CN104513200A

CN104513200A - 取代丁烯酰胺的马来酸盐及其晶型

Info

Publication number: CN104513200A
Application number: CN201310680768.3A
Authority: CN
Inventors: 唐仁茂; 徐柏颐; 唐海涛; 赵耕先; 张大为; 欧阳强; 余长顺; 沈晓霞; 孙金娥; 倪帅健
Original assignee: JIANGSU SZYY GROUP PHARMACEUTICAL Ltd
Current assignee: Suzhong Pharmaceutical Group Co ltd
Priority date: 2013-09-26
Filing date: 2013-12-12
Publication date: 2015-04-15
Anticipated expiration: 2033-12-12
Also published as: CN104513200B

Abstract

本发明公开了一种取代丁烯酰胺的马来酸盐及其晶型，制备结晶马来酸盐各晶型的方法和有关的化合物，以及包含他们的药物组合物。本发明的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐、晶型I、晶型II或晶型III，具有EGFR或ErbB2激酶抑制活性，可应用于预防、治疗或者抑制肿瘤方面，特别是应用于预防、治疗或者抑制跟表皮生长因子受体家族激酶有关的肿瘤药物制备方面。

Description

取代丁烯酰胺的马来酸盐及其晶型

技术领域

本发明涉及(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐形式，制备结晶马来酸盐形式的方法，和有关的化合物，以及包含他们的药物组合物。另外，本发明还涉及它们的药物组合物，以及使用它们在***，特别是跟表皮生长因子受体家族激酶有关的肿瘤中的应用。

背景技术

(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺显示出抗肿瘤生物活性，这使它有望在治疗各种不同的癌症中有很多的应用。这些癌症包括但不仅限于胰腺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、腮腺癌、食管癌、头颈癌、卵巢癌、乳腺癌、表皮癌、主要器官的肿瘤，如肾、膀胱、喉、胃、肺、结直肠和***。示例中的化合物由WO2010151710公开，显示具有抗肿瘤活性。然而该化合物的限制是其不能以游离碱的形式溶解于水中。

发明内容

本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一类(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐及其结晶、制备方法和应用。

本发明的目的可以通过以下措施达到：

本发明具体公开了一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐（式I）、一种无水形式结晶（晶型I）、一种一水合物结晶（晶型II）以及一种无水形式和一水合物的混合形式结晶（晶型III）。

本发明提供了一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐晶型I，其X-射线衍射图谱在2θ角为6.68±0.2、8.58±0.2、10.88±0.2、13.36±0.2、17.28±0.2、20.10±0.2、21.86±0.2、23.32±0.2、25.92±0.2和28.58±0.2处有衍射峰。

进一步的，晶型I的X-射线衍射图谱在2θ角为5.42±0.2、6.68±0.2、7.94±0.2、8.58±0.2、9.22±0.2、10.88±0.2、13.36±0.2、14.06±0.2、16.38±0.2、17.28±0.2、18.40±0.2、18.96±0.2、19.40±0.2、20.10±0.2、20.58±0.2、21.18±0.2、21.86±0.2、22.42±0.2、23.32±0.2、23.94±0.2、25.92±0.2、26.96±0.2、27.38±0.2、27.96±0.2、28.58±0.2、29.36±0.2、30.64±0.2和35.08±0.2处有衍射峰。具体的，在单独的测试中，无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐以2θ表示的X-射线粉末衍射的峰出现在如上所述的位置附近。

更进一步的，晶型I结晶具有基本上如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。该晶型通过差示扫描量热法（DSC）表征时表现出在约117℃的范围内的开始发生相变确定（即其DSC吸热转变在117℃发生），同时，其熔点范围为123～128℃。

本发明提供了一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐晶型II，其X-射线衍射图谱在2θ角为8.00±0.2、9.12±0.2、18.30±0.2、23.80±0.2、24.50±0.2和25.16±0.2处有衍射峰。该晶型在约50℃的时候发生失水，并显示含水量以化合物作为一水合物计为3.0%-3.5%质量分数。

进一步的，晶型II的X-射线衍射图谱在2θ角为7.00±0.2、8.00±0.2、9.12±0.2、9.88±0.2、10.74±0.2、12.18±0.2、13.20±0.2、13.56±0.2、14.02±0.2、14.72±0.2、15.24±0.2、16.36±0.2、17.70±0.2、18.30±0.2、19.36±0.2、20.74±0.2、21.38±0.2、22.30±0.2、23.80±0.2、24.50±0.2、25.16±0.2、26.06±0.2、26.52±0.2、27.24±0.2、28.30±0.2、28.72±0.2、29.72±0.2和30.72±0.2处有衍射峰。具体的，在单独的测试中，(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐以2θ表示的X-射线粉末衍射的峰出现在如上所述的位置附近。

晶型II的红外吸收光谱在约3484.3、3400.5、3270.3、3190.9、3048.0、2993.7、2942.1、2216.7、2101.3、1681.1、1654.6、1622.3、1606.9cm^-1处有特征吸收峰。特别是具有基本上如图4所示的红外光谱。

更进一步的，晶型II结晶具有基本上如图3所示的粉末X-射线衍射图谱。晶型II的DSC吸热转变在113.6℃发生；其熔点范围119-125℃。

本发明提供了一种部分水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐的确定的晶体形式（晶型III），该晶型基于该化合物含有约0.8%-2.4%质量分数的水确定。

本发明提供一种马来酸盐的制备方法：通过在水-醇溶剂中，升温条件下混合(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺（游离碱基）和马来酸制备马来酸盐的方法。冷却终溶液，溶液含有(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐。

本发明提供一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型II的制备方法：在水-醇溶剂中于40℃～60℃下混合(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺（游离碱基）和马来酸进行反应，反应后冷却静置反应溶液，分离出结晶即得。

本发明提供一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型I的制备方法：将(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型II在30℃以上进行真空干燥，即得。真空干燥时间在10小时以上，优选约12至48小时。

本发明提供一种制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水合物晶体（晶型II）的方法：用有机溶剂和一定量的水混悬无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐（晶型I），然后过滤从混合液中沉淀下来的一水合物晶体。

本发明提供一种制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水合物晶体（晶型II）的方法：用有机溶剂和一定量的水混悬无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐（晶型I），加入第二种含一定量水的有机溶剂，然后过滤从混合液中沉淀下来的一水合物晶体。

本发明提供一种制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水合物晶体（晶型II）的方法：用有机溶剂和一定量的水混悬无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐（晶型I）数天，然后从混悬液中过滤得到一水合物晶体沉淀。

本发明提供一种药物组合物，该组合物以(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐、晶型I、晶型II或晶型III中的一种或两种为主要活性成分，辅以药学上可接受的辅料。

本发明提供了一种通过服用治疗有效剂量的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐预防、治疗、抑制肿瘤的方法。服用者可以是哺乳动物，特别的，是人。马来酸盐可以无水形式、一水合物形式或部分含水物形式服用。一个或多个上面讨论的相关化合物通过这种方式可以同时服用到。

发明详述

(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺是Her-2（又称ErbB-2或neu）激酶的不可逆抑制剂。Her-2是表皮生长因子受体（EGFR）家族成员，EGFR家族成员与肿瘤的发生发展以及肿瘤病人预后差有非常紧密的联系。(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺游离碱基的结构如下所示：

化合物(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺在专利WO2010151710有描述。按照生物药剂学分类***（biopharmaceuticalclassification system，BCS），该化合物被划分为第IV级，低水溶性和弱渗透性。在pH7条件下，游离碱基在水中的溶解度约为1μg/ml，随着溶液pH的降低，由于离子化作用，该化合物的溶解度增加。在胃部pH条件下，化合物是水溶性的，并且溶出是非限速的。因此，提高化合物的物理化学性质是一个急待解决的问题。

对于具有溶解度或其他问题的药物化合物而言，做成盐、水合物和/或任何多形体以某种特定的晶体形式存在对于药物的制备难易、稳定性、水溶性、储存稳定性、赋形的难易以及体内药理学特征具有重要的决定性，但是不同的盐、水合物或晶体之间往往性质差异巨大，有时候，一种晶型或盐在制备难易、稳定性、水溶性和/或药代动力学特征上优于另外一种晶型或盐，但在更多的时候却是都不具有更优的效果。

本发明提供了一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺与酸形成水溶性盐的化合物形式。游离碱基可以与药学可用的多种酸成盐，药物适用的酸包括但不仅限于：醋酸、富马酸、马来酸、甲磺酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸。为了得到优化的药学盐形式，评价了几种酸与游离碱基形成的盐，见表1。

表1(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺不同盐的的物理化学性质

在7种盐中，醋酸由于酸性较低，无法成盐，磷酸、盐酸、硫酸产物容易吸潮，苯磺酸盐容易吸湿，并且成晶性差，马来酸盐显示很好的物理化学性质，成晶型，不容易吸湿。在所有的盐中，马来酸盐具有很好的溶解性，另外，马来酸盐非常容易的通过在含水溶剂中重结晶可以制备出其一水合物，是非常容易过滤的晶体形式，对后面的制剂工作具有明显的优势。

另外，(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐是结晶，与游离碱基比较有更好的水溶性。如表2所示，

表2游离碱基和马来酸盐的溶解性比较

预临床试验时，在大鼠体内进行了(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的***暴露量试验。分析结果显示，在大鼠体内，在给药剂量为在5mg/kg体重范围内，化合物的马来酸盐AUC（area under concentration，血药浓度一时间曲线下面积）是游离碱基AUC的两倍。化合物的游离碱基的生物利用度相对较低（20%），而粪便中可以检测出来明显量的化合物，这可以解释化合物的游离碱基相对较低的生物利用度。马来酸盐增加了溶解性，因此在大鼠体内，它的生物利用度也相应的增加。但是，虽然几种盐在溶解度试验中，盐酸盐的在水中的溶解度最高，但是体内的生物利用度比较中，马来酸盐较盐酸盐具有更高的生物利用度。

具体药动学试验：

健康雄性SD大鼠24只，（体重200-265g），分为4组，每组6只，分别口服给予相当于5mg/kg游离碱的游离碱基（A）、马来酸盐（晶型I）（B）、马来酸盐（晶型II）（C）及盐酸盐（D），即等摩尔给药。给药后，观察大鼠的呕吐反应。并于不同时间点采集血浆样品，经有机溶剂处理后采用液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中游离碱基的浓度，结果以血药浓度-时间表示。

受试物以含有10%乙醇和40%聚乙二醇200的生理盐水在给药前配制。给药前禁食过夜，给药4小时后给予饲料。于给药前（0小时），给药后0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、24小时经颈动脉插管取血约0.3ml，置K₂EDTA离心管中，离心分离血浆。血浆样品除分析期间，所有样品收集后置于-20℃冰箱保存。

血浆样品处理方法：

1.所有样品完全融化后，混匀10-30秒。

2.移取100微升样品至96孔板中。

3.加入0.3ml含内标的甲醇溶液，涡旋提取3min。

4.将样品在3200转、4℃条件下离心5min。

5.精密吸取100微升上清液，加入100微升0.4%甲酸水溶液（pH3.2）：乙腈=1：1，涡旋混匀后交由LC-MS/MS分析。

表3雄性SD大鼠口服给予5mg/kg的两种受试物后游离碱基的血药浓度（ng/ml）

表4雄性SD大鼠口服给予5mg/kg的受试物后动物呕吐的发生数

除了较差的水溶性以外，化合物(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的游离碱基与胃部引起呕吐的受体相互作用，导致哺乳动物腹泻。而(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐，意想不到地减轻这种问题并且使得与哺乳动物中引起呕吐的受体的相互作用最小化。

马来酸盐的制备是通过将(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺（游离碱）与马来酸混合并将该混合物溶解在加热的水-醇溶液中来制备。将生成的溶液冷却，该冷却的溶液包含(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐。根据一个实施方案，如路线1所示，通过将马来酸与游离碱在水和正丙醇的溶液中合并来制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐。

路线1

在马来酸盐或晶型II的制备中，游离碱与马来酸的反应在约40℃～60℃、优选约40℃～50℃的高温下发生。水：正丙醇的体积比率可改变，例如为约1：10到约1：5，并且水：正丙醇的最佳比率为约1：9（即90%正丙醇-水溶液）。水-醇溶液可包含约5体积%到约20体积%的水和约80体积%到约95%体积的醇。醇可为正丙醇。在一个实施方案中，水-醇溶液包含约10体积%的水和约90体积%的正丙醇。溶剂溶液的体积可为约8到约25体积，包括约10-10体积。相对于每当量的游离碱使用约1.0-1.2当量的马来酸，优选相对于每当量的游离碱使用约1.03当量的马来酸。

在马来酸盐或晶型II的制备中，生成的马来酸盐的溶液在冷却之前可通过过滤使其澄清。冷却步骤可持续进行直到溶液达到约45℃或40℃以下或更低的温度、包括达到约39℃或更低的温度、更优选达到约30℃或更低的温度为止。在一个实施方案中，在冷却到约室温、优选冷却到约23℃到约25℃之后，将溶液过滤。一般地，当温度达到37℃或更低时，马来酸盐开始从溶液中结晶出来。可使溶液在冷却下静置至少12小时，优选约12到约15小时，然后过滤和洗涤，以回收结晶马来酸盐产物。得到的滤饼可用相同的或不同的水-醇溶液洗涤以获得产物。可将该产物干燥以获得结晶(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐。此时，被回收和分离的马来酸盐产物一般是一水合物形式的马来酸盐的形式。

马来酸盐晶型II可在加热下进行真空干燥，以约70%到约95%的收率、优选约80%到约95%的收率制备无水形式的马来酸盐（晶型I）。该产物通常具有超过约98%的纯度，一般为约99%纯。一般地，干燥过程进行约12到约48小时，以获得从一水合物形式的马来酸盐（晶型II）向无水形式的马来酸盐的完全转化。更短的干燥时间通常获得两种结晶形式的混合物。该干燥过程通常在大于室温的温度下进行。在一个实施方案中，马来酸盐的干燥在大于约30℃、优选约40℃到约60℃、并且在另一个实施方案中在约50℃的温度下进行。

本发明的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐以三种不同的结晶形式被分离：无水形式（晶型I），一水合物形式（晶型II）和部分水合物形式（晶型III），所述的部分水合形式包括I形和II形的混合物。

无水马来酸盐晶型I的分离的结晶形式，其通过差示扫描量热法（DSC）表征时表现出在117℃左右的范围内的开始温度，在该温度下发生熔化和分解。晶型I结晶具有基本上如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

一水马来酸盐的确定的晶体形式（晶型II）在约50℃的时候发生失水，并显示含水量以化合物作为一水合物计为3.0%-3.5%质量分数。晶型II结晶具有基本上如图3所示的粉末X-射线衍射图谱。该晶型通过DSC在113.6℃，特别是单独采用毛细管熔点测定法测定得在120℃左右发生熔化。

部分水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐的确定的晶体形式（晶型III），该晶型通过以无水化合物含有约0.8%-2.4%质量分数和约1.5%-2.3%质量分数的水确定。

一种通过在水-醇溶剂中，升温条件下混合(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺（游离碱基）和马来酸制备马来酸盐的方法。冷却终溶液，溶液含有(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐。

一种制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水合物晶体（晶型II）的方法：用有机溶剂和一定量的水混悬无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐（晶型I），然后过滤从混合液中沉淀下来的一水合物晶体。

一种制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水合物晶体（晶型II）的方法：用有机溶剂和一定量的水混悬无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐（晶型I），加入第二种含一定量水的有机溶剂，然后过滤从混合液中沉淀下来的一水合物晶体。

一种制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水合物晶体（晶型II）的方法：用有机溶剂和一定量的水混悬无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐（晶型I）数天，然后从混悬液中过滤得到一水合物晶体沉淀。

I形无水形式（晶型I）可容易地转化为II形一水合物（晶型II）形式。在20-25℃的温度和50-60%的相对湿度下，I形可随着时间吸水并部分地转化为一水合物。

本发明还涉及一种药物组成包含(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐及有关的化合物。这些化合物中的一种或多种可在本发明的方法中在被冷却的溶液中被发现。因为这些化合物可能不与马来酸盐分离，因此使用该马来酸盐制备的药物制剂可能含有一个或多个这样的有关化合物。

本发明还涉及一种抑制HER-2激酶活性的包含治疗有效剂量的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐及其药学可接

受的载体的药物组合物。该药物组合物可以包含一个或者多个以上提到的相关化合物。马来酸盐可以是无水形式、一水形式及两者组合。

本发明还涉及了一种通过服用治疗有效剂量的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐预防、治疗、抑制肿瘤的方法。服用者可以是哺乳动物，特别的，是人。马来酸盐可以无水形式、一水合物形式或部分含水物形式服用。一个或多个上面讨论的有关化合物通过这种方式可以同时服用到。

本发明的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐、晶型I、晶型II或晶型III，具有EGFR或ErbB2激酶抑制活性，可应用于预防、治疗或者抑制肿瘤方面，特别是应用于预防、治疗或者抑制跟表皮生长因子受体家族激酶有关的肿瘤药物制备方面。

附图说明

图1是(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐的无水形式（晶型I）的XRD扫描图谱。

图2是(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐的无水形式（晶型I）的DSC图。

图3是(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐的一水物形式（晶型II）的XRD扫描图谱。

图4是(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水合物形式（晶型II）的红外图谱。

图5是(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐一水物形式（晶型II）的DSC图。

具体实施方式

将结合以下的具体实施例来更完全地描述本发明，这些具体实施例对本发明的范围不构成限制。本领域技术人员能够在举例说明的方法中，根据工艺参数和设备的不同，来进行步骤的重新排列，合并，修改或删除。

实施例1：制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐，晶型II

将粗品(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺游离碱（0.070kg，0.159mol）用1000ml90%正丙醇-水溶液混悬溶解，加入用100ml90%正丙醇-水溶液溶解的马来酸（0.0191kg，0.164mol），将混合迅速加热到50-60℃并保持至少15min，直到获得溶液为止。使热溶液经过预热到50-60℃的砂芯漏斗使其澄清，并在预热到45-55℃的抽滤瓶中收集滤液。将溶液在至少一小时内冷却到40℃并在该温度下保持12小时，然后在至少4小时内冷却到室温（25℃），并在该温度下保持至少2小时。将混合物在布氏漏斗上过滤，然后用90%的正丙醇-水溶液漂洗和洗涤。将滤饼压实并保持抽吸到滴液基本停止。

实施例2：制备(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐，晶型I

将得自实施例1的产物（晶型II）干燥（50℃，10mmHg，24h），得到94.4g（88%收率）的结晶，即无水(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺马来酸盐（晶型I）。

Claims

1.一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型，其特征在于该结晶为晶型I，其X-射线衍射图谱在2θ角为6.68±0.2、8.58±0.2、10.88±0.2、13.36±0.2、17.28±0.2、20.10±0.2、21.86±0.2、23.32±0.2、25.92±0.2和28.58±0.2处有衍射峰。

2.根据权利要求1所述的马来酸盐晶型，其特征在于其X-射线衍射图谱在2θ角为5.42±0.2、6.68±0.2、7.94±0.2、8.58±0.2、9.22±0.2、10.88±0.2、13.36±0.2、14.06±0.2、16.38±0.2、17.28±0.2、18.40±0.2、18.96±0.2、19.40±0.2、20.10±0.2、20.58±0.2、21.18±0.2、21.86±0.2、22.42±0.2、23.32±0.2、23.94±0.2、25.92±0.2、26.96±0.2、27.38±0.2、27.96±0.2、28.58±0.2、29.36±0.2、30.64±0.2和35.08±0.2处有衍射峰。

3.根据权利要求2所述的马来酸盐晶型，其特征在于该结晶具有基本上如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

4.根据权利要求1所述的马来酸盐晶型，其特征在于其DSC吸热转变在117℃发生；其熔点范围123～128℃。

5.一种(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型，其特征在于该结晶为晶型II，其X-射线衍射图谱在2θ角为8.00±0.2、9.12±0.2、18.30±0.2、23.80±0.2、24.50±0.2和25.16±0.2处有衍射峰。

6.根据权利要求5所述的马来酸盐晶型，其特征在于其X-射线衍射图谱在2θ角为7.00±0.2、8.00±0.2、9.12±0.2、9.88±0.2、10.74±0.2、12.18±0.2、13.20±0.2、13.56±0.2、14.02±0.2、14.72±0.2、15.24±0.2、16.36±0.2、17.70±0.2、18.30±0.2、19.36±0.2、20.74±0.2、21.38±0.2、22.30±0.2、23.80±0.2、24.50±0.2、25.16±0.2、26.06±0.2、26.52±0.2、27.24±0.2、28.30±0.2、28.72±0.2、29.72±0.2和30.72±0.2处有衍射峰。

7.根据权利要求5所述的马来酸盐晶型，其特征在于其红外吸收光谱在约3484.3、3400.5、3270.3、3190.9、3048.0、2993.7、2942.1、2216.7、2101.3、1681.1、1654.6、1622.3、1606.9cm^-1处有特征吸收峰。

8.根据权利要求5所述的马来酸盐晶型，其特征在于该结晶具有基本上如图3所示的粉末X-射线衍射图谱。

9.根据权利要求5所述的马来酸盐晶型，其特征在于其DSC吸热转变在113.6℃发生；其熔点范围119-125℃。

10.如式（I）所示的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐，

11.一种药物组合物，其特征在于该组合物以权利要求1或5中的一种或两种结晶为主要活性成分，辅以药学上可接受的辅料。

12.一种权利要求5所述(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型的制备方法，其特征在于在水-醇溶剂中于40℃～60℃下混合(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺游离碱基和马来酸进行反应，反应后冷却静置反应溶液，分离出结晶即得。

13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于所述醇为正丙醇，水与醇的体积比为1：10～1：5；反应温度为40℃～50℃；反应后冷却至40℃以下；冷却静置时间为12小时以上。

14.一种权利要求1所述(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型的制备方法，其特征在于将(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐晶型II在30℃以上进行真空干燥10小时以上，即得。

15.根据权利要求14所述的制备方法，其特征在于所述真空干燥的温度为40℃～60℃，真空干燥的时间为12小时～48小时。

16.权利要求1～10中任一项所述的(E)-N-{4-[(3-乙炔基苯氨基)-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]}-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺的马来酸盐或其晶型在制备预防、治疗或者抑制肿瘤药物方面的应用，特别是在制备预防、治疗或者抑制跟表皮生长因子受体家族激酶有关的肿瘤药物方面的应用。