CN105770005A - 一种用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂的制备方法。以新鲜马齿苋全草和桑叶为原料，经胶体磨粉碎，高压均质机破壁，高速离心得清夜和滤渣。离心清夜先经微滤，再用纳滤膜浓缩至体积为原液的1/4，加入浓缩液4倍体积的95%乙醇，沉淀过滤，得沉淀提取物A和乙醇滤液A。离心滤渣用乙醇滤液A分两次超声提取，离心得乙醇滤液B，低温旋转真空浓缩，浓缩液上D101树脂；用去离子水和15%乙醇溶液冲洗树脂，70%乙醇洗脱，洗脱液经低温旋转真空浓缩至比重为1.3，与提取物A混合，真空冷冻干燥即制得粉状即制成本发明的复方剂。其对高血糖和糖尿病患者具有非常好的治疗和保健作用。

Description

一种用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂的制备方法

技术领域

本发明涉及到一种用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂的制备方法，属于天然药学技术领域。

背景技术

糖尿病(DM)是以高血糖为特征的中老年人常见疾病，严重的危害人类健康，长期的高血糖导致各种组织，尤其是眼睛、肾脏、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。随着生活水平的提高，生活方式的改变，全世界糖尿病患者人数与日俱增，已成继恶性肿瘤、心血管疾病的第三大疾病，严重威胁人类的健康。根据WHO的预测，1995-2025年间，中国糖尿病增长幅度将达68％，增长率居全球首位，届时我国糖尿病患者绝对人数将突破5000万。对糖尿病防治已迫切。天然草本治疗糖尿病历史悠久，疗效显著，副作用小，不仅能降低血糖，使临床症状消失或好转，而且可降低血脂，改善血液流变的高粘状态，预防和减少糖尿病并发症的发生。

马齿苋是马齿苋科马齿苋属一年生肉质草本植物，广布于全世界温带和热带地区，是一种“药食同源”的植物。现代药理研究表明，马齿苋具有降血脂、降血糖、抗动脉粥样硬化以及抗菌消炎等功效。桑叶也是药食两用资源，《本草纲目》中记载桑叶具有“汁煎代茗，能止消渴”的作用。《神农本草经》称桑叶为“神仙叶”，具有滋阴补血，疏散风热，益肝通气，降压利尿之功效。现代药理研究表明，桑叶具有降血糖、降血脂、降血压、抗菌和抗病毒、抗衰老等多种药理活性，广泛用于预防保健中。马齿苋与桑叶具有良好降血糖作用，主要来源于其所含的生物碱、多糖、总黄酮等的功效。

传统中药原料一般采用干药材，但很多研究表明，药材鲜品药效优于干品，主要原因在于干药材在加工过程中很容易破坏一些不耐热、易氧化、不稳定的有效成分，使中药药效降低。同时高温煎煮提取也会破坏药材有效成分。我们在研究和应用中发现，通过合理的马齿苋与桑叶配比和适当的提取工艺，可制备具有良好降血糖功效的制剂。使用新鲜马齿苋与桑叶和低温提取工艺能更好的保持有效成分的活性。

发明内容

本发明提供一种具有优良降血糖功效的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂的提取工艺和制备方法。本发明从药效出发，合理配比马齿苋与桑叶，使用新鲜马齿苋和桑叶，采用适当的提取工艺，在低温下提取制备出该复方剂。该提取工艺能更好的保持草本中的有效成分的活性，同时去除无效或甚至影响活性的成分；本发明复方剂使用更具有针对性，剂量更小，减少对肠胃刺激等不良影响。

本发明提供的用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂的工艺与制备方法包含下列步骤：

（1）将新鲜马齿苋全草，桑叶清洗干净，以重量比1-3:1混合。利用胶体磨进行粉碎，形成浆状物，加入一定量水，泵入高压均质机中均质破壁；所得破壁悬浊液pH值调整到9.0-10.0之间，经高速离心机离心得离心清夜和滤渣。

（2）将步骤1中所得的离心清夜先过0.01-0.1微米的PVDF滤膜，再用分子量为200-250Da的纳滤膜浓缩至体积为原液的1/4。搅拌加入浓缩液4倍体积的95%乙醇，静置沉淀后，用400目滤布过滤，得沉淀提取物A和乙醇滤液A。

（3）将步骤1中所得的离心滤渣加入一半量的乙醇滤液A，超声波提取一小时后离心机过滤，所得滤渣再加入另一半量的乙醇滤液A，重复提取一次。弃去滤渣，两次滤液合并得乙醇滤液B。在45度左右，低温旋转真空浓缩，浓缩液上D101树脂。用15%乙醇溶液冲洗树脂，然后用55-80%的乙醇洗脱，得洗脱液A。将洗脱液A在45度左右，低温旋转真空浓缩，浓缩至比重为1.3，得浸膏提取物B。

（4）提取物A与提取物B混合，真空冷冻干燥得棕黄色干粉，即制成可用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂。

该复方剂亦可制备成胶囊或压片剂型，可做药物治疗也可做预防保健用。本发明工艺便捷，设备要求简单，成本低，损耗小，利于安全生产，能进行大规模生产，适宜开发成降血糖保健产品或新药。

用法用量：本发明的复方剂，对于高血糖糖尿病等症状，早晚各服用1.0克，至血糖指标恢复正常且稳定。

具体实施方式：

实施例1：

将新鲜马齿苋全草25kg，桑叶10kg清洗干净，利用胶体磨进行粉碎，形成浆状物，加入20kg的水，泵入高压均质机中均质破壁，所得破壁悬浊液用氨水调整pH值到8.0-9.0之间，经高速离心机离心得离心清夜和滤渣。离心清夜先过0.05微米的PVDF滤膜，再用分子量为250Da的纳滤膜浓缩至体积为原液的1/4。加入浓缩液4倍体积的95%的乙醇，搅拌静置沉淀后，用400目滤布过滤，得沉淀提取物A和乙醇滤液A。

（2）将步骤1中所得的离心滤渣加入一半量的乙醇滤液A，超声波提取1.0小时后用高速离心机过滤，所得滤渣再加入到另一半量的乙醇滤液A中，重复提取一次。弃去滤渣，合并两次滤液得乙醇滤液B。在45度左右，低温旋转真空浓缩乙醇滤液B，所得浓缩液上D101树脂（柱体积5L）。先用5L去离子水冲洗树脂，再用5L15%乙醇溶液冲洗树脂，然后用70%的乙醇25L洗脱，得洗脱液。将洗脱液在温度45度左右，低温旋转真空浓缩至比重为1.3，得浸膏提取物B，与提取物A混合，真空冷冻干燥成棕色粉末共696克，即制成可用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂。可制成散剂，胶囊或压片等剂型。

实施例2：

将新鲜马齿苋全草40kg，桑叶20kg清洗干净，利用胶体磨进行粉碎，形成浆状物，加入30kg的水，泵入高压均质机中均质破壁，所得破壁悬浊液用氨水调整pH值到8.0-9.0之间，经高速离心机离心得离心清夜和滤渣。离心清夜先过0.1微米的PVDF滤膜，再用分子量为250Da的纳滤膜浓缩至体积为原液的1/4。加入浓缩液4倍体积的95%的乙醇，搅拌静置沉淀后，用400目滤布过滤，得沉淀提取物A和乙醇滤液A。

（2）将步骤1中所得的离心滤渣加入一半量的乙醇滤液A，超声波提取1.0小时后用高速离心机过滤，所得滤渣再加入到另一半量的乙醇滤液A中，重复提取一次。弃去滤渣，合并两次滤液得乙醇滤液B。在45度左右，低温旋转真空浓缩乙醇滤液B，所得浓缩液上D101树脂（柱体积8.5L）。先用8.5L去离子水冲洗树脂，再用8.5L15%乙醇溶液冲洗树脂，然后用70%的乙醇40L洗脱，得洗脱液。将洗脱液在温度45度左右，低温旋转真空浓缩至比重为1.3，得浸膏提取物B，与提取物A混合，真空冷冻干燥成棕色粉末共1204克，即制成可用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂。

为了验证本发明的药性和药效，利用小白鼠进行药性试验，选择糖尿病患者进行药效试验。

药性试验：

选取三组小白鼠，每组八只（雄，22-26g/只），甲组为健康小白鼠，乙组和丙组为糖尿病高血糖试验体。丙组灌喂提取物复方剂水溶液，按50mg/Kg用量；甲组和乙组灌喂等量的蒸馏水。每天一次，连续灌喂两周后再对三组小白鼠进行体检。检查发现，甲组和乙组小白鼠的血糖浓度基本不变：甲组血糖由起始浓度3.94mmol/L变为3.87mmol/L，乙组血糖由起始浓度19.23mmol/L变为19.34mmol/L。乙组的小白鼠生命体征下降。丙组血糖明显下降，由起始浓度18.87mmol/L变为10.12mmol/L，生命体征稳定。由此可见，本发明所述的药物对安全无毒副作用，而且降血糖效果明显。

药效实验：

选取80名经县级以上医院确诊为2型糖尿病人，年龄36～75岁。试服用本发明马齿苋桑叶提取物方剂，一日两次，饭前服用，使用量为1.0g/次，四周为一个阶段，连续使用三个阶段总用时三个月。每个阶段对上述名糖尿病患者的糖化血红蛋白(Alc)、空腹血糖(FPG)进行体检。

显效的标准是：基本症状（多饮、多食、多尿、乏力）消失，空腹血糖≤7.0mmol/L，或血糖较治疗前下降≥30%，糖化血红蛋白＜6.5%。

有效的标准是：基本症状（多饮、多食、多尿、乏力）明显改变，空腹血糖≤8.3mmol/L或血糖较治疗前下降≥10%，糖化血红蛋白6.5～7.5%。

无效的标准是：基本症状（多饮、多食、多尿、乏力）无明显改善，血糖下降未达到上述标准，糖化血红蛋白≥7.5%。

体检结果显示，显效病例69人，占试用组总数的86.25%；有效病例8人，占试用组总数的10%；无效病例3人，占试用组总数的3.75%，总有效率96.25%。

典型病例：

夏某，男，65岁，患2型糖尿病已有4年之久，消瘦，视力下降，使用本发明方剂后，口干渴、疲劳、多尿、多饮症状消失，应用8周后，空腹血糖由14.5mmol/L降至7.0mmol/L，2小时血糖由19.3mmol/L降至9.8mmol/L，糖化血红蛋白为6.0%。应用三个月后痊愈，一年后随访正常。

高某，男，52岁，糖尿病史5年，消瘦，白发多，疲倦无力，使用本发明方剂后，口干渴、疲劳、多尿、多饮症状消失，应用8周后，空腹血糖由13.7mmol/L降至6.8mmol/L，2小时血糖由19.0mmol/L降至10.1mmol/L，糖化血红蛋白为6.2%。使用一年后随访，体重增加，黑发增多，精神饱满，体力充沛。

甘某，男，39岁，糖尿病史2年，伴有口渴多饮、尿频、饥饿、疲劳虚弱症状。使用本发明方剂8周后，空腹血糖值降至5.7mmol/L，症状消失，精神饱满，免疫力提高，已痊愈上班，多次随访正常。

曾某，女，60岁，有糖尿病史10年之久，并伴有多种并发症，靠胰岛素维持生命，患者服用本发明方剂4周后血糖开始平稳下降，并发症有所缓解，3个月后血糖指标都恢复正常，患者精力充沛，血脂、血压变稳定，患者逐渐减少降糖药物。之后坚持每日食用本方剂一次（1.0g），多次随访，血糖均维持在正常范围，已不再使用其他降糖药物。

Claims (2)

1.一种用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂的制备方法，其步骤如下：

（1）将新鲜马齿苋全草，桑叶清洗干净，以重量比1-3:1混合，利用胶体磨进行粉碎，形成浆状物，泵入高压均质机中均质破壁；所得破壁悬浊液pH值调整到9.0-10.0之间，经高速离心机离心得离心清夜和滤渣；

（2）将步骤1中所得的离心清夜先过0.01-0.1微米的PVDF滤膜，再用分子量为200-250Da的纳滤膜浓缩至体积为原液的1/4，搅拌加入浓缩液4倍体积的95%乙醇，静置沉淀后，用400目滤布过滤，得沉淀提取物A和乙醇滤液A；

（3）将步骤1中所得的离心滤渣加入一半量的乙醇滤液A，超声波提取一小时后离心机过滤，所得滤渣再加入另一半量的乙醇滤液A，重复提取一次；弃去滤渣，两次滤液合并得乙醇滤液B，在45度左右，低温旋转真空浓缩，浓缩液上D101树脂；用15%乙醇溶液冲洗树脂，然后用55-80%的乙醇洗脱，得洗脱液A；将洗脱液A在45度左右，低温旋转真空浓缩，浓缩至比重为1.3，得浸膏提取物B；

（4）提取物A与提取物B混合，真空冷冻干燥得棕黄色干粉，即制成可用于降血糖的鲜马齿苋桑叶低温提取物复方剂。

2.根据权利要求1所述方法制备得的降血糖复方剂，其特征在于，可以按药剂学方法制备成各种临床可接受的剂型：散剂、胶囊剂、片剂或口服液。