CN106474141A - 蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物中的应用 - Google Patents

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刘水
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柳博文
滕梓皓
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Abstract

本发明涉及蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物中的应用，并通过兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠金葡菌肺炎模型证明蛇床子素联用黄芩苷的治疗效果明显优于单独用药的治疗效果。由于传统抗生素的滥用和细菌耐药性的不断加强，蛇床子素联用黄芩苷具有治愈率高，无耐药性的特点，因此蛇床子素联用黄芩苷可以增加使用药物的选择性,对开发新药和有着重要意义。

Description

蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物中的应用
技术领域
本发明涉及蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物中的应用，属于医药领域。
背景技术
蛇床子素是中药蛇床的果实——蛇床子提取物中一种主要的有效成分，是中医常用的单味药。蛇床子素具有温肾助阳、祛风、燥湿、杀虫等多种生物活性。作为新型的天然功效因子，蛇床子素具有抗肿瘤、抗炎、抗心律失常、抗高血压、抗骨质疏松症等功效。黄芩苷是黄芩根中提取分离出来的一种黄酮类化合物,具有显著的生物活性，如抑菌、利尿、抗炎、抗***及解痉作用，并且具有较强的抗癌反应等生理效能,在临床医学已占有重要地位。但截至目前国内外未见蛇床子素联用黄芩苷治疗细菌性肺炎的报道。
金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、化脓性链球菌等均能引起细菌性肺炎。细菌耐药性的不断增加，造成了许多治疗上较为困难的细菌性肺炎病例的出现，尤其在免疫能力较弱的儿童和老人以及免疫缺陷者中死亡率极高。其中以金葡菌感染所导致的肺炎病情较为严重，常规情况下人们使用苯唑西林和氯唑西林对此肺炎进行治疗，但是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的出现，导致治疗失败和较高的死亡率，给肺炎的治疗带来了更大的压力。因此，开发新的安全有效的药物具有十分重要的意义。蛇床子素是药用植物蛇床果实中的主要活性成分，黄芩苷是黄芩根中提取的一种黄酮类化合物，本发明研究表明了蛇床子素联用黄芩苷对细菌性肺炎，尤其是金葡菌引起的肺炎具有良好的治疗效果。
发明内容
蛇床子素的分子结构见附图1。
黄芩苷的分子结构见附图2。
本发明通过家兔红细胞溶血试验、人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验以及小鼠金葡菌肺炎模型证实蛇床子素联用黄芩苷对金葡菌感染有治疗作用。
附图说明
附图1蛇床子素分子结构
附图2黄芩苷分子结构
附图3蛇床子素联用黄芩苷对金葡菌介导A549细胞损伤作用的影响
具体实施方式
溶血试验
金葡菌USA300于不同浓度的蛇床子素及黄芩苷共培养至对数生长后期(OD600＝2.5)。取1ml共培养物，离心取上清；在1.5ml离心管中加入875μl的PBS缓冲液、100μl菌液上清和25μl脱纤维兔血，轻轻混匀后于37℃孵育15min，后离心取上清，并在543nm测其吸光值(表1)。
表1.蛇床子素及黄芩苷对金葡菌α-溶血素的抑制作用(％)
人肺上皮细胞(A549)损伤的保护试验
金葡菌USA300与蛇床子素共培养至对数生长后期(OD600nm＝2.5)，取10ml的细菌培养物，离心取上清，用0.22μm滤器过滤以除菌。A549细胞用含10％胎牛血清DMEM培养,以2×104个细胞/孔铺于96孔板中，37℃、5％CO2培养过夜。细胞贴壁后，离心弃培养基，加入200μl金葡菌上清液，并加入不同浓度的黄芩苷，使得96孔板中分别含不同浓度的蛇床子素、黄芩苷及二者联合应用的试验组。置于细胞培养箱中于37℃、5％CO2共培养5h。离心取上清加入LDH试剂，室温孵育30min后于酶标仪490nm下测定A549细胞的LDH释放率，以反映细胞的保护率。结果表明，蛇床子素联用黄芩苷能够保护金葡菌α-溶血素介导的人肺上皮细胞(A549)损伤，且二者联合应用的效果明显优于单独使用蛇床子素或黄芩苷(附图3)。
小鼠金葡菌肺炎的实验治疗学研究
小鼠金葡菌肺炎模型
BALB/C小鼠(雌性，约20g)经***麻醉后，经鼻给予30μl金葡菌悬液(金葡菌USA300)，小鼠平躺直至苏醒，建立小鼠金葡菌肺炎的模型。致死试验及组织病理学考察给予的金葡菌量相同。
保护率试验
小鼠接种金葡菌后2h分别皮下注射50mg/kg(100μl)的蛇床子素、50mg/kg(100μl)的黄芩苷及蛇床子素和黄芩苷各50mg/kg的混合液100μl，每12h给药一次。不给药的阳性对照组给与100μl的DMSO，每组10只小鼠；另单独设立未感染小鼠10只，给予灭菌的DMSO作为溶剂对照组。按给药方案给药后，分别记录小鼠感染金葡菌12h,24h，36h,48h，60h和72h后的死亡率。结果表明，经蛇床子素处理后，显著降低小鼠金葡菌肺炎的死亡率，且蛇床子素联用黄芩苷的保护效果比二者单独应用效果更好(表2)。
表2.蛇床子素联用黄芩苷对小鼠金葡菌肺炎死亡率的影响

Claims (4)

1.蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物中的应用。
2.如权利要求1所述的“蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物”中的应用，其特征在于所述的蛇床子素和黄芩苷为药学上可接受的载体。
3.如权利要求1所述的“蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物”中的应用，其特征在于所述的肺炎指由细菌引起的肺炎。
4.如权利要求1或3所述的“蛇床子素联用黄芩苷在制备治疗肺炎药物”中的应用，其特征在于所述的细菌性肺炎是指由金黄葡萄球菌引起的肺炎。
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