CN105232526A - 含儿茶素的药物在制备抑菌药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了包括式(1)所示儿茶素、或其多晶型体在内的药物，在制备抑菌药物中的用途。实验研究表明，儿茶素的抗菌谱较广，对包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌等在内的多种致病微生物起到确切的抑制效果，同时具有较好选择性，对于正常菌群以及***粘膜无刺激，对于制备抑菌药物具有广泛的应用前景。？

Description

含儿茶素的药物在制备抑菌药物中的用途

技术领域

本发明属于医药领域，特别地，涉及包括儿茶素在内的药物，在制备抑菌药物中的用途。

背景技术

女性生殖器官天然温湿润，易滋生微生物。正常情况下，通过人体的自热构造和化学环境可以起到防护作用，从而免于病变。一方面，外***两侧大***自然合拢遮掩***口，使外源微生物难以进入；在***内，由于骨盆底肌肉的作用，使***前后壁紧贴，***口闭合，可在一定程度上防止外界的污染。另一方面，在***的影响下，***上皮细胞不断新陈代谢、增生变厚，增加了对病原体的抵御力；同时，在***杆菌的作用下，***上皮细胞中富含的糖原可分解为乳酸，以维持***正常的酸性环境，使适应于弱碱环境中繁殖的病原体受到抑制。因此，健康妇女的***内虽有一些细菌存在，但通常不引起炎症。

正常情况下，***内以***杆菌占优势，还有少量厌氧菌、支原体及念珠菌，上述菌群形成一定的生态平衡。但是，当人体免疫力低下、内分泌激素发生变化，或外来因素如组织损伤、***，破坏了***的生态平衡时，这些常住的菌群可能引起***感染，而且来自于外界的病原微生物也可能趁虚而入。此外，伴随年龄增长、分娩等因素，女性***会逐渐松弛，也会增加外源微生物侵入的风险。

当发生此类妇科疾病时，除了依靠自身免疫***之外，通常应当配合药物治疗，例如可以内服抗生素，外用抑菌药物等。由于此类感染不同于体内器官感染，其发病位置处于体表，因此外用药物疗效更加直接。现有技术的***抑菌药物，可以分为两大类别，其中一类是以抗生素为有效成分的抑菌药物，此类药物起效较快，但易发生耐受性，且对微生物的抑制不具有选择性，因此在停药后需要较长时间重新构建***菌群，在此过程中易发生再次感染；另一类抑菌药物以中药组合物为有效成分，其优势在于对皮肤刺激较小、不存在微生物耐受现象，但缺陷在于部分药物疗效不确切且起效较慢。

儿茶素又称儿茶精，茶单宁。为黄烷醇的衍生物，分子式C15H14O6，呈无色结晶形固体，能溶于水；其水溶液受热或在无机酸存在下，容易聚合成无定形鞣质。现有技术中，有研究表明儿茶素具有抗氧化、调节脂质代谢等作用，因此已被用于作为减肥药物和抗衰老药物，此外还有报道称儿茶素具有降血压、降血糖等功效。现有技术中并未有见有儿茶素单体化合物具有抑菌作用的报道，更未见将其制备成***抑菌药物的报道。

发明内容

本发明旨在针对现有技术中，抗菌药物选择性较差、治疗范围较窄、治疗药物存在副作用等的技术缺陷，提供有效的、无明显不良反应抗菌药物的技术方案，具体为：

本发明提供了一种抑菌的药物，包括儿茶素，如式(I)所示:

进一步的，所述抑菌药物为抑制体内病原菌的药物；

进一步的，所述抑菌药物为抑制***内病原菌的药物；

进一步的，所述抑菌药物为降低***内病原菌数量的药物；

进一步的，本发明所述的抗菌作用包括对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌等在内的多种病原微生物的作用。

另一方面，针对儿茶素结构不稳定，易发生性质改变、影响药效的技术缺陷，本发明还提供了一种儿茶素微晶体，能够提供稳定的抑菌的药物。该微晶体儿茶素使用Cu-Kα辐射，以2θ角度表示的X射线粉末衍射光谱特征如表1所示：

表1儿茶素X射线粉末衍射光谱特征

2θ值	d值	FWHM	I/I0％
				15.120	5.8584	0.118	58
23.740	3.7448	0.212	100

一方面，儿茶素在其药物组合物中的含量为0.1-95重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-75重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-50重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-25重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-15重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-10重量％。

本发明通过将儿茶素与一种或多种药学上可接受的赋形剂和/或载体结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。儿茶素或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射等。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、气(粉)雾剂、喷雾剂等。

儿茶素可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药***。

优选的，在以上技术方案中，所述的药物是外用药；所述药物包括但不限于粘膜给药剂型；进一步优选的，所述剂型为***粘膜给药剂型，***粘膜给药在全身治疗方面具有很多优势,比如可以避免首过效应,降低蛋白酶对药物的水解,促渗剂选自非离子型表面活性剂,包括胆酸盐,甘油酯、有机酸、聚多卡醇、卵磷脂、氯化棕榈酰肉毒碱等；更优选的，所述剂型包括散剂、霜剂、软膏剂、凝胶剂、乳剂、洗剂、栓剂、泡腾片或搽剂等。根据其剂型，本发明的药物组合物可应用各种药学领域常规辅料，包括赋形剂、透皮剂和止痒剂中的一种或多种。所述的赋形剂为本领域常规辅料，较佳的为液状石蜡、单硬脂酸甘油醋、硬脂酸、聚乙烯醇、卡波姆和羧甲基纤维素中的一种或多种。所述的透皮剂为本领域常规辅料，用以促进皮肤吸收，较佳的为十二烷基硫酸钠和/或氮酮。所述的止痒剂为本领域常规辅料，较佳的为薄荷油和/或冰片。除上述辅料外，本发明的药物组合物还可含有抗菌作用的药物活性成分，作为复方制剂使用。

具体药理实验测试结果如下：

(一)儿茶素的抑菌作用

1)儿茶素对白色念珠菌的体外抑菌效果实验：采用琼脂培养法进行抑菌实验，体外实验结果表明，随着时间推移，儿茶素对白色念珠菌具有显著地抑制作用，儿茶素水溶液作用5min，对白色念珠菌的平均抑菌率为91.24％，20min以后对白色念珠菌的抑制率高达99％以上，受试样品对白色念珠菌有较强抑菌作用。

2)儿茶素对大肠杆菌的体外抑菌效果实验：采用琼脂培养法进行抑菌实验，体外实验结果表明，随着时间推移，儿茶素对大肠杆菌具有显著地抑制作用，儿茶素水溶液作用10min，对大肠杆菌的平均抑菌率为91.24％，受试样品对大肠杆菌有较强抑菌作用。

3)儿茶素对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果实验：采用琼脂培养法进行抑菌实验，体外实验结果表明，随着时间推移，儿茶素对金黄色葡萄球菌具有显著地抑制作用，儿茶素水溶液作用2min，对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率即达到98％以上，受试样品对金黄色葡萄球菌有较强抑菌作用。

4)儿茶素对绿脓杆菌的体外抑菌效果实验：采用琼脂培养法进行抑菌实验，体外实验结果表明，随着时间推移，儿茶素对绿脓杆菌具有显著地抑制作用，儿茶素水溶液作用10min，对绿脓杆菌的平均抑菌率即达到90％以上，受试样品对绿脓杆菌有较强抑菌作用。

5)儿茶素对溶血性链球菌的体外抑菌效果实验：采用琼脂培养法进行抑菌实验，体外实验结果表明，随着时间推移，儿茶素对溶血性链球菌具有显著地抑制作用，儿茶素水溶液作用5min，对溶血性链球菌的平均抑菌率即达到90％以上，受试样品对溶血性链球菌有较强抑菌作用。

(二)儿茶素对于体内正常菌群的影响

采用琼脂培养法进行抑菌实验，体外实验结果表明，随着时间推移，发现儿茶素水溶液作用20min以上，对乳酸杆菌的平均抑菌率仅为3.27％，受试样品对乳酸杆菌不具有的抑菌作用。

(三)儿茶素的抗性实验

采用细菌菌落总数与初始污染菌检测方法进行实验，体外实验结果表明，儿茶素水溶液的细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌、真菌菌落总数符合规定。

(四)儿茶素对于***粘膜的作用实验

采用***黏膜刺激试验，对受试动物进行粘膜刺激实验，与空白组对照表明，染毒组各小组均未见充血、水肿，结果显示儿茶素对***粘膜无刺激性作用。

综上所述，本发明具有以下有益效果：儿茶素具有较广泛的抗菌谱，能够对包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌等在内的多种致病微生物起到确切的抑制效果；且儿茶素对微生物的抑制作用体现出了一定的选择性，不破坏人体内正常菌群，降低重复感染的概率；另一方面，本发明还验证了儿茶素对***粘膜无刺激作用，进一步证明了儿茶素尤其适于作用***的抑菌药物。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面结合具体实施方式，对本发明进一步详细说明。应该理解，这些描述只是示例性的，而并非要限制本发明的范围。此外，在以下说明中，省略了对公知结构和技术的描述，以避免不必要地混淆本发明的概念。

除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。

实施例1：儿茶素对白色念珠菌抑菌效果实验

—、器材

试验菌株：对白色念珠菌(ATCC10231)，中国普通微生物菌种保藏中心提供，第4代。

试验样品：儿茶素水溶液(浓度5g/L)

磷酸盐缓冲液(PBS0.03moL/L，pH7.2)

培养基：沙氏琼脂培养基。

二、方法

检验依据：GB15979-2002。

检测条件：试验环境温度20℃，重复次数3次。

三、实验结果

抑菌效果如下表所示：

表1儿茶素对白色念珠菌抑菌效果实验结果

注：阳性对照组菌数为5.35×104cfu/mL(4.8×104～5.8×104cfu/mL)。

四、结论

依据GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》，儿茶素水溶液作用5min，对白色念珠菌的平均抑菌率为91.24％，受试样品对白色念珠菌有较强抑菌作用。

实施例2：儿茶素对大肠杆菌抑菌效果实验

(—)器材

试验菌株：大肠杆菌(8099)，预防医学科学院消毒检测中心提供，第4代

试验样品：儿茶素水溶液(浓度3g/L)

磷酸盐缓冲液(PBS0.03moL/L，pH7.2)

培养基：营养琼脂培养基。

(二)方法

检验依据：GB15979-2002

检测条件：试验环境温度20℃，重复次数3次

(三)实验结果

抑菌效果如下表所示：

表2儿茶素对大肠杆菌抑菌效果实验结果

注：阳性对照组菌数为4.11×104cfu/mL(3.76×104～4.38×104cfu/mL)。

四、结论

依据GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》，儿茶素水溶液作用10min，对大肠杆菌的平均抑菌率为90.27％，受试样品对大肠杆菌具有较强抑菌作用。

实施例3：儿茶素对大肠杆菌抑菌效果实验

一、器材

试验菌株：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)，中国普通微生物菌种保藏中心提供，第4代。

试验样品：儿茶素水溶液(浓度8g/L)

磷酸盐缓冲液(PBS0.03moL/L，pH7.2)

培养基：营养琼脂培养基。

二、方法

检验依据：GB15979-2002

检测条件：试验环境温度20℃，重复次数3次

三、实验结果

抑菌效果如下表所示：

表3儿茶素对金黄色葡萄球菌抑菌效果实验结果

注：阳性对照组菌数为3.67×104cfu/mL(3.24×104～4.08×104cfu/mL)。

四、结论

依据GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》，儿茶素水溶液作用2min，对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率为98.66％，受试样品对金黄色葡萄球菌具有较强抑菌作用。

实施例4：儿茶素对乳酸杆菌抑菌效果实验

一、器材

试验菌株：詹式乳酸杆菌(ATCC25258)，美国菌种保藏中心提供，第4代。

试验样品：儿茶素水溶液(浓度10g/L)

磷酸盐缓冲液(PBS0.03moL/L，pH7.2)

培养基：MRS培养基。

二、方法

检验依据：GB4789.35-2010

检测条件：试验环境温度20℃，重复次数3次

三、实验结果

抑菌效果如下表所示：

表4儿茶素对乳酸杆菌抑菌效果实验结果

注：阳性对照组菌数为4.25×104cfu/mL(3.88×104～4.51×104cfu/mL)。

四、结论

依据GB4789.35-2010《乳酸菌检验标准》所规定的检验方法执行检验，发现儿茶素水溶液作用20min，对乳酸杆菌的平均抑菌率仅为3.27％，受试样品对乳酸杆菌不具有确切的抑菌作用。

实施例5：儿茶素水溶液抗微生物污染性能检测

一、器材

实验样品：儿茶素水溶液(浓度5g/L)

二、方法

检验依据：GB15979-2002

检测条件：环境温度20℃，相对湿度40-50％。

三、实验结果

抑菌效果如下表所示：

表5微生物污染检测结果

四、结论

儿茶素水溶液的细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌、真菌菌落总数符合GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》的规定。

实施例6：儿茶素水溶液***粘膜刺激性实验

一、试验目的

检测受试物对实验动物***黏膜的刺激作用和强度。

二、实验条件

1、实验动物：普通级雌性大耳白兔6只，体重2.5～3.0kg，由北京沙河通利试验动物养殖厂提供，合格证号SCXK(京)2010-00040238286，于动物房外检室适应3天，健康状况良好。

2、实验动物饲养环境：普通级动物实验室，合格证号：津实动设施准第004号。温度20～25℃，相对湿度40～70％。饲料由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，饲料生产许可证号SCXK(京)2009-0008。

三、受试物

儿茶素水溶液(浓度为10g/L)，称取样品10g，加水至1L，进行试验。

四、试验方法

1、检验依据：《消毒技术规范》(2002年版)中2.3.5***黏膜刺激试验。

2、实验分组：将实验动物分为染毒组、空白对照组，每组三只。

3、操作程序：试验前检査实验动物***口未见分泌物、充血、水肿和其他损伤。将长度为8cm左右的钝头软管与2ml的注射器相连。注射器和软管注满受试液备用。动物仰面固定，暴露出***和***口、将软管用受试液湿润后轻柔地******(4～5cm)，并用注射器缓慢注入2ml受试样品，抽出导管，完成染毒。对照组动物用生理盐水作同样处理。染毒后24小时，采用气栓法处死动物，剖腹取出完整的***，纵向剖开，肉眼观察是否充血、水肿等。然后将***放入4％甲醛溶液中固定24h以上，选取***的两端和中央3个部位的组织制片，HE染色，进行病理组织学检查(见表6)。

五、实验结果

肉眼观察各实验动物***黏膜均未见充血、水肿，病理组织学检查刺激指数为0.55。

抑菌效果如下表所示：

表6儿茶素对***黏膜刺激反应评分实验结果

六、结论

儿茶素对***粘膜无刺激性作用。

实施例7：儿茶素洗剂的制备

处方：儿茶素微晶体10g、氯化钠8.5g、泊洛沙姆1881g、蒸馏水加至1000ml；

制备方法：取儿茶素微晶体45g、泊洛沙姆1882g，将二者溶于蒸馏水中，使全部溶解，加氯化钠再溶解，加蒸馏水至1000ml，滤过，灌装即得。

实施例8：儿茶素霜剂的制备

处方：①儿茶素20g，②十六醇76.5g，③凡士林180g，液体石蜡40g，⑤十二烷基硫酸钠8.5g，⑥丙二醇45g，⑦尼泊金乙醋1g,⑧新沸无菌双蒸水若干。

制备方法：先将②③④于水浴上熔融得溶液A，将⑤⑥⑦加双蒸水加热溶解得溶液B，将①以适量双蒸水溶解后注入溶液B得溶液C，将溶液A逐渐加入溶液C中搅拌至乳化，冷却即可。

以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明。凡在本发明的申请范围内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (18)

1.一种抑菌药物，其特征在于，包括儿茶素，所述儿茶素如式(I)所示:

所述儿茶素在其药物组合物中的含量为0.1-95重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-75重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-50重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-25重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-15重量％；更优选的，儿茶素在其药物组合物中含量为0.1-10重量％。

2.根据权利要求1所述的抑菌药物，其特征在于，所述儿茶素是微晶体儿茶素。

3.根据权利要求2所述的抑菌药物，其特征在于，所述微晶体儿茶素是使用Cu-Kα辐射，以2θ角度表示的X-射线粉末衍射光谱在15.12+/-0.01和23.740+/-0.01处有峰。

4.根据权利要求1-3任一项所述的抑菌药物，其特征在于，所述药物为抑制***内病原菌的药物；优选的，为降低***内病原菌数量的药物。

5.根据权利要求1-3任一项所述的抑菌药物，其特征在于，所述抑菌药物包括对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌等在内的多种病原微生物的抑制作用。

6.根据权利要求1-3任一项所述的抑菌药物，其特征在于，所述药物的剂型是临床上可接受的任意剂型。

7.根据权利要求6所述的抑菌药物，其特征在于，所述药物的剂型为外用药；优选的，为经***粘膜给药的剂型；更优选的，包括散剂、霜剂、软膏剂、凝胶剂、乳剂、洗剂、栓剂、泡腾片或搽剂。

8.根据权利要求7所述的抑菌药物，其特征在于，所述药物为洗剂，还包括药学上可接受的载体。

9.根据权利要求7所述的抑菌药物，其特征在于，所述药物为膏剂剂，还包括药学上可接受的载体。

10.儿茶素在制备抑菌药物中的用途。

11.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述儿茶素是微晶体儿茶素。

12.根据权利要求10所述的用途，其特征在于，所述微晶体儿茶素是使用Cu-Kα辐射，以2θ角度表示的X-射线粉末衍射光谱在15.12+/-0.01和23.740+/-0.01处有峰。

13.根据权利要求10-12任一项所述的用途，其特征在于，所述药物为抑制***内病原菌的药物；优选的，为降低***内病原菌数量的药物。

14.根据权利要求10-12任一项所述的用途，其特征在于，所述抑菌药物包括对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌等在内的多种病原微生物具有抑制作用的药物。

15.根据权利要求10-12任一项所述的用途，其特征在于，所述药物的剂型是临床上可接受的任意剂型。

16.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，所述药物的剂型所述药物的剂型为外用药；优选的，为经***粘膜给药的剂型；更优选的，包括散剂、霜剂、软膏剂、凝胶剂、乳剂、洗剂、栓剂、泡腾片或搽剂。

17.根据权利要求16所述的抑菌药物，其特征在于，所述药物为洗剂，还包括药学上可接受的载体。

18.根据权利要求16所述的抑菌药物，其特征在于，所述药物为膏剂，还包括药学上可接受的载体。