CN105121440B - 吡唑并喹啉衍生物的盐及其晶体 - Google Patents

吡唑并喹啉衍生物的盐及其晶体 Download PDF

Info

Publication number
CN105121440B
CN105121440B CN201480017423.2A CN201480017423A CN105121440B CN 105121440 B CN105121440 B CN 105121440B CN 201480017423 A CN201480017423 A CN 201480017423A CN 105121440 B CN105121440 B CN 105121440B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bases
acid
compound
crystal
tetrahydrofuran
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201480017423.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105121440A (zh
Inventor
尾崎俊亮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Eisai R&D Management Co Ltd
Original Assignee
Eisai R&D Management Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Eisai R&D Management Co Ltd filed Critical Eisai R&D Management Co Ltd
Publication of CN105121440A publication Critical patent/CN105121440A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105121440B publication Critical patent/CN105121440B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/29—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/02—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms with only carbon-to-carbon double bonds as unsaturation
    • C07C57/13—Dicarboxylic acids
    • C07C57/145—Maleic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本发明提供一种(S)‑7‑(2‑甲氧基‑3,5‑二甲基吡啶‑4‑基)‑1‑(四氢呋喃‑3‑基)‑1H‑吡唑并[4,3‑c]喹啉‑4(5H)‑酮与选自下组的酸的盐，该组由以下各项组成：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、丙二酸、马来酸、酒石酸、甲磺酸、苯磺酸以及甲苯磺酸；或其晶体，该盐及其晶体具有在药物制剂中用作药品的潜能。

Description

吡唑并喹啉衍生物的盐及其晶体
技术领域
本发明涉及具有针对磷酸二酯酶9(PDE9)的抑制活性的吡唑并喹啉衍生物的盐及其晶体。
背景技术
已知在细胞内起第二信使作用的环磷酸鸟苷(在下文中被称为cGMP)在不同的生理机能(包括学习和记忆行为)中起重要作用。
在脑神经回路的突触后位点，由一氧化氮合酶生物合成的一氧化氮(在下文中被称为NO)活化鸟苷酸环化酶，鸟苷酸环化酶为cGMP合酶。该活化的鸟苷酸环化酶由鸟苷三磷酸生物合成cGMP。该cGMP活化依赖于cGMP的蛋白激酶(在下文中被称为PKG)以磷酸化参与突触可塑性的不同蛋白。已知NO/cGMP/PKG级联的激活参与海马体(已知其为用于学习和记忆行为的神经基质)的突触可塑性(长时程增强；在下文中被称为LTP)的诱导(例如，参见非专利文献1)。已知激活该级联信号传递的药物改善海马体的LTP以及动物的学习行为，而已知抑制该级联的药物显示相反的作用(非专利文献2)。因此，从这些发现中预期脑中cGMP的增加将导致学习和记忆行为的改善。
cGMP被代谢成5'-GMP，不具有通过磷酸二酯酶(在下文中被称为PDE)进行的PKG激活反应。已知PDE具有11个家族，且已知PDE9特异地代谢cGMP，并且在脑、脾、小肠等中表达(例如，参见非专利文献3)。即，预期抑制PDE9将增加脑中的cGMP。据报道，PDE9抑制剂实际上增强海马体LTP，并且改善动物在新颖物体识别测试/被动型躲避学***降低的可能性(非专利文献5)。因此，PDE9可能具有与神经退行性疾病和精神疾病病理学的多种密切关系，特别是与阿尔茨海默病中认知功能障碍等的病理学，例如亚历山大病、阿尔珀病、阿尔茨海默氏病、肌萎缩性脊髓侧索硬化(ALS；称为卢伽雷氏病或运动神经元病)、共济失调毛细血管扩张症、巴登氏病(也称为斯皮尔梅伊尔-沃格特-斯耶格仑-巴登氏病)、宾斯万格氏痴呆(皮层下血管硬化脑病)、双相障碍、牛海绵状脑病(BSE)、卡纳万病、化疗诱导痴呆、科凯恩综合征、皮质基底节变性、克雅氏病、抑郁症、唐氏综合征、额颞叶型失智症(包括额颞叶痴呆症、词义性痴呆以及进行性非流畅性失语)、吉斯特曼-斯召斯列氏病、青光眼、亨廷顿病(舞蹈病)、HIV相关的痴呆、运动过度、肯尼迪氏病、科尔萨科夫综合征(遗忘虚构综合征)、克腊比氏病、路易体痴呆、进行性少词型失语、马查多-约瑟夫病(脊髄小脑型共济失调3型)、多发性硬化症、多萎缩(橄榄体脑桥小脑萎缩)、重症肌无力、帕金森氏病、佩-梅氏病、皮克病、早老性痴呆病(轻度认知缺损)、原发性侧索硬化、原发性进行性失语、辐射诱发性痴呆、雷弗素姆氏病(植烷酸贮积病)、桑德霍夫病、谢耳德氏病、精神***症、词义性痴呆、老年性痴呆、夏伊-德雷格综合征、脊髓小脑性共济失调、脊柱肌肉萎缩、进行性核上性眼肌瘫痪(进行性核上性麻痹)、以及血管淀粉样变性和血管性痴呆(多发性脑梗死性痴呆)。
引用清单
非专利文献
[非专利文献1]多梅克-勒派欣西卡(Domek-Lopacinska)等人，“环GMP代谢和它在脑生理学中的作用(Cyclic GMP metabolism and its role in brain physiology)”，生理学药学期刊(J Physiol Pharmacol.)，第56卷，增刊第2期，第15-34页，2005
[非专利文献2]王X.，(Wang X.)，“环GMP-依赖性蛋白激酶和在神经***中的细胞信号传递(Cyclic GMP-dependent protein kinase and cellular signaling in thenervous system)”，神经化学杂志(J.Neurochem.)，第68卷，第443-456页，1997
[非专利文献3]费舍尔(Fisher)等人，“PDE9A-一种新颖的人类cGMP特异性磷酸二酯酶-的分离和表征(Isolation and characterization of PDE9A,a novel human cGMP-specific phosphodiesterase)”，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)，第273卷，第15559-15564页，1998
[非专利文献4]范德斯德伊(van der Staay)等人，“新颖的选择性PDE9抑制剂BAY73-6691改善啮齿动物的学习和记忆(The novel selective PDE9inhibitor BAY 73-6691improves learning and memory in rodents)”，神经药理学(Neuropharmacology)，第55卷，第908-918页，2008
[非专利文献5]邦卡尔(Bonkale)等人，“减少的氧化氮响应的在阿尔茨海默病患者的颞上皮层中可溶性鸟苷酸环化酶活性(Reduced nitric oxide responsive solubleguanylyl cyclase activity in the superior temporal cortex of patients withAlzheimer's disease)”，神经科学通讯(Neurosci.Lett.)，第187卷，第5-8页，1995
发明简述
技术问题
发现一种由以下化学式(I)代表的化合物((S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮；下文称为化合物(I))为具有PDE9抑制活性的新颖化合物，并且提交了针对这些发明的专利申请(PCT/JP 2012/075748)：
关于具有用作药物制剂潜能的化合物，其盐或盐的晶体的物理特性通常很大程度上影响药物的生物利用度、药品的纯度、药物制剂等。
因此，本发明的一个目的是提供一种化合物(I)的盐或其晶体，该盐或其晶体具有在药物制剂中用作药品的潜能，以及具有改善的溶出度和口服吸收特性。
问题解决方案
本发明的诸位发明人已广泛验证化合物(I)以解决上述问题，并且结果是，发现了化合物(I)的盐或其晶体，从而完成了本发明。
因此，本发明涉及：
[1]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮与选自下组的酸的盐，该组由以下各项组成：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、丙二酸、马来酸、酒石酸、甲磺酸、苯磺酸以及甲苯磺酸；
[2](S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐；
[3](S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐；
[4]一种根据[1]所述的盐的晶体；
[5]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)10.1°处具有一个衍射峰；
[6]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.9°处具有一个衍射峰；
[7]一种药物组合物，包含根据[1]所述的盐作为活性成分；
[P1]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮与选自下组的酸的盐，该组由以下各项组成：无机酸、有机羧酸以及有机磺酸；
[P2]根据[P1]所述的盐，其中该酸是一种有机羧酸；
[P3]根据[P2]所述的盐，其中该有机羧酸是丙二酸、马来酸或酒石酸；
[P4]根据[P1]所述的盐，其中该酸是一种有机磺酸；
[P5]根据[P4]所述的盐，其中该有机磺酸是甲磺酸、苯磺酸或甲苯磺酸；
[P6]根据[P1]所述的盐，其中该酸是一种无机酸；
[P7]根据[P6]所述的盐，其中该无机酸是盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸；
[P8](S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐；
[P9](S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐；
[P10]一种根据[P1]所述的盐的晶体；
[P11]根据[P10]所述的晶体，其中该酸是丙二酸、马来酸、酒石酸、甲磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸；
[P12]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)10.1°处具有一个衍射峰；
[P12.1]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°以及10.1°处具有衍射峰；
[P12.2]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°、10.1°以及11.1°处具有衍射峰；
[P12.3]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°、10.1°、11.1°、18.2°以及25.8°处具有衍射峰；
[P12.4]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°、10.1°、11.1°、16.2°、17.6°、18.2°、22.0°、22.4°、23.8°以及25.8°处具有衍射峰；
[P12.5]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，其在13C固态NMR谱中在化学位移(ppm)13.3、61.9、114.3、138.9以及172.0处具有峰；
[P13]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.9°处具有一个衍射峰；
[P13.1]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.9°以及14.6°处具有衍射峰；
[P13.2]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.9°、13.7°以及14.6°处具有衍射峰；
[P13.3]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)6.6°、9.9°、13.7°、14.6°以及25.7°处具有衍射峰；
[P13.4]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)6.6°、9.9°、13.7°、14.6°、19.0°、19.6°、20.5°、21.7°、23.5°以及25.7°处具有衍射峰；
[P13.5]一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，其在13C固态NMR谱中在化学位移(ppm)16.8、67.9、114.0、137.7以及160.7处具有峰；
[P14]一种药物组合物，包含根据[P1]所述的盐作为活性成分；
[P14.1]一种药物组合物，包含根据[P8]或[P9]所述的盐作为活性成分；
[P14.2]一种药物组合物，包含根据[P12]、[P12.1]、[P12.2]、[P12.3]、[P12.4]或[P12.5]所述的晶体作为活性成分；以及
[P14.3]一种药物组合物，包含根据[P13]、[P13.1]、[P13.2]、[P13.3]、[P13.4]或[P13.5]所述的晶体作为活性成分。
发明的有益效果
本发明提供的化合物(I)的盐及其晶体具有改善的溶出度和口服吸收特性，以及在药物制剂中用作药品的潜能。
附图简要说明
图1是在实例1中获得的化合物(I)单马来酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图2是在实例2中获得的化合物(I)单苯磺酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图3是在实例3中获得的化合物(I)盐酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图4是在实例4中获得的化合物(I)氢溴酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图5是在实例5中获得的化合物(I)对甲苯磺酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图6是在实例6中获得的化合物(I)硝酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图7是在实例7中获得的化合物(I)硫酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图8是在实例8中获得的化合物(I)甲磺酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图9是在实例9中获得的化合物(I)磷酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图10是在实例10中获得的化合物(I)L-酒石酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图11是在实例11中获得的化合物(I)丙二酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。横坐标示出了衍射角(2θ)，而纵坐标示出了峰强度。
图12是一个曲线图，显示了对化合物(I)、实例1中获得的化合物(I)单马来酸盐以及实例2中获得的化合物(I)单苯磺酸盐进行的溶出试验的结果。横坐标示出了时间(分钟)而纵坐标示出了就化合物(I)而言的浓度(μg/mL)。
图13是一个曲线图，显示了当向狗口服给药化合物(I)和实例1中获得的化合物(I)单马来酸盐时化合物(I)的血浆浓度的变化。横坐标示出了时间(小时)而纵坐标示出了就化合物(I)而言的该化合物的浓度(μg/mL)。
实施方式的说明
根据本发明的盐、晶体及其生产方法将在以下更详细地阐述。
如在此使用，“盐”意指“处于其常用意义的盐”或共晶，包含具有PDE9抑制活性的化合物(I)以及一种药学上可接受的酸。“处于其常用意义的盐”是指一种由碱性化合物(I)的带正电荷的组分和酸的带负电荷的组分组成的化合物。此外，共晶是指一种晶体复合物，其中化合物(I)的分子及酸以恒定比率和恒定构型聚集在晶格中。
确切地，根据本发明的盐是处于其常用意义的盐或共晶，包含化合物(I)以及一种选自下组的酸，该组由以下各项组成：有机羧酸、有机磺酸以及无机酸。
有机羧酸的实例优选包括乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、富马酸、柠檬酸以及丙二酸盐，并且更优选地包括马来酸、酒石酸以及丙二酸。
有机磺酸的实例优选包括甲磺酸、三氟甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸以及樟脑磺酸，并且更优选地包括甲磺酸、苯磺酸以及甲苯磺酸。
无机酸的实例优选包括氢氟酸、盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、高氯酸、磷酸、碳酸以及重碳酸酸，并且更优选地包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸以及磷酸。
根据本发明的盐可以是溶剂化物。如在此使用，一种“化合物(I)的盐的溶剂化物”是指一种由化合物(I)的盐和溶剂分子共同形成的固体。溶剂化物中溶剂的实例包括酮溶剂，例如丙酮、2-丁酮以及环己酮；酯溶剂，例如乙酸甲酯以及乙酸乙酯；醚溶剂，例如1,2-二甲氧基乙烷以及叔丁基甲醚；醇溶剂，例如甲醇、乙醇、1-丙醇、和异丙醇，极性溶剂，例如N-甲基-2-吡咯烷酮、N,N-二甲基甲酰胺以及二甲亚砜；以及水。
如在此使用，“晶体”是指一种化合物(I)的盐的晶体。因此，化合物(I)单马来酸盐的晶体，例如，意指处于其常用意义的盐在化合物(I)和马来酸之间形成的晶体，或在化合物(I)和马来酸之间形成的共晶。
在此优选的晶体实例包括
一种化合物(I)单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)10.1°处具有一个衍射峰；
一种化合物(I)单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°以及10.1°处具有衍射峰；
一种化合物(I)单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°、10.1°以及11.1°处具有衍射峰；
一种化合物(I)单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°、10.1°、11.1°、18.2°以及25.8°处具有衍射峰；
一种化合物(I)单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°、10.1°、11.1°、16.2°、17.6°、18.2°、22.0°、22.4°、23.8°以及25.8°处具有衍射峰；
一种化合物(I)单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.9°处具有一个衍射峰；
一种化合物(I)单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.9°以及14.6°处具有衍射峰；
一种化合物(I)单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.9°、13.7°以及14.6°处具有衍射峰；
一种化合物(I)单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)6.6°、9.9°、13.7°、14.6°以及25.7°处具有衍射峰；
一种化合物(I)单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)6.6°、9.9°、13.7°、14.6°、19.0°、19.6°、20.5°、21.7°、23.5°以及25.7°处具有衍射峰；或
一种化合物(I)单马来酸盐的晶体，其特征在于在13C固态NMR谱中在化学位移(ppm)13.3、61.9、114.3、138.9以及172.0处具有峰；
一种化合物(I)单苯磺酸盐的晶体，其特征在于在13C固态NMR谱中在化学位移(ppm)16.8、67.9、114.0、137.7以及160.7处具有峰。
如上所述，在粉末X射线衍射中的峰是化合物(I)单马来酸盐或化合物(I)单苯磺酸盐各自晶体的特征。
通常，衍射角(2θ)在±0.2°的范围内的误差在粉末X射线衍射中可能上升，因此需要考虑上述衍射角的值包括在约±0.2°的范围内的值。因此，本发明中不仅包括具有在粉末X射线衍射中完全相同的衍射角处的峰的晶体，还包括在衍射角的约±0.2°的误差范围内具有峰的晶体。
因此，例如，如在此使用“在衍射角(2θ±0.2°)10.1°处具有衍射峰”意指“在衍射角(2θ)9.9°至10.3°处具有衍射峰”。同样也适用于其他衍射角。
如在此使用，“在化学位移(ppm)13.3、61.9、114.3、138.9以及172.0处具有峰”意指“当在常规测量条件下或与本说明书中的基本相同的条件下进行13C固态NMR谱时，具有与化学位移(ppm)13.3、61.9、114.3、138.9以及172.0处的峰各自基本等同的峰”。
在确定是否“具有与……基本等同的峰”时，由于化学位移(ppm)通常在约±0.5ppm的范围内的误差在13C固态NMR谱中可能上升，需要考虑上述化学位移的值包括在约±0.5ppm范围内的值。因此，本发明中不仅包括具有在13C固态NMR谱中完全相同的化学位移的晶体，还包括具有在约±0.5ppm的误差范围内的化学位移的晶体。因此，例如，如在此使用“在化学位移(ppm)13.3处具有峰”意指“在化学位移(ppm)12.8至13.8处具有峰”。同样也适用于13C固态NMR谱中其他化学位移。
将在以下阐述用于生产化合物(I)的盐或其晶体或类似物的方法，该方法为根据本发明的一个实施例。
化合物(I)的生产
如具体描述于以下参考实例1中，能以3-氧代四氢呋喃、2-氟-5-甲基吡啶以及4-溴-2-溴苯甲酸作为起始物质合成根据本发明的化合物(I)。
用于生产化合物(I)的盐的方法
化合物(I)的盐可以通过用于生产盐的常规方法获得。确切地，例如可以通过将化合物(I)悬浮于或溶于溶剂中，需要的话加热，然后通过向所获得的悬浮液或溶液中添加一种选自下组的酸，该组由以下各项组成：有机羧酸、有机磺酸以及无机酸，并且通过搅拌或将所得悬浮液或溶液在室温下或用冰浴冷却下留置若干分钟至若干天来生产它们。根据这些生产方法，化合物(I)的盐可以作为晶体或非晶体物质获得。有待于在这些方法中使用的溶剂的实例包括，醇溶剂，例如乙醇、1-丙醇以及异丙醇；乙腈；酮溶剂，例如丙酮以及2-丁酮；酯溶剂，例如乙酸乙酯；饱和烃溶剂，例如己烷以及庚烷；醚溶剂，例如叔丁基甲醚或水。这些溶剂可以单独使用或两种或多种混合使用。
在上述用于生产化合物(I)的方法中，化合物(I)的盐可以在化合物(I)的合成之后通过采用前述方法生产。
用于生产化合物(I)的盐的晶体的方法
一种化合物(I)的盐的晶体可以通过上述用于生产化合物(I)的盐的方法来生产，或者通过在溶剂中热溶解化合物(I)的盐并且通过冷却和搅拌使其结晶来生产。
有待于用于结晶的化合物(I)的盐可以呈任何形式：其可以是水合物、酸酐、非晶体物质、晶体物质(包括由多个结晶多晶型物组成的那些)或其组合。
有待于在结晶中使用的溶剂的实例包括，醇溶剂，例如甲醇、乙醇、异丙醇以及1-丙醇；乙腈；酰胺溶剂，例如N,N-二甲基甲酰胺；酯溶剂，例如乙酸乙酯；饱和烃溶剂，例如己烷以及庚烷；酮溶剂，例如丙酮以及2-丁酮；醚溶剂，例如叔丁基甲醚或水。此外，这些溶剂可以单独使用或两种或多种混合使用。
可以适当选择有待使用的溶剂的量，其条件是下限为使用其通过加热将化合物(I)或其盐的游离形式溶解或可使用其搅拌该悬浮液的量，并且上限为使用其使晶体的收率未显著减少的量。
由上述的方法获得的晶体是单晶形态。该晶体形态是稳定的，不会容易地转化为其他晶体形态或非晶体物质，具有良好的物理特性，并且也适用于配制。
在结晶期间，可以添加或者也可以不添加晶种(例如，所希望的化合物(I)的盐的晶体)。添加晶种的温度不受具体限制，但优选是0至60℃。
对于通过加热将化合物(I)的盐溶解时所用的温度(在该温度处化合物(I)溶解)，可以根据溶剂进行适当选择，但是优选地在重结晶溶剂开始回流的温度与50℃之间的范围内，并且更优选地65℃至55℃。
在快速冷却的情况下，在结晶期间进行冷却可以产生包含不同晶体形态(多态性)的物质。因此，基于其对晶体的品质、粒度等的影响的考虑，令人希望的是在进行冷却的同时酌情控制冷却率。优选地按例如40℃至5℃/小时的冷却率进行冷却。更优选地按例如25℃至5℃/小时的冷却率进行冷却。
此外，为了晶体的收率、品质等，可以适当选择最终的结晶温度，但优选是30℃至-25℃。
可以通过以下方式获得目标晶体，经由常规过滤程序分离出所形成的晶体，如果需要的话用溶剂洗涤滤出的晶体，并进一步将其干燥。对于用于洗涤晶体的溶剂，可以使用与在结晶中相同的溶剂。优选地是，例如，丙酮、2-丁酮、乙酸乙酯、叔丁基甲醚以及己烷/2-丁酮(体积比2:3)的混合溶剂。
可以酌情通过将其留在空气中或在氮气流中或通过将其加热而干燥经由过滤程序而分离出的晶体。
对于干燥时间，取决于产物的量、干燥装置、干燥温度等，可以酌情选择直到残余溶剂的量已经小于预定量的时间。此外，可以在气流下或在减压下进行干燥。取决于产物的量、干燥装置、干燥温度等，可以酌情选择减压的程度。在干燥之后，根据需要，可以将获得的晶体留在空气中。
在上述用于生产化合物(I)的方法中，上述晶体可以在化合物(I)的合成之后通过进一步采用上述用于生产化合物(I)的盐的方法生产，并且如果必要的话采用用于生产化合物(I)的盐的晶体的方法。
如在后面所述的示例性药理学测试中的活性数据中所示的，由于其具有PDE9抑制活性，预期通过上述产生方法获得的化合物(I)的盐及其晶体将提高脑中cGMP的浓度。PDE9抑制活性以及脑中cGMP的增加导致学习和记忆行为的改善，而这些盐和晶体具有用作用于阿尔茨海默病中认知功能障碍等的治疗剂的潜能。
根据本发明的具有化学式(I)的化合物或其一种药学上可接受的盐可以通过常规方法进行药学上地制备，并且剂型可以是例如口服制剂(片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂、糖浆或类似剂型)、注射液(用于静脉内给药、肌肉内给药、皮下给药、腹膜内给药以及用于其他给药途径)、以及外用制剂(经皮制剂(药膏、贴片和类似物)、滴眼剂、滴鼻剂、栓剂和类似物)。
在生产一种口服固体制剂的情况下，根据需要，可以将一种赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂等等添加到具有化学式(I)的化合物或其一种药学上可接受的盐中，并且可以通过常规方法生产片剂、颗粒剂、粉剂、以及胶囊剂。根据需要，可以对片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂或类似物进行膜包衣。
赋形剂的实例包括乳糖、玉米淀粉以及结晶纤维素；粘合剂的实例包括羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素；崩解剂的实例包括羧甲基纤维素钙和交联羧甲基纤维素钠；润滑剂的实例包括硬脂酸镁和硬脂酸钙；着色剂的实例包括氧化钛；并且膜包衣剂的实例包括羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素和甲基纤维素，当然，这些添加剂并不限于这些实例。
这些固体制剂(如片剂、胶囊剂、颗粒剂以及粉剂)通常各自可以包含按重量计0.001％到99.5％、优选按重量计0.01％到90％等的具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
在生产一种注射液(用于静脉内给药、肌肉内给药、皮下给药、腹膜内给药以及用于其他给药途径)的情况下，根据需要向具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐中添加pH调节剂、缓冲剂、助悬剂、增溶剂、抗氧剂、防腐剂(防霉剂)、等张剂等，并可通过一种常规方法生产一种注射液。可将制剂冻干以制成临时溶解型冻干制剂。
作为pH调节剂和缓冲剂，例如，可以使用一种有机酸或无机酸和/或其盐等。此外，作为助悬剂，例如，可以使用甲基纤维素、聚山梨醇酯80、羧甲基纤维素钠或类似物。作为增溶剂，例如，可以使用聚山梨醇酯80、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯或类似物。作为抗氧剂，例如，可以使用α-生育酚或类似物。作为防腐剂，例如，可以使用对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯或类似物。作为等张剂，例如，可以使用葡萄糖、氯化钠、甘露醇或类似物。当然，pH调节剂、缓冲剂、助悬剂、增溶剂、抗氧剂、防腐剂(防霉剂)以及等张剂并不限于这些。
相对于注射液的总质量，这些注射液通常可包含0.000001至99.5质量％、并且优选0.00001至90质量％等的化合物(I)的盐或其晶体。
在生产一种外用制剂的情况下，向具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐中添加一种基体原料，并且根据需要添加例如防腐剂、稳定剂、pH调节剂、抗氧剂、着色剂及类似物，并可以通过常规的方法生产例如经皮制剂(药膏、贴片以及类似物)、滴眼剂、滴鼻剂、栓剂以及类似物。
作为将被使用的基体原料，可以使用通常用于，例如，药物、类-药物和化妆品的不同原料。其具体实例包括以下原料，如动物油和植物油、矿物油、酯油、蜡、乳化剂、高级醇、脂肪酸、硅油、表面活性剂、磷脂、醇、多元醇、水溶性聚合物、黏土矿物以及净化水。
这些外用制剂通常各自可以包含按重量计0.000001％到99.5％、优选按重量计0.00001％到90％等的具有化学式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
化合物(I)的盐或其晶体的剂量取决于症状的程度、年龄、性别、体重、剂型、盐的类型、疾病的具体类型等等而不同。通常，在成人的情况下，每天大约30μg至10g、优选100μg至5g、并且更优选100μg至1g口服地给药，或每天大约30μg至1g、优选100μg至500mg、并且更优选100μg至300mg通过注射给药，在每种情况下，以单次给药或分次给药。
实例
以下将通过示出参考实例和实例详细描述本发明，但是不限于这些考实例和实例。
在本说明书中，以下缩写将被用于以下实例和参考实例中。
CDI：1,1'-羰基二咪唑
DCM：二氯甲烷
DMF-DMA：N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
DMSO：二甲亚砜
DTT：二硫苏糖醇
IPA：异丙醇
KTB：叔丁醇钾
MTBE：叔丁基甲基醚
NBS：N-溴代琥珀酰亚胺
Pd(dppf)Cl2DCM复合体：[1,1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)DCM复合体
Pd(PPh3)4：四(三苯基膦)钯(0)
TEA：三乙胺
TFA：三氟乙酸
THF：四氢呋喃
Tris：三羟甲基氨基甲烷
质子核磁共振谱中的化学位移以来自四甲基硅烷的δ单位(ppm)记录，并且偶合常数以赫兹(Hz)记录。关于裂分形式的缩写如下：s：单峰，d：双峰，t；三重峰，q：四重峰，m：多重峰，brs；宽单峰以及brd；宽双峰。
在以下实例中产生的晶体的粉末X射线衍射中，将所获得的晶体安装在粉末X射线衍射仪的样品台上，并且在以下条件下进行分析。
测量条件
样品架：铝
目标：铜
检测器：闪烁计数器
管电压：50kV
管电流：300mA
狭缝：DS 0.5mm(高度限制狭缝2mm)，SS开放，RS开放
扫描速率：10°/min
加样间隔：0.02°
扫描范围：5°至35°
测角仪：卧式测角仪
在以下条件下测量所述晶体的13C固态NMR谱。
测量条件
所用装置：AVANCE400(来自布鲁克公司(Bruker Corporation))
测量温度：室温(22℃)
参比物质：甘氨酸(外部参比：176.03ppm)
测量核：13C(100.6248425MHz)
脉冲重复时间：3秒
脉冲模式：TOSS测量
参考实例1
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮的合成
(1)2-[二氢呋喃-3(2H)-亚基]肼羧酸苄酯的合成
将3-氧代四氢呋喃(5.70g)溶于甲醇(150mL)，并且向该溶液中添加肼甲酸苄酯(10g)。将混合物在室温下搅拌12小时。将该反应混合物浓缩。获得14.8g作为粗产物的残余物。将其未经进一步纯化地用于下一反应中。
(2)(±)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯的合成
将2-[二氢呋喃-3(2H)-亚基]肼羧酸苄酯(14.8g)悬浮在水(96mL)中。在室温下将乙酸(42.1mL)添加至该悬浮液中。将混合物在室温下搅拌一个小时。该悬浮液转变成溶液。向该溶液中分小部分地添加氰基硼氢化钠(4.0g)。将该混合溶液在室温下搅拌两个小时。将该反应混合物冷却至0℃。通过添加5N氢氧化钠水溶液中和该反应混合物。将该混合物用氯仿萃取。将有机层经无水硫酸镁进行干燥、并且然后进行过滤。将滤液在减压下浓缩。将该残余物通过硅胶柱层析法(甲醇/乙酸乙酯，5％)进行纯化。获得标题化合物(13.9g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：1.73-1.80(m,1H)，1.92-2.06(m,1H)，3.66-3.82(m,3H)，3.82-4.03(m,2H)，5.14(s,2H)，7.31-7.40(m,5H)。
(3)(-)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯以及(+)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯的 合成
将饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)加至MTBE(110mL)中的(±)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯(11.5g)溶液中。将该混合物在室温下搅拌10分钟，然后将有机层分离。将所得有机层依序用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤、并经无水硫酸镁干燥，并且将干燥剂通过过滤去除。将滤液在减压下浓缩。将所得残余物通过硅胶柱层析法(乙酸乙酯/己烷，25％至50％)进行纯化，并且将目标馏分浓缩。将二***(30mL)和己烷(15mL)添加至该残余物。通过过滤收集沉淀的固体并在减压下干燥从而得到纯的(±)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯(6.17g)。
将该产物溶于乙醇并通过微孔过滤器过滤。在两种条件下，对所得滤液进行光学拆分。
条件1：大赛璐公司(DAICEL Corp.)生产的CHIRALCELTM，OD-H(20mm Φ×250mmL)，20％IPA-己烷，25mL/min。
条件2：大赛璐公司生产的CHIRALCELTM，AD-H(20mm Φ×250mm L)，20％IPA-己烷，24mL/min。将目标馏分浓缩从而得到具有短保留时间和(-)旋光度(2.60g，>99％ee[OD-H，20％IPA/己烷，保留时间＝11.2min])的标题化合物，以及具有长保留时间和(+)旋光度(2.59g，97.2％ee[OD-H，20％IPA/己烷，保留时间＝12.4min])的标题化合物。
(4)(S)-(四氢呋喃-3-基)肼盐酸盐的合成
将(-)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯(50g)溶于甲醇(500mL)，并且添加二叔丁基二碳酸酯(92.4g)和钯/碳(50％湿的)(5g)。将混合物在25°下在氢气气氛(15psi)中搅拌48小时。将该反应混合物过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将所得残余物溶解在二异丙醚(300mL)中。在0℃冷却后，将盐酸/二异丙醚(500mL)添加至该溶液。将该混合物在10℃下搅拌14小时。通过过滤来收集所沉淀的固体。从(-)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯(70g)开始将相同的操作进行九次，并从(-)2-(四氢呋喃-3-基)肼羧酸苄酯(50g)开始将相同的操作进行一次。将得到的固体用DCM/乙醇(10/1)(1L)研磨两小时。通过过滤来收集所沉淀的固体。在减压下干燥所得固体，从而得到标题化合物(235g)。
1H-NMR(400Mhz,DMSO-d6)δ(ppm)：1.87-2.09(m,2H)，3.55-3.71(m,2H)，3.71-3.84(m,3H)。
根据X-射线晶体学，所得标题化合物的绝对构型被证实是(S)-形式。
(5)2-氟-3-碘-5-甲基吡啶的合成
将二异丙胺(92mL)添加至THF(1.2L)中，并将该混合物在氮气氛下冷却到-18℃。将2.69M正丁基锂于己烷中的溶液(224mL)逐滴添加到这一溶液中。在逐滴添加后，经20分钟将温度升高至-5℃，同时搅拌该混合物。将该反应溶液冷却至-73℃。将2-氟-5-甲基吡啶(61g)的THF溶液(240mL)逐滴添加到这一反应溶液中。将该反应混合物在-75℃下搅拌三个半小时。将碘(139g)的THF溶液(24mL)逐滴添加到这一反应溶液中。将该反应混合物在-75℃下搅拌1小时55分钟。该反应之后，在相同的温度下，将水(220mL)添加到该反应溶液中。将该混合物在相同温度下搅拌5分钟。将该反应溶液返回至室温，然后添加水(1.2L)。向这一混合物添加硫代硫酸钠五水合物(136g)的水溶液(300mL)和水(300mL)，并将该混合物搅拌10分钟。将该混合物用MTBE(1.2L)进行萃取。将有机层用饱和盐水(500mL)进行洗涤。将经合并的水层用MTBE(1L)进行萃取。合并的有机层经无水硫酸镁干燥。通过过滤去除干燥剂并将滤液在减压下进行浓缩。将正庚烷添加到该残余物中，并将该混合物冷却。通过过滤来收集所沉淀的固体。用正庚烷洗涤固体。将滤液冷却，并将沉淀的固体通过过滤进行收集。将该过程重复5次从而得到标题化合物(109.69g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：2.29-2.31(m,3H)，7.93-8.14(m,2H)。
ESI-MS m/z 238[M+H]+
(6)2-氟-4-碘-3,5-二甲基吡啶的合成
将二异丙胺(88mL)添加至THF(1.2L)中，并将该混合物在氮气氛下冷却到-18℃。将2.69M正丁基锂于己烷中的溶液(215mL)逐滴添加到这一溶液中。在逐滴添加后，经30分钟将温度升高至-5℃，同时搅拌该混合物。将该反应溶液冷却至-72℃。将2-氟-3-碘-5-甲基吡啶(109.69g)的THF溶液(240mL)逐滴添加到这一反应溶液中。将该反应混合物在-74℃下搅拌一个半小时。将甲基碘(36ml)的THF溶液(160mL)逐滴添加到这一反应溶液中。将该反应混合物在-70℃至-74℃下搅拌2小时。该反应之后，在相同的温度下，将水(200mL)添加到该反应溶液中。将该混合物在相同温度下搅拌2分钟。将该反应溶液返回至室温，然后添加水(1.2L)。将此混合物搅拌3分钟。进一步添加水(300mL)。将该混合物用MTBE(1.2L)进行萃取。将有机层用饱和盐水(500mL)进行洗涤。将经合并的水层用MTBE(1L)进行萃取。合并的有机层经无水硫酸镁干燥。通过过滤去除干燥剂并将滤液在减压下进行浓缩。将正庚烷(100mL)添加到该残余物中，并将该混合物冷却。通过过滤来收集所沉淀的固体。用正庚烷洗涤固体。将滤液冷却，并将沉淀的固体通过过滤进行收集。将该过程重复两次从而得到标题化合物(86.9g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：2.39-2.40(m,6H)，7.80-7.82(m,1H)。
ESI-MS m/z 252[M+H]+
(7)4-碘-2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶的合成
在20℃下，将28％甲醇钠的甲醇溶液(185mL)添加到2-氟-4-碘-3,5-二甲基吡啶(97.4g)的THF(954mL)溶液中。将该混合物在55℃至65℃下搅拌2小时。将该反应溶液冷却，然后通过添加MTBE(1L)和水(1L)分离。将有机层用饱和盐水进行洗涤。将经合并的水层用MTBE(500mL x2)进行萃取。合并的有机层经无水硫酸镁干燥。通过过滤去除干燥剂并将滤液在减压下进行浓缩。将正庚烷(50mL)添加到该残余物中，并将该混合物在0℃下搅拌1小时。通过过滤来收集所沉淀的固体。用冷冻的正庚烷(10mL)洗涤固体。获得标题化合物(42.6g)。将滤液在减压下浓缩。将正庚烷(5mL)添加到该残余物中，并将该混合物在0℃下搅拌30分钟。通过过滤来收集所沉淀的固体。用冷冻的正庚烷(2mL)洗涤固体从而得到标题化合物(20.2g)。将滤液在减压下浓缩。将正庚烷(5mL)添加到该残余物中，并将该混合物在0℃下搅拌30分钟。通过过滤来收集所沉淀的固体。用冷冻的正庚烷(2mL)洗涤固体。获得标题化合物(10.7g)。当合并时，获得标题化合物(73.5g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：2.33-2.34(m,3H)，2.36-2.38(m,3H)，3.92(s,3H)，7.76(s,1H)。
ESI-MS m/z 264[M+H]+
(8)3-(4-溴-2-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯的合成
将CDI(8.88g)添加到4-溴-2-氟苯甲酸(CAS No.112704-79-7)(10g)在DCM(97mL)中的悬浮液中，并且将该混合物在室温下搅拌3.5小时。这种溶液被称作“溶液1”。
在另一个烧瓶中，向丙二酸乙酯钾(15.5g)在乙腈(303mL)中的悬浮液里添加TEA(15.9mL)然后是氯化镁(10.9g)，并且将该混合物在室温下搅拌3小时10分钟。经25分钟向这一反应混合物中逐滴添加上述制备的“溶液1”，然后将该反应混合物在室温下搅拌过夜。在减压下将该反应溶液浓缩至其一半的体积。将得到的残余物在乙酸乙酯(500mL)中稀释，并且在冰冷却下添加至5N盐酸(250mL)中后，在室温下搅拌1小时。将该有机层分离。用饱和盐水洗涤有机层，经无水硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩。将获得的残余物在硅胶上通过柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，5％-20％)进行纯化，从而得到标题化合物(12.8g)。
ESI-MS m/z 291[M+H]+
(9)5-(4-溴-2-氟苯基)-1-[(S)-四氢呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-羧酸乙酯的合成
将3-(4-溴-2-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯(45g)在DMF-DMA(165mL)中的溶液在50℃下搅拌2小时15分钟。将该反应溶液在减压下进行浓缩。将甲苯(200mL)添加到该残余物中，并且将该混合物在减压下再次浓缩。将乙醇(950mL)添加到该残余物中，并将该混合物加热至50℃。经35分钟向该溶液中逐滴添加(S)-(四氢呋喃-3-基)肼盐酸盐(21.6g)的水溶液(60mL)。将所得反应混合物在50℃下搅拌2小时10分钟。将该反应溶液冷却至室温，然后在减压下浓缩至其一半的体积。将水(200mL)添加到该残余物中，并且在减压下蒸馏除去乙醇。将乙酸乙酯(500mL)添加至所得残余物，并且将该有机层分离。将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取。用饱和盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩。将该残余物在硅胶(乙酸乙酯/正庚烷，10％-15％)上通过柱层析法，然后通过在NH硅胶(来自富士硅化学有限公司(Fuji Silysia Chemical Ltd.)的涂有丙胺的硅胶)(乙酸乙酯/正庚烷，33％)上通过短程柱层析法进行纯化，从而得到标题化合物(43.1g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：1.19(t,J＝7.2Hz,3H)，2.19-2.49(m,2H)，3.87-4.07(m,3H)，4.11-4.25(m,3H)，4.58-4.65(m,1H)，7.17-7.26(m,1H)，7.39-7.47(m,2H)，8.06(s,1H)。
ESI-MS m/z 407[M+Na]+
(10)5-[2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基]-1-[(S)-四氢 呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-羧酸乙酯的合成
将5-(4-溴-2-氟苯基)-1-[(S)-四氢呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(43.1g)、双(频哪醇)二硼(34.3g)、Pd(dppf)Cl2DCM复合体(4.59g)以及乙酸钾(33.1g)的一种混合物在减压下使用一个真空泵干燥1小时。将干燥的残余物在DMF(430mL)中的溶液在80℃下搅拌3小时10分钟。将该反应溶液返回至室温，然后通过CeliteTM过滤。将滤液在减压下浓缩。向该残余物中添加乙酸乙酯(430mL)以及饱和盐水(200mL)，并且将该混合物搅拌5分钟。通过使用CeliteTM过滤将不溶的物质去除。将该有机层从滤液中分离。将水层再次用乙酸乙酯(50mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，过滤，并将滤液在减压下进行浓缩。将该残余物在硅胶上通过柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，10％-15％)进行纯化，从而得到标题化合物(51.9g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：1.16(t,J＝7.2Hz,3H)，1.37(s,12H)，2.15-2.49(m,2H)，3.85-4.06(m,3H)，4.14(q,J＝7.2Hz,2H)，4.20(dd,J＝15.6,8.4Hz,1H)，4.57-4.66(m,1H)，7.30(t,J＝7.2Hz,0.5H)，7.35(t,J＝7.2Hz,0.5H)，7.63(dd,J＝5.6,2.0Hz,1H)，7.70(dd,J＝7.2,2.0Hz,1H)，8.06(s,1H)。
(11)5-[2-氟-4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)苯基]-1-[(S)-四氢呋喃-3- 基]-1H-吡唑-4-羧酸乙酯的合成
将水(170mL)、4-碘-2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶(35.6g)、Pd(PPh3)4(6.52g)以及碳酸铯(110g)添加至5-[2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基]-1-[(S)-四氢呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(51.9g)在1,4-二噁烷(500mL)中的溶液里，并且将该反应混合物在110℃下反应六小时。将该反应混合物返回至室温，然后将有机层分离。将该有机层在减压下进行浓缩。将水层、乙酸乙酯(700m)以及水(100mL)添加至所得残余物，并且将有机层分离。将水层用乙酸乙酯(50mL)重新萃取。依序用水和盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸镁干燥，过滤，并在减压下浓缩。将该残余物通过NH硅胶柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，5％-14％)进行纯化。然后，将该产物再次通过NH硅胶柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，2％-10％)进行纯化，从而得到标题化合物(43.5g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：1.16(t,J＝7.2Hz,1.5H)，1.17(t,J＝7.2Hz,1.5H)，1.97(s,1.5H)，1.98(s,1.5H)，1.99(s,1.5H)，2.00(s,1.5H)，2.25-2.55(m,2H)，3.92-4.27(m,6H)，3.99(s,1.5H)，4.00(s,1.5H)，4.65-4.75(m,1H)，7.01(d,J＝9.2Hz,1H)，7.05(d,J＝7.2Hz,1H)，7.39(t,J＝7.2Hz,0.5H)，7.45(t,J＝7.2Hz,0.5H)，7.93(s,1H)，8.12(s,1H)。
ESI-MS m/z 440[M+H]+
(12)5-[2-氟-4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)苯基]-1-[(S)-四氢呋喃-3- 基]-1H-吡唑-4-羧酸的合成
在室温下，将5N氢氧化钠水溶液(79mL)添加至5-[2-氟-4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)苯基]-1-[(S)-四氢呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(43.2g)在乙醇(574mL)中的溶液里，并且将该反应混合物在60℃下搅拌两小时10分钟。将该反应混合物冷却至室温，然后在减压下浓缩至其一半的体积。将水(300mL)添加到该残余物中，并且在减压下蒸馏除去乙醇。将MTBE(130mL)添加至所得残余物，并且将该水层分离。用水(30mL)萃取该有机层。在冰冷却下，将合并的水层用5N盐酸(78mL)酸化，并且用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层经无水硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，从而得到标题化合物(39.0g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：1.91(s,1.5H)，1.94(s,1.5H)，1.98(s,1.5H)，2.01(s,1.5H)，2.25-2.56(m,2H)，3.92-4.17(m,3H)，3.96(s,1.5H)，4.00(s,1.5H)，4.23(dd,J＝16.0,8.0Hz,1H)，4.65-4.77(m,1H)，6.99(brd,J＝10.0Hz,1H)，7.03(dr d,J＝7.6Hz,1H)，7.38(t,J＝7.6Hz,0.5H)，7.44(t,J＝7.6Hz,0.5H)，7.90(s,0.5H)，7.94(s,0.5H)，8.14(s,1H)。
ESI-MS m/z 434[M+Na]+
(13)5-[2-氟-4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)苯基]-1-[(S)-四氢呋喃-3- 基]-1H-吡唑-4-羧酰胺的合成
在室温下，将CDI(21.4g)一次添加至5-[2-氟-4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)苯基]-1-[(S)-四氢呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-羧酸(38.7g)在DMF(290mL)中的溶液里，并且将该混合物在室温下搅拌95分钟。将28％氨水(95mL)添加到该反应混合物中，并将该混合物在室温下搅拌35分钟。再次将28％氨水(95mL)添加到该反应混合物中，并将该混合物在室温下搅拌90分钟。将该反应混合物在减压下浓缩。将氯仿(250mL)以及水(80mL)添加至所得残余物，并且将有机层分离。将水层用氯仿(50mL)重新萃取。依序用饱和氯化铵水溶液(60mL×3)和盐水洗涤合并的有机层，经无水硫酸镁干燥，并且过滤。将该滤液通过一种硅垫(NH-硅胶)。将该滤液在减压下进行浓缩，从而得到标题化合物(37.2g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：1.98(brs,6H)，2.24-2.60(m,2H)，3.90-4.20(m,3H)，3.99(s,3H)，4.23(dd,J＝16.0,8.0Hz,1H)，4.62-4.71(m,1H)，5.32(brs,2H)，7.05(brd,J＝10.0Hz,1H)，7.10(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H)，7.42-7.56(m,1H)，7.94(brs,1H)，8.03(s,1H)。
ESI-MS m/z 411[M+H]+
(14)(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并 [4,3-c]喹啉-4(5H)-酮的合成
在室温下，将氢氧化钠粉末(9.43g)一次添加至5-[2-氟-4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)苯基]-1-[(S)-四氢呋喃-3-基]-1H-吡唑-4-羧酰胺(37.2g)在DMSO(186mL)中的溶液里。将该反应混合物在相同温度下搅拌50分钟，然后在70℃下搅拌45分钟。在水冷却下，将水(600mL)逐滴添加到该反应混合物中，然后逐滴添加乙酸(13.5mL)。通过过滤来收集所沉淀的粉末。将所收集的对象用水和MTBE进行洗涤，然后在减压条件下进行干燥，从而得到标题化合物(34.0g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):1.92-1.94(m,3H)，1.94-1.96(m,3H)，2.55-2.66(m,1H)，2.76-2.86(m,1H)，4.00(s,3H)，4.09-4.16(m,1H)，4.24-4.37(m,2H)，4.39-4.45(m,1H)，5.61-5.68(m,1H)，7.04(d,J＝1.5Hz,1H)，7.08(dd,J＝1.5Hz,8.3Hz,1H)，7.94(s,1H)，8.13(d,J＝8.3Hz,1H)，8.31(s,1H)，8.86(s,1H)。
ESI-MS m/z 391[M+H]+
该标题化合物显示出(-)的旋光度，而其光学纯度>99％ee[AD-H，100％乙醇，保留时间：9.7min]。
参考实例2
(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮的合成
(±)-5-(2,4-二甲氧基苄基)-1-(四氢呋喃-3-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2- 二噁环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮的合成
(1)3-(4-溴-2-氯苯基)-3-氧代丙酸乙酯的合成
将4-溴-2-氯苯甲酸(1g)悬浮在DCM(10mL)中。将CDI(960mg)添加到所得悬浮液中，并且在室温下搅拌4小时。将该溶液作为“溶液1”。在另一个烧瓶中，于氮气氛中将丙二酸乙酯钾(1.1g)悬浮在乙腈(20mL)中，并且添加TEA(1.5mL)。将所生成的溶液冷却至0℃，并一点一点地添加氯化镁(805mg)，在此之后在室温下搅拌2小时。将该反应混合物冷却至0℃，并将上述制备的“溶液1”滴入其中。滴加完成之后，在室温下搅拌该反应混合物17小时。进一步地，将该反应混合物在50℃下搅拌9小时。将该反应混合物在减压下进行浓缩并且将DCM去除。将获得的残余物冷却至0℃，并添加乙酸乙酯(50mL)和2N盐酸(20mL)，并在室温下搅拌1小时。将该生成的有机层进行分段。将该生成的水层用乙酸乙酯进行萃取。将萃取物与有机层进行合并，并经无水硫酸镁进行干燥。通过过滤去除干燥剂，并将滤液在减压下进行浓缩。将获得的残余物通过硅胶柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，0％至10％)进行纯化，以获得该标题化合物(1.2g)。ESI-MS m/z 307[M+H]+
(2)(±)-5-(4-溴-2-氯苯基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯的合成
将3-(4-溴-2-氯苯基)-3-氧代丙酸乙酯(2.00g)溶解在DMF-DMA(6.96mL)中，并且将该反应混合物在室温下搅拌1.5小时。将该反应混合物在减压下浓缩，并将残余物溶解在乙醇(40mL)中。将(±)-(四氢呋喃-3-基)肼盐酸盐(998mg)添加到该溶液中，并且将该混合物在回流下加热2小时。将该反应混合物冷却至室温，并且然后在减压下浓缩。将该残余物用乙酸乙酯进行萃取，并且将该有机层通过硅胶柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，10％至30％)进行纯化，以获得该标题化合物(1.05g)。
ESI-MS m/z 401[M+H]+
(3)(±)-5-(4-溴-2-氯苯基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-羧酸的合成
将(±)-5-(4-溴-2-氯苯基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(1.05g)和5N氢氧化钠水溶液(1.58mL)的一种混合物在乙醇(20mL)和水(5mL)的混合溶剂中在60℃下搅拌三个小时。将该反应混合物冷却至室温，并且然后在减压下浓缩。将5N盐酸添加到该残余物中，随后用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸镁将有机层干燥，并且滤出干燥剂。将该滤液在减压下进行浓缩，从而得到标题化合物(1g)。
ESI-MS m/z 371[M+H]+
(4)(±)-5-(4-溴-2-氯苯基)-N-(2,4-二甲氧基苄基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H- 吡唑-4-羧酰胺的合成
将(±)-5-(4-溴-2-氯苯基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-羧酸(1g)溶解在DCM(20ml)中，并添加至CDI(611mg)，随后在室温下搅拌一个小时。向该反应混合物中添加2,4-二甲氧基苄胺(0.809mL)，并将该混合物在室温下搅拌两个小时。向该反应混合物中添加饱和碳酸氢钠水溶液，随后用DCM萃取。将该有机层在减压下进行浓缩，并且将该残余物通过硅胶柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，10％至40％)进行纯化，从而得到标题化合物(1.26g)。
ESI-MS m/z 522[M+H]+
(5)(±)-7-溴-5-(2,4-二甲氧基苄基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c] 喹啉-4(5H)-酮的合成
将(±)-5-(4-溴-2-氯苯基)-N-(2,4-二甲氧基苄基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-羧酰胺(1.26g)溶解于THF(25mL)中，并在0℃下添加KTB(597mg)。将混合物搅拌12小时，同时逐渐地加温至室温。将该反应混合物冷却至0℃，添加水，然后过滤。将该过滤残余物分开保存。将滤液用乙酸乙酯萃取，并将有机层在减压下进行浓缩。将该残余物通过硅胶柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，10％-70％)进行纯化。将所产生部分与上述所获得的过滤残余物合并并且浓缩，从而得到标题化合物(488mg)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：2.50-2.62(m,1H)，2.72-2.82(m,1H)，3.76(s,3H)，4.02(s,3H)，4.07-4.15(m,1H)，4.19-4.32(m,2H)，4.35-4.42(m,1H)，5.46-5.57(m,3H)，6.34(dd,J＝8.6Hz,2.2Hz,1H)，6.52(d,J＝2.2Hz,1H)，6.99(d,J＝8.6Hz,1H)，7.38(dd,J＝8.6Hz,1.8Hz,1H)，7.82(d,J＝1.8Hz,1H)，7.89(d,J＝8.6Hz,1H)，8.32(s,1H)。
ESI-MS m/z 506[M+Na]+
(6)(±)-5-(2,4-二甲氧基苄基)-1-(四氢呋喃-3-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3, 2-二噁环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮的合成
使用微波反应器，将(±)-7-溴-5-(2,4-二甲氧基苄基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(300mg)、双(频哪醇)二硼(204mg)、Pd(dppf)Cl2-DCM复合体(13.6mg)以及乙酸钾(182mg)的一种混合物在1,4-二噁烷(15mL)和DMSO(1mL)的混合溶剂中在130℃下反应三个小时。将该反应混合物冷却至室温，并且然后在减压下浓缩。将残余物用乙酸乙酯萃取，并将有机层在减压下进行浓缩。使该残余物经硅胶垫并用乙酸乙酯进行洗脱，从而得到标题化合物(428mg)作为粗产物。
ESI-MS m/z 532[M+H]+
(7)3,5-二溴-2-甲氧基吡啶-4-胺的合成
将2-甲氧基-吡啶-4-基胺(15g)和NBS(47.3g)的一种混合物在乙酸溶剂(150mL)中在室温下搅拌三个小时。将该反应混合物在减压下浓缩，并将5N氢氧化钠水溶液(200mL)在0℃下添加至残余物，随后用二***萃取。将有机层通过硅胶垫(乙酸乙酯/正庚烷，10％)直接进行纯化，从而得到标题化合物(32.4g)。
ESI-MS m/z 283[M+H]+
(8)2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-胺的合成
将3,5-二溴-2-甲氧基吡啶-4-胺(16g)、三甲基硼氧环烷(19.8mL)、Pd(dppf)Cl2-DCM复合体(4.15g)以及碳酸钾(23.5g)的一种混合物在1,4-二噁烷(320mL)和水(32mL)的混合溶剂中在回流下加热12小时。将该反应混合物冷却至室温，并且然后在减压下浓缩。将水和乙酸乙酯添加到该残余物中，随后通过CeliteTM过滤。将滤液用乙酸乙酯萃取，并使有机层经硅胶垫(NH-硅胶)并用乙酸乙酯进行洗脱。将NH-硅胶(30g)添加到所得溶液中，并且将该混合物在减压下进行浓缩。将该残余物通过NH硅胶柱层析法(乙酸乙酯/正庚烷，0％至30％)进行纯化，从而得到标题化合物(4.43g)。
ESI-MS m/z 153[M+H]+
(9)4-溴-2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶的合成
将溴化铜(I)(12.1g)和叔丁基亚硝酸盐(7.07mL)的一种混合物在乙腈溶剂(80mL)中在70℃下加热10分钟。将2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-胺(3.9g)在乙腈(40mL)中的溶液在相同温度下逐滴添加到该反应混合物中，并将该混合物在下70℃搅拌一个小时。将该反应混合物冷却至室温，并且然后在减压下浓缩。将乙酸乙酯和饱和的水性碳酸氢钠溶液添加到该残余物中，并且将该混合物在室温下搅拌30分钟。将该反应混合物通过CeliteTM进行过滤，并将滤液用乙酸乙酯萃取。将该有机层在减压下进行浓缩，并且将该残余物通过NH硅胶柱层析(正庚烷，100％，然后NH-硅胶垫，正庚烷，100％)进行纯化，从而得到标题化合物(4.3g)。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：2.28-2.29(m,3H)，2.29-2.31(m,3H)，3.93(s,3H)，7.77-7.84(m,1H)。
ESI-MS m/z 216[M+H]+
(10)(±)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并 [4,3-c]喹啉-4(5H)-酮的合成
使用微波反应器，将(±)-5-(2,4-二甲氧基苄基)-1-(四氢呋喃-3-基)-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(219mg)、4-溴-2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶(134mg)、Pd(PPh3)4(23.8mg)以及碳酸铯(403mg)的一种混合物在1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)的混合溶剂中在130℃下反应70分钟。将该反应混合物冷却至室温，然后通过硅胶柱层析(乙酸乙酯/正庚烷，10％至90％)直接纯化。将所得偶联产物溶解于TFA(4mL)中，并且将该混合物在70℃下搅拌两个小时。将该反应混合物冷却至室温，并且然后在减压下浓缩。向该残余物中添加饱和碳酸氢钠水溶液，随后用乙酸乙酯萃取。将该有机层在减压下进行浓缩，并且将该残余物通过硅胶柱层析法(DCM，100％，然后乙酸乙酯/正庚烷，50％至100％)进行纯化，从而得到标题化合物(78mg)。
ESI-MS m/z 391[M+H]+
(11)(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并 [4,3-c]喹啉-4(5H)-酮和(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)- 1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮的合成
通过手性柱层析[由大赛璐公司生产的手性柱，AD-H(0.46cm Φx 15cm)，流动相；100％乙醇]分析(±)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮以鉴定在7.8min的(+)形式和在9.7min的(-)形式且证实旋光拆分是可能的。将(±)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(78mg)溶解于乙醇(12mL)和甲醇(12mL)的混合溶剂中，并将该溶液通过棉塞过滤。通过手性柱层析对滤液进行光学拆分。[手性柱：AD-H柱；洗脱溶剂：100％乙醇；流速：10mL/min；洗脱时间：80分钟/洗脱；进样：2mL/进样；短保留时间：(+)形式；长保留时间：(-)形式]，从而得到26.4mg(+)形式和25.2mg(-)形式的标题化合物。
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)：1.92-1.94(m,3H)，1.94-1.96(m,3H)，2.55-2.66(m,1H)，2.76-2.86(m,1H)，4.00(s,3H)，4.09-4.16(m,1H)，4.24-4.37(m,2H)，4.39-4.45(m,1H)，5.61-5.68(m,1H)，7.04(d,J＝1.5Hz,1H)，7.08(dd,J＝1.5Hz,8.3Hz,1H)，7.94(s,1H)，8.13(d,J＝8.3Hz,1H)，8.31(s,1H)，8.86(s,1H)。
ESI-MS m/z 391[M+H]+
将根据以上描述的参考实例1合成的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮用于下述盐的合成。
实例1
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(576.32mg)中添加马来酸(243.97mg)和叔丁基甲醚(6mL)，并将该悬浮液在室温下搅拌2天。通过过滤收集固体并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(713.04mg)，为一种白色固体。
1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)：1.87(s,3H)，1.91(s,3H)，2.52-2.56(m,2H)，3.89(s,3H)，3.93(ddd,J＝8,7,6Hz,1H)，4.03(dddd,J＝8,8,7,2Hz,1H)，4.16(ddd,J＝9,5,3Hz,1H)，4.21(dd,J＝9,6Hz,1H)，5.85-5.89(m,1H)，6.25(s,2H)，7.09(dd,J＝8,1Hz,1H)，7.21(d,J＝1Hz,1H)，7.96(s,1H)，8.18(s,1H)，8.35(d,J＝8Hz,1H)，11.51(s,1H)。
13C-NMR(100MHz，固态)δ(ppm)：13.3，16.1，16.7，29.5，35.9，57.2，58.0，61.9，67.4，69.7，74.6，111.8，114.3，122.5，123.2，125.7，126.9，127.9，132.7，133.8，136.0，138.9，154.8，156.2，157.8，158.9，162.0，163.4，164.7，172.0
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：9.1°，10.1°，11.1°，16.2°，17.6°，18.2°，22.0°，22.4°，23.8°，25.8°。
图1示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例2
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(991.7mg)中添加2-丁酮(10mL)和苯磺酸一水合物(708.0mg)，并将该悬浮液在室温下搅拌2天。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(1393.9mg)，为一种白色固体。
1H-NMR(600MHz,DMSO-d6)δ(ppm)：1.87(s,3H)，1.91(s,3H)，2.52-2.56(m,2H)，3.89(s,3H)，3.93(ddd,J＝8,7,6Hz,1H)，4.01-4.05(m,1H)，4.16(ddd,J＝9,5,3Hz,1H)，4.21(dd,J＝9,6Hz,1H)，5.85-5.89(m,1H)，7.09(dd,J＝8,1Hz,1H)，7.22(d,J＝1Hz,1H)，7.32-7.26(m,3H)，7.59-7.57(m,2H)，7.96(s,1H)，8.18(s,1H)，8.35(d,J＝8Hz,1H)，11.51(s,1H)。
13C-NMR(100MHz，固态)δ(ppm)：12.8，16.8，31.3，35.2，59.1，61.0，61.6，62.0，67.9，70.1，70.6，74.7，111.6，114.0，117.5，122.7，125.4，126.8，128.8，130.1，137.7，139.2，146.4，157.8，159.6，160.7
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：6.6°，9.9°，13.7°，14.6°，19.0°，19.6°，20.5°，21.7°，22.7°，23.5°，25.7°。
图2示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例3
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮盐酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(984.6mg)中添加丙酮(20mL)和5N盐酸(620μL)，并将该悬浮液在室温下搅拌2天。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(1100.21mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：11.2°，12.4°，12.7°，17.1°，23.5°，26.5°，29.4°。
图3示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮盐酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例4
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮氢溴酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(614.45mg)中添加丙酮(6mL)和47％氢溴酸(220μL)，并将该悬浮液在室温下搅拌过夜。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(719.23mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：5.6°，11.1°，12.3°，18.5°，19.3°，22.9°，23.4°，26.3°，29.2°。
图4示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮氢溴酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例5
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮对甲苯磺酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(100.6mg)中添加2-丁酮(4mL)和对甲苯磺酸(65.1mg)，并将该悬浮液在室温下搅拌过夜。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(153.15mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：6.5°，9.8°，13.9°，14.4°，15.3°，18.5°，19.3°，20.3°，22.8°，23.3°，25.4°，28.2°。
图5示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮对甲苯磺酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例6
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮硝酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(22.80mg)中添加乙酸乙酯(300μL)和60％硝酸(5.3μL)，并将该悬浮液在室温下搅拌过夜。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(14.97mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：11.1°，11.7°，14.8°，15.3°，16.4°，19.2°，23.6°，24.2°，25.8°。
图6示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮硝酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例7
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮硫酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(23.53mg)中添加2-丁酮(300μL)和95％硫酸(4μL)，并将该悬浮液在室温下搅拌过夜。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(27.34mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：10.7°，14.0°，14.5°，16.2°，19.1°，20.0°，22.8°，23.6°，25.3°。
图7示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮硫酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例8
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮甲磺酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(22.52mg)中添加2-丁酮(300μL)和甲磺酸(4.5μL)，并将该悬浮液在室温下搅拌过夜。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(28.69mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：12.7°，14.8°，17.8°，18.7°，23.4°，29.8°。
图8示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮甲磺酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例9
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮磷酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(22.29mg)中添加2-丁酮(300μL)和磷酸(4.6μL)，并将该悬浮液在室温下搅拌过夜。在进一步添加至己烷(200μL)并搅拌之后，通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(23.09mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：9.5°，11.3°，15.2°，16.7°，18.4°，23.5°，24.0°。
图9示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮磷酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例10
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮L-酒石酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(27.42mg)中添加丙酮(300μL)和L-酒石酸(20.18mg)，并将该悬浮液在室温下搅拌3天。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(34.89mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：10.1°，14.1°，16.7°，17.4°，18.2°，20.6°，23.4°，24.0°，24.3°，26.5°。
图10示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮L-酒石酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例11
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮丙二酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(27.70mg)中添加丙酮(300μL)和丙二酸(26.65mg)，并将该悬浮液在室温下搅拌3天。通过过滤收集固体材料并于室温下在减压下干燥，从而产生该标题化合物(30.49mg)，为一种白色固体。
粉末X射线衍射角(2θ±0.2°)：10.5°，16.8°，17.4°，17.8°，18.3°，18.9°，21.7°，22.8°，24.2°，25.2°，26.4°。
图11示出了由上述的方法获得的(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮丙二酸盐的晶体的粉末X射线衍射图。
实例12
(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3- c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的合成
向(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(500mg)中添加乙酸乙酯(2mL)，并该混合物在25℃下搅拌20分钟。将一种完全溶解于乙酸乙酯(7.5mL)中的马来酸(223.0mg)溶液添加至上述悬浮液中，并且将该混合物在25℃下搅拌7天。通过过滤收集固体，并用乙酸乙酯(1mL)洗涤晶体并在减压下在40℃下干燥，从而产生该标题化合物(366.9mg)，为一种白色固体。
获得的标题化合物显示出与实例1相同的粉末X射线衍射峰。
[测试实例]
PDE9抑制活性测试实例
1)人重组PDE9蛋白的制备
一种hsPDE9A 1cDNA片段可基于登记在GenBank数据库的hsPDE9A1的碱基序列(登记号：AF048837)，并且通过使用以下序列(北海道***科学有限公司(Hokkaido SystemScience Co.,Ltd.))作为引物以及人海马体cDNA文库(克罗泰克实验室有限公司(Clontech Laboratories，Inc.))作为模板DNA，并使用Pfu50DNA多聚酶(英杰公司(Invitrogen Corp.))，并且通过下列条件的聚合酶链反应(PCR)进行扩增。
hPDE9-1引物：AGGATGGGATCCGGCTCCTCCA(SEQ No.1)
hPDE9A-3引物：CAGGCACAGTCTCCTTCACTG(SEQ No.2)
PCR条件：[96℃，5min]×1个循环，[(96℃，10sec)，(57℃，5sec)，(72℃，2min)]×30个循环
将获得的hsPDE9A 1cDNA片段并入TOPO-TA克隆载体(英杰公司(InvitrogenCorp.))中，并检查碱基序列；此后，将所得物转染到pcDNA3.1/myc His-标签载体(英杰公司(Invitrogen Corp.))中，从而制造用于哺乳动物细胞的人PDE9表达载体。通过使用LIPOFETAMINE 2000试剂(吉博科公司(Gibco))，用瞬时表达转染用于哺乳动物细胞的人PDE9表达载体至HEK293细胞中。经蛋白质印迹法证实，PDE9A在HEK293细胞中表达，然后，将人PDE9A 1cDNA片段转染到pYNG载体(片仓工业公司(Katakura Industries Co.,Ltd.))中，从而制造用于昆虫细胞的表达载体。使用缓冲液A(20mmol/L Tris-HCl，pH：8.0，1mmol/L DTT，10mmol/L咪唑)通过平衡的Ni柱进行均匀化茧蛹的上清液(其中有大量的PDE9表达)的纯化。将该上清液与该Ni柱混合1小时后，使用缓冲液B(20mmol/L Tris-HCl，pH：8.0，1mmol/L DTT)进行清洗，并使用缓冲液C(20mmol/L Tris-HCl，pH:8.0，1mmol/L DTT，100mmol/L咪唑)进行洗脱。将洗脱部分制备型收集，以获得PDE9酶溶液。
2)PDE9抑制作用的测量
在冰冷却下，向包含[3H]-cGMP(0.5μCi/mL)的100μL缓冲液D(40mmol/L Tris-HCl，pH：7.4，10mmol/L MgCl2，1mM DTT，2μM cGMP)溶液中添加10μL用于评估的化合物溶液(其中化合物溶解在DMSO中并且被稀释使得DMSO浓度变为5％的一种溶液)以及90μL通过用缓冲液E(40mmol/L Tris-HCl，pH：7.4，10mmol/L MgCl2，1mM DTT，1mmol/L EGTA)稀释上述制备的PDE9酶溶液而制备的溶液。将该生成的混合溶液在30℃下孵育10min，并且此后在煮沸的水中加热2min以终止PDE9的酶反应。然后，将所得物返回至室温；向其中添加50μL的5’-核苷酸酶(生物分子公司(Biomol GmbH)，10单位/mL)；并且将所得物在30℃下孵育10min，从而将在前面反应中形成的[3H]-5’-GMP转化为[3H]-鸟嘌呤核苷。将500μL的阴离子交换树脂(伯乐(Bio-Rad)AG1-X2树脂，筛目：200-400，H2O:树脂＝2:1)添加到该生成的反应液体中，并允许放置10分钟，并且此后离心(2,000rpm，10min)；并将其中存在[3H]-鸟嘌呤核苷的上清液转移到LumaPlate(铂金埃尔默有限公司(PerkinElmer Inc.))上，并且通过TopCount NXT微板闪烁和荧光计数器(铂金埃尔默有限公司(PerkinElmer Inc.))测量放射性。
使用以下表达式计算该评估化合物的抑制百分率，将一种不包含评估化合物的对照的放射性设为(A)，将一种不包含酶的空白的放射性设为(B)，而将评估化合物的放射性设为(C)。
抑制百分率＝100-{[(C)-(B)]/[(A)-(B)]}×100(％)
评估化合物的PDE9的IC50值由不同浓度的抑制百分率确定。根据参考实例2合成的化合物(I)针对PDE9的IC50值为0.00943μM。
对啮齿类动物脑脊髓液cGMP的作用
将测试化合物给予ICR雄性小鼠(日本查尔斯河实验室有限公司(CHARLES RIVERLABORATORIES JAPAN,INC.))、斯普拉-道来(Sprague-Dawley(SD))雄性大鼠(日本查尔斯河实验室有限公司(CHARLES RIVER LABORATORIES JAPAN,INC.))或朗埃文斯(Long-Evans)(LE)雄性大鼠(动物繁殖研究所(一般财团法人))(Institute for AnimalReproduction(general incorporated foundation))，然后在戊巴比妥钠麻醉下收集脑脊髓液并在-20℃下保存。根据cGMP EIA试剂盒(通用-健康护理公司(GE Healthcare))的乙酰化EIA流程或cGMP EIA试剂盒(开曼化学公司(Cayman Chemical))的非乙酰化流程进行脑脊髓液中cGMP的测量。用下列公式将结果计算为测试化合物给予组(B)中cGMP的量相对于载体给予组(A)中cGMP的量的增加(C)。
cGMP增加(C)＝[(B)-(A)]/(A)x 100(％)
在根据参考实例1合成的化合物(I)的情况下，给予LE大鼠10mg/kg的剂量后1小时，cGMP增加为274％。
对啮齿类动物海马体cGMP的作用
将测试化合物给予SD雄性大鼠(日本查尔斯河实验室有限公司(CHARLES RIVERLABORATORIES JAPAN,INC.))或LE雄性大鼠(动物繁殖研究所(法人))。然后在戊巴比妥钠麻醉下进行微波处理，并且分离海马体，对它们的湿重进行测量，然后冷冻在液氮中并在-80℃下保存。在海马体中cGMP的测量中，添加0.5M高氯酸/1mM EDTA溶液使得湿重占5％(w/v)，并且使该混合物均匀化。均匀化后，将匀浆离心(10000rpm，15min)，并收集上清液。用2M碳酸氢钾溶液中和所收集的上清液，并离心(13000rpm，10min)。根据cGMP EIA试剂盒(通用-健康护理公司(GE Healthcare))的非乙酰化EIA流程进行上清液中cGMP浓度的测量。用下列公式将结果计算为测试化合物给予组(B)中cGMP的量相对于载体给予组(A)中cGMP的量的增加(C)。
cGMP增加(C)＝[(B)-(A)]/(A)x 100(％)
在根据参考实例1合成的化合物(I)的情况下，给予LE大鼠10mg/kg的剂量后1小时，cGMP增加为58％。
溶出试验
将化合物(I)(50mg)、实例1的化合物(30mg)以及实例2的化合物(30mg)中的每一种与相等重量的乳糖水化物一起装入羟丙基甲基纤维素胶囊。使来自安捷伦科技公司(Agilent Technologies)的708-DS配备有小搅拌桨叶和小容器，并用作溶出试验装置。将每个药物填充的胶囊添加到50ml空腹态模拟肠液(包含0.75mM卵磷脂和3mM牛磺胆酸钠的磷酸盐缓冲液pH 6.5)中，该模拟肠液已经被加温到37℃。通过转动搅拌桨在50rpm速度下将药物溶解。随时间从该溶解的溶液中取样，并通过HPLC测量药物浓度。这类使用空腹态的模拟肠液的溶出试验经常被用于评估药物的溶出度和吸收特性(例如，高野(Takano)等人，“难溶性药物的口服吸收：来自小尺度溶出试验的被人吸收的部分的计算机模拟(Oralabsorption of poorly water-soluble drugs:computer simulation of fractionabsorbed in humans from a miniscale dissolution test)”，药物研究(Pharm Res)，第23卷，第1144-1156页，2006)。结果示于表1和图12的曲线图中。相对于当使用它时化合物(I)的浓度，当使用它时实例2的化合物达到的浓度示出2倍更高的值，而当使用它时实例1的化合物的浓度达到4至5倍更高的值。
[表1]
狗中口服吸收特性试验
将化合物(I)(100mg)以及实例1的化合物(130mg：单马来酸盐，就游离形式而言100mg)中的每一种装入羟丙基甲基纤维素胶囊从而制造用于给药的样品。将所得胶囊与少量水一起给予至4只比格(Beagle)狗，并且在给药后0.5、1、2、4、6、8以及24小时的各时间点收集血液。在通过离心获得的血浆中的药物浓度经由LC-MS/MS测量。将化合物(I)和实例1的化合物以交叉方式给予每一个个体，其间有一周的清除时间，并且比较血浆中的药物浓度的变化。结果示于表2和图13的曲线图中。BQL表示在可量化的极限值以下，而NC表示未计算的。血浆药物浓度-时间曲线下面积(AUC)的值示于表3中。当给予化合物(I)时获得的平均AUC值为1.88±0.95μg·h/mL，而当给予实例1的化合物时获得的平均AUC值为4.00±0.45μg·h/mL：吸收率较高并且实例1的化合物的值变化较小。
因此，根据本发明的盐/晶体示出作为用于药物制剂的原料的优选的溶出度和口服吸收特性。
[表2]
[表3]

Claims (3)

1.一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单马来酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)9.1°、10.1°、11.1°、18.2°以及25.8°处具有衍射峰。
2.一种(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮单苯磺酸盐的晶体，在粉末X射线衍射中在衍射角(2θ±0.2°)6.6°、9.9°、13.7°、14.6°以及25.7°处具有衍射峰。
3.一种药物组合物，包含(S)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮与选自下组的酸的盐作为一种活性成分，该组由以下各项组成：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、丙二酸、马来酸、酒石酸、甲磺酸、苯磺酸以及甲苯磺酸。
CN201480017423.2A 2013-04-05 2014-04-03 吡唑并喹啉衍生物的盐及其晶体 Active CN105121440B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2013-079639 2013-04-05
JP2013079639 2013-04-05
PCT/JP2014/059853 WO2014163147A1 (ja) 2013-04-05 2014-04-03 ピラゾロキノリン誘導体の塩およびその結晶

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105121440A CN105121440A (zh) 2015-12-02
CN105121440B true CN105121440B (zh) 2017-05-24

Family

ID=51658438

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201480017423.2A Active CN105121440B (zh) 2013-04-05 2014-04-03 吡唑并喹啉衍生物的盐及其晶体

Country Status (13)

Country Link
US (1) US9573947B2 (zh)
EP (1) EP2982675B1 (zh)
JP (1) JP5666755B1 (zh)
KR (1) KR101997955B1 (zh)
CN (1) CN105121440B (zh)
AU (1) AU2014250392B2 (zh)
BR (1) BR112015024393A2 (zh)
CA (1) CA2907971C (zh)
ES (1) ES2645149T3 (zh)
MX (1) MX359843B (zh)
RU (1) RU2655171C2 (zh)
SG (1) SG11201507897SA (zh)
WO (1) WO2014163147A1 (zh)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6851318B2 (ja) * 2015-11-26 2021-03-31 持田製薬株式会社 ピラゾール誘導体の結晶
EP3632437B1 (en) 2017-06-01 2024-03-13 Eisai R&D Management Co., Ltd. Dementia therapeutic agent combining pyrazoloquinoline derivative and memantine
US11484502B2 (en) * 2017-06-01 2022-11-01 Eisai R&D Management Co., Ltd. Pharmaceutical composition comprising PDE9 inhibitor
CA3061884A1 (en) * 2017-06-01 2019-10-29 Eisai R&D Management Co., Ltd. Lewy body disease therapeutic agent containing pyrazoloquinoline derivative
SG11201909595VA (en) * 2017-06-01 2019-11-28 Eisai R&D Man Co Ltd Dementia therapeutic agent combining pyrazoloquinoline derivative and donepezil
US11530218B2 (en) 2020-01-20 2022-12-20 Incyte Corporation Spiro compounds as inhibitors of KRAS
US11739102B2 (en) 2020-05-13 2023-08-29 Incyte Corporation Fused pyrimidine compounds as KRAS inhibitors
US11767320B2 (en) 2020-10-02 2023-09-26 Incyte Corporation Bicyclic dione compounds as inhibitors of KRAS
WO2023064857A1 (en) 2021-10-14 2023-04-20 Incyte Corporation Quinoline compounds as inhibitors of kras

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05132484A (ja) * 1991-04-26 1993-05-28 Otsuka Pharmaceut Factory Inc ピラゾロキノリン及びピラゾロナフチリジン誘導体
ES2149989T3 (es) 1994-05-24 2000-11-16 Hoffmann La Roche Derivados triciclicos de dicarbonilo.
CA2494785A1 (en) * 2002-08-07 2004-02-19 Mitsubishi Pharma Corporation Dihydropyrazolopyridine compounds
RU2426734C2 (ru) 2003-10-03 2011-08-20 Зм Инновейтив Пропертиз Компани Пиразолопиридины и их аналоги
US20060035920A1 (en) 2004-05-28 2006-02-16 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Chk-1 inhibitors
JP2006045118A (ja) * 2004-08-04 2006-02-16 Mochida Pharmaceut Co Ltd 新規ピラゾロキノロン誘導体
CN101268073B (zh) 2005-09-15 2011-10-19 Aska制药株式会社 杂环化合物、制备方法及其用途
ES2536906T3 (es) 2006-12-13 2015-05-29 Aska Pharmaceutical Co., Ltd. Derivado de quinoxalina
ATE540954T1 (de) 2007-05-11 2012-01-15 Pfizer Aminoheterocyclische verbindungen
UA105362C2 (en) 2008-04-02 2014-05-12 Бьорингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх 1-heterocyclyl-1, 5-dihydro-pyrazolo [3, 4-d] pyrimidin-4-one derivatives and their use as pde9a modulators
KR20110132559A (ko) * 2009-03-05 2011-12-08 아스텔라스세이야쿠 가부시키가이샤 퀴녹살린 화합물
JP5542196B2 (ja) 2009-03-31 2014-07-09 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング １−複素環−１，５−ジヒドロ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン誘導体及びｐｄｅ９ａモジュレーターとしてのそれらの使用
CN103097383B (zh) * 2010-09-07 2015-09-16 安斯泰来制药株式会社 吡唑并喹啉化合物
JP6042060B2 (ja) 2011-09-26 2016-12-14 サノフイ ピラゾロキノリノン誘導体、その調製および治療上の使用
PT2573073E (pt) * 2011-09-26 2015-02-05 Sanofi Sa Derivados de pirazoloquinolinona, sua preparação e sua utilização terapêutica
JP5546693B2 (ja) * 2011-10-07 2014-07-09 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 ピラゾロキノリン誘導体

Also Published As

Publication number Publication date
MX359843B (es) 2018-10-12
KR20150138203A (ko) 2015-12-09
AU2014250392A1 (en) 2015-10-15
JP5666755B1 (ja) 2015-02-12
RU2015140619A (ru) 2017-05-11
WO2014163147A1 (ja) 2014-10-09
KR101997955B1 (ko) 2019-07-08
SG11201507897SA (en) 2015-11-27
RU2655171C2 (ru) 2018-05-24
MX2015013620A (es) 2016-02-25
CN105121440A (zh) 2015-12-02
CA2907971C (en) 2020-12-29
CA2907971A1 (en) 2014-10-09
EP2982675A4 (en) 2016-08-10
BR112015024393A2 (pt) 2017-10-24
EP2982675B1 (en) 2017-08-16
RU2015140619A3 (zh) 2018-03-26
US9573947B2 (en) 2017-02-21
ES2645149T3 (es) 2017-12-04
JPWO2014163147A1 (ja) 2017-02-16
AU2014250392B2 (en) 2018-03-01
EP2982675A1 (en) 2016-02-10
US20160046623A1 (en) 2016-02-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105121440B (zh) 吡唑并喹啉衍生物的盐及其晶体
KR101943680B1 (ko) 피라졸로퀴놀린 유도체
EP3144308B1 (en) Nitrogen-containing heterocyclic compound
CN109790148A (zh) 具有usp30抑制剂活性的氰基取代的杂环
CN105732639A (zh) 作为LRRK2抑制剂的4-(取代的氨基)-7H-吡咯并〔2,3-d〕嘧啶类
CA2811714A1 (en) Imidazotriazinone compounds
CN107810187A (zh) 用于治疗外周疾病的具有咪唑并三嗪酮骨架和咪唑并吡嗪酮骨架的pde9抑制剂
CN105189496B (zh) 吡啶基吡唑并喹啉化合物
CN109923116A (zh) 作为pde2抑制剂的[1,2,4]***并[1,5-a]嘧啶衍生物
US20180179189A1 (en) Adipate forms and compositions of biaryl inhibitors of bruton's tyrosine kinase
CN109890824A (zh) 作为pde2抑制剂的[1,2,4]***并[1,5-a]嘧啶化合物
KR20200013702A (ko) α7니코틴성 아세틸콜린 수용체의 리간드 화합물 및 그 응용
JP2021519294A (ja) 複素環化合物及びその用途
BR112018002597B1 (pt) Compostos, composição farmacêutica e combinação contendo os ditos compostos e uso dos mesmos para prevenir ou tratar doença de chagas, tripanossomíase humana africana, tripanossomíase animal africana e leishmaniose
JP7236458B2 (ja) トリアゾロキナゾリノンの合成
JP5873612B2 (ja) 三環式誘導体ならびにそれらの医薬用途および組成物
CN110357887A (zh) 取代的7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶衍生物及其制备方法和用途
NZ622594B2 (en) Pyrazoloquinoline derivative
KR20040021992A (ko) 1,2,5,6/1,2,3,6-테트라히드로피리디닐테트라히드로사이클로펜타/-헥사이속사졸 유도체 및 그 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant