CN106117185B - 2,4‑二含氮基团取代嘧啶类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

2,4‑二含氮基团取代嘧啶类化合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种2,4‑二含氮基团取代嘧啶类化合物及其制备方法和应用，属于药物化学技术领域。该类具有通式I结构特征的2,4‑二含氮基团取代嘧啶类化合物，能够选择性抑制突变型上皮生长因子受体(EGFR)的活性，包括单点突变T790M和双点突变如L858R/T790M，ex19del/T790M。同时对EGFR单点激活突变如L858R和ex19del亦有抑制活性。这类化合物对野生型EGFR抑制作用弱，具有非常高的选择性。有潜力成为用作EGFR突变的恶性肿瘤，尤其是携带T790M EGFR突变的非小细胞肺癌(NSCLC)治疗的药物，有较大的应用价值。

Description

2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及药物化学技术领域，特别是涉及一种2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor，EGFR)家族的受体酪氨酸激酶(Tyrosine Kinase,TK)，包括EGFR(HER1),HER2(ErbB2),HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4)，参与调节多种发育，代谢和生理过程。EGFR受体激活使EGFR的胞内结构域磷酸化，导致Ras/有丝***原活化蛋白激酶信号通路﹑PI3K/AKT通路和信号转导与转录激活因子的信号转导通路的激活(J ClinOncol 2008；26:1742–1751)。
在肿瘤细胞中，EGFR基因突变和EGFR蛋白的表达增加，使EGFR TK激活，促进肿瘤细胞生存、增殖、侵袭和转移。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，如厄洛替尼，吉非替尼和埃克替尼，是可逆的竞争性抑制剂，能够竞争性的结合酪氨酸激酶结构域中受体腺苷三磷酸的结合位点。这些药物在EGFR基因激活突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者中有显著的治疗效果。表皮生长因子受体基因的序列分析表明，90％EGFR激活突变为外显子19的缺失突变和外显子21的L858R突变(J ClinOncol 2008；26:1742–1751)。在这些EGFR激活突变的NSCLC病人中，厄洛替尼和吉非替尼的反应率大约为70％(Clin Cancer Res2006；12:3908–3914)。携带EGFR激活突变的NSCLC占西方人种的10-15％和亚洲人种的30-40％(Nat Rev Cancer 2010；10：760-774；Oncogene 2009；28(Suppl 1):S24–S31.)。且此类第一代可逆性﹑竞争性的EGFR抑制剂由于同时抑制皮肤和胃肠道野生型EGFR，会引起皮疹和腹泻等副作用(Nat Clin Pract Oncol 2008；5：268-278；CurrOncol2011；18:126–138)。
这些携带EGFR激活突变的NSCLC患者在服用吉非替尼、厄洛替尼或埃克替尼6-14个月后，病人病情恶化(N Engl J Med 2010；362：2380-2388；Lancet Oncol 2012；13:239-246)。50-60％的获得性耐药性病人发生了第二点T790M耐药突变。野生型EGFR基因20外显子第790个氨基酸位点是苏氨酸(T)，而T790M突变是EGFR基因20外显子第790位点由一个庞大体积的蛋氨酸(M)替代了苏氨酸(T)。T790M突变改变了ATP的亲和性，导致第一代的EGFR-TKI(酪氨酸激酶抑制剂)不能有效阻止信号，从而产生了耐药性(N Eng J Med 2005；352:786-792；PLoS Med 2005；2:e73；Oncogene 2009；28(Suppl 1):S24–S31.)。
第二代EGFR抑制剂如Dacomitinib、阿法替尼、Neratinib、XL647等，为不可逆性EGFR-TKI。能够非特异性抑制野生型EGFR，激活型L858R突变以及耐药型T790M突变。虽然这类化合物对EGFR T790M突变型有活性，但临床中未能克服T790M突变产生的耐药性(LancetOncol 2012；13:528-538；J Clin Oncol 2013；31:3335-3341)。又由于其非选择性抑制野生型EGFR，导致产生剂量限制毒性(DLT)，因此，这些药物在体内不能达到有效抑制T790M的浓度。
第三代EGFR抑制剂能够选择性抑制T790M耐药突变，并对野生型EGFR抑制作用小。如Rociletinib(CO-1686)﹑AZD9291和HM61713等均是选择性不可逆T790M EGFR抑制剂(JMed Chem2014；57:8249-8267；Cancer Discov 2014；4:1046-1061；Cancer Discov 2013；3:1404-1405；Mol Cancer Ther 2014；13:1468-1479；)。Osimertinib(AZD9291)，和Rociletinib(CO-1686)1临床用于T790M导致的EGFR-TKI耐药病人展现出了良好的安全性和抗肿瘤活性(N Engl J Med.2015；372:1689-1699)。
由于第三代EGFR抑制剂选择性抑制突变型EGFR，而对野生型EGFR抑制作用小，在临床前研究中显示出很强的抗肿瘤活性同时，在诸如皮疹和腹泻等毒性方面剂量限制毒性(DLT)比第一﹑二代EGFR抑制剂明显降低。
发明内容
基于此，有必要针对上述问题，提供一类化合物，该类化合物能够选择性抑制T790M EGFR,包括单点突变T790M和双点突变如L858R/T790M，ex19del/T790M等。同时对EGFR单点激活突变如L858R和ex19del也有抑制活性，并且，这类化合物对野生型EGFR抑制作用弱，即具有很好的选择性，不会产生剂量限制毒性的问题。
一种式Ⅰ所示的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体：
其中：X1和X2之间的虚线表示X1和X2之间可选单键或双键；
R1选自：H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基取代的甲基，卤素取代的C1-C4烷基，羟基取代的C1-C4烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基,C1-C3烷基胺基取代C1-C4烷基，卤素，硝基，羟基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，C1-C6亚砜基，C1-C6砜基，氰基，氨基，C1-C3烷基取代的胺基，酯基，酰基，酰胺基，羧基；
R2，R3分别独立选自：H，C1-C6烷基；
R4选自：H，OH，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，羟基取代的C1-C4烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷氧基；
R5选自以下基团：
R15选自：H，C1-C6烷基；
R16，R17分别独立选自：H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基；
Z选自：C，N或O，且当Z为O时，R8不存在；
m选自：0，1或2；
n选自：1，2或3；
p选自：1，2，3，4，5或6；
R6，R7，R8分别独立选自：H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基取代的甲基，苯甲基，苯基，酰基，甲磺基，卤素取代的C1-C4烷基，羟基取代的C1-C4烷基，C1-C3烷氧基的取代C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基,C1-C3烷基胺基取代C1-C4烷基，氨基，C1-C3烷基取代的胺基，羟基，C1-C6烷氧基；
X1选自：N，C＝O或C-R9；
R9选自：H，C1-C6烷基，卤素取代的C1-C6烷基，含O,N,S杂原子的C1-C6烷基，卤素，氰基，氨基；
X2选自：N，N-R10，C-R10；
R10选自：H，卤素，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基甲基，卤素取代的C1-C6烷基，含O,N,S杂原子的C1-C6烷基；
X3，X4，X5，X6分别独立选自：N，C-R11；
R11选自：H，C1-C6烷基，羟基取代的C1-C4烷氧基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷氧基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基甲基，卤素取代的C1-C4烷基，羟基取代的C1-C4烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基,C1-C3烷基胺基取代的C1-C4烷基,卤素，硝基，羟基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，C1-C6亚砜基，C1-C6砜基，氰基，氨基，C1-C3烷基取代的胺基，酯基，酰基，酰胺基，C1-C3烷基取代的酰胺基，羧基；
G选自如下基团：
R12，R13分别独立选自：H，C1-C6烷基；
R14选自：H，C1-C6烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基,C1-C3烷基胺基取代的C1-C4烷基，杂环取代的C1-C4烷基；并且，
当R1选自：H，卤素或氰基；R4选自：C1-C6烷氧基；G选自：R10选自：H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，卤素取代的C1-C6烷基时；R11不为：H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，卤素取代的C1-C4烷基，或C1-C6砜基；
或者
当R1选自：H，卤素或氰基；R4选自：C1-C6烷氧基；G选自：R11选自：H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，卤素取代的C1-C4烷基，C1-C6砜基时，R10不为H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基，或卤素取代的C1-C6烷基。
在其中一些实施例中，选自如下式II或式III所示化合物：
其中：X1选自：N，C-R9；
X2，X3，X4，X5，X6如上所述；
R1，R2，R3，R4，R5，R9，G如上所述。
在其中一些实施例中，X3，X5，X6分别独立选自：N，CH；X4选自：C-R11；R11如上所述。
在其中一些实施例中，选自如下式II所示化合物：
其中：X2选自：N-R10；
R10选自：C1-C6烷基，C2-C6烯基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基甲基；
X3，X5，X6分别独立选自：CH；
X4选自：C-R11；
R11选自：C1-C6烷氧基，卤素，氰基。
R1，R2，R3，R4，R5，G如上所述。
在其中一些实施例中，选自如下式III所示化合物：
其中：X1，X2选自：CH；
X3选自：N；
X4如权利要求1所述；
X5，X6选自：CH；
R1，R2，R3，R4，R5，R9，G如上所述。
在其中一些实施例中，X1，X2分别独立选自：C或N-R10；
R10选自：C1-C6烷基，C2-C6烯基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基甲基；
X3选自CH或N；
X5，X6分别独立选自：CH；
X4选自：C-R11；
R11选自：C1-C6烷氧基，卤素，氰基；
R1，R2，R3选自：H；
R4选自：甲氧基；
R5选自如下基团：
G选自如下基团：
在其中一些实施例中，R1选自：H,F,Cl,Br,甲基，三氟甲基，甲氧基，氰基，羟基，二甲胺基，酰胺基；
R2，R3选自：H；
R4选自：H，甲氧基，乙氧基，甲基，乙基，OH，甲氧基乙氧基；
R12，R13选自：H；
R14选自：H，C1-C6烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基,C1-C3烷基胺基取代的C1-C4烷基，杂环取代的C1-C4烷基。
在其中一些实施例中，R5选自如下基团：
本发明还公开了上述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物的制备方法，包括以下步骤：
将中间体101中的硝基还原得到中间体102，并在酸性条件下与硝酸盐反应得到中间体103，中间体103中的氨基被溴替换得到中间体104，采用R5氮上连有氢的中间体与中间体104反应，得到中间体105，备用；或将中间体103与R5氮上连有氢的中间体反应，生成中间体106，备用；
反应线路如下：
将中间体201与中间体202或203或301反应，分别得到中间体204，205，或302，用氨水取代中间体204上的氯，得到中间体205，将中间体302中的硫氧化得到中间体303，中间体303与氨水反应得到中间体205，中间体205备用；
反应线路如下：
将中间体204与中间体103反应，得到中间体401，采用R5氮上连有氢的化合物与中间体401反应，得到中间体402；或将中间体204与中间体106反应,得到中间体402；或将中间体205与中间体105反应，得到中间体402，再将中间体402的硝基还原，得到中间体403，备用；
反应路线如下：
将中间体403与含有G基团的中间体反应，反应路线如下：
即得目标化合物。
本发明还公开了上述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物的制备方法，包括以下步骤：
将中间体101中的硝基还原得到中间体102，并在酸性条件下与硝酸盐反应得到中间体103，中间体103中的氨基被溴替换得到中间体104，采用R5氮上连有氢的中间体与中间体104反应，得到中间体105，备用；中间体103也可与R5氮上连有氢的化合物反应，生成中间体106，备用；
反应线路如下：
将中间体501在N,N'-羰基二咪唑(CDI)存在的条件下关环，得到中间体502，中间体502与中间体202反应，得到中间体503，以氨水中的氨基将中间体503中的氯取代，得到中间体504，将该中间体504与中间体105反应，得到中间体505；或将中间体503与中间体106反应，得到中间体505；或将中间体503与中间体103反应，所获得的产物中的氟用带有氨基的R5反应得到中间体505；将中间体505的硝基还原，得到中间体506，备用；
反应路线如下：
将中间体506与含有G基团的中间体反应，反应路线如下：
即得目标化合物。
本发明还公开了上述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体在制备预防和***药物中的应用。
在其中一些实施例中，所述肿瘤为实体肿瘤。
在其中一些实施例中，所述肿瘤为EGFR基因突变的恶性肿瘤。
在其中一些实施例中，所述肿瘤为携带T790M EGFR突变的非小细胞肺癌(NSCLC)。
本发明还公开了一种防治肿瘤的药物组合物，包括作为活性成份的上述2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，以及药学上可接受的载体。
在其中一些实施例中，所述肿瘤为携带T790M EGFR突变的非小细胞肺癌(NSCLC)。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明的一种2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物，是一系列新的化合物，这类化合物选择性抑制T790M EGFR,包括单点突变T790M和双点突变如L858R/T790M，ex19del/T790M。同时对EGFR单点激活突变如L858R和ex19del也有抑制活性。
并且，这类化合物不但对L858R/T790M EGFR突变的细胞如H1975有很强的抗细胞增殖的活性，而且对野生型EGFR细胞如LOVO及H358的抗细胞增殖的活性弱，具有高度的选择性。
该类2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物具有潜力成为用作EGFR突变的恶性肿瘤，尤其是携带T790M EGFR突变的NSCLC治疗的药物。
附图说明
图1为实验例中化合物91在H1975移植肿瘤小鼠口服给药(30mg/kg)后血浆和肿瘤组织药物浓度药时曲线图；
图2为实验例中化合物91口服给药抑制携带T790突变的H1975移植肿瘤EGFR磷酸化示意图；
图3为实验例中化合物20、50、91、118抑制携带T790突变的H1975移植肿瘤生长量效关系(肿瘤体积变化)；
图4为实验例中化合物50剂量依赖性抑制携带T790突变的H1975移植肿瘤生长量效关系；
图5为实验例中化合物91剂量依赖性抑制携带T790突变的H1975移植肿瘤生长量效关系。
具体实施方式
以下结合具体实施例和附图对本发明做进一步的解释说明，但并不对本发明造成任何限制。
本文所用术语“烷基”意指包括具有特定碳原子数目的支链的和直链的饱和脂肪烃基。例如，“C1-C6烷基”中“C1-C6”的定义包括以直链或支链排列的具有1、2、3、4、5或6个碳原子的基团。例如，“C1-C6烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基。
术语“环烷基”指具有特定碳原子数目的单环饱和脂肪烃基。例如“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2,2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。
术语“烷氧基”指烷基与氧直接连接的基团，如甲氧基，乙氧基等。
术语“烷硫基”指烷基与硫直接连接的基团。
术语“C1-C3烷基胺基取代C1-C4烷基”指的是具有1、2、3个碳原子的烷基与氮原子相连后其氮原子再与具有1、2、3、4个碳原子的烷基与氮原子相连的基团，例如甲胺基甲基，甲胺基乙基，二甲胺基甲基等。
术语“杂环”包括饱和的含有杂原子的环烷基和杂芳基，其中杂原子可以选自氮、硫和氧及氮、硫、磷的任何氧化态形式，优选含N的饱和杂环烷基，如哌啶等。
术语“取代的”是指用指定取代基的基团置换特定结构中的氢基。
本发明包括式Ⅰ-Ⅲ化合物的游离形式，也包括其药学上可接受的盐及立体异构体。可通过常规化学方法自含有碱性部分或酸性部分的本发明化合物合成本发明的药学上可接受的盐。通常，通过离子交换色谱或通过游离碱和化学计算量或过量的所需盐形式的无机或有机酸在适当溶剂或多种溶剂的组合中反应制备碱性化合物的盐。类似的，通过和适当的无机或有机碱反应形成酸性化合物的盐。
因此，本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过碱性本发明化合物和无机或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规的无毒盐包括自无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等制备的盐，也包括自有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2一乙酰氧基一苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等制备的盐。
如果本发明化合物为酸性的，则适当的“药学上可接受的盐”指通过药学上可接受的无毒碱包括无机碱及有机碱制备的盐。得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。得自药学上可接受的有机无毒碱的盐，所述碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，取代的胺包括天然存在的取代胺、环状胺及碱性离子交换树脂例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N'－二苄基乙二胺、二乙胺、2一二乙基氨基乙醇、2一二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N一乙基吗啉、N一乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、羟钴胺、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪,哌啶、呱咤、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。
除在文献中已知的或在实验程序中例证的标准方法外，可采用如下合成方案(方案1-6)中的方法制备本发明化合物。结合下述的合成方案，能够对本发明中所述的化合物以及合成方法进行更好的理解。所述的合成方案描述了可以用于制备本发明中所述的化合物的方法，所述的方法仅仅是为说明目的的说明性方案描述，并不构成对本发明所具有的范围的限制。
方案一
方案二
方案三
方案四
方案五
方案六
方案七
实施例1：中间体103，104，105和106的制备(按照方案一线路制备)
步骤1a:4-氟-2-甲氧基苯胺(4-fluoro-2-methoxyaniline)(中间体102)的制备:将2-甲氧基-4-氟硝基苯(中间体101)(20克，0.12摩尔，1.0当量)，氯化铵(13克，0.24摩尔，2.0当量)和水(50毫升)溶于乙醇(200毫升)，升温到55℃后，往里分批加入铁粉(13克，0.24摩尔，2.0当量)。升温到85℃反应两个小时后，冷却到室温，过滤，旋干溶剂。将残留物溶于乙酸乙酯，用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干溶剂得到浅绿色产物4-氟-2-甲氧基苯胺(15克，收率：91％)。LCMS(ESI):m/z142[M+H]+。
步骤1b:4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(4-fluoro-2-methoxy-5-nitroaniline)(中间体103)的制备:冰浴条件下，往浓硫酸(150毫升)中滴加4-氟-2-甲氧基苯胺(中间体102)(15克，106.4毫摩尔，1.0当量)，滴加过程要控制温度在0℃左右。当形成的固体完全溶解后，往里分批加入硝酸钾(11克，106.4毫摩尔，1.0当量)，在此条件下反应一小时。将反应液倒入冰水中，氢氧化钠调节pH到碱性，析出大量固体，过滤，水洗，石油醚洗，晾干得到棕黄色固体4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(18克，收率：77％)。LCMS(ESI):m/z187[M+H]+。
步骤1c：1-溴-4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯(1-bromo-4-fluoro-2-methoxy-5-nitrobenzene)(中间体104)的制备:在氮气氛围下，将溴化铜(3.568克，16毫摩尔，1.5当量)和亚硝酸叔丁酯(3.399克,33毫摩尔，3当量)混合于乙腈(250毫升)，升温至50℃，然后将化合物4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(103)(2克，11毫摩尔，1当量)的乙腈(20毫升)溶液滴加至体系中，再搅拌反应2.5小时。反应冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用水洗，盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到棕色油状物。油状物用硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)，得到黄色固体1-溴-4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯(1.87克，收率：69.57％)。
步骤1d：N1-(4-溴-5-甲氧基-2-硝基苯基)-N1,N2,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺(N1-(4-bromo-5-methoxy-2-nitrophenyl)-N1,N2,N2-trimethylethane-1,2-diamine)(中间体105-A-5)的制备:将化合物1-溴-4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯(中间体104)(1.87克，7.48毫摩尔，1当量),N,N-二异丙基乙基胺(2.41克，17.8毫摩尔，2.5当量)和N,N,N’-三甲基乙二胺(1.146克，11.22毫摩尔，1.5当量)的乙醇(50毫升)溶液加热至回流，搅拌反应16小时。反应结束后，冷却至室温，二氯甲烷萃取，有机相用水洗和盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到红色油状物N1-(4-溴-5-甲氧基-2-硝基苯基)-N1,N2,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺(2.3克，粗品),直接用于下一步反应。
步骤1e：N1-(2-(二甲胺基)乙基)-5-甲氧基-N1-甲基-2-硝基苯基)-1，4-二胺(N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methyl-2-nitrobenzene-1,4-diamine)(中间体106-A-11)的制备：将化合物4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(中间体103)(2克，10.75毫摩尔，1当量)，DIPEA (2.77克，21.5毫摩尔，2当量)和N,N,N-三甲基乙二胺(1.644克，16.125毫摩尔，1.5当量)混合于50毫升四氢呋喃中。混合物在回流的条件下搅拌反应3天。反应结束后，冷却至室温，用二氯甲烷和水萃取，有机相用水洗，盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇/氨水＝100/1/0.01)纯化，得到红色油状物N1-(2-(二甲胺基)乙基)-5-甲氧基-N1-甲基-2-硝基苯基)-1，4-二胺(1.8克，粗品)。
实施例2：中间体204的制备(按照方案二线路制备)
1-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(1-(2-chloro-5-methoxypyrimidin-4-yl)-1H-indole)(中间体204-6)的制备:将吲哚(201-6)(1克，8.55毫摩尔，1.0当量)溶于四氢呋喃(30毫升)，氮气保护，零度条件下，往里分批加入叔丁醇钾(1.44克，12.82毫摩尔，1.5当量)。室温条件下，反应一小时。再次冷却到室温，往里滴加2,4-二氯-5-甲氧基嘧啶(202-6)(2.3克，12.82毫摩尔，1.5当量)溶于四氢呋喃(20毫升)溶液，滴加完后，升到室温反应过夜。将其倒入水中，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，石油醚洗涤得到米色固体1-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(2.2克，收率：100％)。LCMS(ESI):m/z 260[M+H]+。
下列中间体(204-8，204-10，204-11)可按上述合成中间体204-6的方法制备，仅是将其中的中间体201-6及202-6替换为相应的中间体201和202。
中间体204-8的制备：吲哚(201-6)和2,4-二氯-5-甲基嘧啶(202-8)反应，制备得到1-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(1-(2-chloro-5-methyl-pyrimidin-4-yl)-1H-indole)(中间体204-8)。LCMS(ESI):m/z244[M+H]+。
中间体204-10的制备：吲哚(201-6)和2,4-二氯-N,N-二甲基嘧啶-5-胺(202-10)反应，制备得到2-氯-4-(1H-吲哚-1-基)-N,N-二甲基嘧啶-5-胺(2-chloro-4-(1H-indol-1-yl)-N,N-dimethylpyrimidin-5-amine)(中间体204-10)。LCMS(ESI):m/z273[M+H]+。
中间体204-11的制备：吲哚(201-6)和2,4-二氯-N-甲基嘧啶-5-胺(202-11)反应，制备得到2-氯-4-(1H-吲哚-1-基)-N-甲基嘧啶-5-胺(2-chloro-4-(1H-indol-1-yl)-N-methylpyrimidin-5-amine)(中间体204-11)。LCMS(ESI):m/z259[M+H]+。
实施例3：中间体205的制备(按照方案二线路或方案三线路制备)
中间体205可按三种方法制备，方法3-1，方法3-2和方法3-3，描述如下：
方法3-1(方案二线路):
4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-胺(4-(1H-indol-1-yl)-5-methoxypyrimidin-2-amine)(中间体205-6)的制备:把化合物1-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(中间体204-6)(1克，3.9毫摩尔，1.0当量)，氨水(2毫升)和N,N-二异丙基乙胺(1毫升)溶于N-甲基吡咯烷酮(10毫升)，在闷罐中，升温到110℃反应过夜。反应液冷却到室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干，残留物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂:石油醚/乙酸乙酯20/1至1/1)得到白色固体4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-胺(240毫克，收率：26％)。LCMS(ESI):m/z 241[M+H]+。
方法3-2(方案二线路):
4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(4-(1H-indol-1-yl)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-5)的制备：在室温下，将氢化钠(210毫克，7.0毫摩尔，5.0当量)加入到15毫升N-甲基吡咯烷酮，于冰水浴中冷却，加入吲哚(201-6)(410毫克，3.5毫摩尔，2.5当量)，于室温下搅拌1小时后，于冰浴中冷却，将2-氨基-4-氯-5-三氟甲基嘧啶(203-5)(279毫克，1.4毫摩尔，1.0当量)溶解于1毫升N-甲基吡咯烷酮，加入到上述混合物中，室温下搅拌1小时。加入水和乙酸乙酯，分液，干燥有机相，减压浓缩，经硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯4/1至1/1)，得到黄色固体4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(220毫克，收率：56％)。LCMS(ESI):m/z 279[M+H]+。
4-(5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺(4-(5-methoxy-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-20)的制备：将化合物5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶(201-20)(200毫克，1.35毫摩尔，1当量)，碳酸铯(877.5毫克，2.7毫摩尔，2当量)和2-氨基-4-氯嘧啶(203-20)(261毫克，2.025毫摩尔，1.5当量)混合于N-甲基吡咯烷酮(5毫升)。混合物加热至150℃搅拌反应2小时。反应结束后，冷却至室温，用水淬灭，过滤，滤渣用水洗，减压干燥得到灰色固体(300毫克，收率：92.13％)。LCMS(ESI):m/z 242[M+H]+。
4-(5-氟-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(4-(5-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-28)的制备:将5-氟吲哚(201-28)(500毫克，3.7毫摩尔，1.0当量)，2-氨基-4-氯嘧啶(203-28)(480毫克，5.1毫摩尔，1.0当量)和碳酸铯(2.4克，7.4毫摩尔，2.0当量)溶于NMP(50毫升)，150℃下反应1小时。冷却到室温，将其倒入水中，过滤，水洗，干燥得到粉红色固体4-(5-氟-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(500毫克，收率：59％)。LCMS(ESI):m/z229[M+H]+。
方法3-3(方案三线路):
4-(5-硝基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-氨基(4-(5-Nitro-indol-1-yl)-pyrimidin-2-ylamine)(中间体205-34)的制备:室温下将5-硝基-1H-吲哚(201-34)(3克，18.5毫摩尔)和4-氯-2-甲硫基-嘧啶(301-34)(2.98克，18.5毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(100毫升)，然后加入碳酸钾(5.1克，37毫摩尔)。加热到80℃反应过夜，然后加入水500毫升，直接抽滤，真空干燥，然后得到灰色固体1-(2-甲硫基-嘧啶-4-基)-5-硝基-1H-吲哚(302-34)(5.2克，收率98％)。LCMS(ESI):m/z 287[M+H]+。将化合物302-34(0.5克，1.7毫摩尔)溶于二氯甲烷(15毫升)，然后加入间氯过氧苯甲酸(0.3克，1.7毫摩尔)。常温下搅拌4小时，然后加入饱和碳酸钠水溶液20毫升，用二氯甲烷(20毫升)萃取3次，干燥浓缩之后得到黄色固体1-(2-甲硫亚砜基-嘧啶-4-基)-5-硝基-1H-吲哚(303-34(0.51克，收率98％)。LCMS(ESI):m/z 303[M+H]+。将化合物303-34(0.51克，1.69毫摩尔)溶于四氢呋喃(10毫升)，然后加入20％的氨水(2毫升)。封管下80℃反应过夜，加入20毫升水，用二氯甲烷(20毫升)萃取3次，浓缩干燥之后得到黄色固体4-(5-硝基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-氨基(205-34)(0.37克，收率99.5％)。LCMS(ESI):m/z 256[M+H]+。
4-(5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(4-(5-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-36)的制备:在氮气的氛围下，将化合物5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1H-吲哚(201-36)(800毫克，2.15毫摩尔，1.2当量)，2-甲硫基-4-氯嘧啶(301-34)(286毫克，1.79毫摩尔，1当量)，碳酸铯(1160毫克，3.57毫摩尔，2当量),Pd2(dba)3(77毫克，0.086毫摩尔，0.05当量)和Xantphos(91毫克，0.16毫摩尔，0.09当量)混合于20毫升甲苯中，在110℃下搅拌反应1小时。反应结束后，冷却至室温，减压浓缩，硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝20/1)，得到灰色固体5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(302-36)(980毫克，粗品)。LCMS(ESI):m/z 496[M+H]+。在氮气的氛围下和冰水浴中，将化合物302-36(240毫克，0.485毫摩尔，1当量)溶解于5毫升二氯甲烷中。然后将间氯过氧苯甲酸(118毫克，0.528毫摩尔，1.2当量)的二氯甲烷(2毫升)溶液滴加入其中。混合物在室温下反应30分钟。反应结束后，用饱和碳酸钠淬灭，二氯甲烷和水萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到灰色固体5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1-(2-甲基亚磺酰基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(303-36)(300毫克，粗品)。LCMS(ESI):m/z 512[M+H]+。在闷罐中，将化合物303-36(300毫克，0.587毫摩尔，1当量)和氨水(5毫升)溶解于10毫升四氢呋喃中。混合物在80℃下搅拌反应2小时。反应结束后，冷却至室温，减压浓缩，硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得到白色固体4-(5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-36)(200毫克，收率：73.53％)。LCMS(ESI):m/z 464[M+H]+。
4-(5-甲氧基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(4-(5-methoxy-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-27)的制备:在冰浴的条件下，将化合物5-甲氧基吲哚(201-27)(500毫克，3.4毫摩尔，1当量)溶解于N-甲基吡咯烷酮(5毫升)。然后加入氢化钠(272毫克，6.8毫摩尔，2当量)，混合物在室温下搅拌30分钟。将化合物2-甲硫基-4-氯嘧啶(301-15)(544毫克，3.4毫摩尔，1当量)滴加入体系中，再搅拌反应1小时。反应结束后，加水淬灭，过滤，滤渣用水洗，干燥，得到黄色固体甲氧基-1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(302-27)(1.02克，粗品)。LCMS(ESI):m/z 272[M+H]+。将化合物5-甲氧基-1-(2-甲硫基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(302-27)(500毫克，1.845毫摩尔，1当量)溶于二氯甲烷(20毫升)，氮气保护条件下，降温到0℃左右往里滴加间氯过氧苯甲酸(374.4毫克，1.845毫摩尔，1.2当量)溶于二氯甲烷(2毫升)。滴加完后，室温条件下反应1小时。反应液用碳酸钠水溶液洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得到黄色固体5-甲氧基-1-(2-甲基亚磺酰基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(303-27)(580毫克，粗品)。LCMS(ESI):m/z 288[M+H]+。把化合物5-甲氧基-1-(2-甲基亚磺酰基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(580毫克，2.02毫摩尔，1当量)和氨水(5毫升)溶于四氢呋喃(10毫升)，在闷罐中，升温到80℃反应2小时。反应液冷却到室温，旋干，硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝200/1)得到淡黄色固体4-(5-甲氧基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-27)(407毫克，收率：89.92％)。LCMS(ESI):m/z 241[M+H]+。
下列中间体(205-8，205-10)可按上述合成方法3-1中的中间体205-6的方法制备，仅是将其中的中间体204-6替换为相应的中间体204。
中间体205-8的制备：合成方法如实施例3中方法3-1中的中间体205-6的制备，仅是将其中1-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(204-6)替换为1-(2-氯-5-甲基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(204-8),制备得到4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲基嘧啶-2-胺(4-(1H-indol-1-yl)-5-methylpyrimidin-2-amine)(中间体205-8)。LCMS(ESI):m/z 225[M+H]+。
中间体205-10的制备：合成方法如实施例3中方法3-1中的中间体205-6的制备，仅是将其中1-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-1H-吲哚(204-10)替换为2-氯-4-(1H-吲哚-1-基)-N,N-二甲基嘧啶-5-胺(204-10),制备得到4-(1H-吲哚-1-基)-N5,N5-二甲基嘧啶-2,5-二胺(4-(1H-indol-1-yl)-N5,N5-dimethylpyrimidine-2,5-diamine)(中间体205-10)。LCMS(ESI):m/z254[M+H]+。
下列中间体(205-29，205-30，205-31，205-124)可按上述合成方法3-2中的中间体205-28的方法制备，仅是将其中中间体201-28和203-28替换为相应的中间体201和203。
中间体205-29的制备：合成方法如实施例3中方法3-2中的中间体205-28的制备，仅是将其中加入5-氟吲哚(201-28)替换为6-氟-1H-吲哚(201-29),将2-氨基-4-氯-5-三氟甲基嘧啶(203-5)替换为2-氨基-4-氯嘧啶(203-28)制备得到4-(6-氟-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(4-(6-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-29)。LCMS(ESI):m/z229[M+H]+。
中间体205-30的制备：合成方法如实施例3中方法3-2中的中间体205-28的制备，仅是将其中加入5-氟吲哚(201-28)替换为4-氟-1H-吲哚(201-30),将2-氨基-4-氯-5-三氟甲基嘧啶(203-5)替换为2-氨基-4-氯嘧啶(203-28)制备得到4-(4-氟-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(4-(4-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-30)。LCMS(ESI):m/z229[M+H]+。
中间体205-31的制备：合成方法如实施例3中方法3-2中的中间体205-28的制备，仅是将其中加入5-氟吲哚(201-28)替换为5-氯吲哚(201-31),将2-氨基-4-氯-5-三氟甲基嘧啶(203-5)替换为2-氨基-4-氯嘧啶(203-28)制备得到.4-(5-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(4-(5-chloro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-31)。LCMS(ESI):m/z245[M+H]+。
中间体205-124的制备：合成方法如实施例3中方法3-2中的中间体205-20的制备，仅是将其中加入5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶(201-20)替换为5-氯-1H-吡咯[3,2-b]吡啶(201-124)，制备得到.(4-(5-氯-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺(中间体205-124)。LCMS(ESI):m/z246[M+H]+。
下列中间体(205-39)可按上述合成方法3-3中的中间体205-34的方法制备，仅是将其中的中间体201-34替换为相应的中间体201。
中间体205-39的制备：合成方法如实施例3中方法3-3中的中间体205-34的制备，仅是将其中5-硝基-1H-吲哚(201-34)替换为(1H-吲哚-5-基)甲醇(201-39),制备得到(1-(2-氨基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-基)甲醇(1-(2-aminopyrimidin-4-yl)-1H-indol-5-yl)methanol)(中间体205-39)。LCMS(ESI):m/z241[M+H]+。
下列中间体(205-37，205-38)可按上述合成方法3-3中的中间体205-36的方法制备，仅是将其中中间体201-36替换为相应的中间体201。
中间体205-37的制备：合成方法如实施例3中方法3-3中中间体205-36的制备，仅是将其中5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1H-吲哚(201-36)替换为5-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙氧基)-1H-吲哚(201-37),制备得到4-(5-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺4-(5-(2-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)ethoxy)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine(中间体205-37)。LCMS(ESI):m/z 509[M+H]+。
中间体205-38的制备：合成方法如实施例3中方法3-3中中间体205-36的方法制备，仅是将其中5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1H-吲哚(201-36)替换为5-(2-甲氧乙氧基)-1H-吲哚(201-38),制备得到4-(5-(2-甲氧乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(4-(5-(2-methoxyethoxy)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体205-38)。LCMS(ESI):m/z285[M+H]+。
下列中间体(205-33，205-46)可按上述合成方法3-3中的中间体205-27的方法制备，仅是将其中的中间体201-27替换为相应的中间体201。
中间体205-33的制备：合成方法如实施例3中方法3-3中中间体205-27的制备，仅是将其中5-甲氧基吲哚(201-27)替换为5-氰基吲哚(201-33),制备得到1-(2-胺基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-氰基(1-(2-aminopyrimidin-4-yl)-1H-indole-5-carbonitrile)(中间体205-33)。LCMS(ESI):m/z236[M+H]+。
中间体205-46的制备：合成方法如实施例3中方法3-3中中间体205-27的制备，仅是将其中5-甲氧基吲哚(201-27)替换为3-氯吲哚(201-46),制备得到N-4-(3-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺4-(3-chloro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine(中间体205-46)。LCMS(ESI):m/z245[M+H]+。
实施例4：中间体403的制备(按照方案四线路制备)
中间体403可按三种方法制备，方法4-1，方法4-2和方法4-3，描述如下：
方法4-1(通过中间体103和204制备)：
步骤4-1a：N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(N-(4-fluoro-2-methoxy-5-nitrophenyl)-4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体401-77)的制备:在闷罐中，化合物1-(2-氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚(204-6)(500毫克，2.18毫摩尔，1当量)，对甲苯磺酸(450.47毫克，2.616毫摩尔，1.2当量)和化合物4-氟-2-甲氧基-5-硝基-苯胺(103)(405.5毫克，2.18毫摩尔，1当量)的叔丁醇(15毫升)溶液混合体系在110℃下搅拌反应16小时。反应冷却至室温，减压浓缩，得到黄色固体。黄色固体用2N氢氧化钠水溶液和石油醚/乙酸乙酯10/1洗涤，减压浓缩，得到黄色固体N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(570毫克，收率：68.88％)。LCMS(ESI):m/z 380[M+H]+。
步骤4-1b：N-(4-(3-二甲胺基吖啶-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(N-(4-(3-(dimethylamino)azetidin-1-yl)-2-methoxy-5-nitrophenyl)-4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-amine)(中间体402-C-77)的制备:将化合物N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(401-6)(150毫克，0.4毫摩尔，1.0当量)溶解于30毫升四氢呋喃中。然后分别加入N,N-二异丙基乙胺(153毫克，1.2毫摩尔，3.0当量)和3-二甲胺基-氮杂环丁烷盐酸盐(81毫克，0.6毫摩尔，1.5当量)，加热至80℃下搅拌反应5小时。反应结束后，冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用水洗，盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，最后硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝150/1～100/1)，得到红色固体,N-(4-(3-二甲胺基吖啶-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(402-C-77)(170毫克，收率：93％)。LCMS(ESI):m/z460[M+H]+。
步骤4-1c：N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-4-(3-二甲胺基吖啶-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺N1-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-4-(3-(dimethylamino)azetidin-1-yl)-6-methoxybenzene-1,3-diamine(中间体403-C-77)的制备:将N-(4-(3-二甲胺基吖啶-1-基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(402-C-77)(170毫克，0.37毫摩尔，1.0当量)和氯化铵(65毫克，1.2毫摩尔，8.0当量)混合于30毫升乙醇和7毫升水中，加热至50℃，然后加入还原铁粉(165毫克，2.96毫摩尔，8.0当量)。加热至80℃，反应2小时。反应完成后，过滤，将滤液浓缩，再用二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压旋干，得到产品N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-4-(3-二甲胺基吖啶-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺(179毫克，粗品)。LCMS(ESI):m/z 430[M+H]+。
方法4-2(通过中间体105和205制备)：
步骤4-2a：N1-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N4-(2-二甲胺乙基)-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺(N1-(4-(1H-indol-1-yl)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl)-N4-(2-(dimethylamino)ethyl)-2-methoxy-N4-methyl-5-nitrobenzene-1,4-diamine)(中间体402-A-5)的制备：氮气保护下，将4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)(265毫克，0.95毫摩尔，1.2当量)，N1-(4-溴-5-甲氧基-2-硝基苯基)-N1,N2,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺(105-A-1)(266毫克，0.80毫摩尔，1.0当量)，碳酸铯(782毫克，2.4毫摩尔，3.0当量)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(46毫克，0.08毫摩尔，0.1当量)和三(二亚苄基丙酮)二钯(46毫克，0.04毫摩尔，0.05当量)加入到35毫升甲苯中，回流反应6个小时。冷却至室温，过滤，所得滤液减压浓缩，经硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇50/1至10/1)，得到红色固体N1-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N4-(2-二甲胺乙基)-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺(152毫克，收率：36％)。LCMS(ESI):m/z530[M+H]+。
步骤4-2b：N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(1H-indol-1-yl)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-5)的制备：将化合物N1-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N4-(2-二甲胺乙基)-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基苯-1,4-二胺(402-5)(140毫克，0.26毫摩尔，1.0当量)和氯化铵(114毫克，2.12毫摩尔，8.0当量)加入到30毫升乙醇和8毫升水的混合液中，加热至50℃，分批加入还原性铁粉(127毫克，2.26毫摩尔，8.5当量)，加热至回流，反应1个小时。反应冷却至室温，减压浓缩，用二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到棕色油状物N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(130毫克，收率：98％)。LCMS(ESI):m/z500[M+H]+。
方法4-3(通过中间体204和106制备)：
步骤4-3a：N2-{4-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-2-甲氧基-5-硝基苯}-4-(1H-吲哚-1-基)-N5-甲基嘧啶-2,5-二胺(N2-(4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-nitrophenyl)-4-(1H-indol-1-yl)-N5-methylpyrimidine-2,5-diamine)(中间体402-A-11)的制备：将2-氯-4-(1H-吲哚-1-基)-N-甲基嘧啶-5-胺(204-11)(268毫克,1.036毫摩尔)溶解于甲苯(40毫升)中，依次加入N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基-2-硝基苯-1,4-二胺(106-A-11)(278毫克,1.036毫摩尔，1.0当量)、三(二亚苄基丙酮)二钯(94.8毫克,0.1036毫摩尔，0.1当量)、碳酸铯(675毫克,2.072毫摩尔，2.0当量)和4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(60毫克,0.1036毫摩尔，0.1当量)，然后在氮气保护下搅拌，并在100℃下搅拌4个小时。混合液冷却至室温，浓缩，然后通过柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇＝40:1)，得到黄色固体N2-{4-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-2-甲氧基-5-硝基苯}-4-(1H-吲哚-1-基)-N5-甲基嘧啶-2,5-二胺(263毫克,收率：51.8％)。LCMS(ESI):m/z491[M+H]+。
步骤4-3b：N4-[4-(1H-吲哚-1-基)-5-(甲基氨基)嘧啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(1H-indol-1-yl)-5-(methylamino)pyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-11)的制备：将N2-{4-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-2-甲氧基-5-硝基苯}-4-(1H-吲哚-1-基)-N5-甲基嘧啶-2,5-二胺(402-A-11)(260毫克,0.537毫摩尔，1.0当量)溶解在甲醇(40毫升)中，加入锌粉(279毫克,4.297毫摩尔，8.0当量)和氯化铵(230毫克,4.297毫摩尔，8.0当量)，然后混合物在60℃搅拌反应四个小时，冷却到室温，加入二氯甲烷稀释，过滤，滤液用水和饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体N4-[4-(1H-吲哚-1-基)-5-(甲基氨基)嘧啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(226毫克,粗品)。LCMS(ESI):m/z461[M+H]+。
下列中间体(403-C-78，403-C-79，403-B-80，403-B-81，403-B-82，403-C-84)可按上述合成方法4-1制备。
中间体403-C-78的制备：合成方法如实施例4方法4-1中403-C-77的合成，仅是将其中化合物3-二甲胺基-氮杂环丁烷盐酸盐替换为(S)-N,N-二甲胺基四氢吡咯-3-胺,制备得到(S)-N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺((S)-N1-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-4-(3-(dimethylamino)pyrrolidin-1-yl)-6-methoxybenzene-1,3-diamine)(403-C-78)。LCMS(ESI):m/z444[M+H]+。
中间体403-C-79的制备：合成方法如实施例4方法4-1中403-C-77的合成，仅是将其中化合物3-二甲胺基-氮杂环丁烷盐酸盐替换为(R)-N,N-二甲胺基四氢吡咯-3-胺,制备得到(R)-N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺((R)-N1-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-4-(3-(dimethylamino)pyrrolidin-1-yl)-6-methoxybenzene-1,3-diamine)(化合物403-C-79)。LCMS(ESI):m/z444[M+H]+。
中间体403-B-80的制备：合成方法如实施例4中方法4-1。将N-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(401-6)(250毫克,0.659毫摩尔，1.0当量)溶解在乙醇(30毫升)中，加入N，N-二异丙基乙胺(255毫克,1.978毫摩尔，1.0当量)和N-甲基-2-(吡咯烷-1-基)乙胺(380毫克,粗品)，然后混合液在封管中加热到100℃反应过夜。反应结束后，冷却到室温，加入乙酸乙酯稀释。有机相用水和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，浓缩并通过柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇60/1至50/1)纯化，得到黄色固体N1-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基-N4-[2-(吡咯烷-1-基)乙基]苯基-1,4-二胺(402-B-80)(257毫克,收率：80.0％)。LCMS(ESI):m/z 488[M+H]+。再将N1-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-2-甲氧基-N4-甲基-5-硝基-N4-[2-(吡咯烷-1-基)乙基]苯基-1,4-二胺(402-B-80)(257毫克,0.527毫摩尔，1.0当量)溶解在甲醇(40毫升)中，加入锌粉(274毫克,4.216毫摩尔，8.0当量)和氯化铵(225毫克,4.216毫摩尔，8.0当量)，然后混合物在60℃搅拌反应四个小时，冷却到室温，加入二氯甲烷稀释，过滤，滤液用水和饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体N4-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基-N1-甲基-N1-[2-(吡咯烷-1-基)乙基]苯基-1,2,4-三胺(N4-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-5-methoxy-N1-methyl-N1-(2-(pyrrolidin-1-yl)ethyl)benzene-1,2,4-triamine)(403-B-80)(169毫克,粗品)。LCMS(ESI):m/z 458[M+H]+。
中间体403-B-81的制备：合成方法如实施例4方法4-1中403-B-80的合成，仅是将其中化合物N-甲基-2-(吡咯烷-1-基)乙胺替换为N-甲基-2-(哌啶-1-基)乙烷-1-胺,制备得到N4-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基-N1-甲基-N1-[2-(哌啶-1-基)乙基]苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-5-methoxy-N1-methyl-N1-(2-(piperidin-1-yl)ethyl)benzene-1,2,4-triamine)(中间体403-B-81)。LCMS(ESI):m/z472[M+H]+。
中间体403-B-82的制备：合成方法如实施例4方法4-1中403-B-80的合成，仅是将其中化合物N-甲基-2-(吡咯烷-1-基)乙胺替换为甲基-(2-吗啉-4-基-乙基)-胺,制备得到N4-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基-N1-(2-吗啉-4-基-乙基)-苯基-1,2,4-三胺(N4-(4-Indol-1-yl-pyrimidin-2-yl)-5-methoxy-N1-methyl-N1-(2-morpholin-4-yl-ethyl)-benzene-1,2,4-triamine)(中间体403-B-82)。LCMS(ESI):m/z474[M+H]+。
中间体403-C-84的制备：合成方法如实施例4方法4-1中403-C-77的合成，仅是将其中化合物3-二甲胺基-氮杂环丁烷盐酸盐替换为N-甲基哌嗪,制备得到N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯-1,3-二胺(N1-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-6-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)benzene-1,3-diamine)(中间体403-C-79)。LCMS(ESI):m/z444[M+H]+。
下列中间体(403-A-6，403-A-8，403-A-10，402-A-20，403-A-27，403-A-28，403-A-29，403-A-30，403-A-31，403-A-33，403-A-34，403-A-36，403-A-37，403-A-38，403-A-39，403-A-41，403-A-46,403-A-124)可按上述合成方法4-2制备，仅是将其中的中间体205-5替换为相应的中间体205。
中间体403-A-6的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-胺(205-6),制备得到N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(1H-indol-1-yl)-5-methoxypyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-6)。LCMS(ESI):m/z 462[M+H]+。
中间体403-A-8的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲基嘧啶-2-胺(205-8),制备得到N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺N4-(4-(1H-indol-1-yl)-5-methylpyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine(中间体403-A-8)。LCMS(ESI):m/z 446[M+H]+。
中间体403-A-10的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)4-(1H-吲哚-1-基)-N5,N5-二甲基嘧啶-2,5-二胺(205-10),制备得到N4-[5-(二甲基氨基)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(5-(dimethylamino)-4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine(中间体403-A-10))。LCMS(ESI):m/z475[M+H]+。
中间体403-A-20的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺(205-20),N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N4-(4-(5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)-N1-甲基-2-硝基苯-1,4-二胺(N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N4-(4-(5-methoxy-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-methyl-2-nitrobenzene-1,4-diamine)(中间体403-A-20)。LCMS(ESI):m/z 493[M+H]+。
中间体403-A-27的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-甲氧基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-27),制备得到N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N4-(4-(5-甲氧基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)--N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N4-(4-(5-methoxy-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-27)。LCMS(ESI):m/z 462[M+H]+。
中间体403-A-28的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-氟-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-28),制备得到N1-(2-二甲胺乙基)-N4-(4-(5-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-N4-(4-(5-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-28)。LCMS(ESI):m/z 450[M+H]+。
中间体403-A-29的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(6-氟-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-29),制备得到N1-(2-二甲胺乙基)-N4-(4-(6-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-N4-(4-(6-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-29)。LCMS(ESI):m/z 450[M+H]+。
中间体403-A-30的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(4-氟-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-30),制备得到N1-(2-二甲胺乙基)-N4-(4-(4-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-N4-(4-(4-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-30)。LCMS(ESI):m/z 450[M+H]+。
中间体403-A-31的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-31),制备得到N4-(4-(5-氯-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(5-chloro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-31)。LCMS(ESI):m/z 466[M+H]+。
中间体403-A-33的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为1-(2-胺基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-氰基(205-33),制备得到1-(2-((5-胺基-4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-氰基(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-1H-indole-5-carbonitrile)(中间体403-A-33)。LCMS(ESI):m/z 457[M+H]+。
中间体403-A-34的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-硝基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-氨基(205-34),制备得到N1-(2-二甲氨基-乙基)-5-甲氧基-N1-甲基-N4-[4-(5-硝基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基]-苯基-1,2,4-三胺(N1-(2-dimethylamino-ethyl)-5-methoxy-N1-methyl-N4-[4-(5-nitro-indol-1-yl)-pyrimidin-2-yl]-benzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-34)。LCMS(ESI):m/z 477[M+H]+。
中间体403-A-36的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-((叔丁基二苯基硅)氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-36),制备得到1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-醇(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-1H-indol-5-ol)(中间体403-A-36)。LCMS(ESI):m/z448[M+H]+。
中间体403-A-37的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-37),制备得到N4-4-(5-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-((2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(5-(2-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)ethoxy)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-37)。LCMS(ESI):m/z730[M+H]+。
中间体403-A-38的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-(2-甲氧乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-38),制备得到N1-(2-((2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N4-4-(5-(2-甲氧乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N4-(4-(5-(2-methoxyethoxy)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-38)。LCMS(ESI):m/z730[M+H]+。
中间体403-A-39的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为(1-(2-氨基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-基)甲醇(205-39),制备得到(1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-基)甲醇(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-1H-indol-5-yl)methanol(中间体403-A-39)。LCMS(ESI):m/z462[M+H]+。
中间体403-A-41的制备：将化合物1-(2-胺基嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-氰基(205-33)(120毫克，0.51毫摩尔，1.2当量)，化合物N1-(4-溴-5-甲氧基-2-硝基苯基)-N1,N2,N2-三甲基乙烷-1,2-二胺(105-A-1)(139.4毫克，0.42毫摩尔，1当量)，碳酸铯(273毫克，0.84毫摩尔，2当量)，三(二亚苄基丙酮)二钯(19毫克，0.021毫摩尔，0.05当量)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(21.85毫克，0.038毫摩尔，0.09当量)溶于20毫升甲苯，氮气保护条件下，升温到110℃反应6小时。冷却到室温，旋干溶剂，残留物硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝100/1)纯化得到红色固体1-(2-((4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-氰基(402-A-33)(200毫克，收率：98.03％)。LCMS(ESI):m/z 487[M+H]+。将上述得到的化合物(500毫克，1.03毫摩尔，1当量)溶解到乙醇(10毫升)二甲基亚砜(1毫升)的混合溶剂中，加入氢氧化钠(1毫升，1M水溶液)，冰浴下搅拌均匀，缓慢滴加双氧水(1毫升，30％水溶液)，冰浴下继续搅拌5分钟，用饱和亚硫酸钠水溶液将反应淬灭，用乙酸乙酯萃取后，通过硅胶柱层析分离提纯得到1-(2-((4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-甲酰胺(402-A-41)(417毫克，0.827毫摩尔，收率：80.3％)LCMS(ESI):m/z 505[M+H]+。将上述得到的化合物(417毫克，0.827毫摩尔，1当量)溶解到乙醇(30毫升)氯化铵水溶液(3毫升)的混合溶剂中，加热到60℃，加入还原铁粉(185毫克，3.0毫摩尔，4当量)继续搅拌2小时后过滤，用二氯甲烷萃取旋干得到的粗品通过硅胶柱层析分离提纯得到1-(2-((5-胺基-4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-甲酰胺
(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-1H-indole-5-carboxamide)(403-A-41)(377毫克，0.794毫摩尔，收率：96.0％)LCMS(ESI):m/z[M+H]+。
中间体403-A-46的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为N-4-(3-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺(205-46),制备得到N4-(4-(3-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(3-chloro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-46)。LCMS(ESI):m/z 466[M+H]+。
中间体403-A-124的制备：合成方法如实施例4中方法4-2，仅是将其中化合物4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-胺(205-5)替换为4-(5-氯-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺(205-124),制备得到N4-(4-(5-氯-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(N4-(4-(5-chloro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl)pyrimidin-2-yl)-N1-(2-(dimethylamino)ethyl)-5-methoxy-N1-methylbenzene-1,2,4-triamine)(中间体403-A-124)。LCMS(ESI):m/z 467[M+H]+。
实施例5：中间体506的制备(按照方案五线路制备)
中间体506可按三种方法制备，方法5-1，方法5-2和方法5-3，描述如下：
方法5-1：通过中间体503和504制备。
方法5-2(通过中间体503和106制备)：
步骤5-2a：6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(6-chloro-1-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体502-51)的制备:将5-氯-N1-甲基苯-1,2-二胺(501-51)(3.3克，21毫摩尔，1.0当量)溶解于150毫升二氯甲烷中，加入4.4毫升三乙胺(31.5毫摩尔，1.5当量)，冷却至0℃。在氮气保护下，缓慢滴加溶于30毫升二氯甲烷的三光气溶液(2.6克，8.4毫摩尔，0.4当量)，反应半小时。将反应液用碳酸钠溶液调节pH为7～8，有固体析出，过滤，干燥，即得到产品得到产品6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(2.65克，收率：69％)。LCMS(ESI):m/z 183[M+H]+。
步骤5-2b：5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(5-chloro-1-(2-chloropyrimidin-4-yl)-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体503-51的制备):首先将6-氯-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-51)(500毫克，2.7毫摩尔，1.0当量)和碳酸铯(670毫克，4.05毫摩尔，1.5当量)混合于70毫升N,N-二甲基甲酰胺中。在氮气保护下，加入2,4-二氯嘧啶(410毫克,2.7毫摩尔，1.0当量)，室温搅拌反应2小时。反应完成后，加入大量的水，有固体析出，过滤，干燥，即得到产品5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(410毫克，收率：50％)。LCMS(ESI):m/z 295[M+H]+。
步骤5-2c：5-氯-1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(5-chloro-1-(2-(4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-nitrophenylamino)pyrimidin-4-yl)-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体505-A-51)的制备:将5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-51)(240毫克，0.81毫摩尔，1.0当量),N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基-2-硝基苯-1,4-二胺(106-A-11)(216毫克，0.81毫摩尔，1.0当量)，碳酸铯(528毫克，1.62毫摩尔，2.0当量)，三(二亚苄基丙酮)二钯(40毫克，0.04毫摩尔，0.05当量)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(48毫克，0.08毫摩尔，0.1当量)混合于50毫升甲苯中。在氮气保护下，将反应置于预先加热好的110℃油浴中，加热，搅拌反应3小时。减压浓缩，最后通过硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝300/1～150/1)得到产品5-氯-1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(150毫克，收率：35％)。LCMS(ESI):m/z527[M+H]+。
步骤5-2d：1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氯-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-(5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenylamino)pyrimidin-4-yl)-5-chloro-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-51)的制备:将5-氯-1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(505-A-51)(150毫克，0.28毫摩尔，1.0当量)和氯化铵(126毫克，2.38毫摩尔，8.5当量)混合于30毫升乙醇和7毫升水中，加热至50℃。然后加入还原铁粉(125毫克，2.24毫摩尔，8.0当量)，加热至80℃，反应2小时。反应完成后，过滤，将滤液浓缩，再用二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压旋干，最后通过硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝150/1～50/1)得到产品1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氯-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(140毫克，收率：99％)。MS(ESI):m/z497[M+H]+。
下列中间体(506-A-52，506-A-53，506-A-57，506-A-99,506-A-133,506-A-135)可按方法5-2制备。仅是将其中中间体503-51替换为相应的中间体503。
中间体506-A-52的制备：合成方法如实施例5中方法5-2，仅是将其中化合物5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-51)替换为1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(503-52),制备得到1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazole-5-carbonitrile)(中间体506-A-52)。LCMS(ESI):m/z488[M+H]+。
中间体506-A-53的制备：合成方法如实施例5中方法5-2，仅是将其中化合物5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-51)替换为1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-甲氧基-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-53),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-甲氧基-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-methoxy-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-53)。LCMS(ESI):m/z493[M+H]+。
中间体506-A-57的制备：合成方法如实施例5中方法5-2，仅是将其中化合物5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-51)替换为1-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-57),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)-5-甲氧基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)-5-methoxypyrimidin-4-yl)-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-57)。LCMS(ESI):m/z 493[M+H]+。
中间体506-A-99的制备：合成方法如实施例5中方法5-2，仅是将其中化合物5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-51)替换为5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-环丙基-1,3-二氢-2H-苯唑[d]咪唑-2-酮(503-99)，制备得到1-(2-((5-氨基-4-((2-(二甲氨基)乙基)甲基)氨基)-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)-5-氯-3-环丙基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-chloro-3-cyclopropyl-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one)(中间体506-A-99)。LCMS(ESI):m/z 523[M+H]+。
中间体506-A-133的制备：合成方法如实施例5中方法5-2，仅是将其中化合物5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-51)替换为1-(2-氯-5-甲氧基嘧啶-4-基)-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮1-(2-chloro-5-methoxypyrimidin-4-yl)-3-isopropyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one(503-133)，制备得到1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-胺基苯胺基)-5-甲氧基嘧啶-4-基)-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮1-(2-((4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-aminophenyl)amino)-5-methoxyp yrimidin-4-yl)-3-isopropyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one(中间体506-A-133)。LCMS(ESI):m/z521[M+H]+。
中间体506-A-135的制备：合成方法如实施例5中方法5-2，仅是将其中化合物5-氯-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-51)替换为1-(2-氯-5-(二甲氨基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(1-(2-chloro-5-(dimethylamino)pyrimidin-4-yl)-3-isopropyl-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one)(503-135)，制备得到1-(2-((5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)-5-(dimethylamino)pyrimidin-4-yl)-3-isopropyl-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one)(中间体506-A-135)。LCMS(ESI):m/z 534[M+H]+。
方法5-3(通过中间体503和103制备)：
步骤5-3a：1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(3-methylbut-2-enyl)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体502-62)的制备：将邻硝基苯胺(5克，36毫摩尔，1.0当量)溶解于100毫升N-甲基吡咯烷酮中，加入碳酸铯(23克，72毫摩尔，2.0当量)。然后往混合液中滴加1-溴-3-甲基-2-丁烯(7克，46.8毫摩尔，1.3当量)，加热至100℃，反应过夜。加水淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤多次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到黄色油状物，最后用硅胶柱层析纯化(乙酸乙酯/石油醚＝1/5～1/3)，得到产品N1-(3-甲基-2-丁烯)苯-1,2-二胺(501-62)(3克，收率：40％)。LCMS(ESI):m/z207[M+H]+。
将化合物501-62(1.28克，7.2毫摩尔，1.0当量)溶解于100毫升四氢呋喃中，加入1.5毫升三乙胺(10.8毫摩尔，1.5当量)。在氮气保护下，加入N,N'-羰基二咪唑(3.5克，21.6毫摩尔，3.0当量)，加热至50℃，反应过夜。反应完成，用二氯甲烷萃取，减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝200/1～100/1)得到1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1.3克，收率：89％)。LCMS(ESI):m/z 203[M+H]+。
步骤5-3b：1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-chloropyrimidin-4-yl)-3-(3-methylbut-2-enyl)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体503-62)的制备:首先将1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-63)(600毫克，2.97毫摩尔，1.0当量)和碳酸铯(1.93克，5.94毫摩尔，2.0当量)混合于10毫升N,N-二甲基甲酰胺中。在氮气保护下，加入2,4-二氯嘧啶(659毫克,4.45毫摩尔，1.5当量)，室温搅拌反应2小时。反应完成后，加入大量的水，有固体析出，过滤，干燥，即得到产品1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(755毫克，收率：81％)。LCMS(ESI):m/z315[M+H]+。
步骤5-3c：1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮1-(2-(4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-nitrophenylamino)pyrimidin-4-yl)-3-(3-methylbut-2-enyl)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one(中间体505-A-62)的制备:将化合物1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-62)(350毫克，1.27毫摩尔，1.0当量)，4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(103)(261毫克，1.4毫摩尔，1.3当量)混合于60毫升的异丙醇中，加入浓盐酸(1.5毫升)。混合物在100℃下搅拌反应过夜。反应结束后，冷却至室温，减压浓缩，得到黄色固体。所得固体用乙酸乙酯溶解，加入饱和碳酸钠溶液，中和剩余的酸。有机相减压浓缩，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)重结晶，得到黄色固体(213毫克，收率：41％)。LCMS(ESI):m/z465[M+H]+。将化合物上述得到的化合物(213毫克，0.458毫摩尔，1.0当量)溶解于30毫升四氢呋喃中。然后将N,N,N-三甲基乙二胺(140毫克，1.37毫摩尔，3.0当量)和N，N-二异丙基乙胺(177毫克，1.37毫摩尔，3.0当量)加入到反应体系中，在80℃下搅拌反应过夜。反应结束后，冷却至室温，用乙酸乙酯和水萃取，有机相用水洗，饱和食盐水洗涤多次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，最后硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝200/1～100/1)，得到红色固体，即产品1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(132毫克，收率：52％)。LCMS(ESI):m/z547[M+H]+。
步骤5-3d：1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮1-(2-(5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenylamino)pyrimidin-4-yl)-3-(3-methylbut-2-enyl)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one(中间体506-A-62)的制备:将1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(505-A-62)(132毫克，0.24毫摩尔，1.0当量)和氯化铵(108毫克，2.04毫摩尔，8.5当量)混合于40毫升乙醇和10毫升水中，加热至50℃，然后加入还原铁粉(108毫克，1.92毫摩尔，8.0当量)。加热至80℃，反应2小时。反应完成后，过滤，将滤液浓缩，再用二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，减压旋干，最后硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝200/1～50/1)得到产品1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(110毫克，收率：88％)。LCMS(ESI):m/z 517[M+H]+。
下列中间体(506-A-50,506-A-63,506-A-91,506-A-98,506-A-101,506-A-102,506-A-105,506-A-118,506-A-120，506-A-125,506-A-127,506-A-128,506-A-132,506-A-138，506-A-139)可按方法5-3制备。仅是将其中中间体502-62替换为相应的中间体502。
中间体506-A-50的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为6-氟-1-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(502-50),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-methyl-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one)(中间体506-A-50)。LCMS(ESI):m/z 481[M+H]+。
中间体506-A-62的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-(5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenylamino)pyrimidin-4-yl)-3-(3-methylbut-2-enyl)-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-62)。LCMS(ESI):m/z517[M+H]+。
中间体506-A-63的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为1-环丙甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(502-63),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-(cyclopropylmethyl)-1,3-dihydro-2H-b enzo[d]imidazol-2-one)(中间体506-A-63)。LCMS(ESI):m/z503[M+H]+。
中间体506-A-91的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为6-氟-1-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-91),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-(5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenylamino)pyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-isopropyl-1H-benzo[d]imidazo l-2(3H)-one)(中间体506-A-91)。LCMS(ESI):m/z509[M+H]+。
中间体506-A-98的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为1-环丙基-6-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-98),制备得到1-{2-{5-胺基-4-{[2-(二甲胺基)乙基](甲基)胺基}-2-甲氧基苯胺基}嘧啶-4-基}-3-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-(5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenylamino)pyrimidin-4-yl)-3-cyclopropyl-5-fluoro-1H-benzo[d]imida zol-2(3H)-one)(中间体506-A-98)。LCMS(ESI):m/z 507[M+H]+。
中间体506-A-101的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为3-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-氰基(502-101),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-氰基(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-cyclopropyl-2-o xo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazole-5-carbonitrile)(中间体506-A-101)。LCMS(ESI):m/z 514[M+H]+。
中间体506-A-102的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为1-环丙基-6-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-102),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙基-5-甲氧基1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-cyclopropyl-5-methoxy-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one)(中间体506-A-102)。LCMS(ESI):m/z 519[M+H]+。
中间体506-A-105的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为1-环丙甲基-6-氟-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-105),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙甲基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-(5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenylamino)pyrimidin-4-yl)-3-(cyclopropylmethyl)-5-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-105)。LCMS(ESI):m/z 521[M+H]+。
中间体506-A-118的制备(合成方法如实施例5中方法5-3):将4-氟-2-甲基-5-硝基苯胺(103-118)(340毫克，2.0毫摩尔，1.0当量)，1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(600毫克，2.3毫摩尔，1.15当量)和浓盐酸(5毫升，59.0毫摩尔，29.5当量)加入到100毫升异丙醇中，于100℃下反应过夜。冷却至室温，饱和碳酸钠水溶液中和，用乙酸乙酯萃取水相，用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，经过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚：乙酸乙酯＝1:1)，得到白色固体1-(2-(4-氟-2-甲基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(120毫克，收率：15％)。LCMS(ESI):m/z395[M+H]+。将上述固体(120毫克，0.30毫摩尔，1.0当量)，N,N,N’-三甲基-1,2-乙二胺(0.08毫升，0.60毫摩尔，2.0当量)和二异丙基乙胺(0.10毫升，0.60毫摩尔，2.0当量)加入到30毫升四氢呋喃中，加热回流，搅拌过夜。冷却至室温，减压浓缩，残留物溶解于乙酸乙酯，用水和饱和食盐水洗有机相，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到红色固体1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(505-A-118)(140毫克，收率：98.6％)。LCMS(ESI):m/z 476[M+H]+。将上述得到的固体(140毫克，0.30毫摩尔，1.0当量)和氯化铵(128毫克，2.40毫摩尔，8.0当量)加入到30毫升乙醇和6毫升水的混合液中，加热至65℃，分批加入还原性铁粉(143毫克，2.55毫摩尔，8.5当量)，加热至回流，反应1个小时。反应冷却至室温，加入二氯甲烷，过滤，滤液用水和饱和食盐水洗，有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，经过硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷：甲醇＝40:1～15:1)，得到棕色固体1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(506-A-118)(72毫克，收率：54％)。LCMS(ESI):m/z446[M+H]+。
中间体506-A-120的制备:合成方法如实施例5中方法5-3中的中间体506-A-118的制备，仅是将其中化合物4-氟-2-甲基-5-硝基苯胺(103-118)替换为4-氟-2-(2-甲氧基-乙氧基)-5-硝基-苯胺(103-120),制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(1-{2-[5-Amino-4-[(2-dimethylamino-ethyl)-methyl-amino]-2-(2-methoxy-ethoxy)-phenylamino]-pyrimidin-4-yl}-3-methyl-1,3-dihydro-benzoimidazol-2-one)(中间体506-A-120)。LCMS(ESI):m/z507[M+H]+。
中间体506-A-125的制备:合成方法如实施例5中方法5-3中的中间体506-A-118的制备，仅是将其中化合物4-氟-2-甲基-5-硝基苯胺(103-118)替换为4-氟-3-硝基-苯胺(103-125),制备得到1-(2-(3-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮1-(2-((3-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)phenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-methyl-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one(中间体506-A-125)。LCMS(ESI):m/z433[M+H]+。
中间体506-A-127的制备:合成方法如实施例5中方法5-3中的中间体506-A-118的制备，仅是将其中化合物1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮替换为1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮,制备得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methylphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-isopropyl-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one)(中间体506-A-127)。LCMS(ESI):m/z475[M+H]+。
中间体506-A-128的制备:合成方法如实施例5中方法5-3中的中间体506-A-125的制备，仅是将其中化合物1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮替换为1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮,制备得到1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-3-胺基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-3-aminophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-isopro pyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-128)。LCMS(ESI):m/z461[M+H]+。
中间体506-A-132的制备:合成方法如实施例5中方法5-3中的中间体506-A-125的制备，仅是将其中化合物4-氟-3-硝基苯胺(103-125)替换为4-氟-2-异丙基-5-硝基苯胺(103-132)，制备得到得到1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-异丙基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-isopropylphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-methyl-1,3-dihydro-2H-benzo[d]imidazol-2-one)(中间体506-A-127)。LCMS(ESI):m/z475[M+H]+。
中间体506-A-138的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为1-异丙基-6-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-138),制备得到1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-胺基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-5-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-aminophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-3-isopropyl-5-methoxy-1H-benzo[d]imi dazol-2(3H)-one)(中间体506-A-138)。LCMS(ESI):m/z521[M+H]+。
中间体506-A-139的制备：合成方法如实施例5中方法5-3，仅是将其中化合物1-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-62)替换为1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-羟基-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-139),制备得到1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-胺基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-羟基-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-aminophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-hydrox y-3-isopropyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-139)。LCMS(ESI):m/z507[M+H]+。
实施例6：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物5)的制备(按照方案六线路制备)
将化合物N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)(90毫克，0.26毫摩尔，1.0当量)，三乙胺(0.09毫升，0.65毫摩尔，2.5当量)，HATU(118毫克，0.31毫摩尔，1.2当量)和丙烯酸(602-3)(23毫克，0.31毫摩尔，1.2当量)加入到15毫升二氯甲烷中，于室温下搅拌0.5小时。反应停止搅拌，加入饱和碳酸钠水溶液，分液，用二氯甲烷萃取水相两次，合并有机相，依次用稀盐酸、饱和食盐水洗，干燥，减压浓缩，经薄层制备纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇25/1)，得到微黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(25毫克，收率：17％)。
该化合物5的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 554[M+H]+。熔点：161-162摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.98(s,1H),9.61(s,1H),8.86(s,1H),8.32(s,1H),7.71(s,1H),7.58(s,1H),7.48(s,1H),7.11(s,2H),7.00(s,1H),6.73(s,1H),6.42(s,1H),6.23(d,J＝16.9Hz,1H),5.75(d,J＝9.9Hz,1H),3.79(s,3H),2.87(s,2H),2.69(s,3H),2.21(s,8H)。
实施例7：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)-5-methoxypyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物6)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-6)(270毫克，0.58毫摩尔，1.0当量),得到米黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(35毫克，收率：12％)。
该化合物6的表征数据为：LCMS(ESI):m/z516[M+H]+。熔点：143.3-147.8摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.09(s,1H),8.64(s,1H),8.45(s,1H),8.22(s,1H),8.00(d,J＝19.9Hz,2H),7.57(s,1H),7.11(s,2H),7.01(s,1H),6.70(s,1H),6.38(m,1H),6.21(d,J＝16.6Hz,1H),5.74(d,J＝9.2Hz,1H),3.83(d,J＝34.2Hz,6H),2.86(s,2H),2.71(s,3H),2.29(s,2H),2.19(s,6H)。
实施例8：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲基嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)-5-methylpyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物8)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(99毫克，0.22毫摩尔，1.0当量),得到米黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)-5-甲基嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(60毫克，收率：54.5％)。
该化合物8的表征数据为：LCMS(ESI):m/z500[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.99(s,1H),8.61(s,1H),8.46(s,1H),8.32(s,1H),7.74(d,J＝3.4Hz,1H),7.68(d,J＝7.3Hz,1H),7.60(dd,J＝6.3,2.4Hz,1H),7.11(m,2H),6.98(s,1H),6.69(d,J＝3.3Hz,1H),6.39(dd,J＝16.8,10.1Hz,1H),6.23(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.74(m,1H),3.80(s,3H),2.86(s,2H),2.67(d,J＝9.8Hz,3H),2.30(s,2H),2.20(s,6H),2.17(s,3H)。
实施例9：N-{5-[5-(二甲基氨基)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-4-甲氧基苯}丙烯酰胺(N-(5-(5-(dimethylamino)-4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物10)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-[5-(二甲基氨基)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-10)(277毫克,0.591毫摩尔，1.0当量),得到黄色固体N-{5-[5-(二甲基氨基)-4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-4-甲氧基苯}丙烯酰胺(60毫克,收率：19.2％)
该化合物10的表征数据为：LCMS(ESI):m/z529[M+H]+。熔点：154-155摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),8.69(s,1H),8.38(s,1H),8.13(m,2H),7.87(dd,J＝6.0,3.3Hz,1H),7.57(m,1H),7.10(m,2H),6.98(s,1H),6.69(d,J＝3.5Hz,1H),6.39(dd,J＝16.9,10.1Hz,1H),6.23(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.74(dd,J＝8.7,3.0Hz,1H),3.81(s,3H),2.86(s,2H),2.69(s,3H),2.47(s,6H),2.29(s,2H),2.20(s,6H)。
实施例10：N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)-5-(甲基氨基)嘧啶-2-基氨基]-2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-4-甲氧基苯}丙烯酰胺(N-(5-(4-(1H-indol-1-yl)-5-(methylamino)pyrimidin-2-ylamino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物11)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-[4-(1H-吲哚-1-基)-5-(甲基氨基)嘧啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-11)(216毫克,0.4695毫摩尔，1.0当量),得到黄色固体N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)-5-(甲基氨基)嘧啶-2-基氨基]-2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基}-4-甲氧基苯}丙烯酰胺(30毫克,收率：12.4％)。)
该化合物11的表征数据为：LCMS(ESI):m/z515[M+H]+。熔点154-156摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),8.85(s,1H),8.17(s,1H),7.85(d,J＝3.4Hz,1H),7.61(m,3H),7.14(dt,J＝19.9,7.0Hz,2H),6.95(s,1H),6.71(d,J＝3.3Hz,1H),6.38(dd,J＝16.9,10.1Hz,1H),6.24(d,J＝15.6Hz,1H),5.74(m,1H),4.70(m,1H),3.81(d,J＝8.3Hz,3H),2.85(s,2H),2.68(m,6H),2.26(s,2H),2.19(s,6H)。
实施例11：N-(2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基5-((4-(5-甲氧基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxy-5-((4-(5-methoxy-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物27)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N4-(4-(5-甲氧基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)--N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-27)(100毫克，0.206毫摩尔，1当量),得到黄色固体N-(2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基5-((4-(5-甲氧基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)苯基)丙烯酰胺。(67毫克，收率：59.98％)。
该化合物27的表征数据为：LCMS(ESI):m/z516[M+H]+。熔点：117-118摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.06(s,1H),8.55(d,J＝12.9Hz,2H),8.33(m,2H),8.09(s,1H),7.07(m,3H),6.67(d,J＝11.2Hz,2H),6.40(dd,J＝16.2,11.0Hz,1H),6.19(d,J＝16.9Hz,1H),5.72(d,J＝10.0Hz,1H),3.76(s,6H),2.92(s,2H),2.75(d,J＝1.8Hz,3H),2.34(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例12：N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-(5-((4-(5-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(5-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物28)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N1-(2-二甲胺乙基)-N4-(4-(5-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-28)(400毫克，0.9毫摩尔，1.0当量),得到黄色固体N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-(5-((4-(5-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(230毫克，收率：51％)。
该化合物28的表征数据为：LCMS(ESI):m/z504[M+H]+。熔点：168-170摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.65(s,1H),8.51(s,1H),8.41(m,2H),8.20(s,1H),7.37(d,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝4.9Hz,1H),7.06(s,1H),6.87(s,1H),6.76(s,1H),6.41(m,1H),6.19(d,J＝16.8Hz,1H),5.73(d,J＝9.2Hz,1H),3.78(s,3H),2.92(s,2H),2.75(s,3H),2.35(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例13：N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-(5-((4-(6-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(6-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物29)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N1-(2-二甲胺乙基)-N4-(4-(6-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-29)(162毫克，0.36毫摩尔，1当量),得到黄色固体N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-(5-((4-(6-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(60毫克，收率：33.15％)。
该化合物29的表征数据为：LCMS(ESI):m/z504[M+H]+。熔点：164-165摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.78(s,1H),8.48(s,1H),8.38(d,J＝5.7Hz,1H),8.22(d,J＝9.7Hz,1H),8.12(d,J＝3.7Hz,1H),7.57(dd,J＝8.6,5.7Hz,1H),7.11(d,J＝5.7Hz,1H),7.01(m,2H),6.78(d,J＝3.6Hz,1H),6.37(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.17(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.71(m,1H),3.76(s,3H),2.90(s,2H),2.74(s,3H),2.36(s,2H),2.22(s,6H)。
实施例14：N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-(5-((4-(4-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(4-fluoro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物30)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N1-(2-二甲胺乙基)-N4-(4-(4-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-30)(195毫克，0.43毫摩尔，1当量),得到黄色固体N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-(5-((4-(4-氟-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(60毫克，收率：33.15％)。
该化合物30的表征数据为：LCMS(ESI):m/z504[M+H]+。熔点：165.5-166.5摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.06(s,1H),8.69(s,1H),8.52(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,1H),8.21(dd,J＝27.4,5.8Hz,2H),7.15(d,J＝5.7Hz,1H),7.07(m,2H),6.96(dd,J＝9.8,8.2Hz,1H),6.84(d,J＝3.6Hz,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.20(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.72(dd,J＝10.2,1.6Hz,1H),3.77(s,3H),2.91(t,J＝5.7Hz,2H),2.74(d,J＝10.0Hz,3H),2.35(d,J＝5.3Hz,2H),2.21(s,6H)。
实施例15：N-(5-((4-(5-氯-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺N-(5-((4-(5-chloro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide(化合物31)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-(4-(5-氯-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(300毫克，0.65毫摩尔，1.0当量),得到米黄色固体N-(5-((4-(5-氯-1H-吲唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(85毫克，收率：25％)。
该化合物31的表征数据为：LCMS(ESI):m/z520[M+H]+。熔点：150-153摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.06(s,1H),8.67(s,1H),8.51(s,1H),8.41(d,J＝5.6Hz,2H),8.20(d,J＝3.6Hz,1H),7.65(d,J＝2.1Hz,1H),7.12(d,J＝5.7Hz,1H),7.05(m,2H),6.76(d,J＝3.5Hz,1H),6.41(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.18(dd,J＝17.0,1.8Hz,1H),5.73(dd,J＝10.2,1.6Hz,1H),3.77(d,J＝7.7Hz,3H),2.93(t,J＝5.7Hz,2H),2.75(d,J＝8.8Hz,3H),2.35(t,J＝5.5Hz,2H),2.22(s,6H)。
实施例16：N-5-((4-(5-氰基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基--苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(5-cyano-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物33)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为1-(2-((5-胺基-4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-氰基(403-A-33)(100毫克，0.394毫摩尔，1当量),得到黄色固体N-5-((4-(5-氰基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基--苯基)丙烯酰胺。(35毫克，收率：31.53％)。
该化合物33的表征数据为：LCMS(ESI):m/z511[M+H]+。熔点：127-128摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),8.83(s,1H),8.59(s,1H),8.46(m,2H),8.32(d,J＝3.7Hz,1H),8.14(d,J＝1.1Hz,1H),7.40(d,J＝8.6Hz,1H),7.18(d,J＝5.7Hz,1H),7.07(s,1H),6.90(d,J＝3.6Hz,1H),6.41(dd,J＝17.0,10.2Hz,1H),6.17(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.73(dd,J＝10.2,1.7Hz,1H),3.78(s,3H),2.92(t,J＝5.8Hz,2H),2.76(s,3H),2.34(t,J＝5.7Hz,2H),2.21(s,6H)。
实施例17：N-{2-[(2-二甲氨基-乙基)-甲基-氨基]-4-甲氧基-5-[4-(5-硝基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-丙烯酰胺(N-{2-[(2-Dimethylamino-ethyl)-methyl-amino]-4-methoxy-5-[4-(5-nitro-indol-1-yl)-pyrimidin-2-ylamino]-phenyl}-acrylamide)(化合物34)的制备(按照方案六线路制备)
将N1-(2-二甲氨基-乙基)-5-甲氧基-N1-甲基-N4-[4-(5-硝基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基]-苯基-1,2,4-三胺(403-A-34)(0.13克，0.27毫摩尔)和三乙胺(55毫克，0.55毫摩尔)溶于四氢呋喃(10毫升)，降温至零下70℃，搅拌慢慢滴加丙烯酰氯(25毫克，0.27毫摩尔)。在零下70℃反应2小时，然后加入甲醇(1毫升)和水(15毫升)。用二氯甲烷(15毫升)萃取三次，有机相干燥浓缩之后，用二氯甲烷：甲醇(10:1)柱层析得到黄色固体N-{2-[(2-二甲氨基-乙基)-甲基-氨基]-4-甲氧基-5-[4-(5-硝基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯基}-丙烯酰胺(90毫克，收率62.2％)。
该化合物34的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 531[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.11(s,1H),8.80(s,1H),8.53(m,4H),8.36(d,J＝3.6Hz,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),7.19(d,J＝5.6Hz,1H),7.09(s,1H),7.04(d,J＝3.6Hz,1H),6.39(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.17(dd,J＝17.0,1.7Hz,1H),5.71(m,1H),3.78(s,3H),2.94(t,J＝5.7Hz,2H),2.77(s,3H),2.35(t,J＝5.7Hz,2H),2.21(s,6H)。
实施例18：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-羟基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(5-hydroxy-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物36)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-醇(403-A-36)(111毫克，0.248毫摩尔，1当量)，得到黄色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-羟基-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(55毫克，收率：44.12％)。
该化合物36的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 502[M+H]+。熔点：218-219摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),9.00(s,1H),8.53(d,J＝10.0Hz,2H),8.33(d,J＝5.7Hz,1H),8.17(d,J＝8.8Hz,1H),8.03(d,J＝3.6Hz,1H),7.05(d,J＝4.7Hz,2H),6.88(d,J＝2.3Hz,1H),6.58(m,2H),6.39(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.20(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.73(d,J＝11.7Hz,1H),3.77(s,3H),2.91(t,J＝5.6Hz,2H),2.76(s,3H),2.34(t,J＝5.4Hz,2H),2.22(s,6H)。
实施例19：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-(2-羟乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(5-(2-hydroxyethoxy)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物37)的制备(按照方案六线路制备)
将N4-4-(5-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-((2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-37)(320毫克，0.41毫摩尔，1.0当量)，三乙胺(0.1毫升，0.8毫摩尔，2.0当量)，HATU(182毫克，0.48毫摩尔，1.2当量)和丙烯酸(35毫克，0.48毫摩尔，1.2当量)加入到25毫升二氯甲烷中，于室温下搅拌0.5小时。反应停止搅拌，加入饱和碳酸钠水溶液，分液，用二氯甲烷萃取水相两次，合并有机相，依次用稀盐酸、饱和食盐水洗，干燥，减压浓缩，经硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇40/1至15/1)，得到黄色固体N-5-((4-(5-(2-((叔丁基二苯基硅基)氧基)乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(200毫克，收率：62％)。MS(ESI):m/z 784(M+H)+。
将上述得到的化合物(200毫克，0.25毫摩尔，1.0当量)溶解于20毫升四氢呋喃中，加入四丁基氟化铵(300毫克，1.15毫摩尔，4.6当量)。室温下，搅拌反应1小时，减压浓缩，二氯甲烷萃取，水洗六次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，经硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇40/1至15/1)，得到黄色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-(2-羟乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(30毫克，22％)。
该化合物37的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 546[M+H]+。熔点：65-67摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.06(s,1H),8.55(d,J＝14.9Hz,2H),8.32(dd,J＝28.8,7.0Hz,2H),8.09(d,J＝3.1Hz,1H),7.07(dd,J＝13.9,8.1Hz,3H),6.68(t,J＝7.7Hz,2H),6.40(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.20(d,J＝16.8Hz,1H),5.72(d,J＝10.1Hz,1H),4.80(s,1H),3.98(t,J＝4.8Hz,2H),3.77(s,3H),3.72(d,J＝3.6Hz,2H),2.92(s,2H),2.75(s,3H),2.35(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例20：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-(2-甲氧乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxy-5-((4-(5-(2-methoxyethoxy)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物38)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)N1-(2-((2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N4-4-(5-(2-甲氧乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-38)(140毫克，0.28毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-(2-甲氧乙氧基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(30毫克，收率：19％)。
该化合物38的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 560[M+H]+。熔点：59-61摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),8.56(s,2H),8.35(s,2H),8.10(s,1H),7.09(s,3H),6.69(s,2H),6.43(s,1H),6.21(s,1H),5.73(s,1H),4.09(s,3H),3.73(d,J＝54.8Hz,7H),2.95(s,2H),2.75(s,3H),2.39(m,2H),2.25(s,6H)。
实施例21：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-(2-羟甲基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(5-(hydroxymethyl)-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物39)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为(1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-基)甲醇(403-A-39)(120毫克，0.26毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-((4-(5-(2-羟甲基)-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(25毫克，收率：19％)。
该化合物39的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 516[M+H]+。熔点：67-68摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),8.57(s,2H),8.35(d,J＝26.2Hz,2H),8.11(s,1H),7.51(s,1H),7.08(d,J＝26.0Hz,3H),6.74(s,1H),6.39(s,1H),6.19(d,J＝16.3Hz,1H),5.73(s,1H),5.07(s,1H),4.53(s,2H),3.78(s,3H),2.92(s,2H),2.76(s,3H),2.35(s,2H),2.22(s,6H)。
实施例22：1-(2-((5-丙烯酰胺-4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-甲酰胺(-(2-((5-acrylamido-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-1H-indole-5-carboxamide)(化合物41)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为1-(2-((5-胺基-4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-甲酰胺(100毫克，0.21毫摩尔，1当量)，得到米黄色固体1-(2-((5-丙烯酰胺-4-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-5-甲酰胺(60毫克，0.114毫摩尔，收率：54.3％)。
该化合物41的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 529[M+H]+。熔点：121.3-125.1摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),8.68(s,1H),8.52(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,2H),8.21(d,J＝3.6Hz,1H),8.13(s,1H),7.88(s,1H),7.65(d,J＝8.8Hz,1H),7.16(t,J＝8.9Hz,2H),7.06(s,1H),6.84(d,J＝3.5Hz,1H),6.40(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.19(d,J＝17.0Hz,1H),5.71(d,J＝10.5Hz,1H),3.78(s,3H),2.93(s,2H),2.77(s,3H),2.36(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例23：N-(5-((4-(3-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺N-(5-((4-(3-chloro-1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide(化合物46)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-(4-(3-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-46)(216毫克，0.46毫摩尔，1.0当量)，得到浅黄色固体N-(5-((4-(3-氯-1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(50毫克，收率：29％)。
该化合物46的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 520[M+H]+。熔点：142-144摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),8.67(s,1H),8.56(s,1H),8.43(s,3H),7.55(d,J＝7.2Hz,1H),7.28(s,1H),7.21(s,1H),7.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.06(s,1H),6.41(s,1H),6.22(d,J＝16.5Hz,1H),5.73(d,J＝9.5Hz,1H),3.78(s,3H),2.94(s,2H),2.72(d,J＝29.5Hz,3H),2.37(s,2H),2.24(s,6H)。
实施例24：N-(5-(4-(5-氯-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-(4-(5-chloro-3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)ami no)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物51)的制备(按照方案七线路制备)
将1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氯-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-51)(140毫克，0.28毫摩尔，1.0当量)，三乙胺(57毫克，0.56毫摩尔，2.0当量)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(117毫克，0.308毫摩尔，1.1当量)溶于二氯甲烷(20毫升)中，然后加入丙烯酸(22毫克，0.308毫摩尔，1.1当量)，室温反应。反应半小时后，往里加入30毫升水，萃取，有机相用碳酸钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，残留物用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝500/1～150/1)得到米黄色固体N-(5-(4-(5-氯-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(23毫克，收率：14.8％)。
该化合物51的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 551[M+H]+。熔点：70-71摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.02(s,1H),8.72(s,1H),8.42(m,2H),8.08(s,1H),7.65(d,J＝5.6Hz,1H),7.36(s,1H),7.05(s,1H),6.87(d,J＝8.5Hz,1H),6.40(dd,J＝17.0,10.2Hz,1H),6.17(d,J＝16.9Hz,1H),5.72(d,J＝10.1Hz,1H),3.75(s,3H),3.35(s,3H),2.92(s,2H),2.74(s,3H),2.34(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例25：N-(5-((4-(5-氰基-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(5-cyano-3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物52)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例24，仅是将其中1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-55)替换为1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(506-A-52)(65.4毫克，0.134毫摩尔，1当量)，得到黄色固体N-(5-((4-(5-氰基-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(40毫克，收率：55.06％)。
该化合物52的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 542[M+H]+。熔点：183-185摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.00(s,1H),8.79(s,1H),8.48(d,J＝5.3Hz,1H),8.39(s,1H),8.23(s,1H),7.77(s,1H),7.62(d,J＝5.2Hz,1H),7.31(d,J＝7.3Hz,1H),7.05(s,1H),6.41(dd,J＝16.7,10.2Hz,1H),6.17(d,J＝17.0Hz,1H),5.72(d,J＝10.1Hz,1H),3.77(s,3H),3.39(s,3H),2.92(s,2H),2.75(s,3H),2.35(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例26：N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基-5-((4-(5-甲氧基-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxy-5-((4-(5-methoxy-3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物53)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例24，仅是将其中1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-55)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-甲氧基-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-53)(170毫克，0.35毫摩尔，1.0当量)，得到米黄色固体N-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基-5-((4-(5-甲氧基-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)苯基)丙烯酰胺(80毫克，收率：42％)。
该化合物53的表征数据为：LCMS(ESI):m/z547[M+H]+。熔点：75-87摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.65(s,1H),8.40(m,2H),7.98(d,J＝7.7Hz,1H),7.69(d,J＝5.7Hz,1H),7.05(s,1H),6.84(d,J＝2.3Hz,1H),6.39(dd,J＝16.9,10.1Hz,2H),6.18(dd,J＝17.0,1.6Hz,1H),5.73(m,1H),3.76(t,J＝8.5Hz,6H),3.34(s,3H),2.92(t,J＝5.5Hz,2H),2.75(s,3H),2.35(d,J＝5.2Hz,2H),2.21(s,6H)。
实施例27：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基-5-((5-甲氧基-4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxy-5-((5-methoxy-4-(3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物57)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例24，仅是将其中1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-55)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)-5-甲氧基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-57)(400毫克，0.81毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体N-(5-((5-氯-4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(15毫克，收率：45.08％)。
该化合物57的表征数据为：LCMS(ESI):m/z547[M+H]+。熔点：168-172摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.99(s,1H),8.63(s,1H),8.58(s,1H),8.20(s,1H),7.21(d,J＝7.8Hz,1H),7.13(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.7Hz,1H),7.01(t,J＝7.6Hz,1H),6.96(s,1H),6.37(dd,J＝16.9,10.1Hz,1H),6.22(d,J＝17.0Hz,1H),5.73(d,J＝10.5Hz,1H),3.81(d,J＝9.0Hz,6H),3.37(s,3H),2.83(t,J＝5.6Hz,2H),2.68(s,3H),2.27(t,J＝5.4Hz,2H),2.18(s,6H)。
实施例28：(E)-N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-丁烯酰胺((E)-N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)but-2-enamide)(化合物66)的制备(按照方案六线路制备)
常温下，将巴豆酸(602-66)(24毫克，0.277毫摩尔，1.2当量)三乙胺(58.3毫克，0.58毫摩尔，2.5当量)和HATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯)(114毫克，0.3毫摩尔，1.3当量)溶于二氯甲烷(10毫升)，搅拌半小时后，将N4-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-1)(100毫克，0.232毫摩尔,1当量)溶于二氯甲烷(2毫升)滴加到反应中，搅拌反应1小时。反应液在水相和乙酸乙酯中萃取分离，有机相用盐水洗涤后用无水硫酸钠干燥，真空下浓缩，再用硅胶柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇80/1)分离提纯得到(E)-N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-丁烯酰胺(50毫克,0.1毫摩尔，收率：43.1％)。
该化合物66的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 500[M+H]+；熔点：150.2-152.8摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.86(s,1H),8.57(d,J＝20.3Hz,2H),8.38(d,J＝5.6Hz,2H),8.13(d,J＝3.5Hz,1H),7.58(d,J＝7.7Hz,1H),7.10(m,4H),6.74(m,2H),6.07(d,J＝15.2Hz,1H),3.76(s,3H),2.90(t,J＝5.3Hz,2H),2.74(s,3H),2.35(t,J＝5.4Hz,2H),2.22(s,6H),1.87(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例29：(E)-N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-戊烯酰胺((E)-N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)pent-2-enamide)(化合物67)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例28，仅是将巴豆酸(602-66)替换为反式-2-戊烯酸(602-67)(26毫克，0.25毫摩尔，1.2当量),得到微黄色固体(E)-N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-戊烯酰胺(19毫克，收率：18％)。
该化合物67的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 514[M+H]+。熔点：124.3-126.2摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),8.65(s,1H),8.50(s,1H),8.38(d,J＝5.7Hz,2H),8.13(d,J＝3.6Hz,1H),7.58(d,J＝7.7Hz,1H),7.10(ddd,J＝35.6,16.6,9.3Hz,4H),6.80(m,2H),6.08(dd,J＝17.2,10.2Hz,1H),3.77(s,3H),2.94(s,2H),2.74(s,3H),2.24(dd,J＝22.1,15.0Hz,8H),1.23(s,2H),1.05(t,J＝7.4Hz,3H)。
实施例30：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)甲基丙烯酰胺(N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)methacrylamide)(化合物68)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例28，仅是将巴豆酸(602-66)替换为甲基丙烯酸(602-68)(24毫克，0.28毫摩尔，1.2当量),得到米黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)甲基丙烯酰胺(70毫克，收率：60％)。
该化合物68的表征数据为：LCMS(ESI):m/z500[M+H]+；熔点：145.7-147.1摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),8.59(s,1H),8.53(s,1H),8.40(d,J＝5.7Hz,2H),8.14(d,J＝3.7Hz,1H),7.59(d,J＝7.6Hz,1H),7.12(m,4H),6.77(d,J＝3.6Hz,1H),5.79(s,1H),5.50(s,1H),3.79(s,3H),3.01(s,2H),2.71(s,3H),2.17(s,8H),1.97(s,3H)。
实施例31：(E)-N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-4-二甲胺基丁-2-烯酰胺((E)-N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)-4-(dimethylamino)but-2-enamide)(化合物69)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例28，仅是将巴豆酸(602-66)替换为反式-4-二甲氨基巴豆酸盐酸盐(602-69)(37毫克，0.22毫摩尔，1.2当量),得到棕色固体(E)-N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-4-二甲胺基丁-2-烯酰胺(40毫克，收率：40％)。
该化合物69的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 543[M+H]+。熔点：116.2-118.1摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.92(s,1H),8.50(m,4H),8.13(s,1H),7.59(s,1H),7.08(d,J＝44.8Hz,4H),6.72(d,J＝41.2Hz,2H),6.30(s,1H),3.79(s,3H),3.29(s,2H),3.12(s,2H),2.99(s,2H),2.73(s,3H),2.35(s,6H),2.22(s,6H)。
实施例32：(E)-N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基)-4-甲氧基苯基}-4-哌啶-1-基}丁-2-烯酰胺((E)-N-(5-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)-4-(piperidin-1-yl)but-2-enamide)(化合物70)的制备(按照方案六线路制备)
将N4-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-1)(145毫克，0.336毫摩尔，1.0当量)溶解在乙腈((30毫升)中，依次加入N,N-二异丙基乙胺(87毫克，0.672毫摩尔，2.0当量)，HATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯)(128毫克，0.336毫摩尔，1.0当量)和(E)-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯酸(602-70)(100毫克，粗品)并在室温下搅拌反应两个小时。反应结束后加入饱和碳酸钠水溶液终止反应，用二氯甲烷(3×80毫升)萃取，合并有机相并用无水硫酸钠干燥，浓缩并通过柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇60/1至15/1)纯化，得到灰色固体(E)-N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-2-{[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基)-4-甲氧基苯基}-4-哌啶-1-基}丁-2-烯酰胺(60毫克，收率：30.6％)。
该化合物70的表征数据为：MS(ESI):m/z583[M+H]+。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.92(s,1H),8.57(s,1H),8.42(m,3H),8.13(d,J＝3.6Hz,1H),7.58(d,J＝7.4Hz,1H),7.13(m,3H),7.03(s,1H),6.77(d,J＝3.5Hz,1H),6.69(m,1H),6.36(s,1H),3.79(s,3H),3.16(s,2H),3.04(s,2H),2.71(s,3H),2.42(s,12H),1.54(s,4H),1.40(s,2H)。
实施例33：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-丁炔酰胺(N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)but-2-ynamide)(化合物73)的制备(按照方案六线路制备)。
合成方法如实施例28，仅是将巴豆酸(602-66)替换为2-丁炔酸(604-73)(21毫克，0.25毫摩尔，1.2当量),得到微黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-丁炔酰胺(48毫克，收率：46％)。
该化合物73的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 498[M+H]+。熔点：189.7-191.8摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),8.60(s,1H),8.39(m,3H),8.11(d,J＝3.6Hz,1H),7.59(d,J＝7.6Hz,1H),7.13(m,4H),6.77(d,J＝3.5Hz,1H),3.77(s,3H),2.90(s,2H),2.75(s,3H),2.31(d,J＝24.4Hz,8H),2.03(s,3H)。
实施例34：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-戊炔酰胺(N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)pent-2-ynamide)(化合物74)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例28，仅是将巴豆酸(602-66)替换为2-戊炔酸(25毫克，0.25毫摩尔，1.2当量),得到微黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((2-(二甲胺基)乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)-2-戊炔酰胺(27毫克，收率：25％)。
该化合物74的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 512[M+H]+。熔点：149.4-151.7摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.92(s,1H),8.60(s,1H),8.39(d,J＝5.6Hz,3H),8.11(d,J＝3.6Hz,1H),7.59(d,J＝7.6Hz,1H),7.13(m,4H),6.77(d,J＝3.5Hz,1H),3.78(s,3H),2.96(s,2H),2.74(s,3H),2.41(dt,J＝27.1,13.5Hz,8H),1.24(s,2H),1.16(t,J＝7.5Hz,3H)。
实施例35：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((3-二甲胺基吖啶-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺N-(5-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-2-(3-(dimethylamino)azetidin-1-yl)-4-methoxyphenyl)acrylamide(化合物77)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-4-(3-二甲胺基吖啶-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺(403-C-77)(179毫克，0.416毫摩尔，1.0当量)，得到米黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-((3-二甲胺基吖啶-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(45毫克，收率：22％)。
该化合物77的表征数据为：LCMS(ESI):m/z484[M+H]+；熔点：81-83摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.41(s,2H),8.34(d,J＝5.6Hz,1H),8.07(d,J＝3.6Hz,1H),7.58(d,J＝7.5Hz,1H),7.46(s,1H),7.17(dt,J＝19.2,7.2Hz,2H),7.06(d,J＝5.7Hz,1H),6.76(d,J＝3.5Hz,1H),6.47(dd,J＝17.1,10.2Hz,1H),6.20(m,2H),5.66(d,J＝11.8Hz,1H),3.97(t,J＝7.0Hz,2H),3.78(s,3H),3.59(t,J＝6.6Hz,2H),3.08(m,1H),2.09(s,6H)。
实施例36：(S)-N-(5-((4-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺((S)-N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-(3-(dimethylamino)pyrrolidin-1-yl)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物78)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为(S)-N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺(403-C-78)(130毫克，0.293毫摩尔，1当量)，得到黄色固体(S)-N-(5-((4-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(100毫克，收率：68.49％)。
该化合物78的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 498[M+H]+；熔点：161-162摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.32(s,1H),8.43(s,2H),8.35(d,J＝5.6Hz,1H),8.08(d,J＝3.5Hz,1H),7.58(d,J＝8.5Hz,2H),7.16(d,J＝3.6Hz,2H),7.07(d,J＝5.7Hz,1H),6.76(d,J＝3.4Hz,1H),6.51(m,2H),6.17(d,J＝17.0Hz,1H),5.66(d,J＝10.3Hz,1H),3.79(s,3H),3.39(dd,J＝15.9,9.0Hz,1H),3.22(dd,J＝16.5,7.4Hz,3H),2.71(s,1H),2.18(s,6H),2.09(s,1H),1.74(dd,J＝20.0,10.1Hz,1H)。
实施例37：(R)-N-(5-((4-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺((R)-N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-(3-(dimethylamino)pyrrolidin-1-yl)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物79)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为(R)-N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-4-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-6-甲氧基苯-1,3-二胺(403-C-79)(135毫克，0.305毫摩尔，1当量)，得到黄色固体(R)-N-(5-((4-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-2-(3-(二甲胺基)四氢吡咯-1-基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(69毫克，收率：56.67％)。
该化合物79的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 498[M+H]+；熔点：161-162摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.32(s,1H),8.43(s,2H),8.35(d,J＝5.6Hz,1H),8.08(d,J＝3.6Hz,1H),7.58(d,J＝9.0Hz,2H),7.16(m,2H),7.07(d,J＝5.7Hz,1H),6.76(d,J＝3.5Hz,1H),6.51(m,2H),6.17(d,J＝17.1Hz,1H),5.67(d,J＝10.3Hz,1H),3.79(s,3H),3.39(dd,J＝15.9,9.2Hz,1H),3.22(dd,J＝16.3,7.3Hz,3H),2.71(m,1H),2.18(s,6H),2.09(s,1H),1.74(dd,J＝20.4,9.6Hz,1H)。
实施例38：N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-4-甲氧基-2-{甲基[2-(吡咯烷-1-基)乙基]氨基}苯基}丙烯酰胺(N-(5-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-(methyl(2-(pyrrolidin-1-yl)ethyl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物80)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基-N1-甲基-N1-[2-(吡咯烷-1-基)乙基]苯基-1,2,4-三胺(403-B-80)(169毫克,0.369毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-4-甲氧基-2-{甲基[2-(吡咯烷-1-基)乙基]氨基}苯基}丙烯酰胺(25毫克,收率：13.3％)。
该化合物80的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 512[M+H]+；熔点：151-153摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),8.59(s,1H),8.48(s,1H),8.39(d,J＝5.6Hz,2H),8.13(d,J＝3.7Hz,1H),7.58(d,J＝7.6Hz,1H),7.11(ddd,J＝30.8,17.7,11.4Hz,4H),6.76(d,J＝3.6Hz,1H),6.45(m,1H),6.19(d,J＝16.9Hz,1H),5.73(m,1H),3.78(s,3H),3.00(s,2H),2.74(s,3H),2.50(d,J＝1.7Hz,6H),1.73(s,4H)。
实施例39：N-{5-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基氨基)-4-甲氧基-2-[甲基-(2-吗啉-4-基-乙基)-氨基]-苯基}-丙烯酰胺(N-{5-(4-Indol-1-yl-pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-[methyl-(2-morpholin-4-yl-ethyl)-amino]-phenyl}-acrylamide)(化合物82)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基)-5-甲氧基-N1-甲基-N1-(2-吗啉-4-基-乙基)-苯基-1,2,4-三胺(403-B-82)(0.12克，0.25毫摩尔)，得到黄色固体N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基氨基]-4-甲氧基-2-{甲基[2-(吡咯烷-1-基)乙基]氨基}苯基}丙烯酰胺(25毫克,收率：13.3％)。
该化合物82的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 528[M+H]+；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.29(s,1H),8.58(s,1H),8.39(m,3H),8.12(d,J＝3.7Hz,1H),7.58(d,J＝7.2Hz,1H),7.12(m,3H),7.01(s,1H),6.76(d,J＝3.6Hz,1H),6.61(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.19(dd,J＝17.0,1.7Hz,1H),5.73(d,J＝10.6Hz,1H),3.79(s,3H),3.55(m,4H),3.03(t,J＝6.6Hz,2H),2.74(s,3H),2.41(t,J＝6.6Hz,2H),2.34(s,4H)。
实施例40：N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺N-(5-((4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxy-2-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl)acrylamide(化合物84)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N1-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-6-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯-1,3-二胺(403-C-84)(180毫克，0.41毫摩尔，1.0当量)，得到浅黄色固体N-(5-((4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)胺基)-4-甲氧基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)丙烯酰胺(40毫克，收率：20％)。
该化合物84的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 484[M+H]+；熔点：204-205摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.03(s,1H),8.63(s,1H),8.39(t,J＝8.8Hz,2H),8.21(s,1H),8.12(d,J＝3.5Hz,1H),7.58(d,J＝7.3Hz,1H),7.14(m,3H),6.90(s,1H),6.77(d,J＝3.4Hz,1H),6.62(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.18(d,J＝17.1Hz,1H),5.71(d,J＝10.3Hz,1H),3.78(s,3H),2.91(s,4H),2.58(s,4H),2.28(s,3H)。
实施例41：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基-5-(4-(5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺基)-苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxy-5-((4-(5-methoxy-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylami de)(化合物20)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N4-(4-(5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-20)(132毫克，0.286毫摩尔，1当量),得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基-5-(4-(5-甲氧基-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺基)-苯基)丙烯酰胺(90毫克，收率：61.05％)。
该化合物20的表征数据为：LCMS(ESI):m/z517[M+H]+。熔点177-178摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.05(s,1H),8.71(s,1H),8.61(s,1H),8.49(s,1H),8.40(d,J＝5.0Hz,1H),8.32(s,1H),7.14(d,J＝5.1Hz,1H),7.05(s,1H),6.74(s,1H),6.43(m,2H),6.18(d,J＝16.8Hz,1H),5.72(d,J＝9.8Hz,1H),3.87(s,3H),3.76(s,3H),2.91(s,2H),2.75(s,3H),2.34(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例42：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(5-fluoro-3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物50)的制备(按照方案七线路制备)
步骤42a：5-氟N1-甲基苯-1,2-二胺(5-fluoro-N1-methylbenzene-1,2-diamine)(中间体501-50)的制备：将2,4-二氟硝基苯(10克，62.9毫摩尔，1.0当量)溶于四氢呋喃(150毫升)，冰浴条件下往里快速滴加40％甲胺水溶液(9.8克，125.8毫摩尔，2.0当量)。室温反应4小时，液质检测反应完全，往里加入石油醚(50毫升)和乙酸乙酯(50毫升)，用水洗、2摩尔每升盐酸洗、碳酸氢钠水溶液洗、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到黄色固体产物5-氟N-甲基-2-硝基苯胺(10.7克，收率：100％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z 171[M+H]+。上述得到的化合物(10.5克，61.8毫摩尔，1.0当量)，铁粉(17.3克，309毫摩尔，5.0当量)，氯化铵(16.5克，309毫摩尔，5.0当量)和水(50毫升)溶于乙醇(200毫升)，放到85℃油浴中反应3小时。液质检测反应完全，将反应液冷却到室温，倒入200毫升水中，再加入200毫升二氯甲烷，搅拌5分钟，垫硅藻土过滤，分液。有机相用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，得到红色液体产物5-氟N1-甲基苯-1,2-二胺(8.5克，收率：98.2％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z 141[M+H]+。
步骤42b：6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(6-fluoro-1-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体502-50)的制备：将5-氟N1-甲基苯-1,2-二胺(501-50)(4.2克，30.0毫摩尔，1.0当量)溶于二氯甲烷(100毫升)，加入三乙胺(6.1克，60.0毫摩尔，2.0当量)，氮气保护，冰浴冷却到0℃左右，往里滴加三光气(3.1克，10.5毫摩尔，0.35当量)溶于二氯甲烷(50毫升)溶液，温度控制小于5度。滴加完后，冰浴控制温度0℃左右反应半小时，液质检测反应完全，加入30毫升甲醇，搅拌10分钟后，倒入100毫升水中，分液，水相用二氯甲烷/甲醇＝3/1(100毫升)萃取，有机相合并，无水硫酸钠干燥，旋干，加入100毫升二氯甲烷析晶，过滤，滤饼二氯甲烷洗涤，真空干燥得到粉色固体产物6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(4.2克，收率：84.0％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z 167[M+H]+。
步骤42c：1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-chloropyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体503-50)的制备:将6-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-50)(7.0克，42.2毫摩尔，1.0当量)和2,4-二氯嘧啶(9.4克，63.3毫摩尔，1.5当量)溶于DMF(200毫升)，往里加入碳酸铯(20.7克，63.3毫摩尔，1.5当量)，水浴冰水浴控制温度小于20℃反应4小时。倒入600毫升水中，搅拌30分钟(冷却到室温)，过滤，残留物用水洗，200毫升石油醚洗涤，200毫升甲醇洗，收集固体，用石油醚/乙酸乙酯＝2/1(150毫升)加热打浆，冷却到室温完全析晶，过滤，滤饼用石油醚/乙酸乙酯＝2/1溶液洗涤，干燥得到白色固体1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(10.1克，收率：86.3％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z 279[M+H]+。
步骤42d：1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-nitrophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体505-A-50)的制备:将1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-50)(10克，35.9毫摩尔，1.0当量)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(103)(7.3克，39.5毫摩尔，1.1当量)溶于异丙醇(400毫升)溶液，往里滴加浓盐酸(8毫升)，升温到85℃反应48小时。液质检测反应完全，冷却到室温，加入100毫升水，再加入2摩尔每升的氢氧化钠水溶液调节PH>8，搅拌10分钟，过滤，滤饼用甲醇洗、乙酸乙酯洗，真空干燥得到淡黄色固体产物1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(12.0克，收率：77.9％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z 429[M+H]+。上述得到的化合物(6.5克，15.2毫摩尔，1.0当量)，N,N,N-三甲基乙二胺(3.1克，30.4毫摩尔，2.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(5.9克，45.6毫摩尔，3.0当量)溶于100毫升四氢呋喃，再加入N-甲基吡咯烷酮(20毫升)。将反应体系加热至回流，搅拌反应18小时。冷却至室温，加入100毫升乙酸乙酯后用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸镁干燥，旋干溶剂得到黄色粗品，粗品用甲醇打浆，过滤，滤饼用甲醇洗涤得到黄色固体1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(7.0克，收率：90.9％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z 511[M+H]+。
步骤42e：1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-methyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-50)的制备:将1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(505-A-50)(7.0克，13.7毫摩尔，1.0当量)，铁粉(3.8克，68.5毫摩尔，5.0当量)，氯化铵(3.7克，68.5毫摩尔，5.0当量)和水(20毫升)溶于乙醇(100毫升)，升温到85℃反应3小时。液质检测反应完全,得1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z481[M+H]+。
步骤42f：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(5-fluoro-3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)ami no)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物50)的制备:方法1：上述得到的1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-50)反应液冰盐浴降温冷却到0℃左右后，滴加3-氯丙酰氯(3.5克，27.4毫摩尔，2.0当量)溶于四氢呋喃(20毫升)溶液。滴加完后，温度控制在0℃左右搅拌30分钟。液质检测未完全反应，加入N,N-二异丙基乙胺(5.3克，41.1毫摩尔，3.0当量)，搅拌10分钟后，补加3-氯丙酰氯(3.5克，27.4毫摩尔，2.0当量)溶于四氢呋喃(20毫升)溶液。滴加完后，温度控制在0℃左右搅拌30分钟。液质检测反应完全，加入200毫升水和200毫升二氯甲烷，搅拌10分钟，布氏漏斗中垫硅藻土过滤，分液，水相再用100毫升二氯甲烷萃取，合并有机相，旋干溶剂得到灰白色残留物。残留物用100毫升乙酸乙酯打浆，过滤，乙酸乙酯洗涤，得到白色中间体。将中间体溶于100毫升乙腈，再往里加入10毫升三乙胺，回流反应18小时。液质检测反应完全，冷却到室温，加入100毫升水，搅拌1小时使固体充分析出，过滤，滤饼用水洗、石油醚洗，把滤饼溶于50毫升二氯甲烷，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干溶剂得到白色固体产物N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(4.7克，收率：75.1％)。方法2：将1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-50)(100毫克，0.21毫摩尔，1当量)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(103毫克，0.27毫摩，1.3当量)和三乙胺(64毫克，0.63毫摩尔，3当量)溶于二氯甲烷(20毫升)中，将丙烯酸(18毫克，0.252毫摩尔，1.2当量)溶于二氯甲烷(1毫升)缓慢滴入反应，搅拌2小时后，将反应液浓缩，通过硅胶柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝100/1)分离提纯得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(80毫克，收率：71.4％)
该化合物50的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 535[M+H]+。熔点：208-210摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.01(s,1H),8.72(s,1H),8.42(m,2H),8.11(s,1H),7.66(d,J＝5.6Hz,1H),7.20(dd,J＝8.9,2.6Hz,1H),7.04(s,1H),6.65(t,J＝8.2Hz,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.18(dd,J＝17.0,1.9Hz,1H),5.72(dd,J＝10.2,1.7Hz,1H),3.75(d,J＝4.4Hz,3H),3.34(d,J＝8.6Hz,3H),2.91(t,J＝5.9Hz,2H),2.75(s,3H),2.34(dd,J＝11.2,5.4Hz,2H),2.20(s,6H)。
实施例43：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基-5-(4-(3-(3-甲基-2-丁烯)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxy-5-(4-(3-(3-methylbut-2-enyl)-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imi dazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)phenyl)acrylamide)(化合物62)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例24，仅是将其中1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-55)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-(3-甲基-2-丁烯)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-62)(110毫克，0.2毫摩尔，1.0当量)，得到米黄色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基-5-(4-(3-(3-甲基-2-丁烯)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(60毫克，收率：49％)。
该化合物62的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 571[M+H]+。熔点：187-188摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),8.70(s,1H),8.42(d,J＝5.5Hz,2H),8.10(s,1H),7.67(d,J＝5.4Hz,1H),7.13(d,J＝10.0Hz,2H),7.04(s,1H),6.88(s,1H),6.39(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.18(d,J＝16.8Hz,1H),5.72(d,J＝10.1Hz,1H),5.24(s,1H),4.47(d,J＝6.2Hz,2H),3.75(s,3H),2.90(s,2H),2.74(s,3H),2.37(d,J＝28.5Hz,2H),2.21(s,6H),1.80(d,J＝20.1Hz,3H),1.68(s,3H)。
实施例44：N-(5-(4-(3-环丙甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(3-(cyclopropylmethyl)-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物63)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例24，仅是将其中1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-55)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(506-A-63)(529毫克，1.05毫摩尔，1当量)，得到米黄色固体N-(5-(4-(3-环丙甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(300毫克，收率：51.4％)。
该化合物63的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 557[M+H]+。熔点：68-72摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.70(s,1H),8.43(d,J＝5.6Hz,2H),8.10(d,J＝7.1Hz,1H),7.67(d,J＝5.6Hz,1H),7.30(d,J＝7.9Hz,1H),7.15(t,J＝7.7Hz,1H),7.05(s,1H),6.89(t,J＝7.8Hz,1H),6.39(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.18(d,J＝16.9Hz,1H),5.72(d,J＝10.3Hz,1H),3.77(m,5H),2.91(t,J＝5.5Hz,2H),2.75(s,3H),2.34(s,2H),2.21(s,6H),0.47(m,2H),0.40(m,2H)。
实施例45：(E)-N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺基]-2-{[2-(二甲基胺基)乙基](甲基)胺基}-4-甲基苯}-4-甲氧基丁-2-烯酰胺((E)-N-(5-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)-4-methoxybut-2-enamide)(化合物71)的制备(按照方案六线路制备)
将化合物N4-(4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-1)(200毫克，0.464毫摩尔，1.0当量)溶解于乙腈(50毫升)中，然后加入N,N-二异丙基乙基胺(120毫克，0.928毫摩尔，2当量)、(E)-4-溴-2-丁烯酸(602-71)(92毫克，0.5568毫摩尔，1.2当量)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(211毫克，0.5568毫摩尔，1.2当量)，然后在室温下搅拌4个小时。当反应结束时，加入碳酸钠水溶液，再用二氯甲烷(100毫升×3)萃取，将有机层合并，真空浓缩。将残余物通过柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇50/1至30/1)纯化，得到黄色油状物(E)-N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺基]-2-{[2-(二甲基胺基)乙基](甲基)胺基}-4-甲基苯基}-4-溴丁-2-烯酰胺(200毫克,收率：74.5％)。MS(ESI):m/z578(M+1)+.将上述所得的化合物(200毫克，0.346毫摩尔，1.0当量)溶解在甲醇(25毫升)中，加入甲醇钠(38毫克，0.692毫摩尔，2.0当量)，然后在室温下搅拌过夜。当反应结束时，加入水，再用二氯甲烷(100毫升x 3)萃取，将有机层合并，真空浓缩。将残余物通过柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇50/1)纯化，得到黄色固体(E)-N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-胺基]-2-{[2-(二甲基胺基)乙基](甲基)胺基}-4-甲基苯}-4-甲氧基丁-2-烯酰胺(40毫克，收率：21％)。
该化合物71的表征数据为：LCMS(ESI):m/z530[M+H]+。熔点：193-200摄氏度；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ9.51(s,1H),8.48(d,J＝5.6Hz,1H),8.24(d,J＝8.3Hz,1H),8.12(s,1H),7.62(d,J＝7.4Hz,2H),7.28(m,3H),7.21(t,J＝7.2Hz,1H),6.97(m,2H),6.74(m,2H),4.16(d,J＝2.8Hz,2H),3.90(s,3H),3.43(s,3H),3.08(s,2H),2.64(m,11H)。
实施例46：N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基胺基]-4-甲氧基-2-{甲基[2-(哌啶-1-基)乙基]胺基}苯基}丙烯酰胺(N-(5-(4-(1H-indol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxy-2-(methyl(2-(piperidin-1-yl)ethyl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物81)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基-N1-甲基-N1-[2-(哌啶-1-基)乙基]苯-1,2,4-三胺(403-B-81)(150毫克,0.318毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体N-{5-[4-(1H-吲哚-1-基)嘧啶-2-基胺基]-4-甲氧基-2-{甲基[2-(哌啶-1-基)乙基]胺基}苯基}丙烯酰胺(25毫克,收率：10.3％)。
该化合物81的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 526[M+H]+；熔点：131-136摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.39(m,3H),8.12(d,J＝3.7Hz,1H),7.58(d,J＝7.2Hz,1H),7.12(m,3H),7.00(s,1H),6.76(d,J＝3.6Hz,1H),6.59(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.19(m,1H),5.73(m,1H),3.79(s,3H),3.03(d,J＝5.1Hz,2H),2.72(s,3H),2.35(m,6H),1.49(s,4H),1.36(d,J＝19.9Hz,2H)。
实施例47：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-(4-(5-fluoro-3-isopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-ylami no)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物91)的制备(按照方案七线路制备)
步骤47a：5-氟N1-异丙基苯-1,2-二胺(5-fluoro-N1-isopropylbenzene-1,2-diamine)(中间体501-91)的制备：将2,4-二氟硝基苯(10克，62.9毫摩尔，1.0当量)，异丙胺(4.8克，81.8毫摩尔，1.5当量)和碳酸钾(17.4克，125.8毫摩尔，2.0当量)溶于DMF(150毫升)，室温反应18小时。液质检测反应完全，倒入400毫升水中，搅拌30分钟充分析晶，过滤，滤饼用水洗，收集滤饼真空干燥得到黄色固体产物5-氟N-异丙基-2-硝基苯胺胺(11.5克，收率：92.4％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z199[M+H]+。将上述得到的化合物(6.1克，30.8毫摩尔，1.0当量)，铁(8.6克，154毫摩尔，5.0当量)，氯化铵(8.2克，154毫摩尔，3.0当量)和水(20毫升)溶于乙醇(100毫升)，氮气保护条件下，升温到85℃反应3小时。液质检测反应完全，将反应液冷却到室温，倒入200毫升水中，再加入200毫升二氯甲烷，搅拌5分钟，垫硅藻土过滤，分液。有机相用无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，得到红色液体产物5-氟N1-异丙基苯-1,2-二胺(4.5克，收率：86.5％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z169[M+H]+。
步骤47b：6-氟-1-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(6-fluoro-1-isopropyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体502-91)的制备：将5-氟N1-异丙基苯-1,2-二胺(501-91)(4.5克，26.8毫摩尔，1.0当量)溶于二氯甲烷(100毫升)，加入三乙胺(5.5克，53.6毫摩尔，2.0当量)，氮气保护，冰浴冷却到0℃左右，往里滴加三光气(2.8克，9.38毫摩尔，0.35当量)溶于二氯甲烷(50毫升)溶液，温度控制小于5℃。滴加完后，冰浴控制温度0℃左右反应半小时，液质检测反应完全，往里加入10毫升甲醇搅拌10分钟淬灭反应。反应液用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸镁干燥，旋干得到棕色固体产物6-氟-1-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(4.6克，收率：88.5％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z195[M+H]+。
步骤47c：1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-chloropyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-isopropyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体503-91)的制备:将6-氟-1-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(502-91)(4.6克，23.7毫摩尔，1.0当量)和2,4-二氯嘧啶(5.3克，35.6毫摩尔，1.5当量)溶于DMF(80毫升)，往里加入碳酸铯(11.6克，35.6毫摩尔，1.5当量)，室温反应过夜。倒入500毫升水中，搅拌30分钟(冷却到室温)，过滤，残留物用水洗，200毫升石油醚洗涤，收集固体，加入100毫升甲醇打浆，过滤，滤饼用甲醇洗，收集固体真空干燥得到粉红色产物1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(6.1克，收率：83.6％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z307[M+H]+。
步骤47d：1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxy-5-nitrophenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-isopropyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体505-A-91)的制备:将1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(503-91)(2.8克，9.13毫摩尔，1.0当量)和4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺(103)(1.87克，10毫摩尔，1.1当量)溶于异丙醇(100毫升)溶液，往里滴加浓盐酸(2毫升)，升温到85℃反应18小时。液质检测反应完全，冷却到室温，过滤，滤饼用石油醚(100毫升)洗涤，收集固体，真空干燥得到土色固体产物1-(2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(3.4克，收率：81.0％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z457[M+H]+。上述得到的化合物(3.4克，7.46毫摩尔，1.0当量)，N,N,N-三甲基乙二胺(1.5克，14.92毫摩尔，2.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(2.9克，22.38毫摩尔，3.0当量)溶于80毫升四氢呋喃。将反应体系加热至回流，搅拌反应18小时。冷却至室温，加入80毫升乙酸乙酯后用水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸镁干燥，旋干溶剂，得到黄色固体1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(3.7克，收率：92.5％)。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z539[M+H]+。
步骤47e：1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1-(2-((5-amino-4-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-2-methoxyphenyl)amino)pyrimidin-4-yl)-5-fluoro-3-isopropyl-1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-one)(中间体506-A-91)的制备:将1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-硝基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(505-A-91)(3.7克，6.88毫摩尔，1.0当量)，铁(1.9克，34.4毫摩尔，5.0当量)，氯化铵(1.8克，34.4毫摩尔，3.0当量)和水(12毫升)溶于乙醇(60毫升)，升温到85℃反应3小时。液质检测反应完全，得1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮。该化合物表征数据为：LCMS(ESI):m/z509[M+H]+。
步骤47f：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-(4-(5-fluoro-3-isopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物91)的制备:
方法1：上述得到的1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)反应液冰盐浴降温冷却到0℃左右后，滴加3-氯丙酰氯(1.8克，13.76毫摩尔，2.0当量)溶于四氢呋喃(10毫升)。滴加完后，温度控制在0℃左右搅拌30分钟。液质检测完全反应，加入100毫升水和100毫升二氯甲烷，搅拌10分钟，布氏漏斗中垫硅藻土过滤，分液，水相再用50毫升二氯甲烷萃取，合并有机相，旋干溶剂得到乳白色残留物。残留物用50毫升乙酸乙酯打浆，过滤，乙酸乙酯洗涤，得到白色中间体。将中间体溶于50毫升乙腈，再往里加入5毫升三乙胺，回流反应18小时。液质检测反应完全，冷却到室温，倒入300毫升水中，搅拌1小时使固体充分析出，过滤，滤饼用水洗，把滤饼溶于100毫升二氯甲烷，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到白色固体产物N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(2.9克，收率：75.1％)。方法2：将1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)(400毫克，0.787毫摩尔，1.0当量)溶解于50毫升二氯甲烷中，加入三乙胺(0.328毫升，2.36毫摩尔，3.0当量)。冷却至-70℃，滴加溶于10毫升二氯甲烷的丙烯酰氯(601-1)(109毫克，1.18毫摩尔，1.5当量)溶液，反应15分钟。加入甲醇淬灭反应，然后用二氯甲烷萃取。无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇400/1至150/1)得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-氟-3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(224毫克，收率：50％)。
该化合物91的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 563[M+H]+。熔点：225-227摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.01(s,1H),8.70(s,1H),8.41(m,2H),8.11(s,1H),7.62(d,J＝5.6Hz,1H),7.32(d,J＝9.3Hz,1H),7.04(s,1H),6.65(t,J＝8.9Hz,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.18(d,J＝16.8Hz,1H),5.72(d,J＝10.3Hz,1H),4.64(m,1H),3.76(s,3H),2.90(d,J＝5.2Hz,2H),2.74(s,3H),2.34(s,2H),2.20(s,6H),1.47(d,J＝6.9Hz,6H)。
实施例48：N-{5-[4-(3-环丙基-5-氟-2-氧-2,3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基胺基]-2-{[2-(二甲胺基)乙基](甲基)胺基}-4-甲氧基苯基}丙烯酰胺N-(5-(4-(3-cyclopropyl-5-fluoro-2-oxo-2,3-dihydrobenzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide(化合物98)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法2，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-{2-{5-胺基-4-{[2-(二甲胺基)乙基](甲基)胺基}-2-甲氧基苯胺基}嘧啶-4-基}-3-环丙基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-98)(868毫克，1.72毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体N-{5-[4-(3-环丙基-5-氟-2-氧-2,3-二氢苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-基胺基]-2-{[2-(二甲胺基)乙基](甲基)胺基}-4-甲氧基苯基}丙烯酰胺为黄色固体(300毫克,31.1％)。
该化合物98的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 561[M+H]+。熔点：181-184摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.01(s,1H),8.69(s,1H),8.41(m,2H),8.08(s,1H),7.62(d,J＝5.6Hz,1H),7.11(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.04(s,1H),6.66(t,J＝8.4Hz,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.18(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.73(dd,J＝14.6,4.4Hz,1H),3.75(s,3H),2.91(t,J＝5.2Hz,3H),2.74(s,3H),2.34(s,2H),2.20(s,6H),1.07(m,2H),0.93(m,2H)。
实施例49：N-(5-((4-(5-氯-3-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(5-chloro-3-cyclopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethyl amino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物99)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法2，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-((5-氨基-4-((2-(二甲氨基)乙基)甲基)氨基)-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)-5-氯-3-环丙基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(506-A-99)(160毫克，0.31毫摩尔)，得到黄色固体N-(5-((4-(5-氯-3-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(40毫克,23％)。
该化合物99的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 577[M+H]+。熔点：124-126摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),8.70(s,1H),8.42(m,2H),8.04(s,1H),7.60(d,J＝5.2Hz,1H),7.26(s,1H),7.05(s,1H),6.87(d,J＝8.1Hz,1H),6.39(dd,J＝16.6,10.3Hz,1H),6.18(d,J＝16.8Hz,1H),5.72(d,J＝9.9Hz,1H),3.75(s,3H),2.91(s,3H),2.74(s,3H),2.34(s,2H),2.21(s,6H),1.07(d,J＝5.5Hz,2H),0.93(s,2H)。
实施例50：N-(5-(4-(5-氰基-3-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(5-cyano-3-cyclopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物101)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法2，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-氰基(506-A-101)(200毫克，0.39毫摩尔，1.0当量)，得到淡黄色固体N-(5-(4-(5-氰基-3-环丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(130毫克，收率：56％)。
该化合物101的表征数据为：LCMS(ESI):m/z568[M+H]+。熔点：177-179摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.92(s,1H),8.77(s,1H),8.47(d,J＝5.5Hz,1H),8.30(s,1H),8.21(s,1H),7.68(s,1H),7.57(d,J＝5.5Hz,1H),7.35(d,J＝7.2Hz,1H),7.03(s,1H),6.56(s,1H),6.19(d,J＝16.8Hz,1H),5.72(d,J＝10.3Hz,1H),3.78(s,3H),2.97(m,3H),2.65(m,5H),2.36(s,6H),1.09(d,J＝5.8Hz,2H),0.95(s,2H)。
实施例51：N-(5-(4-(3-环丙基-5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((4-(3-cyclopropyl-5-methoxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物102)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法2，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙基-5-甲氧基1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(506-A-102)(420毫克，0.81毫摩尔，1.0当量)，得到米黄色固体N-(5-(4-(3-环丙基-5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(250毫克，收率：54％)。
该化合物102的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 573[M+H]+。熔点：144-146摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.63(s,1H),8.39(m,2H),7.96(d,J＝8.5Hz,1H),7.64(d,J＝5.6Hz,1H),7.05(s,1H),6.80(d,J＝2.3Hz,1H),6.39(m,2H),6.18(dd,J＝16.9,1.4Hz,1H),5.72(d,J＝11.1Hz,1H),3.75(d,J＝7.1Hz,6H),2.89(m,3H),2.75(s,3H),2.34(t,J＝5.7Hz,2H),2.20(s,6H),1.07(q,J＝6.9Hz,2H),0.92(m,2H)。
实施例52：N-(5-(4-(3-环丙甲基-5-氟-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-(4-(3-(cyclopropylmethyl)-5-fluoro-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-ylamino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物105)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法2，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-环丙甲基-5-氟-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-105)(520毫克，1毫摩尔，1.0当量)，得到米黄色固体N-(5-(4-(3-环丙甲基-5-氟-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(180毫克，收率：31％)。
该化合物105的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 563[M+H]+。熔点：168-169摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.02(s,1H),8.72(s,1H),8.42(m,2H),8.11(s,1H),7.65(d,J＝4.9Hz,1H),7.31(d,J＝7.8Hz,1H),7.05(s,1H),6.66(s,1H),6.40(dd,J＝16.3,10.2Hz,1H),6.18(d,J＝16.9Hz,1H),5.72(d,J＝9.6Hz,1H),3.76(s,5H),2.91(s,2H),2.75(s,3H),2.34(s,2H),2.20(s,6H),1.23(s,1H),0.45(m,4H)。
实施例53：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methyl-5-((4-(3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物118)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法2，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-118)(72毫克，0.16毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(15毫克，收率：18.7％)。
该化合物118的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 501[M+H]+。熔点：208-210摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.11(s,1H),9.06(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,1H),8.33(s,1H),7.96(s,1H),7.69(d,J＝5.6Hz,1H),7.16(m,3H),6.80(d,J＝7.0Hz,1H),6.40(dd,J＝16.8,10.3Hz,1H),6.20(d,J＝16.9Hz,1H),5.74(d,J＝11.2Hz,1H),3.35(s,3H),2.87(s,2H),2.72(s,3H),2.36(s,2H),2.18(m,9H)。
实施例54：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-(2-甲氧基-乙氧基)-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-苯并咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(N-{2-[(2-Dimethylamino-ethyl)-methyl-amino]-4-(2-methoxy-ethoxy)-5-[4-(3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-benzoimidazol-1-yl)-pyrimidin-2-ylamino]-phenyl}-acrylamide)(化合物120)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例24，仅是将其中1-(2-((5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯基)胺基)-5-氟嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-55)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-(2-甲氧基-乙氧基)-苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(506-A-120)(250毫克，0.49毫摩尔，1.0当量)，得到白色蜡状固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-(2-甲氧基-乙氧基)-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-苯并咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(28毫克，收率：10.2％)。
该化合物120的表征数据为：LCMS(ESI):m/z561[M+H]+。熔点：71-78摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.60(s,1H),8.52(s,1H),8.45(d,J＝5.6Hz,1H),8.10(d,J＝7.4Hz,1H),7.71(d,J＝5.6Hz,1H),7.17(m,2H),7.07(s,1H),6.90(t,J＝7.6Hz,1H),6.39(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.18(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.72(m,1H),4.08(m,2H),3.52(m,2H),3.38(d,J＝9.6Hz,3H),3.19(s,3H),2.89(t,J＝5.7Hz,2H),2.72(s,3H),2.33(s,2H),2.21(s,6H)。
实施例55：N-(5-(4-(5-氯-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺N-(5-((4-(5-chloro-1H-pyrrolo[3,2-b]pyridin-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide(化合物124)的制备(按照方案六线路制备)
合成方法如实施例6，仅是将其中N4-(4-(1H-吲哚-1-基)-5-三氟甲基嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(403-A-5)替换为N4-(4-(5-氯-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-基)-N1-(2-二甲胺乙基)-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺(200毫克，0.43毫摩尔，1.0当量),米黄色固体N-(5-(4-(5-氯-1H-吡咯[3,2-b]吡啶-1-基)嘧啶-2-胺基)-2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(140毫克，收率：63％)。
该化合物124的表征数据为：LCMS(ESI)m/z521[M+H]+。熔点：127～129摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO)δ10.12(s,1H),9.03(s,1H),8.37(d,J＝5.6Hz,2H),8.29(s,1H),8.08(d,J＝3.6Hz,1H),7.56(d,J＝7.7Hz,1H),7.24(s,1H),7.10(m,2H),6.98(t,J＝7.5Hz,1H),6.75(d,J＝3.6Hz,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.19(dd,J＝16.9,1.7Hz,1H),5.74(dd,J＝10.2,1.6Hz,1H),2.89(t,J＝5.3Hz,2H),2.74(s,3H),2.36(s,2H),2.20(d,J＝23.4Hz,9H).
实施例56：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物125)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法2，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(3-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(506-A-125)(110毫克，0.26毫摩尔，1当量)，得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(50毫克，0.10毫摩尔，收率：38.5％)。
该化合物125的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 487[M+H]+。熔点：190～193摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.18(s,1H),9.63(s,1H),8.51(dd,J＝17.1,9.4Hz,3H),7.76(d,J＝5.6Hz,1H),7.53(d,J＝8.2Hz,1H),7.25(m,3H),7.07(t,J＝7.0Hz,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.1Hz,1H),6.24(d,J＝16.8Hz,1H),5.77(d,J＝10.2Hz,1H),3.39(s,3H),2.84(t,J＝5.5Hz,2H),2.66(d,J＝23.7Hz,3H),2.29(t,J＝5.1Hz,2H),2.22(d,J＝12.1Hz,6H).
实施例57：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲基苯基)丙烯酰胺N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(3-isopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methylphenyl)acrylamide(化合物127)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法1，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(506-A-127)(360毫克，0.77毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲基苯基)丙烯酰胺(15毫克，收率：8％)。
该化合物127的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 529[M+1]+。熔点：179～181摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.12(s,1H),9.04(s,1H),8.38(d,J＝43.5Hz,2H),7.97(s,1H),7.65(s,1H),7.33(d,J＝6.6Hz,1H),7.23(s,1H),7.09(s,1H),6.77(s,1H),6.40(m,1H),6.20(d,J＝16.5Hz,1H),5.74(d,J＝8.9Hz,1H),4.66(s,1H),2.86(s,2H),2.72(s,3H),2.34(s,2H),2.18(d,J＝32.8Hz,9H),1.47(d,J＝5.0Hz,6H).
实施例58：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(3-isopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物128)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法1，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-3-胺基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-128)(650毫克，1.33毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(390毫克，收率：54％)。
该化合物128的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 515[M+1]+；熔点：85～90摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.19(s,1H),9.62(s,1H),8.51(dd,J＝16.1,5.7Hz,3H),7.73(d,J＝5.6Hz,1H),7.53(dd,J＝8.6,1.7Hz,1H),7.40(d,J＝7.9Hz,1H),7.27(d,J＝8.7Hz,1H),7.19(t,J＝7.7Hz,1H),7.05(t,J＝7.8Hz,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.1Hz,1H),6.25(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.77(m,1H),4.71(dd,J＝13.9,7.0Hz,1H),2.83(t,J＝5.6Hz,2H),2.68(s,3H),2.29(t,J＝5.6Hz,2H),2.20(s,6H),1.51(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例59：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-异丙基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-isopropyl-5-((4-(3-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)phenyl)acrylamide)(化合物132)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法1，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-异丙基-5-胺基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(506-A-132)(500毫克，0.99毫摩尔，1.0当量)，得到黄色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-4-异丙基-5-(4-(3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)苯基)丙烯酰胺(73毫克，收率：16％)。
该化合物132的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 529[M+1]+；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),9.02(s,1H),8.40(d,J＝5.6Hz,1H),8.24(s,1H),7.83(s,1H),7.66(d,J＝5.6Hz,1H),7.28(s,1H),7.13(m,2H),6.73(s,1H),6.40(dd,J＝16.9,10.2Hz,1H),6.19(dd,J＝16.9,1.7Hz,1H),5.73(d,J＝11.6Hz,1H),3.34(s,3H),3.13(dt,J＝13.7,6.8Hz,1H),2.92(dd,J＝23.6,18.3Hz,2H),2.76(s,3H),2.37(s,2H),2.21(s,6H),1.09(t,J＝9.4Hz,6H).
实施例60：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(3-isopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)-5-methoxypyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物133)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法1，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-胺基苯胺基)-5-甲氧基嘧啶-4-基)-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-133)(660毫克，1.2毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-5-甲氧基嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(310毫克，收率：42.7％)。
该化合物133的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 575[M+1]+.熔点；92～95摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.00(s,1H),8.65(s,1H),8.58(s,1H),8.20(s,1H),7.36(d,J＝7.9Hz,1H),7.03(m,4H),6.30(ddd,J＝18.4,17.0,5.8Hz,2H),5.74(d,J＝11.4Hz,1H),4.64(m,1H),3.81(d,J＝6.0Hz,6H),2.83(t,J＝5.7Hz,2H),2.68(s,3H),2.27(t,J＝5.7Hz,2H),2.18(s,6H),1.49(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例61：N-(5-((5-(二甲基氨基)-4-(3-异丙基-2-酮-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(5-((5-(dimethylamino)-4-(3-isopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物135)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法1，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-((5-氨基-4-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-2-甲氧基苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-1,3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮，得到白色固体N-(5-((5-(二甲基氨基)-4-(3-异丙基-2-酮-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(90毫克，收率：13.9％)。
该化合物135的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 588[M+1]+.熔点：114.6～116.2摄氏度；1H NMR(500MHz,DMSO)δ10.15(s,1H),9.69(s,1H),8.48(s,1H),8.41(s,1H),8.10(s,1H),7.36(d,J＝7.9Hz,1H),7.07(t,J＝7.7Hz,1H),6.98(t,J＝7.6Hz,1H),6.88(d,J＝6.3Hz,2H),6.22(d,J＝16.9Hz,1H),5.69(d,J＝10.6Hz,1H),4.63(dt,J＝13.8,6.9Hz,1H),3.82(s,3H),3.15(d,J＝63.2Hz,4H),2.71(d,J＝42.9Hz,6H),2.55(s,3H),2.50(s,6H),1.47(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例62：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(3-isopropyl-5-methoxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物138)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法1，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-胺基苯胺基)嘧啶-4-基)-3-异丙基-5-甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(1.3克，2.36毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(3-异丙基-5-甲氧基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(940毫克，收率：65.7％)。
该化合物138的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 575[M+1]+；熔点：95～98摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.63(s,1H),8.40(m,2H),8.00(d,J＝8.5Hz,1H),7.66(d,J＝5.7Hz,1H),7.05(s,1H),6.90(d,J＝2.4Hz,1H),6.40(m,2H),6.19(dd,J＝17.0,1.8Hz,1H),5.73(dd,J＝14.4,4.3Hz,1H),4.64(m,1H),3.75(s,6H),2.91(t,J＝5.7Hz,2H),2.75(s,3H),2.34(t,J＝5.6Hz,2H),2.20(s,6H),1.47(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例63：N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-羟基-3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(N-(2-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)-5-((4-(5-hydroxy-3-isopropyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-1-yl)pyrimidin-2-yl)amino)-4-methoxyphenyl)acrylamide)(化合物139)的制备(按照方案七线路制备)
合成方法如实施例47步骤47f方法1，仅是将其中1-(2-(5-胺基-4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-氟-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(506-A-91)替换为1-(2-(4-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-2-甲氧基-5-胺基苯胺基)嘧啶-4-基)-5-羟基-3-异丙基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(35毫克，0.065毫摩尔，1.0当量)，得到白色固体N-(2-((2-二甲胺乙基)(甲基)胺基)-5-(4-(5-羟基-3-异丙基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-2-胺基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺(20毫克，收率：54.8％)。
该化合物139的表征数据为：LCMS(ESI):m/z 561[M+1]+；熔点：115～117摄氏度；1HNMR(500MHz,DMSO)δ10.06(s,1H),9.35(s,1H),8.62(s,1H),8.38(d,J＝15.4Hz,2H),7.89(s,1H),7.66(s,1H),7.03(s,1H),6.69(s,1H),6.26(dd,J＝67.7,30.1Hz,3H),5.73(s,1H),4.58(s,1H),3.74(s,3H),2.90(s,2H),2.75(s,3H),2.34(s,2H),2.18(d,J＝26.7Hz,6H),1.45(s,6H).
实验例
一、酶活性抑制实验
1、实验方法
(1)EGFR T790M/L858R活性抑制实验。
采用Caliper迁移率变动检测技术(Caliper mobility shift assay)测定EGFRT790M/L858R蛋白激酶活性(参见J Biomol Screen 14:31，2009)。
实验方法为：将待测化合物用DMSO溶解后用激酶缓冲液(50mM HEPES-pH7.5，0.0015％Brij-35，10mM MgCl2，2mM DTT)稀释，在384孔板中加入5μl的10％DMSO溶解的5倍反应终浓度的化合物，无化合物对照孔是5μl的10％DMSO,无酶活性对照孔是5μl激酶缓冲液。加入10μl的稀释2.5倍后的EGFR T790M L858R(Invitrogen,Cat.No PR8911A,Lot.1498821A)酶溶液后在室温下孵育10分钟，再加入10μl的稀释2.5倍后的底物溶液Peptide FAM-P22(GL Biochem,Cat.No.112393,Lot.No.P130408-ZB112393)。28℃下孵育60分钟后加25μl终止液(100mM HEPES,pH 7.5，0.015％Brij-35，0.2％Coating Reagent#3)终止反应。在Caliper EZ Reader II(Caliper Life Sciences)上读取转化率数据。把转化率转化成抑制率数据。
其中max是指DMSO无化合物对照孔的转化率，min是指无酶活对照的转化率。以化合物浓度和抑制率为横纵坐标，绘制曲线，使用XLFit excel add-in version 4.3.1软件拟合曲线并计算IC50。抑制率％＝(max-转化率)/(max-min)×100。
(2)EGFR T790M活性抑制实验
采用Caliper迁移率变动检测技术(Caliper mobility shift assay)测定EGFRT790M蛋白激酶活性(参见J Biomol Screen 14:31，2009)。
实验方法为：将待测化合物用DMSO溶解后用激酶缓冲液(50mM HEPES-pH 7.5，0.0015％Brij-35，10mM MgCl2，2mM DTT)稀释，在384孔板中加入5μl的10％DMSO溶解的5倍反应终浓度的化合物，无化合物对照孔是5μl的10％DMSO,无酶活性对照孔是5μl激酶缓冲液。加入10μl的稀释2.5倍后的EGFR_T790M(Invitrogen,Cat.No PR8052A,Lot.1229180E)酶溶液后在室温下孵育10分钟，再加入10μl的稀释2.5倍后的底物溶液Peptide FAM-P22(GL Biochem,Cat.No.112393,Lot.No.P130408-ZB112393)。28℃下孵育60分钟后加25μl终止液(100mM HEPES,pH 7.5，0.015％Brij-35，0.2％Coating Reagent#3)终止反应。Caliper EZ Reader II(Caliper Life Sciences)上读取转化率数据。把转化率转化成抑制率数据。
其中max是指DMSO无化合物对照孔的转化率，min是指无酶活对照的转化率。以化合物浓度和抑制率为横纵坐标，绘制曲线，使用XLFit excel add-in version 4.3.1软件拟合曲线并计算IC50。抑制率％＝(max-转化率)/(max-min)×100。
2、实验结果
计算出上述实验中各化合物的半数抑制浓度(IC50)，结果如下表所示。
表1.酶活性抑制结果(IC50)
其中：I>100nM,100nM≥II>50nM,50nM≥III>10nM,10nM≥IV>1nM,V≤1nM。
从上表中可以看出，这类化合物能选择性抑制T790M EGFR,包括单点突变T790M和双点突变如T790M/L858R。
二、肿瘤细胞增殖抑制实验
1、实验方法
采用CellTiter-Glo发光细胞活力检测试剂盒法(Promega，#G7572)测定三磷酸腺苷(ATP)的含量来评估细胞活力。
人非小细胞肺癌肿瘤细胞株H1975携带L858R和T790M表皮生长因子受体(EGFR)双重突变。人结肠癌细胞株LOVO和人非小细胞肺癌H358表达野生型EGFR。人非小细胞肺癌细胞株HCC827携带外显子19的缺失突变(ex19del)。这些细胞株购买自上海复旦IBS细胞资源中心和美国菌种保藏中心(ATCC)。
实验方法为：用胰酶将细胞从细胞培养盘上消化和DPBS培养基重悬后用Scepter自动细胞计数仪(Millipore#PHCC00000)计数测定细胞密度。将细胞稀释成每毫升含44,000个细胞的溶液。调整密度后的细胞溶液以每孔90微升加入细胞实验板中。孔板置于37℃、5％CO2培养箱培养24小时后加入不同浓度的待试化合物。细胞在10％胎牛血清存在下与化合物一起培养72小时。使用Luminescent Cell Viability Assay kit(详见厂家说明书)测定ATP的含量来评估细胞生长抑制。
简要来讲，每个孔中加入30μl试剂，摇板10分钟，诱导细胞裂解，用Fluoroskan Ascent FL(Thermo)检测记录萤光信号。从二甲基亚砜处理72小时的细胞得到最大的信号值。从单独的培养基(细胞数为零)得到最小信号值。抑制率％＝(最大信号值-化合物信号值)/(最大信号值-最小信号值)×100。使用GraphPad Prism V5.0(GraphPadSoftware,San Diego,CA)软件处理数据。通过S形剂量-反应曲线拟合计算IC50值。
2、实验结果
计算出上述实验中各化合物的IC50，结果如下表所示。
表2.肿瘤细胞增殖抑制结果
其中：I>1μM,1μM≥II>0.1μM,0.1μM≥III>0.05μM,0.05μM≥IV>0.01μM,V≤0.01μM。
AZD9291和CO-1686为阳性对照药。
从上表中可以看出，这类化合物对L858R/T790M EGFR突变的细胞如H1975有很强的抗细胞增殖的活性，对携带外显子19的缺失突变的HCC827也有很强的抑制活性。但对野生型EGFR细胞如LOVO及H358的抗细胞增殖的活性弱，具有高度的选择性。
三、药代动力学(PK)实验
1、实验方法
雄性SD大鼠，体重250-300克；或雄性比格犬，9-10kg，试验前过夜禁食。待试化合物溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)中，大鼠以20mg/kg和比格犬以5mg/kg的剂量灌胃给药。给药后15分钟、30分钟和1、2、3、4、6、8及24小时取血，每时间点约取血0.3ml，置于含K2-EDTA(乙二胺四乙酸二钾)的离心管中，离心处理(2,000g，10分钟，4℃)取血浆，储存在-80℃的超低温冰箱中。50μL的血浆样品与5微升内标(IS)混合，用乙酸乙酯萃取。真空干燥后残留物重新溶于乙腈中。对样品进行过滤，并注入到LC-MS/MS分析。
2、实验结果
本发明提供的化合物20、50、62、91、124在大鼠经口服给药后，吸收良好，血液暴露量效高。这类化合物Tmax为1.0-3.7小时；T1/2半衰期为3.0-6.8小时。Cmax为84.-349.7ng/ml(表3)。化合物50和化合物90在比格犬口服Cmax分别为428.0和109.2ng/ml，AUC0-24分别为1423.4和785.6hr×ng/ml)(表4)。表中Tmax是指达峰时间，Cmax是指最大血药浓度，T1/2为半衰期，AUC0-24是指0-24小时时间-浓度曲线下面积，AUCinf是指0-Inf时间-浓度曲线下面积。
表3.大鼠口服给药(20mg/kg)药代动力学
表4.比格犬口服给药(5mg/kg)药代动力学
四、人H1975非小细胞肺癌移植肿瘤小鼠模型实验
Balb/C裸鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司,饲养于SPF动物房。培养皿中人非小细胞肺癌肿瘤细胞株H1975用胰蛋白酶-EDTA(0.25％胰蛋白酶,1mM EDTA)收集后，用不含血清的PBS溶液清洗。最后细胞由不含血清的培养基中稀释后植入。只有大于90％的存活率(台盼蓝排斥)的单细胞悬液才可用于注射。采用1ml的注射器和25G注射器针头，将悬浮在0.1毫升的不含血清的培养基中500万个细胞注入每只小鼠右前侧翼皮下区域并小心避开血管。在植入一周左右即可测量出肿瘤大小。使用卡尺测量肿瘤的大小。并用以下公式计算肿瘤体积：肿瘤体积＝(长×宽2)/2。
五、肿瘤模型药代动力学实验
1.实验方法
当H1975移植肿瘤体积达到400mm3左右，将动物分为6个口服给药组，即赋形剂对照组(0小时)﹑给药后30分钟﹑2小时﹑4小时﹑8小时和24小时组(每时间点3个动物)。化合物91以3mg/ml的浓度溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)以及1.0摩尔等值的盐酸(pH3-4)中，以30mg/kg的剂量灌胃给药。小鼠在上述时间点经CO2安乐死处置后，经心脏采血置于含K2-EDTA的离心管中，离心后收集血浆。并采集肿瘤组织，立即在液氮中冷却。随后放置在-80℃保存，直至药代动力学分析。
药代动力学分析：血浆和肿瘤组织匀浆样品与5微升内标(IS)混合，用乙酸乙酯萃取。真空干燥后残留物重新溶于乙腈中。对样品进行过滤，并注入到LC-MS/MS分析。
2.实验结果
如图1和下表所示，化合物91口服给药后迅速吸收，血浆和肿瘤组织峰值时间分别为0.5小时和4小时、Cmax分别为1723.3ng/ml和868.0ng/ml。肿瘤组织中AUC0-24h(6434.6ng/ml*hr)和血浆AUC0-24h(5095.6ng/ml*hr)相当。
表5.化合物91在H1975移植肿瘤小鼠口服给药(30mg/kg)后药代动力学参数
PK参数 血浆 肿瘤
t1/2(h) 3.1 5.5
Tmax(h) 0.5 4.0
Cmax(ng/ml) 1723.3 868.0
AUC 0-24(ng/ml*h) 5095.6 6434.6
AUC 0-inf(ng/ml*h) 5127.6 6838.2
五、肿瘤模型药效动力学实验
1.实验方法
当H1975移植肿瘤体积达到2000mm3左右，将动物分为4个口服给药组，即赋形剂对照组(0小时)﹑给药后2小时﹑4小时﹑和8小时组(每时间点3-4个动物)。化合物91以3mg/ml的浓度溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)以及1.0摩尔等值的盐酸(pH 3-4)中，以30mg/kg的剂量灌胃给药。小鼠在上述时间点经CO2安乐死处置后，采集肿瘤组织，立即在液氮中冷却。随后放置在-80℃保存。
取20mg肿瘤组织在300μl蛋白质提取液体(RIPA,CST,#9806)中匀浆。该提取液还加入磷酸酶抑制剂(1:100v/v，Protease Inhibitor Cocktail,sigma，#P8340)和100mM/LPMSF(1:100v/v)。组织裂解液在4℃以12,000rpm离心15分钟。收集200μl上清液保存在-80℃。采用Bradford法测定蛋白浓度(Beyotime，#P0006)，加入上样缓冲液(Beyotime，#P0015L)于100℃煮5min，以8％-10％SDS-PAGE电泳分离蛋白后转移至PVDF膜，膜用含5％的BSA(Beyotime，#ST023)封闭60min，加β-actin Antibody(CST，#4970)、Mouse Anti-EGFRAntibody(BD，#610017)、或Human Phospho-EGFR/ErbB1(Y1068)Mouse Antibody(R&D，#MAB3570)于4℃下孵育过夜，然后用1x TBST液洗膜3×5min。分别以荧光二抗IRDye@800CWGoat(polyclonal)Anti-Mouse lgG(H+L)，Highly Cross Adsorbed(LI-COR，926-32210)和IRDye@680CW Goat(polyclonal)Anti-Rabbit lgG(H+L)，Highly Cross Adsorbed(LI-COR，#926-68071)室温下避光孵育2h后再洗膜，洗涤条件同上。最后将膜置于LI-COROdyssey红外荧光扫描成像***上检测成像。
2.实验结果
如图2所示，化合物91以30mg/kg口服给药后，抑制携带L858R和T790MEGFR双重突变的人非小细胞肺癌肿瘤细胞株H1975EGFR的磷酸化，2小时和4小时抑制作用强力，8小时仍有明显抑制。
六、肿瘤模型药效学实验
1.实验方法
实验研究化合物20、50、91、118在H1975移植肿瘤模型抑制肿瘤生长。当H1975肿瘤体积达到平均260mm3左右，将动物分为5个口服给药组，即赋形剂对照组和化合物20、50、91、118口服给药组(n＝8/组)。将化合物分别溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)以及1.0摩尔等值的盐酸(pH 3-4)中，以10ml/kg的剂量灌胃给药，每日一次，连续给药16天。
进一步实验评价化合物50和91抑制H1975移植肿瘤生长的量效关系，将动物分为8个口服给药组，即赋形剂对照组，AZD9291阳性对照组(最大耐受量25mg/kg),化合物50化合物和化合物91 10mg/kg、20mg/kg和40mg/kg口服给药组(n＝7/组)。将化合物分别溶解在30％磺丁基-β-环糊精(SBE-β-CD)以及1.0摩尔等值的盐酸(pH 3-4)中，以10ml/kg的剂量灌胃给药，每日一次，连续给药22天。
2.实验结果
赋形剂组给药后16天因肿瘤体积超过2000mm3,终止实验。如图3所示，化合物20、50、91、118 30mg/kg qd口服给药抑制H1975移植肿瘤生长，使肿瘤消退。化合物50和化合物91给药后16天，导致肿瘤基本消失(T/C值分别为-97％和-95％；P<0.001)。与给药前比较，各给药组动物体重无明显下降。
化合物50和化合物91口服给药剂量依赖性抑制H1975移植肿瘤生长。连续给药22天后，化合物50和化合物91高剂量(40mg/kg)使肿瘤完全消失，在1/4最大耐受量(10mg/kg)时，亦可导致肿瘤缩小(T/C值分别为-65％和-73％)。两个化合物在各个剂量组对体重影响较小，最大体重下降小于5％，如图4-5和下表所示。
表6.在H1975移植肿瘤模型化合物91和50抗肿瘤活性和对体重的影响
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (15)

1.一种式I所示的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体：
其中：X1和X2之间的虚线表示X1和X2之间可选单键或双键；
R1选自：H，C1-C6烷基，卤素取代的C1-C4烷基，卤素，羟基，C1-C6烷氧基，氨基，C1-C3烷基取代的胺基；
R2，R3分别独立选自：H；
R4选自：H，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷氧基；
R5选自以下基团：
X1选自：N，C＝O或C-R9；
R9选自：H；
X2选自：N-R10，C-R10；
R10选自：H，卤素，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基甲基，；
X3，X4，X5，X6分别独立选自：N，C-R11；
R11选自：H，C1-C6烷基，羟基取代的C1-C4烷氧基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷氧基，卤素取代的C1-C4烷基，羟基取代的C1-C4烷基，C1-C3烷氧基取代的C1-C4烷基，氨基取代的C1-C4烷基,C1-C3烷基胺基取代的C1-C4烷基,卤素，硝基，羟基，C1-C6烷氧基，氰基，氨基，C1-C3烷基取代的胺基，酰胺基；
G选自如下基团：
并且，
当R1选自：H，卤素；R4选自：C1-C6烷氧基；R10选自：H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基时；R11不为：H，C1-C6烷基，卤素取代的C1-C4烷基；
或者
当R1选自：H，卤素；R4选自：C1-C6烷氧基；R11选自：H，C1-C6烷基，卤素取代的C1-C4烷基时，R10不为H，C1-C6烷基，C3-C6环烷基。
2.根据权利要求1所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，选自如下式II或式III所示化合物：
其中：X1选自：N，C-R9；
X2，X3，X4，X5，X6如权利要求1所述；
R1，R2，R3，R4，R5，R9，G如权利要求1所述。
3.根据权利要求2所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，X3，X5，X6分别独立选自：N，CH；
X4选自：C-R11；
R11如权利要求1所述。
4.根据权利要求1-3任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，选自如下式II所示化合物：
其中：X2选自：N-R10；
R10选自：C1-C6烷基，C2-C6烯基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基甲基；
X3，X5，X6分别独立选自：CH；
X4选自：C-R11；
R11选自：C1-C6烷氧基，卤素，氰基。
R1，R2，R3，R4，R5，G如权利要求1所述。
5.根据权利要求1-3任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，选自如下式III所示化合物：
其中：X1，X2选自：CH；
X3选自：N；
X4如权利要求1所述；
X5，X6选自：CH；
R1，R2，R3，R4，R5，R9，G如权利要求1所述。
6.根据权利要求1-3任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，
X1，X2分别独立选自：C或N-R10；
R10选自：C1-C6烷基，C2-C6烯基，C3-C6环烷基，C3-C6环烷基甲基；
X3选自CH或N；
X5，X6分别独立选自：CH；
X4选自：C-R11；
R11选自：C1-C6烷氧基，卤素，氰基；
R1，R2，R3选自：H；
R4选自：甲氧基；
R5选自如下基团：
G选自如下基团：
7.根据权利要求1-3任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，
R1选自：H,F,Cl,Br,甲基，三氟甲基，甲氧基，羟基，二甲胺基；
R2，R3选自：H；
R4选自：H，甲氧基，乙氧基，甲基，乙基，甲氧基乙氧基。
8.根据权利要求1所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，选自如下化合物：
9.权利要求1-8任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将中间体101中的硝基还原得到中间体102，并在酸性条件下与硝酸盐反应得到中间体103，中间体103中的氨基被溴替换得到中间体104，采用R5氮上连有氢的中间体与中间体104反应，得到中间体105，备用；或将中间体103与R5氮上连有氢的中间体反应，生成中间体106，备用；
反应线路如下：
将中间体201与中间体202或203或301反应，分别得到中间体204，205，或302，用氨水取代中间体204上的氯，得到中间体205，将中间体302中的硫氧化得到中间体303，中间体303与氨水反应得到中间体205，中间体205备用；
反应线路如下：
将中间体204与中间体103反应，得到中间体401，采用R5氮上连有氢的化合物与中间体401反应，得到中间体402；或将中间体204与中间体106反应,得到中间体402；或将中间体205与中间体105反应，得到中间体402，再将中间体402的硝基还原，得到中间体403，备用；
反应路线如下：
将中间体403与含有G基团的中间体反应，反应路线如下：
即得目标化合物。
10.权利要求1-8任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将中间体101中的硝基还原得到中间体102，并在酸性条件下与硝酸盐反应得到中间体103，中间体103中的氨基被溴替换得到中间体104，采用R5氮上连有氢的中间体与中间体104反应，得到中间体105，备用；中间体103也可与R5氮上连有氢的化合物反应，生成中间体106，备用；
反应线路如下：
将中间体501在N,N'-羰基二咪唑存在的条件下关环，得到中间体502，中间体502与中间体202反应，得到中间体503，以氨水中的氨基将中间体503中的氯取代，得到中间体504，将该中间体504与中间体105反应，得到中间体505；或将中间体503与中间体106反应，得到中间体505；或将中间体503与中间体103反应，所获得的产物中的氟用带有氨基的R5反应得到中间体505；将中间体505的硝基还原，得到中间体506，备用；
反应路线如下：
将中间体506与含有G基团的中间体反应，反应路线如下：
即得目标化合物。
11.权利要求1-8任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体在制备预防和***药物中的应用。
12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为EGFR基因突变的恶性肿瘤。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为携带T790M EGFR突变的非小细胞肺癌。
14.一种防治肿瘤的药物组合物，其特征在于，包括作为活性成份的权利要求1-8任一项所述的2,4-二含氮基团取代嘧啶类化合物或者其药学上可接受的盐或立体异构体，以及药学上可接受的载体。
15.根据权利要求14所述防治肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述肿瘤为携带T790MEGFR突变的非小细胞肺癌。
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