CN105662946B - 石榴皮提取物的制备及其在化妆品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种石榴皮提取物的制备及其在化妆品中的应用。所述石榴皮提取物的制备方法包括如下步骤：提取步骤：称取石榴皮粉碎物，加入乙醇溶液，超声波辅助提取，过滤，再减压浓缩，得浓缩液；萃取步骤：将浓缩液依次经乙酸乙酯萃取和氢氧化钠溶液萃取，得萃取液A；沉淀步骤：在萃取液A中加入明胶溶液，静置，过滤，得沉淀；将沉淀用丙酮溶解，滤除不溶物；滤液回收丙酮后的残余液；分离纯化步骤：将残余液液进行分离纯化，即得。本发明制备的石榴皮提取物颜色浅，多酚含量高，抗氧化活性显著，可用于化妆品领域。且用其制备的红石榴润肤抗皱霜，用于皮肤表面，具有延缓衰老，减轻皱纹，保湿护肤等功效。

Description

石榴皮提取物的制备及其在化妆品中的应用

技术领域

本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种石榴皮提取物的制备及其在化妆品中的应用。

背景技术

石榴(学名：Punica granatum L.)落叶乔木或灌木；单叶，通常对生或簇生，无托叶。花顶生或近顶生，单生或几朵簇生或组成聚伞花序，近钟形，裂片5-9，花瓣5-9，多皱褶，覆瓦状排列；胚珠多数。浆果球形，顶端有宿存花萼裂片，果皮厚；种子多数，浆果近球形，果熟期9-10月。外种皮肉质半透明，多汁；内种皮革质。性味甘、酸涩、温，具有杀虫、收敛、涩肠、止痢等功效。

石榴是一种浆果，其营养丰富，维生素C比苹果、梨高1倍。原产中国西域，汉代传出中原。石榴成熟后，全身都可用，果皮可入药，果实可食用或压汁。对老年人的身体健康有很高营养价值，所以老人应该常吃石榴。石榴是一种珍奇的浆果，其果实营养价值较高。研究发现，石榴含大量的有机酸、糖类、蛋白质、脂肪、维生素以及钙、磷、钾等矿物质。中医认为，石榴具清热、解毒、平肝、补血、活血和止泻功效，适合黄疸性肝炎、哮喘和久泻的患者及经期过长的女性。

石榴皮为石榴的干燥果皮，含有多种生物碱，抑菌试验证实，石榴的醇浸出物及果皮水煎剂，具有广谱抗菌作用，其对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、霍乱弧菌、痢疾杆菌等有明显的抑制作用，其中对志贺氏痢疾杆菌作用最强，石榴皮水浸剂在试管内对各种皮肤真菌也有不同程度的抑制作用，石榴皮煎剂还能抑制流感病毒。

现有技术中，专利CN101057878A中公开了一种石榴皮提取物及其制备方法，将石榴皮经低碳醇作为提取溶媒提取、浓缩、柱层析、浓缩、干燥，得到粉末状石榴皮提取物。但是，该方法所得产品色泽较深。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种石榴皮提取物的制备及其在化妆品中的应用。所得产品色浅，呈淡黄色，多酚含量高，抗氧化活性显著，可作为天然抗氧化剂用于化妆品领域。

本发明是一种基于溶剂提取法提取红石榴皮中抗氧化活性成分，并采用聚酰胺色谱法进行分离纯化红石榴皮提取物的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种石榴皮提取物的制备方法，所述方法包括如下步骤：

提取步骤：称取石榴皮粉碎物，加入乙醇溶液，超声波辅助提取，过滤，再减压浓缩，得浓缩液；

萃取步骤：将浓缩液依次经乙酸乙酯萃取和氢氧化钠溶液萃取，得萃取液A；

沉淀步骤：在萃取液A中加入明胶溶液，静置，过滤，得沉淀；将沉淀用丙酮溶解，滤除不溶物；滤液回收丙酮后得残余液；

分离纯化步骤：将残余液进行分离纯化，即得。

优选地，所述提取步骤中，所述石榴皮粉碎物和乙醇溶液的固液比g/mL为1:20～1:40，乙醇溶液的体积分数为50-80％，更优选乙醇溶液的体积分数为60-75％。

乙醇溶液的体积浓度和料液比对以多酚为代表的抗氧化活性成分的提取得率影响最显著。本发明中，乙醇体积分数在30％-50％之间，随浓度的提高多酚得率会显著提高，乙醇体积分数在50％-80％，多酚得率变化不大，乙醇体积分数高于80％后多酚得率下降。料液比在1：20-1：40范围之间，多酚得率随料液比的增大而提高，但超过1：30后，料液比对多酚得率的影响逐渐减小。

优选地，提取步骤中，所述超声波辅助提取30-60分钟，提取2次；更优选超声波辅助提取40-60分钟，

优选地，所述萃取步骤具体为：浓缩液与乙酸乙酯等体积萃取两次，萃取液合并后，回收乙酸乙酯至萃取液的体积减半，再将体积减半后的萃取液与质量浓度为1-10％的氢氧化钠溶液等体积萃取，得萃取液A。

优选地，沉淀步骤中，所述萃取液以稀盐酸调pH值至4-6，明胶溶液的质量浓度为1-10％；更优选明胶溶液的质量浓度为3-5％。

优选地，沉淀步骤中，所述丙酮溶液的体积分数为40-70％，更优选丙酮溶液的体积分数为50-70％。

优选地，所述分离纯化步骤具体为：将残余液上样于聚酰胺色谱柱，依次以3-6倍柱体积的20％，40％，60％，和无水乙醇洗脱，分别收集各洗脱液，其中经体积分数为40％乙醇洗脱获得的洗脱液减压浓缩，冷冻干燥，得石榴皮提取物。

在实验过程中，各洗脱液均分别收集，但最终经多酚含量测定及多酚得率两方面为指标，保留40％乙醇洗脱液为所得产品，60％乙醇和无水乙醇洗脱过程可计入聚酰胺色谱柱的再生过程。

本发明还提供了一种所述石榴皮提取物的制备方法得到的石榴皮提取物在制备化妆品的用途。

本发明还提供了一种红石榴润肤抗皱霜，以质量分数100％计，包括以下质量分数的各组分：石榴皮提取物1-3％，芦荟多糖提取液15-30％，辛酸和/或癸酸甘油三酯3-6％，十八醇3-8％，乳木果油1-3％，黑种草油1-3％，乳化蜡3-6％，丁二醇3-5％，胶原蛋白0.5-1％，卡波姆940 0.2-0.5％，苯氧乙醇0.5-0.8％，乙基己基甘油0.5-0.8％，EDTA二钠0.05-0.1％，氢氧化钠0.2-0.4％，香精0.3-0.8％，余量为去离子水。

本发明还提供了一种红石榴润肤抗皱霜的制备方法，包括以下步骤：

S1、称取各组分原料：

A相：辛酸和/或癸酸甘油三酯，十八醇，乳木果油，黑种草油，乳化蜡；

B相：芦荟多糖提取液，丁二醇，卡波姆940，EDTA二钠，去离子水；

C相：红石榴提取物，胶原蛋白，苯氧乙醇，乙基己基甘油，氢氧化钠，香精；

S2、A相混合液制备：将A相各原料混合，加热搅拌均匀，得A相混合液；

S3、B相混合液制备：先将卡波姆940以适量去离子水溶胀得溶液a,EDTA二钠溶于去离子水得溶液b，再将溶液a、溶液b与其它B相原料一起混合，加热搅拌均匀，得B相混合液；

S4、A相、B相、C相混合：将B相混合液缓慢加入A相混合液中，均质，搅拌，冷却后，加入C相各原料，再均质，抽真空，搅拌，冷却，即得。

优选地，所述步骤S2中，加热至80±2℃；

所述步骤S3中，加热至70±5℃；

所述步骤S4具体为：将B相混合液缓慢加入A相混合液中，3000rpm均质20分钟，搅拌消泡，冷却至50±5℃，保持搅拌，加入C相各原料，2000rpm均质20分钟，抽真空脱气泡，搅拌，冷却，即得。

与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

1、本发明制备所得石榴皮提取物的颜色较浅，呈淡黄色，多酚含量高，抗氧化活性显著，可作为天然抗氧化剂用于化妆品领域。

2、本发明制备的红石榴润肤抗皱霜，用于皮肤表面，具有延缓衰老，减轻皱纹，保湿护肤等功效。

附图说明

通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：

图1为不同洗脱流分对超氧阴离子自由基的清除率；

图2为不同洗脱流分对DPPH自由基的清除率。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。

实施例1

本实施例提供了一种石榴皮提取物的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：提取步骤

按固液比g/mL为1:20，称取石榴皮粉碎物，加入体积分数为60％乙醇溶液，超声波辅助提取40分钟，过滤，滤渣重复提取1次，滤液合并，减压浓缩。

步骤二：萃取步骤

浓缩液以等体积乙酸乙酯萃取两次，萃取液合并，回收乙酸乙酯至一半体积，继以等体积质量浓度5％氢氧化钠溶液萃取。

步骤三：沉淀步骤

萃取液以稀盐酸调pH值至5，加入质量浓度为4％的明胶溶液，静置过夜，过滤；收集沉淀以50％丙酮溶液溶解，滤除不溶物，滤液回收丙酮。

步骤四：分离纯化步骤

步骤三所述滤液回收丙酮后，上样于已预处理好的聚酰胺色谱柱，依次以3-6倍柱体积的20％，40％，60％，和无水乙醇洗脱，并收集40％乙醇洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，得石榴皮提取物。

采用不同洗脱流分：20％，40％，60％，和无水乙醇的石榴皮提取物得率分别为23.6％，50.1％，3.3％，和4.2％，其中多酚含量以质量分数计，分别为35.2％，85.5％，60.2％和12.1％。

实施例2石榴皮提取物的生物活性检测

分别采用邻苯三酚自氧化法和DPPH法测定实施例1中采用不同洗脱流分洗脱获得的石榴皮提取物对超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除能力，结果分别见图1，图2。当浓度为2mg/ml时，40％乙醇和60％乙醇洗脱流分对超氧阴离子自由基的清除率均达到90％以上；在对DPPH自由基的清除能力上，40％乙醇洗脱流分的IC₅₀值为0.02mg/ml，同样实验条件下与维生素C的DPPH自由基清除能力相当。

实施例3

本实施例提供了一种石榴皮提取物的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：提取步骤

按固液比g/mL为1:30，称取石榴皮粉碎物，加入体积分数为75％乙醇溶液，超声波辅助提取50分钟，过滤，滤渣重复提取1次，滤液合并，减压浓缩。

步骤二：萃取步骤

浓缩液以等体积乙酸乙酯萃取两次，萃取液合并，回收乙酸乙酯至一半体积，继以等体积质量浓度4％氢氧化钠溶液萃取。

步骤三：沉淀步骤

萃取液以稀盐酸调pH值至4，加入质量浓度为5％的明胶溶液，静置过夜，过滤；收集沉淀以60％丙酮溶液溶解，滤除不溶物，滤液回收丙酮。

步骤四：分离纯化步骤

步骤三所述滤液回收丙酮后，上样于已预处理好的聚酰胺色谱柱，依次以3-6倍柱体积的20％，40％，60％，和无水乙醇洗脱，并收集40％乙醇洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，得石榴皮提取物。

采用不同洗脱流分：20％，40％，60％，和无水乙醇的石榴皮提取物得率分别为22.1％，52.3％，2.9％，和3.8％，其中多酚含量以质量分数计，分别为34.6％，83.7％，62.3％和10.5％。

实施例4

本实施例提供了一种石榴皮提取物的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：提取步骤

按固液比g/mL为1:40，称取石榴皮粉碎物，加入体积分数为65％乙醇溶液，超声波辅助提取60分钟，过滤，滤渣重复提取1次，滤液合并，减压浓缩。

步骤二：萃取步骤

浓缩液以等体积乙酸乙酯萃取两次，萃取液合并，回收乙酸乙酯至一半体积，继以等体积质量浓度3％氢氧化钠溶液萃取。

步骤三：沉淀步骤

萃取液以稀盐酸调pH值至6，加入质量浓度为6％的明胶溶液，静置过夜，过滤；收集沉淀以70％丙酮溶液溶解，滤除不溶物，滤液回收丙酮。

步骤四：分离纯化步骤

步骤三所述滤液回收丙酮后，上样于已预处理好的聚酰胺色谱柱，依次以3-6倍柱体积的20％，40％，60％，和无水乙醇洗脱，并收集40％乙醇洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，得石榴皮提取物。

采用不同洗脱流分：20％，40％，60％，和无水乙醇的石榴皮提取物得率分别为24.8％，54.4％，3.1％，和3.6％，其中多酚含量以质量分数计，分别为30.5％，87.2％，56.1％和9.7％。

对比例1

本对比例提供了一种石榴皮提取物的制备方法，所述制备方法与实施例1相同，不同之处仅在于：步骤一中，所述加入的乙醇溶液体积分数为40％。

采用不同洗脱流分：20％，40％，60％，和无水乙醇的石榴皮提取物得率分别为33.7％，46.2％，3.1％，和2.8％，其中多酚含量以质量分数计，分别为22.5％，75.9％，60.4％和13.7％。

对比例2

本对比例提供了一种石榴皮提取物的制备方法，所述制备方法与实施例1相同，不同之处仅在于：步骤一中，所述固液比为1:10。

采用不同洗脱流分：20％，40％，60％，和无水乙醇的石榴皮提取物得率分别为21.3％，45.8％，10.2％，和3.6％，其中多酚含量以质量分数计，分别为38.9％，82.0％，58.6％和12.7％。

对比例3

本对比例提供了一种石榴皮提取物的制备方法，所述制备方法与实施例1相同，不同之处仅在于：步骤三中，所述萃取液以稀盐酸调pH值至7。

采用不同洗脱流分：20％，40％，60％，和无水乙醇的石榴皮提取物得率分别为18.7％，35.2％，18.9％，和2.7％，其中多酚含量以质量分数计，分别为32.6％，75.4％，53.5％和10.1％。

实施例3红石榴润肤抗皱霜的制备

本实施例提供了一种红石榴润肤抗皱霜及其制备方法，所述制备方法为：

A相：辛酸/癸酸甘油三酯，十八醇，乳木果油，黑种草油，乳化蜡；

B相：芦荟多糖提取液，丁二醇，卡波姆940，EDTA二钠，去离子水；

C相：红石榴提取物，胶原蛋白，苯氧乙醇，乙基己基甘油，氢氧化钠，香精。

上述各原料组分的重量份数如下：

以重量份数100％计，红石榴提取物1-3％，芦荟多糖提取液15-30％，辛酸/癸酸甘油三酯3-6％，十八醇3-8％，乳木果油1-3％，黑种草油1-3％，乳化蜡3-6％，丁二醇3-5％，胶原蛋白0.5-1％，卡波姆940 0.2-0.5％，苯氧乙醇0.5-0.8％，乙基己基甘油0.5-0.8％，EDTA二钠0.05-0.1％，氢氧化钠0.2-0.4％，香精0.3-0.8％，余量为去离子水。

将A相各原料加入烧杯中，加热搅拌至80±2℃，待充分混合均匀；B相原料中，先将卡波姆940以适量去离子水充分溶胀，EDTA二钠另外溶于适量去离子水，二者再与其它B相原料一起混合搅拌均匀，并加热至70±5℃；将B相缓慢加入A相，3000rpm均质20分钟，搅拌消泡，冷却至50±5℃，保持搅拌，加入C相原料，2000rpm均质20分钟，抽真空脱气泡，搅拌，冷却，即得。

本实施例制备的红石榴润肤抗皱霜，用于皮肤表面，具有延缓衰老，减轻皱纹，保湿护肤等功效。

综上所述，本发明制备所得石榴皮提取物的颜色较浅，呈淡黄色，多酚含量高，抗氧化活性显著，可作为天然抗氧化剂用于化妆品领域。

上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种石榴皮提取物的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

提取步骤：称取石榴皮粉碎物，加入乙醇溶液，超声波辅助提取，过滤，再减压浓缩，得浓缩液；

萃取步骤：将浓缩液依次经乙酸乙酯萃取和氢氧化钠溶液萃取，得萃取液A；

沉淀步骤：在萃取液A中加入明胶溶液，静置，过滤，得沉淀；将沉淀用丙酮溶解，滤除不溶物；滤液回收丙酮后得残余液；

分离纯化步骤：将残余液进行分离纯化，即得；

所述分离纯化步骤具体为：将残余液上样于聚酰胺色谱柱，依次以3-6倍柱体积的20％，40％，60％，和无水乙醇洗脱，分别收集各洗脱液，其中经体积分数为40％乙醇洗脱获得的洗脱液减压浓缩，冷冻干燥，得石榴皮提取物；

提取步骤中，所述石榴皮粉碎物和乙醇溶液的固液比g/mL为1:20～1:40，乙醇溶液的体积分数为50-80％；

沉淀步骤中，所述萃取液A以稀盐酸调pH值至4-6。

2.根据权利要求1所述的石榴皮提取物的制备方法，其特征在于，提取步骤中，所述超声波辅助提取30-60分钟，提取2次。

3.根据权利要求1所述的石榴皮提取物的制备方法，其特征在于，所述萃取步骤具体为：浓缩液与乙酸乙酯等体积萃取两次，所得萃取液合并后，回收乙酸乙酯至萃取液的体积减半，再将体积减半后的萃取液与质量浓度为1-10％的氢氧化钠溶液等体积萃取，得萃取液A。

4.根据权利要求1所述的石榴皮提取物的制备方法，其特征在于，沉淀步骤中，所述明胶溶液的质量浓度为1-10％。

5.根据权利要求1所述的石榴皮提取物的制备方法，其特征在于，沉淀步骤中，所述丙酮的体积分数为40-70％。

6.一种根据权利要求1-5任一项所述的石榴皮提取物的制备方法得到的石榴皮提取物在制备化妆品中的用途。

7.一种红石榴润肤抗皱霜，其特征在于，以质量分数100％计，包括以下质量分数的各组分：根据权利要求1制备的石榴皮提取物1-3％，芦荟多糖提取液15-30％，辛酸和/或癸酸甘油三酯3-6％，十八醇3-8％，乳木果油1-3％，黑种草油1-3％，乳化蜡3-6％，丁二醇3-5％，胶原蛋白0.5-1％，卡波姆940 0.2-0.5％，苯氧乙醇0.5-0.8％，乙基己基甘油0.5-0.8％，EDTA二钠0.05-0.1％，氢氧化钠0.2-0.4％，香精0.3-0.8％，余量为去离子水。

8.一种根据权利要求7所述的红石榴润肤抗皱霜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、称取各组分原料：

A相：辛酸和/或癸酸甘油三酯，十八醇，乳木果油，黑种草油，乳化蜡；

B相：芦荟多糖提取液，丁二醇，卡波姆940，EDTA二钠，去离子水；

C相：石榴皮提取物，胶原蛋白，苯氧乙醇，乙基己基甘油，氢氧化钠，香精；

S2、A相混合液制备：将A相各原料混合，加热搅拌均匀，得A相混合液；

S3、B相混合液制备：先将卡波姆940以适量去离子水溶胀得溶液a,EDTA二钠溶于去离子水得溶液b，再将溶液a、溶液b与其它B相原料一起混合，加热搅拌均匀，得B相混合液；

S4、A相、B相、C相混合：将B相混合液缓慢加入A相混合液中，均质，搅拌，冷却后，加入C相各原料，再均质，抽真空，搅拌，冷却，即得。