CN105853999A - 干扰素λ的雾化吸入剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物技术药物的制剂领域,涉及干扰素λ的雾化吸入剂。所述的雾化吸入剂单次给药剂量中含有1‑1000μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料;优选单次给药剂量中含有5‑100μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料;更优选单次给药剂量中含有10‑50μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料。用本发明的干扰素λ的雾化吸入剂治疗病毒性肺炎,可较传统的干扰素α的雾化吸入剂明显提高疗效。
Description
技术领域
本发明一般的涉及干扰素的呼吸道及肺部给药制剂,特别的涉及干扰素的雾化吸入剂。
背景技术
病毒性肺炎是一种婴幼儿时期的常见病,严重危害婴幼儿的生命健康。据不完全统计,超过90%的婴幼儿在2岁以前感染过病毒性肺炎,其中80%以上病例在1岁以内,发病高峰年龄为2-6个月,1-6个月可见较重病例。婴幼儿因感染病毒性肺炎造成的死亡在发达国家为0.5%-2.0%,在发展中国家可达7%,在我国更是婴幼儿死亡的首要原因。此外,病毒性肺炎的传染性和再感染性很强,有报道表明家庭成员间可发生相继感染,已感染婴幼儿在10年内再感染发生率高达65%。
引起病毒性肺炎的病毒主要是腺病毒(adenovirus,ADV)和呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),其次是流感病毒(influenza virus,IFV)和副流感病毒(parainfluenza virus,PIV),再次是巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)、单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)、肠道病毒(enterovirus,EV)、人类偏肺病毒(hMPV)等。由于这些病毒极易发生变异,加之在病毒感染后容易诱发进一步的细菌感染,从而给患儿造成混合感染和并发症,因此婴幼儿病毒性肺炎很难实现全面的特异防治,临床上缺乏有效的药物治疗。
化学药物是目前治疗病毒性肺炎的最主要药物,原因是临床使用时间最长,可迅速清除感染病毒;但化学药物治疗病毒性肺炎的缺点是停药后病情容易反弹,不能调节和提高患儿机体免疫力对抗病毒,且在长期使用过程中容易产生耐药性。目前临床上治疗病毒性肺炎的化学药物包括但不限于利巴韦林、更昔洛韦、奥司他韦、阿糖腺苷、金刚烷胺等。例如美国专利5,290,540公开了利巴韦林用于治疗病毒性肺炎的方法。
中药对病毒性肺炎的治疗在近年的研究使用日益广泛,这源于中药药性的温和持久,并兼具免疫调节作用,但中药治疗病毒性肺炎周期长,且中药在很大程度上并不适宜于婴幼儿使用,另外中药的长期安全性问题也是一个不容忽视的问题。目前有报道临床研究用于病毒性肺炎治疗的中药包括但不限于大青叶、板蓝根、银花、连翘、射干、黄芩、黄连、麻黄、苦杏仁等。例如中国专利申请03131642.5公开了一种治疗小儿病毒性肺炎的清肺口服液制剂,其由麻黄、生石膏、苦杏仁、葶苈子、桑白皮、前胡、僵蚕、丹参、虎杖、拳参等中草药组成。又如中国专利申请02138175.5公开了一种治疗小儿病毒性肺炎的药物组合物,其由麻黄、苦杏仁、石膏、甘草、前胡、僵蚕、丹参、虎杖、拳参、葶苈子、桑白皮十一味中药组成。
伴随着生物技术药物的迅猛发展,近年来越来越多的研究关注生物技术药物对病毒性肺炎的治疗,其中使用的生物技术药物包括但不限于干扰素、白细胞介素、人血丙种球蛋白、胸腺肽、特异性抗病毒抗体等,尤其以干扰素使用的报道最多。例如中国专利申请03147580.9公开了一种治疗病毒性肺炎的重组人干扰素α喷雾剂,其由重组人干扰素α原液配以适当的保护剂、粘膜吸收促进剂、抑菌剂等制成,pH值在5.0-8.0。
干扰素(interferon,IFN)是一种最初由动物机体产生的兼具抗病毒、抗增殖与免疫调节作用的细胞因子蛋白质类药物,根据其产生部位、作用机理、药效特点等的不同可以分为I、II、III三种大的类型。其中I型干扰素主要是指干扰素α与干扰素β,干扰素α又有包括干扰素α2a、干扰素α2b、干扰素α1b在内的超过20种的天然亚型;II型干扰素主要是指干扰素γ;III型干扰素主要是指干扰素λ,包括干扰素λ1、干扰素λ2、干扰素λ3三种天然亚型。
生物技术药物,尤其是干扰素用于病毒性肺炎的治疗,作用持久,可调节和提高患儿机体免疫力对抗病毒,不易产生耐药性,安全性更高。但目前在干扰素治疗病毒性肺炎的报道中,所用的都是干扰素α,未见有使用III型干扰素,即干扰素λ的报道。
相较于I、II型干扰素,III型干扰素的发现与报道较晚。其中干扰素λ1最早由津莫吉尼蒂克斯公司公开于其国际专利申请PCT/US2001/021087(国际公布日2002年1月10日,进入中国国家阶段后的国家申请号为01813153.0)中,干扰素λ2与干扰素λ3随后亦由该公司公开于其国际专利申请PCT/US2002/012887(国际公布日2002年10月31日,进入中国国家阶段后的国家申请号为02801970.9)中。而在该公司再后的国际专利申请PCT/US2004/025864(国际公布日2005年3月17日,进入中国国家阶段后的国家申请号为200480029170.7)中则对干扰素λ及其多种变体做了***的梳理,干扰素λ1、λ2、λ3的氨基酸序列分别被确定的报道在了其说明书公开的SEQ ID No.4、SEQ ID No.2和SEQ ID No.6中,干扰素λ1、λ2、λ3的制备方法则被报道在了其说明书实施例1-9中(此外,干扰素λ1、λ2、λ3的制备方法也可参见国际专利申请PCT/US2002/012887,即中国专利申请02801970.9的说明书实施例1-7)。
干扰素λ1在最初公开时的代号为zcyto21,干扰素λ2在最初公开时的代号为zcyto20,干扰素λ3在最初公开时的代号为zcyto22。在随后的研究中由于发现它们的基因、蛋白质三级结构与白介素10(IL-10)非常接近,因此它们被归于白介素10家族,分别被重新命名为IL-29、IL-28A与IL-28B。
尽管zcyto21、zcyto20与干扰素α的氨基酸序列一致性(也即同源性)只有17%,与干扰素β的氨基酸序列一致性只有14%,与干扰素γ的氨基酸序列一致性只有4%;zcyto22与干扰素α的氨基酸序列一致性只有16%,与干扰素β的氨基酸序列一致性只有13%,与干扰素γ的氨基酸序列一致性只有4%,但它们在随后的研究中都发现和确认与传统的干扰素有相似的信号转导途径,有很多类干扰素性质。因此从功能的角度出发,它们最终分别被命名为干扰素λ1、干扰素λ2与干扰素λ3。
鉴于传统的干扰素α对病毒性肺炎的疗效也有待进一步提高,因此,有必要尝试III型干扰素,即干扰素λ用于病毒性肺炎的治疗。
而在治疗病毒性肺炎的药物递送***方面,雾化吸入剂是一种近年来在临床上发展起来的新的给药剂型。所谓雾化吸入剂,是指将药液经过雾化变成药雾,经吸入达呼吸***靶部位起治疗作用的剂型。雾化吸入剂的给药必须借助一定的雾化吸入装置,包括压缩雾化器、超声雾化器等。由于雾化吸入剂给药后不经过吸收可直接作用于呼吸***病变部位,从而相比其他剂型有明显更高的生物利用度与药效,因此雾化吸入剂已逐渐成为临床上治疗小儿病毒性肺炎的首选剂型。
发明内容
本发明的首要目的是提供一种干扰素λ的雾化吸入剂,以用于婴幼儿病毒性肺炎的治疗,进一步提高疗效。
在基础的实施方案中,本发明的干扰素λ的雾化吸入剂单次给药剂量(例如0.25ml、0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml或5ml)中含有1-1000μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料。
所述的雾化吸入剂可药用辅料包括但不局限于干扰素λ活性保护剂、渗透压调节剂、防腐剂、吸附抑制剂、pH稳定调节剂中的一种或几种。而且应当指出,一种或一类物质可能同时起到多种可药用辅料功能的作用。例如人血清白蛋白可同时起到渗透压调节剂、活性保护剂、吸附抑制剂的作用。
干扰素λ活性保护剂起到保护干扰素λ雾化吸入剂在制备、运输、贮存与使用中活性不丧失或较少丧失的作用,除人血清白蛋白外还可以选择氨基酸、多元醇、环糊精、卵磷脂等物质中的一种或多种的组合。
渗透压调节剂起到将干扰素λ雾化吸入剂的渗透压调节到与人体血液基本等渗(240-360mOsm/L)的作用,除人血清白蛋白外还可以选择氯化钠、甘露醇、葡萄糖等物质中的一种或多种的组合。
防腐剂起到在干扰素λ雾化吸入剂的制备、运输、贮存与使用过程中抑制微生物生长,尤其是有害微生物生长,并防止微生物及其代谢产物破坏药物成分,特别是活性成分干扰素λ的作用。这样的防腐剂可选择苯扎氯铵、苯扎溴铵、苯甲醇、苯酚、甲酚(又包括邻甲酚、间甲酚、对甲酚)、尼泊金酯(即对羟基苯甲酸酯,包括对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯、丁酯等)等物质中的一种或多种的组合。
吸附抑制剂起到抑制或降低装盛干扰素λ雾化吸入剂的容器对干扰素λ及其他辅料的吸附的作用,除人血清白蛋白外还可以选择表面活性剂,在表面活性剂中又优选非离子表面活性剂,并更优选吐温类非离子表面活性剂。
pH稳定调节剂起到将干扰素λ雾化吸入剂的pH稳定在生理适宜pH(5.0-8.0)的作用,并要求生理安全,可选择的范围包括但不局限于磷酸盐缓冲溶液体系、枸橼酸盐缓冲溶液体系、抗坏血酸盐缓冲溶液体系,优选磷酸盐缓冲溶液体系。这样的pH稳定调节剂的总浓度应在0.1-500mmol/L之间,优选在1-100mmol/L之间,并更优选在5-20mmol/L之间。
本发明的干扰素λ雾化吸入剂在配制过程中应首先按配制所需量溶解各可药用辅料,然后在与干扰素λ的原液混合均匀后用水调节溶液的体积至目标配制体积。各可药用辅料的溶解可同时进行,也可分别进行,但难溶性可药用辅料的配制应单独进行,并视情况加热和/或加入一定的助溶剂。溶解过程中应快速混合,注意避免pH、温度等的急剧变化,从而引起药物活性成分干扰素λ的生物失活和/或化学降解。
在一种优选的实施方案中,本发明的干扰素λ的雾化吸入剂单次给药剂量(例如0.25ml、0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml或5ml)中含有5-100μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料。
在一种优选的实施方案中,本发明的干扰素λ的雾化吸入剂单次给药剂量(例如0.25ml、0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml或5ml)中含有10-50μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料。
在一种优选的实施方案中,本发明的干扰素λ的雾化吸入剂中的干扰素λ是干扰素λ1、干扰素λ2、干扰素λ3中的一种或以任意比例混合的几种。
在一种优选的实施方案中,本发明的干扰素λ的雾化吸入剂中的干扰素λ是干扰素λ1。
在一种优选的实施方案中,本发明的雾化吸入剂可药用辅料包含干扰素λ活性保护剂,选自人血清白蛋白、氨基酸、多元醇、环糊精、卵磷脂类物质中的一种或几种的组合。
在一种优选的实施方案中,本发明的雾化吸入剂可药用辅料包含渗透压调节剂,选自人血清白蛋白、NaCl、甘露醇、葡萄糖中的一种或几种的组合。
在一种优选的实施方案中,本发明的雾化吸入剂可药用辅料包含防腐剂,选自苯扎氯铵、苯扎溴铵、苯甲醇、苯酚、甲酚、尼泊金酯中的一种或几种的组合。
在一种优选的实施方案中,本发明的雾化吸入剂可药用辅料包含吸附抑制剂,选自人血清白蛋白和表面活性剂中的一种或几种的组合。
在一种优选的实施方案中,本发明的雾化吸入剂可药用辅料包含能将雾化吸入剂的pH稳定在5.0-8.0范围内的缓冲溶液体系,选自磷酸盐缓冲溶液体系、枸橼酸盐缓冲溶液体系、抗坏血酸盐缓冲溶液体系中的一种或几种的组合。
在一种优选的实施方案中,本发明的干扰素的雾化吸入剂含有:1)单次给药剂量(例如0.25ml、0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml或5ml)中1-1000μg的干扰素λ;2)1-50mg/ml的人血清白蛋白;3)1-8mg/ml的NaCl;4)1-100mmol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠,pH7.0溶液。
在一种优选的实施方案中,本发明的干扰素的雾化吸入剂含有:1)单次给药剂量(例如0.25ml、0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml或5ml)中5-100μg的干扰素λ;2)5-30mg/ml的人血清白蛋白;3)2-7mg/ml的NaCl;4)5-50mmol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠,pH7.0溶液。
在一种优选的实施方案中,本发明的干扰素的雾化吸入剂含有:1)单次给药剂量(例如0.25ml、0.5ml、1ml、2ml、3ml、4ml或5ml)中10-50μg的干扰素λ;2)10-20mg/ml的人血清白蛋白;3)4-6mg/ml的NaCl;4)10-20mmol/L的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠,pH7.0溶液。
本发明的另一个目的是提供干扰素λ的雾化吸入剂在制备治疗病毒性肺炎药物中的应用。利用本发明主药含量的干扰素λ的雾化吸入剂治疗病毒性肺炎,可取得明显更好的治疗效果。
本发明中使用的术语“干扰素λ”或“λ干扰素”包括人体或动物体在外界病原性物质刺激下产生的天然抗病毒活性物质(包括干扰素λ1、干扰素λ2、干扰素λ3),也包括通过基因工程方法选择适宜的表达载体表达的与上述天然序列完全相同的重组分子,还包括干扰素λ1、干扰素λ2、干扰素λ3的突变体,尤其是国际专利申请PCT/US2004/025864的说明书中明确提及乃至公开氨基酸序列的干扰素λ的突变体。
本发明中使用的术语“治疗有效量”表示当施用药物活性成分用于治疗或预防疾病时,药物活性成分的量足以实现对疾病的治疗或预防。治疗有效量将依药物活性成分、疾病和它的严重性和所治疗病人的年龄、体重等而异。
本发明中使用的术语“雾化吸入剂可药用辅料”是指在雾化吸入剂处方设计时,为解决雾化吸入剂的溶解性、有效性、稳定性、安全性等问题,加入到雾化吸入剂处方中的除药物活性成分以外自身对人体或动物体安全的其他辅助成分。
具体实施方式
通过如下的实施例对本发明的实施作进一步说明,但本发明的实施方式并不局限于如下的实施例。
实施例1:干扰素雾化吸入剂的制备
按如下表1的方法制备干扰素的雾化吸入剂。其中“PB”为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液(pH7.0)。
表1 干扰素雾化吸入剂的制备
实施例2:干扰素雾化吸入剂治疗病毒性肺炎的动物试验
1)RSV病毒培养
将呼吸道合胞病毒标准株RSV-Long(引自北京儿科研究所)接种于Hep-2细胞上,待细胞病变达80%以上时收获,将病毒液冻存于液氮中,用时于37℃融化,1000rpm离心10分钟,取上清液备用。
2)RSV小鼠感染模型的建立
取126只6-7周龄的Balb/c小鼠,雌雄各半,均用***麻醉后,分别经鼻腔滴入106PFU/ml RSV病毒液0.1ml,每天滴病毒1次,共滴2次,第3天小鼠出现竖毛、烦躁不安、呼吸急促、腹肌抽搐阳性反应,表明RSV感染小鼠模型建立成功。
3)分组及给药
将上述126只小鼠随机分为21组,每组6只,雌雄各半。组1至组20分别每日超声雾化吸入前述实施例所述的雾化吸入剂1至雾化吸入剂20各1ml(加入生理盐水稀释至4ml后雾化吸入);组21每日超声雾化吸入生理盐水4ml。所有各组每日均只超声雾化吸入1次,共超声雾化吸入5次(5天)。5天后取小鼠血进行BALF白细胞计数,各组6只小鼠的平均结果如下表2所示。
表2 BALF白细胞计数结果
Claims (10)
1.干扰素λ的雾化吸入剂,其特征是单次给药剂量中含有1-1000μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料。
2.根据权利要求1所述的雾化吸入剂,其特征是单次给药剂量中含有5-100μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料。
3.根据权利要求2所述的雾化吸入剂,其特征是单次给药剂量中含有10-50μg的干扰素λ与适宜量的雾化吸入剂可药用辅料。
4.根据权利要求1所述的雾化吸入剂,其特征是所述的雾化吸入剂可药用辅料包含干扰素λ活性保护剂,选自人血清白蛋白、氨基酸、多元醇、环糊精、卵磷脂类物质中的一种或几种的组合。
5.根据权利要求1所述的雾化吸入剂,其特征是所述的雾化吸入剂可药用辅料包含渗透压调节剂,选自人血清白蛋白、NaCl、甘露醇、葡萄糖中的一种或几种的组合。
6.根据权利要求1所述的雾化吸入剂,其特征是所述的雾化吸入剂可药用辅料包含防腐剂,选自苯扎氯铵、苯扎溴铵、苯甲醇、苯酚、甲酚、尼泊金酯中的一种或几种的组合。
7.根据权利要求1所述的雾化吸入剂,其特征是所述的雾化吸入剂可药用辅料包含能将雾化吸入剂的pH稳定在5.0-8.0范围内的缓冲溶液体系,选自磷酸盐缓冲溶液体系、枸橼酸盐缓冲溶液体系、抗坏血酸盐缓冲溶液体系中的一种或几种的组合。
8.根据权利要求1所述的雾化吸入剂,其特征是所述的干扰素λ是干扰素λ1、干扰素λ2、干扰素λ3中的一种或以任意比例混合的几种。
9.根据权利要求8所述的雾化吸入剂,其特征是所述的干扰素λ是干扰素λ1。
10.根据权利要求1-9之一所述的雾化吸入剂在制备治疗病毒性肺炎的药物中的应用。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160817 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |