CN105194231A - 一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂；本发明还涉及一种上述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法。本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，包括下列质量份数的各组分：洋葱汁液23-34份、蒲公英20-28份、兰花参18-25份、菖蒲18-25份、白头翁17-25份、艾叶16-22份、桑白皮16-22份、小窃草12-19份、普洱熟茶6-13份、溪黄草15-24份、木蝴蝶9-14份、紫花地丁6-13份、锦灯笼8-13份、薄荷油6-11份、干燥的蚯蚓粉18-29份、鱼油6-12份等。本发明的饲料添加剂对锦鲤细菌性烂鳃病有良好的预防效果。

Description

一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂及其制备方法

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，尤其涉及一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂；本发明还涉及一种上述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法。

背景技术

锦鲤(Cryprinuscarpiod)在生物学上属于鲤科(Cyprinidae)，锦鲤是一种彩色鲤鱼，因其鱼体表面色彩鲜艳、花色似锦，故得其名，锦鲤是红色鲤鱼的变种，我国饲养红鲤作为观赏鱼在明代已非常普及，红鲤传入日本后，日本人在饲养过程中发现这种鲤鱼会发生色变，根据红鲤容易变异的特点，经过选种，人工改良为绯鲤，培育出许多新品种，初称“色鲤”、“花鲤”，后改称“锦鲤”，锦鲤游姿高雅，体型优美，色彩艳丽，斑纹灿烂，被称为“水中活宝石”，是备受青睐的风水鱼和观赏宠物。

细菌性烂鳃病是最常见的一种疾病，不论饲养条件或鱼的大小都有发生的可能。其症状是：鳃丝呈粉红或苍白，继而组织破坏黏液增多，带有污泥，严重时鳃盖骨的内表皮充血，中间部分的表皮亦腐蚀成一个略呈圆形的透明区，俗称“开天窗”，软骨外露；由于鳃丝组织被破坏造成病鱼呼吸困难，常游近水表呈浮头状，病情严重的病鱼在换清水后仍有浮头现象。细菌性烂鳃病通常流行于高温季节，可引起锦鲤的大批死亡。细菌性烂鳃病由柱状嗜纤维菌引起，带菌鱼以及带菌的水是该病的传染源，在该病流行季节，病鱼在水中不断散布病原菌，鱼体与病原菌接触，尤其是鳃部受损后特别容易引起感染。在饲养密度过大、水质较差的环境中容易发生该病。细菌性烂鳃病一般是在水温20℃左右开始，春末到秋季是流行盛期。当水温下降到15℃时病鱼逐渐减少。在发病期间，饲养水温越高致死时间越短。然而，目前治疗锦鲤锦鲤细菌性烂鳃病常用手段是降温或用呋喃唑酮、红霉素等常规化学药物或抗生素药物杀菌。用降温的方式治疗的缺点是不能解决根本问题，而且降温幅度过快容易导致锦鲤其它疾病的发生甚至爆发，此外，夏季水温很难保持在15℃或以下。用呋喃唑酮、红霉素等常规化学药物或抗生素药物杀菌的缺点是针对性差、毒性太大，不能使锦鲤迅速恢复健康，容易造成水质污染和环境破坏。因此，开发一种能有效预防锦鲤细菌性烂鳃病的饲料或饲料添加剂有着重要的经济意义和市场前景。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，其原料组分均为绿色纯天然原料，对锦鲤细菌性烂鳃病的病原菌有很好的抑菌杀菌效果，能有效降低锦鲤细菌性烂鳃病的发病率，提高锦鲤的免疫力和成活率。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案，一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液23-34份、蒲公英20-28份、兰花参18-25份、菖蒲18-25份、白头翁17-25份、艾叶16-22份、桑白皮16-22份、小窃草12-19份、普洱熟茶6-13份、溪黄草15-24份、荠菜15-21份、大青叶13-20份、马齿苋11-18份、五倍子12-18份、马兰11-16份、小蓟8-18份、酢浆草9-17份、穿心莲8-15份、黄芩7-15份、木蝴蝶9-14份、紫花地丁6-13份、锦灯笼8-13份、薄荷油6-11份、干燥的蚯蚓粉18-29份、鱼油6-12份。

优选地，所述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液27-31份、蒲公英22-26份、兰花参21-23份、菖蒲21-23份、白头翁19-22份、艾叶19-20份、桑白皮18-20份、小窃草14-16份、普洱熟茶9-11份、溪黄草18-21份、荠菜18-20份、大青叶15-17份、马齿苋14-16份、五倍子14-16份、马兰13-14份、小蓟12-15份、酢浆草12-14份、穿心莲11-13份、黄芩10-12份、木蝴蝶11-12份、紫花地丁8-10份、锦灯笼9-11份、薄荷油8-9份，干燥的蚯蚓粉24-25份、鱼油8-9份。

优选地，所述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液29份、蒲公英24份、兰花参22份、菖蒲22份、白头翁20份、艾叶20份、桑白皮19份、小窃草15份、普洱熟茶10份、溪黄草19份、荠菜19份、大青叶16份、马齿苋15份、五倍子15份、马兰14份、小蓟13份、酢浆草13份、穿心莲12份、黄芩11份、木蝴蝶12份、紫花地丁9份、锦灯笼10份、薄荷油9份，干燥的蚯蚓粉24份、鱼油8份。

本发明的另一目的是提供一种上述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法，该预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：

(1)将洋葱研磨或捣碎或放入榨汁机中榨汁得洋葱汁液，并按上述配比称取所得的洋葱汁液；

(2)按配比称取蒲公英、兰花参、菖蒲、白头翁、艾叶、桑白皮、小窃草和普洱熟茶，将蒲公英、兰花参、菖蒲、白头翁、艾叶、桑白皮、小窃草和普洱熟茶的总重量记作1份，称取20份的纯化水，70-80℃下水浴浸泡2-3h，得浸泡液；

(3)将步骤(2)得到的浸泡液加热至沸腾后煮沸2h，分离取出煎出液，继续向药材内加入6份的纯化水，加热至沸腾后继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；

(4)按上述配比分别称取干燥的溪黄草、荠菜、大青叶、马齿苋、五倍子、马兰、小蓟、酢浆草、穿心莲、黄芩、木蝴蝶、紫花地丁和锦灯笼，装入球磨机研磨2h，过80目筛，得研磨粉；

(5)步骤(3)得到的提取液及步骤(4)得到的研磨粉放置于超临界萃取仪中的萃取釜中，利用二氧化碳作为介质进行萃取，萃取釜压力为40Mpa，萃取温度为45℃，分离器压力12Mpa，分离器温度为70℃，萃取2小时，得到萃取液；

(6)按照配比称取干燥的蚯蚓粉；

(7)按照配比称取薄荷油和鱼油，与步骤(1)称量好的洋葱汁液、步骤(5)所得的萃取液、步骤(6)称量好的干燥的蚯蚓粉混合均匀，即得目标物。

所述干燥的蚯蚓粉的制备方法为：将蚯蚓用淡水洗净，再用蒸馏水冲洗三遍，彻底干燥后研磨成粉状，过80目筛。进一步地，将蚯蚓彻底干燥的方法为：将蚯蚓烘干或真空冷冻干燥，优选为真空冷冻干燥。

本发明的使用方法为：将本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂与市售基础饲料以1:40-1:10的重量比混合均匀后投喂，优选地，本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂与市售基础饲料的重量比为1：20。

本发明的各组分功效解析如下：

洋葱是一种很普通的廉价家常菜，洋葱中的营养成分十分丰富，不仅富含钾、维生素C、叶酸、锌、硒，及纤维质等营养素，更有两种特殊的营养物质：槲皮素和***素A；洋葱中含有植物杀菌素如大蒜素等，有很强的杀菌能力，能有效抵御流感病毒、预防感冒，洋葱的杀菌素经由呼吸道、泌尿道、汗腺排出时，能刺激这些位置的细胞管道壁分泌，所以又有祛痰、利尿、发汗以及抑菌防腐等作用。蒲公英能杀菌消炎、清热解毒，利尿散结。治急性乳腺炎，淋巴腺炎，瘰疬，疔毒疮肿，急性结膜炎，感冒发热，急性扁桃体炎，急性支气管炎，胃炎，肝炎，胆囊炎，***。兰花参补脾胃，益肺肾，祛痰，杀虫，止血，解表清热，治风热喘嗽，咳血，衄血，小儿惊风，跌打损伤。菖蒲可祛疫益智、祛湿解毒、强身健体，燃菖蒲、艾叶，驱蚊灭虫，将菖蒲根茎500克捣烂后，加水1-1.5千克熬煮两小时，经过滤所得的原液，兑水3-6千克，可有效防治稻飞虱、稻叶蝉、稻螟蛉、蚜虫、红蜘蛛等虫害。白头翁可以治疗痔疮等出血症状。治热毒血痢，温疟寒热，鼻衄，血痔，兰继毓等研究发现白头翁煎剂对杀灭溶组织内阿米巴的效果较好；曹景花等用K-B纸片扩散法测得白头翁水提液对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、炭疽杆菌、伤寒杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌具有明显的抑制作用。艾叶可辟邪驱毒、驱虫止痒。小窃草有活血消肿，收敛杀虫的作用。桑白皮的石油醚、***、乙酸乙酯等脂溶性溶媒的提取物给小鼠静注，能减少小鼠的自发活动，并有抗惊厥的作用；桑白皮水或正丁醇提取物50mg/kg以上腹腔注射小鼠，可使动物自发活动减少，触觉及痛觉反应降低，瞳孔散大，并能轻度抑制小鼠电休克的发生；桑白皮水提取物给大鼠口服或注射对角叉菜胶及葡聚糖所引起的脚肿胀有抑制作用；桑白皮煎剂对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用；对伤寒杆菌及福氏痢疾杆菌也有轻度的抑制作用；桑皮呋喃A对金黄色葡萄球菌、分歧杆菌均有较强的抑菌活性；环桑皮素也有抗真菌作用。小窃草有活血消肿，收敛杀虫的作用。普洱熟茶内含丰富的茶多酚，普洱熟茶具有抗癌、抑菌消炎、减轻烟毒、减轻重金属毒等功效，可以治疗细菌性痢疾。溪黄草具有清热利湿、退黄祛湿、凉血散瘀的功效，可以用于治疗急性黄疸型肝炎、急性胆囊炎，痢疾，肠炎，癃闭，跌打瘀痛等病症。荠菜具有和脾、利水、止血、明目的功效，常用于治疗产后出血、痢疾、水肿、肠炎、胃溃疡、感冒发热、目赤肿疼等症。大青叶可杀菌消炎，主治热毒发斑、丹毒、咽喉肿痛、口舌生疮、疮痈肿毒等症，又可用于痰热郁肺、咯痰黄稠；尤常用于流行性乙性脑炎。马齿苋有清热利湿、解毒消肿、消炎、止渴、利尿作用。五倍子性寒，味酸、涩，具有敛肺降火、涩肠止泻、敛汗止血、收湿敛疮等功效，主治肺虚久咳、久泻久痢、便血痔血、痈肿疮毒、皮肤湿烂等症。马兰为菊科植物马兰的干燥全草或根，夏、秋季采收，鲜用或晒干；其味辛，性凉，具有凉血止血，清热利湿，解毒消肿之功效，可用于吐血，衄血，血痢，崩漏，创伤出血，黄疸，水肿，淋浊，感冒，咳嗽，咽痛喉痹，痔疮，痈肿，丹毒，小儿疳积。小蓟叶甘，性凉。能凉血止血，解毒消痈，清热除烦，小蓟全株含胆碱、儿茶酚胺类物质、皂甙、生物碱等成分，全草含挥发油、菊糖、生物碱、黄酮类、香豆精衍生物等成分，对肺炎双球菌、溶血性链球菌、白喉杆菌、伤寒村菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌等均有抑制作用。酢浆草全草入药，能杀菌消炎、解热利尿，消肿散淤、跌打损伤。穿心莲又名春莲秋柳，一见喜，榄核莲、苦胆草、金香草、金耳钩、印度草，苦草等。一年生草本植物，长4-8厘米，宽1-2.5厘米。药用植物，有清热解毒、消炎、消肿止痛作用，穿心莲内酯有明显抑制静脉血中碳末廓清率的作用。穿心莲制剂一新得平(内含酯和酮)可提高小鼠血清溶菌酶水平。黄芩的根入药，味苦、性寒，有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效，主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症，黄芩的临床抗菌性比黄连好，而且不产生抗药性。木蝴蝶的种子、茎皮含黄芩甙元，有抗炎、抗***反应、利尿、利胆，降胆固醇的作用，种子和茎皮中含白杨素，对人体鼻咽癌(KB)细胞有细胞毒活性。紫花地丁味苦、辛、寒，归心、肺经，具有清热解毒，凉血消肿，清热利湿的作用，主治疔疮，痈肿，瘰疬，黄疸，痢疾，腹泻，目赤，喉痹，毒蛇咬伤。锦灯笼性寒，味苦，主治肺热喉痛，肺病，腮腺炎，热疝，血淋；外治皮肤疮肿，天疱疮，牙龈肿痛，有清热解毒，利咽，化痰，利尿之功效；苗、叶、茎、根均可入药，味苦、寒、无毒；苗、叶、茎含酸浆苦味素A0.02％、B0.002％、C(脱氧酸浆苦味素A)；味酸、苦，性寒，有清热解毒、利尿功能。可治咳嗽、黄疸、疟疾、水肿、疔疮、丹毒等；根味苦、性寒，有清热、利水功能，可治疟疾、黄疸、疝气。薄荷油质轻宣散，有疏散风热，宣毒透疹之功：可用于治风热束表，麻疹不透；也可治疗风疹瘙痒，取其祛风透疹止痒之效。蚯蚓体内含有地龙素、地龙解毒素、黄嘌呤、抗组织胺和维生素B等多种药用成分，而且对锦鲤具有诱食作用。鱼油可以为锦鲤提供能量，且具有诱食作用。

制备方法中，原料药经纯化水浸泡一段时间，药材***，细胞膨胀，有效成分容易被煎出，并且药材含有淀粉、蛋白质，经浸泡后，防止在煎煮时，药材表面的淀粉糊化，蛋白质凝固，堵塞药材表面的毛细孔道，使在煎煮时水分进不去，有效成分不易被煎出，影响药物疗效；煎煮可以改变药物的刺激性作用，较温和的作用于锦鲤，促进锦鲤对药物的吸收；研磨使药材中的淀粉、蛋白质在后续步骤更充分的析出；超临界萃取、浸泡、浓缩步骤最大限度的保留本发明中药中的有效成分。

本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，是根据锦鲤细菌性烂鳃病的作用机理，选择的合适的中草药，并将其有机结合，具有显著的协同增效效果，最大限度地发挥各组分的功能。本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的组分均为绿色环保原料，对环境无害，对细菌性烂鳃病的病原菌柱状嗜纤维菌具有显著的杀菌抑菌效果。由于本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂中含有的蚯蚓粉和鱼油具有诱食作用，可在一定程度上改善饲料口感，刺激锦鲤的味蕾，锦鲤喜欢摄食饲料，因此本发明的添加剂中的能增强锦鲤免疫力和抵抗力、对细菌性烂鳃病的病原菌柱状嗜纤维菌具有显著杀菌抑菌效果的成分能进入锦鲤体内，并发挥其相应的作用。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)洋葱是一种很普通的廉价家常菜，洋葱中的营养成分十分丰富，不仅富含钾、维生素C、叶酸、锌、硒，及纤维质等营养素，更有两种特殊的营养物质：槲皮素和***素A；洋葱中含有植物杀菌素如大蒜素等，有很强的杀菌能力，能有效抵御流感病毒、预防感冒，洋葱的杀菌素经由呼吸道、泌尿道、汗腺排出时，能刺激这些位置的细胞管道壁分泌，所以又有祛痰、利尿、发汗以及抑菌防腐等作用。蒲公英能杀菌消炎、清热解毒，利尿散结。治急性乳腺炎，淋巴腺炎，瘰疬，疔毒疮肿，急性结膜炎，感冒发热，急性扁桃体炎，急性支气管炎，胃炎，肝炎，胆囊炎，***。兰花参补脾胃，益肺肾，祛痰，杀虫，止血，解表清热，治风热喘嗽，咳血，衄血，小儿惊风，跌打损伤。菖蒲可祛疫益智、祛湿解毒、强身健体，燃菖蒲、艾叶，驱蚊灭虫，将菖蒲根茎500克捣烂后，加水1-1.5千克熬煮两小时，经过滤所得的原液，兑水3-6千克，可有效防治稻飞虱、稻叶蝉、稻螟蛉、蚜虫、红蜘蛛等虫害。白头翁可以治疗痔疮等出血症状。治热毒血痢，温疟寒热，鼻衄，血痔，兰继毓等研究发现白头翁煎剂对杀灭溶组织内阿米巴的效果较好；曹景花等用K-B纸片扩散法测得白头翁水提液对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、炭疽杆菌、伤寒杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌具有明显的抑制作用。艾叶可辟邪驱毒、驱虫止痒。小窃草有活血消肿，收敛杀虫的作用。桑白皮的石油醚、***、乙酸乙酯等脂溶性溶媒的提取物给小鼠静注，能减少小鼠的自发活动，并有抗惊厥的作用；桑白皮水或正丁醇提取物50mg/kg以上腹腔注射小鼠，可使动物自发活动减少，触觉及痛觉反应降低，瞳孔散大，并能轻度抑制小鼠电休克的发生；桑白皮水提取物给大鼠口服或注射对角叉菜胶及葡聚糖所引起的脚肿胀有抑制作用；桑白皮煎剂对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用；对伤寒杆菌及福氏痢疾杆菌也有轻度的抑制作用；桑皮呋喃A对金黄色葡萄球菌、分歧杆菌均有较强的抑菌活性；环桑皮素也有抗真菌作用。小窃草有活血消肿，收敛杀虫的作用。普洱熟茶内含丰富的茶多酚，普洱熟茶具有抗癌、抑菌消炎、减轻烟毒、减轻重金属毒等功效，可以治疗细菌性痢疾。溪黄草具有清热利湿、退黄祛湿、凉血散瘀的功效，可以用于治疗急性黄疸型肝炎、急性胆囊炎，痢疾，肠炎，癃闭，跌打瘀痛等病症。荠菜具有和脾、利水、止血、明目的功效，常用于治疗产后出血、痢疾、水肿、肠炎、胃溃疡、感冒发热、目赤肿疼等症。大青叶可杀菌消炎，主治热毒发斑、丹毒、咽喉肿痛、口舌生疮、疮痈肿毒等症，又可用于痰热郁肺、咯痰黄稠；尤常用于流行性乙性脑炎。马齿苋有清热利湿、解毒消肿、消炎、止渴、利尿作用。五倍子性寒，味酸、涩，具有敛肺降火、涩肠止泻、敛汗止血、收湿敛疮等功效，主治肺虚久咳、久泻久痢、便血痔血、痈肿疮毒、皮肤湿烂等症。马兰为菊科植物马兰的干燥全草或根，夏、秋季采收，鲜用或晒干；其味辛，性凉，具有凉血止血，清热利湿，解毒消肿之功效，可用于吐血，衄血，血痢，崩漏，创伤出血，黄疸，水肿，淋浊，感冒，咳嗽，咽痛喉痹，痔疮，痈肿，丹毒，小儿疳积。小蓟叶甘，性凉。能凉血止血，解毒消痈，清热除烦，小蓟全株含胆碱、儿茶酚胺类物质、皂甙、生物碱等成分，全草含挥发油、菊糖、生物碱、黄酮类、香豆精衍生物等成分，对肺炎双球菌、溶血性链球菌、白喉杆菌、伤寒村菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌等均有抑制作用。酢浆草全草入药，能杀菌消炎、解热利尿，消肿散淤、跌打损伤。穿心莲又名春莲秋柳，一见喜，榄核莲、苦胆草、金香草、金耳钩、印度草，苦草等。一年生草本植物，长4-8厘米，宽1-2.5厘米。药用植物，有清热解毒、消炎、消肿止痛作用，穿心莲内酯有明显抑制静脉血中碳末廓清率的作用。穿心莲制剂一新得平(内含酯和酮)可提高小鼠血清溶菌酶水平。黄芩的根入药，味苦、性寒，有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效，主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症，黄芩的临床抗菌性比黄连好，而且不产生抗药性。木蝴蝶的种子、茎皮含黄芩甙元，有抗炎、抗***反应、利尿、利胆，降胆固醇的作用，种子和茎皮中含白杨素，对人体鼻咽癌(KB)细胞有细胞毒活性。紫花地丁味苦、辛、寒，归心、肺经，具有清热解毒，凉血消肿，清热利湿的作用，主治疔疮，痈肿，瘰疬，黄疸，痢疾，腹泻，目赤，喉痹，毒蛇咬伤。锦灯笼性寒，味苦，主治肺热喉痛，肺病，腮腺炎，热疝，血淋；外治皮肤疮肿，天疱疮，牙龈肿痛，有清热解毒，利咽，化痰，利尿之功效；苗、叶、茎、根均可入药，味苦、寒、无毒；苗、叶、茎含酸浆苦味素A0.02％、B0.002％、C(脱氧酸浆苦味素A)；味酸、苦，性寒，有清热解毒、利尿功能。可治咳嗽、黄疸、疟疾、水肿、疔疮、丹毒等；根味苦、性寒，有清热、利水功能，可治疟疾、黄疸、疝气。薄荷油质轻宣散，有疏散风热，宣毒透疹之功：可用于治风热束表，麻疹不透；也可治疗风疹瘙痒，取其祛风透疹止痒之效。蚯蚓体内含有地龙素、地龙解毒素、黄嘌呤、抗组织胺和维生素B等多种药用成分，而且对锦鲤具有诱食作用。鱼油可以为锦鲤提供能量，且具有诱食作用。

(2)本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，是根据锦鲤细菌性烂鳃病的作用机理，选择的合适的中草药，并将其有机结合，具有显著的协同增效效果，最大限度地发挥各组分的功能。本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的组分均为绿色环保原料，对环境无害，对细菌性烂鳃病的病原菌柱状嗜纤维菌具有显著的杀菌抑菌效果。由于本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂中含有的蚯蚓粉和鱼油具有诱食作用，可在一定程度上改善饲料口感，刺激锦鲤的味蕾，锦鲤喜欢摄食饲料，因此本发明的添加剂中的能增强锦鲤免疫力和抵抗力、对细菌性烂鳃病的病原菌柱状嗜纤维菌具有显著杀菌抑菌效果的成分能进入锦鲤体内并发挥其相应的作用。

(3)制备方法中，原料药经纯化水浸泡一段时间，药材***，细胞膨胀，有效成分容易被煎出，并且药材含有淀粉、蛋白质，经浸泡后，防止在煎煮时，药材表面的淀粉糊化，蛋白质凝固，堵塞药材表面的毛细孔道，使在煎煮时水分进不去，有效成分不易被煎出，影响药物疗效；煎煮可以改变药物的刺激性作用，较温和的作用于锦鲤，促进锦鲤对药物的吸收；研磨使药材中的淀粉、蛋白质在后续步骤更充分的析出；超临界萃取、浸泡、浓缩步骤最大限度的保留本发明中药中的有效成分。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

实施例1

本发明第一个具体实施方式中饲料成分及其制备方法如下：

一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液23份、蒲公英20份、兰花参19份、菖蒲18份、白头翁18份、艾叶16份、桑白皮16份、小窃草19份、普洱熟茶13份、溪黄草15份、荠菜21份、大青叶13份、马齿苋16份、五倍子12份、马兰12份、小蓟8份、酢浆草9份、穿心莲10份、黄芩7份、木蝴蝶9份、紫花地丁8份、锦灯笼9份、薄荷油6份，干燥的蚯蚓粉18份、鱼油7份。

上述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：

(3)将洋葱研磨或捣碎或放入榨汁机中榨汁得洋葱汁液，并按上述配比称取所得的洋葱汁液；

(4)按配比称取蒲公英、兰花参、菖蒲、白头翁、艾叶、桑白皮、小窃草和普洱熟茶，将蒲公英、兰花参、菖蒲、白头翁、艾叶、桑白皮、小窃草和普洱熟茶的总重量记作1份，称取20份的纯化水，70-80℃下水浴浸泡2-3h，得浸泡液；

(3)将步骤(2)得到的浸泡液加热至沸腾后煮沸2h，分离取出煎出液，继续向药材内加入6份的纯化水，加热至沸腾后继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；

(4)按上述配比分别称取干燥的溪黄草、荠菜、大青叶、马齿苋、五倍子、马兰、小蓟、酢浆草、穿心莲、黄芩、木蝴蝶、紫花地丁和锦灯笼，装入球磨机研磨2h，过80目筛，得研磨粉；

(5)步骤(3)得到的提取液及步骤(4)得到的研磨粉放置于超临界萃取仪中的萃取釜中，利用二氧化碳作为介质进行萃取，萃取釜压力为40Mpa，萃取温度为45℃，分离器压力12Mpa，分离器温度为70℃，萃取2小时，得到萃取液；

(6)按照配比称取干燥的蚯蚓粉；

(7)按照配比称取薄荷油和鱼油，与步骤(1)称量好的洋葱汁液、步骤(5)所得的萃取液、步骤(6)称量好的干燥的蚯蚓粉混合均匀，即得目标物。

所述干燥的蚯蚓粉的制备方法为：将蚯蚓用淡水洗净，再用蒸馏水冲洗三遍，真空冷冻干燥至彻底干燥后研磨成粉状，过80目筛。

实施例2

本发明第二个具体实施方式中饲料成分及其制备方法如下：

一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液31份、蒲公英28份、兰花参25份、菖蒲23份、白头翁22份、艾叶22份、桑白皮20份、小窃草16份、普洱熟茶11份、溪黄草21份、荠菜20份、大青叶20份、马齿苋18份、五倍子18份、马兰16份、小蓟15份、酢浆草17份、穿心莲15份、黄芩15份、木蝴蝶14份、紫花地丁13份、锦灯笼11份、薄荷油11份，干燥的蚯蚓粉26份、鱼油6份。

本实施例的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法同实施例1。

实施例3

本发明第三个具体实施方式中饲料成分及其制备方法如下：

一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液34份、蒲公英26份、兰花参23份、菖蒲25份、白头翁25份、艾叶20份、桑白皮22份、小窃草14份、普洱熟茶9份、溪黄草18份、荠菜18份、大青叶17份、马齿苋14份、五倍子16份、马兰14份、小蓟18份、酢浆草14份、穿心莲13份、黄芩12份、木蝴蝶12份、紫花地丁10份、锦灯笼13份、薄荷油9份，干燥的蚯蚓粉28份、鱼油8份。

本实施例的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法同实施例1。

实施例4

本发明第四个具体实施方式中饲料成分及其制备方法如下：

一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液27份、蒲公英22份、兰花参21份、菖蒲21份、白头翁17份、艾叶19份、桑白皮18份、小窃草12份、普洱熟茶6份、溪黄草24份、荠菜15份、大青叶15份、马齿苋11份、五倍子14份、马兰13份、小蓟12份、酢浆草12份、穿心莲8份、黄芩10份、木蝴蝶11份、紫花地丁6份、锦灯笼8份、薄荷油8份，干燥的蚯蚓粉29份、鱼油12份。

本实施例的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法同实施例1。

实施例5

本发明第五个具体实施方式中饲料成分及其制备方法如下：

一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液28份、蒲公英22份、兰花参18份、菖蒲21份、白头翁19份、艾叶16份、桑白皮20份、小窃草16份、普洱熟茶11份、溪黄草18份、荠菜15份、大青叶13份、马齿苋11份、五倍子15份、马兰11份、小蓟16份、酢浆草13份、穿心莲11份、黄芩7份、木蝴蝶11份、紫花地丁10份、锦灯笼11份、薄荷油9份，干燥的蚯蚓粉25份、鱼油9份。

本实施例的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法同实施例1。

实施例6

本发明第六个具体实施方式中饲料成分及其制备方法如下：

一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液29份、蒲公英24份、兰花参22份、菖蒲22份、白头翁20份、艾叶20份、桑白皮19份、小窃草15份、普洱熟茶10份、溪黄草19份、荠菜19份、大青叶16份、马齿苋15份、五倍子15份、马兰14份、小蓟13份、酢浆草13份、穿心莲12份、黄芩11份、木蝴蝶12份、紫花地丁9份、锦灯笼10份、薄荷油9份，干燥的蚯蚓粉24份、鱼油8份。

本实施例的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法同实施例1。

实验结果

养殖实验

选择基础饲料(为正常市售饲料)为对照组，以基础饲料中加入本发明实施例6的饲料组为实验组，每组设3个平行，实验组中，实施例6的添加剂与基础饲料的重量比为1：20。选取6个水族箱、健康锦鲤300只，将健康锦鲤随机均分到6个水族箱，每个水族箱50只锦鲤，在每个水族箱中加入5只患有细菌性烂鳃病的锦鲤。饲养过程中观察锦鲤的成长与死亡、感染情况，观察21天，实验结果见表1：

表1实验组锦鲤和对照组锦鲤的健康率、死亡率和感染率

组别	健康率	死亡率	感染率
				对照组	54％	30％	46％
实验组	82％	4％	18％

由表1可见，本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂能有效降低感染率和死亡率，本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂具有很好的预防效果。

抑菌试验检查

采用呋喃唑酮做对照组，实施例6的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂为实验组进行抑菌检查。

培养基的制备：称取牛肉浸膏5g溶于水800mL中，加入蛋白胨10g溶解，加入酪蛋白34g溶解，再加入NaCl5g溶解，调至pH7.6～7.8，稀释至1000mL。加入琼脂粉18g，高压灭菌15min，冷却至40℃～50℃时，倒板，凝固，放置无细菌污染的4℃冰箱备用。

菌种为：柱状嗜纤维菌。

对照组抑菌液配制：将1份呋喃唑酮分别溶解在10ml无菌去离子水中，将药液浓度分别进行稀释，与原液比为1:2，1:4，1:8，1:16，1:32。

实验组抑菌液配制：将本发明的实施例6的添加剂溶解在10ml无菌去离子水中，将药液浓度分别进行稀释，与原液比为1:2，1:4，1:8，1:16，1:32。柱状嗜纤维菌结果抑菌效果见表2：

表2本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的杀菌抑菌效果

由表2可见，本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂具有良好的杀菌抑菌效果。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进，这些改进应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，其特征在于：由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液23-34份、蒲公英20-28份、兰花参18-25份、菖蒲18-25份、白头翁17-25份、艾叶16-22份、桑白皮16-22份、小窃草12-19份、普洱熟茶6-13份、溪黄草15-24份、荠菜15-21份、大青叶13-20份、马齿苋11-18份、五倍子12-18份、马兰11-16份、小蓟8-18份、酢浆草9-17份、穿心莲8-15份、黄芩7-15份、木蝴蝶9-14份、紫花地丁6-13份、锦灯笼8-13份、薄荷油6-11份、干燥的蚯蚓粉18-29份、鱼油6-12份。

2.根据权利要求1所述的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，其特征在于：所述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液27-31份、蒲公英22-26份、兰花参21-23份、菖蒲21-23份、白头翁19-22份、艾叶19-20份、桑白皮18-20份、小窃草14-16份、普洱熟茶9-11份、溪黄草18-21份、荠菜18-20份、大青叶15-17份、马齿苋14-16份、五倍子14-16份、马兰13-14份、小蓟12-15份、酢浆草12-14份、穿心莲11-13份、黄芩10-12份、木蝴蝶11-12份、紫花地丁8-10份、锦灯笼9-11份、薄荷油8-9份，干燥的蚯蚓粉24-25份、鱼油8-9份。

3.根据权利要求1所述的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，其特征在于：所述预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂，由下列质量份数的各组分组成：洋葱汁液29份、蒲公英24份、兰花参22份、菖蒲22份、白头翁20份、艾叶20份、桑白皮19份、小窃草15份、普洱熟茶10份、溪黄草19份、荠菜19份、大青叶16份、马齿苋15份、五倍子15份、马兰14份、小蓟13份、酢浆草13份、穿心莲12份、黄芩11份、木蝴蝶12份、紫花地丁9份、锦灯笼10份、薄荷油9份，干燥的蚯蚓粉24份、鱼油8份。

4.一种权利要求1-3中任一项所述的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将洋葱研磨或捣碎或放入榨汁机中榨汁得洋葱汁液，并按上述配比称取所得的洋葱汁液；

(2)按配比称取蒲公英、兰花参、菖蒲、白头翁、艾叶、桑白皮、小窃草和普洱熟茶，将蒲公英、兰花参、菖蒲、白头翁、艾叶、桑白皮、小窃草和普洱熟茶的总重量记作1份，称取20份的纯化水，70-80℃下水浴浸泡2-3h，得浸泡液；

(3)将步骤(2)得到的浸泡液加热至沸腾后煮沸2h，分离取出煎出液，继续向药材内加入6份的纯化水，加热至沸腾后继续煮沸1.5h，合并两次煎出液即为提取液；

(4)按上述配比分别称取干燥的溪黄草、荠菜、大青叶、马齿苋、五倍子、马兰、小蓟、酢浆草、穿心莲、黄芩、木蝴蝶、紫花地丁和锦灯笼，装入球磨机研磨2h，过80目筛，得研磨粉；

(5)步骤(3)得到的提取液及步骤(4)得到的研磨粉放置于超临界萃取仪中的萃取釜中，利用二氧化碳作为介质进行萃取，萃取釜压力为40Mpa，萃取温度为45℃，分离器压力12Mpa，分离器温度为70℃，萃取2小时，得到萃取液；

(6)按照配比称取干燥的蚯蚓粉；

(7)按照配比称取薄荷油和鱼油，与步骤(1)称量好的洋葱汁液、步骤(5)所得的萃取液、步骤(6)称量好的干燥的蚯蚓粉混合均匀，即得目标物。

5.根据权利要求4所述的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述干燥的蚯蚓粉的制备方法为：将蚯蚓用淡水洗净，再用蒸馏水冲洗三遍，烘干至彻底干燥后研磨成粉状，过80目筛。

6.根据权利要求4所述的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于：所述干燥的蚯蚓粉的制备方法为：将蚯蚓用淡水洗净，再用蒸馏水冲洗三遍，真空冷冻干燥至彻底干燥后研磨成粉状，过80目筛。

7.一种权利要求1-3中任一项所述的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的使用方法，其特征在于：将本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂与市售基础饲料以1:40-1:10的重量比混合均匀后投喂。

8.根据权利要求7所述的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂的使用方法，其特征在于：本发明的预防锦鲤细菌性烂鳃病的中草药饲料添加剂与市售基础饲料的重量比为1：20。