CN105962321A - 一种灵芝发酵液的制备方法 - Google Patents
一种灵芝发酵液的制备方法 Download PDFInfo
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Classifications
-
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Abstract
本发明涉及一种灵芝发酵液的制备方法，包括如下步骤：⑴配制食物酶解液；⑵配制灵芝提取液；⑶灵芝营养液的制备；⑷发酵；⑸乳化。本发明将灵芝、辣木粉以及药食同源的多种物料通过合理比例的搭配，充分混合，再加入乳酸菌进行发酵，而发酵过程中采用单一菌种，即乳酸菌，以特制的培养液作为温床，其发酵效率发挥得更加充分，氯化钠及醋酸的组合作为缓冲溶液保证了发酵过程中溶液pH值保持在预控的范围内。
Description
技术领域
本发明属于保健药液领域，涉及发酵技术，尤其是一种灵芝发酵液的制备方法。
背景技术
灵芝又称灵芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株。以紫灵芝药效为最好，灵芝原产于亚洲东部，中国分布最广的在江西，灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍贵药材，具备很高的药用价值。灵芝药性为甘，平。归心、肺、肝、肾经。主治虚劳、咳嗽、气喘、失眠、消化不良，恶性肿瘤等。动物药理表明实验：灵芝对神经***有抑制作用，循环***有降压和加强心脏收缩力的作用，对呼吸***有祛痰作用，此外，还有护肝、提高免疫功能，抗菌等作用。
灵芝目前仅是被用于药物或药膳，而申请人在此之前也没有发现以发酵液的形式用于人们的日常生活的报道及技术文献。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种安身理气且抗疲劳的灵芝发酵液的制备方法。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种提高皮肤活性且具有提高免疫力功能的灵芝发酵液的制备方法。
本发明采用的技术方案是：
一种灵芝发酵液的制备方法，包括如下步骤：
⑴配制食物酶解液：将等重量的紫米、小米、薏米、茯苓、红枣、乌梅、陈皮、焦山楂浸泡，按食物:水为1:3的重量比混合，加入食物和水的总重量的1.5％的红豆粉和物料总重量的1.5％的0.05％NaHCO3，80℃预煮15min后，加用柠檬酸调pH值5.5，加入食物和水的总重量的0.02％果胶酶55℃保温酶解2h，加入食物和水的总重量的1％半纤维素酶、加入食物和水的总重量的0.56％纤维素酶，加入食物和水的总重量的0.5％木瓜蛋白酶、加入食物和水的总重量的0.04％植酸酶1h，拌麦芽、神曲15h，过滤，杀菌，得到食物酶解液，待用；
⑵配制灵芝提取液：将灵芝沸水热烫2min，冷却，按料:水为1:10的重量比加水打浆，然后与辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子混合，加水至初始水量的2.5倍，煎煮，抽取上清液，得到灵芝提取液，待用；
⑶灵芝营养液的制备：将食物酶解液与灵芝提取液按重量比为4:1的比例配比混均，将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min，即可获得灵芝营养液；
⑷发酵：向灵芝营养液中加入培养液，灵芝营养液与培养液重量比为10:1，加入乳酸菌、氯化钠及醋酸混合发酵1day，再加入上述乳酸菌、氯化钠及醋酸各一半重量的乳酸菌、氯化钠及醋酸发酵，即得发酵液；
⑸乳化：向发酵液中加入乳化剂，过滤取清液，巴氏灭活后包装即得成品，乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素。
而且，步骤⑴所述的食物酶解液的固形物的含量为8％～10％。
而且，步骤⑵中所述的灵芝提取液的固形物含量为4％～6％。
而且，步骤⑵中所述的灵芝、辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子的重量份数分别为：20～25份、5～10份、1～2份、1～2份、1～2份、1～2份。
而且，步骤⑶所述的乳酸菌、氯化钠、醋酸的总用量的重量份数分别为100～120份、8～10份，醋酸为4～6份。
而且，步骤⑶所述的培养液的制备方法是：将麦芽糖溶于水中，静置20min后放入复合维生素，搅拌均匀后加热煮沸，冷却至室温后加入蛋清，搅拌均匀，待用，麦芽糖、水、复合维生素、蛋清的重量比为100:10000:3:10。
本发明优点和积极效果为：
本发明将灵芝、辣木粉以及药食同源的多种物料通过合理比例的搭配，先将食物对应酶解，然后和提取液充分混合，再加入乳酸菌进行发酵，而发酵过程中采用单一菌种，即乳酸菌，以特制的培养液作为温床，其发酵效率发挥得更加充分，氯化钠及醋酸的组合作为缓冲溶液保证了发酵过程中溶液pH值保持在预控的范围内。
本发明中各组分的用量是经过多次试验且在试验中不断对比，发现了技术方案中所涉及的用量范围可产生意料不到的效果，通过有效的发酵，使灵芝、辣木粉以及黄芪主要的营养功效得以倍增，虽然各组分的用量及其效果仅是以文字和数值体现，但其操作步骤克服了本技术领域的诸多技术偏见，才得到具有较好的乳酸降解性能和抗疲劳的灵芝发酵液。
具体实施方式：
下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
实施例1
一种灵芝发酵液的制备方法，包括如下步骤：
⑴配制食物酶解液：将等重量的紫米、小米、薏米、茯苓、红枣、乌梅、陈皮、焦山楂浸泡，按食物:水为1:3的重量比混合，加入食物和水的总重量的1.5％的红豆粉和物料总重量的1.5％的0.05％NaHCO3，使之易煮、去腥、除苦涩味，80℃预煮15min后，加用柠檬酸调pH值5.5，加入食物和水的总重量的0.02％果胶酶55℃保温酶解2h，加入食物和水的总重量的1％半纤维素酶、加入食物和水的总重量的0.56％纤维素酶，加入食物和水的总重量的0.5％木瓜蛋白酶、加入食物和水的总重量的0.04％植酸酶1h，拌麦芽、神曲15h，过滤，杀菌，待用(固形物8％～10％)；
⑵配制灵芝提取液：将灵芝沸水热烫2min，冷却，按料:水为1:10的重量比加水打浆，然后与辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子混合，加水至初始水量的2.5倍，煎煮，抽取上清液，待用(固形物4％～6％)，灵芝、辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子的重量分别为：2000g、500g、100g、100g、100g、100g；
⑶灵芝营养液的制备：将食物酶解液与灵芝提取液按重量比为4:1的比例配比混均，将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min，即可获得灵芝营养液；
⑷发酵：向灵芝营养液中加入培养液，灵芝营养液与培养液重量比为10:1，加入乳酸菌、氯化钠及醋酸混合发酵1day，再加入上述乳酸菌、氯化钠及醋酸各一半重量的乳酸菌、氯化钠及醋酸发酵，即得发酵液，乳酸菌、氯化钠、醋酸的总用量的重量分别为120g、氯化钠为9g，醋酸为4.5g；
培养液的制备方法是：将麦芽糖溶于水中，静置20min后放入复合维生素，搅拌均匀后加热煮沸，冷却至室温后加入蛋清，搅拌均匀，待用，麦芽糖、水、复合维生素、蛋清的重量比为100:10000:3:10。
⑸乳化：向发酵液中加入乳化剂，过滤取清液，巴氏灭活后包装即得成品，乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素。
成品可制膏、制粉，用于口服液的制备或化妆品原料而进一步加工，该加工过程不作为本案发明点，采用常规的现有技术即可完成，本发明中，各原料均采用市售商品。
在步骤⑶中，将混合液放入灭菌锅之后，加酵母抽提物7.5％、异麦芽低聚糖10％-20％、柠檬酸0.15％-0.25％、柠檬酸钠0.05％、L苹果酸0.05％、VC 0.03％，配以食品添加剂：木糖醇、0.07％-0.12％黄原胶0.5％***胶、0.15％果胶、0.15％海藻酸钠、0.12％-0.23％羧甲基纤维素钠、0.2％-0.8％脂肪酸蔗糖酯乳化剂、0.05％三聚甘油酯、0.2％枣香精、饮料香味剂0.5％乙基香兰素(豆浆粉精)、食用色素0.02％叶黄素、1％卵磷脂(北京绿之源，纯度为15％)、0.06％大豆苷元、黑醋、聚葡萄糖、烟酸、泛酸钙中的全部或其中一部分，→调配、过滤→灭菌(将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min)→可直接灵芝口服饮品，则不需要步骤⑷的发酵和步骤⑸的乳化，上述百分比均是各物料与食物酶解液以及灵芝提取液混合后的总重量的百分比。
实施例2
一种灵芝发酵液的制备方法，包括如下步骤：
⑴配制食物酶解液：将等重量的紫米、小米、薏米、茯苓、红枣、乌梅、陈皮、焦山楂浸泡，按食物:水为1:3的重量比混合，加入食物和水的总重量的1.5％的红豆粉和物料总重量的1.5％的0.05％NaHCO3，使之易煮、去腥、除苦涩味，80℃预煮15min后，加用柠檬酸调pH值5.5，加入食物和水的总重量的0.02％果胶酶55℃保温酶解2h，加入食物和水的总重量的1％半纤维素酶、加入食物和水的总重量的0.56％纤维素酶，加入食物和水的总重量的0.5％木瓜蛋白酶、加入食物和水的总重量的0.04％植酸酶1h，拌麦芽、神曲15h，过滤，杀菌，待用(固形物8％～10％)；
⑵配制灵芝提取液：将灵芝沸水热烫2min，冷却，按料:水为1:10的重量比加水打浆，然后与辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子混合，加水至初始水量的2.5倍，煎煮，抽取上清液，待用(固形物4％～6％)，灵芝、辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子的重量分别为：2500g、1000g、150g、150g、150g、150g；
⑶灵芝营养液的制备：将食物酶解液与灵芝提取液按重量比为4:1的比例配比混均，将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min，即可获得灵芝营养液；
⑷发酵：向灵芝营养液中加入培养液，灵芝营养液与培养液重量比为10:1，加入乳酸菌、氯化钠及醋酸混合发酵1day，再加入上述乳酸菌、氯化钠及醋酸各一半重量的乳酸菌、氯化钠及醋酸发酵，即得发酵液，乳酸菌、氯化钠、醋酸的总用量的重量分别为120g、氯化钠为9g，醋酸为6g；
培养液的制备方法是：将麦芽糖溶于水中，静置20min后放入复合维生素，搅拌均匀后加热煮沸，冷却至室温后加入蛋清，搅拌均匀，待用，麦芽糖、水、复合维生素、蛋清的重量比为100:10000:3:10。
⑸乳化：向发酵液中加入乳化剂，过滤取清液，巴氏灭活后包装即得成品，乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素。
成品可制膏、制粉，用于口服液的制备或化妆品原料而进一步加工，该加工过程不作为本案发明点，采用常规的现有技术即可完成，本发明中，各原料均采用市售商品。
在步骤⑶中，将混合液放入灭菌锅之后，加酵母抽提物7.5％、异麦芽低聚糖10％-20％、柠檬酸0.15％-0.25％、柠檬酸钠0.05％、L苹果酸0.05％、VC 0.03％，配以食品添加剂：木糖醇、0.07％-0.12％黄原胶0.5％***胶、0.15％果胶、0.15％海藻酸钠、0.12％-0.23％羧甲基纤维素钠、0.2％-0.8％脂肪酸蔗糖酯乳化剂、0.05％三聚甘油酯、0.2％枣香精、饮料香味剂0.5％乙基香兰素(豆浆粉精)、食用色素0.02％叶黄素、1％卵磷脂(北京绿之源，纯度为15％)、0.06％大豆苷元、黑醋、聚葡萄糖、烟酸、泛酸钙中的全部或其中一部分，→调配、过滤→灭菌(将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min)→可直接灵芝口服饮品，则不需要步骤⑷的发酵和步骤⑸的乳化，上述百分比均是各物料与食物酶解液以及灵芝提取液混合后的总重量的百分比。
实施例3
一种灵芝发酵液的制备方法，包括如下步骤：
⑴配制食物酶解液：将等重量的紫米、小米、薏米、茯苓、红枣、乌梅、陈皮、焦山楂浸泡，按食物:水为1:3的重量比混合，加入食物和水的总重量的1.5％的红豆粉和物料总重量的1.5％的0.05％NaHCO3，使之易煮、去腥、除苦涩味，80℃预煮15min后，加用柠檬酸调pH值5.5，加入食物和水的总重量的0.02％果胶酶55℃保温酶解2h，加入食物和水的总重量的1％半纤维素酶、加入食物和水的总重量的0.56％纤维素酶，加入食物和水的总重量的0.5％木瓜蛋白酶、加入食物和水的总重量的0.04％植酸酶1h，拌麦芽、神曲15h，过滤，杀菌，待用(固形物8％～10％)；
⑵配制灵芝提取液：将灵芝沸水热烫2min，冷却，按料:水为1:10的重量比加水打浆，然后与辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子混合，加水至初始水量的2.5倍，煎煮，抽取上清液，待用(固形物4％～6％)，灵芝、辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子的重量分别为：2200g、1100g、150g、120g、150g、110g、120g、140g、150g；
⑶灵芝营养液的制备：将食物酶解液与灵芝提取液按重量比为4:1的比例配比混均，将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min，即可获得灵芝营养液；
⑷发酵：向灵芝营养液中加入培养液，灵芝营养液与培养液重量比为10:1，加入乳酸菌、氯化钠及醋酸混合发酵1day，再加入上述乳酸菌、氯化钠及醋酸各一半重量的乳酸菌、氯化钠及醋酸发酵，即得发酵液，乳酸菌、氯化钠、醋酸的总用量的重量分别为120g、氯化钠为9g，醋酸为6g；
培养液的制备方法是：将麦芽糖溶于水中，静置20min后放入复合维生素，搅拌均匀后加热煮沸，冷却至室温后加入蛋清，搅拌均匀，待用，麦芽糖、水、复合维生素、蛋清的重量比为100:10000:3:10。
⑸乳化：向发酵液中加入乳化剂，过滤取清液，巴氏灭活后包装即得成品，乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素。
成品可制膏、制粉，用于口服液的制备或化妆品原料而进一步加工，该加工过程不作为本案发明点，采用常规的现有技术即可完成，本发明中，各原料均采用市售商品。
在步骤⑶中，将混合液放入灭菌锅之后，加酵母抽提物7.5％、异麦芽低聚糖10％-20％、柠檬酸0.15％-0.25％、柠檬酸钠0.05％、L苹果酸0.05％、VC 0.03％，配以食品添加剂：木糖醇、0.07％-0.12％黄原胶0.5％***胶、0.15％果胶、0.15％海藻酸钠、0.12％-0.23％羧甲基纤维素钠、0.2％-0.8％脂肪酸蔗糖酯乳化剂、0.05％三聚甘油酯、0.2％枣香精、饮料香味剂0.5％乙基香兰素(豆浆粉精)、食用色素0.02％叶黄素、1％卵磷脂(北京绿之源，纯度为15％)、0.06％大豆苷元、黑醋、聚葡萄糖、烟酸、泛酸钙中的全部或其中一部分，→调配、过滤→灭菌(将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min)→可直接灵芝口服饮品，则不需要步骤⑷的发酵和步骤⑸的乳化，上述百分比均是各物料与食物酶解液以及灵芝提取液混合后的总重量的百分比。
对照实验
选用同地区的健康雄性小鼠30只,体重20±2g，随机均分为3组：对照组(标记为A)、灵芝发酵液组(标记为B)以及灵芝组(标记为C)，
A组采用0.02ml/(kg·d)的蒸馏水，连续灌胃10d，
B组采用2.6g/(kg·d)的本发明实施例1给出的灵芝发酵液，连续灌胃10d，
C组采用2.6g/(kg·d)的灵芝蒸馏水溶液，连续灌胃10d，
灌胃期间进行适应性游泳二次，每次10min。
负重游泳实验
末次灌胃30min后，3组动物均随机选取5只，将尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水温25±1℃，记录小鼠力竭游泳时间，即小鼠自游泳开始至口鼻没入水面10s无抬头的时间。
疲劳是机体在一定环境条件下，因长时间过于繁重、紧张的劳动(包括脑力和体力)而引起的工作效率暂时性明显降低的一种生理现象。疲劳的发生是多因素作用的结果，最直接和客观的表现是运动耐力的下降，而力竭游泳时间一直以来被作为反映运动耐力的重要指标。
血乳酸的测定
末次用药30min后，每组剩余的5只动物立即采集小鼠尾血，测定血乳酸Ⅰ；然后在游泳箱中游泳(不负重)20min后立即采尾血，测定血乳酸Ⅱ；休息40min后，再次采尾血，测定血乳酸Ⅲ。测定方法按照全血乳酸试剂盒说明进行。
血乳酸的生成和降解速率的测定
血乳酸的生成速率＝(血乳酸最高值-运动前安静值)/运动到最高值所用时间×100％；血乳酸降解速率＝(血乳酸最高值-休息40min后血乳酸值)/40min×100％。
统计分析
数据采用SPSS11.5软件处理，各实验组采用单因素方法分析进行两两比较。
实验结果
灵芝发酵液对小鼠负重力竭游泳时间的影响
灵芝发酵液对小鼠负重力竭游泳时间的影响结果见表1。由表1可知，B组小鼠负重力竭游泳时间比A组和C组显著增加(P＜0.05)，表明灵芝发酵液具有明显的抗疲劳功效。
表1灵芝发酵液对小鼠负重力竭游泳时间的影响(min)
本实验结果表明:本研究所选用的A和C组对小鼠力竭游泳时间无明显影响，而灵芝发酵液可显著地延长小鼠的力竭游泳时间，由此提示灵子发酵液可明显提高小鼠的运动耐力。
灵芝发酵液对小鼠游泳前后血乳酸含量及乳酸生产和降解速率的影响
由表2可知，各组小鼠灌胃10d后，小鼠运动前血乳酸值各组之间没有明显差异。小鼠进行短时间(20min)的剧烈运动后，C组与A组没有差异，B组血乳酸值均显著高于对照组，各给药组间无明显差异。
由表2还可发现，运动休息40min后，与A组相比，B、C组小鼠的血乳酸值(血乳酸Ⅲ)都显著降低。虽然B、C组血乳酸生成速率显著高于A组，但B组的血乳酸降解速率均C组明显增大，提示灵芝发酵液有氧代谢的能力得到加强。
表2灵芝发酵液对小鼠游泳前后血乳酸含量的影响
(mmol/L)
代谢产物的堆积是机体产生疲劳的主要原因，其中，乳酸的堆积和H+浓度的增加是重要因素。剧烈的体力活动使乳酸在体内堆积，血pH降低，抑制了磷酸果糖激酸等多种能量代谢过程中酶的活性，使糖酵解受到影响，ATP供应减少，导致肌肉疲劳。小鼠游泳20min后，C组和B组动物血乳酸含量较空白组明显增加，且乳酸生产速率也相应增加，结合B组动物力竭游泳时间明显延长的结果分析，这与灵芝及其酶解发酵液促进机体无氧代谢水平有关。
另外小鼠游泳停止后20～50min是运动后血乳酸的恢复期。在运动后的恢复期，机体需要吸进大量氧气，此时机体除了主要以有氧代谢方式供能外，还要偿还剧烈运动中的氧债，乳酸的清除正是靠此时的有氧代谢来完成。
由于灵芝发酵液除含有糖、电解质外，还含有小分子短肽、聚合糖、氨基酸包括强化的牛磺酸和丰富的植物黄酮、B族维生素、VC和各种脂溶性维生素、胆碱、高浓度的锌等功能成分有极大的关系。小分子短肽可被肠道直接吸收，能迅速供能，具有加速运动肌肉疲劳恢复的作用。
尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的内容。
Claims (6)
1.一种灵芝发酵液的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
⑴配制食物酶解液：将等重量的紫米、小米、薏米、茯苓、红枣、乌梅、陈皮、焦山楂浸泡，按食物:水为1:3的重量比混合，加入食物和水的总重量的1.5％的红豆粉和物料总重量的1.5％的0.05％NaHCO3，80℃预煮15min后，加用柠檬酸调pH值5.5，加入食物和水的总重量的0.02％果胶酶55℃保温酶解2h，加入食物和水的总重量的1％半纤维素酶、加入食物和水的总重量的0.56％纤维素酶，加入食物和水的总重量的0.5％木瓜蛋白酶、加入食物和水的总重量的0.04％植酸酶1h，拌麦芽、神曲15h，过滤，杀菌，得到食物酶解液，待用；
⑵配制灵芝提取液：将灵芝沸水热烫2min，冷却，按料:水为1:10的重量比加水打浆，然后与辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子混合，加水至2.5倍，煎煮，抽取上清液，得到灵芝提取液，待用；
⑶灵芝营养液的制备：将食物酶解液与灵芝提取液按重量比为4:1的比例配比混均，将混合液放入灭菌锅中,加热至90℃,并保持5min，即可获得灵芝营养液；
⑷发酵：向灵芝营养液中加入培养液，灵芝营养液与培养液重量比为10:1，加入乳酸菌、氯化钠及醋酸混合发酵1day，再加入上述乳酸菌、氯化钠及醋酸各一半重量的乳酸菌、氯化钠及醋酸发酵，即得发酵液；
⑸乳化：向发酵液中加入乳化剂，过滤取清液，巴氏灭活后包装即得成品，乳化剂为食用明胶或羧甲基纤维素。
2.根据权利要求1所述的灵芝发酵液的制备方法，其特征在于：步骤⑴所述的食物酶解液的固形物的含量为8％～10％。
3.根据权利要求1所述的灵芝发酵液的制备方法，其特征在于：步骤⑵中所述的灵芝提取液的固形物含量为4％～6％。
4.根据权利要求3所述的灵芝发酵液的制备方法，其特征在于：步骤⑵中所述的灵芝、辣木粉、黄芪、砂仁、玉竹、莱菔子的重量份数分别为：20～25份、5～10份、1～2份、1～2份、1～2份、1～2份。
5.根据权利要求1所述的灵芝发酵液的制备方法，其特征在于：步骤⑶所述的乳酸菌、氯化钠、醋酸的总用量的重量份数分别为100～120份、8～10份，醋酸为4～6份。
6.根据权利要求5所述的灵芝发酵液的制备方法，其特征在于：步骤⑶所述的培养液的制备方法是：将麦芽糖溶于水中，静置20min后放入复合维生素，搅拌均匀后加热煮沸，冷却至室温后加入蛋清，搅拌均匀，待用，麦芽糖、水、复合维生素、蛋清的重量比为100:10000:3:10。
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