟磷酸O-(6-氯苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HCTU)、六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳(COMU)、2-羟基-吡啶(HOPy)或氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉(DMTMM);
a4)在三氟乙酸和适宜的清除剂如茴香硫醚、茴香醚、苯酚、三异丙基硅烷、三乙基硅烷、乙二硫醇或二硫苏糖醇存在下进行全面脱保护和从所述树脂的断开;
a5)任选地,纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物。
10.权利要求1的方法,其中,在所述步骤中,
b1)利用哌啶或4-甲基-哌啶在适宜的有机溶剂中的溶液将所述Fmoc基团R5断开;
b2)在三氟乙酸和适宜的清除剂如茴香硫醚、茴香醚、苯酚、三异丙基硅烷、三乙基硅烷、乙二硫醇或二硫苏糖醇存在下进行全面脱保护和从所述树脂的断开;
b3)使用选自以下各项的环化剂在溶液中在有机胺碱存在下进行环环化:六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基鏻(PyBOP)、六氟磷酸(7-氮杂苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(PyAOP)、六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(1H-苯并***-1-基)脲(HBTU)、六氟磷酸1-[二(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-***并[4,5-b]吡啶3-氧化物(HATU)、六氟磷酸O-(6-氯苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HCTU)、六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳(COMU)、2-羟基-吡啶(HOPy)或氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉(DMTMM);
b4)任选地,纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物。
11.权利要求9或10的方法,其中所述有机胺碱选自吡啶、咪唑、N,N-二异丙基乙胺、三乙胺、N-甲基吗啉、N,N-二甲基-4-氨基吡啶、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯或1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷。
12.权利要求1的方法,其用于制备式Ia的催产素类似物,
其中
R1是氢或C1-4-烷基,并且
R2是氢或C1-4-烷基;或
R1和R2连同它们连接的氮和碳原子一起形成脯氨酸的任选地被羟基或卤素取代的吡咯烷环;
R3是正丁基或异丁基
和它的相应对映异构体和/或其旋光异构体,所述方法包括将式II的树脂结合的肽前体
其中
R1、R2和R3如上所述,并且
R4是叔丁基、烯丙基、三苯甲基、2-氯三苯甲基、叔丁基氧基羰基、叔丁基二苯基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基;
R5是Fmoc;
R6是烯丙基、叔丁基、1-金刚烷基或苯基异丙基;
R7是三苯甲基、2-氯三苯甲基、4-甲基三苯甲基;并且
R8是三苯甲基、2-氯三苯甲基、4-甲基三苯甲基
根据以下方法进行处理:
b1)利用哌啶或4-甲基-哌啶在适宜的有机溶剂中的溶液将所述Fmoc基团R5断开;
b2)在三氟乙酸和适宜的清除剂如茴香硫醚、茴香醚、苯酚、三异丙基硅烷、三乙基硅烷、乙二硫醇或二硫苏糖醇存在下进行全面脱保护和从所述树脂的断开;
b3)使用选自以下各项的环化剂在溶液中在有机胺碱存在下进行环环化:六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基鏻(PyBOP)、六氟磷酸(7-氮杂苯并***-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(PyAOP)、六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(1H-苯并***-1-基)脲(HBTU)、六氟磷酸1-[二(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-***并[4,5-b]吡啶3-氧化物(HATU)、六氟磷酸O-(6-氯苯并***-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲(HCTU)、六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳(COMU)、2-羟基-吡啶(HOPy)或氯化4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉(DMTMM);
b4)任选地,纯化和分离如此获得的所述式I的催产素类似物。
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WAHRENBURG等: "Effect of an amide group in place of the disulfide bridge in deamino-oxytocin", 《JOURANL OF MEDICINAL CHEMISTRY》 * |
陈冠荣: "《化工百科全书 第3卷 刀具材料-发电》", 31 March 1993, 化学工业出版社 * |
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