CN106468715A - 一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用 - Google Patents
一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106468715A CN106468715A CN201610452206.7A CN201610452206A CN106468715A CN 106468715 A CN106468715 A CN 106468715A CN 201610452206 A CN201610452206 A CN 201610452206A CN 106468715 A CN106468715 A CN 106468715A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- cervical cancer
- buffer solution
- detection reagent
- urine detection
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6827—Total protein determination, e.g. albumin in urine
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57442—Specifically defined cancers of the uterus and endometrial
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明涉及一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用,包括有含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合液,含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合比例是0.5:1:1。含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的浓度为0.05mol~0.5mol/L,磷钨酸试剂包含下列组份含量的水溶液:钨酸钠40g~58g/380ml~650ml、浓磷酸85%/30ml~50ml、浓盐酸20ml~50ml、硫酸锂30g~55g,缓冲溶液为乙酸/乙酸钠缓冲溶液,其PH值为PH5~PH6。本发明制备的***尿液检测试剂通过检测尿液中的巯基代谢物的含量,判断是否为***阳性,不需辅助的仪器设备,不需要冷藏,建立了一种快速、简便、灵敏、特异的***检测试剂,以期达到对***早期筛查的目的。
Description
技术领域
本发明涉及体外诊断试剂技术领域,具体涉及一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用。
背景技术
***是全世界女性常见的恶性肿瘤之一,在危害女性健康的恶性肿瘤中,***被列在第三位。据统计,2008年在全球女性所有新发癌症中,新发***所占的比例为9%,仅次于乳腺癌和结肠直肠癌。在我国,据统计每年新发子***患者约15万例。业已公认高危人***瘤病毒(HR-HPV)的持续感染是***发生的必要条件。但从HR-HPV感染妇女诱发宫颈上皮内瘤变(CIN)发展为浸润性***(ICC)约需5-20年时间,这为通过筛查发现并治疗癌前病变以降低***的发病率和死亡率赢得了时间。
最近50年以来,由于有效的筛查方法和策略的应用,***的筛查普及率得以较大幅度的提高,在世界范围内,***的死亡率有了大幅度的下降,尤其是在一些发达国家。在我们国家,尽管从全国范围来说,***的死亡率有了较大幅度的下降,但是这种比例分布并不均衡,比如我国的中西部地区,从事农业的人口占了总人口很大的比例,其中部分地区由于经济条件落后,科学知识普及面过窄,卫生资源缺乏,人们卫生意识较差,这就导致这些地区的***发病率和死亡率始终维持在较高的水平。近年来,患***的人数呈现逐年增加的趋势,患病的妇女也越来越年轻,引起全世界的高度重视。世界卫生组织(WHO)指出在未来10年里,要釆取更强而有力的措施去阻遏***的发生发展,否则,死于***的人数将上升25%。
随着科学技术的发展,对***的病因学研究取得了突破性的进展,目前比较一致的结论是:***的主要病因是人***瘤病毒(HPV)感染。此后又经过流行病学和生物学大量的研究完善,得出结论:持续高危的HPV感染是引起***及宫颈上皮内瘤变的必要因素。***发病较缓慢,它的发生、发展是一个逐渐积累,由渐变到突变,由量变到质变的过程。由最初的持续性高危HPV感染到最后发展为***这个过程是连续的,它往往要经历以下阶段:持续高危型HPV感染→宫颈不典型增生及宫颈原位癌 (CIN I、CIN II和CIN III)→微小***→***。经研究证实从高危型HPV感染发展到宫颈***(CIS)大约需要7—12年,这个过程中存在着一个较长的癌前病变期,是可逆转的。其明确的致病因素和缓慢的发展过程为广大妇科医生及时有效的干预***的发生和发展提供了宝贵的时机。而大量的临床实践表明,通过采取经济有效的筛查方法可以及早发现***前期病变,继而采取积极的措施去治疗,对于帮助广大妇女远离***的威胁,降低***的发病率以及死亡率有着不可低估的意义。
世界卫生组织唯一建议的在世界范围内开展筛查的恶性肿瘤便是***。***在全球范围内的防治目标是:一方面使参与到***筛查中的妇女人数不断增加,逐步扩大成年妇女***筛查的范围,特别是如今***患者趋于年轻化,年轻患者更应该备受关注;另一方面,尽可能给每位患***的妇女提供准确的筛查方法,确保筛查方法本身的质量和有效性不存在问题。对于***病因学的突破为其预防提供了新的方向和前景,目前HPV-DNA检测作为***的一种主要筛查方法在临床上逐步推广;2006年,HPV的预防性疫苗也已成功上市。但是,由于疫苗的成本较高,而且其在人群中是否具有预防效果尚需20-30年的时间进行验证,对于发展中国家的广大妇女来说,实现疫苗预防在目前来说不太现实。因此,顺应发展中国家国情的需要,在目前及将来很长一段时间内,***的筛查仍然是***防治的一种重要手段。所以,根据我国的实际情况,在临床上如何选择一种既准确有效、又经济适用,而且容易被女性接受的***筛查方法显得尤为重要。
目前临床上***的筛查方法主要有肉眼观察法、细胞学检查法和HPV检测法。细胞学检查因其快速、价廉,是目前最常用的方法,在宫颈筛查中仍起着重要作用,并被许多国家作为常规筛査项目。但细胞学检查并不十分可靠,具有较高的假阴性,通常需要重复检查才能获得满意的敏感度,且巴氏涂片在腺癌检测中的敏感度比鳞癌更低。虽然薄层液基细胞学等新技术的出现改善了细胞学的制片问题,但并没有彻底改变其敏感度低的现状,这也制约着细胞学筛查的发展。HPV检测是***筛查的另一项重要方法。在欧洲国家,HPV检测正在取代细胞学检查,成为宫颈病变初筛的首选。HPV检测具有很高的敏感性,在大样本筛査中可查出高风险人群,比细胞学筛查更为有效。但HPV的感染非常普遍,据统计,性活跃妇女终生累积感染率可高达80%。这种感染通常是一过性的,可通过自身免疫***及时清除,并不导致高度CIN及***的发生。因而,HPV检测通常具有较高的假阳性,尤其在年轻女性中其特异性更低。
因此,从***筛査及早期诊断的角度出发,有必要寻找新的手段来替代或协助常规筛查方法进行综合判断,使***的筛查更加准确和可靠。利用尿液筛查***,克服了传统检查方法的不足,一方面增强了受试者的依从性,使加入到***筛查的妇女大大增加;另一方面,对于一些未有性生活或者不愿进行妇科检查的妇女提供了新的***筛查的途径,这些优势可以提高我国的***筛查率,促进我国***的预防和控制工作效率,对于减少***的发病率和降低其死亡率有着迫切的现实意义。
现有的***尿液检测试剂盒虽然是一种快速简便的方法,但是试剂盒仍然存在组成溶液种类较多、结构较复杂、操作步骤多等缺陷,且上述试剂盒中的试剂保存时间短、稳定性差。现有技术有待进一步改进和提高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于,提供一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用,通过检测患者尿液中巯基代谢物的含量,判断患者是否为***阳性,不需辅助的仪器设备,不需要冷藏,建立了一种快速、简便、灵敏、特异的***检测试剂,以期达到对***早期筛查的目的。
本发明人对尿液中的***标志物进行研究,意外地发现,巯基化合物在健康人的尿液中含量非常低,而在***患者的尿液中含量显著升高。为了验证这种标志物与***之间的特异性关联,本发明人进一步研究了巯基化合物在其他类型癌症患者尿液中的含量,意外发现基本上没有出现这种蛋白含量同时升高的情况。因此,巯基化合物可以作为尿液中***的特异性诊断标志物。本发明的技术方案就是以尿液中存在的巯基化合物作为靶标来检测***的存在于否。
本发明是这样实现的,提供一种***尿液检测试剂,包括有含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合液,所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合比例是0.5:1:1;所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的浓度为0.05mol~0.5mol/L,所述磷钨酸试剂包含下列组份含量的水溶液:钨酸钠40g~58g/380ml~650ml、浓磷酸85%/30ml~50ml、浓盐酸20ml~50ml、硫酸锂30g~55g,所述缓冲溶液为乙酸/乙酸钠缓冲溶液,所述缓冲溶液的PH值为PH5~PH6。
进一步地,所述含锌离子化合物溶液为氯化锌溶液,所述含汞离子化合物溶液为氯化汞溶液。
进一步地,所述氯化汞溶液的浓度为0.05mol/L;所述钨酸钠45g/380ml、浓磷酸85%/30ml、浓盐酸30ml、硫酸锂30g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠82.3g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.3~PH5.5的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
进一步地,所述氯化汞溶液的浓度为0.08mol/L;所述钨酸钠51g/400ml、浓磷酸85%/37ml、浓盐酸20ml、硫酸锂38g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠70g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.5~PH5.7的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
进一步地,所述氯化锌溶液的浓度为0.1mol/L;所述钨酸钠58g/520ml、浓磷酸85%/40ml、浓盐酸30ml、硫酸锂40g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠65g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5~PH5.3的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
进一步地,所述氯化锌溶液的浓度为0.5mol/L;所述钨酸钠40g/650ml、浓磷酸85%/50ml、浓盐酸50ml、硫酸锂55g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠95g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.7~PH6的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
本发明还提供一种如前述的***尿液检测试剂的制备方法,包括:
(1)含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的制备:按浓度0.05mol~0.5mol/L的要求称取含锌离子化合物或含汞离子化合物溶于蒸馏水后备用;
(2)磷钨酸试剂的制备:称取钨酸钠40g~58g,溶于蒸馏水500ml~650ml中,加入85%浓磷酸30ml~50ml,加入浓盐酸30ml~50ml,回流2小时~4小时,冷却后定容至1000ml,最后加入硫酸锂30g~55g, 保存备用;
(3)缓冲溶液的制备:即取65g~82.3g乙酸钠溶入1000ml的水中,用乙酸调PH值至PH 5到PH6;
(4)将磷钨酸试剂与缓冲溶液混合:将第(2)步和第(3)步制备的磷钨酸试剂与缓冲溶液按1:1比例混合均匀,得到磷钨酸缓冲溶液;
(5)将第(1)步和第(4)制备的含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液0.5ml和磷钨酸缓冲溶液2ml混合均匀制成2.5ml的混合液,将该混合液无菌封装到10ml的安瓿瓶中。
本发明还公开了利用前述的***尿液检测试剂进行***的筛查和辅助诊断方面的应用。
利用本发明的***尿液检测试剂进行***的筛查和辅助诊断的方法是:
取妇女患者晨尿0.5ml,加入盛有本发明的***尿液检测试剂的试剂瓶中,摇匀静置5~10分钟,如试剂瓶中的溶液颜色显示为无色或乳白色,则结果为阴性,说明患者没有患***。如试剂瓶中的溶液颜色显示为蓝色,则结果为阳性,说明患者患有***。
与现有技术相比,本发明的***尿液检测试剂及其制备方法和应用的有益效果在于:
(1)利用患者的尿液作为检测样本,患者无痛苦;
(2)制备方便,成本低;
(3)检测方法操作简单,特异性高,诊断结果准确;
(4)可用于***的大规模筛查以及***高危人群的早期防范。
具体实施方式
为了使本发明所要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。而且,下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照本领域的常规手段进行。
实施例1:制备***尿液检测试剂1000支
(1)氯化汞溶液制备:按浓度0.05mol/L 的要求称取氯化汞溶于蒸馏水后定容至500ml备用。
(2)磷钨酸试剂的制备:称取钨酸钠45g,溶于蒸馏水380ml中,加入85%浓磷酸30ml,加入浓盐酸30-50ml,回流煮沸2小时,冷却后加入硫酸锂30g,最后加蒸馏水定容至1000ml 保存备用。
(3)缓冲液的制备:乙酸钠82.3g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.3~PH5.5,保存备用。
(4)将磷钨酸试剂与缓冲溶液混合:将第(2)步和第(3)步制备的磷钨酸试剂与缓冲溶液按1:1比例混合均匀,得到磷钨酸缓冲溶液。
(5)将第(1)步和第(4)制备的氯化汞溶液0.5ml和磷钨酸缓冲溶液2ml混合均匀制成2.5ml的混合液,将该混合液无菌封装到10ml的安瓿瓶中,得到一支***尿液检测试剂。
(6)重复(5)依次完成1000支***尿液检测试剂的制备。
实施例2:制备另一种***尿液检测试剂1000支
(1)氯化汞溶液制备:按浓度0.08mol/L 的要求称取氯化汞溶于蒸馏水后定容至500ml备用。
(2)磷钨酸试剂的制备:称取钨酸钠51g,溶于蒸馏水400ml中,加入85%浓磷酸37ml,加入浓盐酸20ml,回流煮沸2小时,冷却后加入硫酸锂38g溶解, 最后加蒸馏水定容至1000ml,保存备用。
(3)缓冲液的制备:乙酸钠70g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.5~PH5.7,保存备用。
(4)将磷钨酸试剂与缓冲溶液混合:将第(2)步和第(3)步制备的磷钨酸试剂与缓冲溶液按1:1比例混合均匀,得到磷钨酸缓冲溶液。
(5)将第(1)步和第(4)制备的氯化汞溶液0.5ml和磷钨酸缓冲溶液2ml混合均匀制成2.5ml的混合液,将该混合液无菌封装到10ml的安瓿瓶中,得到一支***尿液检测试剂。
(6)重复(5)依次完成1000支***尿液检测试剂的制备。
实施例3:制备再一种***尿液检测试剂1000支
(1)氯化锌溶液制备:按浓度0.1mol/L 的要求称取氯化锌溶于蒸馏水后定容至500ml备用。
(2)磷钨酸试剂的制备:称取钨酸钠58g,溶于蒸馏水520ml中,加入85%浓磷酸40ml,加入浓盐酸30ml,回流煮沸2小时,冷却后加入硫酸锂40g溶解, 最后加蒸馏水定容至1000ml,保存备用。
(3)缓冲液的制备:乙酸钠65g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5~PH5.3,保存备用。
(4)将磷钨酸试剂与缓冲溶液混合:将第(2)步和第(3)步制备的磷钨酸试剂与缓冲溶液按1:1比例混合均匀,得到磷钨酸缓冲溶液。
(5)将第(1)步和第(4)制备的氯化锌溶液0.5ml和磷钨酸缓冲溶液2ml混合均匀制成2.5ml的混合液,将该混合液无菌封装到10ml的安瓿瓶中,得到一支***尿液检测试剂。
(6)重复(5)依次完成1000支***尿液检测试剂的制备。
实施例4:制备再一种***尿液检测试剂1000支
(1)氯化锌溶液制备:按浓度0.5mol/L 的要求称取氯化锌溶于蒸馏水后定容至500ml备用。
(2)磷钨酸试剂的制备:称取钨酸钠40g,溶于蒸馏水650ml中,加入85%浓磷酸50ml,加入浓盐酸50ml,回流煮沸2小时,冷却后加入硫酸锂55g溶解, 最后加蒸馏水定容至1000ml,保存备用。
(3)缓冲液的制备:乙酸钠95g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.7~PH6,保存备用。
(4)将磷钨酸试剂与缓冲溶液混合:将第(2)步和第(3)步制备的磷钨酸试剂与缓冲溶液按1:1比例混合均匀,得到磷钨酸缓冲溶液。
(5)将第(1)步和第(4)制备的氯化锌溶液0.5ml和磷钨酸缓冲溶液2ml混合均匀制成2.5ml的混合液,将该混合液无菌封装到10ml的安瓿瓶中,得到一支***尿液检测试剂。
(6)重复(5)依次完成1000支***尿液检测试剂的制备。
实施例5:本发明的宫颈尿液癌检测试剂与其它***检测方法的比较
1.试验对象:
选取妇产科门诊就诊患者共378名女性受试者,年龄25-52岁。入选标准:有性生活史,非妊娠期、哺乳期和月经期,无恶性肿瘤史,无子宫切除病史,无宫颈手术治疗史。所有受试者均签署知情同意书。
2.检测方法:
(1)本发明的***检测试剂按照上述实施例1的步骤进行制备。
(2)液基细胞学检查方法:擦去宫颈表面黏液,采用专用的宫颈细胞刷伸入宫颈管内1 cm处按顺时针方向旋转4~6周后取出,收集宫颈细胞刷上的细胞,保存于装有细胞保存液的专用小瓶中,将保存液中的细胞采用自然沉淀法制成分布均匀的巴氏涂片,采用TBS分级诊断标准阅片方法进行阅片。根据液基细胞检查结果判定是否为***阳性。
(3)病理活检:对于所有受试者进行宫颈多点活检或颈管搔刮,取组织做病理检查,诊断是否患有***。
3.结果收集和数据处理:
全部受试者都分别同时使用本发明的***尿液检测试剂进行检测,得到检测结果1,采用液基细胞学检查方法进行检测,得到检测结果2,采用病理活检检测,得到检测结果3,并对检测结果进行比较,同时再计算敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值等参数值进行比较。其中,敏感性=真阳性/(真阳性+假阴性),特异性=真阴性/(假阳性+真阴性),准确性=(真阳性+真阴性)/总人数,阳性预测值=真阳性/(真阳性+假阳性),阴性预测值=真阴性/(假阴性+真阴性)。***(+)标示为***检测呈阳性,***(-)标示为***检测呈阴性。
共有378名受试者参与本次筛查,三种检测方法得到的检测结果显示于表1,检测结果的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值显示于表2。
表1. 不同检测方法与病理检查结果的比较
表2. 不同检测结果各项指标的比较
同时结合表1和表2可以看出,本发明通过巯基检测尿液中特异性标志物来诊断***的方法的各项检测指标都要优于液基细胞学检查方法,说明本发明的尿液检测试剂特异性强,准确率高,可作为有效的***筛查试剂。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种***尿液检测试剂,其特征在于,包括有含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合液,所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液、磷钨酸试剂以及缓冲溶液的混合比例是0.5:1:1;所述含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的浓度为0.05mol~0.5mol/L,所述磷钨酸试剂包含下列组份含量的水溶液:钨酸钠40g~58g/380ml~650ml、浓磷酸85%/30ml~50ml、浓盐酸20ml~50ml、硫酸锂30g~55g,所述缓冲溶液为乙酸/乙酸钠缓冲溶液,所述缓冲溶液的PH值为PH5~PH6。
2.如权利要求1所述的***尿液检测试剂,其特征在于,所述含锌离子化合物溶液为氯化锌溶液,所述含汞离子化合物溶液为氯化汞溶液。
3.如权利要求2所述的***尿液检测试剂,其特征在于,所述氯化汞溶液的浓度为0.05mol/L;所述钨酸钠45g/380ml、浓磷酸85%/30ml、浓盐酸30ml、硫酸锂30g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠82.3g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.3~PH5.5的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
4.如权利要求2所述的***尿液检测试剂,其特征在于,所述氯化汞溶液的浓度为0.08mol/L;所述钨酸钠51g/400ml、浓磷酸85%/37ml、浓盐酸20ml、硫酸锂38g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠70g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.5~PH5.7的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
5.如权利要求2所述的***尿液检测试剂,其特征在于,所述氯化锌溶液的浓度为0.1mol/L;所述钨酸钠58g/520ml、浓磷酸85%/40ml、浓盐酸30ml、硫酸锂40g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠65g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5~PH5.3的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
6.如权利要求2所述的***尿液检测试剂,其特征在于,所述氯化锌溶液的浓度为0.5mol/L;所述钨酸钠40g/650ml、浓磷酸85%/50ml、浓盐酸50ml、硫酸锂55g,最后加蒸馏水定容至1000ml;所述乙酸钠95g/1000ml、加入乙酸调PH值至PH5.7~PH6的乙酸/乙酸钠缓冲溶液。
7.一种如权利要求1或2所述的***尿液检测试剂的制备方法,其特征在于,包括:
(1)含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液的制备:按浓度0.05mol~0.5mol/L的要求称取含锌离子化合物或含汞离子化合物溶于蒸馏水后备用;
(2)磷钨酸试剂的制备:称取钨酸钠40g~58g,溶于蒸馏水500ml~650ml中,加入85%浓磷酸30ml~50ml,加入浓盐酸30ml~50ml,回流2小时~4小时,冷却后定容至1000ml,最后加入硫酸锂30g~55g, 保存备用;
(3)缓冲溶液的制备:即取65g~82.3g乙酸钠溶入1000ml的水中,用乙酸调PH值至PH 5到PH6;
(4)将磷钨酸试剂与缓冲溶液混合:将第(2)步和第(3)步制备的磷钨酸试剂与缓冲溶液按1:1比例混合均匀,得到磷钨酸缓冲溶液;
(5)将第(1)步和第(4)制备的含锌离子化合物溶液或者含汞离子化合物溶液0.5ml和磷钨酸缓冲溶液2ml混合均匀制成2.5ml的混合液,将该混合液无菌封装到10ml的安瓿瓶中。
8.如权利要求1至6中任意一项所述的***尿液检测试剂的应用,其特征在于,所述***尿液检测试剂应用于***的筛查和辅助诊断方面。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610452206.7A CN106468715A (zh) | 2016-06-21 | 2016-06-21 | 一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610452206.7A CN106468715A (zh) | 2016-06-21 | 2016-06-21 | 一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106468715A true CN106468715A (zh) | 2017-03-01 |
Family
ID=58229972
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610452206.7A Pending CN106468715A (zh) | 2016-06-21 | 2016-06-21 | 一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106468715A (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110006884A (zh) * | 2019-04-08 | 2019-07-12 | 深圳华创生物医药科技有限公司 | 一种尿液巯基化合物无汞检测试纸条及制备方法 |
CN110927156A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-03-27 | 欧迪玛(湖北)生物科技有限公司 | 一种***尿液检测试剂盒及其制备方法 |
CN111830023A (zh) * | 2019-08-19 | 2020-10-27 | 杭州爱光医疗器械有限公司 | 巯基化合物检测试剂、检测试纸、试剂盒、试纸盒及其制备方法 |
CN114441523A (zh) * | 2022-02-10 | 2022-05-06 | 梅宗泉 | 尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN2602374Y (zh) * | 2003-02-26 | 2004-02-04 | 林根春 | 子宫癌快速自检试剂盒 |
CN101539553A (zh) * | 2009-04-24 | 2009-09-23 | 上海海洋大学 | 一种监测易变质低温流通货品货架寿命的方法 |
CN101661002A (zh) * | 2009-09-25 | 2010-03-03 | 福建农林大学 | 一种水体总酚测定试剂及其制备方法和使用 |
CN202092960U (zh) * | 2011-05-17 | 2011-12-28 | 李志华 | ***快检试剂盒 |
CN103076425A (zh) * | 2013-01-08 | 2013-05-01 | 新疆奇康哈博维药有限公司 | 一种破布木果的质量检测方法 |
CN103424402A (zh) * | 2013-07-02 | 2013-12-04 | 福建省明溪海天蓝波生物技术有限公司 | 一种体液巯基检测试剂盒 |
CN104181155A (zh) * | 2014-08-10 | 2014-12-03 | 成都煦华生物科技有限公司 | 一种试剂盒及其制备方法 |
CN105115966A (zh) * | 2015-08-18 | 2015-12-02 | 江苏东博生物医药有限公司 | 尿液中巯基类化合物检测试剂盒及制备方法和应用 |
-
2016
- 2016-06-21 CN CN201610452206.7A patent/CN106468715A/zh active Pending
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN2602374Y (zh) * | 2003-02-26 | 2004-02-04 | 林根春 | 子宫癌快速自检试剂盒 |
CN101539553A (zh) * | 2009-04-24 | 2009-09-23 | 上海海洋大学 | 一种监测易变质低温流通货品货架寿命的方法 |
CN101661002A (zh) * | 2009-09-25 | 2010-03-03 | 福建农林大学 | 一种水体总酚测定试剂及其制备方法和使用 |
CN202092960U (zh) * | 2011-05-17 | 2011-12-28 | 李志华 | ***快检试剂盒 |
CN103076425A (zh) * | 2013-01-08 | 2013-05-01 | 新疆奇康哈博维药有限公司 | 一种破布木果的质量检测方法 |
CN103424402A (zh) * | 2013-07-02 | 2013-12-04 | 福建省明溪海天蓝波生物技术有限公司 | 一种体液巯基检测试剂盒 |
CN104181155A (zh) * | 2014-08-10 | 2014-12-03 | 成都煦华生物科技有限公司 | 一种试剂盒及其制备方法 |
CN105115966A (zh) * | 2015-08-18 | 2015-12-02 | 江苏东博生物医药有限公司 | 尿液中巯基类化合物检测试剂盒及制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
余忠谊 邹学贤主编: "《分析化学》", 30 June 1990 * |
刘健,等: "检测尿中巯基筛诊***与癌前病变的临床意义", 《临床肿瘤学杂志》 * |
林根春,等: "测定尿中巯基物对恶性肿瘤的诊断", 《福建医学院学报》 * |
赵世民等主编: "《肾素-血管紧张素***与现代医学》", 31 December 1995 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110006884A (zh) * | 2019-04-08 | 2019-07-12 | 深圳华创生物医药科技有限公司 | 一种尿液巯基化合物无汞检测试纸条及制备方法 |
CN111830023A (zh) * | 2019-08-19 | 2020-10-27 | 杭州爱光医疗器械有限公司 | 巯基化合物检测试剂、检测试纸、试剂盒、试纸盒及其制备方法 |
CN110927156A (zh) * | 2019-12-26 | 2020-03-27 | 欧迪玛(湖北)生物科技有限公司 | 一种***尿液检测试剂盒及其制备方法 |
CN114441523A (zh) * | 2022-02-10 | 2022-05-06 | 梅宗泉 | 尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Jeronimo et al. | ATL | |
Deguillaume et al. | Effect of endocervical inflammation on days to conception in dairy cows | |
CN106468715A (zh) | 一种***尿液检测试剂及其制备方法和应用 | |
Kerkar et al. | Screening for cervical cancer: an overview | |
Robboy et al. | Dysplasia and cytologic findings in 4,589 young women enrolled in diethylstilbestrol-adenosis (DESAD) project | |
Lazcano-Ponce et al. | Recommendations for cervical cancer screening programs in developing countries: The need for equity and technological development | |
Li et al. | Neonatal TSH screening: is it a sensitive and reliable tool for monitoring iodine status in populations? | |
Tang et al. | Oral HPV16 DNA as a screening tool to detect early oropharyngeal squamous cell carcinoma | |
Cremer et al. | Adequacy of visual inspection with acetic acid in women of advancing age | |
Ngelangel et al. | Acetic-acid guided visual inspection vs. cytology-based screening for cervical cancer in the Philippines | |
Shafi et al. | Colposcopy: a practical guide | |
Wong et al. | Can human papillomavirus DNA self-sampling be an acceptable and reliable option for cervical cancer screening in female sex workers? | |
Choi et al. | A case of bilateral submandibular gland mucoceles in a 16-month-old child | |
de Albuquerque Neto et al. | Expression of p53 protein in the endometrial polyp in postmenopausal women | |
John et al. | Avoiding negative appendectomies in rural surgical practice: is C-reactive protein estimation useful as a diagnostic tool? | |
Geva et al. | The VI-SENSE–vaginal discharge self-test to facilitate management of vaginal symptoms | |
Kumar et al. | Evaluation of urinary abnormalities in urolithiasis patients: A study from North India | |
Prakash et al. | Biochemical analysis of Liver Function Test in different trimesters of Pregnancy | |
Arrigoni et al. | Pattern analysis of serum alpha-fetoprotein in the early diagnosis of hepatocellular carcinoma in liver cirrhosis | |
Nasreen et al. | Evaluation of conventional pap test for cervical intraepithelial lesions and cancer in a tertiary hospital of Bangladesh | |
Boyd et al. | Cervical screening for carcinoma: a comparison of cytological and enzyme (6-phosphogluconate dehydrogenase) methods and clinical findings. | |
Nikibakhsh et al. | Normal values for random urinary calcium to creatinine ratio in Iranian children | |
Manandhar et al. | Thyroid profile in infertile women | |
CN108760733A (zh) | 一种***尿液检测试剂及其应用 | |
CN1793865A (zh) | 白带ph、胺试验联合检测试剂 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170301 |