CN104826123A - 一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物 - Google Patents
一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104826123A CN104826123A CN201510167874.0A CN201510167874A CN104826123A CN 104826123 A CN104826123 A CN 104826123A CN 201510167874 A CN201510167874 A CN 201510167874A CN 104826123 A CN104826123 A CN 104826123A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- oleanolic acid
- clathrate
- cyclodextrin
- deoxidation
- beta
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 3beta-hydroxyolean-12-en-28-oic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 0.000 title claims abstract description 58
- JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N Epioleonolsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4CCC3C21C JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 58
- YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N Oleanolic acid Natural products CC1(C)CC2C3=CCC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CCC4(C)C3(C)CCC2(C1)C(=O)O YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 58
- MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N Oleanolinsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 58
- 229940100243 oleanolic acid Drugs 0.000 title claims abstract description 58
- HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N prosapogenin PS-A Natural products C12CC(C)(C)CCC2(C(O)=O)CCC(C2(CCC3C4(C)C)C)(C)C1=CCC2C3(C)CCC4OC1OCC(O)C(O)C1O HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 58
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 title claims abstract description 47
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 45
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 title claims abstract description 32
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 21
- 229960001124 trientine Drugs 0.000 claims description 16
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 14
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims description 5
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims description 5
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 9
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 3
- -1 amino-substituted beta-cyclodextrin Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 abstract 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 abstract 1
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 abstract 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 abstract 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 abstract 1
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 14
- 229950005162 benexate Drugs 0.000 description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 11
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 238000005084 2D-nuclear magnetic resonance Methods 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-tetramine Chemical compound NCCNCCNCCN VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N Diethylenetriamine Chemical compound NCCNCCN RPNUMPOLZDHAAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 description 3
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical compound CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 2
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 238000010025 steaming Methods 0.000 description 2
- 230000006103 sulfonylation Effects 0.000 description 2
- 238000005694 sulfonylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 6-hydroxy-3,4-dihydro-1h-quinolin-2-one Chemical group N1C(=O)CCC2=CC(O)=CC=C21 HOSGXJWQVBHGLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010025880 Cyclomaltodextrin glucanotransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010070840 Gastrointestinal tract irritation Diseases 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 231100000739 chronic poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N gamma-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N 0.000 description 1
- 229940080345 gamma-cyclodextrin Drugs 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002443 hepatoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002966 pentacyclic triterpenoids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000032895 transmembrane transport Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种五环三萜类化合物齐墩果酸与胺类环糊精的包合物,所述的胺类环糊精为氨基取代的β-环糊精,该包合物采用溶剂法或超声法进行制备;齐墩果酸与胺类环糊精形成包合物之后,其在水中的溶解度大大提高,稳定性增加,可望提高其生物利用度。同时,体外抗肿瘤实验表明,该包合物对几种肿瘤细胞株具有很好的体外抗肿瘤活性;其制备方法简便、易于操作且反应条件温和,可用于齐墩果酸新制剂的开发。
Description
技术领域
本发明属于制药技术领域,涉及一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物。
背景技术
齐墩果酸(如式II所示)英文名为Oleanolic Acid,是一种五环三萜类化合物,以游离体和配糖体的形式广泛存在于多种植物(126种)中。现代药理研究表明,齐墩果酸具有抑菌消炎、降酶护肝、强心利尿、升白、增强机体免疫功能等方面的作用。临床上齐墩果酸主要用于治疗急性黄胆型肝炎和慢性中毒型肝炎,也用作抗肿瘤辅助药物。齐墩果酸的水溶性极差,溶出速度很慢,生物利用度低,这些都限制了它的进一步应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种水溶性好、抗肿瘤活性高的齐墩果酸与胺类环糊精的包合物,该包合物含有齐墩果酸和胺类环糊精,其中齐墩果酸与胺类环糊精的物质的量比为1:1~1:10,采用溶剂包合法,在25~60℃下边搅拌边向溶有胺类环糊精的水溶液中加入齐墩果酸,继续避光搅拌24~72 h后,滤去不溶物,减压蒸干溶剂即得齐墩果酸与胺类环糊精的粉末状固体包合物。
本发明化合物还可以采用超声包合法,25~60℃温度范围内,向正在超声振荡中的胺类环糊***溶液中加入齐墩果酸,然后继续避光超声1~10 h后,滤去不溶物,减压蒸干溶剂即得齐墩果酸与胺类环糊精的粉末状固体包合物。
本发明中所述胺类环糊精为6-位单取代的β-环糊精,其结构式如式I所示:
其中,R = -NH2,-NH(CH2)2NH2、-NH(CH2)2NH(CH2)2NH2或-NH(CH2)2NH(CH2)2NH (CH2)2NH2。
所述胺类环糊精为单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精或单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精。
本发明中所述的环糊精(cyclodextrin,简称CD)是直链淀粉在由芽孢杆菌产生的环糊精葡萄糖基转移酶作用下生成的一系列环状低聚糖的总称,其中研究得较多并且具有实际意义的是含有6、7、8个葡糖糖单元的分子,分别称作α-,β-,γ-环糊精。根据X-射线晶体衍射、红外光谱和核磁共振波谱分析的结果,确定构成环糊精分子的每个D(+)-吡喃葡萄糖都是椅式构象,各个葡萄糖单元均以α-1,4-糖苷键连接成环。由于连接葡萄糖单元的糖苷键不能自由旋转,从而使环糊精形成两个开口端一大一小,中间空心的圆筒立体结构。在其空腔结构中,腔内部由于受到C-H键的屏蔽作用而形成了疏水区间,而所有的羟基分布在分子外部,大口端由C2,C3位仲羟基构成,小口端由C6位伯羟基构成,具有较强的亲水性。其立体结构如图9所示;
胺类环糊精为环糊精分子的D(+)-吡喃葡萄糖C6的羟基被氨基取代生成的衍生物,对可包合的客体分子特别是含有酸性基团的分子具有很好的增溶效果。
胺类环糊精的合成方法可参照已有的文献方法进行。首先对吡喃葡萄糖C6位羟基进行单磺酰化得到单6-OTs-CD,然后与胺类化合物反应生成胺类环糊精,其中,所述的磺酰化试剂一般为对甲基苯磺酰氯;所述的氨基化合物包括含氨水、甲胺、乙胺、丙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙烯三胺和三乙烯四胺等,其合成步骤如式IV所示:
IV
其中,m = 7,对应β-环糊精。n = 0、1或2,分别对应的胺类化合物为乙二胺、二乙烯三胺和三乙烯四胺。
药物分子与环糊精及其衍生物形成包合物后,可增加药物水溶解性,提高其稳定性,还可掩盖其不良气味、降低其在胃肠道的刺激性与不良反应并延长药物的释放时间和提高药物的生物利用度,并具有结肠靶向性。同时,应用环糊精包合技术可有效避免或减少有机溶剂、表面活性剂和脂类的使用。环糊精包合物最大的优点在于它可从分子水平改变药物的性质并且对药物的药动学过程几乎没有干扰。目前世界上约有30种含有环糊精的药物制剂上市,在这些制剂中环糊精的作用主要是:替换注射剂或局部应用制剂处方中的有机溶剂;提高第Ⅱ类和一些第Ⅳ类药物的口服生物利用度;减少胃肠道刺激和增加药物的透皮扩散能力等。经过动物和人体实验研究表明,环糊精可以改善几乎所有类型药物的跨膜转运。
本发明包合物的制备方法简便易行,条件温和,适合工业化生产。
附图说明
图1为单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精与其固体包合物1H-NMR的比较示意图;
图2为单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精与齐墩果酸包合物的2D-NMR示意图;
图3为单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精与其固体包合物1H-NMR的比较示意图;
图4为单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精与齐墩果酸包合物的2D-NMR示意图;
图5为单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精与其固体包合物1H-NMR的比较示意图;
图6为单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精与齐墩果酸包合物的2D-NMR示意图;
图7为单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精与其固体包合物1H-NMR的比较示意图;
图8为单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精与齐墩果酸包合物的2D-NMR示意图;
图9为环糊精立体结构式示意图。
具体实施方式
下面通过实施例进一步对本发明中所述方法进行描述,但本发明保护范围不受实施例限制,本实施例中使用的试剂如无特殊说明均为常规市售试剂或按常规方法配制的试剂,使用的方法如无特殊说明均为常规方法。
实施例1:齐墩果酸与单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
(1)单6-OTs-β-CD的制备
取用水重结晶过的β-环糊精210 g,分批加入盛有1300 mL水的三颈瓶中,室温搅拌。称取17.2 g 氢氧化钠溶于50 mL水中,然后缓慢将该氢氧化钠水溶液滴加到β-环糊精的混悬液中至反应液逐渐澄清,继续搅拌1.5 h。待反应液中环糊精完全溶解变澄清后,将含有26.0 g对甲苯磺酰氯的乙腈(80 mL)溶液缓慢滴加至反应液中(约30分钟滴完),继续搅拌2 h后,滤去不溶物,滤液用2 mol/L的盐酸调节至pH = 7.5,此时有大量白色沉淀析出。抽滤收集沉淀,加热条件下将沉淀物溶于450 mL的蒸馏水中,趁热抽滤不溶物,滤液室温静置12 h,收集沉淀物,并用水重结晶几次,直至薄层色谱显示产物纯净。得最终产物17 g,产率8%;产物结构表征如下:1H NMR (500 MHz,DMSO-d6,ppm):δ 2.43(s, 3H, -CH3),3.23-3.71(m, 42H, H-2, -3, -4, -5, -6 of β-CD),4.34-4.45(m, 6H, 6-OH of β-CD),4.84(s, 7H, H-1 of β-CD),5.66-5.88(m, 14H, 2-, 3- OH of β-CD),7.43-7.45(d, 2H, Ar-H),7.74-7.77(d, 2H, Ar-H);
(2) 单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精(EN-β-CD)的制备
将3.0 g(2.3 mmol)6-OTs-βCD溶于20 mL已干燥的乙二胺溶液中,室温搅拌至完全溶解,于氮气保护下80℃反应10 h,待反应完成后,减压蒸去溶剂,向反应瓶中加少量水溶解固体,继续蒸除溶剂,然后加入2 mL水溶解产物,并将其缓慢滴入至400 mL丙酮中,室温搅拌30 min,抽滤收集白色沉淀,并将所得固体粗品于真空干燥箱中干燥24 h。将已干燥的固体粉末再次溶于2 mL蒸馏水中,过滤除去少量不溶物,滤液滴入300 mL丙酮中,收集白色沉淀。重复上述操作至薄层色谱检测无杂质点,即得到纯的单-(6-乙二胺-6-脱氧)-β-环糊精(2.3 g),产率84%;产物结构表征:1H NMR (500 MHz,D2O,ppm):δ 2.8-3.0(m, 4H, -CH2-CH2- of CD),3.4-3.6(m, 14H, H-2, 4 of CD),3.7-3.9(m, 28H, H-3, 5, 6 of CD),4.98(s, 7H, H-1 of CD);
(3) 齐墩果酸与单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
于25 mL的反应瓶中加入单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精(3528 mg,3 mmol)加入20 mL蒸馏水搅拌至溶解,然后加入齐墩果酸(456 mg,1 mmol)的甲醇溶液,在25℃下避光搅拌72 h,过滤除去未溶解的固体药物,再用0.45μm的微孔滤膜过滤,滤液蒸干即得白色粉末,在真空干燥箱中干燥24 h,即得齐墩果酸与单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物(见图3、4)。
实施例2:齐墩果酸与单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
(1)单6-OTs-β-CD的制备方法同实施例1之步骤(1);
(2) 单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精(DETA-β-CD)的制备
将3.0 g(2.3 mmol)单6-OTs-β-CD溶于20 mL干燥的二乙烯三胺中,室温搅拌至完全溶解,氮气保护下,于80℃下反应10 h,待反应结束后,将反应液缓慢滴入400 mL丙酮中,室温搅拌30 min后,抽滤除去滤液,收集白色沉淀,将沉淀溶于少量水,并将其再次滴入300 mL丙酮中,搅拌0.5 h后抽滤收集白色沉淀,将其于真空干燥箱中干燥,将所得固体粉末研碎后加入200 mL乙醇中,超声20 min后,收集白色沉淀。重复上述操作至薄层色谱检测无杂质点,即得纯的单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精(DETA-β-CD)(2.2 g),产率78%;产物结构表征如下:1H NMR (500 MHz,D2O,ppm):δ 2.65-2.76 (m, 8H, -CH2CH2- of CD),3.47-3.58 (m, 14H, H-2, 4 of CD),3.75-3.89 (m, 28H, H-3, 5, 6 of CD),4.98 (s, 7H, H-1 of CD);
(3) 齐墩果酸与单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
于25 mL的反应瓶中加入单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精(6095 mg,5 mmol)加入20 mL的蒸馏水搅拌至溶解,然后加入齐墩果酸(456 mg,1 mmol)的乙醇溶液,在25℃下避光超声10 h,过滤除去未溶解的固体药物,再用0.45μm的微孔滤膜过滤,然后将滤液减压蒸干即可得白色粉末,在真空干燥箱中干燥24 h,即得包合物(见图5、6)。
实施例3:齐墩果酸与单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
(1)单6-OTs-β-CD的制备方法同实施例1步骤(1);
(2)单-6- N3-β-CD的制备
将6.5 g(5.0 mmol)单6-OTs-β-CD溶于15 mL干燥的DMF中,室温搅拌至完全溶解,然后加入叠氮钠 (0.4 g,6.15 mmol), 氮气保护下,于75℃下反应10 h,待反应结束后冷却至室温,将反应液缓慢滴入300 mL丙酮中,搅拌30 min后,抽滤取滤饼,真空干燥得到白色粉末4.7 g, 产率为80%。1H NMR (500 MHz,D2O,ppm):δ 4.90(s,7H, H-1 of CD), 3.38-3. 80 (m, H-2, 3, 4, 5, 6 of CD)。
(3)单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精的制备
将单-6- N3-β-CD (1.5 g, 1.32 mmol)溶解于20 mL干燥DMF中,加入三苯基膦 (1.7 g, 6.49 mmol), 25℃下搅拌2 h。缓慢加入7 mL水,继续反应18 h,过滤除去不容物,将澄清液缓慢滴入300 mL丙酮中,搅拌30 min后过滤取滤饼,真空干燥,得白色粉末0.97 g, 产率65%。1H NMR (500 MHz,D2O,ppm):δ 5.01 (s,7H, H-1 of CD), 3.32-3.95(m, H-2, 3, 4, 5, 6 of CD);
(4)齐墩果酸与单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
于25 mL的反应瓶中加入单-(6-胺基-6-脱氧)-β-环糊精(7931 mg,7mmol)加入20 mL的蒸馏水搅拌至溶解,然后加入齐墩果酸(456 mg,1 mmol)的乙醇溶液,在25℃下避光超声5 h,过滤除去未溶解的固体药物,再用0.45μm的微孔滤膜过滤,然后将滤液减压蒸干即可得白色粉末,在真空干燥箱中干燥24 h,即得包合物。(见图1、2)。
实施例4:齐墩果酸与单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
(1)单6-OTs-β-CD的制备方法同实施例1步骤(1);
(2)单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精的制备
将3.0 g(2.3 mmol)单6-OTs-β-CD溶于20 mL干燥的三乙烯四胺中,室温搅拌至完全溶解,氮气保护下,于85℃下反应12 h,待反应结束后,将反应液缓慢滴入400 mL丙酮中,室温搅拌30 min后,抽滤除去滤液,收集白色沉淀,将沉淀溶于少量水,并将其再次滴入300 mL丙酮中,搅拌0.5 h后抽滤收集白色沉淀,将其于真空干燥箱中干燥,将所得固体粉末研碎后加入200 mL乙醇中,超声20 min后,收集白色沉淀。重复上述操作至薄层色谱检测无杂质点,即得纯的单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精(DETA-β-CD)(1.59 g),产率54%;产物结构表征如下:1H NMR (500 MHz,D2O,ppm):δ 2.61-2.85 (m, 12H, -CH2CH2- of CD),3.38-3.89 (m, H-2, 3, 4, 5, 6 of CD),5.08 (s, 7H, H-1 of CD)。
(3)齐墩果酸与单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的制备
于25 mL的反应瓶中加入单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精(6876 mg,4 mmol)加入20 mL的蒸馏水搅拌至溶解,然后加入齐墩果酸(456 mg,1 mmol),在25℃下避光超声7 h,过滤除去未溶解的固体药物,再用0.45μm的微孔滤膜过滤,然后将滤液减压蒸干即可得白色粉末,在真空干燥箱中干燥24 h,即得包合物(见图7、8)。
实施例5:齐墩果酸与胺类环糊精的包合物的水溶性测定
(1)齐墩果酸溶解度标准曲线的测定
精确配制一系列浓度范围为0.5~5×10-3 mol/L 的齐墩果酸的甲醇溶液,用荧光分光光度计测定其在25℃下激发波长在355 nm处的荧光强度F,然后以浓度 C(mol/L)为横坐标,以荧光强度F为纵坐标拟合标准曲线为:F = 41578 C-4.5329(R2 = 0.9991)。
(2)包合物在水中溶解度的测定
于25 mL 的反应瓶中分别加入0.1 mmol单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精和单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精,然后加入20 mL 的蒸馏水搅拌至溶解,再加入0.3 mmol的齐墩果酸,于室温下避光搅拌3天;最后用0.45μm的微孔滤膜过滤即得到齐墩果酸的胺类环糊精的饱和溶液。取1 mL该饱和溶液用水稀释至10 mL,在25 ℃、激发波长355 nm的条件下测定其荧光强度,最后代入标准曲线计算其浓度。
通过荧光分光光度计测得齐墩果酸的单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精饱和水溶液的荧光强度分别为:F = 80.123,95.973,97.420,225.127。通过标准曲线计算得到齐墩果酸在单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精中的水溶解度分别为:2.1×10-2 mol/L,2.4×10-2 mol/L,2.5×10-2 mol/L,5.5×10-2 mol/L。
通过检索文献得知,25℃下齐墩果酸在水中的溶解度为1.08×105 mol/L(文献:Liu, L. & Wang, X. J. Chem. Eng. Data, 2007, 52, 2527-2528.),由此可见,通过与胺类环糊精进行包合后,齐墩果酸在水中的溶解度得到显著提高,且对其增溶作用最强的为单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精。
实施例6:包合物对人肝癌细胞(HepG2)及人结肠癌细胞(HT-29和HCT116)的体外抑制作用
以实施例1所制备的齐墩果酸与单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物为例。取人肝癌细胞(HepG2)及人结肠癌细胞(HT-29和HCT116)悬液(浓度为4×104个/mL)各180μL加入96孔板,在5%二氧化碳浓度、37℃及饱和湿度下预培养24 h。更换其中的150 μL培养基后,再加入含有不同浓度齐墩果酸与单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的培养基20μL,并继续培养48 h。用MTT法分别测定其OD值,求出生长抑制率,观察高、中、低各浓度的上述包合物对肿瘤细胞增殖的抑制作用,并计算IC50值。上述实验平行进行三次后取其平均值。
表1 齐墩果酸/胺类环糊精包合物在人肝癌细胞(HepG2)及人结肠癌细胞(HT-29和HCT116)中的IC50值(μM)
由表1可以发现,所有四种包合物对人肝癌细胞(HepG2)及人结肠癌细胞(HT-29和HCT116)的抑制活性均强于齐墩果酸本身。其中,以齐墩果酸/单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精包合物的体外抗肿瘤活性最为优越。
Claims (4)
1.一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物,其特征在于:采用溶剂包合法,在25~60℃下边搅拌边向溶有胺类环糊精的水溶液中加入齐墩果酸,继续避光搅拌24~72 h后,滤去不溶物,减压蒸干溶剂即得齐墩果酸与胺类环糊精的粉末状固体包合物,其中齐墩果酸与胺类环糊精的摩尔比为1︰1~1︰10。
2.根据权利要求1所述齐墩果酸与胺类环糊精的包合物,其特征在于:在25~60℃下向超声振荡中的胺类环糊***溶液中加入齐墩果酸,然后继续避光超声1~10 h后,滤去不溶物,减压蒸干溶剂即得齐墩果酸与胺类环糊精的粉末状固体包合物。
3.根据权利要求1或2所述齐墩果酸与胺类环糊精的包合物,其特征在于胺类环糊精为6-位单取代的β-环糊精,其结构式如式I所示:
其中,R = -NH2,-NH(CH2)2NH2、-NH(CH2)2NH(CH2)2NH2或-NH(CH2)2NH(CH2)2NH (CH2)2NH2。
4.根据权利要求3所述齐墩果酸与胺类环糊精的包合物,其特征在于:胺类环糊精为单-(6-氨基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-乙二胺基-6-脱氧)-β-环糊精、单-(6-二乙烯三胺基-6-脱氧)-β-环糊精或单-(6-三乙烯四胺基-6-脱氧)-β-环糊精。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510167874.0A CN104826123B (zh) | 2015-04-10 | 2015-04-10 | 一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510167874.0A CN104826123B (zh) | 2015-04-10 | 2015-04-10 | 一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104826123A true CN104826123A (zh) | 2015-08-12 |
CN104826123B CN104826123B (zh) | 2017-11-10 |
Family
ID=53804559
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510167874.0A Expired - Fee Related CN104826123B (zh) | 2015-04-10 | 2015-04-10 | 一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104826123B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108239185A (zh) * | 2018-01-02 | 2018-07-03 | 昆明理工大学 | 一种奎尼丁与胺类环糊精的包合物 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1424112A (zh) * | 2002-12-17 | 2003-06-18 | 上海医药工业研究院 | 难溶性药物的水溶性包合物及其制备方法 |
CN102871848A (zh) * | 2012-10-15 | 2013-01-16 | 西安雅芝生物科技有限公司 | 五环三萜类化合物环糊精包合物前体脂质体及其制备方法 |
CN104013972A (zh) * | 2014-06-25 | 2014-09-03 | 东北林业大学 | 一种亲水型桦木酸制剂的制备方法 |
-
2015
- 2015-04-10 CN CN201510167874.0A patent/CN104826123B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1424112A (zh) * | 2002-12-17 | 2003-06-18 | 上海医药工业研究院 | 难溶性药物的水溶性包合物及其制备方法 |
CN102871848A (zh) * | 2012-10-15 | 2013-01-16 | 西安雅芝生物科技有限公司 | 五环三萜类化合物环糊精包合物前体脂质体及其制备方法 |
CN104013972A (zh) * | 2014-06-25 | 2014-09-03 | 东北林业大学 | 一种亲水型桦木酸制剂的制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
XUE MA ET AL: "Host–Guest Inclusion System of Scutellarin with Polyamine-b-Cyclodextrin: Preparation, Characterisation, and Anti-Cancer Activity", 《 AUST. J. CHEM.》 * |
杨彩琴等: "相溶解度法研究羟丙基-β-环糊精对齐墩果酸的增溶效果", 《中成药》 * |
颜耀东,冯波,黄晓洁,周志刚: "齐墩果酸-β-环糊精包合物的研究", 《中成药》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108239185A (zh) * | 2018-01-02 | 2018-07-03 | 昆明理工大学 | 一种奎尼丁与胺类环糊精的包合物 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104826123B (zh) | 2017-11-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US8278437B2 (en) | Hydroxypropyl-sulfobutyl-beta-cyclodextrin, the preparation method, the analytical method, and the pharmacutical application thereof | |
JP2010502653A (ja) | シクロデキストリン・ドセタキセルの包接体を含む薬物組成物及びその製造方法 | |
CN108239185A (zh) | 一种奎尼丁与胺类环糊精的包合物 | |
CN104826124A (zh) | 一种白杨素与胺类环糊精的包合物 | |
EP1535916B1 (en) | Inclusion complexes of butylphthalide with cyclodextrin derivatives and processes for their preparation | |
CN104892792A (zh) | 一种氧化型α-1,4-寡聚葡萄糖醛酸及其制备方法和用途 | |
CN112402620A (zh) | 肿瘤微环境还原响应性的纳米药物及其制备方法 | |
CN101658484B (zh) | 胆固醇甲酰氯修饰的壳聚糖共聚物载药胶束的制备方法和应用 | |
CN109675053B (zh) | 鬼臼毒素及其衍生物的靶向制剂及其制备方法 | |
WO2007009265A1 (en) | NOVEL β-CYCLODEXTRIN-BASED MOLECULES AND DRUG DELIVERY COMPOSITIONS | |
CN104208704A (zh) | 一种pH敏感的碳纳米管靶向递药体系的制备方法 | |
CN104826123B (zh) | 一种齐墩果酸与胺类环糊精的包合物 | |
CN103462975A (zh) | 芒果苷与碱性环糊精的包合物 | |
CN102302786A (zh) | β-环糊精聚合物-紫杉醇包合物的制备方法 | |
CN102898433A (zh) | 一种汉防己甲素的没食子酸盐、其药物组合物、其制备方法及其用途 | |
Han et al. | Host–guest inclusion system of norathyriol with β-cyclodextrin and its derivatives: Preparation, characterization, and anticancer activity | |
CN104857003A (zh) | 一种熊果酸与胺类环糊精的包合物 | |
CN102558394A (zh) | 羟丙基-β-环糊精的制备方法 | |
CN113069554B (zh) | 一种齐墩果酸季铵盐-肝素-壳聚糖纳米粒的制备方法及其应用 | |
CN103830293A (zh) | 以常春藤皂苷元为有效成分的药物及其在药物方面的应用 | |
CN106565859B (zh) | 一种手性铂-环糊精键接物及其制备方法和应用 | |
CN102952207B (zh) | 6-(1-甲基-β-咔啉-3-羧酸乙酰基)-6-脱氧-β-环糊精及其与阿霉素超分子包结配合物的制备和应用 | |
JPH085923B2 (ja) | 新規なシクロデキストリン誘導体及びその製法 | |
CN108623711A (zh) | 阿魏酸-环糊精共价偶联化合物及其制备方法和应用 | |
CN102716496A (zh) | 灯盏花乙素与碱性环糊精的包合物及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20171110 |