CN105541945B - 一种单磷酸阿糖腺苷晶型化合物 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种式（I）所示的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物。该化合物使用Cu‑Kα射线测量得到的X‑射线粉末衍射谱图如图1所示。本发明所提供的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物是具有改善的溶解度和稳定性，具有更好的医药价值。

Description

一种单磷酸阿糖腺苷晶型化合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及到一种单磷酸阿糖腺苷的晶型化合物及其制备方法。

背景技术

阿糖腺苷为嘌呤核苷类衍生物，难溶于水，有良好的抗病毒作用，抑制病毒基因组核酸的复制，具有广谱的抗疱疹病毒的作用。对处于复制期的单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒及巨细胞病毒均有抑制作用，对部分阿昔洛韦耐药的病毒感染仍有效。

单磷酸阿糖腺苷为阿糖腺苷的单磷酸化合物，是在阿糖腺苷(Ara-A)的5位引入一磷腺苷(AMP)形成了单磷酸阿糖腺苷(Ara-ATP)，水溶性比Ara-A高400倍，在体内较易转化为活性形式三磷酸阿糖腺苷，抗病毒作用较Ara-A强，且细胞毒性明显低于Ara-A。

单磷酸阿糖腺苷化学名称为：9-(β-D-***呋喃糖)腺膘呤5’-单磷酸酯一水合物。分子式：C₁₀H₁₄N₅O₇P·H₂O，分子量：365.26，单磷酸阿糖腺苷为白色或类白色结晶性粉末，无臭，在水中极微溶解，在甲醇、乙醇、***中几乎不溶，其结构式为：

注射用单磷酸阿糖腺苷为抗脱氧核糖核酸(DNA)病毒药，其药理作用是与病毒的脱氧核糖核酸聚合酶结合，使其活性降低而抑制DNA合成。单磷酸阿糖腺苷进入细胞后，经过磷酸化生成阿糖腺苷二磷酸(Ara-ADP)和阿糖腺苷三磷酸(Ara-ATP)。抗病毒活性主要由阿糖腺苷三磷酸(Ara-ATP)所引起，Ara-ATP与脱氧腺苷三磷酸(dATP)竞争地结合到病毒DNAP上，从而抑制了酶的活性及病毒DNA的合成，同时抑制病毒核苷酸还原酶的活性而抑制病毒DNA的合成，还能抑制病毒DNA末端脱氧核苷酰转移酶的活性，使Ara-A渗入到病毒的DNA中并连接在DNA链3′-OH位置的末端，抑制了病毒DNA的继续合成。用于治疗疱疹病毒感染所致的口炎、皮炎、脑炎及巨细胞病毒感染。

但是，由于单磷酸阿糖腺苷微溶于水，溶液浑浊，澄清度不好，使得注射用单磷酸阿糖腺苷在实际生产过程中，需用氢氧化钠溶液调节pH值；而且注射用单磷酸阿糖腺苷在长期存放过程中不溶性微粒会增多，不符合规定，造成溶液浑浊，澄清度不好，而在《中国药典》2010版中对注射剂的不溶性微粒提出了更高的要求，因为静脉输液中的不溶性微粒可对人体造成危害，如较大的不溶性微粒可造成局部循环障碍，引起血管栓塞；微粒过多则可造成局部堵塞和供血不足，并进一步导致组织缺氧，产生水肿和静脉炎，还可引起肉芽肿、过敏反应、热源样反应等，均可对人体造成危害。

CN201310093504.8提供了一种新的结晶化合物，该化合物具有更好的溶解性，使单磷酸阿糖腺苷水中的溶解度(20℃)由98.5mg/mL提升至115.6mg/mL，溶解度改善程度有限，能否可以解决上述制剂中存在的问题值得怀疑。

CN201310048253.1提供了一种新的单磷酸阿糖腺苷的精制方法，试图解决现有技术通过水作为溶剂温度较高的产生副产物的问题，该专利获得的单磷酸阿糖腺苷晶体未给出溶解性数据。

单磷酸阿糖腺苷的临床用量较大，由于其溶解性的问题在临床使用安全性问题还有待进一步提高，因此研究开发更好的晶体化合物具有一定的市场需求。

发明内容

药物多晶型现象是现在药物研究中普遍存在的问题。药物的多晶型现象会影响其理化性质，进而可能影响到药物的临床疗效。物质在结晶时由于受各种因素的影响，使分子内或分子键合方式发生改变，致使分子或原子在晶格空间排列不同，形成不同的晶体结构。本发明人在对单磷酸阿糖腺苷进行了大量的研究后，通过改变结晶溶剂、结晶条件制得了一种不同于现有技术的晶型结构的单磷酸阿糖腺苷新晶型化合物，并惊喜地发现该新的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的水中溶解度明显优于现有技术的单磷酸阿糖腺苷。

本发明的目的在于提供一种单磷酸阿糖腺苷晶型化合物，该晶型化合物是单磷酸阿糖腺苷的一种新晶型结构，该晶型结构具有改善的溶解度。

同时，本发明的目的还在于提供所述的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的制备方法。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种式(I)所示的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物，其中，

所述的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射谱图如图1所示。

一些实施方式中将本发明所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物可以与其他药学上可接受的辅料一起组成药物组合物。

一些实施方式中本发明所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物可以在制备治疗单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒及巨细胞病毒药物中应用。

一些实施方式中本发明所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的药物组合物可以在制备治疗单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒及巨细胞病毒药物中应用。

一些实施方式中本发明所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物可以在制备治疗疱疹病毒感染所致的口炎、皮炎、脑炎及巨细胞病毒感染药物中应用。

一些实施方式中本发明所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的药物组合物可以在制备治疗疱疹病毒感染所致的口炎、皮炎、脑炎及巨细胞病毒感染药物中应用。

一些实施方式中将本发明所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物可以在制备治疗对阿昔洛韦耐药的病毒感染药物中应用。

一些实施方式中将本发明所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的药物组合物可以在制备治疗对阿昔洛韦耐药的病毒感染药物中应用。

本发明还进一步提供所述的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

取单磷酸阿糖腺苷加入10倍量DMF中，加热至回流至全溶，回流搅拌条件下，缓慢滴加甲醇与乙腈体积比为1:3.6的混合溶液，直至溶液出现浑浊，搅拌条件下置冰盐浴中卒冷，缓慢升至室温，静置过夜，过滤，经干燥即得。

本发明的单磷酸阿糖腺苷晶型组合物的有关物质及含量检测方法为：

(1)有关物质检测方法：

色谱条件与***适用性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L的磷酸二氢钾(加10％氢氧化四丁基铵调节pH至6.5)-甲醇(90：10)为流动相；流速为1.0ml/min，检测波长为259nm。单磷酸阿糖腺苷峰与其他杂质峰的分离度应符合规定，理论塔板数按单磷酸阿糖腺苷峰计，应不得低于1500。

测定法精密称取单磷酸阿糖腺苷样品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含160μg的溶液，作为供试品溶液；再精密量取供试液1mL，置100mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为1％自身对照溶液。量取对照溶液20μL，注入液相色谱仪分析，记录色谱图。调节峰高为满量程的20～25％，再精密量取供试品溶液20μL注入色谱仪，记录色谱图至供试品溶液主成分峰保留时间的2.5倍，供试品溶液如显杂质峰，杂质峰面积总和应不得大于对照品溶液主峰面积的5倍(5.％)。

(2)含量测定的方法

色谱条件与***适用性实验同上述有关物质检测方法

测定法精密称取本品适量(约单磷酸阿糖腺苷20mg)，置50mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL置50mL容量瓶中，加流动相定容，摇匀，作为供试品，精密量取20μL注入色谱仪，记录色谱图；另取单磷酸阿糖腺苷对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1mL中约20μg的溶液，作为对照品溶液；同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。

附图说明

图1：本发明实施例1制得的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的X射线粉末衍射图谱。

具体实施方案

下述是结合具体实施例和实验例，进一步阐述本发明。但这些实施例仅限于说明本发明而不是用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体实验条件的实验方法，通常按照常规条件。

实施例1：单磷酸阿糖腺苷晶型化合物

取单磷酸阿糖腺苷加入10倍量DMF中，加热至回流至全溶，回流搅拌条件下，缓慢滴加甲醇与乙腈体积比为1:3.6的混合溶液，直至溶液出现浑浊，搅拌条件下置冰盐浴中卒冷，缓慢升至室温，静置过夜，过滤，经干燥即得。用HPLC检测纯度为99.8％。

将得到的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图谱，如图1所示。

实施例2：注射用单磷酸阿糖腺苷的药用组合物

单磷酸阿糖腺苷冻干粉针制备工艺

取实施例1单磷酸阿糖腺苷晶型化合物加适量注射用水，然后搅拌下徐徐加入赖氨酸，加入甘露醇，全部溶解，取PH调节剂(磷酸氢二钠-磷酸二氢钠)调节溶液的PH在7.0～7.5范围内，室温搅拌，离心，取上清液，无菌过滤后，滤液分装西林瓶中，然后冷冻干燥。

将单磷酸阿糖腺苷药物溶液配分装成2mL/瓶，冻干制得粉针剂。

对比例1：

按专利CN201310093504.8说明书实施例1方法制备奥扎格雷钠晶体，得白色粉末，为对比例1样品。

对比例2：

按专利CN201310048253.1说明书实施例1方法制备奥扎格雷钠晶体，得白色粉末，为对比例2样品。

对比例3：

市售单磷酸阿糖腺苷。

对比例4：

单磷酸阿糖腺苷冻干粉针制备工艺同实施例2。

试验例1：溶解性试验

参照中国药典2000年版二部凡例部分，称取待测样品适量，精密称定，置于25℃±2一定容量的水中，每隔五分钟置于振荡器上振荡30秒钟；考察30分钟内样品溶解情况，如看不见溶质颗粒时，即视为完全溶解。实验结果见表1：

表1水中溶解度实验

样品	水(25℃±2)
		实施例1	187.3mg/mL
对比例1	124.4mg/mL
		对比例2	106.7mg/mL
对比例3	65.1mg/mL

由上述实验数据看出，本发明的晶型化合物的溶解度大于对比例样品。

试验例2：稳定性试验

稳定性试验目的是考察产品在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律，为药品生产、包装、运输条件提供科学依据。

1、光照实验

操作：取本发明的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物和对比例样品适量平铺于培养皿中(约2mm厚度)，置于4500Lx士500Lx强光照射条件下放置10天，于第5天、10天取样检测。检测方法如上所述。

2、高温实验

取本发明的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物和对比例样品适量平铺于培养皿中(约2mm厚度)，置于60℃的恒温箱中放置10天，于第5、10天取样检测。检测方法同光照实验。

3、高湿实验

取本发明的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物和对比例样品平铺于培养皿中(约2mm厚度)，置于室温25℃士2℃、相对湿度RH90％士5％的条件下放置10天，于第5、10天取样检测。检测方法同光照实验。

表4高湿实验结果

4、加速实验

取本发明的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物和对比例样品，置温度40℃±2℃、相对湿度RH75％±5％条件下，放置6个月，于第1、2、3、6月末取样一次，检测方法同光照实验。

表5加速实验结果

由上述实验数据可知，本发明的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物在光照、高温、高湿及加速实验条件下稳定性较好，有利于制成品的长期贮存。

试验例3：复溶性试验

本实验例考察了本发明实施例2注射用单磷酸阿糖腺苷及对比例4注射用单磷酸阿糖腺苷的复溶性的影响。结果见表6、表7。

表6、复溶性能(溶解速度)结果

表7、复溶性能(固体析出)结果

从上表可以看出，在放置一段时间后，本发明注射用单磷酸阿糖腺苷复溶速度大于对比例注射用单磷酸阿糖腺苷复溶速度。因此，采用本发明的制备方法制备的产品溶解性更加稳定，不易析出固体物质，从而大大提高了患者的用药安全。

应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (9)

1.一种式（Ⅰ）所示的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物，

式（Ⅰ）

其特征在于，所述的单磷酸阿糖腺苷晶型化合物使用Cu-Kα射线测量得到的X-射线粉末衍射图谱如图1所示。

2.一种包含权利要求1所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的药物组合物。

3.一种如权利要求1所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物在制备治疗单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒及巨细胞病毒药物中的应用。

4.一种如权利要求2所述的药物组合物在制备治疗单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒及巨细胞病毒药物中的应用。

5.一种如权利要求1所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物在制备治疗疱疹病毒感染所致的口炎、皮炎、脑炎及巨细胞病毒感染药物中的应用。

6.一种如权利要求2所述的药物组合物在制备治疗疱疹病毒感染所致的口炎、皮炎、脑炎及巨细胞病毒感染药物中的应用。

7.一种如权利要求1所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物在制备治疗对阿昔洛韦耐药的病毒感染药物中的应用。

8.一种如权利要求2所述的药物组合物在制备治疗对阿昔洛韦耐药的病毒感染药物中的应用。

9.一种如权1所述单磷酸阿糖腺苷晶型化合物的制备方法：其特征在于包含如下步骤：取单磷酸阿糖腺苷加入10倍量DMF中，加热至回流至全溶，回流搅拌条件下，缓慢滴加甲醇与乙腈体积比为1:3.6的混合溶液，直至溶液出现浑浊，搅拌条件下置冰盐浴中卒冷，缓慢升至室温，静置过夜，过滤，经干燥即得。