CN104706655B - 注射用环磷腺苷葡胺粉针剂药物组合物和制法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及注射用环磷腺苷葡胺粉针剂药物组合物和制法。具体地说，本发明一方面涉及一种药物组合物，其中包含：环磷腺苷、葡甲胺、甘露醇以及任选的酸碱调节剂；其中包含的物料以环磷腺苷每10重量份计，葡甲胺的量为5.5～6.5重量份，甘露醇的量为9～15重量份，所述酸碱调节剂的用量是，使得该药物组合物在加水溶解并稀释制成每1ml中含环磷腺苷10mg的溶液时，该溶液的pH值为5.5～7.0。本发明粉针剂组合物可用于心力衰竭、心肌炎、病窦综合征、冠心病及心肌病，还可用于心律失常的辅助治疗。本发明的注射用环磷腺苷葡胺粉针剂药物组合物具有良好的药学性质。

Description

注射用环磷腺苷葡胺粉针剂药物组合物和制法

技术领域

本发明属于医药制剂技术领域，涉及一种可用于心力衰竭、心肌炎、病窦综合征、冠心病及心肌病，还可用于心律失常的辅助治疗的药物，特别是涉及一种注射用环磷腺苷葡胺粉针剂药物组合物，以及它们的制备方法，该注射用环磷腺苷葡胺粉针剂药物组合物具有良好的药学性质。

背景技术

本发明涉及的注射用环磷腺苷葡胺粉针剂是一种有效的可用于心力衰竭、心肌炎、病窦综合征、冠心病及心肌病，还可用于心律失常的辅助治疗的药物。据信本发明的注射用环磷腺苷葡胺粉针剂通常可用于以下疾病：心血管疾病(冠心病、风心病、心肌炎、心律失常等)；脑血管疾病(脑缺血、脑血栓及其后遗症)；脑血管意外；肿瘤病人；手术病人(各种骨科手术、颅脑手术、器官移植、麻醉前常规用药等)；糖尿病、肾病等各种慢性消耗性疾病；各种肝炎；哮喘，银屑病，老年慢性支气管炎。

环磷腺苷(Adenosine Cyclophosphate)的化学名为6-氨基-9-β-D-呋喃核糖基-9H-嘌呤-4’,5’-环磷酸氢酯，分子式为C10H12N5O6P，分子量为329.21，其化学结构式为：

由于环磷腺苷微溶于水，在环磷腺苷中增加葡甲胺(Meglumine，1-脱氧-1-(甲氨基)-D-山梨醇，分子式C7H17NO5，分子量195.22)可以增加其溶解性，同时葡甲胺对磷酸二酯酶有一定的抑制作用，使之对环磷腺苷的分解作用降低，故环磷腺苷葡胺的正性肌力作用较相当量的环磷腺苷更强，因此临床常把环磷腺苷与葡甲胺结合成环磷腺苷葡胺使用，药理作用环磷腺苷葡胺为非洋地黄类强心剂，具有正性肌力作用，能增强心肌收缩力，改善心肌泵血功能，有扩张血管作用，可降低心肌耗氧量；改善心肌细胞代谢，保护缺血、缺氧的心肌；能改善窦房结P细胞功能。现有技术 已有环磷腺苷葡胺注射液有不溶性微粒不稳定，遇光易降解等缺点，稳定性心较差。

环磷腺苷是一种核苷酸类药物，为非洋地黄类强心药。环磷腺苷(cAMP)是细胞内参与调节物质代谢和生物学功能的重要物质，是生命信息传递的“第二信使”。作为一个心血管药物，环磷腺苷具有穿透性好、药理作用温和、稳定性高、毒副作用小的优点。在体内环磷腺苷可以促进心肌细胞的存活，增强心肌细胞抗损伤、抗缺血和缺氧能力；促进钙离子向心肌细胞内流动，增强磷酸化作用，促进兴奋-收缩偶联，提高心肌细胞收缩力，增加心输出量；同时还扩张外周血管，降低心脏射血阻抗，减轻心脏前后负荷，增加心排出量，改善心功能。从而对心脏起到营养心肌、正性肌力、舒张血管、抗血小板凝聚和抗心律失常的作用。在临床上主要用于治疗心功能不全、心绞痛和心肌梗死。尤其是对洋对黄类强心药中毒或不敏感的患者。

进入细胞的环磷腺苷在发挥生物学效应后被磷酸二酯酶降解成5-腺苷-5′-磷酸(5-AMP)失去活性，进而被分解成腺苷和磷酸。环磷腺苷在临床上用于心功能不全、心绞痛和心肌梗死；对洋地黄类强心药中毒或不敏感的患者；治疗心律失常的辅助药物。

由于环磷腺苷的溶解性不足，人们将其制成与葡甲胺以克分子比1:1的方式混合制成注射剂以增加环磷腺苷的溶解度。尽管制备环磷腺苷葡胺制剂例如其粉针剂或水针剂时是以环磷腺苷和葡甲胺两种物料以克分子比1:1的比例直接投料制备得到的，但是人们偶有将其称为一种复盐的说法，例如据说形成以下结构的化合物：

现有技术中有诸多有关环磷腺苷葡胺技术例如其制剂技术例如其粉针剂或水针剂的技术报道。

CN101780099A(201010108233.5，邓学峰)涉及的环磷腺苷葡胺组合药物或是环磷腺苷组合药物，由如下重量份数的药效成分制成:环磷腺苷葡胺或是环磷腺苷20-60，赖氨酸阿司匹林100-200，还原型谷胱甘肽与维生素C重量比1∶10-15混合物200-300。发明了制备方法。本发明的环磷腺苷葡胺组合药物或是环磷腺苷组合药物，消除了现有技术制备的环磷腺苷葡胺或环磷腺苷的发热、皮疹、疼痛的不良反应。

CN103613626A(201310619163.3，美林)涉及一种环磷腺苷化合物及其环磷腺苷葡胺药物组合 物。本发明环磷腺苷化合物为晶体，采用X-射线粉末衍射测定，其图谱中特征峰在2θ±0.2°为5.8°、6.9°、7.6°、11.3°、16.5°、19.2°、21.7°、22.6°、24.0°、25.9°、30.1°、31.2°、33.4°显示。本发明还提供有效成分为本发明所述的环磷腺苷化合物的注射液和环磷腺苷葡胺组合物注射液及其环磷腺苷葡胺葡萄糖组合物注射液。本发明环磷腺苷注射液相比现有技术稳定性有显著提高，处方中添加L-苹果酸、酒石酸钠可以进一步提高稳定性。

CN102988305A(201210303740.3，姚云)涉及一种含有环磷腺苷葡胺化合物的药物组合物，特别涉及一种环磷腺苷葡胺的冻干粉针制剂及其制备方法，每1000支注射剂，由以下配比的组分制成：环磷腺苷葡胺20g；甘露醇100-200g；EDTA钙1-3g；维生素C1-2g，摩尔比为1：4的柠檬酸氢二钠和柠檬酸三钠缓冲液2000ml。

CN1579413A(200410013546.7，江卫世)公开了注射用环磷腺苷葡胺及其制备工艺。在环磷腺苷葡胺溶液中，随着保存时间的延长，环磷腺苷会逐渐析出，使药液发生变质、浑浊，给病人应用会发生严重的不良反应，从而影响药品的疗效和用药的安全性。注射用环磷腺苷葡胺，其组成包括:环磷腺苷，所述的环磷腺苷与葡甲胺及赋形剂制成冻干粉针剂，其重量份数为环磷腺苷1.7～63、葡甲胺1.0～37、赋形剂0.675～90，所述的环磷腺苷与所述的葡甲胺的重量份数比为1.7∶1，pH值为3.5-9.0，性状为白色或类白色冻干块状物或粉末，与三氯化铁试液反应初显棕红色沉淀，随即溶解成棕红色溶液。本产品用于治疗心力衰竭、心肌炎、病窦综合症、冠心病及心肌病，也可用于心律失常的辅助治疗。

CN1459288A(03124559.5，赵琛)涉及一种环磷腺苷葡胺大输液制剂及其制备方法以及该大输液制剂中环磷腺苷葡胺含量测定方法。环磷腺苷葡胺的等渗大输液制剂，其配方为100ml制剂中含主药环磷腺苷葡胺54-66mg，等渗介质葡萄糖4.5-5.5g或氯化钠0.85-0.95g。本发明确定了环磷腺苷葡胺大输液制剂稳定的关键条件pH值范围及其大输液制剂制备方法、并解决了环磷腺苷葡胺含量测定方法，有利于对环磷腺苷葡胺大输液制剂生产质量的控制，从而制定合适的生产方法，使环磷腺苷葡胺大输液制剂得以工业化大批量生产成为可能。使用本制剂，可避免从小针抽取药液注入葡萄糖或氯化钠大输液的中间环节，杜绝了用药过程中的交叉感染和污染，使用药更为安全、方便。本发明可制成多种规格，供医护人员酌情选用。

CN101721357A(200810230677.9，华中)公开了环磷腺苷葡胺大容量注射剂的一种过滤方法。本发明将环磷腺苷葡胺大容量注射液的配制液首先经预处理，然后再经超滤技术处理，确保了大分子无效成分被完全去除，制成的注射剂澄明度高、有关物质小、热原合格、稳定性好。

CN1923180A(200610116409.5，万邦)及一种注射用环磷腺苷葡胺的制备工艺，属化学制药。一种注射用环磷腺苷葡胺的制备工艺:取6％环磷腺苷葡胺溶液并在其溶液中加入赋形剂无菌粉， 搅拌溶解，加入注射用水稀释，调PH值在5.5～7.0范围内，冷却，当品温达到-35℃至1-2小时后，冷凝，当冷凝器温度降至-45℃时，抽真空至压力为-1.5×10-2KPA，以3℃/小时速度升温，当品温达室温或30℃以上，保温2小时，整个冻干过程需24-26小时。本发明的注射用环磷腺苷葡胺，是采用现代制剂技术制成的无菌冻干粉针剂，可常温运输、保存，提高了该产品的稳定性和安全性。本产品的制备工艺简单，科学合理，容易操作。

CN101455631A(200910060427.X，德康)涉及一种环磷腺苷葡胺注射液及其制备工艺，它是将枸橼酸放入磁力搅拌罐中，加配制量50％注射用水搅拌使溶解，再将环磷腺苷、葡甲胺加入上述溶液中，搅拌使溶解，并按体积加入0.02％针用活性炭，搅拌30分钟，粗滤除炭，制得环磷腺苷葡胺溶液备用，补加注射用水至全量，用10％氢氧化钠溶液调节PH值至6.0-6.5，制成无色的澄明注射液。本发明不但具有作用直接、快速等优点，而且本品不良反应少，可常温运输、保存，因而提高了该产品的稳定性和安全性。

CN102283804A(201010214356.7，方明)涉及一种环磷腺苷葡胺注射液及其制备方法。其制备工艺是取适量注射用水，加入氯化钠、环磷腺苷、葡甲胺，搅拌使完全溶解，按体积加入0.05～0.2％(W/V)针用活性炭，搅拌15～30分钟，过滤除炭，补加注射用水至近全量，用磷酸盐缓冲液调pH值至6.0～6.5之间，补加注射用水至全量，检测半成品合格后，过滤，灌封(全过程充氮气)，灭菌，灯检、包装即得。其优点在于:选用了适宜的溶媒及附加剂，改善了环磷腺苷葡胺的溶解性及稳定性，采用最终灭菌的制备方法，有效地保证了药品的无菌保证水平。具有组方、工艺简单，生产成本低，药物稳定性、安全性强等特点。

CN102600070A(201110435919.X，德康)涉及一种化学药品的制备方法，具体地说是一种环磷腺苷葡胺组合物注射液及其制备。其重量份数为：环磷腺苷5-15份、葡甲胺3-10份、枸橼酸2.0-2.2份、氢氧化钠0.6-0.8份、氯化钠2-4份、注射用水2-5份；制备步骤如下：取枸橼酸，加注射用水搅拌溶解后，用氢氧化钠调节pH值至5.9～6.5形成缓冲溶液，再加入氯化钠和助溶剂搅拌溶解，加入注射用水，边搅拌边加入环磷腺苷、葡甲胺，待完全溶解后，加入活性炭搅拌，经过滤、回流制成无色的澄明液体。本发明注射液澄明度好，稳定性好，用药安全。

CN102796156A(201210314213.2，宁辉)涉及一种环磷腺苷二葡甲胺化合物及其制备方法，提供由1分子环磷腺苷与2分子的葡甲胺形成的化合物、其制备方法，以及包含它的药物组合物。所述化合物水溶性、稳定性均优于现有化合物。

CN102258531A(201110102704.6，宁辉)提供了一种含有环磷腺苷与葡甲胺的药物组合物及其制备方法，其包含作为活性成分的环磷腺苷、作为稳定剂的葡甲胺和作为骨架的甘露醇，以一定配比存在。本发明组合物使环磷腺苷的降解最小化，从而保护了药物稳定性、有效性和安全性。

CN101455631A(200910060427.X，德康)涉及一种环磷腺苷葡胺注射液及其制备工艺，它是将枸橼酸放入磁力搅拌罐中，加配制量50％注射用水搅拌使溶解，再将环磷腺苷、葡甲胺加入上述溶液中，搅拌使溶解，并按体积加入0.02％针用活性炭，搅拌30分钟，粗滤除炭，制得环磷腺苷葡胺溶液备用，补加注射用水至全量，用10％氢氧化钠溶液调节PH值至6.0-6.5，制成无色的澄明注射液。本发明不但具有作用直接、快速等优点，而且本品不良反应少，可常温运输、保存，因而提高了该产品的稳定性和安全性。

然而，现有的环磷腺苷葡胺制剂特别是其冻干粉针剂仍然存在有待克服的技术问题。因此，本领域技术人员仍然期待有新的方法来制备具有良好药学性能的注射用环磷腺苷葡胺冻干粉针剂。

发明内容

本发明目的在于提供一种具有良好药学性能的注射用环磷腺苷葡胺冻干粉针剂。本发明人已经出人意料地发现，具有本发明组合物特征的注射用环磷腺苷葡胺冻干粉针剂能够有益地实现上述目的。本发明因此而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了一种药物组合物，其中包含：环磷腺苷、葡甲胺、甘露醇以及任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中包含的物料以环磷腺苷每10重量份计，葡甲胺的量为5.5～6.5重量份；例如葡甲胺的量为5.75～6.25重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中包含的物料以环磷腺苷每10重量份计，甘露醇的量为9～15重量份；例如甘露醇的量为10～14重量份。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中酸碱调节剂的用量是，使得该药物组合物在加水溶解并稀释制成每1ml中含环磷腺苷10mg的溶液时，该溶液的pH值为5.5～7.0，例如pH值为6.0～6.5。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中还任选地包括糖类。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，所述糖类选自蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、麦芽糖等。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中包含的物料以环磷腺苷每10重量份计，糖类的量为0.5～5重量份；例如糖类的量为0.5～2重量份。出人意料地发现，使用适量的特定糖类可以克服本发明组合物的某种不良性质。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中包含：环磷腺苷10重量份、葡甲胺5.5～6.5重量份、甘露醇9～15重量份、糖类0.5～5重量份，以及任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中包含：环磷腺苷10重量份、葡甲胺5.75～6.25重量份、甘露醇10～14重量份、糖类0.5～2重量份，以及任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其加水溶解并稀释制成每1ml中含环磷腺苷10mg的溶液，该溶液的pH值为5.5～7.0，例如pH值为6.0～6.5。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其是冷冻干燥粉针剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其在冷冻干燥之前的溶液除包括环磷腺苷、葡甲胺、甘露醇以及任选的糖类和任选的酸碱调节剂外，还包括注射用水。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其在冷冻干燥之前的溶液除包括环磷腺苷、葡甲胺、甘露醇以及任选的糖类和任选的酸碱调节剂外，还包括注射用水，所述溶液的固形物含量为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，所得溶液中的固形物含量为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中包含：环磷腺苷10重量份、葡甲胺5.5～6.5重量份(例如5.75～6.25重量份)、甘露醇9～15重量份(例如10～14重量份)、糖类0.5～5重量份(例如0.5～2重量份)，以及任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中酸碱调节剂的用量是，使得该药物组合物在加水溶解并稀释制成每1ml中含环磷腺苷10mg的溶液时，该溶液的pH值为5.5～7.0，例如pH值为6.0～6.5。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其是冷冻干燥粉针剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其在冷冻干燥之前的溶液除包括环磷腺苷、葡甲胺、甘露醇以及任选的糖类和任选的酸碱调节剂外，还包括注射用水。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其在冷冻干燥之前的溶液除包括环磷腺苷、葡甲胺、甘露醇以及任选的糖类和任选的酸碱调节剂外，还包括注射用水，所述溶液的固形物含量为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其用注射用水复溶到基本上与冷冻干燥前溶液相同的体积，所得溶液中的固形物含量为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中包含：环磷腺苷10重量份、葡甲胺5.5～6.5重量份(例如5.75～6.25重量份)、甘露醇9～15重量份(例如10～14重量份)、糖类0.5～5重量份(例如0.5～2重量份)，以及任选的酸碱调节剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其是冷冻干燥粉针剂，其每瓶中包括的环磷腺苷重量为10～100mg，例如每瓶中包括的环磷腺苷重量为10～75mg，例如每瓶中包括的环磷腺苷重量为15～50mg。

众所周知，经低温冷冻-真空干燥而获得的冷冻干燥粉针剂(通常简称为冻干粉针剂或冻干粉针)，其是首先将各物料用溶剂溶解(通常而言是用水溶解)，配制成一溶液，然后使该溶液进行低温冷冻，再进行抽真空、升华、干燥而获得的一种基本无水(通常而言水含量低于8％，特别是通常低于5％，特别是通常低于3％)的粉末状物或块状物。因此，该固体冻干物的酸碱度通常通过配制过程调节溶液的pH值来控制；或者可以通过处方调整以使获得的固体冻干物在规定的溶解/稀释程度下控制该溶解/稀释液的pH值来控制(此称为控制固体冻干物的酸碱度)；后一方式通常更为普遍使用，例如药典中所载的诸多冻干粉针剂均以此方式控制制品的酸碱度，而这种方式控制产品的酸碱度通常可以不具体规定酸碱调节剂的处方量，而仅规定终产品的酸碱度即可。同样适用于本发明的是，根据本发明第一方面任一实施方案所述的药物组合物，其中所述任选的酸碱调节剂的量是，使所述冻干粉针剂用注射用水溶解成含活性成分10mg/ml浓度的溶液时该溶液的pH值在5.5～7.0范围内的量，例如该溶液的pH值在6.0～6.5范围内的量。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其基本上是按包括如下的步骤制备的：

(a)称取处方量的环磷腺苷、葡甲胺和甘露醇、和任选的糖类，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要 时用酸碱调节剂调节该溶液至pH符合规定的范围；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中步骤(b)所述pH符合规定的范围是指：当将该溶液用注射用水稀释至含环磷腺苷10mg/ml的浓度时，所得稀释溶液的pH值在5.5～7.0范围内，例如该稀释溶液的pH值在6.0～6.5范围内，例如该稀释溶液的pH值为6.2。尽管步骤(b)所得溶液的环磷腺苷浓度(约12mg/ml)高于终产品测定pH值的规定浓度(约是1.2倍)，但是本领域技术人员可以容易地将步骤(b)溶液稀释1.2倍并测定所得稀释液的pH值，根据该pH值确定步骤(b)所得溶液需要调节酸碱性的幅度。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其为冷冻干燥粉针剂，其照中华人民共和国药典2010年版二部(在本发明中可简称为“中国药典2010版二部”或类似称呼)附录IX C不溶性微粒检查法中的“第一法(光阻法)”检查，每个供试品容器中含≥10μm的微粒数小于6000粒，例如小于3000粒，例如小于1500粒，例如小于1000粒，例如小于500粒，例如小于250粒。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其为冷冻干燥粉针剂，其照中华人民共和国药典2010年版二部(在本发明中可简称为“中国药典2010版二部”或类似称呼)附录IX C不溶性微粒检查法中的“第一法(光阻法)”检查，每个供试品容器中含≥25μm的微粒数小于600粒，例如小于300粒，例如小于150粒，例如小于100粒，例如小于50粒，例如小于25粒。

根据本发明第一方面任一实施方案的药物组合物，其为冷冻干燥粉针剂，其照中华人民共和国药典2010年版二部(在本发明中可简称为“中国药典2010版二部”或类似称呼)附录IX C不溶性微粒检查法中的“第一法(光阻法)”检查，每个供试品容器中含≥10μm的微粒数小于6000粒(例如小于3000粒，例如小于1500粒，例如小于1000粒，例如小于500粒，例如小于250粒)，并且≥25μm的微粒数小于600粒(例如小于300粒，例如小于150粒，例如小于100粒，例如小于50粒，例如小于25粒)。

进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明第一方面任一实施方案所述的药物组合物的方法，其基本上包括以下步骤：

(a)称取处方量的环磷腺苷、葡甲胺和甘露醇、和任选的糖类，加入适量注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，必要 时用酸碱调节剂调节该溶液至pH符合规定的范围；

(c)将药液除菌过滤，灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(b)所述pH符合规定的范围是指：当将该溶液用注射用水稀释至含环磷腺苷10mg/ml的浓度时，所得稀释溶液的pH值在5.5～7.0范围内，例如该稀释溶液的pH值在6.0～6.5范围内，例如该稀释溶液的pH值为6.2。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(c)所得经过滤的滤液，其中固形物含量为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述适量注射用水是注射用水处方量的约70～90％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(b)中“补加注射用水至其处方量”中的所述“处方量”的注射用水是环磷腺苷重量的20-200倍，例如50-150倍，例如60-100倍，例如约80倍。此注射用水的量可通过步骤(c)中所述固形物含量而容易地控制。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(a)所述活性炭用量是溶液重量的0.02％～0.5％(w/v)，优选0.05％～0.2％。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(b)中所述酸碱调节剂是选自下列的酸碱调节剂的水溶液：氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、盐酸、磷酸、硝酸、硫酸、或其组合。这些水溶液的浓度是本领域技术人员公知的，例如1～10％，例如2％～5％。在一个实施方案中，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液，例如1M盐酸溶液或者1M氢氧化钠溶液。

根据本发明第二方面任一实施方案所述的方法，其中步骤(d)中除去水分后所得冷冻干燥物料中水分含量低于10％，优选低于8％，优选低于5％，更优选低于3％。

在本发明上述制备方法的步骤中，虽然其描述的具体步骤在某些细节上或者语言描述上与下文具体实施方式部分的制备例中所描述的步骤有所区别，然而，本领域技术人员根据本发明全文的详细公开完全可以概括出以上所述方法步骤。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域 技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

环磷腺苷葡胺为非洋地黄类强心剂，具有正改正肌力作用，能增强心肌收缩力，改善心肌泵血功能，有扩张血管作用，可降低心肌耗氧量；改善心肌细胞代谢，保护缺血、缺氧的心肌；能够改善窦房结P细胞功能。环磷腺苷葡胺进入人体，在血液中的半衰期为60～150min，由于其有较好的亲水性，尤其是脂溶性较强，较易透过脂溶性细胞膜进入心肌细胞内发挥作用，经磷酸二酯本科分解形成5-AMP，再经5-AMP本科降解为腺苷和磷酸，环磷腺苷葡胺在用药后10～20min后开始作用，显效高峰时间在1～2小时，药效消失时间在6～8小时。

环磷腺苷葡胺制剂的主要成份为环磷腺苷葡胺，系环磷腺苷与葡甲胺按摩尔比约1：1比例制备得到的，是非洋地黄类强心剂，具有正性肌力作用，增强心肌收缩力，改善心肌泵血功能，有扩张血管作用，可降低心肌耗氧量，改善心肌细胞代谢，保护缺血、缺氧的心肌细胞，能改善窦房结的p细胞功能，临床上已用于治疗心力衰竭、冠心病、脑梗死及其它疾病。。

环磷腺苷葡胺制剂可用于治疗心血管疾病。

对充血性心力衰竭的治疗作用方面。充血性心力衰竭常见于冠心病、扩张型心肌病、风湿性心脏病等，应用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗充血性心力衰竭48例。治疗组48例中男性28例，女性20例，心功能Ⅱ—Ⅲ级30例，Ⅳ级18例，对照组40例，男性24例，女性16例，心功能Ⅱ—Ⅲ级28例，Ⅳ级16例。性别年龄及心功能分级比较为无显著性意义(p>0.05)。治疗组用环磷腺苷葡胺注射制剂90毫克加入3％葡萄糖或0.9％生理盐水250毫升中，静脉滴入，两周为一疗程，使用两个疗程。对照组仅给予强心利尿和肾素血管紧张转换酶抑制剂治疗。治疗组：显效17例(35.4％)，有效26例(54.18％)，无效5例(10.42)，对照组：显效6例(15％)，有效23例(57.5％)，无效11例(27.5)，治疗组总有效率89.58％，对照组72.5％，治疗组总有效率明显高于对照组。

结果显示治疗组明显优于对照组，环磷腺苷葡胺注射制剂，能显著改善冲血性心力衰竭患者的心肌舒缩功能，提高运动耐力，改善生活质量。

运用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗84例充血性心力衰竭，两组均用强心，利尿，扩血管治疗，治疗组加用环磷腺苷葡胺注射制剂60毫克至180毫克，加入5％葡萄糖或生理盐水250毫克中，静脉滴入，每日一次，15天为一疗程。治疗组显效31例(73.8％)，有效10例，(23.8)，无效1例(2.4％)有效19例(45.2％)，无效6例(14.3％)，总有效率36例(85.7％)。与对照组比较(p<0.01)。

结果显示环磷腺苷葡胺注射制剂治疗组症状缓解，心力衰竭改善程度显著好于对照组。认为环磷腺苷葡胺注射制剂能通过扩张外周血管、减少心脏前后负荷，能明显改善心力衰竭患者的症状体征，具有显著疗效。

运用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗冠心病心力衰竭39例，治疗组与对照组均使用强心、利尿扩血管。治疗组加用环磷腺苷葡胺注射制剂90毫克加入5％葡萄糖或生理盐水250毫克，在90分钟左右滴完，每天一次，14天为一个疗程。治疗组总有效率92.3％，对照组69.2％(p<0.05)。治疗组用药后症状明显改善，左室功能明显增强，每搏量，每分输出量，左室射血分数用药后显著性差异(p<0.05)，未见不良反应。

对冠心病的治疗作用方面。将冠心病58例分成两组，治疗组30例，使用环磷腺苷葡胺90毫克加入5％葡萄糖或生理盐水中25毫克，静脉滴入，每日一次，15天为一个疗程。对照组28例用复方丹参注射制剂15毫克加入5％葡萄糖或生理盐水250毫克中，静脉滴入，每日一次，15天为一个疗程。两组临床治疗比较，环磷腺苷葡胺注射制剂在改善心电图、胸闷、心绞痛、心悸、气促等症状显效率明显，用于复方丹参注射制剂组，改善心功能的总有效率也明显用于对照组。

结果证实环磷腺苷葡胺注射制剂具有正性肌力作用，能增强心肌收缩力，改善心肌泵血功能，扩张血管、降低心肌耗氧，改善心肌细胞代谢，保护缺血、缺氧的心肌，缓解冠心病的临休症状优于复方丹参注射制剂。

对肺心病的治疗作用方面。使用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗肺心病45例，男性39例，女性6例，年龄65—70岁，病史5—25年。环磷腺苷葡胺注射制剂90毫克加入5％葡萄糖或生理盐水250毫克中，静脉滴入，每日一次，10—15日为一个疗程，用药期间同时用其他扩血管药及强心剂利尿药。临床观察显示，肺心病给用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗后胸闷、心悸、气促肝功能、肾功能、肺功能，心电图显效率在83％以上，总有效率95％以上。认为该药是治疗肺心病，特别是伴心力衰竭的一线药物，可扩张血管，降低肺动脉压，增强心肌收缩力改善心、肝、肺、肾功能，提高生存质量，延长生存期。是安全、有效、具有良好应用前景的正性肌力药物。

对扩张型心肌病的治疗作用方面。使用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗扩张型心肌病44例，治疗组使用环磷腺苷葡胺注射制剂静脉滴入，加用强心、利尿、扩血管治疗，对照组是用强心、利尿、扩血管等一般治疗。治疗前使用彩色心动仪测左室舒缩功能，结果显示，治疗组左室舒张早期血流峰值速度上升，左室舒张晚期血流峰值速度下降，心脏舒张功能明显改变，每搏输出量，射血分数，心脏指数均有改善，心律失常发生率降低。

对高血压病的治疗作用方面。使用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗高血压病48例，治疗组用环磷腺苷葡胺注射制剂90毫克加入5％葡萄糖或生理盐水250毫克中，静脉滴入，每日一次，连续用15日。对照组42例，仅口服拜新同(拜耳公可生产)30毫克，每日一次，共用15日。治疗组合对照组均使用其他降压药物及降脂药，结果对照组降压有效率91.67％。收缩压舒张压均有显著下降，头昏、眼花、头痛等症状显著，明显优于对照组，认为环磷腺苷葡胺注射制剂是一种治疗显著， 安全性好的降压药物。

环磷腺苷葡胺制剂可用于治疗脑梗死。使用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗脑梗死32例。治疗组32例，使用环磷腺苷葡胺注射制剂90毫克加入5％葡萄糖或生理盐水250毫克中，静脉滴入，每日一次，连续用20日为一个疗程。对照组32例，使用胞二磷胆盐0.5加入5％葡萄糖或生理盐水250毫克中，静脉滴入，每日一次，连续用20日为一个疗程。结果治疗组总有效率93.8％，对照组81.3％，两组治疗有明显差异。认为环磷腺苷葡胺注射制剂可促进脑内细胞内线粒体内能量代谢，增加脑血流量，提高脑氧分压，减轻脑水肿，缩小脑梗死范围，促进脑功能恢复。治疗脑梗死疗程短，神经损害轻，取得了良好疗效。

环磷腺苷葡胺制剂可用于治疗慢性肾功能衰竭。使用环磷腺苷葡胺注射制剂治疗慢性肾功能衰竭，治疗组20例，在常规治疗基础上加用环磷腺苷葡胺注射制剂90毫克生理盐水250毫克中，静脉滴入，每日一次，连续用15日为一个疗程，一般1—2疗程。对照组20例，仅给予常规治疗。结果治疗组显效4例，(20％)，有效8例(40％)，稳定3例，(15％)，无效3例(25％)。对照组显效3例(15％)，有效5例(25％)，稳定6例，(30％)，无效6例(30％)。通过观察对肾功能不全失代偿的治疗有较好疗效，对肌酐大于707umol/l的肾功能衰竭患者治疗差。慢性肾功能衰竭失代期患者在采用传统的透析治疗同时配合环磷腺苷葡胺注射制剂治疗，能取得延缓慢性肾功能衰竭发展的作用。

根据本发明，术语“赋形剂”亦可称为辅料、填充剂等。本文所用的“药学可接受的赋形剂”指的是可用于配制药物的赋形剂，其对生物体基本上没有不良影响，并且通常是生物体可耐受的。

冷冻干燥粉针剂的制备过程是本领域技术人员公知的制药工艺，例如如下冻干曲线A和冻干曲线B所示的两种示意性的冻干曲线：

在下文制备冷冻干燥粉针剂中的具体实例中，如未另外特别说明，所用的冻干曲线是冻干曲线A。

冷冻干燥粉针剂中的水分含量是一般在8％以下，优选低于5％，更优选低于3％。水分控制可通过适当调整冷冻干燥程序来控制。该冷冻干燥粉针剂中的水分含量可根据许多已知方法来测定，例如干燥失重法。

在本发明中，为了在必要时调节药液的pH值，可以向组合物中加入适当的pH调节剂。尽管本发明人仅用不具缓冲能力的强酸或强碱溶液例如氢氧化钠水溶液和盐酸水溶液进行调节，然而，本领域技术人员理解，如果用这种不具缓冲能力的pH调节剂处理能满足体系的pH要求，则具有缓冲能力的pH调节剂将更加能够实现本发明目的，因此这些缓冲剂不但能够调节pH值，而且能稳定pH值。因此本发明所列任一pH调节剂或其组合均包括在本发明精神和范围内。

在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中，固形物含量是为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。由于冻干粉针剂通常是在管状西林瓶中进行冷冻干燥得到，本领域技术人员理解这种产品在获得成品甚至在供医生使用之前，通常均呈现一个圆饼状，尽管该圆 饼的体积理论上讲会比原有水溶液的体积少(稍有缩小)，然而通常这种缩小通常不会缩小到原水溶液体积50％，通常会在原水溶液体积的80-120％之间，更通常在原水溶液体积的90-100％之间，而从终产品西林瓶内可观察到原水溶液液面痕迹(主体饼状物因冻干缩小后残留在瓶壁上的液面痕迹，即便西林瓶中的冻干品因各种原因例如碰撞等原因而呈粉末状，通常仍然可以保留原有的液面痕迹)，据此痕迹亦可估计出该冷冻干燥组合物在冷冻干燥之前的水溶液体积。因此，虽然本发明提供的是一种基本无水的冷冻干燥粉针剂，然而根据该粉针剂仍然可以大致估计出其在配制时，至少在冷冻干燥开始之前的药液体积，根据该估计出的体积以及西林瓶中的干燥终产物的重量，亦可计算到在制备本发明冻干粉针剂时，所配制的药液中的固形物的含量。因此，根据本发明第一方面的冻干粉针剂，其在配制时的药液的固形物含量为1～20％(w/v)，优选2～15％(w/v)，再更优选2～10％。

术语“固形物含量”是指固体物质(例如本发明活性化合物及所用的全部赋形剂，重量/克)加入到溶剂(例如注射用水)中，溶解后得到一个溶液，所述固体物质的重量除以终溶液体积的百分数(重量/体积百分数，例如g/100ml)。例如在本发明中，以100mg活性化合物和总计约20mg的其它固形物加适量注射用水溶液，配制成终体积为2ml的溶液，其固形物含量即为6％。

在本发明中，符号％，根据其所使用的语境，可以具有本领域技术人员容易理解的含义。例如在提及固形物含量时，该符号表示重量/体积的百分数(w/v，例如g/100ml)；又例如在提及冷冻干燥粉针剂中的“水含量”时，例如水含量在8％以下，此时该符号％表示重量/重量的百分数(w/w，g/100g)。一般而言，在固体分散在液体中时，％表示重量/体积百分数；在固体分散在固体中或者液体分散在固体中(例如粉针的含水量)时，％表示重量/重量百分数。在其它情况下，如无另外说明，符号％表示重量/重量百分数。

在配制本发明的药液时，本领域技术人员公知，可使用例如约0.45um的微孔滤膜进行粗滤过滤，在将药液灌装到西林瓶中之前，可以使用例如约0.22um的微孔滤膜进行精滤过滤以除菌，必要时可以过滤多次。

根据本发明的药物组合物，其为冷冻干燥粉针剂。在一个实施方案中，该冷冻干燥粉针剂为单剂量制剂(例如西林瓶装的粉针剂)，每一单位剂量中活性化合物的量(其在本发明中如未另外说明，均以环磷腺苷计)可以例如但不限于约15mg、约19mg、约38mg、约50mg。

根据本发明的药物组合物，其用注射用水复溶，通常而言复溶时间在30秒内，优选在20秒内，更优选在15秒内。

根据本发明的冻干粉针剂，其用水制成每1ml中含环磷腺苷10mg的溶液并根据中国药典2010年版二部附录VI H项下的方法测定，该溶液的pH值为5.5～7.0，例如pH值为6.0～6.5。

本发明提供的冻干粉针剂可以在25℃以下干燥处保存至少24个月，可以满足一般的冷冻干燥粉针剂的贮藏要求。

本发明所得冻干粉针剂特别是冷冻干燥粉针剂通常为白色或类白色的冻干块状物或其碎块或其粉末，无臭、味苦，易溶于水。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。以下实施例进一步说明本发明，而不是限制本发明。在下面的例子中，使用的pH调节剂(在本发明中亦即酸碱调节剂)，如无另外说明，是1M氢氧化钠溶液或者1M盐酸溶液，其用量是使制备粉针剂时，使冷冻干燥前所配制的溶液的pH值调节至某一规定值或范围，该规定值或范围是冷冻干燥所得干粉用注射用水稀释成含环磷腺苷10mg/ml的溶液所测定的pH值的值或范围。下文制备步骤为了举例的目的，并基于各举例的可比较性而作了某些具体描述，本领域技术人员根据已有知识完全可以从中概括得到本发明制备冻干粉针剂的方法。在下面配液制备各种组合物中，如未另外说明，每批的总配液量为10000ml，但是列明配方时，均以相对于环磷腺苷10mg的量阐明，并且以每瓶含环磷腺苷18.8mg的量分装到5ml西林瓶中，进行冷冻干燥；得到的冻干粉针剂每瓶中含环磷腺苷18.8mg。

粉针剂的质量控制方法和标准照国家食品药品监督管理局局颁标准YBH02762005中的具体方法和标准进行。例如本发明所得粉针剂的性状、鉴别、酸度、溶液的澄清度与颜色、有关物质、水分、无菌、热原、含量测定(测定的是环磷腺苷葡胺的量而非环磷腺苷的量)等项目。

这些项目中的某些测定项目还可以参照相关药典方法测定，例如粉针剂的不溶性微粒检查的方法照中国药典2010版二部附录IX C不溶性微粒检查法中的“第一法(光阻法)”进行。

额外地，本发明制备的粉针剂，可以使用HPLC测定它们的环磷腺苷的量，特别是考察它们在经历模拟临床复溶时玻璃瓶中残余环磷腺苷的量。使用HPLC法测定环磷腺苷的量的方法参照何晓艳等文献方法(何晓艳，等，HPLC法测定环磷腺苷葡胺注射液中环磷腺苷的含量，中国药师，2011，14(5):682)，该环磷腺苷的含量测定方法在本发明中可称为何晓艳法。

在临床上，注射用环磷腺苷葡胺冻干粉针剂的用法用量为：1)静脉滴注：加入200～500ml的5％葡萄糖注射液溶解后静脉滴注，一日一次，一次60～180mg；2)静脉推注：加入20～40ml 的25％或10％葡萄糖注射液溶解后缓慢静脉推注，一日一次，一次90mg。但是在生产上，通常而言对于每瓶中包含环磷腺苷约18.8mg的规格的粉针剂，其通常使用5ml的西林瓶密封包装成单剂量制剂。在使用的时候，取约3ml注射用水或葡萄糖注射液注入该西林瓶中，然后振摇使冻干粉溶解，再将溶解后的药液抽出。但是，已经发现，对于此制剂在复溶时，通常会产生泡沫，在将复溶后的药液抽出后，再向空西林瓶中定量地添加注射用水，测定该溶液中残余的环磷腺苷含量，结果完全出人意料地发现，不同处方的粉针剂在西林瓶中残余的环磷腺苷量呈现完全不同的程度，并且本发明添加特定糖类的配方中残余的环磷腺苷量极低。

一、组合物制备例部分

在下面的各个粉针剂的制备例子中

制备例1、制备包含环磷腺苷葡甲胺的粉针剂

配方：

环磷腺苷	10mg，
		葡甲胺	6mg，
甘露醇	12mg，
		麦芽糖	1mg，
pH调节剂	至pH6.2，
		注射用水	适量，加至0.8ml。

制备方法：

(1)称取处方量的主药和辅料(pH调节剂除外)，置于不锈钢桶中，加入处方量约80％的注射用水，搅拌使溶解，再按溶液体积加入0.1％(w/v)的活性炭，搅拌30分钟，过滤脱炭，补加注射用水至接近处方全量。

(2)滤液取样，测定pH值，必要时用pH调节剂调节至规定值(即，取滤液适量加注射用水稀释至含活性成分10mg/ml，测定该稀释液的pH值应达到6.2，否则再用pH调节剂即酸碱调节剂适当调节)，再补加注射用水至处方全量，测定pH值，必要时再次如上所述用pH调节剂调节至规定的pH6.2；测定药液中活性成分的含量。

(3)药液先用0.45um微孔滤膜过滤，再用0.22um微孔滤膜过滤2次。

(4)以每瓶灌装的药液中含环磷腺苷18.8mg的量灌装于5ml西林瓶中(在以下各例子中，引用本制备例方法时，如未另外说明，灌装药液量为包含18.8mg环磷腺苷的药液体积；在其它例子中如果灌装药液体积明显增加或者明显减小，可以根据经验适当调整西林瓶的体积)，半加胶塞。

(5)按照本文所述冻干曲线A进行冷冻干燥，至水分低于3％；冻干结束后，进行液压加塞； 扎铝盖，即得。在本发明中制备例1的样品可简称为Ex1；其它制备例的样品亦可类似表示。

补充制备例1：参考以上制备例1的方法，不同的是将其中的甘露醇的量进行调整，分别为0mg、4mg、9mg、15mg、25mg、或50mg，得到的粉针剂编号分别为Ex111、Ex112、Ex113、Ex114、Ex115、Ex116六个粉针。补充制备例2：参考以上制备例1的方法，不同的是将其中的麦芽糖的量进行调整，分别为0mg、0.2mg、0.5mg、2mg、5mg、10mg、或20mg，得到的粉针剂编号分别为Ex121、Ex122、Ex123、Ex124、Ex125、Ex126、Ex127。补充制备例3：参考以上制备例1的方法，不同的是麦芽糖的量为0.5mg，甘露醇的量为0mg、4mg、9mg、15mg、25mg、或50mg，得到的粉针剂编号分别为Ex131、Ex132、Ex133、Ex134、Ex135、Ex136。补充制备例4：参考以上制备例1的方法，不同的是麦芽糖的量为5mg，甘露醇的量为0mg、4mg、9mg、15mg、25mg、或50mg，得到的粉针剂编号分别为Ex141、Ex142、Ex143、Ex144、Ex145、Ex146。补充制备例5：参考以上制备例1的方法，不同的是甘露醇的量为9mg，麦芽糖的量为0mg、0.2mg、0.5mg、2mg、5mg、10mg、或20mg，得到的粉针剂编号分别为Ex151、Ex152、Ex153、Ex154、Ex155、Ex156、Ex157。补充制备例6：参考以上制备例1的方法，不同的是甘露醇的量为15mg，麦芽糖的量为0mg、0.2mg、0.5mg、2mg、5mg、10mg、或20mg，得到的粉针剂编号分别为Ex161、Ex162、Ex163、Ex164、Ex165、Ex166、Ex167。补充制备例7：参考以上制备例1的方法，不同的是麦芽糖替换为等量的蔗糖、葡萄糖、乳糖、或果糖，得到的粉针剂编号分别为Ex171、Ex172、Ex173、Ex174；参考以上制备例1的方法，不同的是甘露醇替换为等量的山梨醇、右旋糖苷、氯化钠、或乳糖，得到的粉针剂编号分别为Ex175、Ex176、Ex177、Ex178。补充制备例8：参考以上制备例1的方法，不同的是不添加葡甲胺，制得不含葡甲胺的环磷腺苷冻干粉针Ex181；参考以上制备例1的方法，不同的是不添加葡甲胺并且不添加麦芽糖，制得不含葡甲胺且不含麦芽糖的环磷腺苷冻干粉针Ex182。补充制备例9：照CN1579413A说明书实施例1的配方和制法，其中赋形剂使用甘露醇，得到粉针记为Ex191；照CN102258531B说明书实施例4的配方和制法，得到粉针记为Ex192；照CN 102988305B说明书实施例1的配方和制法，得到粉针记为Ex193；从市场购得三批市售注射用环磷腺苷葡胺粉针剂(H2004**39、H2005**64、H2005**21)，每瓶标示含环磷腺苷18.8mg(相当于环磷腺苷葡胺30mg)，三批市售粉针分别记为Ex194、Ex195、Ex196。

制备例2、制备包含环磷腺苷葡甲胺的粉针剂

配方：

环磷腺苷	10mg，
		葡甲胺	6.5mg，

甘露醇	9mg，
		麦芽糖	5mg，
pH调节剂	至pH6.5，
		注射用水	适量，加至0.3ml。

制备方法：参考以上制备例1的方法制备，但按照本文所述冻干曲线B进行冷冻干燥，所得粉针剂记为Ex2。

制备例3、制备包含环磷腺苷葡甲胺的粉针剂

配方：

环磷腺苷	10mg，
		葡甲胺	5.5mg，
甘露醇	15mg，
		麦芽糖	0.5mg，
pH调节剂	至pH6.0，
		注射用水	适量，加至1.5ml。

制备方法：参考以上制备例1的方法制备，所得粉针剂记为Ex3。

制备例4、制备包含环磷腺苷葡甲胺的粉针剂

配方：

环磷腺苷	10mg，
		葡甲胺	5.75mg，
甘露醇	14mg，
		麦芽糖	2mg，
pH调节剂	至pH6.4，
		注射用水	适量，加至1ml。

制备方法：参考以上制备例1的方法制备，所得粉针剂记为Ex4。

制备例5、制备包含环磷腺苷葡甲胺的粉针剂

配方：

环磷腺苷	10mg，
		葡甲胺	6.25mg，
甘露醇	10mg，

麦芽糖	0.5mg，
		pH调节剂	至pH6.2，
注射用水	适量，加至1ml。

制备方法：参考以上制备例1的方法制备，所得粉针剂记为Ex5。

试验例部分

试验例1：粉针剂性质考察

对上面各制备例及补充制备例制得的试样进行考察。

对于每批粉针试样，取10瓶，每瓶使用注射用水5ml溶解并完全转移至100ml，用注射用水稀释至刻度，摇匀，测定该溶液中环磷腺苷含量，计算每瓶中环磷腺苷的平均含量(mg，可表示为M1)；然后，对于每批粉针试样，取10瓶，向保持橡胶塞密封的每瓶中用注射器注入3ml的5％葡萄糖注射液，摇匀使粉针溶解，再用该注射器将药液完全抽出(此时，不同批次的产品在瓶中会有不同程度的泡沫残余)，接着，向每个空西林瓶中定量添加注射用水1ml，以清洗西林瓶，合并10个西林瓶的洗液，测定该溶液中环磷腺苷含量，计算每瓶中环磷腺苷的平均含量(mg，可表示为M2)；以下式计算每瓶中环磷腺苷残余率(％)：

环磷腺苷残余率(％)＝(M2÷M1)×100％

结果：全部的制备例1至制备例5制得的五个粉针剂以及Ex113、Ex114、Ex123、Ex124、Ex125、Ex133、Ex134、Ex143、Ex144、Ex153、Ex154、Ex155、Ex163、Ex164、Ex165，这些粉针剂在西林瓶中未见明显的泡沫残余，并且它们的环磷腺苷残余率均低于1％，均在0.16～0.41％范围内；此外，Ex115、Ex116、Ex126、Ex127、Ex135、Ex136、Ex145、Ex146、Ex156、Ex157、Ex166、Ex167、补充制备例8所得2个粉针试样，这些粉针剂在西林瓶中也未见明显的泡沫残余，并且它们的环磷腺苷残余率均低于1％，均在0.14～0.45％范围内；但是，Ex111、Ex112、Ex121、Ex122、Ex131、Ex132、Ex141、Ex142、Ex151、Ex152、Ex161、Ex162、补充制备例7所得8个粉针试样、补充制备例9所述6个粉针试样，这些粉针剂在西林瓶中可见明显的泡沫残余，并且它们的环磷腺苷残余率均低于4％，均在4.36～8.41％范围内，显示这些试样可能因为泡沫造成的相当多的环磷腺苷残余在西林瓶中。以上结果是使用5％葡萄糖注射液作为复溶溶液观察到的结果，申请人在补充的试验中，发现当改用注射用水作为复溶溶液时，同样能观察到与上述使用5％葡萄糖注射液作为复溶溶液相同的结果。

试验例2：粉针剂性质考察

对上面各制备例及补充制备例制得的部分试样进行考察。对于每批粉针试样，取10瓶，向每瓶中注入注射用水3ml，静置，观察完全溶解的时间，并计算每批粉针剂在此条件下复溶的时间。 结果：全部的制备例1至制备例5制得的五个粉针剂以及Ex113、Ex114、Ex123、Ex124、Ex125、Ex133、Ex134、Ex143、Ex144、Ex153、Ex154、Ex155、Ex163、Ex164、Ex165，这些粉针剂的复溶时间均小于27秒，均在14秒至26秒之间；但是，Ex115、Ex116、Ex126、Ex127、Ex135、Ex136、Ex145、Ex146、Ex156、Ex157、Ex166、Ex167这些使用甘露醇或麦芽糖过量的粉针剂，它们的复溶时间均大于120秒，均在124～217秒之间。另外，当改用5％葡萄糖注射液为复溶溶液时，在复溶时间方面亦观察到与上述使用注射用水作为复溶溶液相同的结果。

试验例3：药品性质考察

照国家食品药品监督管理局局颁标准YBH02762005中的具体方法，测定Ex1、Ex2、Ex3、Ex4、Ex5、Ex113、Ex114、Ex123、Ex124、Ex125、Ex133、Ex134、Ex143、Ex144、Ex153、Ex154、Ex155、Ex163、Ex164、Ex165这些具有本发明组合物特征的试样的：酸度、溶液的澄清度与颜色、有关物质、水分、可见异物、不溶性微粒、含量测定等项目。根据上述标准，这些项目的测定方法和标准规定如下：

酸度：取供试品，加水溶解并稀释制成每1ml中含环磷腺苷葡胺15mg的溶液，依法测定(附录VI H)，pH值应为5.5～7.0；

溶液的澄清度与颜色：取供试品，加水溶解并稀释制成每1ml中含环磷腺苷葡胺15mg的溶液，溶液应澄清无色；如显色，与黄色1号标准比色液(中国药典2010年版二部附录ⅨA第一法)比较，不得更深；

有关物质：取供试品，加水制成每1ml中含环磷腺苷葡胺15mg的溶液，作为供试品溶液；照含量测定项下的色谱条件和方法试验,吸取供试品溶液10μl，点于层析滤纸上，展开后，干燥，置紫外光灯(254nm)下检视，在比移值0.4～0.5主斑点的下方及原点处，如还显示较小杂质斑点，将杂质斑点剪下，剪成条状，放入试管中，精密加入0.01mol/L盐酸溶液5ml，振摇，放置1小时后，倾取上清液，照分光光度法(中国药典2010年版二部附录IV A)，在257nm波长处测定，以0.01mol/L盐酸溶液作为空白，吸光度不得大于0.02；

水分：取供试品，照水分测定法(中国药典2010年版二部附录VIII M第一法A)测定，含水分应不得过4.5％；

可见异物：取供试品，依法检查(中国药典2010年版二部附录ⅨH)，应符合规定；

不溶性微粒：取供试品，依法检查(中国药典2010年版二部附录ⅨC)，应符合规定；

含量测定：取装量差异项下的内容物混匀，精密称取适量，加水制成每1ml中含环磷腺苷葡胺15mg的溶液，作为供试品溶液；另取环磷腺苷对照品适量，加60℃的水制成每1ml中约含10mg的溶液，作为对照品溶液；照纸色谱法(中国药典2010年版二部附录V A)试验，精密吸取上述两 种溶液各10μl，点于长约30cm的层析滤纸上，以异丙醇－浓氨溶液－水(9:1:2)为展开剂，展开约15小时后，干燥，置紫外光灯(254nm)下检视，在与对照品斑点位置相同处划出供试品紫色斑点，将此斑点剪下，并剪成细条状，放入试管中，精密加0.01mol/L盐酸溶液10ml，振摇，放置1小时后，取上清液，照分光光度法(中国药典2010年版二部附录IV A)，在257nm的波长处测定吸光度，同时以水代替供试品溶液，同法操作，作为空白校正。按环磷腺苷的()为447除以0.6278，即为环磷腺苷葡胺的量(0.6278为环磷腺苷与环磷腺苷葡胺的分子量比值)。

结果：上述检测样品的这些检测/测定项目均在上述标准规定的范围内，例如Ex1的酸度为6.23、溶液的澄清度与颜色合格、水分2.18％、含量为理论标示量99.52％。

此外，将上述这些具有本发明组合物特征的试样经历42℃5个月处理，再照上述标准的上述检测项目和方法，测定这些经高温处置(模拟长期留样)的粉针剂的各项目；结果显示，这些项目仍然均在上述标准规定的范围内，例如Ex1在经42℃5个月处理后的酸度为6.25、溶液的澄清度与颜色合格、水分2.12％、含量为理论标示量99.21％。

安全性试验例：对本发明组合物粉针进行安全性试验考察

本发明所得试样Ex1、Ex2、Ex3以及对照试样(市售品，注射用环磷腺苷葡胺，H20050249，北大高科华泰产)，照现行的药品注册法规要求，进行血管刺激性实验、溶血实验、过敏性实验，结果显示这些试样均符合血管刺激性实验、溶血实验、过敏性实验的规定。显示这些粉针剂组合物具有良好的安全性。

Claims (7)

1.一种药物组合物，其是冷冻干燥粉针剂，其由以下成分组成：环磷腺苷10重量份、葡甲胺5.5~6.5重量份、甘露醇9~15重量份、麦芽糖0.5~5重量份、以及酸碱调节剂，该药物组合物是按包括如下步骤的方法制备得到的：

(a)称取处方量的环磷腺苷、葡甲胺、甘露醇和麦芽糖，加入处方量的70~90%的注射用水，使溶解，再加入活性炭，搅拌，过滤脱炭；

(b)补加注射用水至其处方量，搅拌均匀，测定溶液pH值和任选的测定活性成分含量，用酸碱调节剂调节该溶液至pH符合规定的范围；所述pH符合规定的范围是指：当将该溶液用注射用水稀释至含环磷腺苷10mg/ml的浓度时，所得稀释溶液的pH值在6.0~6.5范围内；

(c)将药液除菌过滤，所得滤液中固形物的重量/体积百分含量为1~20%，将滤液灌装于西林瓶中；

(d)冷冻干燥除去水分，压塞，即得。

2.根据权利要求1的药物组合物，其中包含的物料以环磷腺苷每10重量份计，葡甲胺的量为5.75~6.25重量份。

3.根据权利要求1的药物组合物，其中包含的物料以环磷腺苷每10重量份计，甘露醇的量为10~14重量份。

4.根据权利要求1的药物组合物，所述的酸碱调节剂选自氢氧化钠、盐酸、磷酸或其组合。

5.根据权利要求1的药物组合物，所述的酸碱调节剂是盐酸溶液或者氢氧化钠溶液。

6.根据权利要求1的药物组合物，其中包含的物料以环磷腺苷每10重量份计，麦芽糖的量为0.5~2重量份。

7.根据权利要求1的药物组合物，其是冷冻干燥粉针剂，其每瓶中包括的环磷腺苷重量为10~100mg。