CN105566656A - 酶解分离杜仲胶中残渣的方法 - Google Patents

酶解分离杜仲胶中残渣的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了酶解分离杜仲胶中残渣的方法，该方法根据杜仲胶和植物组织基本结构的不同以及物理性质不同，通过淘洗-酶解植物碎屑达到纯化杜仲胶的目的。具体做法是：酶解反应器中，用清水反复淘洗，以除去植物碎屑；与此同时，依次用脂肪酶、蛋白酶、半纤维素酶、纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶、木聚糖酶对植物组织进行水解，反复进行淘洗-酶解，未水解的植物碎屑不断地分离，沉到酶解液外筒底部被除去，而辅助的酶解把杜仲胶表面亲水性物质水解除去，最后得到高纯度天然长丝杜仲胶。本发明优点是：污染低；生产成本低；天然药物成分浓度高；杜仲胶产品聚合度高、抗拉、抗撕裂，并且分子量大、分布窄，分子量的D值为1左右。适用于提纯天然杜仲胶。

Description

酶解分离杜仲胶中残渣的方法
技术领域
本发明与天然高分子材料的处理工艺有关，具体而言，涉及用酶解分离杜仲胶中残渣的方法。
技术背景
全酶法水解杜仲植物组织获取杜仲胶和杜仲天然药物具有：①污染低；②胶和天然药物的生产成本低；③天然药物成分浓度高；④杜仲胶产品的品质高、抗拉、抗撕裂性强等优点。但是，由于酶解的杜仲胶中包含有大量的植物碎屑，如不除尽会降低杜仲长丝胶的应用价值和使用范围。杜仲胶存在于杜仲植物中的含胶细胞中，若纤维素组成的细胞壁不能被全部水解则杜仲胶不能被充分地释放出来，所以必须全部降解植物组织才有利于杜仲胶的游离。
近年来人们对杜仲的深入研究在研究杜仲胶分离提纯方面，开发了一些技术方案，如中国专利申请件201110147426.6号《从杜仲籽中循环连续提取杜仲胶、杜仲籽油、杜仲浸膏及杜仲树脂的方法》、201210307947.8号《一种酶解提取杜仲胶的方法》、201410499693.3号《一种杜仲精粉、杜仲多糖及杜仲胶联产提取分离方法》等。但这些专利技术尚未解决全部降解和除去植物组织的问题。
发明内容
本发明旨在提供一种酶解分离杜仲胶中残渣的方法，通过彻底地破坏各种植物组织结构，使杜仲胶充分地游离出来。
发明人提供的酶解分离杜仲胶中残渣的方法原理是根据杜仲胶和植物组织基本结构的不同以及物理性质不同，通过淘洗和酶解植物碎屑达到纯化杜仲胶的目的，具体方法是：
将全酶法水解杜仲植物组织获取的粗杜仲胶送入酶解淘洗反应器中，用清水反复淘洗，以除去植物碎屑；与此同时，依次用脂肪酶、蛋白酶、半纤维素酶、纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶、木聚糖酶对植物组织进行水解，以彻底清理杜仲胶丝表面的植物物质，获得纯粹不粘附有杂质物质的杜仲胶丝；在第一次淘洗-酶解之后，将沉降到溶液底部的植物碎屑与杜仲胶分离，对于仍残留在产品杜仲胶中的植物残渣，需要进行第二次淘洗-酶解，反复地更换不同功能的酶，重复地降解各个重复结构的不同组织成分，破坏各个层面的植物组织，再次淘洗、分离残渣，提高杜仲胶的纯度；如此反复，未水解的植物碎屑不断地与杜仲胶分离，沉到酶解液的底部被除去，而辅助的酶解则把杜仲胶表面的蛋白、果胶、树脂、纤维素细胞壁等亲水性物质水解除去，显现出杜仲胶原有的状态，胶丝的颜色也随着细胞壁纤维素的水解逐渐变成白色，而且憎水性增强，比重变轻；酶解淘洗完成后，用清水清洗淘洗3次；使杜仲胶丝完全暴露出来、浮在酶解淘洗液表面，胶丝表面不再附着任何非杜仲胶的植物残余物质，捞出后得到纯度非常高的天然长丝杜仲胶。
上述酶解反应器是由内筒和外筒组成的设备，内筒安装有转轴，运行时随转轴而转动，外筒则不旋转，淘洗水和各种酶与粗杜仲胶在其中进行动态酶解淘洗反应。
上述脂肪酶的使用方法是：称取原料重量的2%～3%脂肪酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=6.0～8.0缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料5～10cm，在最适pH条件下在淘洗器中酶解/淘洗，反应温度为45℃～55℃，淘洗机运行时间为16h。反应结束后用清水清洗一次并更换生物酶和缓冲液。
上述蛋白酶的使用方法是：称取原料重量的3%～5%蛋白酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=3.0～4.0缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为45℃～50℃，淘洗机运行时间为16～20h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
上述半纤维素酶、纤维素酶使用方法是：称取原料重量的1%～2%的半纤维素酶和3%纤维素酶置于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=5.5～6.0的缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料20cm，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为50℃～55℃，淘洗机运行时间为18～20h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
上述果胶酶的使用方法是：称取原料重量的2%果胶酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH3.5～4.5的缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为45℃～50℃，淘洗机运行时间为12～16h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
上述葡聚糖酶、木聚糖酶的使用方法是：称取原料重量的各1%～2%的葡聚糖酶和木聚糖酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为50℃～55℃，淘洗机运行时间为18h；反应结束后用清水清洗多次并可回收杜仲胶。
本发明的酶解分离杜仲胶中残渣的方法确保了生物法提取的完整性，利用杜仲胶和未降解杜仲植物残渣碎屑的比重性质差异和对水的亲和与憎恶的不同，进行杜仲胶和未水解残渣碎屑的分离，整个淘洗分离过程既保证原生态杜仲原来的品质，又显著提高了杜仲胶的纯度。本发明具有以下优点：污染低；生产成本低；天然药物成分浓度高；杜仲胶产品聚合度高、抗拉、抗撕裂，并且分子量大、分布窄，分子量的D值为1～3，而合成高分子的D值一般为1.5～50，范围宽。适用于提纯天然杜仲胶。
附图说明
图1为天然中药成分提取的动态酶解反应器结构示意图。图中不严密的转筒表面具有装取料的翻盖，不严密的盖口是排除固体碎屑渣的逸出口。
图中：1为外筒，2为密封盖，3为内筒，4为转轴，5为夹套，6为集渣槽，7为进液管，8为排液/排渣管，9为网眼，10为传动齿轮。
具体实施方式
实施例︰
将全酶法水解杜仲植物组织获取的粗杜仲胶送入酶解淘洗反应器中，进行第一次淘洗-酶解，用清水反复淘洗，以除去植物碎屑；与此同时，依次用、脂肪酶、蛋白酶、半纤维素酶、纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶、木聚糖酶对植物组织进行水解；
其中，脂肪酶去除植物碎屑组织中的脂肪成分，方法是：称取原料重量的2%～3%脂肪酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=6.0～8.0缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料5～10cm，在最适pH条件下在淘洗器中酶解/淘洗，反应温度为45℃～55℃，淘洗机运行时间为16h。反应结束后用清水清洗一次并更换生物酶和缓冲液。
其中，蛋白酶去除植物碎屑组织中的蛋白质组分，方法是：称取原料重量的3%～5%蛋白酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=3.0～4.0缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为45℃～50℃，淘洗机运行时间为16～20h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
其中，半纤维素酶、纤维素酶使除植物碎屑组织中的纤维素水解，方法是：称取原料重量的1%～2%的半纤维素酶和3%纤维素酶置于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=5.5～6.0的缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料20cm，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为50℃～55℃，淘洗机运行时间为18～20h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
果胶酶酶解与角质层黏连的果胶质和部分植物细胞壁，方法是：称取原料重量的2%果胶酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH3.5～4.5的缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为45℃～50℃，淘洗机运行时间为12～16h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
葡聚糖酶、木聚糖酶除植物碎屑组织中的葡聚糖和木聚糖水解，方法是：称取原料重量的各2%的葡聚糖酶和木聚糖酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为50℃～55℃，淘洗机运行时间为18h；反应结束后用清水清洗多次并可回收杜仲胶。
将沉降到溶液底部的植物碎屑与杜仲胶分离；对于继续残留在产品杜仲胶中的植物残渣，需要进行第二次淘洗-酶解，反复地更换不同功能的酶，重复地降解各个重复结构的不同组织成分，破坏各个层面的植物组织，再次淘洗、分离残渣，提高杜仲胶的纯度；如此反复，未水解的植物碎屑不断地杜仲胶分离，沉到酶解液的外筒底部被除去，而辅助的酶解则把杜仲胶表面的蛋白、果胶、树脂、纤维素细胞壁等亲水性物质水解除去，显现出杜仲胶原有的状态，胶丝的颜色也随着细胞壁纤维素的水解逐渐变成白色，而且憎水性增强，比重变轻。
酶解淘洗完成后，用清水清洗淘洗3次；这时杜仲胶丝已经完全暴露出来，浮在酶解淘洗液表面，表面不再附着任何非杜仲胶的植物残余物质，捞出后得到纯度非常高的天然长丝杜仲胶。

Claims (7)

1.酶解分离杜仲胶中残渣的方法，其特征在于该方法是根据杜仲胶和植物组织基本结构的不同以及物理性质不同，通过淘洗和酶解植物碎屑达到纯化杜仲胶的目的，具体做法是：
将全酶法水解杜仲植物组织获取的粗杜仲胶送入酶解反应器中，用清水反复淘洗，以除去植物碎屑；与此同时，依次用脂肪酶、蛋白酶、半纤维素酶、纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶、木聚糖酶对植物组织进行水解，以彻底清理杜仲胶丝表面的植物物质，获得纯粹不粘附有杂质物质的杜仲胶丝；在第一次淘洗-酶解之后，将沉降到外筒溶液底部的植物碎屑与杜仲胶分离，对于仍残留在产品杜仲胶中的植物残渣，需要进行第二次淘洗-酶解，反复地更换不同功能的酶，重复地降解各个重复结构的不同组织成分，破坏各个层面的植物组织，再次淘洗、分离残渣，提高杜仲胶的纯度；如此反复，未水解的植物碎屑不断地与杜仲胶分离，沉到酶解液的底部被除去，而辅助的酶解则把杜仲胶表面的蛋白、果胶、树脂、纤维素细胞壁等亲水性物质水解除去，显现出杜仲胶原有的状态，胶丝的颜色也随着细胞壁纤维素的水解逐渐变成白色，而且憎水性增强，比重变轻；酶解淘洗完成后，用清水清洗淘洗3次；使杜仲胶丝完全暴露出来、浮在酶解淘洗液表面，表面不再附着任何非杜仲胶的植物残余物质，捞出后得到纯度非常高的天然长丝杜仲胶。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述酶解反应器是由内筒和外筒组成的设备，内筒安装有转轴，运行时随转轴而转动，外筒则不旋转，淘洗水和各种酶与粗杜仲胶在其中进行动态酶解反应。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述脂肪酶去除植物碎屑组织中的脂肪成分，方法是：称取原料重量的2%～3%脂肪酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=6.0～8.0缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料5～10cm，在最适pH条件下在淘洗器中酶解/淘洗，反应温度为45℃～55℃，淘洗机运行时间为16h，反应结束后用清水清洗一次并更换生物酶和缓冲液。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述蛋白酶去除植物碎屑组织中的蛋白质组分，方法是：称取原料重量的3%～5%蛋白酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=3.0～4.0缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为45℃～50℃，淘洗机运行时间为16～20h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述半纤维素酶、纤维素酶使除植物碎屑组织中的纤维素水解，方法是：称取原料重量的1%～2%的半纤维素酶和3%纤维素酶置于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH=5.5～6.0的缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料20cm，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为50℃～55℃，淘洗机运行时间为18～20h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述果胶酶酶解与角质层黏连的果胶质和部分植物细胞壁，方法是：称取原料重量的2%果胶酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH3.5～4.5的缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为45℃～50℃，淘洗机运行时间为12～16h；反应结束后用清水清洗一次并更换不同pH缓冲液。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述葡聚糖酶、木聚糖酶除植物碎屑组织中的葡聚糖和木聚糖水解，方法是：称取原料重量的各2%的葡聚糖酶和木聚糖酶于酶解淘洗器中，用食用级柠檬酸和柠檬酸钠配成pH缓冲液，溶解酶的缓冲液体积以没过原料即可，在最适pH条件下在淘洗器中酶解淘洗，反应温度为50℃～55℃，淘洗机运行时间为18h；反应结束后用清水清洗多次，完成酶解反应。
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