CN105777871A - 一种环五肽的合成方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种环五肽的合成方法。该方法采用“固液结合”策略及用合适的缩合试剂进行缩合反应，通过适当的工艺分别制备线性五肽，且关环位点选在N‑甲基亮氨酸与亮氨酸之间，有效提高制备线性肽时的效率。用合适的缩合试剂进行缩合反应，能有效地减少在形成酰胺键时的消旋化，从而有效提高了目标产物的纯度，纯度可达99％以上，能够充分满足生物活性试验和临床应用的需要，具有较高的医学价值。采用环合试剂PyBOP进行关环反应，可有效提高环合收率，其环合收率达84.2％。该方法不需进行繁杂的柱层析纯化，经由简单的洗涤即可将多余的氨基酸洗去，合成工艺简单，原料成本低，反应条件温和，纯度高，易于产业化，具有广阔的市场前景。
Description
技术领域
本发明属于有机化学合成领域，具体涉及一种环五肽的合成方法。
背景技术
海洋环肽是海洋生物活性肽类中数量最庞大的一类化合物，其种类达到万种以上，被广大生物学家药学家还有化学家所关注，其部分环肽已进入临床。天然存在的环肽类化合物大多具有独特的结构(Tripathi A,Puddick J,Prinsep MR.J Nat Prod,2010,73(11),1810-1814；Tan K C,Wakimoto T,Takada K..J NatProd,2013,76(7),1388-1391.)，其生物利用率及生物活性均优于线性肽(ZhengL H,Wang Y J,Sheng J.Mar Drugs,2011,9(10),1840-1859.)虽然环肽类化合物广泛存在于动、植物，低等海洋生物，微生物和细菌中，但自然界存在的环肽含量非常少，对于分离带来的很大的困难，故合成环肽化合物已经成为最热的研究课题之一(Wang D X，Han X，Gong X.Chinese Journal of Organic Chemistry.2008,28(4),549-573)。
从自然界动植物或者微生物中分离出来的环肽有一部分含有N-甲基酰胺键，含N-甲基酰胺键的环肽生物活性要比不含N-甲基酰胺键环肽的活性高出十几倍至几万倍(Chatterjee,J.Rechenmacher,F.and Kessler.H.Angew.Chem.Int.Ed.2013,52,254–269.)。
环五肽Galaxamide是本课题组从中国南海西沙群岛永兴岛采集的红藻乳状丝节藻(Galaxaura filamentosa)中分离得到的一种新型环五肽，其化学结构中含有两个N-甲基酰胺键。对Galaxamide进行体外抗肿瘤活性实验，试验数据表明该化合物对多种肿瘤细胞具有一定的细胞毒性，同时对该化合物诱导肝癌细胞Bel-7402凋亡机制进行了初步研究，结果显示Galaxamide有望成为新型抗癌药物的先导化合物，但是天然来源分离得到的具有较好活性的天然产物极其少量，不能满足人们需要。本课题组采用经典的“3+2”策略对其进行了液相合成。因液相法在每次反应后都需要进行柱层析纯化，在整个反应中需要5次柱层析纯化，需要耗费大量溶剂和时间，并且该方法的环合产率不高，仅有50％左右(Xu W.J.，Liao X.J.，Xu S.H.，Organic Letters，2008，10(20),4569-4572.)。
发明内容
为了克服现有技术中合成环五肽Galaxamide上存在的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种环五肽Galaxamide的合成方法。本发明通过采用“固液结合”策略不需要进行柱层析纯化，能够有效地缩短合成线性肽的时间，合适的环合试剂使用，使得环合收率达84.2％。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种环五肽的合成方法，通过“固液结合”策略合成环五肽，具体包括以下步骤：
(1)将芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)进行N-甲基化反应，得到芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸(Fmoc-N-Me-Leu-OH)；
(2)将芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)连接到2-氯三苯甲基氯树脂，得到保护氨基酸和树脂的复合物Fmoc-Leu-Resin(R-1A)；可用甲醇对树脂的残余活性位点进行封闭；
(3)将步骤(2)得到的Fmoc-Leu-Resin(R-1A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)在缩合试剂存在的条件下与其进行缩合反应，得到保护二肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)；
(4)将步骤(3)得到的Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与步骤(1)得到的芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸(Fmoc-N-Me-Leu-OH)在缩合试剂存在下进行缩合反应得到保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)；
(5)将步骤(4)得到的保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)在缩合试剂存在的条件下与其进行缩合反应得到保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)；
(6)将步骤(5)得到的保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与步骤(1)得到的芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸(Fmoc-N-Me-Leu-OH)在缩合试剂存在下进行缩合反应得到保护五肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-5A)，对其进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后进行切肽反应，得到线性五肽后对线性五肽进行关环反应，得到环五肽。
本发明所述的环五肽，其化学名称为：环(亮氨酰-亮氨酰-N-甲基-亮氨酰-亮氨酰-N-甲基-亮氨酰)；英文缩写表达式为：cyclo-(Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu)；分子式为C32H59N5O5；结构式如下所示：
上述合成方法中，步骤(1)中所述的将芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)进行N-甲基化反应的具体操作步骤为：取Fmoc-Leu-OH悬浮于甲苯中，加入多聚甲醛和催化量的对甲苯磺酸，将混合物共沸回流30～50分钟，除去水；用饱和NaHCO3水溶液洗涤并用无水Na2SO4干燥；过滤，减压旋去溶剂后进行硅胶柱层析得到化合物(1)；将化合物(1)溶于二氯甲烷，加入无水三氯化铝和三乙基硅烷，待反应结束后，反应液用1mol/L的盐酸洗涤两遍；洗涤液用无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到粗产品后进行硅胶柱层析得到芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸(Fmoc-N-Me-Leu-OH)。
所述的多聚甲醛是Fmoc-Leu-OH的1～2摩尔倍量；
所述的无水三氯化铝是Fmoc-Leu-OH的1.5～3摩尔倍量；
所述的三乙基硅烷是Fmoc-Leu-OH的1.5～3摩尔倍量；
上述合成方法中，步骤(2)中所述芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)连接到2-氯三苯甲基氯树脂的具体操作步骤为：将Fmoc-Leu-OH溶于二氯甲烷中，再向其中加入N,N-二异丙基乙胺调节pH到8～9，搅拌3～5分钟后，将混合溶液加入到已经活化好的2-氯三苯甲基氯树脂中，通入氮气，然后摇床反应3～5h；将树脂的残余活性位点进行封闭的具体操作步骤为：用DIEA/MeOH(1：9)的溶液，加入已经连接了第一个氨基酸的树脂中，反应30～50min。
所述的已经活化好的2-氯三苯甲基氯树脂是通过将2-氯三苯甲基氯树脂用二氯甲烷浸泡，使树脂充分溶胀活化，然后将液体抽干得到的。
上述合成方法中，步骤(3)、(4)、(5)、(6)中所述的脱除保护基芴甲氧羰酰基处理的具体操作步骤为：向反应器中加入20％(体积分数)哌啶/DMF溶液，反应20～30min，抽去反应液，用DMF冲洗复合物，手摇振荡，重复3次；仍用该方法重复操作两次，将复合物洗净，抽干洗涤液；
上述合成方法中，步骤(3)、(4)、(5)、(6)中所述的缩合试剂为1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)和1,3-二异丙基碳二亚胺(DIC)；
所述的1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)和1,3-二异丙基碳二亚胺(DIC)的摩尔比优选为1：1。
所述的1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)与2-氯三苯甲基氯树脂的负载量的摩尔比优选为3：1；
上述合成方法中，步骤(3)、(4)、(5)、(6)中所述的缩合反应是指在缩合试剂1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)和1,3-二异丙基碳二亚胺(DIC)的存在下两种相应的待缩合物进行脱水缩合，其具体操作步骤为：将芴甲氧羰酰基保护的待缩合物溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)，依次加入HOAt和DIC，室温下摇床反应3～5小时，即得相应的肽和树脂的复合物；
上述合成方法中，步骤(6)中所述的切肽反应是指在体积分数为2％的三氟乙酸/二氯甲烷溶液中将连接在树脂上的线性肽切下，其具体操作步骤为：将体积分数为2％的三氟乙酸/二氯甲烷溶液加入到含有线性五肽和树脂复合物的反应器中，摇床反应2～3小时后，减压蒸除溶剂，再加入CH2Cl2，减压蒸除，重复操作三次除去三氟乙酸，油泵干燥即得到线性五肽。
上述合成方法中，步骤(6)中所述的关环反应是指用PyBOP作为环合试剂，线性五肽首尾环合得到环五肽，其具体操作步骤为：将线性五肽溶于二氯甲烷中，配成10-3M的溶液，氮气保护下，再向其中加入环合试剂PyBOP，DIEA调节pH至7～8，室温下搅拌反应，反应24～48小时，减压蒸除溶剂，用反相HPLC分离得到目标产物。
本发明相对于现有技术，具有如下的优点及效果：
(1)本发明环五肽的合成方法中，选择合适的缩合试剂进行缩合反应，能有效地减少在形成酰胺键时的消旋化，从而有效提高了目标产物的纯度，纯度可达到99％以上，能够充分满足生物活性试验和临床应用的需要，具有较高的医学价值。
(2)本发明环五肽的合成方法中，选择了较好的环合试剂和较合适的环合位点进行关环反应，本发明中采用环合试剂PyBOP进行关环反应，可以有效提高环合收率，其环合收率达到84.2％，环合位点选在N-甲基亮氨酸和亮氨酸之间，能够有效地减少合成线性肽的时间。
(3)本发明采用“固液结合”策略合成目标产物，“固液结合”是指在合成线性肽是采用固相法，环合在液相中进行。本策略不需进行繁杂的柱层析纯化，反应经由简单的洗涤即可将多余的氨基酸洗去，合成工艺简单，原料成本低，反应条件温和，纯度高，易于产业化，能充分满足生物学试验和临床使用的需要，具有广阔的市场前景。
附图说明
图1是本发明合成环五肽Galaxamide的反应过程；其中，a为DIEA，DCM，rt，3～5h；b为DIEA/MeOH＝1:9，rt，30～50min；c为20％哌啶/DMF，20～30min；d为Fmoc-N-Me-Leu-OH，HOAt，DIC，DMF，rt，3～5h；e为Fmoc-Leu-OH，HOAt，DIC，DMF，rt，3～5h；f为2％TFA/DCM，2～3h；g为PyBOP，DIEA，DCM，rt，24～48h。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
本发明合成环五肽Galaxamide的反应过程，见图1所示。
实施例1合成芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸(Fmoc-N-Me-Leu-OH)
取Fmoc-Leu-OH(7.07g，2mmol)悬浮于100mL甲苯中，多聚甲醛(9.00g,3mmol)和对甲苯磺酸(0.200g，催化量)加入，将混合物共沸回流30分钟，除去水。溶液冷却后，用饱和NaHCO3水溶液洗涤(25mL×2)并用无水Na2SO4干燥。过滤，减压旋去溶剂后进行硅胶柱层析(淋洗剂V石油醚:V乙酸乙酯＝8:1)，得到白色化合物(1)，在250mL烧瓶中加入化合物(1)(7.00g，2mmol)，二氯甲烷(150mL)，无水三氯化铝(4.00g，3mmol)，三乙基硅烷(4.8mL，3mmol)，反应数小时，TLC监测原料点基本消失时，停止反应，反应液用1mol/L盐酸洗涤两遍。洗涤液用无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到粗产品后进行硅胶柱层析(淋洗剂V石油醚:V乙酸乙酯＝4:1)，得到白色固体芴甲氧羰酰基-N-甲基-亮氨酸(Fmoc-N-Me-Leu-OH)6.54g，收率为92.7％。
实施例2芴甲氧羰酰基亮氨酸(Fmoc-Leu-OH)连接到2-氯三苯甲基氯树脂
树脂的活化：将1.00g 2-氯三苯甲基氯树脂(负载量0.985mmol/g)加到多肽合成管中，用15mL二氯甲烷浸泡30min，使树脂充分溶胀活化，然后将液体抽干。
Fmoc-Leu-OH连接到树脂：在50mL锥形瓶中加入Fmoc-Leu-OH(1.06g，3mmol)，用20mL DCM(二氯甲烷)将其溶解，再向其中加入DIEA调节pH到8左右，搅拌1分钟后，将混合溶液加入到含有已经活化好的树脂的反应器中，通入氮气，然后摇床反应4h。反应完毕，抽干反应液，依次分别使用10mL DCM、DMF(二甲基甲酰胺)洗涤树脂三次，抽干洗涤液。
实施例3树脂的残余活性位点的封闭
取18mL甲醇，将2mL DIEA溶于甲醇中，配成DIEA/MeOH(1:9)的溶液，加入实施例2中得到的已经连接了第一个氨基酸的树脂中，反应30min。封闭反应结束后，依次分别使用10mL DCM、DMF洗涤树脂三次，抽干洗涤液。得到保护氨基酸和树脂的复合物Fmoc-Leu-Resin(R-1A)。
实施例4保护二肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)的合成
脱除Fmoc保护基：向装有实施例3获得的保护氨基酸和树脂的复合物Fmoc-Leu-Resin(R-1A)的反应器中加入10mL 20％哌啶/DMF溶液(体积分数)脱除Fmoc基团，反应20min，抽去反应液，用10mL DMF冲洗复合物，手摇振荡，重复3次。仍用上述同样量的溶液重复操作两次，将复合物洗净，抽干洗涤液。
Fmoc-Leu-OH连接到Fmoc-Leu-Resin(R-1A)：在50mL锥形瓶中依次加入Fmoc-Leu-OH(1.060g，3mmol)、HOAt(0.408g，3mmol)、DIC(0.466mL，3mmol)和15mL DMF，室温下活化3～5min之后，将活化好的反应物加入装有脱除保护基芴甲氧羰酰基的Fmoc-Leu-Resin(R-1A)的反应器中；室温下反应3h。将反应溶剂抽干，依次分别使用10mL DMF、DCM分别洗涤三次，抽干洗涤液。得到保护二肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)。
实施例5保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)的合成
脱除Fmoc保护基：向装有实施例4获得的保护二肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)的反应器中加入10mL 20％哌啶/DMF溶液(体积分数)脱除Fmoc基团，反应20min，抽去反应液，用10mL DMF冲洗复合物，手摇振荡，重复3次。仍用上述同样量的溶液重复操作两次，将复合物洗净，抽干洗涤液。
Fmoc-N-Me-Leu-OH连接到Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)：在50mL锥形瓶中依次加入实施例1得到的Fmoc-N-Me-Leu-OH(1.101g，3mmol)、HOAt(0.408g，3mmol)、DIC(0.466mL，3mmol)和15mL DMF，室温下活化3～5min之后，将活化好的反应物加入装有脱除保护基芴甲氧羰酰基的Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)的反应器中；室温下反应3h。将反应溶剂抽干，依次分别使用10mL DMF、DCM分别洗涤三次，抽干洗涤液。得到保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)。
实施例6保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)的合成
脱除Fmoc保护基：向装有实施例5获得的保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)的反应器中加入10mL 20％哌啶/DMF溶液(体积分数)脱除Fmoc基团，反应20min，抽去反应液，用10mL DMF冲洗复合物，手摇振荡，重复3次。仍用上述同样量的溶液重复操作两次，将复合物洗净，抽干洗涤液。
Fmoc-Leu-OH连接到Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)：在50mL锥形瓶中依次加入Fmoc-Leu-OH(1.060g，3mmol)、HOAt(0.408g，3mmol)、DIC(0.466mL，3mmol)和15mL DMF，室温下活化3～5min之后，将活化好的反应物加入装有脱除保护基芴甲氧羰酰基的Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)的反应器中；室温下反应3h。将反应溶剂抽干，依次分别使用10mL DMF、DCM分别洗涤三次，抽干洗涤液。得到保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)。
实施例7保护五肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-5A)的合成
脱除Fmoc保护基：向装有实施例6获得的保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)的反应器中加入10mL 20％哌啶/DMF溶液(体积分数)脱除Fmoc基团，反应20min，抽去反应液，用10mL DMF冲洗复合物，手摇振荡，重复3次。仍用上述同样量的溶液重复操作两次，将复合物洗净，抽干洗涤液。
Fmoc-N-Me-Leu-OH连接到Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)：在50mL锥形瓶中依次加入实施例1得到的Fmoc-N-Me-Leu-OH(1.101g，3mmol)、HOAt(0.408g，3mmol)、DIC(0.466mL，3mmol)和15mL DMF，室温下活化3～5min之后，将活化好的反应物加入装有脱除保护基芴甲氧羰酰基的Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)的反应器中；室温下反应3h。将反应溶剂抽干，依次分别使用10mL DMF、DCM分别洗涤三次，抽干洗涤液。得到保护五肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-5A)。
实施例8切肽反应
切肽试剂采用2％的TFA/DCM溶液(体积分数)，往含有脱除保护基芴甲氧羰酰基的Fmoc-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-5A)的合成管中加入20mL的切肽试剂，摇床反应2h，室温，滤出切肽液，用10mL的DCM洗涤树脂4次。合并液体，用水洗切肽液2遍后，加入无水硫酸镁干燥，减压浓缩，加入过量***，析出白色粉末状物，离心分离除去清液，真空干燥，得到线性五肽。
实施例9线性五肽的环合
取实施例8得到的线性五肽0.5mmol，用1L的DCM将其溶解，氮气保护下，加入1.5mmol的PyBOP(六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基磷)，用DIEA调节反应溶液pH＝7～8，常温下反应24～48h，旋去溶剂，以甲醇和体积分数1‰的三氟乙酸水溶液为流动相，通过HPLC对粗品进行纯化，得到目标环五肽Galaxamide。产率84.2％，纯度达99％以上。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ8.18(d,J＝9.6Hz,1H),7.45(d,J＝8.8Hz,1H),5.85(d,J＝7.6Hz,1H),5.10–4.72(m,2H),4.33(ddd,J＝11.1,7.6,3.7Hz,1H),3.49(ddd,J＝10.3,9.0,6.0Hz,2H),3.39(s,3H),2.99(s,3H),1.74-2.04(m,2H),1.73–1.30(m,10H),1.09–0.88(m,30H)..13C NMR(75MHz,CDCl3)δ174.55,172.72,172.44,171.08,170.44,70.83,65.05,53.00,49.04,47.89,41.25,41.02,40.71,40.57,39.39,38.64,37.22,25.93,25.28,25.26,24.97,24.74,23.54,23.33,23.07,22.93,22.82,22.46,21.94,21.92,21.91,21.19.
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种环五肽的合成方法，其特征在于具体包括以下步骤：
(1)将芴甲氧羰酰基亮氨酸进行N-甲基化反应，得到芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸；
(2)将芴甲氧羰酰基亮氨酸连接到2-氯三苯甲基氯树脂，得到保护氨基酸和树脂的复合物Fmoc-Leu-Resin(R-1A)；
(3)将步骤(2)得到的Fmoc-Leu-Resin(R-1A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与芴甲氧羰酰基亮氨酸在缩合试剂存在的条件下与其进行缩合反应，得到保护二肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)；
(4)将步骤(3)得到的Fmoc-Leu-Leu-Resin(R-2A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与步骤(1)得到的芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸在缩合试剂存在下进行缩合反应得到保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)；
(5)将步骤(4)得到的保护三肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-3A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与芴甲氧羰酰基亮氨酸在缩合试剂存在的条件下与其进行缩合反应得到保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)；
(6)将步骤(5)得到的保护四肽和树脂的复合物Fmoc-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-4A)进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后，与步骤(1)得到的芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸在缩合试剂存在下进行缩合反应得到保护五肽和树脂的复合物Fmoc-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-Leu-Resin(R-5A)，对其进行脱除保护基芴甲氧羰酰基处理后进行切肽反应，得到线性五肽后对线性五肽进行关环反应，得到环五肽；
所述的环五肽，其化学名称为：环(亮氨酰-亮氨酰-N-甲基-亮氨酰-亮氨酰-N-甲基-亮氨酰)；英文缩写表达式为：cyclo-(Leu-Leu-N-Me-Leu-Leu-N-Me-Leu)；分子式为C32H59N5O5；结构式如下所示：
2.根据权利要求1所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(1)中所述的将芴甲氧羰酰基亮氨酸进行N-甲基化反应的具体操作步骤为：取Fmoc-Leu-OH悬浮于甲苯中，加入多聚甲醛和催化量的对甲苯磺酸，将混合物共沸回流30～50分钟，除去水；用饱和NaHCO3水溶液洗涤并用无水Na2SO4干燥；过滤，减压旋去溶剂后进行硅胶柱层析得到化合物(1)；将化合物(1)溶于二氯甲烷，加入无水三氯化铝和三乙基硅烷，待反应结束后，反应液用1mol/L的盐酸洗涤两遍；洗涤液用无水Na2SO4干燥，真空浓缩得到粗产品后进行硅胶柱层析得到芴甲氧羰酰基N-甲基-亮氨酸。
3.根据权利要求2所述的环五肽的合成方法，其特征在于：
所述的多聚甲醛是Fmoc-Leu-OH的1～2摩尔倍量；
所述的无水三氯化铝是Fmoc-Leu-OH的1.5～3摩尔倍量；
所述的三乙基硅烷是Fmoc-Leu-OH的1.5～3摩尔倍量。
4.根据权利要求1所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(2)中所述芴甲氧羰酰基亮氨酸连接到2-氯三苯甲基氯树脂的具体操作步骤为：将Fmoc-Leu-OH溶于二氯甲烷中，再向其中加入N,N-二异丙基乙胺调节pH到8～9，搅拌3～5分钟后，将混合溶液加入到已经活化好的2-氯三苯甲基氯树脂中，通入氮气，然后摇床反应3～5h。
5.根据权利要求1所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(3)、(4)、(5)、(6)中所述的脱除保护基芴甲氧羰酰基处理的具体操作步骤为：向反应器中加入20％哌啶/DMF溶液，反应20～30min，抽去反应液，用DMF冲洗复合物，手摇振荡，重复3次；仍用该方法重复操作两次，将复合物洗净，抽干洗涤液。
6.根据权利要求1所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(3)、(4)、(5)、(6)中所述的缩合试剂为1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑和1,3-二异丙基碳二亚胺。
7.根据权利要求6所述的环五肽的合成方法，其特征在于：所述的1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑和1,3-二异丙基碳二亚胺的摩尔比为1：1。
8.根据权利要求6所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(3)、(4)、(5)、(6)中所述的缩合反应是指将芴甲氧羰酰基保护的待缩合物溶于N,N-二甲基甲酰胺，依次加入1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑和1,3-二异丙基碳二亚胺，室温下摇床反应3～5小时，即得相应的肽和树脂的复合物。
9.根据权利要求1所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(6)中所述的切肽反应是指在体积分数为2％的三氟乙酸/二氯甲烷溶液中将连接在树脂上的线性肽切下，其具体操作步骤为：将体积分数为2％的三氟乙酸/二氯甲烷溶液加入到含有线性五肽和树脂复合物中，反应2～3小时后，减压蒸除溶剂，再加入CH2Cl2，减压蒸除，重复操作三次除去三氟乙酸，油泵干燥即得到线性五肽。
10.根据权利要求1所述的环五肽的合成方法，其特征在于：步骤(6)中所述的关环反应是指用PyBOP作为环合试剂，线性五肽首尾环合得到环五肽，其具体操作步骤为：将线性五肽溶于二氯甲烷中，氮气保护下，再向其中加入环合试剂PyBOP，DIEA调节pH至7～8，室温下搅拌反应，反应24～48小时，减压蒸除溶剂，用反相HPLC分离得到目标产物。
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