CN106551378A - 一种益生菌发酵蛹虫草的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
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- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种益生菌发酵蛹虫草的组合物及其制备方法，该组合物为蛹虫草经粉碎成蛹虫草粉，经水浸，添加葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉，无机盐，甜味剂，灭菌后经益生菌发酵处理，添加聚葡萄糖、低聚果糖浆，得到益生菌发酵蛹虫草的组合物。本发明制备的发酵组合物，可用于制备改善呼吸***疾病、保肺益肾、调节肠道菌群平衡、改善胃肠功能的保健品或饮品。本发明将蛹虫草直接加入到益生菌发酵培养基中，经高压、高温提取其有效成分，提高了蛹虫草的利用率，使蛹虫草的有效成分变为易于被肠道吸收的活性物质，经实验证明，对改善呼吸***疾病、保肺益肾、调节肠道菌群平衡、改善胃肠功能具有显著的作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种多株肠道益生菌发酵的蛹虫草组合物及其制备方法，属于功能性保健品领域。
背景技术
蛹虫草（Cordyceps.militaris(L.ex Fr.)Link）又称为北虫草、北冬虫夏草,隶属于真菌界的子囊菌门（Ascomycota）、肉座菌目（Hypocreales）、麦角菌科（Clavicipitaceae）,是世界性广布种，中国各省区均有分布，蛹虫草人工栽培已形成较为成熟的栽培模式。蛹虫草作为传统珍贵中药材，中国人民对其药用价值早有认识。近年来，随着人们对蛹虫草的滋补保健功效和多种药用价值的认识，其开发利用研究倍受关注，并在药理、有效成分等各方面取得了很大的进展，研究表明蛹虫草具有与冬虫夏草极相似的作用，无毒副作用，可抗肿瘤，抗病原微生物，保护肝肾及呼吸***，清除人体自由基，调节免疫***，调节内分泌与抗疲劳等。2009年***第3号公告批准蛹虫草作为新资源食品。
蛹虫草含有蛋白质、脂类、糖类、维生素及多种微量元，使其拥有较高的营养价值。其中蛋白质含量高达40.7%，必须氨基酸种类齐全，数量充足，占氨基酸总量的35.47%。含多种微量元素，其中硒、铁、锌、锰、钼、钙、磷等含量丰富，其中硒的含量可达0.44毫克/千克。同时还含有丰富的维生素A、维生素C、和B族维生素。
蛹虫草含有丰富的虫草素、腺苷、虫草酸、虫草多糖和超氧化物歧化酶（SOD）等生物活性物质，使其具有明显的药用价值。虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质，对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在DNA转录mRNA过程中使mRNA成熟障碍，抑制癌细胞的生长，并有降血糖、抗病毒、抗菌的作用。腺苷可抗病毒、抗菌，预防治疗脑血栓、脑溢血 ，抑制血小板积聚防止血栓形成，消除面斑，抗衰防皱。虫草酸（甘露醇）可以显著地降低颅压，促进机体新陈代谢，因而使脑溢血和脑血栓病症得到缓解，清除自由基、扩张血管、降低血压。虫草多糖是国际医学公认的人体免疫增强剂，是一种高度分枝的半乳甘露聚糖，它能促进淋巴细胞转化，提高血清IgG的抗体含量和机体的免疫功能，增强机体自身抗癌抑癌的能力，中医认为其起扶正固本作用，对老年慢性支气管炎、肺源性心脏病有显著疗效，能提高肝脏解毒能力，起护肝作用，提高身体抗病毒和抗辐射能力。超氧化物歧化酶（SOD）可抑制或消除催人衰老的超氧自由基形成及抗癌、防衰、减毒。
人体肠道中寄居着大量的微生物种群，其中益生菌对人体健康起着至关重要的作用。益生菌可以分解代谢上消化道***不能分解代谢的食物成分，产生短链脂肪酸，为胃肠粘膜细胞提供营养物质。同时对于口服药物尤其是天然药物的某些成分可以进行分解代谢，将药物的前体物质转化成为活性药物成分而发挥作用。目前益生菌制剂主要是单纯含有活的益生菌以及益生菌菌体的制剂。
目前对于蛹虫草产品的开发，国内传统的干鲜品和盐渍品，对营养、活性物质的保持明显不如深加工产品，且深加工产品更易被人体所吸收利用，更能体现出蛹虫草的保健功效，但深加工产品在市场的占有率微乎其微，只有蛹虫草子实体烘干品在广州的汤煲餐饮上销售量较大。在国际市场上利用蛹虫草提取物制成的各类营养膳食补充剂风靡欧美和日本。我国出口的蛹虫草产品多以初级原料为主，产品附加值低。因此，蛹虫草利用现代生物技术，经益生菌发酵制成的产品，可满足消费者日益增长的需求，市场空间巨大。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种益生菌发酵蛹虫草的组合物，所述的组合物为蛹虫草经粉碎成蛹虫草粉，经水浸，添加或不添加葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉，添加无机盐，添加或不添加甜味剂，灭菌后经益生菌发酵处理，添加或不添加聚葡萄糖、低聚果糖浆，得到益生菌发酵蛹虫草的组合物。
该益生菌发酵蛹虫草的组合物中：
所述的蛹虫草粉在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比为1.0-10%；
所述的葡萄糖、蛋白胨、酵母膏和酵母粉在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比分别为：葡萄糖0~1.5%，蛋白胨0~1%，酵母膏0~0.2%，酵母粉0~0.1%；所述的聚葡萄糖、低聚果糖浆在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比分别为：聚葡萄糖0~5%、低聚果糖浆0~0.7%；所述甜味剂为蔗糖、三氯蔗糖，其在益生菌发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比为：蔗糖3.0%、三氯蔗糖0.008%；
所述的无机盐为K2HPO4•3H2O 0.1g/100ml、KH2PO4
0.1g/100ml、FeSO4•7H2O 5.0mg/100ml、ZnSO4•7H2O 4.4mg/100ml、MgSO4•7H2O 50mg/100ml；
所述的益生菌为双歧杆菌和乳杆菌；所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌或婴儿双歧杆菌；所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌或植物乳杆菌；
该益生菌发酵蛹虫草的组合物具有保护肝肾及呼吸***，清除人体自由基，调节免疫***，调节内分泌与抗疲劳，调节肠道菌群平衡，改善胃肠功能，美容养颜等作用。
本发明的另一个目的是提供一种益生菌发酵蛹虫草的组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）粉碎：将干燥蛹虫草粉碎，细度在100目以上。（通常采用普通的粉碎技术制备蛹虫草粉，经粉碎后，原料的比表面积增加, 从而更有利于原料有效成分的溶出, 大大增加了原料有效成分的提取率。
（2）制备提取物：取蛹虫草粉，加入蛹虫草粉重量的10-100倍的水浸泡30分钟，向浸泡液中添加或不添加葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉，添加无机盐，添加或不添加甜味剂，调节pH 值6.5-7.0，115℃左右灭菌50分钟，得到无菌蛹虫草提取物。
（3）发酵：当无菌蛹虫草提取物温度降至39℃左右时，接种预培养的各约体积百分比为0.5%的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约3~8小时后，再次接种预培养的各约体积百分比为0.5%的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续发酵20~22小时。当pH值降至4.2以下时，降低发酵温度至28℃，继续发酵至pH值降至4.0，结束发酵，即得到益生菌发酵蛹虫草液。
（4）调配：将（3）中益生菌发酵蛹虫草液过管式离心机过滤、离心，得离心液；离心液中添加或不添加聚葡萄糖、低聚果糖浆（G 55L），搅匀溶解，得半成品。
（5）灭活：将步骤（4）中的半成品进行高压灭菌，115℃左右灭菌15分钟后，得益生菌发酵蛹虫草的组合物。检测此发酵组合物含有益生菌菌体数量及有效成分腺苷含量。
上述制备方法中，在步骤（2）中蛹虫草粉在所述的益生菌发酵蛹虫草液中的重量g/体积ml百分比为1.0-10%。
上述制备方法中，在步骤（2）中加入重量g /体积ml百分比为0~1.5%的葡萄糖、重量g/体积ml百分比为0~1%的蛋白胨、重量g/体积ml百分比为0~0.2%的酵母膏、重量g/体积ml百分比为0~0.1%的酵母粉，所述的无机盐为K2HPO4•3H2O 0.1g/100ml、 KH2PO4
0.1g/100ml、FeSO4•7H2O 5.0mg/100ml、ZnSO4•7H2O 4.4mg/100ml、MgSO4•7H2O 50mg/100ml。
上述制备方法中，为了改善饮品的口感，在步骤（2）中调节pH值前添加一定量的甜味剂，所述的甜味剂为重量g/体积ml百分比为3%的蔗糖、重量g/体积ml百分比为0.008%的三氯蔗糖。
在步骤（4）中加入重量g/体积ml百分比为0~5%的聚葡萄糖、重量g/体积ml百分比为0~0.7%的低聚果糖浆（G 55L）。
上述制备方法中，在步骤（3）中所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌或婴儿双歧杆菌；所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌或植物乳杆菌。
本发明的再一个目的在于提供一种由蛹虫草发酵液、聚葡萄糖和低聚果糖浆（G 55L）组成的组合物在改善呼吸***疾病、保肺益肾、调节肠道菌群平衡、改善胃肠功能的应用。
可将本发明的发酵组合物直接制成食品或保健食品，适于具有呼吸***疾病、肾虚、胃肠道功能差的人使用。
根据本发明的一个优选实施方案，按照本发明的方法制备的发酵组合物，可应用于制备改善呼吸***疾病、保肺益肾、调节肠道菌群平衡、改善胃肠功能的保健品或饮品。例如，可将本发明的多株益生菌发酵蛹虫草或其上清液，按照已知的常规方法，添加一种或多种具有相同、相似或不同生物学活性，并对基本活性成分表现有辅助或协同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合成的其他药物成份或其混合物，配制成适于口服给药的合剂、乳剂等。
也可将本发明的多株益生菌发酵蛹虫草组合物通过适当的干燥方法，制得固体粉末，添加一种或多种具有相同、相似或不同生物学活性，并对基本活性成分表现有辅助或协同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合成的其他药物成份或其混合物中，配制成适于口服给药的胶囊、片剂、颗粒剂等剂型的药物。
本发明具有以下优点：
1、本发明对蛹虫草有效成分进行高压、高温提取，大大增加了原料有效成分的提取率。
2、本发明将蛹虫草直接加入到益生菌发酵培养基中，经高压、高温提取其有效成分，带原料渣进行发酵，提高了蛹虫草的利用率，优化了工艺流程。
3、本发明模拟人体肠道环境，利用多株益生菌进行发酵，使蛹虫草的有效成分变为易于被肠道吸收的活性物质，提高了利用率，减少了人体肠道负担。
4、为进一步研发一种新资源食品蛹虫草的益生菌制剂、饮料或保健品提供研发思路；利用蛹虫草为益生菌生长提供充足的营养，益生菌亦使蛹虫草的效用得到提高。
5、本组合物中加入不被人体吸收的水溶性膳食纤维聚葡萄糖和低聚果糖，口感酸甜适口，状态稳定，可极大地改善人体肠道环境。
6、本组合物未添加任何防腐剂，经高温灭菌、无菌灌装，保质期长，饮用方便、安全。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
实施例
1
：多株肠道益生菌发酵蛹虫草饮品
A
的制备
取干燥的蛹虫草2000g ,粉碎过100目筛，100倍水浸泡30分钟，向浸泡液中加入葡萄糖0.7%（重量g/体积ml）、蛋白胨0.4%（重量g/体积ml）、酵母膏0.13%（重量g/体积ml）、酵母粉0.07%（重量g/体积ml）、无机盐（K2HPO4•3H2O 0.1g/100ml、KH2PO4
0.1g/100ml、FeSO4•7H2O 5.0mg/100ml、ZnSO4•7H2O 4.4mg/100ml、MgSO4•7H2O 50mg/100ml）、蔗糖3.0%（重量g/体积ml）和三氯蔗糖0.008%（重量g/体积ml）。调节pH 6.5-7.0，115℃左右灭菌50分钟，得到无菌蛹虫草提取物。当提取物温度降至39℃左右时，接入预培养好的两歧双歧杆菌（正常人体分离，经中国科学院微生物研究所鉴定）和短双歧杆菌（AS 1.2213）菌液，接种量均为0.5%（体积/体积）。发酵6小时后再接入预培养的德氏乳杆菌（AS
1.1480）和植物乳杆菌（AS 1.19）菌液，接种量均为0.5%（体积/体积）。37℃继续发酵22小时，pH值降至4.2以下，降低发酵温度至28℃，继续发酵至pH降至4.0，结束发酵，即得到益生菌发酵蛹虫草液。将益生菌发酵蛹虫草液过管式离心机离心，得离心液。向离心液中加入聚葡萄糖2%（重量g/体积ml）、低聚果糖浆（G 55L）0.7%（重量g/体积ml），搅匀溶解，得半成品。将半成品进行高压灭菌，115℃左右灭菌15分钟后，于无菌条件下灌装，得益生菌发酵蛹虫草饮品成品（规格为100ml/瓶）。此发酵组合物含有益生菌菌体数量为：3.4×108个/ml，腺苷含量为：0.42mg/100ml。
实施例 2：多株肠道益生菌发酵蛹虫草饮品 B 的制备
取干燥的蛹虫草8000g ,粉碎过100目筛，25倍水浸泡30分钟，向浸泡液中加入葡萄糖0.6%（重量g/体积ml）、蛋白胨0.3%（重量g/体积ml）、酵母膏0.1%（重量g/体积ml）、酵母粉0.05%（重量g/体积ml）、无机盐（K2HPO4•3H2O 0.1g/100ml、KH2PO4
0.1g/100ml、FeSO4•7H2O 5.0mg/100ml、ZnSO4•7H2O 4.4mg/100ml、MgSO4•7H2O 50mg/100ml）、蔗糖3.0%（重量g/体积ml）和三氯蔗糖0.008%（重量g/体积ml）。调节pH 6.5-7.0，115℃左右灭菌50分钟，得到无菌蛹虫草提取物。当提取物温度降至39℃左右时，接入预培养好的婴儿双歧杆菌（AS1.853）和短双歧杆菌（AS
1.2213）菌液，接种量均为0.5%（体积/体积）。发酵7小时后再接入预培养的德氏乳杆菌（AS
1.1480）和鼠李糖乳杆菌（AS 1.22）菌液，接种量均为0.5%（体积/体积）。37℃继续发酵21小时，pH值降至4.2以下，降低发酵温度至28℃，继续发酵至pH降至4.0，结束发酵，即得到益生菌发酵蛹虫草液。将益生菌发酵蛹虫草液过管式离心机离心，得离心液。向离心液中加入聚葡萄糖1.5%（重量g/体积ml）、低聚果糖浆（G 55L）0.6%（重量g/体积ml），搅匀溶解，得半成品。将半成品进行高压灭菌，115℃左右灭菌15分钟后，于无菌条件下灌装，得益生菌发酵蛹虫草饮品成品（规格为100ml/瓶）。此发酵组合物含有益生菌菌体数量为：3.8×108个/ml，腺苷含量为：1.67mg/100ml。
实施例 3：多株肠道益生菌发酵蛹虫草饮品 C 的制备
取干燥的蛹虫草16000g ,粉碎过100目筛，12.5倍水浸泡30分钟，向浸泡液中加入葡萄糖0.5%（重量g/体积ml）、蛋白胨0.2%（重量g/体积ml）、酵母膏0.08%（重量g/体积ml）、酵母粉0.03%（重量g/体积ml）、无机盐（K2HPO4•3H2O 0.1g/100ml、KH2PO4
0.1g/100ml、FeSO4•7H2O 5.0mg/100ml、ZnSO4•7H2O 4.4mg/100ml、MgSO4•7H2O 50mg/100ml）、蔗糖3.0%（重量g/体积ml）和三氯蔗糖0.008%（重量g/体积ml）。调节pH 6.5-7.0，115℃左右灭菌50分钟，得到无菌蛹虫草提取物。当提取物温度降至39℃左右时，接入预培养好的两歧双歧杆菌（正常人体分离，经中国科学院微生物研究所鉴定）和青春双歧杆菌（AS 1.2190）菌液，接种量均为0.5%（体积/体积）。发酵8小时后再接入预培养的嗜酸乳杆菌（AS
1.1854）和植物乳杆菌（AS 1.19）菌液，接种量均为0.5%（体积/体积）。37℃继续发酵21小时，pH值降至4.2以下，降低发酵温度至28℃，继续发酵至pH降至4.0，结束发酵，即得到益生菌发酵蛹虫草液。将益生菌发酵蛹虫草液过管式离心机离心，得离心液。向离心液中加入聚葡萄糖1%（重量g/体积ml）、低聚果糖浆（G 55L）0.5%（重量g/体积ml），搅匀溶解，得半成品。将半成品进行高压灭菌，115℃左右灭菌15分钟后，于无菌条件下灌装，得益生菌发酵蛹虫草饮品成品（规格为100ml/瓶）。此发酵组合物含有益生菌菌体数量为：3.2×108个/ml，腺苷含量为：3.16mg/100ml。
实验例：本发明发酵组合物人体试服实验
本实验例旨在通过观察不同人群试服本发酵组合物前后症状的变化，以确定本发酵组合物对改善呼吸***疾病、保肺益肾、调节肠道菌群平衡、改善胃肠功能具有较好的作用。
方案
1
：
试服样品：实施例1制备的发酵组合物A；对照组为同等浓度未发酵的蛹虫草提取液。
试服方式：100ml/日/人，一天两次，每次50ml；服用周期为30天/人，分别于7天、15天、30天统计服用效果。
试服对象：一部分选自来三株医院看病的人，该人群的疾病包括支气管病（20人），肾阳虚（20人）；另一部分选自长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人群（20人），吸烟、吸二手烟的人群（20人）和胃肠功能差的人群（20人）。
结果统计：不同人群试服发酵组合物A及对照组，30天时，每个试服人群中症状有明显改善的人数占该试服人群总数的比例为有效率。
表1 不同人群试服发酵组合物A及对照组有效率
试服结果(表1)：
1、试服发酵组合物A的有效率统计
（1）支气管病10人试服发酵组合物A，服用30天，其中7人的咳嗽、咳痰、气喘等症状有明显好转，3人的咳嗽、咳痰、气喘等症状未见明显改善，有效率为70%；
（2）肾阳虚病10人试服发酵组合物A，服用30天，其中8人的腰膝酸软、畏寒肢冷、头目眩晕、精神萎靡、面色白等症状有明显好转，2人的腰膝酸软、畏寒肢冷、头目眩晕、精神萎靡、面色白等症状未见明显改善，有效率为80%；
（3）长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的10人试服发酵组合物A，服用30天，其中8人的呼吸短促、咳痰等症状有明显好转，2人的呼吸短促、咳痰等症状未见明显改善，有效率为80%；
（4）吸烟、吸二手烟的10人试服发酵组合物A，服用30天，其中8人的呼吸沉重、咳嗽、咳痰等症状有明显好转，2人的呼吸沉重、咳嗽、咳痰等症状未见明显改善，有效率为80%；
（5）胃肠功能差的10人试服发酵组合物A，服用30天，其中9人的消化不良、多日不便、胃肠疼痛、腹泻等症状有明显好转，1人的消化不良等症状未见明显改善，有效率为90%。
2、对照组，试服未发酵蛹虫草提取液有效率统计
对支气管病有效率为50%，肾阳虚病有效率为60%，长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人有效率为50%，吸烟、吸二手烟的人有效率为60%，胃肠功能差的人有效率为0。
方案
2
：
试服样品：实施例2制备的发酵组合物B；对照组为同等浓度未发酵的蛹虫草提取液。
试服方式：100ml/日/人，一天两次，每次50ml；服用周期为30天/人，分别于7天、15天、30天统计服用效果。
试服对象：一部分选自来三株医院看病的人，该人群的疾病包括支气管病（20人），肾阳虚（20人）；另一部分选自长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人群（20人），吸烟、吸二手烟的人群（20人）和胃肠功能差的人群（20人）。
结果统计：不同人群试服发酵组合物B及对照组，30天时，每个试服人群中症状有明显改善的人数占该试服人群总数的比例为有效率。
表2 不同人群试服发酵组合物B及对照组有效率
试服结果(表2)：
1、试服发酵组合物B的有效率统计
（1）支气管病10人试服发酵组合物B，服用30天，其中7人的咳嗽、咳痰、气喘等症状有明显好转，3人的咳嗽、咳痰、气喘等症状未见明显改善，有效率为70%；
（2）肾阳虚病10人试服发酵组合物B，服用30天，其中7人的腰膝酸软、畏寒肢冷、头目眩晕、精神萎靡、面色白等症状有明显好转，3人的腰膝酸软、畏寒肢冷、头目眩晕、精神萎靡、面色白等症状未见明显改善，有效率为70%；
（3）长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的10人试服发酵组合物B，服用30天，其中9人的呼吸短促、咳痰等症状有明显好转，1人的咳痰等症状未见明显改善，有效率为90%；
（4）吸烟、吸二手烟的10人试服发酵组合物B，服用30天，其中9人的呼吸沉重、咳嗽、咳痰等症状有明显好转，1人的呼吸沉重、咳嗽等症状未见明显改善，有效率为90%；
（5）胃肠功能差的10人试服发酵组合物B，服用30天，其中9人的消化不良、多日不便、胃肠疼痛、腹泻等症状明显好转，仅有1人的胃肠疼痛、腹泻等症状未见明显改善，有效率为90%。
2、对照组，试服未发酵蛹虫草提取液有效率统计
对支气管病有效率为50%，肾阳虚病有效率为60%，长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人有效率为60%，吸烟、吸二手烟的人有效率为70%，胃肠功能差的人有效率为0。
方案
3
：
试服样品：实施例3制备的发酵组合物C；对照组为同等浓度未发酵的蛹虫草提取液。
试服方式：100ml/日/人，一天两次，每次50ml；服用周期为30天/人，分别于7天、15天、30天统计服用效果。
试服对象：一部分选自来三株医院看病的人，该人群的疾病包括支气管病（20人），肾阳虚（20人）；另一部分选自长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人群（20人），吸烟、吸二手烟的人群（20人）和胃肠功能差的人群（20人）。
结果统计：不同人群试服发酵组合物C及对照组，30天时，每个试服人群中症状有明显改善的人数占该试服人群总数的比例为有效率。
表3 不同人群试服发酵组合物C及对照组有效率
试服结果(表3)：
1、试服发酵组合物C的有效率统计
（1）支气管病10人试服发酵组合物C，服用30天，其中9人的咳嗽、咳痰、气喘等症状有明显好转，1人的咳嗽、咳痰、气喘等症状未见明显改善，有效率为90%；
（2）肾阳虚病10人试服发酵组合物C，服用30天，其中9人的腰膝酸软、畏寒肢冷、头目眩晕、精神萎靡、面色白等症状有明显好转，1人的腰膝酸软头目眩晕、精神萎靡、面色白等症状未见明显改善，有效率为90%；
（3）长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的10人试服发酵组合物C，服用30天，其中8人的呼吸短促、咳痰等症状有明显好转，2人的呼吸短促、咳痰等症状未见明显改善，有效率为80%；
（4）吸烟、吸二手烟的10人试服发酵组合物C，服用30天，其中9人的呼吸沉重、咳嗽、咳痰等症状有明显好转，1人的咳嗽等症状未见明显改善，有效率为90%；
（5）胃肠功能差的10人试服发酵组合物C，服用30天，其中9人的消化不良、多日不便、胃肠疼痛、腹泻等症状有明显好转，1人的胃肠疼痛、腹泻等症状未见明显改善，有效率为90%。
2、对照组，试服未发酵蛹虫草提取液有效率统计
对支气管病有效率为60%，肾阳虚病有效率为60%，长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人有效率为60%，吸烟、吸二手烟的人有效率为70%，胃肠功能差的人有效率为0。
表4 不同人群分别服用发酵组合物A、B、C及对照组30天有效率
试服结果（表4）表明：通过对不同人群试服发酵组合物A、B、C及对照组有效率统计，可发现本发酵组合物对支气管病，肾阳虚，长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人群，吸烟、吸二手烟的人群和胃肠功能差的人群的病证有较好的改善作用，有效率为70%-90%；对照组对支气管病，肾阳虚，长期生活在雾霾、粉尘严重的地区或工作在大气污染严重的人群，吸烟、吸二手烟的人群有效率为50%-70%，对胃肠功能差的人群无效果；通过与对照组相比较，说明本发酵组合物对改善呼吸***疾病、保肺益肾、调节肠道菌群平衡、改善胃肠功能具有显著的作用。
Claims (10)
1.一种益生菌发酵蛹虫草的组合物，其特征在于，蛹虫草经粉碎成蛹虫草粉，经水浸，添加或不添加葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉，添加无机盐，添加或不添加甜味剂，灭菌后经益生菌发酵处理，添加或不添加聚葡萄糖、低聚果糖浆，得到益生菌发酵蛹虫草的组合物。
2.根据权利要求1所述的益生菌发酵蛹虫草的组合物，其特征在于，所述的蛹虫草粉在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比为1.0-10%。
3.根据权利要求1所述的益生菌发酵蛹虫草的组合物，其特征在于，所述的葡萄糖、蛋白胨、酵母膏和酵母粉在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比分别为：葡萄糖0~1.5%，蛋白胨0~1%，酵母膏0~0.2%，酵母粉0~0.1%；所述的聚葡萄糖、低聚果糖浆在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比分别为：聚葡萄糖0~5%、低聚果糖浆0~0.7%；所述甜味剂为蔗糖、三氯蔗糖，其在益生菌发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比为：蔗糖3.0%、三氯蔗糖0.008%。
4.根据权利要求1所述的益生菌发酵蛹虫草的组合物，其特征在于，所述的无机盐为K2HPO4•3H2O 0.1g/100ml、KH2PO4
0.1g/100ml、FeSO4•7H2O 5.0mg/100ml、ZnSO4•7H2O 4.4mg/100ml、MgSO4•7H2O 50mg/100ml。
5.根据权利要求1所述的益生菌发酵蛹虫草的组合物，其特征在于，所述的益生菌为双歧杆菌和乳杆菌；所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌或婴儿双歧杆菌；所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌或植物乳杆菌。
6.一种益生菌发酵蛹虫草的组合物的制备方法，其步骤如下：
（1）粉碎：将干燥蛹虫草粉碎，细度在100目以上；
（2）制备提取物：取步骤（1）的蛹虫草粉，加入蛹虫草粉重量的10-100倍的水浸泡30分钟，向浸泡液中添加或不添加葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、酵母粉，添加无机盐，添加或不添加甜味剂，调节pH值 6.5-7.0，115℃灭菌50分钟，得到无菌蛹虫草提取物；
（3）发酵：当无菌蛹虫草提取物温度降至39℃时，接种预培养的各约体积百分比为0.5%的一种或两种及以上双歧杆菌菌液，常规培养约3~8小时后，再次接种预培养的各约体积百分比为0.5%的一种或两种及以上乳杆菌菌液，继续发酵20~22小时；当pH值降至4.2以下时，降低发酵温度至28℃，继续发酵至pH值降至4.0时，结束发酵，即得到益生菌发酵蛹虫草液；
（4）调配：将步骤（3）得到的益生菌发酵蛹虫草液过滤、离心，得离心液；离心液中添加或不添加聚葡萄糖、低聚果糖浆，搅匀溶解，得半成品；
（5）灭活：将步骤（4）得到的半成品115℃灭菌15分钟后，得益生菌发酵蛹虫草的组合物。
7.根据权利要求6所述的益生菌发酵蛹虫草的组合物的制备方法，其特征在于，所述的蛹虫草粉在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比为1.0-10%；所述的葡萄糖、蛋白胨、酵母膏和酵母粉在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比分别为：葡萄糖0~1.5%，蛋白胨0~1%，酵母膏0~0.2%，酵母粉0~0.1%；所述的聚葡萄糖、低聚果糖浆在发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比分别为：聚葡萄糖0~5%、低聚果糖浆0~0.7%；所述甜味剂为蔗糖、三氯蔗糖，其在益生菌发酵蛹虫草的组合物中的重量g/体积ml百分比为：蔗糖3.0%、三氯蔗糖0.008%。
8.根据权利要求6或7所述的益生菌发酵蛹虫草的组合物的制备方法，其特征在于，所述的无机盐为K2HPO4•3H2O 0.1g/100ml、KH2PO4 0.1g/100ml、FeSO4•7H2O 5.0mg/100ml、ZnSO4•7H2O 4.4mg/100ml、MgSO4•7H2O 50mg/100ml；所述的双歧杆菌选自两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌或婴儿双歧杆菌；所述的乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌或植物乳杆菌。
9.权利要求1—5任一项所述的益生菌发酵蛹虫草的组合物在制备改善呼吸***疾病、保肺益肾、调节肠道菌群平衡、改善胃肠功能的保健品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，将益生菌发酵蛹虫草的组合物或其上清液，按照已知的常规方法，添加一种或多种具有相同、相似或不同生物学活性，并对基本活性成分表现有辅助或协同作用，但彼此又互不拮抗的天然或合成的其他药物成份或其混合物，配制成适于口服的合剂、乳剂、胶囊、片剂、颗粒剂。
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