CN105030937B - 一种用于治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药领域，公开一种用于治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制备方法，该中药组合物为羌活‑威灵仙药对，由以下方法制备得到：取净威灵仙段，用黄酒拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉；将按照上述方法炮制后的威灵仙与羌活按照羌活1‑5重量份，威灵仙1‑5重量份的重量配比关系混合，用40％‑95％乙醇液提取，提取液浓缩，减压蒸干即得。药效学研究结果表明，本发明中药羌活‑威灵仙药对具有显著抗类风湿关节炎作用，在制备治疗类风湿关节炎药物中具有良好应用前景。

Description

一种用于治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制备方法

技术领域：

本发明属于中药领域，具体涉及一种用于治疗类风湿关节炎的中药组合物及其制备方法，该中药组合物为中药羌活-威灵仙药对，其在制备治疗类风湿关节炎的药物中应用效果显著。

技术背景：

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性、对称性、进行性和侵袭性多关节炎为主要表现，以关节滑膜炎及血管翳形成为主要病理特征的、病因不明的、全身性自身免疫性疾病。RA在欧美的发病率为0.5～1.0％，我国患病率为0.32％～0.36％，女性患病率是男性的3倍。RA是导致人群丧失劳动力的主要疾病之一，具有较高的致残率，严重危害人们的健康和生活质量。目前，临床治疗RA的药物主要分为五类：①非甾体抗炎药；②改善病情抗风湿药；③生物制剂；④糖皮质激素；⑤中药及其制剂。由于长期使用带来的诱发胃肠道和肝肾功能损伤及增加心血管不良事件的风险、肝脏和骨髓毒性、骨质疏松及沉重的经济负担，故①～④类药物的临床使用受到一定限制；相比之下，中药以其安全、低毒、副作用小以及多成分、多靶点的作用特点，吸引了大批研究者的目光，从中药中开发、寻找治疗RA的药物，具有重要的社会意义和实用价值。

类风湿关节炎属于中医的“痹症”范畴，中医药治疗此类疾病的实践经验丰富，积累了大量理法方药。羌活-威灵仙药对史载于《太平圣惠方》的“羌活散”方，大羌活汤(出自《卫生宝鉴》)、威灵仙丸(出自《丹溪心法》)和舒筋立安汤(出自《万病回春》)等方剂中均含有羌活-威灵仙药对，其中威灵仙辛温，善走串，通行十二经，祛风除湿，通络止痛，尤善祛风；羌活辛苦温，有祛风胜湿之功，善发散肌表及上交风寒湿邪。两药合用，功能除风湿、通经络、止痹痛，主治等风寒湿痹。迄今为止，未见有关羌活-威灵仙药对在治疗类风湿关节炎方面的生物活性和临床研究的文献报道。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种用于治疗类风湿关节炎的中药组合物。

本发明的另一目的在于提供上述中药组合物在制备治疗类风湿关节炎药物中的应用。

本发明的又一目的在于提供由上述中药组合物制备的用于治疗类风湿关节炎的药物。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

一种用于治疗类风湿关节炎的中药组合物，它包括以下重量份的组分：羌活1～5份、威灵仙1～5份。优选的，它包括以下重量份的组分：羌活1份、威灵仙4份。上述的重量份的组分按照生药量计。

上述的用于治疗类风湿关节炎的中药组合物，采用以下步骤制备：

(1)炮制威灵仙：取净威灵仙段，用黄酒拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉即得；

(2)将步骤(1)中炮制的威灵仙与羌活按比例混合后，用40％～95％乙醇液提取，提取液浓缩，减压蒸干。

步骤(1)中所述的威灵仙与黄酒的重量比为10:1～1.5。

步骤(2)中所述乙醇液的浓度为75％。

上述的中药组合物在制备治疗类风湿关节炎药物中应用。

一种用于治疗类风湿关节炎的药物，由上述的中药组合物和药学可接受的辅料制成。

本发明研究发现，酒炙后的威灵仙和羌活组合物在治疗类风湿关节炎中的应用效果显著高于单独使用酒炙威灵仙治疗类风湿关节炎的应用效果，证明将羌活和酒炙后的威灵仙配合使用可显著提高酒炙后的威灵仙的治疗效果，两者合用具有显著增加药效的作用。

本发明的羌活-威灵仙药对可以作为药物组合物直接用于制备临床用的各种药物制剂，此制剂中含有治疗有效量的羌活-威灵仙药对及医药学上可接受的载体。本发明的羌活-威灵仙药对也可以作为活性部位与其它中药提取物/有效部位或相关化学合成药物与医药学上可接受的材料一起用于制备药物组合物。

上述两种药物组合物均可采用制剂学的常规方法制备成各剂型，如胶囊、片剂、丸剂、口服液、颗粒剂、酊剂、缓释剂等经胃肠道给药剂型，以及注射剂、外用制剂等胃肠外给药剂型。

本发明的有益效果：

药效学试验结果表明，本发明羌活-威灵仙药对能显著抑制胶原性关节炎模型大鼠的足跖肿胀，显著降低关节炎模型大鼠的关节炎积分，并能显著改善上述关节炎模型大鼠的关节组织病理学改变和体重减轻现象。因此，可以用本发明羌活-威灵仙药对作为药物组合物或活性部位制备治疗类风湿关节炎的药物，且两者合用具有显著增加药效的作用。药效学研究结果表明，本发明中药羌活-威灵仙药对具有显著抗类风湿关节炎作用，在制备治疗类风湿关节炎药物中具有良好应用前景。

具体实施方式：

本发明羌活-威灵仙药对的药效学研究

1实验材料

1.1试剂与药品

水合氯醛，国药集团化学试剂有限公司；不完全弗氏佐剂、牛II型胶原(CII)，美国Sigma公司；羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，天津市科密欧化学试剂开发中心；其他化学试剂均购自南京化学试剂有限公司。

阳性对照药：帕夫林(白芍总苷胶囊，TGP)，宁波立华制药有限公司；布洛芬(IBF)，中美天津史克制药有限公司。

本发明以外的受试品，羌活、威灵仙(生)、威灵仙(酒炙)、羌活+威灵仙(生；按羌活1重量份，生威灵仙4重量份配比)分别以75％乙醇液提取，提取液浓缩，减压蒸干，即完成制备。

本发明中药组合物制备：取净威灵仙段10kg，用黄酒1.5kg拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉；取羌活2.5kg，与上述酒炙威灵仙混合，分别以10倍体积量75％乙醇提取3次，提取液合并，过滤，浓缩，减压蒸干，即完成制备。

1.2主要仪器

BS-124S光学读数分析天平，北京Sartorius天平有限公司；78-1磁力搅拌器，常州国华电器有限公司；KH-250DB型数控超声波清洗器，昆山禾创超声仪器有限公司；大鼠足跖容积测量仪，自制；倒置显微镜，Olympus株式会社。

1.3实验动物

Wistar大鼠，雌性，体重140～170g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。动物自由进食和饮水，饲喂标准颗粒饲料，室温18-22℃。适应饲养3天后使用。

2实验方法

2.1大鼠胶原关节炎(CIA)的建立

称取牛CII适量，加入0.05M乙酸使其终浓度为2mg/mL，4℃过夜使之充分溶解。将不完全弗氏佐剂和2mg/mL CII按体积比1:1混合后低温研磨至充分乳化，4℃保存备用。

大鼠以3％水合氯醛麻醉，于尾根和背部共选取5～6个点，以1mL注射器皮内注射CII乳剂，每只大鼠0.2mL。初次注射日记为d0，d7在相同区域避开首次注射点，同法注射CII乳剂，每只大鼠注射0.1mL。

2.2动物分组及给药

大鼠随机分为11组，留取其中10只为正常组，其余大鼠全部用以CIA模型制备。于d14，依据病变程度将制备成功的CIA模型大鼠随机分为模型组(CMC-Na)、羌活组(8g生药/kg.bw)、威灵仙(生)组(8g生药/kg.bw)、威灵仙(酒炙)组(8g生药/kg.bw)、羌活+威灵仙(生)低剂量组(2g生药/kg.bw)、羌活+威灵仙(生)高剂量组(8g生药/kg.bw)、本发明低剂量组(2g生药/kg.bw)、本发明高剂量组(8g生药/kg.bw)、白芍总苷组(TGP,50mg/kg.bw)和布洛芬组(IBF,60mg/kg.bw)，每组10只。分组后即灌胃给药，每天1次，连续14天。

2.3大鼠体重及关节炎症状的评价

2.3.1体重

分别于d0、d7、d14、d17、d21、d24、d27称量各组大鼠体重。

2.3.2足跖肿胀度

分别于与2.3.1相同时间点测量大鼠双后肢踝关节以下容积，以d0、d7、d14、d17、d21、d24、d27的足体积与初次CII免疫前足体积的差值(mL)表示足跖肿胀程度。

2.3.3关节炎评分

分别于与2.3.1相同时间点观察记录大鼠前、后四肢关节病变情况，按5级评分法评价并计算关节炎评分：4＝包括踝关节在内的全部足爪肿胀；3＝踝关节以下的足爪肿胀；2＝趾关节和足跖肿胀；1＝趾关节红肿；0＝无红肿。每只大鼠的关节炎评分为四肢评分累加所得，最大值为16。

2.4标本采集

末次给药后，过量***麻醉处死大鼠。取各组大鼠左踝关节，固定于10％甲醛。

2.5踝关节组织病理检查

取固定于10％甲醛的各组大鼠左踝关节，5％硝酸脱钙5天，5％硫酸钠溶液中和24h，流水冲洗过夜，梯度浓度乙醇脱水，石蜡包埋切片，切片4-5μm(纵切)，常规脱蜡。苏木素-伊红染色，中性树脂封片，光学显微镜观察滑膜组织、关节及关节周围组织的病理组织学变化，对滑膜炎症及骨破坏程度进行评分，轻重程度对应评分为1-5，无病变记0。

3实验结果

3.1对大鼠体重的影响

表1本发明对CIA大鼠体重的影响(mean±SD,n＝10)

^##：与正常组比较p<0.01

^*：与CIA模型组比较p<0.05

^**：与CIA模型组比较p<0.01

由表1可见，所有注射CII的大鼠体重增长逐渐减缓，关节炎症状出现后，CIA模型大鼠体重明显低于正常大鼠，且持续至实验结束(d27)。本发明低剂量(2g生药/kg.bw)、本发明高剂量(8g生药/kg.bw)连续灌胃均能显著改善CIA模型大鼠体重降低现象(p值分别为0.023和0.037)，高剂量作用优于低剂量，高剂量作用均略优于阳性药白芍总苷(TGP,50mg/kg.bw)和布洛芬(IBF,60mg/kg.bw)。

3.2对大鼠足跖肿胀的影响

表2本发明对CIA大鼠足跖肿胀的影响(mL,mean±SD,n＝10)

^##：与正常组比较p<0.01

^*：与CIA模型组比较p<0.05

^**：与CIA模型组比较p<0.01

^Δ：与威灵仙(酒炙)组比较p<0.05

如表2所示，本发明高剂量(8g生药/kg.bw)连续灌胃7天即显著降低CIA模型大鼠足跖肿胀程度(p＝0.002)，其作用显著优于阳性药白芍总苷(TGP,50mg/kg.bw)。本发明低剂量(2g生药/kg.bw)则在连续灌胃10天后，显著降低CIA模型大鼠足跖肿胀程度(p＝0.046)。另外，本发明高剂量(8g生药/kg.bw)在连续灌胃7天后，直至实验结束，降低CIA模型大鼠足跖肿胀程度的效果显著优于威灵仙(酒炙)组(8g生药/kg.bw)。

3.3对大鼠关节炎评分的影响

表3本发明对CIA大鼠关节炎评分的影响(mean±SD,n＝10)

^##：与正常组比较p<0.01

^*：与CIA模型组比较p<0.05

^**：与CIA模型组比较p<0.01

^Δ：与威灵仙(酒炙)组比较p<0.05

如表3所示，本发明高剂量(8g生药/kg.bw)连续灌胃21天即显著降低CIA模型大鼠关节炎评分(p＝0.008)，其作用显著优于阳性药白芍总苷(TGP,50mg/kg.bw)。本发明低剂量(2g生药/kg.bw)则在连续灌胃14天后表现出对CIA模型大鼠关节炎评分的显著降低作用(p＝0.047)。本发明高剂量(8g生药/kg.bw)连续灌胃21天后，直至实验结束，效果显著高于威灵仙(酒炙)组(8g生药/kg.bw)。

3.4对大鼠踝关节组织病理学的影响

表4本发明对CIA大鼠组织病理学的影响(mean±SD,n＝10)

^##：与正常组比较p<0.01

^*：与CIA模型组比较p<0.05

^**：与CIA模型组比较p<0.01

^Δ：与威灵仙(酒炙)组比较p<0.05

表4显示各组大鼠踝关节组织病理学评分。本发明高剂量(8g生药/kg.bw)连续灌胃14天可显著降低CIA模型大鼠踝关节滑膜炎症(p＝0.0002)和骨破坏(p＝0.0006)，对骨破坏的改善作用优于阳性药白芍总苷(TGP,50mg/kg.bw)。本发明低剂量(2g生药/kg.bw)连续灌胃14天可显著改善CIA模型大鼠踝关节的骨破坏(p＝0.01)。本发明高剂量(8g生药/kg.bw)连续灌胃14天对滑膜炎症和骨破坏的改善作用显著优于威灵仙(酒炙)组(8g生药/kg.bw)。

4实验结论

药效学实验结果表明，本发明高剂量(8g生药/kg.bw)灌胃给药可显著减轻CIA大鼠足跖肿胀程度，降低关节炎评分并改善体重降低，明显减轻滑膜炎症和骨破坏，对大鼠CIA有显著治疗作用。研究同时发现，酒炙后的威灵仙和羌活组合物在治疗类风湿关节炎中的应用效果显著高于单独使用酒炙威灵仙治疗类风湿关节炎的应用效果，证明将羌活和酒炙后的威灵仙配合使用可显著提高酒炙后的威灵仙的治疗效果，两者具有增效协同作用。

实施例1

取净威灵仙段10kg，用黄酒1.5kg拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉；取羌活2.5kg，与上述酒炙威灵仙混合，分别以10倍体积量75％乙醇提取3次，提取液合并，过滤，浓缩，减压蒸干，粉碎过筛，得干膏粉，装入胶囊，即得胶囊剂。

实施例2

取净威灵仙段10kg，用黄酒1.5kg拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉；取羌活2.5kg，与上述酒炙威灵仙混合，分别以10倍体积量75％乙醇提取3次，提取液合并，过滤，浓缩，减压蒸干，粉碎过筛，得干膏粉。取上述干膏粉适量，与等量淀粉和糊精混合，以适当浓度乙醇作润湿剂，常规方法制粒，加入适量硬脂酸镁混合，制成片剂。

实施例3

取净威灵仙段10kg，用黄酒1.5kg拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉；取羌活2kg，与上述酒炙威灵仙混合，分别以10倍体积量85％乙醇提取3次，提取液合并，过滤，浓缩，减压蒸干，粉碎过筛，得干膏粉。取上述干膏粉适量，与等量淀粉和糊精混合，以适当浓度乙醇作润湿剂，常规方法制粒，加入适量硬脂酸镁混合，制成片剂。

实施例4

取净威灵仙段10kg，用黄酒1.5kg拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉；取羌活50kg，与上述酒炙威灵仙混合，分别以10倍体积量60％乙醇提取3次，提取液合并，过滤，浓缩，减压蒸干，粉碎过筛，得干膏粉，装入胶囊，即得胶囊剂。

Claims (5)

1.一种用于治疗类风湿关节炎的中药组合物，其特征在于它是由以下重量份的原料药制成：羌活1份、威灵仙4份；

该中药组合物采用以下步骤制备：

（1）炮制威灵仙：取净威灵仙段，用黄酒拌匀，润透，置锅内用文火微炒干，取出，放凉即得；

（2）将步骤（1）中炮制后的威灵仙与羌活按比例混合后，用40%~95%乙醇液提取，提取液浓缩，减压蒸干。

2.根据权利要求1所述的用于治疗类风湿关节炎的中药组合物，其特征在于步骤（1）中所述的威灵仙与黄酒的重量比为10:1~1.5。

3.根据权利要求1所述的用于治疗类风湿关节炎的中药组合物，其特征在于步骤（2）中所述乙醇液的浓度为75%。

4.权利要求1~3中任意一项所述的中药组合物在制备治疗类风湿关节炎的药物中的应用。

5.一种用于治疗类风湿关节炎的药物，其特征在于由权利要求1~3中任意一项所述的中药组合物和药学可接受的辅料制成。