CN105906621A - 用作fgfr抑制剂的乙醇类化合物 - Google Patents

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CN105906621A CN201610205596.8A CN201610205596A CN105906621A CN 105906621 A CN105906621 A CN 105906621A CN 201610205596 A CN201610205596 A CN 201610205596A CN 105906621 A CN105906621 A CN 105906621A
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吴勇
朱义
海俐
王茜
王一茜
李�杰
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Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd
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Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Abstract

本发明公开了一种用作FGFR抑制剂的乙醇类化合物。本发明提供了式I化合物或其在药学上可接受的盐，还提供了制备式I化合物的方法，和式I化合物作为药物和在癌症治疗中的用途。

Description

用作FGFR抑制剂的乙醇类化合物
技术领域
本发明属于药物学领域，涉及一类(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物及其制备方法和用途。具体涉及如结构式I的一类化合物及其制备方法和在FGFR抑制剂中的用途，上述化合物具有显著的抗肿瘤活性。
背景技术
蛋白激酶为一类调节各种细胞功能的蛋白质。这是通过在蛋白底物上特定氨基酸的磷酸化而使得底物蛋白构象改变而完成的。构象的变化调节底物活性或者其与其他结合配偶体相互作用的能力。蛋白激酶的酶活性是指激酶往底物上添加磷酸根基团的速率。这可以通过测定被转化为底物的量和时间的函数来测定。在蛋白激酶的活性位出现底物的磷酸化。
酪氨酸激酶在蛋白底物上催化ATP的末端磷酸转化为酪氨酸残基的蛋白激酶的亚组。这些激酶在致使细胞增殖、分化和迁移的生长因子信号传导的传播中具有重要作用。
成纤维细胞生长因子（FGF）被认为是许多生理过程（如发育和血管生长过程中形态变化）的重要介质。目前存在超过25中德已知FGF家族成员。成纤维细胞生长因子受体（FGFR）家族包括是个成员，其各由胞外配体结合区、单跨膜区和细胞内胞质蛋白酪氨酸激酶区组成。在FGF刺激下，FGFR发生二聚作用和转磷酸作用，着导致受体活化。受体的活化足以恢复和激活特定的下游信号配偶体，所述下游信号配偶体参与各种过程如细胞生长、细胞代谢和细胞存活的调节（Eswarakumar, V. P.等，Cytokine&Growth Factor Reviews2005,16,139-149）。在对于肿瘤细胞增殖、迁移、入侵和血管形成等关键性的生活过程中，FGF/FGFR信号通路具有多效应作用，与人类癌症直接有关。
在多种肿瘤如膀胱、肾细胞和***等中各种FGF的表达均有增加。FGF也是强有力地血管生成因子。各种FGF的激活突变与膀胱癌和多发性骨髓瘤有关，同时有文献证明受体在***和膀胱癌有表达（Grose， R. 等， Cytokine&Growth Factor Reviews 2005,16,179-186； Kwabi-Addo，B.等， Endocrime-Related Caner 2004,11,709-24）.因此，靶向FGFR和FGF信号传导的治疗可以直接影响肿瘤细胞核肿瘤血管生成，FGF信号传导***为具有吸引力的治疗靶点。
发明内容
本发明的一个目的是公开下述结构通式I所示的一类全新的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物。
本发明的另一个目的是公开上述的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物的制备方法。
本发明的又一个目的是公开上述的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物在制备FGFR抑制剂的抗肿瘤药物中的用途。
本发明提供了式I化合物或其在药学上可接受的盐。
其中
X代表N；
Y代表N；
B-A-(R1)a代表 或或基团；
做为优选方式，X代表N原子，Y代表N原子；
作为优选方式，X代表对应的N原子可以唯一出现在此类化合物中；X代表对应的N原子可以唯一出现在此类化合物中；X、Y代表对应的N原子可以同时出现在此类化合物中。
作为优选方式，所述B-A-(R1)a中，选自外消旋体1-(3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基、R-1-(3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基、S-1-(3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基；
包括上述任一所述的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物在制备用于在温血动物中产生FGFR抑制作用以抗肿瘤的药物中的用途。
做为优选方式，所述肿瘤为非小细胞肺癌。
做为优选方式，所述肿瘤为胃癌。
做为优选方式，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。
包括上述任一所述的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物及药学上可接受的盐、水合物的药物组合物。
本发明中药学上可接受的盐包括：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐等无机酸，以及苹果酸盐、富马酸盐、马来酸盐、甲磺酸、对甲苯磺酸、甲酸盐、领苯二甲酸盐、醋酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、酒石酸、丙二酸、乳酸盐、扁桃酸盐等有机酸盐，以及钠盐、钾盐、钡盐等。
本发明的有益效果在于：本发明提供一系列的化合物用于FGFR抑制剂以抗肿瘤的用途，常规方法即可合成。经实验，发现其抗肿瘤的作用明显。
附图说明
图1为具有代表性的（E）-2-（4-（2-（5 - （1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基）- 1H-吡唑并[4,3-b]吡啶-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇的合成路线；
图2为具有代表性的（E）-2-（4-（2-（5 - （1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基）- 1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇的合成路线；
图3为具有代表性的（E）-2-（4-（2-（5 - （1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基）- 1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇的合成路线。
具体实施方式
本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了互相排斥的特征和/或步骤以外，均可以以任何方式组合。
实施例1：本发明(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物中具有代表性的化合物结构如下：
表1 具有代表性的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H- 吡唑-1-基）乙醇类化合物H
化合物 编号
1a
2a
3a
1b
2b
3b
1c
2c
3c
实施例2：本发明(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物中具有代表性的化合物的合成路线。
实施例2：化合物2的合成
将浓硫酸110mL在0-1℃下冷却，缓慢加入原料1（20g），冷却至0℃，缓慢加入体积比为1：1的110mL硝酸酸，-1℃搅拌后转至室温搅拌30min后于50℃下反应11h,反应液用EA萃取，EA层用氨水洗涤，浓缩氨水层倒入水层，析出固体2（18g），产率75%。
实施例3：化合物3的合成
将原料2（5g）加至15mL水中，外温-5℃下滴加浓硫酸25mL，保持内温0~-5℃的条件下缓慢滴加NaNO2（2.48g/8mL）水溶液20mL，转至20℃下搅拌2h,反应液倒入冰水，有固体析出，减压抽滤得到产品3（4.7g），产率56.3%。
实施例4：化合物4的合成
将原料3（150mg）及PCl5（210mg）和POCl3（180mg）置于圆底烧瓶中在100℃下回流反应2h,减压蒸除POCl3后加水搅拌，析出固体，减压抽滤得到粗产品，柱层析得到纯净的产物4（100mg），产率63.8%。
实施例5：化合物5的合成
将原料4（500mg）溶解于甲苯15mL中，加入450mg的外消旋体1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙醇于室温下搅拌0.5h,然后于40℃下过夜反应，原料基本反应完全，柱层析纯化得到纯净的产物5（600mg），产率63.8%。
实施例6：化合物6的合成
将原料5（1.4g）及铁粉（1g）和氯化铵（300mg）置于反应瓶中，加入乙醇和水的混合溶剂（10 mL /3 mL），80℃回流反应40min后底物反应完全。粗品柱层析后得到的中间体6（1.2g），产率76.4%。
实施例7：化合物7的合成
将原料6（260mg）溶解于5mL的氯仿中，加入醋酸钾140mg及醋酐486mg，室温下搅拌1h然后转至80℃下回流，冷至室温下然后加入亚硝酸异戊酯（836mg）反应过夜。次日将反应液的溶剂旋干得到黄色固体。加入碳酸钾搅拌，将产物粗品柱层析纯化，得到170mg的产品7，产率69.2%。
实施例8：化合物8的合成
将原料7（165mg）溶解于4mL DMF中，室温下搅拌后加入KOH（120mg）和碘328mg，反应1.5h后原料基本反映完全，加入适量的饱和硫代硫酸钠后溶液中析出固体，用EA萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后，旋干溶剂后得到350mg产品8，产率72.4%。
实施例9：化合物9的合成
将原料8（345mg）溶解于40mL DCM中，加入66.6mg TsOH及387mg THP后于室温下搅拌，反应1h后原料基本反应完全，将反应粗品柱层析，得到270mg的产品9，产率80.14%。
实施例10：化合物10的合成
将PEG2000及溶解于0.5M的氢氧化钠中，室温下搅拌5min,加入原料(400mg)及醋酸钯8mg，然后于140℃下回流5.5h,然后加入原料9(187mg)及醋酸钯8mg，然后于120℃下回流7h.反应液用柱层析得到产品10(500mg)，产率77.9%。
实施例11：化合物1a的合成
将原料10(27mg)溶解于10mL的甲醇中，加入0.1mL的HCl。室温下搅拌2h,柱层析纯化得到纯净的产品1a(17mg)，产率87.9%。H1-NMR(DMSO):δ13.112 (s,1H), 8.565 (s,2H),7.973 (s,1H), 7.943 (s,1H), 7.780 (s,1H), 7.348 (d,1H,J=16.8HZ), 7.003 (s,1H), 6.969 (d,1H,J=16.8HZ), 6.474 (q,1H), 5.007 (s,1H), 4.199 (t,2H), 1.736(d,3H,J=6.8HZ)。
实施例12：化合物2a、3a的合成
这两个化合物的合成的起始原料是按照实施例5的方法，将原料4分别与R-1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙醇或者S-1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙醇于室温下搅拌0.5h,然后于40℃下过夜反应即可得到对应的化合5,接着按照实施例6-11的方法继续合成即可得到化合物2a、3a。
化合物2a：H1-NMR(DMSO):δ13.076 (br,1H), 8.559 (s,2H), 7.965 (s,1H),7.745 (d,1H,J=9.0HZ), 7.772 (s,1H), 7.342 (d,1H,J=16.8HZ), 6.985 (d,1H,J=9.0HZ),6.960 (d,1H,J=16.8HZ), 6.470 (q,1H), 5.005 (m,1H), 4.090 (m,2H), 3.781(m,2H), 1.730 (s,3H)
化合物3a：H1-NMR(DMSO):δ8.242 (s,2H), 8.130 (d,1H,J=9.2HZ) , 8.051 (s,1H),7.960 (s,1H), 7.847 (s,1H), 7.782 (d,1H,J=16.4HZ), 7.064 (d,1H,J=8.8HZ),7.022 (d,1H,J=16.4HZ), 6.489 (q,1H,J=6.4HZ), 5.744(m,1H), 4.541(m,1H) , 4.291(s,2H), 3.978~3.372(m,6H), 2.298 (m,1H) 1.947 (m,2H), 1.717 (d,3H,J=5.6HZ)1.725~1.384(m,12H)
实施例13：本发明(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物中具有代表性的化合物的合成路线。
实施例14：化合物12的合成
将原料11（6.3g）溶解于30ml的浓硫酸中，于-2℃下缓慢低价混酸（浓硫酸/浓硝酸=10ml/12ml）,最后转至35℃下反应12h,原料反应完全。将反应液倒入冰水中，有大量的浅黄色的固体析出，减压过滤后，得到浅黄色固体12（4g），产率65.2%。
实施例15：化合物13的合成
将原料12(1eq)溶解于17.54ml的三氯氧磷中，室温下缓慢滴加2.92ml的N,N-二甲基苯胺(1eq)，再滴加8.04ul的DMF(0.00445eq)，于120℃下回流反应8h,待原料反应完全后，减压蒸出三氯氧磷，加入冰水，加入乙酸乙酯萃取，合并有机层，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂，得到黄棕色油状物，干法上样，最后纯化得到黄色固体13（1g），产率65%。
实施例16：化合物14的合成
将原料13（860mg）及Pd/C(180mg) 溶于乙酸乙酯中(30ml)，氢气换气3次，于氢气压力40psi下室温反应，原料反应完全后，过滤Pd/C，将滤液旋干，得到黄色固体14（500mg），产率65.1%。
实施例17：化合物15的合成
将原料14（2.63g）,加入263mg的Pd/C,加入三乙胺3.5ml,无水乙醇88ml,水4ml,于20psi的氢气压力反应8h，原料反应完全后抽滤，旋干溶剂，得到黄色固体，干法上样，纯化后得到白色固体15（1.22g）产率74.4%。
实施例18：化合物16的合成
将原料15（83mg,1eq）溶解于2ml的氯仿中，加入45.4mg(1.2eq)的醋酸钾及乙酸酐（157.5mg,4eq）,室温下搅拌1h,TLC监测原料反应完全后将其置于80℃下回流1h,冷至室温后加入亚硝酸异戊酯311.6ul(6eq),反应过夜后监测中间体反应完全，旋干溶剂得到黄色固体16（100mg），产率73.7%。
实施例19：化合物17的合成
将原料16 (100mg),溶于5ml的甲醇中，加入333mg的碳酸钾，室温下搅拌1h,原料反应完全后旋干溶剂，干法上样纯化，最后得到白色固体17 (50mg)，产率75.1%。
实施例20：化合物18的合成
将905ul的消旋醇（3.2eq）加入30ml的无水THF中，加入327mg（3.0eq）的60%NaH,活化30min后，加入400mg的原料17，回流12h后原料反应完全，加入水及乙酸乙酯萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，旋干溶剂，得到棕色油状物18 (420mg)，产率57.3%。
实施例21：化合物19的合成
将原料18（1eq）溶解于DMF中，加入3eq的KOH及1.8eq的碘，室温搅拌1h后原料反应完全，将反应液倒入饱和硫代硫酸钠中，有白色固体析出，乙酸乙酯萃取，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干溶剂得到黄色油状物，干法上样，纯化后得到白色固体19。
实施例22：化合物20的合成
将原料19（1g, 1eq）,对甲苯磺酸（0.4eq）溶于DCM中，加入2-四氢吡喃（5eq）后室温搅拌2h,原料反应完全后直接旋干溶剂，干法上样纯化最后得到白色固体20 (0.8g)，，产率67.2%。
实施例23：化合物21的合成
将PEG2000及溶解于0.5M的氢氧化钠中，室温下搅拌5min,加入原料及醋酸钯，然后于140℃下回流5.5h,然后加入原料20及醋酸钯，然后于120℃下回流7h.反应液用柱层析得到产品21。
实施例24：化合物1b的合成
将原料21溶解于甲醇中，加入浓盐酸室温搅拌过夜反应，原料反应完全后，旋干溶剂，乙酸乙酯萃取得到黄色固体，柱层析纯化得化合物1b。H1-NMR(DMSO):δ13.322 (s,1H),8.525 (s,2H), 7.924 (s,1H), 7.913 (s,1H), 7.680 (s,1H), 7.338 (d,1H,J=16.8HZ), 7.023 (s,1H), 6.989 (d,1H,J=16.8HZ), 6.444 (q,1H), 5.677 (s,1H),4.179 (t,2H), 1.746 (d,3H,J=6.8HZ)。
实施例25：化合物2b、3b的合成
这两个化合物的合成的起始原料是按照实施例18的方法，将原料17分别与R-1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙醇或者S-1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙醇于室温下搅拌0.5h,然后于40℃下过夜反应即可得到对应的化合18,接着按照实施例18-24的方法继续合成即可得到化合物2b、3b。
化合物2b：H1-NMR(DMSO):δ13.176 (br,1H), 8.529 (s,2H), 7.995 (s,1H),7.776 (d,1H,J=9.0HZ), 7.756 (s,1H), 7.876 (d,1H,J=16.8HZ), 6.786 (d,1H,J=9.0HZ),6.335 (d,1H,J=16.8HZ), 6.244 (q,1H), 5.545 (m,1H), 4.456 (m,2H), 3.781(m,2H), 1.787 (s,3H)。
化合物3b：H1-NMR(DMSO):δ8.453 (s,2H), 8.134 (d,1H,J=9.2HZ) , 8.343 (s,1H), 7.896 (s,1H), 7.846 (s,1H), 7.432 (d,1H,J=16.4HZ), 7.045 (d,1H,J=8.8HZ),7.031 (d,1H,J=16.4HZ), 6.453(q,1H,J=6.4HZ), 5.876(m,1H), 4.454(m,1H) , 4.564(s,2H), 3.978~3.334(m,6H), 2.676 (m,1H) 1.943 (m,2H), 1.743 (d,3H,J=5.6HZ)1.725~1.345(m,12H)。
实施例26：本发明(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物中具有代表性的化合物的合成路线。
实施例27：化合物23的合成
量取150ml浓H2SO4加入500ml圆底烧瓶中，置于-5℃低温冷浴槽中预冷，20min后分批加入50g原料22（2-氨基-4甲基吡啶），溶液逐渐由无色澄清溶液变为黄色粘稠状溶液，整个过程保持内温不超过0℃。配制34ml浓H2SO4与34ml浓HNO3的混酸于-5℃中预冷，通过恒压滴液漏斗缓慢加入到反应液中，保持温度不超过0℃，滴毕，将反应置于室温搅拌20min后，转移至油浴锅中缓慢加热升温至50℃，产生大量气泡，反应液颜色逐渐加深变为棕色。待不再产生气泡后，保持50℃继续反应。TLC监测反应，24h后反应完全，停止反应。将反应液缓慢加入装有冰水搅拌的烧杯中，避免放热过快，以NaOH溶液调节PH值至碱性（8左右），析出大量泥黄色固体，过滤并用水洗涤固体至中性，转至培养皿中，于红外灯下干燥，再于50℃减压干燥3h，得到黄色固体粗品41.61g。以EA重结晶，热过滤除去不溶杂质后，旋蒸除去一部分溶剂后重新以EA重结晶，于室温析晶，24h后过滤得到橙色固体18.54g，产率37.08%。
实施例28：化合物24的合成
称取原料2-氨基-4-甲基-5-硝基吡啶23（10g）于250ml圆底烧瓶中，加入70ml浓H2SO4搅拌溶解，待原料完全溶解后，将反应瓶置于-5℃低温冷浴槽中，由恒压低液漏斗缓慢滴加预先配置的NaNO2（6.76g）溶液，产生大量气泡，避免温度升高过快，保持整个过程内温不超过0℃，随着反应进行，反应瓶中逐渐析出固体，滴毕，搅拌10min后反应液变为橙色澄清溶液，0℃继续反应。
TLC监测显示3h后反应完全，停止反应。将反应液倒入装有约300ml水的烧杯中，析出大量黄色固体，室温析晶3h后，过滤收集固体并于红外灯下干燥，得到黄色固体6.72g，产率67.2%。
实施例29：化合物25的合成
称取原料2-羟基-4-甲基-5-硝基吡啶24（3.21g）以及消旋体3,5-二氯-4-异羟基乙基吡啶4g加入250ml圆底烧瓶中，向反应瓶中加入150mlTHF搅拌使固体溶解，滴加8.26mlDIAD后，反应液由浅黄色澄清溶液变为棕黄色浑浊溶液，加入10.93gPh3P后，反应液先变澄清，放热，后逐渐变为土黄色浑浊溶液，室温搅拌反应过夜。（18:00）
次日9:00，TLC显示原料反应完全，停止反应。旋蒸除去溶剂后，干法上样进行柱层析，先用PE/EA=300:1过出产物前面的多个小极性杂质，再用PE/EA=100/1过出产物，最后加大洗脱剂极性到PE/EA=50/1将产物全部过出，浓缩得到白色固体3.19g，产率46.83%。
实施例30：化合物26的合成
称取原料25（2.6g）加入100ml圆底烧瓶中，向反应瓶中加入EtOH/H2O 30ml/9ml后搅拌未完全将原料溶解，加入1.78g Fe粉及0.42g NH4Cl后将反应瓶转移至80℃的油浴锅中回流反应，反应液逐渐由淡黄色变为棕色。TLC监测反应进行，1h后显示原料反应完全，停止反应。用布氏漏斗过滤，以少量H2O和EA洗涤滤饼，合并滤液用EA萃取溶液三次，合并有机层并用Brine返洗，再用无水硫酸钠干燥一段时间，浓缩溶液得到黄色固体2.28g。未过柱，直接投下一步反应。
实施例31：化合物27的合成
取原料26（2.28g）在50ml圆底烧瓶中溶于15mlCHCl3溶液，向反应瓶中加入0.91g AcOK以及2.9mlAc2O后，室温搅拌反应。
1h后TLC显示原料反应完全，向反应瓶中缓慢滴加4.13ml (i-pen)ONO后，将反应转移至80℃油浴锅中回流反应过夜。（18:30）
次日9:00，TLC显示反应完全，反应液由开始的黄色变为棕色澄清溶液，旋蒸除去溶剂后，加入13ml MeOH以及5gK2CO3后，室温搅拌反应。15:00，TLC显示反应完全，停止反应，加入适量水后，以EA萃取溶液三次，合并有机层并用Brine返洗，再用无水硫酸钠干燥一段时间，浓缩溶液后干法上样进行柱层析，洗脱剂由PE/EA=8/1→PE/EA=5/1过柱，浓缩得到棕色固体1.46g，产率61.76%。
实施例32：化合物28的合成
称取原料27（1.45g）加入25ml圆底烧瓶中，向反应瓶中加入12ml DMF，搅拌反应液呈棕色澄清溶液，加入0.79gKOH以及2.14g I2后，反应液逐渐变黑，室温搅拌反应。
TLC监测反应进行，1h后原料反应完全，停止反应。将反应液倒入50ml饱和Na2S2O3溶液中搅拌30min后，用EA萃取溶液三次，合并有机层并用Brine返洗，再用无水硫酸钠干燥一段时间，浓缩后得到黄色固体2.15g。干法上样进行柱层析，洗脱剂由PE/EA=8/1→PE/EA=5/1→PE/EA=2/1过柱，浓缩得到淡黄色固体1.73g，产率84.68%。
实施例33：化合物29的合成
称取原料28（1g）加入50ml圆底烧瓶中，向反应瓶中加入30ml DCM将固体溶解，加入0.16g TsOH后缓慢滴加1.00ml 3,4-二氢吡喃，反应液的颜色逐渐变深，室温继续反应。
TCL监测反应，2.5h后产物点浓度较大，此时原料点并未反应完全，但如果继续反应，产物点将会变淡且会有一个小极性的新点产生并不断变浓，故停止反应。干法上样柱层析，洗脱剂由PE/EA=10/1→PE/EA=8/1过柱，浓缩得到黄色油状物0.62g，产率51.95%。
实施例34：化合物30的合成
称取520mg原料29以及230mg加入50ml双颈瓶中，向反应瓶中加入25ml重蒸无水DMF溶液搅拌将固体溶解，20min后加入227μl DIEA，于水泵将反应瓶中的空气换为N2，室温搅拌30min，加入23mg Pd(OAc)2以及37mg P(O-tol)3后重新将反应瓶中换入N2，将反应瓶置于100℃的油浴锅中进行反应。（17:30）21:00将油浴锅的温度调至80℃反应过夜。
次日9:00，TLC显示原料反应完全，停止反应。旋蒸除去溶剂后，干法上样进行柱层析，洗脱剂由PE/EA=50/1→PE/EA=30/1→PE/EA=20/1→PE/EA=10/1→PE/EA=5/1→PE/EA=2/1→PE/EA=1/1过柱，浓缩得到棕色油状物220mg，产率35.82%。
实施例35：化合物1c的合成
取原料30 (220mg)加入50ml圆底烧瓶中，向反应瓶中加入15mlMeOH将其溶解，室温下缓慢滴加1.5ml浓HCl后，于室温搅拌反应。
TCL监测反应，8h后原料反应完全，停止反应。旋蒸除去溶剂后加入适量水，以EA萃取溶液三次，合并有机层并用Brine返洗，再用无水硫酸钠干燥一段时间，浓缩溶液得到黄色固体210mg，干法上样进行柱层析，洗脱剂由DCM/MeOH=50/1→DCM/MeOH=30/1过柱，浓缩得到黄色固体90mg，产率56.39%。H1-NMR(DMSO):δ13.122(s,1H), 8.433 (s,2H), 7.866(s,1H), 7.813 (s,1H), 7.660 (s,1H), 7.367 (d,1H,J=16.8HZ), 7.127 (s,1H),6.953 (d,1H,J=16.8HZ), 6.443(q,1H), 5.662 (s,1H), 4.134 (t,2H), 1.734 (d,3H,J=6.8HZ)。
实施例36：化合物2c、3c的合成
这两个化合物的合成的起始原料是按照实施例29的方法，将原料24分别与R-1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙醇或者S-1-（3,5-二氯吡啶-4-基）乙醇于室温下搅拌0.5h,然后于40℃下过夜反应即可得到对应的化合25,接着按照实施例29-35的方法继续合成即可得到化合物2c、3c。
化合物2c：H1-NMR(DMSO):δ13.123 (br,1H), 8.329 (s,2H), 7.934 (s,1H),7.234 (d,1H,J=9.0HZ), 7.256 (s,1H), 7.216 (d,1H,J=16.8HZ), 6.586 (d,1H,J=9.0HZ),6.345 (d,1H,J=16.8HZ), 6.243 (q,1H), 5.543(m,1H), 4.478 (m,2H), 3.745(m,2H), 1.787 (s,3H)。
化合物3c：H1-NMR(DMSO):δ8.432 (s,2H), 8.189(d,1H,J=9.2HZ) , 8.143(s,1H), 7.832 (s,1H), 7.823 (s,1H), 7.497 (d,1H,J=16.4HZ), 7.098 (d,1H,J=8.8HZ),7.032 (d,1H,J=16.4HZ), 6.445(q,1H,J=6.4HZ), 5.843(m,1H), 4.454(m,1H) , 4.576(s,2H), 3.954~3.343(m,6H), 2.645 (m,1H) 1.945(m,2H), 1.765 (d,3H,J=5.6HZ)1.723~1.345(m,12H)。
实施例37: 体外抗肿瘤活性实验
基于CellTiter-Glo细胞生长抑制实验模型，每个化合物检测浓度为10 μM，细胞与化合物孵育72小时后进行检测，计算细胞增殖抑制百分比。实验同时设置阴性对照组（不加药仅含0.2% DMSO）和盐酸阿霉素（多柔比星，Doxorubicin）阳性对照组，阳性对照为8个浓度的量效曲线。
1.材料
1.1细胞培养材料：
（1）RPMI 1640 培养基, Cat. No. #22400-089, Lot. No. #792079（Gibco）
（2）FBS, Cat. No. #26140-079, Lot. No. #1227693（Gibco）
（3）DMSO, Cat. No. #0231-500ml, Lot. No. #2210C024 (Amresco)
（4）0.25% Trypsin-EDTA, Cat.No. #GB25200-072, Lot. No. #862530（Gibco）
（5）PBS, Cat.No. #21300-025, Lot.No.#1434815（Gibco）
（6）6 孔板, Cat.No.#3516, Lot.No.#34609010 (Corning)
（7）50 ml 离心管, Cat. No. #430828, Lot. No. #17409032 (Corning)
（8）384 孔检测板, Cat. No. #3707 (Corning)
（9）15 ml 离心管, Cat. No. #430053 (Corning)
1.2检测试剂
CellTiter-Glo 试剂盒, Cat. No. #G7571, Lot. No. #328530 (Promega) 2.实验方法:
2.1 细胞培养
2.1.1 细胞复苏
实验前，超净工作台台面用紫外线照射30 min。将水浴锅预热至37℃,将新鲜配制的培养基置于水浴锅预热。取出冻存的细胞，迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并不断的摇动，使管中的液体迅速融化。 约1-2 min后冻存管内液体完全溶解，取出用含70%酒精棉球擦拭冻存管的外壁。 吸取冻存管内细胞，转移至15 ml离心管中，同时加入5ml预热完全培养基。 500 x g低转速离心3-5 min，吸弃上清液。向离心管内加入10 ml培养液，轻柔吹打制成细胞悬液。通过台盼蓝染色细胞记数并进行活力测定后，将细胞悬液加入10 cm培养皿中，于含37℃/ 5% CO2培养箱中培养过夜。
2.1.2 细胞培养与传代
细胞培养时所需的培养基以及细胞传代的比例参考细胞供货商细胞培养说明书。
2.2 化合物处理
待测化合物用DMSO溶解后用完全培养基稀释至5倍的最终浓度（最终浓度为10 μM）用于实验。在项目完成后，GenScript会保存客户样品储存液3个月，之后会做丢弃处理。
2.3 CellTiter-Glo细胞活力检测方法
(1) 接种细胞：
收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，在384孔板中接种40 μl细胞悬液（2 ×104/mL），边缘孔用无菌PBS填充。
(2) 将细胞板放在37°C / 5% CO2培养箱孵育至贴壁，加入10 μl 5 x待测浓度的化合物。原则上细胞贴壁后即可加化合物，本研究采用的方法是铺好细胞孵育6小时后加入药物。
(3) 细胞在37°C / 5% CO2培养箱孵育，在24小时、48小时和72小时用倒置显微镜进行观察。
(4) 读板：
72小时后每孔加入30μL每孔CellTiter-Glo 反应混合物，将检测板振荡 2-3分钟，室温孵育10min。 在Pherastar（BMG labtech）读RLU值并保存数据。
2.4 数据分析
Cell Growth inhibition% = 100% × [1-RLU样品/RLU阴性]，其中RLU样品为加化合物孔或阳性对照孔RLU值，RLU阴性为仅含DMSO的RLU值。运用GraphPad Prism 6.0软件进行数据分析。
检测16个化合物在10 μM时对肿瘤细胞SNU-16及KATO III的生长抑制作用，每个浓度检测2个复孔。
上述实验结果证明：化合物的活性已经达到较高水平，本发明的（E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物均有很显著的抗肿瘤活性。
本发明并不局限于前述的具体实施方式。本发明扩展到任何在本说明书中披露的新特征或任何新的组合，以及披露的任一新的方法或过程的步骤或任何新的组合。

Claims (10)

1.结构通式I 所示的一类（E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物或其药学上可接受的盐：
其中
X代表N；
Y代表N；
B-A-(R1)a代表 或或基团。
2.根据权利要求1 所述的（E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物，其特征在于：X代表N原子，Y代表N原子。
3.根据权利要求1 所述的（E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物，其特征在于： X代表对应的N原子可以唯一出现在此类化合物中；X代表对应的N原子可以唯一出现在此类化合物中；X、Y代表对应的N原子可以同时出现在此类化合物中。
4.根据权利要求1 所述的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物，其特征在于：所述B-A-(R1)a中，选自外消旋体1-(3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基、R-1-(3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基、S-1-(3,5-二氯吡啶-4-基）乙氧基。
5.根据权利要求1-4任一所述的通式（Ⅰ）的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物衍生物或其药学上可接受的盐、水合物，其特征在于所述化合物选自：
或其药学上可接受的盐、水合物。
6.权利要求1~5 中任意一项所述的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物在制备用于在温血动物中产生FGFR抑制作用以抗肿瘤的药物中的用途。
7.根据权利要求5 所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为非小细胞肺癌。
8.根据权利要求5 所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为胃癌。
9.根据权利要求5 所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为多发性骨髓瘤。
10.一种具有抗肿瘤活性的药物组合物，其特征在于，包含治疗有效量的一种或多种权利要求1~5中任意一项所述的(E）-2-（4-（2-（5-（1-取代基-1H吡唑并芳杂环-3-基）乙烯基）-1H-吡唑-1-基）乙醇类化合物及药学上可接受的盐、水合物的药物组合物。
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