CN106046008A - 二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其制备方法和用途 - Google Patents

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缪震元
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韩贵焱
刘明辉
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Abstract

本发明涉及医药技术领域，具体涉及是一种新型二氢卟吩类光敏剂——二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的用途。本发明的二氢卟吩p6氨基酸衍生物的化学结构如通式(I)所示，

Description

二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及是一种新型二氢卟吩类光敏剂——二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其制备方法，以及在制备抗肿瘤药物中的用途。
背景技术
光动力疗法(photodynamic therapy，PDT)是在上世纪八十年代逐渐发展起来的肿瘤靶向治疗新技术即给药(光敏剂)后用波长与光敏剂固有的红光区最大吸收波长相匹配的激光定向辐照病灶(肿瘤)组织，由光敏剂诱发组织中的基质氧(O2)激发产生单态氧(1O2)等活性氧物质(ROS)，导致肿瘤细胞凋亡或坏死而发挥肿瘤靶向治疗作用。由于PDT仅对肿瘤组织实施靶向光照，可选择性地破坏肿瘤细胞而对正常组织或器官则几乎没有损害或损害很小，在临床上也具有很好的控制性，因此，它是一种对人体非侵害性的治疗技术，具有副作用小(无手术产生的创伤痛苦，无放疗和化疗产生的呕吐、恶心和免疫抑制)、可单独或配合其它治疗手段重复多次使用等优点。
光照、组织中的氧和光敏剂是PDT的三大要素，其中，光敏剂是核心。第一代卟啉类光敏剂如卟吩姆钠(porfimer sodium)等成功用于肿瘤临床治疗，取得了令人瞩目的疗效，但也存在明显缺陷：(1)红光区最大吸收波长短(630nm)使得波长与之相匹配的激光穿透杀伤肿瘤深度不够；且摩尔吸收系数(ε)小，导致光敏活性低；(2)为多组分卟啉混合物；(3)体内清除慢导致滞留光毒性大。因此，从上世纪九十年代末起开展了二氢卟吩如苯并卟啉衍生物(benzoporphyrin derivative，BPD)及叶绿素a降解衍生物为代表的第二代光敏剂的研发。由于二氢卟吩类光敏剂具有结构单一明确、红光区(＞600nm)最大吸收波长较卟啉类红移至660-690nm致使该波长激光具有更佳的肿瘤杀伤深度且摩尔吸收系数(ε)高一个数量级、光敏活性强、体内代谢快、滞留光毒性小，已成为光敏新药研究热点。其中，维替泊芬(verteporfin)、替莫泊芬(temoporfin)和他拉泊芬(talaporfin)分别于2000年、2001年和2004年成功上市。
二氢卟吩p6极不稳定，其6-和γ-羧基可自行脱水缩合成更稳定的六元内酸酐结构而生成紫红素-18，因此，针对二氢卟吩p6的结构修饰，文献报道较少，主要在其3-乙烯基、13-，15-羧基和20-中介氢三个部位分别进行结构改造(姚建忠,等.二氢卟吩p6醚类衍生物的合成.有机化学,2001,21(6):458-462；姚建忠,等.蚕沙叶绿素的降解及二氢卟吩p6酰胺衍生物的合成.中国医药工业杂志,1999,30(9):403-406；王屹，等.δ-(甲酰乙稀基)二氢卟吩衍生物的合成.有机化学,2007,27(3):391-396；Leach,M.W.；et al.In vitrophotodynamic effects of lysyl chlorine p6:cell survival,localization andultrastructural changes.Photochemistry and Photobiology,1993,58(5):653-660.)。
鉴于文献报道卟啉和二氢卟吩分子结构中引入水溶性氨基酸残基可以改善其药效和制药学性质(Hitoshi,T.,et al.Synthesis of chlorophyll-amino acidconjugates as models for modification of proteins with chromo/fluorophores.Bioorg.Med.Chem.2014,22,1421-1428.；Kwitniewski,M.,et al.Diaminoacid derivatives of PpIX as potential photosensitizers for photodynamictherapy of squamous cell carcinoma and prostate cancer:in vitrostudies.J.Photochem.Photobiol.B 2009,94,214–222.；Serra,V.V.,New porphyrinamino acid conjugates:synthesis and photodynamic effect in human epithelialcells.Bioorg.Med.Chem.2010,18,6170–6178.；Wang,H.M.；Porphyrin with amino acidmoieties:a tumor photosensitizer.Chem.Biol.Interact.2008,172,154-158.)；另外，二氢卟吩的2-位乙烯基的醚类衍生物比其先导物具有更强的光敏活性和肿瘤PDT疗效(姚建忠等，二氢卟吩f甲醚的合成及其光敏化力和肿瘤光生物活性.药学学报，2000,35(1):63-66；姚建忠等，2-(1-羟基)乙基二氢卟吩f及其醚类衍生物的合成和肿瘤光生物活性.中国药物化学杂志，2001,39(1):1-4.)，本发明拟在此基础上研发新的一种二氢卟吩类光敏剂。
目前尚无文献报道将二氢卟吩p6作为先导结构，在其7-位丙羧基引入氨基酸残基或同时在其7-位丙羧基引入氨基酸残基和2-位乙烯基进行醚化结构设计。
发明内容
本发明的目的是提供一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物包括二氢卟吩p6氨基酸衍生物和二氢卟吩p6醚类氨基酸衍生物。本发明的另一目的在于提供该二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的制备方法。本发明的第三目的是提供该二氢卟吩p6类氨基酸衍生物在制备抗肿瘤药物中特别是光敏剂中的用途。
本发明以结构稳定且制备方便的叶绿素a稳定降解产物紫红素-18为原料，经内酸酐碱开环、羧基重氮甲烷甲基化及酯选择性酸水解制得的二氢卟吩p6二甲酯为先导结构，在其7-位丙羧基引入水溶性氨基酸残基或在其7-位丙羧基引入水溶性氨基酸残基后同时对2-位乙烯基进行醚化，优化设计合成了一类新型二氢卟吩类光敏剂——二氢卟吩p6类氨基酸衍生物。
本发明的第一方面，提供了一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐，本发明所述的二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的化学结构如式(Ⅰ)所示：
式(Ⅰ)中，
R1代表各种氨基酸残基；优选赖氨酸、谷氨酸、天冬氨酸等。
R2代表CH＝CH2、CH(OR3)CH3；
R3代表H、低级烷基、高级烷基、(CH2)mOR4或(CH2)mNR5R6；优选CH3、C2H5、n-C3H7、n-C4H9、n-C5H11、n-C6H13、n-C8H17等。
R4代表H、低级烷基；
R5和R6独立地表示低级烷基；
m表示2-6之间的整数；
所述的低级烷基，指含1-6个碳原子的直链或支链烷基；
所述的高级烷基，指含7-18个碳原子的直链或支链烷基。
本发明所述的二氢卟吩p6类氨基酸衍生物，部分优选化合物I1～I24的R1和R2分别组合如表1所示：
表1：本发明部分优选化合物I1～I24
其中n表示“正-”。
进一步地，本发明还提供了上述二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的药用盐和药学上可接受制剂，所述的药用盐可以为碱金属盐，优选钠盐等，所述的制剂优选脂质体和脂肪乳等静脉制剂。
本发明的第二方面，提供了上述的二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的制备方法。
本发明提供一种原料来源广、制备方法简单、毒性低的新型二氢卟吩类光敏剂——二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的制备方法。
本发明所用原料为叶绿素a稳定降解产物—紫红素-18(purpurin-18)，其化学结构式如下：
紫红素-18经内酸酐碱开环、羧基重氮甲烷甲基化和酯选择性酸水解制得的二氢卟吩p6二甲酯结构中的7-丙羧基与氨基酸缩合或其2-乙烯基和7-丙羧基分别与醇和氨基酸发生加成和缩合反应，合成得到本发明新的结构类型的二氢卟吩类光敏剂——二氢卟吩p6类氨基酸衍生物。
上述紫红素-18原料可用蚕沙中的叶绿素a经酸碱降解制备。
我国是世界蚕丝生产大国，蚕沙(家蚕粪)是蚕业的主要副产物之一。我国每年蚕丝生产中约可产生100万吨蚕沙。蚕沙中叶绿素a含量约占0.75％，是极为丰富而廉价的叶绿素资源。利用蚕沙制备焦脱镁叶绿酸a醚类氨基酸衍生物，可拓展蚕业废物资源的医药应用，最终实现“变废为宝”。
紫红素-18可用文献方法合成得到(姚建忠，等.蚕沙中叶绿素a降解过程的化学研究.中草药，1999,30(8):568-57.)
本发明所述的二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的制备方法，以蚕沙叶绿素粗提物——市售糊状叶绿素为起始原料的制备方法如下：
A、用叶绿素a(chlorophyll a，Ⅷ)为原料制备二氢卟吩p6二甲酯(chlorinp6dimethylester，Ⅳ)，反应流程为：
B、用化合物Ⅲ制备目标化合物二氢卟吩p6类氨基酸衍生物Ⅰ，反应流程如下：
具体合成步骤为：
A1、制备紫红素-18(purpurin-18，Ⅵ)：
首先，市售糊状叶绿素的***溶液，在0～5℃条件下与等体积量浓盐酸搅拌反应0.5h生成脱镁叶绿酸a(pheophorbide a，Ⅶ)；然后，化合物Ⅶ在25％氢氧化钾的正丙醇液中通氧气反应2制得Ⅵ；
A2、制备二氢卟吩p6二甲酯(chlorin p6dimethylester，Ⅳ)
化合物Ⅵ溶于四氢呋喃-甲醇(1:4，v/v)，加等体积0.5mol.L-1氢氧化钠反应2h制得不稳定产物二氢卟吩p6(chlorine p6)后迅速与重氮甲烷反应制得二氢卟吩p6三甲酯(chlorin p6trimethylester，Ⅴ)，化合物Ⅴ经25％HCl水解制得Ⅳ；
B1、制备二氢卟吩p6醚类衍生物Ⅱ
将化合物Ⅳ与过量的33％HBr冰醋酸液室温反应24h制得中间体Ⅲ，中间体Ⅲ在过量K2CO3存在下与各种醇(R3OH)反应制得化合物Ⅱ；
B2、制备二氢卟吩p6类氨基酸目标衍生物I：
将化合物Ⅳ或Ⅱ的二氯甲烷液在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、N-羟基苯并***(HOBt)和N,N-二甲基异丙基胺(DIPEA)存在下分别与各种羧基或/和氨基保护的酸性或碱性氨基酸盐酸盐(R1'-NH2·HCl)反应24h后再经三氟醋酸(TFA)脱去叔丁基或叔丁氧羰基或和氢氧化锂脱甲基酯制得二氢卟吩p6类氨基酸目标衍生物I。
本发明的部分优选化合物I1～I24的R1和R2分别组合如前述的表1。
本发明的第三方面，提供上述的二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的制药用途。
本发明二氢卟吩p6类氨基酸衍生物对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10和人黑色素瘤细胞A375等具有优良的PDT杀伤效应，且具有高效、低毒的优点。
与现有临床应用的新一代光敏剂维替泊芬(verteporfin)相比，本发明二氢卟吩p6类氨基酸衍生物具有高效、低毒等优点，可用于制备抗肿瘤药物，特别是新的光动力治癌药物、光动力治疗良性血管性疾病如老年性黄斑变性(一种视网膜微血管增生性疾病)及鲜红斑痣(一种先天性皮肤微血管畸形病变)的药物和光动力治疗***(人***瘤病毒感染疾病)药物。
具体实施方式
现结合实施例，对本发明作详细描述，但本发明的实施不仅限于此。本发明所用试剂和原料均市售可得或可按文献方法制备。
下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1：脱镁叶绿酸a(Ⅶ)的制备
蚕沙叶绿素a(Ⅷ)粗提物(糊状叶绿素)，购自浙江海宁市凤鸣叶绿素有限公司。
蚕沙叶绿素a(Ⅷ)粗提物100g溶于500mL***，于0～5℃条件下加入等体积的浓盐酸并搅拌反应1h，分取下层酸液，加2倍量水稀释，冷却下用10mol/L的NaOH中和至pH为5-6，抽滤，P2O5干燥后得到黑色粉末Ⅶ粗品15g，不做纯化直接用于下一步反应。
实施例2：紫红素-18(Ⅵ)的制备
Ⅶ粗品15g，溶于50mL四氢呋喃，加入300mL***稀释，再加入25％(w/v)的氢氧化钾正丙醇溶液20mL，于0～5℃条件下通O2反应2h，用水提取(300mL×2)，10％H2SO4中和，过滤，P2O5干燥，硅胶H柱层析分离得黑色粉末Ⅵ2.7g。
实施例3：二氢卟吩p6三甲酯(Ⅴ)的制备
化合物Ⅵ(2.0g,3.55mmol)，溶于50mL四氢呋喃，加入200mL甲醇，再加0.5mol·L-1氢氧化钠水溶液250mL，室温搅拌反应至698nm处吸收峰消失，加水500ml，用稀盐酸中和至pH 5～6，***提取(3×200mL)，无水硫酸钠干燥，过滤，醚液于冰盐浴上加入新配制的2.8％(w/v)CH2N2***液20mL，反应5min，水洗，回收溶剂，干燥后经硅胶H柱色谱分离得1.85g黑色粉末Ⅴ，产率83.6％，纯度(HPLC)：99.8％。
实施例4：二氢卟吩p6二甲酯(Ⅳ)的制备
化合物Ⅴ(375mg,0.601mmol)溶于100mL四氢呋喃，加入100mL的25％盐酸，常温反应4小时。反应完全后，加入2.5倍量水，用氢氧化钠水溶液调节pH至5-6，二氯甲烷萃取。有机层水洗3次，无水硫酸钠干燥，减压蒸出二氯甲烷，硅胶H柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝100/3)，得黑色固体Ⅳ(300mg，0.492mmol)，产率81.8％。MS(ESI+)m/z:611.39[M+H]+(100％)。UV-visλmax(CH3OH,nm)(ε/M-1cm-1):667(1.73×105),610(2.23×104),529(2.31×104),497(6.22×104),397(3.47×105)。1H NMR[CDCl3,600MHz]:δ9.69(s,1H),9.47(s,1H),8.66(s,1H),7.95(dd,J＝18.0,11.4Hz,1H),6.29(d,J＝18.0Hz,1H),6.12(d,J＝11.4Hz,1H),5.16(m,1H),4.39(m,1H),4.20(s,3H),4.14(s,3H),3.71(m,2H),3.64(s,3H),3.38(s,3H),3.23(s,3H),2.43-2.10(m,4H),1.85(d,J＝6.0Hz,3H),1.69(t,J＝7.8Hz,3H),-1.0(br s,2H)。HPLC purity:98.8％。
实施例5：21-溴乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅲ)的制备
化合物Ⅳ(1.0g,1.64mmol)，加33％HBr冰醋酸液100mL，室温避光密封反应36h，减压蒸除冰醋酸，得到墨绿色固体化合物Ⅲ，不做纯化直接用于下一步反应。
实施例6：2-(1-甲氧基)乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅱ1)的制备
上述墨绿色固体化合物Ⅲ(0.1g)，溶于干燥二氯甲烷50mL，加入K2CO3(100mg)和2mL干燥甲醇，在N2保护下室温反应2.5h后反应完毕，停止反应，过滤，水洗3次，饱和食盐水洗1次，无水Na2SO4干燥2h，减压回收有机溶剂后硅胶H色谱分离(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/丙酮/甲酸＝100/2/2/0.1，v/v/v/v)，得黑色粉末Ⅱ1 30.4mg，产率32.7％。
MS(ESI+)m/z:643.73[M+H]+(100％)；HRMS(ESI+)m/z:642.3059[M]+,calcd forC36H42N4O7 642.3053。
1H NMR[(CD3)2SO,300MHz]:δ9.79(s,2H),8.98(s,1H),5.97(m,1H),4.99(m,1H),4.55(m,1H),4.13(s,3H),4.10(s,3H),3.73(m,2H),3.60(s,3H),3.47(s,3H),3.30(s,3H),2.35(m,2H),2.15(m,2H),2.00(d,3H),1.78(d,3H),1.61(m,3H),-1.16(s,1H),-1.30(s,1H)。
实施例7：2-(1-乙氧基)乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅱ2)的制备
按实施例6的方法，化合物Ⅲ(0.1g)与2mL干燥无水乙醇反应制得黑色固体Ⅱ226.8mg，收率28.2％。
MS(ESI+)m/z:657.50[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,300MHz]:δ9.62(s,1H),9.06(s,1H),8.82(s,1H),8.77(s,1H),5.91(m,1H),4.92(m,1H),4.51(m,1H),4.32(s,3H),4.15(s,3H),3.69(m,2H),3.58(s,3H),3.45(s,3H),3.33(s,3H),2.32(m,2H),2.21(m,2H),1.96(d,3H),1.83(d,3H),1.63(m,3H),0.91(m,3H),-1.01(s,1H),-1.26(s,1H)。
实施例8：2-(1-正丙氧基)乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅱ3)的制备
按实施例6的方法，化合物Ⅲ(0.1g)与2mL干燥无水正丙醇反应制得黑色固体Ⅱ331.1mg，收率32.1％。
MS(ESI+)m/z:671.46[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ12.06(s,1H),9.85(s,1H),9.72(s,1H),8.97(s,1H),5.96(m,1H),4.99(m,1H),4.57(m,1H),4.14(s,3H),4.12(s,3H),3.69(m,3H),3.57(s,3H),3.38(s,3H),3.16(s,3H),2.37(m,1H),2.14(m,1H),2.09(m,2H),1.97(d,3H),1.80(d,3H),1.64(m,3H),1.56(m,3H),0.89(m,3H),-1.13(s,1H),-1.28(s,1H)。
实施例9：2-(1-正丁氧基)乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅱ4)的制备
按实施例6的方法，化合物Ⅲ(0.1g)与2mL干燥无水正丁醇反应制得黑色固体Ⅱ427.5mg，收率27.8％。
MS(ESI+)m/z:685.49[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ12.01(s,1H),9.83(s,1H),9.65(s,1H),8.98(s,1H),5.88(m,1H),5.05(m,1H),4.58(m,1H),4.16(s,3H),4.15(s,3H),3.58(m,3H),3.55(s,3H),3.47(m,3H),3.35(s,3H),3.10(d,3H),2.40(m,1H),2.12(m,4H),1.92(d,3H),1.83(d,3H),1.68(m,3H),0.72(m,3H),-1.13(s,1H),-1.25(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ174.91,174.38,170.22,167.59,166.58,145.46,141.12,140.85,137.70,136.20,135.17,134.73,132.66,129.09,112.95,104.73,103.70,101.03,94.46,72.41,68.82,53.24,52.90,52.73,48.81,41.72,34.11,32.22,29.23,24.83,23.89,19.49,19.09,17.90,14.13,12.49,11.09。
实施例10：2-(1-正戊氧基)乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅱ5)的制备
按实施例6的方法，化合物Ⅲ(0.1g)与2mL干燥无水正戊醇反应制得黑色固体Ⅱ527.0mg，收率26.7％。
MS(ESI+)m/z:699.52[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ12.05(s,1H),9.87(s,1H),9.78(s,1H),8.96(s,1H),5.95(m,1H),4.99(m,1H),4.55(m,1H),4.15(s,3H),4.11(s,3H),3.66(m,3H),3.60(s,3H),3.49(m,1H),3.38(s,3H),3.19(d,3H),2.36(m,1H),2.06(m,2H),1.99(m,4H),1.80(d,3H),1.66(m,2H),1.60(m,3H),1.38(m,2H),1.28(m,2H),0.74(m,3H),-1.14(s,1H),-1.27(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ174.91,174.38,170.22,167.59,166.58,145.46,141.12,140.85,137.70,136.20,135.17,134.73,132.66,129.09,112.95,104.73,103.70,101.03,94.46,72.41,68.82,53.24,52.90,52.73,48.81,41.72,34.11,32.22,29.23,24.83,23.89,19.49,19.09,17.90,14.13,12.49,11.09。
实施例11：2-(1-正己氧基)乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅱ6)的制备
按实施例6的方法，化合物Ⅲ(0.1g)与2mL干燥无水正戊醇反应制得黑色固体Ⅱ637.4mg，收率36.3％。
MS(ESI+)m/z:713.45[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ12.07(s,1H),9.81(s,1H),9.67(s,1H),8.95(s,1H),5.87(m,1H),5.02(m,1H),4.56(m,1H),4.15(s,3H),4.13(s,3H),3.55(s,3H),3.51(m,3H),3.37(m,3H),3.34(s,3H),3.11(d,3H),2.40(m,1H),2.10(m,2H),1.93(d,3H),1.81(d,3H),1.68(m,3H),1.52(m,3H),0.56(m,3H),-1.13(s,1H),-1.27(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ173.84,173.48,169.72,166.87,166.10,154.25,148.25,145.10,140.48,137.06,135.85,134.65,134.00,132.10,128.50,122.41,104.30,103.11,100.67,93.80,71.90,68.61,53.24,52.70,52.38,48.28,31.24,30.95,29.54,28.76,25.44,24.41,23.36,21.85,18.61,17.45,13.57,11.97,10.57。
实施例12：2-(1-正辛氧基)乙基-2-去乙烯基二氢卟吩p6二甲酯(Ⅱ7)的制备
按实施例6的方法，化合物Ⅲ(0.1g)与2mL干燥无水正辛醇反应制得黑色固体Ⅱ738.0mg，收率35.5％。
MS(ESI+)m/z:741.52[M+H]+(100％)。
实施例13：N-(二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基)-L-谷氨酸(I1)的制备
化合物Ⅳ(110mg,0.180mmol)溶解在30mL干燥二氯甲烷，加入EDCI(41.5mg,0.216mmol,1.2equiv.)和HOBt(29.2mg,0.216mmol,1.2equiv.)，氮气保护冰盐浴下搅拌反应30min，将L-Glu(OBut)2·HCl(60.9mg,0.216mmol,1.2equiv.)和DIPEA(0.038mL,0.216mmol,1.2equiv.)溶于10mL二氯甲烷后，滴加入反应液，氮气保护室温条件下搅拌反应过夜。然后加入200mL二氯甲烷，依次用5％柠檬酸水溶液、饱和食盐水和水洗涤，无水硫酸钠干燥，回收溶剂。固体残留物直接溶于15mL干燥二氯甲烷，然后加入5mL三氟乙酸，室温搅拌反应6小时。反应完全后，加入100mL二氯甲烷，10％碳酸氢钠水溶液调节pH至3-4，硅胶H柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇/丙酮/甲酸＝100/5/5/0.1)，得黑色固体产物I1，82.5mg，0.112mmol，两步收率61.9％；HPLC purity:97.6％。
MS(ESI+)m/z:740.42[M+H]+(100％)；HRMS(ESI+)m/z:739.3290[M]+,calcd forC40H45N5O9 739.3217。
UV-visλmax(CH3OH,nm)(ε/M-1cm-1):666(2.72×105),528(5.39×104),497(8.92×104),397(4.81×105)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ12.33(br s,2H),9.67(s,1H),9.45(s,1H),8.98(s,1H),8.10(dd,J＝18,12Hz,1H),8.03(d,J＝12Hz,1H),6.34(d,J＝18Hz,1H),6.10(d,J＝12Hz,1H),4.99(m,1H),4.58(m,1H),4.15(s,3H),4.12(s,3H),3.98(m,2H),3.56(s,3H),3.40(s,3H),3.38(m,1H),3.09(s,3H),2.28(m,2H),2.18(m,2H),2.01(m,2H),1.88(m,2H),1.83(d,J＝6.0Hz,3H),1.65(t,J＝6.0Hz,3H),-1.14(s,1H),-1.29(s,1H)。13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ173.59,173.42,173.30,171.74,169.75,167.27,166.09,154.16,148.17,144.95,140.56,137.28,136.03,135.11,134.20,131.19,128.76,128.66,122.63,122.53,104.22,103.13,99.79,94.13,52.79,52.62,52.29,51.10,48.16,32.43,31.53,30.01,28.89,26.22,23.49,18.54,17.51,12.00,11.85,10.64。
化合物I1的化学结构式如下：
实施例14：N-[2-(1-甲氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-谷氨酸(I2)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ1与L-Glu(OBut)2·HCl制得黑色固体I2，收率61.2％。
MS(ESI+)m/z:772.58[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,300MHz]:δ9.81(s,1H),9.79(s,1H),8.96(s,1H),5.97(m,1H),4.96(m,1H),4.59(m,1H),4.14(s,3H),4.10(s,3H),3.98(m,2H),3.75(m,3H),3.61(s,3H),3.49(s,3H),3.42(s,3H),3.23(s,3H),2.27-2.11(m,5H),2.00(m,4H),1.81(d,3H),1.63(m,3H),-1.12(s,1H),-1.29(s,1H)。
化合物I2的化学结构式如下：
实施例15：N-[2-(1-乙氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-谷氨酸(I3)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ2与L-Glu(OBut)2·HCl制得黑色固体I3，收率65.3％。
MS(ESI+)m/z:786.56[M+H]+(100％)。
化合物I3的化学结构式如下：
实施例16：N-[2-(1-正丙氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-谷氨酸(I4)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ3与L-Glu(OBut)2·HCl制得黑色固体I4，收率63.6％。
MS(ESI+)m/z:800.57[M+H]+(100％)；HRMS(ESI+)m/z:799.3808[M]+,calcd forC43H53N5O10 799.3792。
1H NMR[(CD3)2SO,300MHz]:δ9.86(s,1H),9.78(s,1H),8.95(s,1H),7.71(s,1H),5.99(m,1H),4.98(m,1H),4.57(m,1H),4.14(s,3H),4.11(s,3H),3.72(m,3H),3.66(m,1H),3.60(s,3H),3.47(m,2H),3.40(s,3H),3.20(s,3H),2.27-2.03(m,5H),2.00(m,4H),1.81(d,3H),1.68(m,4H),1.61(m,3H),0.91(m,3H),-1.12(s,1H),-1.27(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ174.84,174.33,171.45,170.21,167.83,166.59,154.74,148.71,145.73,141.05,140.84,137.62,136.46,135.21,135.11,134.51,132.73,128.95,122.88,104.88,103.60,101.08,94.33,72.41,70.86,53.26,53.13,52.75,52.42,48.70,33.18,32.10,31.71,29.41,25.01,23.94,23.40,22.51,19.22,18.11,14.37,12.54,11.25。
化合物I4的化学结构式如下：
实施例17：N-[2-(1-正丁氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-谷氨酸(I5)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ4与L-Glu(OBut)2·HCl制得黑色固体I5，收率45.0％。
MS(ESI+)m/z:814.53[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ9.90(s,1H),9.81(s,1H),8.99(s,1H),7.96(m,1H),6.00(m,1H),5.04(m,1H),4.62(m,1H),4.19(s,3H),4.16(s,3H),3.74(m,3H),3.64(s,3H),3.56(m,1H),3.44(s,3H),3.24(s,3H),2.35-2.12(m,5H),2.03(m,4H),1.86(d,3H),1.70(m,4H),1.65(m,3H),-1.07(s,1H),-1.22(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ173.76,171.42,169.72,167.25,166.08,154.23,148.21,145.21,140.53,137.11,135.93,134.59,134.02,132.11,128.47,122.39,104.35,103.12,100.60,93.79,71.95,68.38,52.74,52.24,51.37,48.21,32.46,31.77,31.53,31.19,30.52,28.89,26.71,24.45,23.44,19.03,18.71,17.59,13.72,12.03,10.65。
化合物I5的化学结构式如下：
实施例18：N-[2-(1-正戊氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-谷氨酸(I6)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ5与L-Glu(OBut)2·HCl制得黑色固体I6，收率50.0％。
MS(ESI+)m/z:828.58[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ9.84(s,1H),9.74(s,1H),8.93(s,1H),7.73(m,1H),5.91(m,1H),4.98(m,1H),4.58(m,1H),4.13(s,3H),4.11(s,3H),3.64(m,4H),3.58(s,3H),3.46(m,1H),3.37(s,3H),3.17(s,3H),2.28-2.14(m,4H),2.09(m,2H),1.97(d,3H),1.81(d,3H),1.72(m,2H),1.65(m,4H),1.59(m,3H),0.73(t,3H),-1.12(s,1H),-1.27(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ173.79,171.02,169.72,167.31,166.08,154.20,148.19,145.18,140.48,137.09,135.88,134.67,134.03,132.18,128.46,122.38,104.32,103.12,100.62,93.80,71.92,68.65,52.74,52.22,51.90,48.23,32.72,31.62,31.36,31.16,29.32,28.85,27.57,24.48,23.44,18.68,17.54,13.72,12.01,10.62。
化合物I6的化学结构式如下：
实施例19：N-[2-(1-正己氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-谷氨酸(I7)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ6与L-Glu(OBut)2·HCl制得黑色固体I7，收率48.7％。
MS(ESI+)m/z:842.60[M+H]+(100％)。
化合物I7的化学结构式如下：
实施例20：N-[2-(1-正辛氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-谷氨酸(I8)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ7与L-Glu(OBut)2·HCl制得黑色固体I8，收率49.3％。
MS(ESI+)m/z:870.62[M+H]+(100％)。
化合物I8的化学结构式如下：
实施例21：N-(二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基)-L-天冬氨酸(I9)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅳ与L-Asp(OBut)2·HCl制得I9，收率58.0％；HPLCpurity:96.3％。
MS(ESI+)m/z:726.43[M+H]+(100％)。
UV-visλmax(CH3OH,nm)(ε/M-1cm-1):667(3.73×105),612(5.46×104),529(6.14×104),497(1.01×105),398(6.15×105)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ9.48(s,1H),9.19(s,1H),8.95(s,1H),8.05(d,J＝7.2Hz,1H),7.89(dd,J＝18,12Hz,1H),6.17(d,J＝18Hz,1H),5.96(d,J＝12Hz,1H),5.01(m,1H),4.61(m,1H),4.45(m,2H),4.17(s,3H),4.16(s,3H),3.51(s,3H),3.36(m,1H),3.31(s,3H),2.88(s,3H),2.61(m,1H),2.49(s,2H),2.35(m,1H),2.09(m,2H),1.84(d,J＝6.6Hz,3H),1.44(t,J＝7.2Hz,3H),-1.25(s,1H),-1.33(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ173.37,172.84,172.03,171.24,169.79,167.31,166.13,154.03,148.05,144.73,140.50,137.17,135.81,134.95,134.21,131.05,128.62,122.48,122.39,104.05,103.13,99.61,94.10,52.82,52.69,52.28,48.62,48.18,37.31,32.73,31.64,28.83,23.51,18.41,17.42,11.97,11.77,10.47。HRMS(ESI+)m/z:725.3061[M]+,calcd for C39H43N5O9 725.3086。
化合物I9的化学结构式如下：
实施例22：N-[2-(1-甲氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-天冬氨酸(I10)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ1与L-Asp(OBut)2·HCl制得I10，收率62.2％。
MS(ESI+)m/z:758.51[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,300MHz]:δ9.81(s,2H),8.97(s,1H),7.67(m,1H),5.98(m,1H),4.99(m,1H),4.59(m,1H),4.15(s,3H),4.11(s,3H),3.76(m,3H),3.67(m,1H),3.61(s,3H),3.48(s,3H),3.42(s,3H),3.23(s,3H),2.34-2.17(m,5H),2.02(m,4H),1.82(d,3H),1.63(m,3H),-1.12(s,1H),-1.29(s,1H)。
化合物I10的化学结构式如下：
实施例23：N-[2-(1-乙氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-天冬氨酸(I11)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ2与L-Asp(OBut)2·HCl制得I11，收率65.2％。
MS(ESI+)m/z:772.48[M+H]+(100％)。
化合物I11的化学结构式如下：
实施例24：N-[2-(1-正丙氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-天冬氨酸(I12)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ3与L-Asp(OBut)2·HCl制得I12，收率67.0％。
MS(ESI+)m/z:786.44[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,300MHz]:δ9.86(s,1H),9.79(s,1H),8.94(s,1H),7.64(m,1H),6.00(m,1H),4.96(m,1H),4.58(m,1H),4.14(s,3H),4.10(s,3H),3.74(m,3H),3.67(m,2H),3.60(s,3H),3.49(m,2H),3.40(s,3H),3.21(s,3H),2.38-2.15(m,5H),2.00(m,4H),1.81(d,3H),1.68(m,2H),1.61(m,3H),0.91(m,3H),-1.13(s,1H),-1.28(s,1H)。
化合物I12的化学结构式如下：
实施例25：N-[2-(1-正丁氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-天冬氨酸(I13)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ4与L-Asp(OBut)2·HCl制得I13，收率77.1％。
MS(ESI+)m/z:800.68[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ9.90(s,1H),9.80(s,1H),8.99(s,1H),7.75(m,1H),6.00(m,1H),5.03(m,1H),4.64(m,1H),4.28,(m,1H),4.19(s,3H),4.17(s,3H),3.74(m,2H),3.64(s,3H),3.56(m,2H),3.44(s,3H),3.23(s,3H),2.50-2.30(m,4H),2.10(m,2H),2.03(m,5H),1.86(d,3H),1.70(m,2H),1.65(m,6H),-1.07(s,1H),-1.21(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ173.81,170.62,169.69,167.33,166.09,154.22,148.20,145.18,140.50,137.08,135.90,134.59,134.03,132.17,128.46,122.37,104.34,103.10,100.58,93.83,71.95,68.37,52.77,52.24,48.60,48.22,32.78,31.76,31.64,31.17,28.86,28.57,24.49,23.43,21.99,19.03,18.70,17.57,13.71,12.03,10.77。
化合物I13的化学结构式如下：
实施例26：N-[2-(1-正戊氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-天冬氨酸(I14)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ5与L-Asp(OBut)2·HCl制得I14，收率50.2％。
MS(ESI+)m/z:814.47[M+H]+(100％)。
1H NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ9.83(s,1H),9.69(s,1H),8.96(s,1H),7.95(m,1H),5.91(m,1H),5.00(m,1H),4.60(m,1H),4.37(s,1H),4.15(s,3H),4.14(s,3H),3.59(m,4H),3.56(s,3H),3.43(m,2H),3.37(s,3H),3.14(s,3H),2.57(m,1H),2.09(m,2H),1.96(d,3H),1.83(d,3H),1.72(m,2H),1.62(m,4H),1.58(m,3H),0.70(t,3H),-1.10(s,1H),-1.25(s,1H)。
13C NMR[(CD3)2SO,600MHz]:δ173.78,172.98,172.19,171.03,169.73,167.28,166.10,154.21,148.19,145.14,140.54,140.32,137.07,135.85,134.67,134.04,132.15,128.47,122.40,104.27,103.14,100.63,93.81,71.93,68.63,52.77,52.22,48.60,48.24,32.67,31.60,29.30,28.78,28.04,24.45,23.43,21.86,18.64,17.50,13.69,11.99,10.74。
化合物I14的化学结构式如下：
实施例27：N-[2-(1-正己氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-天冬氨酸(I15)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ6与L-Asp(OBut)2·HCl制得I15，收率48.4％。
MS(ESI+)m/z:828.57[M+H]+(100％)。
化合物I15的化学结构式如下：
实施例28：N-[2-(1-正辛氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-天冬氨酸(I16)的制备
按实施例13的方法，化合物Ⅱ7与L-Asp(OBut)2·HCl制得I16，收率46.8％。
MS(ESI+)m/z:856.61[M+H]+(100％)。
化合物I16的化学结构式如下：
实施例29：N-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基)-L-赖氨酸(I17)的制备
化合物Ⅳ(110mg,0.180mmol)溶解在30mL干燥二氯甲烷，加入EDCI(41.5mg,0.216mmol,1.2equiv.)和HOBt(29.2mg,0.216mmol,1.2equiv.)，氮气保护冰盐浴下搅拌反应30min，将Nε-叔丁氧羰基-L-赖氨酸甲酯盐酸盐(Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl)(64.1mg,0.216mmol,1.2equiv.)和DIPEA(0.038mL,0.216mmol,1.2equiv.)溶于10mL二氯甲烷后，滴加入反应液，氮气保护室温条件下搅拌反应过夜。然后加入200mL二氯甲烷，依次用5％柠檬酸水溶液、饱和食盐水和水洗涤，无水硫酸钠干燥，回收溶剂。固体残留物溶于15mL THF，加LiOH(33.6mg,1.4mmol，8.0equiv.)水溶液(5mL)和甲醇(10mL)，室温搅拌反应2h，反应完毕。反应液加水(50mL)稀释，用饱和NH4Cl液调节pH至5-6，用二氯甲烷萃取(20mL×3)，无水Na2SO4干燥，减压除去二氯甲烷，P2O5真空干燥得黑色固体。上述黑色固体重新溶于15mL干燥二氯甲烷，冰浴下加5mL三氟乙酸(TFA)反应1h，反应完毕后加85mL二氯甲烷稀释，用饱和NaHCO3中和未反应TFA至反应液由绿色转变为紫褐色，分取有机层，减压回收有机溶剂，经硅胶H柱色谱分离，梯度洗脱剂CH2Cl2:MeOH＝4:1～2:1(v/v)，得黑色粉末I17 56,5mg，收率42.50％。
MS(ESI+)m/z:739.43[M+H]+(100％)。
化合物I17的化学结构式如下：
实施例30：N-[2-(1-甲氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-赖氨酸(I18)的制备
按实施例29的方法，化合物Ⅱ1与Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl制得I18，收率45.2％。
MS(ESI+)m/z:771.48[M+H]+(100％)。
化合物I18的化学结构式如下：
实施例31：N-[2-(1-乙氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-赖氨酸(I19)的制备
按实施例29的方法，化合物Ⅱ2与Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl制得I19，收率40.8％。
MS(ESI+)m/z:785.51[M+H]+(100％)。
化合物I19的化学结构式如下：
实施例32：N-[2-(1-正丙氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-赖氨酸(I20)的制备
按实施例29的方法，化合物Ⅱ3与Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl制得I20，收率47.4％。
MS(ESI+)m/z:799.54[M+H]+(100％)。
化合物I20的化学结构式如下：
实施例33：N-[2-(1-正丁氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-赖氨酸(I21)的制备
按实施例29的方法，化合物Ⅱ4与Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl制得I21，收率48.5％。
MS(ESI+)m/z:813.43[M+H]+(100％)。
化合物I21的化学结构式如下：
实施例34：N-[2-(1-正戊氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-赖氨酸(I22)的制备
按实施例29的方法，化合物Ⅱ5与Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl制得I22，收率38.2％。
MS(ESI+)m/z:827.58[M+H]+(100％)。
化合物I22的化学结构式如下：
实施例35：N-[2-(1-正己氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-赖氨酸(I23)的制备
按实施例29的方法，化合物Ⅱ6与Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl制得I23，收率43.7％。
MS(ESI+)m/z:841.47[M+H]+(100％)。
化合物I23的化学结构式如下：
实施例36：N-[2-(1-正辛氧基)乙基-2-去乙烯基-二氢卟吩p6二甲酯-73-酰基]-L-赖氨酸(I24)的制备
按实施例29的方法，化合物Ⅱ7与Nε-Boc-L-Lys-OMe·HCl制得I24，收率47.6％。
MS(ESI+)m/z:869.63[M+H]+(100％)。
化合物I24的化学结构式如下：
实施例37：本发明部分优选二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的体外PDT抗肿瘤活性试验。
1.材料
细胞株选用小鼠黑色素瘤细胞(B16-F10)和人黑色素瘤细胞(A375)，购自中国科学院上海细胞库。
激光光源采用恩耐激光技术(上海)有限公司研制的660nm半导体激光治疗仪，最大输出功率为2W。
2.方法
1)细胞培养：B16-F10和A375细胞分别培养于加入了2mg/mL的碳酸氢钠、4.5mg/mL葡萄糖、100μg/mL链霉素硫酸盐、40mg/mL庆大霉素、100U/mL青霉素、10％(v/v)热灭活胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基(Hyclone,Logan,UT,USA)或DMEM培养基(Hyclone,Logan,UT,USA)，后置于5％二氧化碳温度为37℃的恒温培养箱中培养。
2)药液配制：取本发明待测化合物和阳性对照药物维替泊芬(verteporfin,BPD-MA)溶于DMSO，配成300mM浓度的药物储存液。
3)细胞暗毒性：于96孔板每孔上(Costar,Cambridge,MA,USA)接种5×103个B16-F10或A375细胞，然后培养于上述条件下培养。取待测样品配成已知浓度的待测液，稀释成不同浓度加入细胞培养液，后再培养48小时。
CCK-8测定法：将细胞培养液吸出，加入含10％(v/v)CCK-8(DojindoLaboratories,Japan)的培养液200μL，继续培养1.5小时，然后用酶标仪(Tecan,Switzerland)波长450nm，测定每孔的吸光度值。
4)细胞光毒性：B16-F10或A375细胞按照上述条件培养，加入已知浓度的待测样品，培养24小时。然后用660nm波长光照射，光剂量10J/cm2，继续培养24小时。再选用CCK-8法测定细胞的存活率。
3.结果
本发明部分中间体和优选目标化合物对体外肿瘤细胞的暗毒性和PDT杀伤效应结果，见表2。
表2部分中间体和目标化合物对肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50(μM)
上述实验结果显示：
在光照剂量为10J/cm2条件下，绝大多数测试化合物对受试肿瘤细胞株均具有优良的PDT抗癌活性，且其治疗指数(暗毒和光毒比)显著优于同类上市的阳性对照光敏药物维替泊芬(verteporfin,BPD-MA)。
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可作出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (10)

1.一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐，所述的二氢卟吩p6类氨基酸衍生物的化学结构如式(Ⅰ)所示：
式(Ⅰ)中，
R1代表氨基酸残基；
R2代表CH＝CH2、CH(OR3)CH3；
R3代表H、低级烷基、高级烷基、(CH2)mOR4或(CH2CH2O)kR5；
R4代表H、低级烷基；
R5代表H、低级烷基；
m表示3-6之间的整数；
k表示1-6之间的整数；
所述的低级烷基，指含1-6个碳原子的直链或支链烷基；
所述的高级烷基，指含7-18个碳原子的直链或支链烷基。
2.根据权利要求1所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐，其特征在于，式(Ⅰ)中，
R1代表赖氨酸、谷氨酸或天冬氨酸；
R2代表CH＝CH2、CH(OCH3)CH3、CH(OC2H5)CH3、CH(O-n-C3H7)CH3、CH(O-n-C4H9)CH3、CH(O-n-C5H11)CH3、CH(O-n-C6H11)CH3、CH(O-n-C8H17)CH3。
3.根据权利要求2所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐，其特征在于，所述的二氢卟吩p6类氨基酸衍生物中R1和R2分别组合如下：
4.根据权利要求1、2或3所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐，其特征在于，所述的药用盐为碱金属盐。
5.如权利要求1所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
以紫红素-18为原料，依次经内酸酐碱开环、羧基甲基化和酯水解制得的二氢卟吩p6二甲酯为关键中间体，二氢卟吩p6二甲酯结构中的7-丙羧基与氨基酸缩合或其2-乙烯基和7-丙羧基分别与醇和氨基酸发生加成和缩合反应，合成二氢卟吩p6类氨基酸衍生物。
6.根据权利要求5所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐的制备方法，其特征在于，所述的合成原料紫红素-18是用叶绿素a经酸、碱及氧化降解制备得到的。
7.根据权利要求5所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
A、以叶绿素a(chlorophyll a，Ⅷ)为原料制备二氢卟吩p6二甲酯(chlorin p6dimethylester，Ⅳ)，反应流程如下，反应方法为A1至A2：
A1、制备紫红素-18(purpurin-18，Ⅵ)
首先，市售糊状叶绿素的***溶液，在0～5℃条件下与等体积量浓盐酸搅拌反应0.5h生成脱镁叶绿酸a(pheophorbide a，Ⅶ)；然后，化合物Ⅶ在25％氢氧化钾的正丙醇液中通氧气反应2制得Ⅵ；
A2、制备二氢卟吩p6二甲酯(chlorin p6 dimethylester，Ⅳ)
化合物Ⅵ溶于四氢呋喃-甲醇(1:4，v/v)，加等体积0.5mol.L-1氢氧化钠反应2h制得不稳定产物二氢卟吩p6(chlorine p6)后迅速与重氮甲烷反应制得二氢卟吩p6三甲酯(chlorin p6 trimethylester，Ⅴ)，化合物Ⅴ经25％HCl水解制得Ⅳ；
B、用化合物Ⅳ制备目标化合物二氢卟吩p6类氨基酸衍生物Ⅰ，反应流程如下，反应方法为B1至B2：
B1、制备二氢卟吩p6醚类衍生物Ⅱ
将化合物Ⅳ与过量的33％HBr冰醋酸液室温反应24h制得中间体Ⅲ，中间体Ⅲ在过量K2CO3存在下与各种醇(R3OH)反应制得化合物Ⅱ；
B2、制备二氢卟吩p6类氨基酸目标衍生物I：
将化合物Ⅳ或Ⅱ的二氯甲烷液在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、N-羟基苯并***(HOBt)和N,N-二甲基异丙基胺(DIPEA)存在下分别与各种羧基或/和氨基保护的酸性或碱性氨基酸盐酸盐(R1'-NH2·HCl)反应24h后再经三氟醋酸(TFA)脱去叔丁基或叔丁氧羰基或和氢氧化锂脱甲基酯制得二氢卟吩p6类氨基酸目标衍生物I。
8.如权利要求1、2或3所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述的抗肿瘤药物为光动力治癌药物。
10.如权利要求1所述的一种二氢卟吩p6类氨基酸衍生物及其药用盐在制备光动力治疗老年性黄斑变性、鲜红斑痣，或***药物中的应用。
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