CN105902761A - 一种槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,可有效解决高血糖和糖尿病的治疗用药问题,方法是,取鲜槐花,洗净,真空干燥,然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀,粉碎成细粉,即为槐花珍,包装,灭菌。本发明原料丰富,制备方法简单,有效用于治疗高血糖和糖尿病,实现槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,是治疗高血糖和糖尿病药物上的创新,经济和社会效益显著。
Description
技术领域
本发明涉及医药,特别是一种槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用。
背景技术
当血糖值高于正常范围即为高血糖。高血糖也是通常大家所说“三高”中的一高。另外“两高”分别是高血压和高脂血症。空腹血糖正常值在6.1mmol/L以下,餐后两小时血糖的正常值在7.8mmol/L以下,如果高于这一范围,称为高血糖。正常情况下,人体能够通过激素调节和神经调节这两大调节***确保血糖的来源与去路保持平衡,使血糖维持在一定水平。但是在遗传因素(如糖尿病家族史)与环境因素(如不合理的膳食、肥胖等)的共同作用下,两大调节功能发生紊乱,就会出现血糖水平的升高。
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损,或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖,导致各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍,临床表现多饮、多尿、多食和消瘦、疲乏无力、肥胖。
高血糖和糖尿病严重影响着人们的身体健康,现虽有治疗高血糖和糖尿病的多种药物,但由于种种原因,其使用和疗效并不尽人意,因此,研制新的治疗高血糖和糖尿病的药物势在必行。
发明内容
针对上述情况,为克服现有技术之缺陷,本发明之目的就是提供一种槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,可有效解决高血糖和糖尿病的治疗用药问题。
本发明解决的技术方案是,一种槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,该槐花珍是,取鲜槐花,洗净,真空干燥,然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀,粉碎成细粉,即为槐花珍(粉),包装,灭菌。
本发明原料丰富,制备方法简单,有效用于治疗高血糖和糖尿病,实现槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,是治疗高血糖和糖尿病药物上的创新,经济和社会效益显著。
具体实施方式
以下结合具体情况对本发明的具体实施方式作详细说明。
本发明在具体实施中,一种槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,该槐花珍 是,取鲜槐花,洗净,60℃真空干燥,然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀,粉碎成过100目筛的细粉,即为槐花珍(粉),包装,灭菌,鲜槐花与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草的重量比为3︰2︰1︰0.5︰0.3︰0.2。
在上述组分中,其中槐花是豆科植物的花及花蕾,鲜槐花是指从槐树上采集的新鲜槐花,槐花味苦,性平,无毒,具有清热、凉血、止血、降压的功效。对吐血、尿血、痔疮出血、风热目赤、高血压病、高脂血症、颈***核、血管硬化、大便带血、糖尿病、视网膜炎、银屑病等有显著疗效;还可以驱虫、治咽炎。槐花能增强毛细血管的抵抗力,减少血管通透性,可使脆性血管恢复弹性的功能,从而降血脂和防止血管硬化。
土炒怀山药是怀山药用用东墙土或灶心土(公知技术),以增强补脾健胃的功效。
粉葛:粉葛是豆科,葛属植物葛的变种(拉丁学名:Pueraria lobata(Willd.)Ohwi var.thomsonii(Benth.)Vaniot der Maesen),中药名,主治外感发热、头项强痛、麻疹初起、疹出不畅、温病口渴、消渴、泄泻、痢疾、高血压、冠心病。
玫瑰花甘、微苦,温。归肝、脾经,行气解郁,和血,止痛。用于肝胃气痛,食少呕恶,***,跌扑伤痛。
陈皮味苦、辛,性温,归肺、脾经,理气健脾,燥湿化痰。
甘草气微,味甜而特殊。功能主治清热解毒、祛痰止咳、脘腹等。
上述组分的有效组合,互相支持,具有降血糖之功效,有效用于治疗高血糖和糖尿病,实现槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,并经实地试验和应用取得了非常好的有益技术效果,有关试验资料如下:
1实验材料
1.1药物试剂
本发明槐花珍(河南中医药大学实验室提供,每袋10g,每次1-2袋,每天3次);盐酸二甲双胍,上海医药(集团)有限公司信谊制药总厂生产;盐酸肾上腺素注射液,上海禾丰制药有限公司生产;四氧嘧啶,sigma公司生产;链脲佐菌素,sigma公司生产;生理盐水,郑州永和制药有限公司生产;浓硫酸,洛阳市化学试剂厂生产;柠檬酸(分析纯),湖北省医药公司化玻站;柠檬酸钠(分析纯),天津市化学试剂批发部;血糖试剂盒,浙江东瓯生物工程有限公司生产;肝糖元试剂盒,南京建成生物工程研究所生产;糖化血清蛋白(GSP)测定试剂盒,南京建成生物工程研究所第一分所生产。
1.2实验动物
小鼠:昆明种,SPF级,雄性,由河南省医学实验动物中心提供,合格证号:008373。
1.3实验仪器
UV-2000紫外可见分光光度计:尤尼柯(上海)仪器有限公司生产;恒温水浴锅,北京市光明仪器厂生产;离心机,北京医疗仪器修理厂生产;FA(N)/JA(N)系列电子天平,上海民桥精密仪器有限公司生产;可调式移液器,上海雷勃分析仪器有限公司生产。
1.4试液配制
枸橼酸缓冲液的配制:分别称取1292.4mg柠檬酸和1132.3mg柠檬酸钠配成100ml溶液,此溶液即为PH为4.2枸橼酸缓冲液,为确保其准确性可用PH仪器校正调配。(链脲佐菌素不十分稳定,且对血管刺激较大,用缓冲液配制链脲佐菌素可减轻这些负面影响):临用前配制。
10%***固定液的配制:36%甲醛溶液10ml,用蒸馏水配成100ml。
2实验方法
2.1分组与给药
2.1.1对肾上腺素致小鼠高血糖模型的影响
取雄性小鼠50只,体重20~22g,随机均匀分为5组,分别灌服大、小剂量的槐花珍混悬液(16g/kg、8g/kg,0.4g/ml、0.2g/ml,0.4ml/10g),二甲双胍混悬液(0.208g/kg,0.052mg/ml,0.4ml/10g),模型组和空白组灌服同体积的生理盐水液(,0.4ml/10g)。每天上午给药1次,下午喂饲,连续9天。于禁食后12h,除空白组外每鼠迅速腹腔注射肾上腺素240ug/kg,空白对照组注射同体积生理盐水,于给肾上腺素后30min、60min立即眼眶取血,分离血清,供测血糖用。然后处死小鼠后,称取肝脏,制匀浆,供测肝糖元用。
2.1.2对四氧嘧啶致小鼠高血糖模型的影响
取雄性小鼠50只,体重20~22g,随机均匀分为5组,分别灌服大、小剂量的槐花珍混悬液(16g/kg、8g/kg,0.4g/ml、0.2g/ml,0.4ml/10g),二甲双胍混悬液(0.208g/kg,0.052mg/ml,0.4ml/10g),模型组和空白组灌服同体积的生理盐水液(,0.4ml/10g)。每天上午给药1次,下午喂饲,连续10天。于第7天禁食后12h灌药后90min,除空白组外每鼠尾静脉注射80mg/kg(0.05ml/10g)新配制的四氧嘧啶生理盐水液,注射后72h,小鼠眼眶取血,分离血清,供测血糖用。然后处死小鼠后,称取肝脏,制匀浆,供测肝糖元用。
2.1.3对链尿佐菌素致小鼠糖尿病模型的影响
取雄性小鼠,正常饲养3天,禁食12h后,尾静脉注射链脲佐菌素80(mg/kg,0.02ml/10g),于注射第11天禁食12h后,尾部采血测空腹血糖值,选取血糖值>11.1mmol/L并具有明显多饮、多食、多尿症状的小鼠40只,按血糖值随机均分为4组,分别灌服大、中、小剂量槐花珍混悬液(16g/kg、8g/kg,0.4g/ml、0.2g/ml,0.4ml/10g)、二甲双胍混悬液 (0.208g/kg,0.052mg/ml,0.4ml/10g)同体积的生理盐水(模型组)。另取同批小鼠10只作为空白对照组,灌服同体积生理盐水。每天上午给药1次(给水),下午喂饲,连续30天。于给喂饲第10、20、30天尾部取血测血糖值。第30天在禁食12h末次给药1h后,小鼠眼眶取血,分离血清,供测血糖用。然后处死小鼠后,称取肝脏,制匀浆,供测肝糖元用;取胰腺,10%***液固定,作病理切片,供光镜观察胰脏组织情况。
2.2指标测定
2.2.1血清血糖水平
小鼠眼眶取血,分离血清,按试剂盒说明操作测OD值,按试剂盒公式换算血糖值。
试剂成分以及浓度
操作方法
结果计算:葡萄糖含量(nmol/L)=Ar/As×5.55(100mg/dL)
单位换算:mg/dl×0.0555=mmol/L
2.2.2肝糖原含量
眼眶取血后,处死小鼠,取肝脏,精密称取肝脏50mg左右,按肝糖元试剂盒说明于620nm处测各管OD值,按试剂盒公式换算肝糖元值。
样本前处理
取样:取新鲜肝脏用生理盐水漂洗后,滤纸吸干,称重
水解:按样本重量(mg):碱液体积(ul)=1:3,一起加入试管中,沸水浴煮20分钟,流水冷却.
将糖元水解液进一步制备成糖原检测液:
肌糖元检测液为5%,加蒸馏水的量为:肝脏重量×20-肝脏重量×4=肝脏重量×16
操作表
混匀后置于沸水中煮5分钟,冷却后于620nm波长,1cm光径,空白管调零,测各管OD值
计算公式:糖元含量(mg/g组织)=测定管OD值/标准管OD值×标准管含量(0.01mg)×样本测试前稀释倍数×10÷1.11
3实验结果
3.1对肾上腺素致小鼠血糖水平及肝糖原含量的影响
按血糖试剂盒说明书和肝糖原试剂盒说明书,分别测定各组小鼠的血糖水平和肝糖原含量,结果见表1。
表1槐花珍对肾上腺素致小鼠高血糖模型血糖水平及肝糖原含量的影响
*与模型组比P<0.05,**与模型组比P<0.01
从上表可看出,与空白对照组比,模型组在30分钟和60分钟血糖水平显著升高(P﹤0.01),肝糖元水平显著降低(P﹤0.01),说明造肾上腺素高血糖模型成功。与模型组比,大、小剂量槐花珍组和二甲双胍组可显著降低30分钟血糖水平(P﹤0.01)、可显著升高肝糖元水平(P﹤0.01),二甲双胍组可显著性降低60分钟血糖水平(P﹤0.01),大剂量槐花珍组可明显降低60分钟血糖水平(P﹤0.05)。
3.2对四氧嘧啶致致小鼠血糖水平及肝糖原含量的影响
按血糖试剂盒说明书和肝糖原试剂盒说明书进行操作,分别测定各组小鼠的血糖水平和肝糖原含量,结果见表2。
表2槐花珍对四氧嘧啶致小鼠高血糖模型血糖水平及肝糖元含量的影响
*与模型组比P<0.05,**与模型组比P<0.01
从上表可看出,与空白对照组比,模型组血糖水平显著升高(P﹤0.01),肝糖元水平显著降低(P﹤0.01),说明造小鼠四氧嘧啶高血糖模型成功。与模型组比,大、小剂量槐花珍组和二甲双胍组可显著降低小鼠四氧嘧啶高血糖模型糖水平(P﹤0.01),大剂量槐花珍组可显著升高肝糖元水平(P﹤0.01),小剂量槐花珍组和二甲双胍组可明显升高肝糖元水平(P﹤0.05)。
3.3对链尿佐菌素致小鼠糖尿病模型血糖及胰脏组织形态的影响
按血糖试剂盒说明书和肝糖原试剂盒说明书进行操作,分别测定各组小鼠的血糖水平和肝糖原含量,结果见表3。光镜观察胰脏组织切片,各组胰脏不同病理变化见表4。
表3槐花珍对链尿佐菌素致小鼠糖尿病模型血糖水平的影响(mmol/l)
*与模型组比P<0.05,**与模型组比P<0.01
从表3可看出,与空白对照组比,从开始给药到给药第30天,模型组血糖水平均显著升 高(P﹤0.01),肝糖元水平显著降低(P﹤0.01),说明造小鼠链尿佐菌素糖尿病模型成功。各给药组开始血糖之间无明显差异,说明分组均匀;给药第10天,各给药组比模型组均降低,但无明显差异;给药第20天,与模型组比,二甲双胍组和大剂量槐花珍组小鼠血糖水平均显著降低(P﹤0.01);给药第30天,与模型组比,大、小剂量槐花珍组和二甲双胍组均可显著降低模型小鼠血糖水平(P﹤0.01),小剂量槐花珍组明显降低血糖水平(P﹤0.05);大、小剂量槐花珍组和二甲双胍组均可显著升高模型小鼠肝糖元水平(P﹤0.01)。
表4槐花珍对链尿佐菌素致小鼠糖尿病模型胰脏组织的影响
“—”胰岛细胞胞浆丰富,未出现萎缩,水肿和空泡变性,均正常;“+”胰岛细胞呈现萎缩现象,而无水肿和空泡变性;“++”胰岛细胞大部分出现萎缩,细胞少数出现水肿而无空泡变性;“+++”胰岛细胞出现萎缩,同时出现水肿和空泡变性明显者。
从上表可看出,经Ridit检验,与空白对照组比,模型组胰脏病理变化显著(P﹤0.01),说明造小鼠糖尿病模型成功。与模型组比,大剂量槐花珍组均可显著减轻胰脏的病理变化(P﹤0.01)。各组小鼠胰脏组织光镜观察可见:空白对照组小鼠胰岛细胞胞浆丰富、胞体大、胰岛体积也大;模型组小鼠胰岛中的胰岛细胞胞浆明显减少、胞体缩小、细胞显得密集,胰岛细胞部分出现空泡变;二甲双胍组小鼠胰岛中的胰岛细胞部分细胞胞浆较丰富,部分细胞胞浆明显减少,胞体明显缩小,核密集;大剂量槐花珍组小鼠胰脏组织的大部分细胞已得到恢复,胞浆丰富,个别细胞呈水肿状态,周围少部分细胞出现萎缩;小剂量槐花珍组小鼠胰脏组织中的胰岛细胞大部分呈现萎缩状态,细胞体积缩小,核密集,少数细胞出现一定萎缩,但有部分胞浆。
临床资料:
根据WHO2型糖尿病标准,“中药新药临床研究指导原则”制定本研究的标准:糖尿病标准:具有典型症状(多饮、多食、多尿、体重下降、皮肤瘙痒等),空腹血糖>7.0mmol/L或餐后血糖≥11.1mmol/L;不具有典型症状,空腹血糖>7.0mmol/L或餐后血糖≥11.1mmol/L,糖耐量试验2小时血糖11.1mmol/L。气血血瘀标准:主症:腰脊酸痛、疲倦无力,或水肿,纳少或腕胀,面色晦暗,舌色紫暗或有瘀点、瘀斑。次症:大便溏,尿频或夜尿多,舌质淡 红,有齿痕,苔薄白,肌肤甲错或肢体麻木,脉细或细涩,全血、血浆粘度升高。主症两项加次症中任意两项,并必须具备舌紫暗或有瘀点、瘀斑与血液流变学检测全血、血浆粘度升高中任意一项,即可诊断。
疗效标准。显效:血糖基本降至正常或血糖下降>3.0mmol/L;患者症状基本消失,血液流变学指标有明显改善。有效:血糖下降>1.0mmol/L;患者症状得到改善,血液流变学指标有所改善;无效:患者血糖、症状、体征无改善,各项指标未达到有效标准,甚至恶化。
气虚血瘀型糖尿病42例,男26例,女16例,年龄32-63岁,糖尿病病程0.5-2年。槐花珍:每次1-2袋,开水冲服,每袋10g,每天3次。一个月为一个疗程。应用槐花珍期间,控制饮食。疗程结束:42例气虚血瘀糖尿病患者,6例显效、32例显效,4例无效。总有效率90.5%。
4结论
上述实验充分证明,槐花珍可显著降低肾上腺素所致的高血糖小鼠的血糖含量;显著降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠和链脲佐菌素糖尿病模型小鼠的高血糖。槐花珍还能够促进血糖转化为糖元,显著提高肾上腺素和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠肝糖元的含量。槐花珍还可以改善链脲佐菌素糖尿病小鼠胰岛细胞形态和功能,发挥良好降血糖作用。大剂量组优于小剂量组。也就是说随着给药剂量的增加,降糖作用就越明显,肝糖元含量的增加也越显著,呈现一定的量效关系。结果提示槐花珍的降糖作用机理可能是其对抗肾上腺素分解肝糖原;改善胰岛细胞形态和功能,促进动物损伤的胰岛β细胞恢复,有效用于制备治疗高血糖和糖尿病的药物,实现槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,具有实际的应用价值,经济和社会效益显著。
Claims (1)
1.一种槐花珍在制备治疗高血糖和糖尿病药物中的应用,该槐花珍是,取鲜槐花,洗净,60℃真空干燥,然后与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草混合均匀,粉碎成过100目筛的细粉,即为槐花珍,包装,灭菌,鲜槐花与土炒怀山药、粉葛、玫瑰花、陈皮和甘草的重量比为3︰2︰1︰0.5︰0.3︰0.2。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160831 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |