CN1058160C - ***炎洗剂及该洗剂的制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及的是治疗各种致病微生物引起的***炎的治疗中药洗剂，该洗剂是由黄柏、苦参、百部以及具有“养五脏、除热、生阴中肌”作用的五味子中药组成，经回流、减压回缩、静置后得药液。该洗剂不仅对需氧菌、而且对厌氧菌和真菌都具有很高的抗菌活性，可以治疗各种病菌性、滴虫***炎，无副作用。

Description

***炎洗剂及该洗剂的制造方法

本发明涉及的是用于治疗由各种病菌引起的妇***道炎，如阴痒、阴疮等，抑制***微生物群中潜在性致病微生物的中药制剂。

阴痒、阴疮是妇科常见病，就已婚妇女的普查中，其患病率达60-80％而诊治率只占20％，因此急需一种能够有效预防、治疗***疾病的药物，在《金匮要略》、《医宗金鉴》等古籍医典中就提出了中草药治疗细菌性、霉菌性、滴虫性***炎的外洗方、散剂、栓剂，如参柏蛇洗剂、灭滴洗剂、二妙虎参煎剂等，但这些方剂的普治效果并非理想。近年来，成都恩威世亨制药有限公司研制出洁尔阴洗液成为治疗此类***炎症的主导药物，该药物尤其对需氧菌引起的***炎症有一定的治疗效果，据现代微生物学研究，***腔、口腔、鼻腔的感染细菌主要为厌氧菌，其感染率达72％左右，与需氧菌之比为5∶1，因此研制治疗病菌性***炎症的药物，应着重针对厌氧菌的抑制能力，但经实验和临床证明，洁尔阴洗液不仅对厌氧菌的抑制能力远低于对需氧菌的抑制能力，而且对真菌性***炎无抗菌活性，因此对洁尔阴洗液的治疗效果有很大局限，使疗程延长，治愈率不高；另外洁尔阴由黄柏、苦参、蛇床子、花椒、艾叶、苍术、百部、地肤子、菌陈、桅子、独活等多达十几味草药组成配方，药味多，难免有某味药的刺激性使患者出现过敏性或毒性反应，而且制药工序相应复杂，成本高。

本发明的发明目的在于提供一种能够有效抑制各种病菌感染引起的***炎，具有高抗菌活性的***外洗方剂。

本发明的另一发明目的在于提供一种药味少、疗效高、毒性低的治疗***炎症的***炎洗剂。

技术人员在研制过程中是以中医治疗细菌性、霉菌性、滴虫性阴痒、阴疮等***疾病的清热解毒为治则，以女性生殖***菌群变化为依据，用最低抑菌浓度为客观指标对中医古籍如《金匮要略》、《妇人良方大全》、《医宗金鉴》、《诸病源候论》等中记载有超过一百多个方剂进行筛选，选出44个方剂，统计出单味药出现频率最多者18味，对此18味草药分别用***炎致病菌：厌氧菌、需氧菌、真菌共18种进行抑菌实验，从实验结果中选取抗菌活性强、抗菌谱广的黄柏、苦参、百部三味药，上述44个成方中含有这三种草药的有9个成方，再经抗菌实验、化载组方，得到新的抗菌谱广、抗菌作用强的中药方剂。

针对下面含有黄柏、苦参、百部三味药的四个典型组方进行抗菌活性实验，其抗菌活性数据(MIC mg/ml)比较表如下：

方  剂细菌名称		黄柏、苦    黄柏、苦参  黄柏、苦参、百部    黄柏、苦参参、百部    百部、防已  地胰子、蛇床子      百部、五味子
			需氧菌	金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌溶血性链球菌大肠杆菌绿脓杆菌克雷伯氏肺炎杆菌伤寒沙门氏菌	80            40            80                10160           80            80                20160           160           40                2080            160           160               20＞320         ＞320         160               4080            160           80                2040            80            40                40
厌氧菌	胞弱类杆菌产黑色素类杆菌消化球菌艰难梭状芽孢杆菌	320           80            320               4080            160           160               40160           320           ＞320             160＞320         320           ＞320             40
			真菌	白色念球菌	320           ＞320         ＞320             160

实验表明：第四方剂组与其它各组比较有显著性差异P＜0.001，其抗菌活性最高。因此，本发明提供的***炎洗剂其组分为黄柏41～43％、苦参33～36％、百部23～25％。

在本方案中，依据中医中药的“清热解毒、杀虫、止痒、化腐生肌”理论，在上述具有抗菌作用配方中增加具有“养五脏、除热、生阴中肌”作用的中草药五味子，不仅增强药剂的抗菌作用，还可改善***局部为酸性环境，使细菌不得于生长，其中药组分为：黄柏23～25％、苦参20～23％、百部14～16％、五味子36～38％。

本发明提供的***炎洗剂其制药方法为：

将上述各味药切碎前加工后，加溶剂回流1～3次，共回流2～4小时，滤出药液，减压浓缩，静置12--24小时后过滤得到药剂。

在上述药剂中加入适量防腐剂，即得到本***炎洗剂。

本发明方案的***炎洗剂药味少，药源丰富，制造方法简单，且毒性低，疗效高，对照洁尔阴洗液对各种标准菌株的抗菌活性及抗菌谱说明其效果：

细  菌  名  称		株数       MICmg/ml
			本洗剂  洁尔阴
		需氧菌		金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌溶血性链球菌大肠杆菌绿脓杆菌克雷伯氏肺炎杆菌伤寒沙门氏菌	1      20      401      20      401      20      401      20      801      40      ＞3201      20      1601      40      40

厌氧菌	脆弱类杆菌产黑色素类杆菌消化链球菌艰难梭状孢杆菌	1    80     1601    40     ＞3201    320    1601    40     ＞320
				白色念珠菌	1    160    ＞320

注：***炎洗剂浓度为含药量1g/ml，洁尔阴的批号为9206064，购

于沈阳天益堂药房。

以上实验数据表明***炎洗剂对需氧菌及厌氧菌和真菌的标准菌株均有不同程度的抗菌活性，其MIC值在20～320mg/ml之间，阳性对照药洁尔阴的MIC值在40～＞320mg/ml之间，两药相比本洗剂优于洁尔阴，尤其是对厌氧菌及真菌的作用更为突出。

上述结论可由下面的测试表进一步证明，本***炎洗剂和洁尔阴洗液对与***感染有关的临床各菌株的MIC90敏感率测试见下表：

	需氧革兰氏阳性球菌与革兰氏阴性杆菌		无芽孢厌氧菌和梭状芽孢杆菌		真  菌
							本洗剂	MIC90	敏感率	MIC90	敏感率	MIC90	敏感率
20-160	65-100％平均值86.4％	40-320	66.6-83.3％	80-＞320	0-80％
						洁尔阴		20-320	30-100％平均值64.41％	320--＞320	30-90％平均值64.41％	无

下面将通过各种动物实验与洁尔阴洗液对照说明本发明洗剂的效果：

1、首先，对豚鼠***粘膜用需氧菌和厌氧菌致使混合感染的治疗作用试验：实验用重为500-550g的健康老龄雌性白毛豚鼠，用生理盐水稀释的氢化可的松溶液，使其浓度为2mg/ml，用无菌棉球蘸取，置于豚鼠***内，每日更换一次，更换一周经降低局部克疫力后，用棉球蘸取5％碳酸氢钠溶液涂擦豚鼠***粘膜，直至***PH值为7.0左右。

在受试豚鼠***粘膜浅层注射混合菌悬液0.1ml(该菌液为5％胃膜素制成的含有1×10⁸个/ml大肠杆菌，1×10⁹个/ml消化球菌悬液)，并用脱脂棉球蘸供试菌液置***中，感染三日后，选取***粘膜出现红肿、糜烂的豚鼠，随机等分三组，分别用***炎洗剂、洁尔阴洗液和生理盐水(空白对照)冲洗***腔，每日一回，连续冲洗7日，实验中进行***分泌物中的厌氧菌及需氧菌培养分离测试，其结果为：组别      动物数  恢复正常  好转  未好或加剧  治愈率     P

       (只)     (只)    (只)    (只)      (％)     (％²)本洗剂组    20       17      1        2        85     ＜0.01*

                                                  ＜0.05**洁尔阴组    20       10      3        7        50     ＜0.01*生理盐水    20       2      1         17       10组*与生理盐水组比         **与洁尔阴组比本洗剂的治愈率高于洁尔阴组，且粘膜糜烂创面愈合时间先于洁尔阴组2-3日，即本洗剂的化腐生肌作用优于洁尔阴。

2、选取体重为500-550g的健康老龄的白色雌性豚鼠进行真菌感染实验：按上述方法，同样使豚鼠***内接受真菌感染至***粘膜有黄灰色膜斑块及乳酪状物后，随机等分三组，分别用本洗剂、洁尔阴和生理盐水冲洗***腔，用药7日后记录情况如下：组别      动物数  恢复正常  好转  未好或加剧  治愈率      P

       (只)    (只)     (只)     (只)      (％)     (％²)本洗剂组    20      13       1        6         65     ＜0.01**洁尔阴组    20      4        3        13        20     ＞0.05*生理盐水    20      2        1        17        10组本洗剂组与其他两组相比，差异非常显著(P＜0.01)，且治愈时间上先于洁尔阴2-3日。

3、对豚鼠皮肤用需氧菌、厌氧菌致混合感染的治疗作用试验：

实验所用体重为250-300g的白色健康豚鼠，雌雄各半，所用菌液为含菌种金黄色葡萄球菌(Saphylococcus anres)含1×10⁸个/ml和脆弱类杆菌(Bacteroide fragilis)1×10⁹个/ml。

在豚鼠背部用脱毛剂脱毛面积为16cm²，24小时后，用无菌砂纸使皮肤至创面出血制成1×1cm²的创面一处，然后用混合菌液0.2ml接种于创面上，覆盖无菌纱布，3天每天更换一次，选取创面处出现红肿、糜烂、有炎性渗出物后，随机等分三组，分别推注创面：本洗剂、洁尔阴和生理盐水，隔5分钟再按上法冲洗，连续三次，再覆盖无菌纱布，7天中更换一次/每天，在停药时采血检查白细胞总数，其结果为；组别      动物数             症状     白细胞总数(千/mm³)(x±sd)

       (只)     疗效     变化

                         (只)         给药前        停药时本洗剂组    20    恢复正常    15       23.81±1.58    7.39±1.14

                好转      3        24.40±1.57    13.74±1.33

                无效      3        25.75±0.45    24.15±2.50洁尔阴组    20    恢复正常    8        24.70±0.61    8.92±1.08

                好转      3        24.03±1.42    13.67±0.70

                无效      9        25.60±1.39    23.61±1.91生理盐水组  20      好转      1        21.10          9.04

                无效      19       24.19±1.45    25.10±2.04

实验结果表明：本洗剂组的治愈率为75％，而洁尔阴组仅为40％，生理盐水组为0％，在起效时间上本洗剂组亦优于洁尔阴2-3天，创面愈合时间先于洁尔阴组3天，即本洗剂有明显的解毒消炎和化腐生肌效果。

4、经实验还证明了，本***炎洗剂与洁尔阴洗剂均有不同程度的灭杀***滴虫的作用，其最低杀虫浓度分别为：5，10mg/ml和10，20mg/ml，表明本***炎洗剂优于洁尔阴洗剂一倍。

5、本洗剂系治疗妇女细菌性、霉菌性、滴虫性***炎及外阴、皮肤搔痒的外用中药洗剂，为探讨其止痒作用，进行组胺导致豚鼠皮肤搔痒试验：褐色本洗剂溶液PH 4.5-5.0大剂量原浓度(0.96-1.20(60-70℃))。小剂量组用原浓度稀释三倍的浓度；盐酸组织胺批号：8605146；盐酸苯海拉明注射液(天津市和平制药厂生产批号900722)；洁尔阴批号9207040。

选取体重为320-560g雄性豚鼠，将其后足背脱毛并随机等分五组，即为生理盐水、苯海拉明阳性、本洗剂大剂量、本洗剂小剂量和洁尔阴五个对照组。豚鼠脱毛后次日开始，早晚各用棉签在左右后足背部涂药一次，第三日将脱毛区擦伤，伤口涂药一次，十分钟后，用注射器依次由低浓度到高浓度向豚鼠后足背涂抹组织胺溶液，每次涂药间隔3分钟，直至出现舔后足出现搔痒反应为止。计算积累涂组织胺量，作为豚鼠对组胺耐受量，以此为指标，评价药物止痒作用：药物         动物数(只)         耐受组胺量(X±SD)μgNS              9                    22.5±17.49苯海拉明        7                    43.07±5.79洁尔阴          7                    17.57±11.18本洗剂大剂量    9                    38.86±10.11本洗剂小剂量    9                    34±11.42

实验表明：原浓度本洗剂外用涂抹豚鼠足背部，能显著提高豚鼠对组胺的耐受量，抑制组胺所致的皮肤搔痒反应，与苯海拉明15μg的作用相近，而稀释三倍的本洗剂及洁尔阴对组织胺所致搔痒反应无抑制作用。

6、用动物对全身搔痒反应实验：本实验选取右旋糖酐(批号920324)作为致豚鼠全身搔痒剂，其它药物对照组分别为：本洗剂褐色溶液PH4.5-5.0；盐酸苯海拉明注射液批号900722；洁尔阴批号9207040；所用动物13-27g雌雄两性昆明种小鼠，随机对应上述各组分为五组，灌胃生理盐水0.2ml/mg，苯海拉明5mg/kg；洁尔阴0.2ml/mg，本洗剂0.2ml/mg，及稀释三倍的本洗剂0.2ml/mg给药后20分钟，各鼠分别经尾静脉注射右旋糖酐0.05ml/10g，30分钟后观察小鼠搔痒反应，以搔痒发作次数及每次反复痒时间累加为评价指标：药物    剂量        动物数     搔痒次数          搔痒时间

                 (只)      (X±SD)次         (X±SD)秒NS                    21      22.76±5.53      359.48±129.35苯海拉明5mg/ml        13      8.54±3.10       93.46±42.40洁尔阴  20ml/mg       9       6.84±2.04       70.68±12.77原浓度本洗剂20ml/mg   14      15.71±7.64      208±129.091/3本洗剂20ml/mg      13      17.62±6.81      263±84.9

实验表明：本洗剂口服能抑制右旋糖酐所致小鼠全身搔痒反应，而且随剂量增加，抑制作用增强。

综上各实验说明，本发明提供的***炎洗剂不仅抗菌谱广，而且抗菌活性高，还具有较强的解毒消炎、化腐生肌的作用，弥补了现有治疗细菌性、霉菌性和滴虫性***炎的主导药物--洁尔阴抗厌氧菌能力低和无抑制真菌能力的缺陷，能够显著缩短疗程，普治效果优。

下面通过以下实施例详细叙述本发明：

本方案的***炎洗剂的组分为：

黄柏52g  苦参44.4g  百部30g

在上述配方中，还可以加入具有“养五脏、清热、生阴中肌”作用的另一味中草药五味子，形成最佳组分为：

黄柏52g  苦参44.4g  百部30g  五味子74g

其制药方法为：将黄柏切丝、苦参和百部切片与五味子共同混合，加溶剂回流提取后过滤，将滤液浓缩回收至一定浓度，静置后得本制剂。在该制造方法中，药效学研究证明了乙醇提取优于水提，因此溶剂选用乙醇溶液。

上述制造方法的各工艺参数可各设定为：

乙醇浓度(A)：①--40％②--60％③--80％

总乙醇量(为药材量倍数B)：①--8倍  ②--10倍  ③--12倍

总回流时间(C)：①--2小时  ②--3小时  ③--4小时

总回流次数(D)：①--1次  ②--2次  ③--3次

注：上述①、②、③所编序号

按上述方法将各味药前处理好后，将以上四种工艺参数按以下方式组合，并分别测试每组组合的药液的小蘖碱含量和固体物含量二项指标，采取加权评分的计算方法，得到：A  B  C  D     小蘖碱含量     固体物含量       综合评分

              mg/ml          g/ml① ① ① ①       0.137         0.0447           81.77① ② ② ②       0.263         0.0553           92.97① ③ ③ ③       0.327         0.0626           100.00② ① ② ③       0.200         0.0502           87.51② ② ③ ①       0.168       0.0522       87.95② ③ ① ②       0.218       0.0528       89.67③ ① ③ ②       0.180       0.0468       84.53③ ② ① ③       0.283       0.0511       90.63③ ③ ② ①       0.129       0.0557       91.93

从实验结果得出最佳工艺条件为：A① B③ C③ D③即用40％的药材量12倍乙醇量，总回流次数为3次，回流时间共为4小时，但工艺条件过于繁琐，不适于大批量生产，难以缩短生产周期降低成本，在不影响产量质量的条件下，采用第二实验组A① B② C② D②的工艺条件，即黄柏、苦参、百部、五味子按量配好混合后，加入药材量5倍浓度为40％乙醇，回流提取1.5小时后过滤，药渣中再加入5倍药材量40％的乙醇，再次回流提取1.5小时，然后过滤，将两次药液混合减压浓缩回收乙醇至相对密度为0,95～1.02(60～70℃)，药液静置24小时后过滤，加入适量防腐剂，加水至1000ml，制成浓度为0.2g生药/ml的***炎洗剂。其防腐剂为苯酚0.1g，苯甲酸0.1g。

Claims (6)

1、一种用于治疗***炎的***炎洗剂，其特征在于它是由下列按重量百分比的原料经提取过程制成的：

黄柏23～25％、苦参20～23％、百部14～16％、五味子36～38％。

2、根据权利要求1所述的***炎洗剂，其特征在于它是由以下原料经提取过程制成的：

黄柏52g  苦参44.4g、百部30g  五味子74g。

3、权利要求1所述的***炎洗剂的制造方法，其步骤为：

将黄柏、苦参、百部、五味子前处理混合后，加40～80％乙醇溶剂回流提取1～3次，共回流2～4小时，滤出的药液混合，静置12～24小时后过滤得取药液。

4、根据权利要求3所述的制造方法，其特征在于：

用40％的乙醇加入药材中，回流提取3次，每次加入药材量的4倍乙醉，共回流4小时，再将过滤后的药液混合减压浓缩回收乙醇，静置24小时后过滤得到药液。

5、根据权利要求3所述的制造方法，其特征在于：

用40％的乙醇加入药材中，回流两次，每次加入药材量的5倍，每次回流1.5小时，再将过滤后的药液混合，减压浓缩回收乙醇，静置24小时后得到药液。

6、根据权利要求3所述的制造方法，其特征在于静置药液过滤后加入防腐剂，其防腐剂为：苯酚，苯甲酸。