CN105769953A - 酶解提取柴胡中药用成分的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种酶解提取柴胡中药用成分的方法,包括粉碎、酶解、真空裂解,离心,蒸馏,本发明与现有技术相比,中药成分分离速度快,纯度高,不仅提高柴胡总苷的含量,而其有利于挥发油及其他可溶性物质的提取,成本低,段时间内就可以有效提取柴胡中药用成分。
Description
技术领域
本发明属于制药工业技术领域,具体涉及一种酶解提取柴胡中药用成分的方法。
背景技术
柴胡属的植物根,别名地熏、柴胡、柴草等,始载于《神农本草经》,系伞形科植物柴胡干燥根,性味苦、微寒,归肝、胆经、功能解表退热、疏肝解郁、升举阳气等。为我国传统常用中药,柴胡按性状不同分别习称“北柴胡”及“南柴胡”等。伞形科柴胡属还有其他种类(如黑柴胡、小叶黑柴胡等),南、北柴胡也有变种。柴胡的化学成分复杂,其主要成分为柴胡皂苷和挥发油,但是其中柴胡皂苷为其主要的有效成分,药理实验证明柴胡皂苷有解热、抗菌、抗炎、镇静、抗病毒、保肝等作用。目前从属植物中分离出皂苷近100种,其中柴胡皂苷a、d和b1、b2的含量较高,生物活性较强,常与柴胡中含有的总皂苷一起作为评价柴胡质量的标准,柴胡皂苷主要存在于根中,地上部位不含有皂苷或含量极少,因此以柴胡根为药用部位是合理的,柴胡属植物地上部位主要含有黄铜类物质,具有一定的抗炎作用,但因其不含皂苷,因此不可以代替柴胡根或混合用药。
中国专利200610099498.7公开了一种柴胡提取物的制备方法,该方法采用乙醇回流提取后减压浓缩,得到的浓缩液经大孔树脂提纯,收集洗脱液干燥后得到柴胡提取物。该方法采用乙醇回流提取,乙醇用量大、耗能高,并且提取物中多糖含量高,为分离纯化带来了一定的困难。并且柴胡皂苷不稳定,在加热条件下,柴胡皂苷容易发生结构转化,生成活性较弱的次生皂苷。又如中国专利200710039351.3公开了一种从柴胡中获取提取物的方法,该方法中采用醋制柴胡进行渗漉,渗漉液浓缩后取乙酸乙酯提取物制备利胆药。该方法以醋制柴胡为原料,在酸性条件下,柴胡皂苷容易转化成次生皂苷而降低生物活性,采用高浓度乙醇进行渗漉,成本较高,另外,生产中使用大量氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等有机试剂,会对环境造成污染,专利CN102166235A一种柴胡皂苷的分离纯化方法,包括提取、提取液回收浓缩得浸膏、大孔树脂处理、洗脱液浓缩干燥等步骤,但是大孔树脂处理,成本高,分离提取所需时间长。
发明内容
本发明为了客服现有技术中的上述问题,提供一种酶解提取柴胡中药用成分的方法,中药成分分离速度快,纯度高。
为实现上述目的,一种酶解提取柴胡中药用成分的方法本发明的技术方案如下:
(1)粉碎,将柴胡药根系粉碎,过200目的筛子,得到柴胡粉末;
(2)酶解骤(1)中的,柴胡粉末用pH值为7-12的碱性溶剂浸泡12-24h,调节PH为5.8,而后加入酶解液中,酶解3h,放置在恒温摇床150rpm,温度为30℃;
(3)空裂解,将步骤2)所在的酶解液中加入1.5%离析酶,转入抽真空箱体中,用真空泵在200pa下抽真空30min,紧接着释放气体25-30min内完成真空释放,重复操作2-3次;
(4)离心,将步骤3)中真空裂解后的液体转移到离心机中,4℃,4000rpm,离心3-5min,得到上清液与下层药渣;
(5)蒸馏,将离心后上清液加水12L,水蒸气蒸馏6小时,分离挥发油,下层药渣用0.05%NaOH-50%EtOH回流提取3次,每次提取1小时,回收溶剂,与水蒸馏液合并,加水分散溶解。
所述的步骤(2)中酶解液为1.0%纤维素酶,1.0%果胶酶的混合液。
所述的步骤(2)中果胶酶为聚半乳糖醛酸酶、内切果胶酸裂解酶、外切果胶酸裂解酶中的任两种以上组合。
所述的步骤(3)中离析酶为离析酶R-10。
本发明的有益效果之处:
本发明与现有技术相比,中药成分分离速度快,纯度高,不仅提高柴胡总苷的含量,而其有利于挥发油及其他可溶性物质的提取率。
具体实施方式
以下通过具体实施例对本发明作进一步说明,但是本发明所保护的权利范围不仅限于以下实施例。
实施例1
(1)称取柴胡药用根部100g,粉碎,将柴胡药根系粉碎,过200目的筛子,得到柴胡粉末;
(2)酶解,酶解液为1.0%纤维素酶与1.0%果胶酶的酶的混合液,分别称取1g纤维素酶与1g果胶酶先用5ml,0.5mol.L-1的甘露醇溶解,再用水稀释,骤(1)中的柴胡粉末用pH值为7的碱性溶剂浸泡24h,调节PH为5.8,而后加入酶解液中,酶解3h,放置在恒温摇床150rpm,温度为30℃;
(3)空裂解,将步骤2)所在的酶解液中加入1.5%离析酶R-10,转入抽真空箱体中,用真空泵在200pa下抽真空30min,紧接着释放气体30min内完成真空释放,重复操作3次;
(4)离心,将步骤3)中真空裂解后的液体转移到离心机中,4℃,4000rpm,离心5min,得到上清液与下层药渣;
(5)蒸馏,将离心后上清液加水12L,水蒸气蒸馏6小时,分离挥发油,下层药渣用0.05%NaOH-50%EtOH回流提取3次,每次提取1小时,回收溶剂,与水蒸馏液合并,加水分散溶解。
实施例2
(1)称取柴胡药用根部200g,粉碎,将柴胡药根系粉碎,过200目的筛子,得到柴胡粉末;
(2)酶解,酶解液为1.0%纤维素酶与1.0%果胶酶的酶的混合液,分别称取2g纤维素酶与2g果胶酶先用5ml,0.5mol.L-1的甘露醇溶解,再用水稀释,骤(1)中的柴胡粉末用pH值为7的碱性溶剂浸泡24h,调节PH为5.8,而后加入酶解液中,酶解3h,放置在恒温摇床150rpm,温度为30℃;
(3)空裂解,将步骤2)所在的酶解液中加入1.5%离析酶R-10,转入抽真空箱体中,用真空泵在200pa下抽真空30min,紧接着释放气体30min内完成真空释放,重复操作3次;
(4)离心,将步骤3)中真空裂解后的液体转移到离心机中,4℃,4000rpm,离心5min,得到上清液与下层药渣;
(5)蒸馏,将离心后上清液加水12L,水蒸气蒸馏6小时,分离挥发油,下层药渣用0.05%NaOH-50%EtOH回流提取3次,每次提取1小时,回收溶剂,与水蒸馏液合并,加水分散溶解。
实施例3
(1)称取柴胡药用根部300g,粉碎,将柴胡药根系粉碎,过200目的筛子,得到柴胡粉末;
(2)酶解,酶解液为1.0%纤维素酶与1.0%果胶酶的酶的混合液,分别称取3g纤维素酶与3g果胶酶先用5ml,0.5mol.L-1的甘露醇溶解,再用水稀释,骤(1)中的柴胡粉末用pH值为7的碱性溶剂浸泡24h,调节PH为5.8,而后加入酶解液中,酶解3h,放置在恒温摇床150rpm,温度为30℃;
(3)空裂解,将步骤2)所在的酶解液中加入1.5%离析酶R-10,转入抽真空箱体中,用真空泵在200pa下抽真空30min,紧接着释放气体30min内完成真空释放,重复操作3次;
(4)离心,将步骤3)中真空裂解后的液体转移到离心机中,4℃,4000rpm,离心5min,得到上清液与下层药渣;
(5)蒸馏,将离心后上清液加水12L,水蒸气蒸馏6小时,分离挥发油,下层药渣用0.05%NaOH-50%EtOH回流提取3次,每次提取1小时,回收溶剂,与水蒸馏液合并,加水分散溶解。
Claims (4)
1.一种酶解提取柴胡中药用成分的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)粉碎,将柴胡药根系粉碎,过200目的筛子,得到柴胡粉末;
(2)酶解骤(1)中的,柴胡粉末用pH值为7-12的碱性溶剂浸泡12-24h,调节PH为5.8,而后加入酶解液中,酶解3h,放置在恒温摇床150rpm,温度为30℃;
(3)空裂解,将步骤2)所在的酶解液中加入1.5%离析酶,转入抽真空箱体中,用真空泵在200pa下抽真空30min,紧接着释放气体25-30min内完成真空释放,重复操作2-3次;
(4)离心,将步骤3)中真空裂解后的液体转移到离心机中,4℃,4000rpm,离心3-5min,得到上清液与下层药渣;
(5)蒸馏,将离心后上清液加水12L,水蒸气蒸馏6小时,分离挥发油,下层药渣用0.05%NaOH-50%EtOH回流提取3次,每次提取1小时,回收溶剂,与水蒸馏液合并,加水分散溶解。
2.根据权利要求1所述的一种酶解提取柴胡中药用成分的方法,其特征在于,所述的步骤(2)中酶解液为1.0%纤维素酶,1.0%果胶酶的混合液。
3.根据权利要求1所述的一种酶解提取柴胡中药用成分的方法,其特征在于,所述的步骤(2)中果胶酶为聚半乳糖醛酸酶、内切果胶酸裂解酶、外切果胶酸裂解酶中的任两种以上组合。
4.根据权利要求1所述的一种酶解提取柴胡中药用成分的方法,其特征在于,所述的步骤(3)中离析酶为离析酶R-10。
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CN110141591A (zh) * | 2019-05-23 | 2019-08-20 | 佛山市欧若拉生物科技有限公司 | 一种柴胡皂苷制备方法 |
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