CN106478493B - 5-氨基酮戊酸/3-羟基吡啶酮缀合物及其制备法和用途 - Google Patents

5-氨基酮戊酸/3-羟基吡啶酮缀合物及其制备法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了5‑氨基酮戊酸与3‑羟基吡啶‑4‑酮的缀合物，该缀合物是5‑氨基酮戊酸与铁螯合剂3‑羟基吡啶‑4‑酮的缀合物，分别为ALA‑HPO缀合物1‑4。本发明还同时公开了上述5‑氨基酮戊酸与3‑羟基吡啶‑4‑酮的缀合物的制备方法及其用途，其能用作制备光动力学治疗药物，也能用于制备治疗皮肤癌、肺癌或***的药物。

Description

5-氨基酮戊酸/3-羟基吡啶酮缀合物及其制备法和用途
技术领域
本发明属于化学制药领域，涉及一类5-氨基酮戊酸(ALA)-铁螯合剂缀合物及其制备方法和用途----作为光动力学疗法药物。
背景技术
光动力学疗法(PDT)是二十世纪七十年代末问世的一种针对(血管)增生性病变组织的选择性治疗新技术，已成为世界肿瘤防治科学中最活跃的研究领域之一。PDT是以光、光敏剂和氧的相互作用为基础的一种新的疾病治疗手段；将光敏剂(光动力治疗药物)输入人体，在一定时间后，以特定波长的光照射肿瘤部位，通过一系列光化学和光生物学反应，在分子氧的参与下，产生单态氧和/或自由基，氧化破坏组织和细胞中的各种生物大分子，使肿瘤细胞发生不可逆的损伤，最终使细胞死亡，达到治疗目的。因此，光敏剂是影响光动力治疗效果的关键所在。
ALA(即：艾拉)是新一代光敏剂，自1996年以来用于光动力学疗法来治疗基底细胞癌、鳞状细胞癌、皮肤癌、***，获得了较满意的治疗效果，因此越来越被人们所接受。ALA本身并没有光活性，它在体内通过血红素的生物合成循环途径代谢，产生有活性的光敏剂原卟啉(缩写为PpIX)。这个过程在快速***的细胞，尤其癌细胞中发生得更为有效，因此ALA对正常的组织细胞的毒性较小。ALA的主要缺点来自ALA本身的高亲水性，在生理pH条件下，ALA是两性离子，这严重影响了它通过细胞膜的能力，限制了其被细胞吸收。为了解决这个问题，具有更好的脂溶性的ALA前药的到了广泛的研究，如ALA的酯衍生物、肽衍生物等。ALA-PDT能否取得好的疗效，很大程度上取决于细胞中由ALA产生的光敏剂PpIX水平。而PpIX在细胞中的积累除了主要与ALA浓度有关外，另一个关键的因素是亚铁螯合酶的活性，该酶能催化由ALA产生的PpIX螯合亚铁离子，使其转变成没有光活性的血红素，导致药物活性降低。因此降低细胞中亚铁螯合酶的活性能够提高ALA-PDT的疗效。由于对Fe3+具有高亲和性的铁螯合剂(如3-羟基吡啶-4-酮)能促进氧气将低浓度的Fe2+氧化成Fe3+并与之形成螯合物,故铁螯合剂能抑制亚铁螯合酶的活性。因此，铁螯合剂与ALA联合使用能减少细胞中铁的浓度，从而有利于光敏剂PpIX在细胞中积累。已经证明ALA与铁螯合剂(如：去铁胺、羟基吡啶酮二齿配体)配伍使用与单独使用ALA相比，能使细胞中PpIX浓度显著增加，也已有报道有些ALA-羟基吡啶酮(HPO)缀合物与ALA和羟基吡啶酮配伍使用相比，在一些肿瘤细胞中能产生更高浓度的PpIX。
如：2015109686482的发明《5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物及其制备法和用途》公开了一种ALA-HPO缀合物，其结构通式为：
其中R为烃基或取代烃基；R’来自天然氨基酸。其用途是：用作制备光动力学治疗药物，用于治疗皮肤癌、肺癌或***等疾病。
201410422562.5的发明《5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物及其制备法和用途》公开了两种ALA-HPO缀合物，其结构通式为：
其中R来自天然氨基酸；R’为烃基或取代烃基；R”为烃基、取代烃基或烷基氨基。其用途是：用作光动力学治疗药物，用于治疗皮肤癌、肺癌或***等。
本发明旨在通过设计合成结构新颖的ALA-羟基吡啶酮缀合物，得到比以上公开的ALA-羟基吡啶酮缀合物在一些肿瘤细胞中具有更好生物活性的化合物。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能显著提高5-氨基酮戊酸药效的5-氨基酮戊酸-羟基吡啶酮(ALA-HPO)缀合物及其制备方法和用途。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物(即ALA-HPO缀合物)，该缀合物是5-氨基酮戊酸(即艾拉，ALA)与铁螯合剂3-羟基吡啶-4-酮的缀合物，为ALA-HPO缀合物1-4；
所述ALA-HPO缀合物1-4的结构通式为：
其中通式1,2和3中的n为2-12的整数；通式4中的n为1-4的整数。
本发明还同时提供了上述5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物的制备方法，其特征是包括以下步骤：
1)以乙基麦芽酚(5)为原料，经苄基保护、与氨基醇缩合、在1,3-二环己基碳二亚胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)作用下与N-苄氧羰基-5-氨基酮戊酸(N-Cbz-ALA，化合物7)偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物1。
2)苄基保护的乙基麦芽酚用二氧化硒氧化，选择性地得到2-位羟基化的产物，与溴化苄反应将羟基保护，与氨基醇缩合，在DCC和4-二甲氨基吡啶作用下与N-Cbz-ALA偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物2。
3)以甲基麦芽酚为原料，经苄基保护，用二氧化硒氧化，将2-位甲基氧化成甲酰基，用氨基磺酸/亚氯酸进一步氧化成羧基，用N-羟基琥珀酰亚胺/DCC将羧基活化后与甲胺作用生成酰胺，与氨基醇缩合，在DCC和4-二甲氨基吡啶作用下与N-Cbz-ALA偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物3。
4)苄基保护的乙基麦芽酚与NH2(CH2CH2O)nH缩合，在DCC和4-二甲氨基吡啶作用下与N-Cbz-ALA偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物4。
本发明还同时提供了上述5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物(即ALA-HPO缀合物)的用途：用作制备光动力学治疗药物。
作为本发明的5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物(即ALA-HPO缀合物)的用途的改进：用于制备治疗皮肤癌、肺癌或***的药物。
具体而言，ALA-HPO缀合物1的合成路线如Scheme 1所示：
ALA-HPO缀合物2的合成路线如Scheme 2所示：
ALA-HPO缀合物3的合成路线如Scheme 3所示：
ALA-HPO缀合物4的合成路线如Scheme 4所示：
本发明的5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物(即ALA-HPO缀合物)具备如下技术优势：
1、与ALA相比，ALA-HPO缀合物1-4能在癌细胞中产生更高浓度的光敏剂原卟啉(PpIX)。如：与MCF-7R癌细胞孵育6h后化合物1a-1f、2a、3a和4a都比ALA能产生更高浓度的光敏剂PpIX。1c、2a和4a产生的PpIX荧光强度是ALA的10-15倍，而含有长脂肪链的1d、1e和1f显示了比其它化合物有更强的活性，在浓度为50μmol/L时，产生的PpIX荧光强度分别是ALA的18、21和20倍，甚至比脂溶性良好的ALA己酯和ALA辛酯产生的PpIX荧光强度更强。与KB癌细胞孵育2-24小时后，化合物1-4都比ALA能产生更高浓度的光敏剂PpIX。浓度为50μmol/L时，与KB癌细胞孵育24小时1d、1e和1f在此条件下产生的PpIX荧光强度分别是ALA的8、10.2和9.2倍。
2、与ALA和相应3-羟基吡啶-4-酮配伍使用相比，ALA-HPO缀合物1-4能更有效地提高癌细胞中的PpIX浓度。如：在MCF-7and MCF-7R细胞中，1c、4a、1d、1e和1f都分别比ALA与相应的HPO配伍使用能产生更高浓度的PpIX。
3、对癌细胞的光毒性也比ALA强得多。如缀合物1d,1e和1f与三种癌细胞(KB,MCF-7和MCF-7R细胞)培养4小时后进行光照，对这些癌细胞的半致死量(LD50)在2.3μM到12.9μM之间；而ALA的LD50值则>120μM。
4、与申请号2015109686482的化合物1a’(结构式如下)相比，本发明的化合物能在肿瘤细胞中具有更好的生物活性。以KB细胞为例，本发明的1d、1e和1f(浓度为50μmol/L)与KB癌细胞孵育24小时，产生的PpIX荧光强度分别是ALA的8、10.2和9.2倍；而申请号2015109686482的化合物1a’(100μmol/L)与KB癌细胞孵育24小时产生的PpIX荧光强度仅是ALA的2.9倍。本发明的细胞光毒性也明显更强，本发明的1d、1e和1f对KB细胞的半致死量(LD50)分别为3.1、2.3和2.5μM，在浓度为10μM时，KB细胞存活率的存活率都在6％以下；而同样条件下申请号2015109686482的化合物1a’在浓度为200μM时，KB细胞存活率为7.8％。
同样，本发明的上述生物活性也优于201410422562.5。
本发明的ALA-HPO缀合物使用方法和用量可参照ALA。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
图1是由本发明实施例1-4得到的ALA-HPO缀合物、ALA、ALA己酯和ALA辛基与MCF-7R细胞培养6h后产生的原卟啉(PpIX)荧光强度。(A)ALA、1a、1b、2a、3a和4a；(B)ALA、1c、1d、1e、1f、ALA己酯和ALA辛基。
图2是由本发明实施例1-4得到的ALA-HPO缀合物和ALA(浓度都为50μM)与KB细胞经不同时间的培养后产生的原卟啉(PpIX)荧光强度。(A)ALA、1a、1b、2a、3a和4a；(B)ALA、1c、1d、1e和1f。
图3.与MCF-7and MCF-7R细胞孵育4小时，由本发明实施例1-4得到的ALA-HPO缀合物(50μΜ)与相同浓度的ALA+铁螯合剂产生的PpIX荧光强度比较。
图4是由本发明实施例1-4得到的ALA-HPO缀合物、ALA与KB细胞培养4h后用蓝光照射(2.5J/cm2)的光毒性。(A)ALA、1a、1b、2a、3a和4a；(B)ALA、1c、1d、1e、1f和ALA己酯。
具体实施方式
实施例1、化合物1的制备方法，依次进行以下步骤：
A、化合物6的合成
乙基麦芽酚的苄基化：乙基麦芽酚--化合物5(84g,0.4mol)溶于甲醇(300mL)，加入NaOH溶液(26.4g溶于80mL H2O)。混合液加热至沸腾，滴加苄溴(85.6mL,0.72mol)，2小时加完。溶于继续在60-65℃加热过夜(12h)。过滤除去NaBr，滤液用旋转蒸发仪浓缩至约原体积的1/3)，加入二氯甲烷(400mL)，用5％(质量％)NaOH溶液(3×250mL),、H2O(2×300mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥。过滤，所得滤液蒸去溶剂(主要为二氯甲烷，也包括甲醇)，加入***(100mL)，置于4℃冰箱。产物(化合物6，即，苄基保护的乙基麦芽酚)以无色晶体析出(91.2g,66.1％)。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ0.98(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),2.50(q,J＝7.6Hz,2H,CH2),5.17(s,2H,CH2),6.37(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.30-7.41(m,5H,Ph),7.63(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C6-H)。
3-苄氧基-2-乙基-1-(2-羟乙基)吡啶-4(1氢)-酮(6a)的合成：苄基保护的乙基麦芽酚与氨基醇的缩合：苄基保护的乙基麦芽酚(4.6g,20mmol)溶于乙醇(30mL)/水(30mL)，加入乙醇胺(3.05g,50mmol)和2M NaOH溶液(2mL)。混合液回流18h后，冷却至室温，用浓盐酸调节至pH 1，然后浓缩至一半体积，加入50mL水。此溶液用***洗涤(2×50mL)，10MNaOH调节至pH 9，用二氯甲烷萃取(3×50mL)。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，将所得滤液蒸干。残留物用乙酸乙酯重结晶，得到黄色晶体6a(4.06g,74％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ0.96(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),2.68(q,J＝7.6Hz,2H,CH2),3.86(m,2H,CH2),3.90(m,2H,CH2),5.06(s,2H,CH2),6.15(d,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.30-7.40(m,4H,Ph和吡啶酮中C6-H),7.42(m,2H,Ph).ESI-MS:m/z 274([M+H]+),296([M+Na]+).
黄色晶体6a结构式中，n＝2。
化合物6b-6f(n＝4/6/8/10/12)的合成按类似方法：
上述步骤中，用4-氨基-1-丁醇代替乙醇胺，得到3-苄氧基-2-乙基-1-(4-羟丁基)吡啶-4(1氢)-酮(6b)：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1.02(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),1.54(m,2H,CH2),1.78(m,2H,CH2),2.57(q,J＝7.6Hz,2H,CH2),3.66(t,J＝6.0Hz,2H,CH2),3.82(t,J＝7.6Hz,2H,CH2),5.22(s,2H,CH2),6.36(d,J＝7.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.25(d,J＝7.6Hz,1H,吡啶酮中C6-H),7.28-7.35(m,3H,Ph),7.41(m,2H,Ph).ESI-MS:m/z 302([M+H]+),324([M+Na]+).
上述步骤中，用6-氨基-1-己醇代替乙醇胺，得到3-苄氧基-2-乙基-1-(6-羟己基)吡啶-4(1氢)-酮(6c)：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1.03(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),1.30-1.44(m,4H,CH2),1.56(m,2H,CH2),1.67(m,2H,CH2),2.56(q,J＝7.6Hz,2H,CH2),3.64(t,J＝6.4Hz,2H,CH2),3.75(t,J＝7.6Hz,2H,CH2),5.26(s,2H,CH2),6.41(d,J＝7.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H,吡啶酮中C6-H),7.27-7.35(m,3H,Ph),7.42(m,2H,Ph).ESI-MS:m/z 330([M+H]+),352([M+Na]+).
上述步骤中，用8-氨基-1-辛醇代替乙醇胺，得到3-苄氧基-2-乙基-1-(8-羟辛基)吡啶-4(1氢)-酮(6d)：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1.03(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),1.32(m,8H,CH2),1.56(m,2H,CH2),1.66(m,2H,CH2),2.57(q,J＝7.6Hz,2H,CH2),3.64(t,J＝6.6Hz,2H,CH2),3.74(t,J＝7.6Hz,2H,CH2),5.28(s,2H,CH2),6.43(d,J＝7.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.17(d,J＝7.6Hz,1H,吡啶酮中C6-H),7.29-7.35(m,3H,Ph),7.43(m,2H,Ph).ESI-MS:m/z358([M+H]+),380([M+Na]+).
上述步骤中，用10-氨基-1-癸醇代替乙醇胺，得到3-苄氧基-2-乙基-1-(10-羟癸基)吡啶-4(1氢)-酮(6e)：1H NMR(CDCl3,500MHz)δ1.04(t,J＝7.5Hz,3H,CH3),1.29(m,10H,CH2),1.55(m,2H,CH2),1.66(m,4H,CH2),2.57(q,J＝7.5Hz,2H,CH2),3.64(t,J＝6.5Hz,2H,CH2),3.74(t,J＝7.5Hz,2H,CH2),5.29(s,2H,CH2),6.42(d,J＝7.5Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.17(d,J＝7.5Hz,1H,吡啶酮中C6-H),7.29-7.35(m,3H,Ph),7.44(m,2H,Ph).ESI-MS:m/z386([M+H]+),408([M+Na]+).
上述步骤中，用12-氨基-1-十二醇代替乙醇胺，得到3-苄氧基-2-乙基-1-(12-羟十二烷基)吡啶-4(1氢)-酮(6f)：1H NMR(CDCl3,500MHz)δ1.04(t,J＝7.5Hz,3H,CH3),1.28(m,16H,CH2),1.55(m,2H,CH2),1.66(m,2H,CH2),2.57(q,J＝7.5Hz,2H,CH2),3.64(t,J＝6.5Hz,2H,CH2),3.74(t,J＝7.5Hz,2H,CH2),5.28(s,2H,CH2),6.42(d,J＝7.5Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.17(d,J＝7.5Hz,1H,吡啶酮中C6-H),7.29-7.35(m,3H,Ph),7.43(m,2H,Ph).ESI-MS:m/z414([M+H]+),436([M+Na]+).
B、化合物6与N-苄氧羰基-5-氨基酮戊酸(N-Cbz-ALA，7)偶联生成8
8a的制备：
N-Cbz-ALA(2.2mmol)溶于二氯甲烷(20ml)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF，5ml)，加入DCC(2mmol)和DMAP(0.2mmol)。氮气保护下，混合液室温搅拌50min。滴加化合物6a(2mmol)溶液(溶于10ml二氯甲烷)，30min加完。混合液室温搅拌过夜，过滤，将滤液蒸干。残留物溶于二氯甲烷(约30ml)，分别用水(约30ml)和饱和NaHCO3(约30ml)洗涤。过滤，所得滤液蒸去溶剂，残留物用硅胶柱(内装约150g 200-300目的硅胶)层析纯化(甲醇/乙酸乙酯1:9)，得到黄色产物8a。产率77％。1H NMR(CDCl3,270MHz)δ0.95(t,J＝7.6Hz,3H CH3),2.47(m,2H,CH2),2.55(m,2H,CH2),2.59(q,J＝7.6Hz,2H,CH2),3,95(m,4H,CH2N and CH2CO2),4.12(s,2H,CH2),5.01(s,2H,CH2),5.14(s,2H,CH2),6.30(s,1H,NH),6.32(d,J＝7.4,1H,吡啶酮环中C5-H),7.2-7.36(m,11H,10H来自2Ph，1H来自吡啶酮环中C6-H).ESI-MS:m/z521.3([M+H]+),543.6([M+Na]+).
采用类似方法，用6b-6f代替6a，分别得到8b-8f：
8b：产率79％。1H NMR(CDCl3,270MHz):0.95(t,J＝7.6Hz,3H CH3),1.52(m,2H,CH2),1.67(m,2H,CH2),2.47(m,2H,CH2),2.49(m,2H,CH2),2.52(q,J＝7.6Hz,2H,CH2),3.63(m,2H,CH2),3.93(m,4H,CH2),4.98(s,2H,CH2),5.11(s,2H,CH2),6.01(s,1H,NH),6.31(d,J＝7.4,1H,吡啶酮环中C5-H),7.19-7.22(m,11H,10H来自2Ph，1H为吡啶酮环中C6-H).ESI-MS:m/z 549.3([M+H]+).571.3([M+Na]+).
8c：产率80％.1H NMR(CDCl3,270MHz):δ0.98(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),1.22(m,4H,2CH2),1.53(m,4H,2CH2),2.45(m,4H,2CH2),3.63(q,J＝7.4Hz,2H,CH2),3.84-3.98(m,6H,3CH2),5.01(s,2H,CH2O),5.11(s,2H,CH2),6.02(br,1H,NH),6.31(d,J＝7.4,1H,吡啶酮环中C5-H),7.18(d,J＝7.4Hz,吡啶酮环中C6-H),7.21(m,10H,2Ph).ESI-MS:m/z 577.2([M+H]+),599.2([M+Na]+).
8d：产率75％。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ1.02(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),1.29(m,8H,4CH2),1.63(m,4H,2CH2),2.55–2.70(m,6H,3CH2),3.75(m 2H,CH2),4.03-4.13(m,4H,2CH2),5.09(s,2H,CH2),5.25(s,2H,CH2),5.57(br,1H,NH),6.49(1H,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮环中C5-H),7.28-7.64(m,11H,2Ph和吡啶酮环中C6-H).ESI-MS:m/z 605.2([M+H]+),627.2([M+Na]+).
8e：产率72％。1H NMR(CDCl3,270MHz):δ1.02(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),1.24(m,12H,6CH2),1.56(m,4H,2CH2),2.51-2.66(m,6H,3CH2),3.70(m,2H,CH2),4.01-4.09(m,4H,2CH2),4.95(s,2H,CH2),5.23(s,2H,CH2),5.69(br,1H,NH),6.36(d,J＝7.4,1H,吡啶酮环中C5-H),7.12(d,J＝7.4,1H,吡啶酮环中C6-H),7.26-7.31(m,10H,2Ph).ESI-MS:m/z 633.3([M+H]+),655.4([M+Na]+).
8f：产率73％。1H NMR(CDCl3,270MHz)0.98(t,J＝7.6Hz,3H,CH3),1.03(m,16H,8CH2),1.59(m,4H,2CH2),2.53–2.64(m,6H,3CH2),3.71(q,J＝7.4,2H,CH2),4.02(m,2H,CH2),4,11(s,2H,CH2),5.06(s,2H,CH2),5.24(s,2H,CH2),5.59(br,1H,NH),6.40(d,1H,J＝7.4Hz,吡啶酮环中C5-H),7.28(d,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮环中C6-H),7.30–7.39(m,10H,Ph).ESI-MS:m/z 661.4([M+H]+),683.2([M+Na]+).
C.化合物1的合成：
化合物1a的合成：
取化合物8a(0.52g，1mmol)和氯化苄(0.28g,2.2mmol)溶于甲醇/乙酸乙酯(20mL，1:4，V/V)中，加入5％钯碳催化剂(52mg)，在40psi(即，0.27MPa)的氢气下，室温催化氢化10min。过滤除去钯碳，滤液蒸去溶剂得到黄色油状产物1a的盐酸盐0.31g。1H NMR(DMSO,270MHz):1.23(t,J＝7.5,3H,CH3),2.64(m,2H,CH2),2.85(m,2H,CH2),3.06(m,2H,CH2),3.59(m,2H,CH2),4.02(s,2H,CH2),4.38(m,2H,CH2),7.13(d,J＝6.7,1H,吡啶酮中C5-H)7.66(m,3H,H3N+),8.10(d,J＝6.9,1H,吡啶酮中C6-H).13C NMR:δ12.1,15.3,27.7,36.2,44.3,53.7,55.5,113.3 127.9,134.0,143.0,164.9,172.1,206.2.ESI-MS:m/z 297([M+H]+).HRMS:C14H21N2O5计算值：297.1450([M+H]+),实测值：297.1441.
产物1a的结构式如下：
采用类似方法，用8b-8f代替8a，分别得到1b-1f的盐酸盐：
ALA-HPO缀合物1b的盐酸盐:1H NMR(CD3OH,,270MHz):1.26(t,J＝7.1Hz,3H,CH3),1.82(m,2H,CH2)1.98(m,2H,CH2),2.64(m,2H,CH2),2.83(m,2H,CH2),3.06(q,J＝5.4Hz,2H,CH2),4.09(m,4H,CH2),4.43(m,2H,CH2),7.12(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),8.32(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ11.1,15.3,19.4,26.8,27.1,36.2,50.3,52.6,64.4,116.8,126.2,137.4,140.5,156.2,172.2,201.2.ESI-MS:m/z 325.1([M+H]+),347.1([M+Na]+).HRMS:C16H25N2O5计算值：325.1763([M+H]+),实测值：325.1743.
ALA-HPO缀合物1c的盐酸盐:1H NMR(CD3OH,270MHz):δ1.29(t,J＝7.1Hz,3H,CH3),1.45(m,4H,CH2)1.89(m,4H,CH2),2.67(m,4H,CH2),2.82(m,2H,CH2),3.29(m,2H,CH2),3.55(m,2H,CH2),4.06(m,2H,CH2),7.15(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),8.20(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ11.1,15.2,19.4,25.4,26.8,29.1,34.2,36.2,50.3,52.6,64.4,111.9 136.4,138.5,156.2,172.2,173.1,201.2.ESI-MS:m/z 353.3([M+H]+),375.3([M+Na]+).HRMS:C18H29N2O5计算值：353.2076([M+H]+),实测值：353.2065.
ALA-HPO缀合物1d的盐酸盐:1H NMR(CD3OH,270MHz):δ1.17(t,3H,J＝7.1Hz,CH3),1.26(m,12H,CH2),2.66(m,2H,CH2),2.85(m,2H,CH2),3.49(m,2H,CH2),3.61,(m,2H,CH2),4.05-4.11(m,4H,CH2),7.33(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H)8.22(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ11.3,15.4,19.8,26.4,29.0,29.1,34.2,36.2,50.3,52.6,64.4,110.8138.4,143.4,158.2,172.2,173.1,201.2.ESI-MS:m/z 382.1([M+H]+),404.2([M+Na]+).HRMS:C20H33N2O5计算值：381.2389([M+H]+),实测值：381.2383.
ALA-HPO缀合物1e的盐酸盐:1H NMR(CD3OH,270MHz):δ1.17(t,J＝7.1Hz,3H,CH3),1.26(m,16H,CH2),2.66(m,2H,CH2),2.85(m,2H,CH2),3.15(m,2H,CH2),3.91(m,2H,CH2),4.05(s,2H,CH2),4.60(m,2H,CH2),7.15(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),8.20(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ11.3,15.7,19.8,26.4,29.0,29.1,34.2,50.3,52.6,56.3,61.3,64.4,110.8,138.4,143.5,146.0,158.2,172.3,173.1,201.2.ESI-MS:409.2([M+H]+),HRMS:C22H37N2O5计算值：409.2702([M+H]+),实测值：409.2700.
ALA-HPO缀合物1f的盐酸盐:1H NMR(CD3OH,270MHz):δ1.11(t,J＝7.1Hz,3H,CH3),1.13(m,20H,CH2),2.66(m,2H,CH2),2.90(m,2H,CH2),3.32(m,2H,CH2),3.91(m,2H,CH2),4.09(s,2H,CH2),4.60(m,2H,CH2),7.33(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),8.22(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ11.3,19.8,25.7,26.1,28.9,29.0,29.1,29.3,34.2,50.2,52.3,56.7,61.3,64.6,110.7,138.1,143.5,158.4,172.9,173.3,201.2.ESI-MS:m/z437.0,([M+H]+),459.1,([M+Na]+).HRMS:C24H41N2O5计算值：437.3015([M+H]+),实测值：437.3025.
实施例2、化合物2a的制备方法，依次进行以下步骤：
A.化合物10的合成：
苄基保护的乙基麦芽酚--化合物9(10g,43.4mmol),二氧化硒(14.5g,130.4mmol)和溴苯(50mL)的混合液在135-140℃剧烈搅拌4h。冷却后过滤，蒸干滤液，残留物用硅胶柱(内装约600g 200-300目的硅胶)层析纯化(乙酸乙酯/环己烷,2:1)，得棕色油状物---化合物10(4.6g,43％)。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ1.23(d,J＝6.7Hz,3H,CH3),4.85(q,J＝6.7Hz,1H,CH),5.22(d,J＝2.0Hz,2H,CH2),6.46(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.37(m,5H,Ph),7.71(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C6-H).ESI-MS:m/z 247([M+H]+).
B.化合物11的合成：
化合物10(4.0g,16.2mmol)溶于二氯甲烷(50mL)，加入50％KOH(5.45g,48.6mmol)和Bu4N+HSO4 -(0.1g)。混合液室温搅拌30min，然后滴加苄溴(4.17g,24.4mmol)。反应在室温下进行，用TLC检测，至原料(即，10)消失。反应液用盐水洗涤，有机层用无水Na2SO4干燥。过滤，蒸干滤液，残留物用硅胶柱(内装约300g 200-300目的硅胶)层析纯化(乙酸乙酯/环己烷1:2)，得淡黄色油状物11(3.4g,62％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1.14(d,J＝6.6Hz,3H,CH3),4.19-4.28(m,2H,CH2),4.67(q,J＝6.6Hz,1H,CH),5.19(s,2H,CH2),6.40(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.24-7.33(m,10H,Ph),7.71(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C6-H).ESI-MS:m/z 337([M+H]+.
C.化合物12a的合成：
化合物11(1.68g,5mmol)溶于乙醇(30mL)/水(30mL),加入6-氨基-1-己醇(1.47g,12.5mmol)和2M NaOH溶液(2mL)。混合液回流18h后，冷却至室温，用浓盐酸调节至pH1，然后浓缩至一半体积，加入50mL水。此溶液用***洗涤(2×50mL)，10M NaOH调节至pH 9，用二氯甲烷萃取(3×50mL)。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，蒸去溶剂。残留物用乙酸乙酯重结晶，得到黄色晶体12a。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1.14-1.29(m,4H,CH2),1.22(d,J＝7.0Hz,3H,CH3),1.44(m,2H,CH2),1.62(m,2H,CH2),3.56(t,J＝6.5Hz,2H,CH2),3.98and 4.10(m,2H,CH2),4.16(s,2H,CH2),5.26(s,2H,CH2),6.48(d,J＝7.5Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.21(m,3H,Ph和吡啶酮中C6-H),7.28-7.34(m,8H,Ph)；ESI-MS:m/z 436([M+H]+),458([M+Na]+).
D.化合物13a的合成：
N-Cbz-ALA(0.292g，1.1mmol)溶于二氯甲烷(4ml)和DMF(1ml)，加入DCC(0.202g，1mmol)和DMAP(0.2mmol)。氮气保护下，混合液室温搅拌50min。滴加化合物12a(1mmol)溶液(溶于4ml二氯甲烷)，30min加完。混合液室温搅拌过夜，过滤，将滤液蒸干。残留物溶于二氯甲烷(约30ml)，用水和饱和NaHCO3(约30ml)洗涤。过滤，蒸去溶剂，残留物用硅胶柱(内装100g 200-300目的硅胶)层析纯化(甲醇/乙酸乙酯1:9)，得到产物13a。1H NMR(CDCl3,270MHz)δ1.22(m,7H,2CH2and CH3),1.44-1.59(m,4H,2CH2),2.58-2.69(m,4H,2CH2),3.93-4.14(m,7H,3CH2and CH),5.09(s,2H,CH2),5.22(s,4H,2CH2),5.63(s,1H,NH),6.46(d,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.38-7.47(m,15H,3Ph),8.82(d,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ19.2,25.5,27.2,27.7,28.9,31.7,34.5,49.9,52.9,63.2,65.2,66.8,71.7,117.2,123.5,127.1,127.6,128.9,136.1,142.0,142.4,156.2,173.1,173.5,206.7.ESI-MS:m/z683.2([M+H]+),705.2([M+Na]+).
E.化合物2a的合成：
取化合物13a(0.682g，1mmol)和氯化苄(0.14g,1.1mmol)溶于甲醇(20mL)中，加入5％钯碳催化剂(68mg)，在40psi的氢气下，室温催化氢化10min。过滤除去钯碳，滤液蒸去溶剂，得到黄色油状产物2a的盐酸盐0.377g。1H NMR(CD3OH,270MHz):δ1.20-1.44(m,7H,2CH2和CH3),1.93-2.06(m,4H,CH2),2.66(m,2H,CH2),2.81(m,2H,CH2),3.57(m,2H,CH2),4.09(m,4H,2CH2),5.67(m,1H,CH),7.19(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H)，8.21(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ13.9,19.4,25.4,26.8,27.1,34.23,36.2,50.3,52.6,64.4,72.2,116.8,126.2,137.4,141.5,156.2,173.1,201.2.ESI-MS:370.2([M+H]+),392.2([M+Na]+)。HRMS:C18H29N2O6计算值：369.2026([M+H]+),实测值369.2019。
产物2a的结构式如下：
n＝6。
实施例3、化合物3a的制备方法，依次进行以下步骤：
A.化合物17的合成：
将化合物16(0.94g,3.82mmol)和N-羟基琥珀酰亚胺(0.485g,4.2mmol)溶于四氢呋喃(20ml)，室温搅拌30min，加入DCC(0.866g,4.2mmol)，继续搅拌5h。加入甲胺的四氢呋喃溶液(2M,4.58mmol)，室温搅拌过夜。过滤，将滤液浓缩，用硅胶柱(内装约150g 200-300目的硅胶)层析纯化(乙酸乙酯/甲醇9:1)，得到产物17(0.85g,86％).1H NMR(CDCl3,400MHz)δ2.78(d,J＝5.0Hz,3H,CH3),5.39(s,2H,CH2),6.49(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.40(m,5H,Ph),7.70(br,1H,NH),7.84(d,J＝5.6Hz,1H,吡啶酮中C6-H).ESI-MS:m/z260([M+H]+).
注：化合物16的合成按文献方法(Xie,Y.Y.；Liu,M.S.；Hu,P.P.；Kong,X.L.；Qiu,D.H.；Xu,J.L.；Hider,R.C.；Zhou,T.Synthesis,physico-chemical properties,anantimicrobial evaluation of a new series of iron(III)hexadentatechelators.Medicinal Chemistry Research 2013,22(5),2351-2359.)进行。
B.化合物18a的合成：
化合物17(1.3g,5mmol)溶于乙醇(30mL)/水(30mL),加入6-氨基-1-己醇(1.47g,12.5mmol)和2M NaOH溶液(2mL)。混合液回流18h后，冷却至室温，用浓盐酸调节至pH1，然后浓缩至一半体积，加入50mL水。此溶液用***洗涤(2×50mL),10M NaOH调节至pH 9，用二氯甲烷萃取(3×50mL)。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，滤液蒸去溶剂。残留物用乙酸乙酯重结晶，得到黄色晶体18a。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1.30-1.42(m,4H,CH2),1.55(m,2H,CH2),1.76(m,2H,CH2),2.73(d,J＝4.9Hz,3H,CH3),3.62(t,J＝6.3Hz,2H,CH2),3.83(t,J＝7.5Hz,2H,CH2),5.09(s,2H,CH2),6.30(d,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.13(d,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮中C6-H),7.31(m,5H,Ph),7.43(m,1H,NH).ESI-MS:m/z 359([M+H]+),381([M+Na]+).
C.化合物19a的合成：
N-Cbz-ALA(0.292g，1.1mmol)溶于二氯甲烷(4ml)和DMF(1ml)，加入DCC(0.202g，1mmol)和DMAP(0.2mmol)。氮气保护下，混合液室温搅拌50min。滴加化合物18a(1mmol)溶液(溶于4ml二氯甲烷)，30min加完。混合液室温搅拌过夜，过滤，将滤液蒸干。残留物溶于二氯甲烷(约30ml)，用水(约30ml)和饱和NaHCO3(约30ml)洗涤。过滤，滤液蒸去溶剂，残留物用硅胶柱(内装约100g 200-300目的硅胶)层析纯化(甲醇/乙酸乙酯1:9)，得到产物19a。产率80％.1H NMR(CDCl3,270MHz):δ1.30(m,4H,2CH2),1.57(m,2H,CH2),1.74(m,2H,CH2),2.60–2.68(m,4H,2CH2),2.70(d,J＝2.9Hz,3H,CH3),2.76(m,2H,CH2)4.02(m,4H,2CH2),4.98(s,2H,CH2),5.06(s,2H,CH2),5.71(br,1H,NH),6.20(d,J＝7.4,1H,吡啶酮中C5-H),7.25(d,J＝7.4Hz,吡啶酮中C6-H),7.27–7.32(m,10H,2Ph),8.01(br,H,NH).ESI-MS:m/z 606.3([M+H]+),,628.3([M+Na]+).
D.化合物3a的合成：
取化合物19a(0.605g，1mmol)和氯化苄(0.14g,1.1mmol)溶于甲醇(20mL)中，加入5％钯碳催化剂(61mg)，在40psi的氢气下，室温催化氢化10min。过滤除去钯碳，滤液蒸去溶剂，得到黄色油状产物3a的盐酸盐0.398g。1H NMR(CD3OH,270MHz):δ1.52(m,4H,2CH2),1.64(m,2H,CH2),2.07(m,2H,CH2),2.67(m,2H,CH2),2.83(m,2H,CH2),3.28(s,3H,CH3),4.02-4.07(m,4H,2CH2),4.35(m,2H,CH2),7.26(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),8.30(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ25.0,25.5,27.2,27.9,28.1,34.0,59.2,64.6,111.0,138.4,143.0,146.5,158.2,172.3,173.1,201.2.ESI-MS:m/z 382.2([M+H]+),404.4([M+Na]+)。
产物3a的结构式如下：
n＝6。
实施例4、化合物4a的制备方法，依次进行以下步骤：
A.化合物21a的合成：
苄基保护的乙基麦芽酚9(0.92g,4mmol)溶于乙醇(10mL)/水(10mL)，加入2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙醇(20a)(0.90g,6mmol)和2M NaOH溶液(2mL)。混合液回流18h后，冷却至室温，用浓盐酸调节至pH 1，然后浓缩至一半体积，加入30mL水。此溶液用***洗涤(2×30mL),10M NaOH调节至pH 9，用二氯甲烷萃取(3×30mL)。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，滤液蒸去溶剂。残留物用乙酸乙酯重结晶，得到黄色晶体21a。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1.00(t,J＝7.5Hz,3H,CH3),2.63(q,J＝7.5Hz,2H,CH2),3.54(m,6H,CH2),3.66-3.73(m,4H,CH2),3.98(t,J＝5.2Hz,2H,CH2),5.25(s,2H,CH2),6.43(d,J＝7.6Hz,1H,吡啶酮中C5-H),7.28-7.35(m,4H,Ph和吡啶酮中C6-H),7.44(m,2H,Ph)；ESI-MS:m/z 362([M+H]+),384([M+Na]+).
B.化合物22a的合成：
N-Cbz-ALA(0.292g，1.1mmol)溶于二氯甲烷(4ml)和DMF(1ml)，加入DCC(0.202g，1mmol)和DMAP(0.2mmol)。氮气保护下，混合液室温搅拌50min。滴加化合物21a(1mmol)溶液(溶于4ml二氯甲烷)，30min加完。混合液室温搅拌过夜，过滤，将滤液蒸干。残留物溶于二氯甲烷(约30ml)，用水(约30ml)和饱和NaHCO3(约30ml)洗涤。过滤，蒸去溶剂，残留物用硅胶柱(内装100g 200-300目的硅胶)层析纯化(甲醇/乙酸乙酯1:9)，得到油状产物22a，产率70％.1H NMR(CDCl3,270MHz)δ0.98(t,3H,CH3),2.59-2.61(m,6H,3CH2),3.47-3.73(m,8H,4CH2),3.90(m,2H,CH2),4.04(s,2H,CH2),4.30(m,2H,CH2),5.05(s,2H,CH2),5.19(s,2H,CH2),5.90(br,H,NH),6.35(d,1H,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H inpyridinone),7.23-7.27(m,10H,2Ph),7.38(d,J＝7.4Hz,1H,吡啶酮中C6-H pyridinone).ESI-MS:m/z 609.2,([M+H]+),631.5([M+Na]+).
C.化合物4a的合成：
取化合物22a(0.61g，1mmol)和氯化苄(0.14g,1.1mmol)溶于甲醇(20mL)中，加入5％钯碳催化剂(61mg)，在40psi的氢气下，室温催化氢化10min。过滤除去钯碳，滤液蒸去溶剂得到黄色油状产物4a的盐酸盐0.38g。1H NMR(CD3OH,270MHz):δ1.17(t,J＝7.1Hz,3H,CH3),2.56(m,2H,CH2),2.73(m,2H,CH2),3.01(q,J＝5.4Hz,2H,CH2),3.21(m,2H,CH2),3.47(m,6H,3CH2),3.54(m,2H,CH2),3.90(s,2H,CH2),4.65(m,2H,CH2),7.07(d,J＝6.4Hz,1H,吡啶酮中C5-H),8.08(d,J＝6.7Hz,1H,吡啶酮中C6-H)；13C NMR:δ13.9,19.4,25.4,27.1,34.23,36.2,26.8,50.3,52.6,64.4,72.2,116.8 126.2,137.4,141.5.4,156.2,173.1,204.2.ESI-MS:m/z385.2([M+H]+),407.2([M+Na]+).
产物4a的结构式如下：
实验1：细胞中的原卟啉(PpIX)产生的药代动力学研究
方法：ALA在细胞内经代谢产生光敏剂PpIX，由于PpIX是荧光化合物，因此用耦合自动酶标仪的荧光光谱仪进行测定。激发波长405nm，发射波长635nm。
细胞培养：采用人乳腺癌细胞(MCF-7)及其耐药性的细胞系(MCF-7R)、人类癌(KB)细胞作为研究对象。MCF-7细胞和MCF-7R细胞在无菌条件下在DEME/F12培养基中培养，该培养基中含有20μM的L-谷氨酰胺和酚红，以及10％小牛血清(铁浓度450-600μg/100g之间)和庆大霉素(500U/mL)。KB细胞在EMEM培养基中培养，含有20μM的L-谷氨酰胺，10％小牛血清和链霉素(200U/mL)。这些细胞在37℃，潮湿的5％二氧化碳培养箱生长。
药代动力学研究：细胞接种到经灭菌的96孔板培养48小时(细胞密度大约为每孔5×104)，除去培养液后，细胞用磷酸缓冲液洗涤。接着细胞与新配制的ALA和ALA-HPO缀合物溶液一起培养：将含一定浓度ALA或ALA-HPO的100μL培养基(不含血清)添加到指定的孔中。空白对照(即细胞培养时加入不含药物的培养基)和各种不同浓度的药物各进行6次平行试验。细胞培养一定时间后，每个孔的荧光信号用耦合自动酶标仪的荧光光谱仪测定。减去空白对照值后计算平均荧光强度。
由图1可见，与MCF-7R癌细胞孵育6h后ALA-HPO缀合物都比ALA能产生更高浓度的光敏剂PpIX。1c、2a和4a产生的PpIX荧光强度是ALA的10-15倍，1a和3a的则相对较弱，而含有长脂肪链的1d、1e和1f显示了比其它化合物更强的活性，在浓度为50μmol/L时，产生的PpIX荧光强度分别是ALA的18、21和20倍，甚至比脂溶性良好的ALA己酯和ALA辛酯产生的PpIX荧光强度更强。
由图2可见，与KB癌细胞孵育2-24小时后，ALA-HPO缀合物1a-1f，以及2a、3a和4a都比ALA能产生更高浓度的光敏剂PpIX。浓度为50μmol/L时，与KB癌细胞孵育24小时1d、1e和1f在此条件下产生的PpIX荧光强度分别是ALA的8、10.2和9.2倍。而申请号2015109686482的化合物1a(100μmol/L)与KB癌细胞孵育24小时产生的PpIX荧光强度仅是ALA的2.9倍。
由图3可见，尽管与ALA单独使用相比，ALA和HPO配伍使用能增强PpIX水平，但这个增强作用比ALA与相应的HPO的缀合物要明显弱。在MCF-7and MCF-7R细胞中，1c、4a、1d、1e和1f都分别比ALA与相应的HPO配伍使用能产生更高浓度的PpIX。
实验2：光毒性试验
将细胞以约5×104/孔的密度接种于96孔板，孵育48小时后，用磷酸缓冲液洗涤细胞，0.1毫升含不同浓度(1、10、20、50、100μM)的化合物溶液加入指定的孔中，孵育4小时。空白对照(即不加化合物)和五种不同浓度的化合物各进行6次平行试验。用能量密度为2.5J/cm2的低功率蓝光辐照。照射后，立即更换培养基，细胞继续孵育18小时。细胞毒性采用噻唑蓝(MTT)分析法测定。细胞用含有1mg/mLMTT的培养基(MCF-7和MCF-7R细胞培养基为DMEM/F-12，KB细胞培养基为EMEM)培养24小时。小心吸去孔内培养基上清液，每孔加入0.1毫升的二甲亚砜(DMSO)，使紫色结晶物充分溶解，酶标仪上490nm波长处测定各孔OD值。平均细胞存活率用以下公式计算：
由图4可知，与ALA相比，经不同浓度的ALA-HPO缀合物处理后，癌细胞的存活率大大降低，表明这些化合物具有比ALA更强的药效，尤其是1d、1e和1f具有更强的活性。细胞毒性与产生PpIX荧光强度的活性相符。从图4中得到的ALA-HPO缀合物的三种癌细胞的半致死量(LD50)列于表1。结合物1d,1e和1f对三种癌细胞的LD50在2.3μM到12.9μM之间；而ALA的LD50值则>120μM；高脂溶性的ALA已基酯的LD50值则稍高于1e。
表1、ALA和ALA-HPO缀合物对KB,MCF-7和MCF-7R细胞的半致死量(LD50)
本发明的1d、1e和1f对KB细胞的半致死量(LD50)分别为3.1、2.3和2.5μM，在浓度为10μM时，KB细胞存活率的存活率都在6％以下；而同样条件下申请号2015109686482的化合物1a在浓度为200μM时，KB细胞存活率为7.8％。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

Claims (5)

1.5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物，其特征是：该缀合物是5-氨基酮戊酸与铁螯合剂3-羟基吡啶-4-酮的缀合物，分别为ALA-HPO缀合物1-4；所述ALA-HPO缀合物1-4的结构通式为：
其中通式1,2和3中的n为2-12的任一整数；通式4中的n为1-4的任一整数。
2.根据权利要求1所述的5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物，其特征是：
通式1中，n为6、8或10，
通式2中，n为2。
3.如权利要求1所述的5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物的制备方法，其特征是：
1)以乙基麦芽酚为原料，经苄基保护、与氨基醇缩合、在1,3-二环己基碳二亚胺和4-二甲氨基吡啶作用下与N-苄氧羰基-5-氨基酮戊酸(N-Cbz-ALA)偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物1；
2)苄基保护的乙基麦芽酚用二氧化硒氧化，选择性地得到2-位羟基化的产物，与溴化苄反应将羟基保护，与氨基醇缩合，在DCC和4-二甲氨基吡啶作用下与N-Cbz-ALA偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物2；
3)以甲基麦芽酚为原料，经苄基保护，用二氧化硒氧化，将2-位甲基氧化成甲酰基，用氨基磺酸/亚氯酸进一步氧化成羧基，用N-羟基琥珀酰亚胺/DCC将羧基活化后与甲胺作用生成酰胺，与氨基醇缩合，在DCC和4-二甲氨基吡啶作用下与N-Cbz-ALA偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物3；
4)苄基保护的乙基麦芽酚与缩合，在DCC和4-二甲氨基吡啶作用下与N-Cbz-ALA偶联，最后经催化氢化脱去保护基团，得到ALA-HPO缀合物4。
4.如权利要求1所述的5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物的用途，其特征是：用作制备光动力学治疗药物。
5.根据权利要求4所述的5-氨基酮戊酸与3-羟基吡啶-4-酮的缀合物的用途，其特征是：用于制备治疗皮肤癌、肺癌或***的药物。
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