CN104721620A - 一种增强免疫力的叶类组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种具有增强免疫力的叶类组合物及其制备方法和应用,组合物由明日叶、人参叶、杜仲叶和淡竹叶制成。本发明的组合物不仅剂量小,而且每天只需服用1次,使用方便。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有增强人体免疫力的组合物及其制备方法和应用,属于医药技术领域。
背景技术
提高机体免疫力需要综合措施,包括锻炼、饮食、睡眠、预防接种、免疫调节剂、药物预防和治疗手段等诸多方面。但随着生活节奏的加快,保健品越来越受到人们欢迎。但是现有的保健品服用剂量大、每天服用频率高、口感差、成本高,限制了保健品的使用人群。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有增强免疫力的组合物及其制备方法和应用。
针对上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明的治疗原发性痛经的中药组合物,其特征在于:它是用下列重量份的药材制成:明日叶1~5份、人参叶1~5份、杜仲叶1~5份、淡竹叶1~5份。
本发明的中药组合物优选用下列重量份的原料制成:明日叶1~2份、人参叶1~2份、杜仲叶1~2份、淡竹叶1~2份。
本发明的上述中药组合物加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料,例如稀释剂、黏合剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、矫味剂、包合材料、吸附材料等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂,例如可以是颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、丸剂、口服液、滴丸剂等。
本发明的口服制剂优选为颗粒剂,颗粒剂按照下列步骤制备:称取明日叶、人参叶、杜仲叶和淡竹叶,加水提取,提取液浓缩成稠膏,加入药用辅料制成颗粒剂。
本发明的中药组合物用于制备增强免疫力的保健品的应用。
本发明的有益效果主要是:
(1)本发明的组合物配伍后具有非常显著的增强免疫力效果。
(2)本发明的组合物由明日叶、人参叶、杜仲叶和淡竹叶组成,原料来源广泛,成本低,能够为低免疫力人群提供物美价廉的保健品。
(3)明日叶、人参叶、杜仲叶和淡竹叶自身味道较佳,不需要添加矫味剂即具有良好的口感。
(4)本发明的组合物不仅剂量小,而且每天只需服用1次,使用方便。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明,但应注意本发明的范围并不受这些实例的任何限制。
实施例1
明日叶10g、人参叶10g、杜仲叶10g、淡竹叶10g
将上述药材加20倍量水浸泡1小时,煎煮2次,每次1小时,合并2次煎液,离心过滤,滤液浓缩成稠膏,将稠膏与糊精混合,制成颗粒,干燥,混合均匀,装入胶囊,即得胶囊剂。每粒胶囊200mg,每天服用1次,每次1粒。。
实施例2
明日叶2g、人参叶10g、杜仲叶10g、淡竹叶10g
将上述药材加10倍量水浸泡1小时,煎煮2次,每次1小时,合并2次煎液,离心过滤,滤液浓缩成稠膏,将稠膏与糊精混合,制成颗粒,干燥,混合均匀,装入胶囊,即得胶囊剂。每粒胶囊200mg,每天服用1次,每次1粒。
实施例3
明日叶5g、人参叶10g、杜仲叶10g、淡竹叶5g
将上述药材加10倍量水浸泡1小时,煎煮2次,每次1小时,合并2次煎液,离心过滤,滤液浓缩成稠膏,将稠膏与糊精混合,制成颗粒,干燥,将颗粒与滑石粉、硬脂酸镁混合均匀,压片,即得片剂。每片300mg,每天服用1次,每次1片。
实施例4
明日叶10g、人参叶10g、杜仲叶3g、淡竹叶3g
将上述药材加10倍量水浸泡1小时,煎煮2次,每次1小时,合并2次煎液,离心过滤,滤液浓缩成稠膏,与融化的聚乙二醇4000混合均匀,滴制成滴丸,即得滴丸剂。每丸50mg,每天服用1次,每次8粒。
实施例5
明日叶10g、人参叶10g、杜仲叶5g、淡竹叶5g
将上述药材加10倍量水浸泡1小时,煎煮2次,每次1小时,合并2次煎液,离心过滤,浓缩,加乙醇至乙醇含量达到60%,醇沉48小时,取上清液回收乙醇,加入适量水,活性炭脱色,过滤,分装至口服液瓶中,灭菌,即得口服液。每支口服液10ml,每天服用1次,每次1支。
实施例6
明日叶5g、人参叶5g、杜仲叶5g、淡竹叶5g
将上述药材加10倍量水浸泡1小时,煎煮2次,每次1小时,合并2次煎液,离心过滤,浓缩,加乙醇至乙醇含量达到60%,醇沉48小时,取上清液回收乙醇,加入适量水,活性炭脱色,过滤,分装至口服液瓶中,灭菌,即得口服液。每支口服液10ml,每天服用1次,每次1支。
实施例7
明日叶100g、人参叶100g、杜仲叶100g、淡竹叶100g
将上述药材加20倍量水浸泡1小时,煎煮2次,每次1小时,合并2次煎液,离心过滤,滤液浓缩成稠膏,将稠膏与适量糊精和糖粉混合,制成颗粒,干燥,即制得颗粒剂100g,每g相当于含原生药4g,分装成50包,每包2g。
用法与用量:口服,每天服用1次,每次2g。
实施例8增强免疫力实验
(1)实验动物
清洁级昆明种雄性小鼠200只,质量18~21g,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,在温度18~24℃、湿度40%~70%的环境中饲养。
(2)药物:阳性对照药物破壁灵芝孢子粉,购自北京同仁堂。药物为本发明组合物(按实施例7制备颗粒剂),每g相当于含原生药4g。
(3)动物分组及给药方法
动物分为4大组,每大组50只小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组及高、中、低剂量药物组。免疫实验I组测定迟发性***反应;免疫实验Ⅱ组测定碳廓清能力;免疫实验Ⅲ组测定淋巴细胞转化功能;免疫实验Ⅳ组测定巨噬细胞吞噬作用。阴性对照组给予纯化水;阳性对照组给予破壁灵芝孢子粉,剂量为1000mg/Kg;高、中、低药物组剂量分别为297mg/Kg、99mg/Kg、33mg/Kg,按体重计算相当于人拟临床用量的9、3、1倍。各组老鼠连续灌胃给药15天。
(4)实验方法和结果
①迟发性***反应
小鼠末次给药后,每只小鼠腹部去毛,范围约3cm×3cm,并将含1%DNCB的丙酮麻油溶液(1:1,V/V)50μl均匀涂抹致敏,次日强化1次;正常组小鼠去毛后涂抹等量无DNCB的丙酮麻油溶液。致敏7天,将1%DNCB丙酮麻油溶液10μl均匀涂抹于各组小鼠右耳内外两面进行攻击,左耳涂抹等量无DNCB的丙酮麻油溶液。攻击后24h,颈椎脱臼处死小鼠,剪下左右耳壳,称重,计算左右耳重量之差。数据处理后得到如下结果:
项目 | 阴性对照组 | 阳性对照组 | 低剂量组 | 中剂量组 | 高剂量组 |
左右耳重量之差(mg) | 2.15±1.02 | 3.82±1.03* | 5.07±1.05* | 5.62±1.02* | 6.52±1.03* |
*表示与阴性对照组相比p<0.05
②碳廓清能力
小鼠末次给药30min后,尾iv印度墨汁(0.1ml/10g)。注射前按印度墨汁每1ml加入生理盐水4ml稀释。墨汁一经注入立即计时。分别于注射后2,10min从动物内眦静脉丛取血20μl。将取得的血加入2ml 0.1%碳酸钠溶液中摇匀。约2h后用酶标仪在650nm波长处测定吸光度(OD)值。按下列公式计算廓清指数(K):K=(logOD1-logOD2)/(T10-T2)。式中,OD1为T1(动物注射印度墨汁2min)时的OD值;OD2为T2(动物注射印度墨汁10min)时的OD值。吞噬系数a=K×1/3×体重/(肝重+脾重)。数据处理后得到如下结果:
项目 | 阴性对照组 | 阳性对照组 | 低剂量组 | 中剂量组 | 高剂量组 |
吞噬系数 | 10.63±1.15 | 13.57±1.09* | 15.82±1.08* | 16.95±1.06* | 17.72±1.03* |
*表示与阴性对照组相比p<0.05
③淋巴细胞转化功能
小鼠末次给药后,颈椎脱臼处死,无菌取脾,置于盛有适量无菌Hank’s液的平皿中,轻轻将脾磨碎,制成单细胞悬液,200目筛网过滤,用Hank’s液洗涤2次,每次离心10分钟计数活细胞数(应在95%以上),调整细胞浓度为3×106个/ml。将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中,每孔1ml,75μl ConA(7.5μg/ml)。置37℃、5%CO2培养箱中培养72小时。培养结束前4小时,每孔轻轻吸去上清液0.7ml,加入0.7ml不含小牛血清的RPMI 1640培养液,同时加入MTT(5mg/ml)50μl孔,继续培养4小时。培养结束,每孔加入1ml酸性异丙醇,吹打混匀,使紫色结晶完全溶解。将溶解液移入2ml比色杯中,在570nm波长处测定光密度值(OD)。比较加与不加Con A的吸光度值之差,作统计处理,数据处理后得到如下结果:
项目 | 阴性对照组 | 阳性对照组 | 低剂量组 | 中剂量组 | 高剂量组 |
吸光度值之差 | 0.14±0.23 | 0.18±0.11* | 0.22±0.21* | 0.25±0.11* | 0.26±0.12* |
*表示与阴性对照组相比p<0.05
④巨噬细胞吞噬作用
新鲜公鸡血,载玻片,快速姬姆萨染液。
阿氏液的配制:精确称取葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.80g、柠檬酸0.05g、氯化钠0.42g,用双蒸水溶解并定容至1000ml。
鸡血红细胞悬液的配制:选用健康绵羊,从血液样本放入有玻璃珠的无菌三角烧瓶中,盖上瓶塞,用手朝同一个方向摇动,经充分混合直至凝块完全形成,去除纤维蛋白。把血液样本移入含有阿氏液的三角烧瓶中,轻轻摇匀,置4℃冰箱贮藏,备用。使用前取适量抗凝鸡血用无菌生理盐水洗涤3次,每次2000rpm离心10min,与无菌生理盐水按照体积比1:50配成细胞悬液(有溶血现象的不能使用)。
小鼠末次给药后,每鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液1ml,间隔30min颈椎脱臼处死,固定于鼠板上,剪开腹壁皮肤,注射生理盐水2ml,转动鼠板1min,吸出腹腔洗液1ml分滴于2片玻片上,37℃孵箱30min,用生理盐水漂洗、晾干,以丙酮+甲醇(1+1)固定,4%Giemsa-磷酸缓冲液染色3min,再以蒸馏水漂洗晾干,用油镜镜检,计算吞噬指数。数据处理后得到如下结果:
项目 | 阴性对照组 | 阳性对照组 | 低剂量组 | 中剂量组 | 高剂量组 |
吞噬系数 | 0.15±0.21 | 0.19±0.12* | 0.23±0.11* | 0.26±0.01* | 0.28±0.12* |
(5)实验结果分析
从以上结果可以看出,本发明组合物低剂量组在口服剂量仅为阳性对照药物破壁灵芝孢子粉的三十分之一时,就显示了更好的免疫力增强效果。
Claims (5)
1.一种具有增强免疫力的组合物,其特征在于:它是用下列重量份的药材制成:明日叶1~5份、人参叶1~5份、杜仲叶1~5份、淡竹叶1~5份。
2.如权利要求1所述的组合物,其特征是由下列重量份的药材制成:明日叶1~2份、人参叶1~2份、杜仲叶1~2份、淡竹叶1~2份。
3.权利要求1所述的中药组合物的制备方法,其特征是:按照常规的中药制剂方法制备成任何一种常用的口服制剂。
4.按照权利要求3所述的中药组合物的制备方法,其特征在于,所述口服制剂为颗粒剂,颗粒剂按照下列步骤制备:
称取明日叶、人参叶、杜仲叶和淡竹叶,加水提取,提取液浓缩成稠膏,加入药用辅料制成颗粒剂。
5.权利要求1所述的中药组合物用于制备增强免疫力的保健品的应用。
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