CN104450851B

CN104450851B - 一种去乙酰头孢硫脒的制备方法

Info

Publication number: CN104450851B
Application number: CN201410829212.0A
Authority: CN
Inventors: 谭胜连; 司徒小燕; 文青; 闵翠娥; 陆媛; 郭泽彬; 贾永兵
Original assignee: GUANGZHOU BAIYUNSHAN TIANXIN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: GUANGZHOU BAIYUNSHAN TIANXIN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2014-12-25
Filing date: 2014-12-25
Publication date: 2018-02-23
Anticipated expiration: 2034-12-25
Also published as: CN104450851A

Abstract

本发明涉及一种去乙酰头孢硫脒的制备方法，适于制药企业，它公开了步骤(1)：把头孢硫脒溶解在水或含5％～20％有机溶剂的水中，控制温度20℃～35℃，加入0.8～1.2倍的固定化乙酰酯酶，同时加入pH调节剂控制体系pH7.0～9.0，搅拌反应；所述水或含有机溶剂的水的量为头孢硫脒的2.5～4.0倍；步骤(2)：反应结束后，过滤，调节pH至5.0～5.5，减压浓缩，洗涤，过滤，真空干燥，即得去乙酰头孢硫脒固体。本发明采用酶法制备去乙酰头孢硫脒，纯度高，不低于97％，可作为对照品用于头孢硫脒原料药及其制剂的质量控制。

Description

一种去乙酰头孢硫脒的制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种去乙酰头孢硫脒的制备方法。

技术背景

药品在临床使用中产生的不良反应除了与药品本身的药理活性有关外，还与药品中存在的杂质息息相关，所以杂质研究是药物质量研究、质量控制和安全性研究的重点，涉及定性研究及定量研究，贯穿于药学研究的全过程。

杂质对照品是药物杂质研究的重要关键，但大多数药物的杂质并没有对照品提供，即杂质对照品的获得已经成为大多数药物杂质研究的瓶颈。

杂质的来源包括工艺杂质(合成中未反应完全的反应物及试剂、中间体、副产物等)、降解产物、从反应物及试剂中混入的杂质等。

注射用头孢硫脒是我国唯一自主研发并首先进行临床研究和应用的第一代头孢菌素，该产品经酸、碱、热等破坏或长期存放，去乙酰头孢硫脒作为其中一种杂质的含量会逐渐增大，为了更好地控制该产品的质量，进一步考察该杂质对注射用头孢硫脒的稳定性及安全性的影响，急需确认其结构并获得对照品。

文献报道的LC-MS法，只能根据其结果信息对去乙酰头孢硫脒的结构进行分析推断，由于没有制得样品，无法进行结构确证。

专利CN102863461A公开了(6R，7R)-3-羟甲基-7-[α-(N，N-二异丙基脒硫基)-乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]-辛-2-烯-2-甲酸内铵盐，即去乙酰头孢硫脒的制备方法，具体为：以D-7-ACA为原料，在水和与水不相混溶的有机溶剂两相溶液中，碱性条件下溶解后与溴乙酰溴反应生成溴乙酰D-7-ACA中间体，分液取水相，用酸调节水相pH为1.0～4.0，析出中间体；中间体经干燥后，在有机相中与N,N-二异丙基硫脲反应生成去乙酰头孢硫脒。此法采用两步反应：第一步两相反应，操作步骤多，反应生成的中间体需析出干燥；第二步无水反应，反应条件苛刻，要求高，控制困难。

发明内容

本发明提供了一种简单的去乙酰头孢硫脒的制备方法，目的在于制备高纯度的去乙酰头孢硫脒。

本发明所述的去乙酰头孢硫脒的制备方法包括以下两个步骤：

步骤(1)：把头孢硫脒溶解在水或含5％～20％有机溶剂的水中，控制温度20℃～35℃，加入0.8～1.2倍的固定化乙酰酯酶，同时加入pH调节剂控制体系pH7.0～9.0，搅拌反应；所述水或含有机溶剂的水的量为头孢硫脒的2.5～4.0倍；

步骤(2)：反应结束后，过滤，调节pH至5.0～5.5，减压浓缩，洗涤，过滤，真空干燥，即得去乙酰头孢硫脒固体；

合成路线如下：

在上述步骤(1)中所述有机溶剂为：甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、乙腈、丙酮。

本发明所述步骤(1)的pH调节剂为氨水或三乙胺。

以上本发明所述步骤(2)的洗涤用溶剂为二氯甲烷或丙酮。

已报道的去乙酰头孢硫脒的制备是采用化学法，两步反应，操作步骤多，且反应条件苛刻；而本发明的优势在于采用酶法，反应专一性高，条件温和，副反应少；减少了有机溶剂的使用量；固定化乙酰酯酶可重复使用，成本低；此制备方法一步反应，操作简单；制备得的去乙酰头孢硫脒纯度高，不低于97％，可作为对照品用于头孢硫脒原料药及其制剂的质量控制，也可以用于制备高纯度的头孢硫脒内酯。

附图说明

附图1：去乙酰头孢硫脒UV图；

附图2：去乙酰头孢硫脒IR图；

附图3：去乙酰头孢硫脒MS图；

附图4：去乙酰头孢硫脒¹HNMR(D₂O)；

附图5：去乙酰头孢硫脒¹³CNMR谱图(D₂O)。

具体实施方式

本发明制备的去乙酰头孢硫脒，经紫外(UV)、红外(IR)、质谱(MS)、核磁(NMR)检测，确证其结构为本发明去乙酰头孢硫脒。UV、IR、MS、NMR的检测谱图详见附图1-附图5。

实施例1

头孢硫脒20g，加入纯化水50ml，控制温度20℃～25℃，搅拌至溶清，加入固定化乙酰酯酶1.6g，并不断缓慢滴加三乙胺控制pH7.0～9.0，搅拌反应至pH基本不变。过滤去酶，滴加盐酸调节pH至5.0～5.5，减压浓缩滤液至干，二氯甲烷洗涤，过滤，真空干燥，得去乙酰头孢硫脒。

经HPLC检测，纯度为98％。

实施例2

头孢硫脒20g，加入纯化水60ml、甲醇3ml，控制温度20℃～25℃，搅拌至溶清，加入固定化乙酰酯酶2.0g，并不断缓慢滴加氨水控制pH7.0～9.0，搅拌反应至pH基本不变。过滤去酶，滴加盐酸调节pH至5.0～5.5，减压浓缩滤液至干，丙酮洗涤，过滤，真空干燥，得去乙酰头孢硫脒。

经HPLC检测，纯度为97％。

实施例3

头孢硫脒20g，加入纯化水70ml、乙醇7ml，控制温度20℃～25℃，搅拌至溶清，加入固定化乙酰酯酶2.2g，并不断缓慢滴加三乙胺控制pH7.0～9.0，搅拌反应至pH基本不变。过滤去酶，滴加盐酸调节pH至5.0～5.5，减压浓缩滤液至干，二氯甲烷洗涤，过滤，真空干燥，得去乙酰头孢硫脒。

经HPLC检测，纯度为97％。

实施例4

头孢硫脒20g，加入纯化水80ml、异丙醇12ml，控制温度30℃～35℃，搅拌至溶清，加入固定化乙酰酯酶2.0g，并不断缓慢滴加氨水控制pH7.0～9.0，搅拌反应至pH基本不变。过滤去酶，滴加盐酸调节pH至5.0～5.5，减压浓缩滤液至干，丙酮洗涤，过滤，真空干燥，得去乙酰头孢硫脒。

经HPLC检测，纯度为97％。

实施例5

头孢硫脒20g，加入纯化水80ml、正丙醇16ml，控制温度30℃～35℃，搅拌至溶清，加入固定化乙酰酯酶2.4g，并不断缓慢滴加三乙胺控制pH7.0～9.0，搅拌反应至pH基本不变。过滤去酶，滴加盐酸调节pH至5.0～5.5，减压浓缩滤液至干，二氯甲烷洗涤，过滤，真空干燥，得去乙酰头孢硫脒。

经HPLC检测，纯度为98％。

实施例6

头孢硫脒20g，加入纯化水80ml、乙腈15ml，控制温度25℃～30℃，搅拌至溶清，加入固定化乙酰酯酶1.8g，并不断缓慢滴加氨水控制pH7.0～9.0，搅拌反应至pH基本不变。过滤去酶，滴加盐酸调节pH至5.0～5.5，减压浓缩滤液至干，丙酮洗涤，过滤，真空干燥，得去乙酰头孢硫脒。

经HPLC检测，纯度为98％。

实施例7

头孢硫脒20g，加入纯化水80ml、丙酮10ml，控制温度25℃～30℃，搅拌至溶清，加入固定化乙酰酯酶2.0g，并不断缓慢滴加三乙胺控制pH7.0～9.0，搅拌反应至pH基本不变。过滤去酶，滴加盐酸调节pH至5.0～5.5，减压浓缩滤液至干，二氯甲烷洗涤，过滤，真空干燥，得去乙酰头孢硫脒。

经HPLC检测，纯度为98％。

Claims

1.一种去乙酰头孢硫脒的制备方法，其特征是：

步骤(1)：把头孢硫脒溶解在水或含5％～20％低级醇、或乙腈、或丙酮的水中，控制温度20℃～35℃，加入0.8～1.2倍的固定化乙酰酯酶，同时加入氨水或三乙胺控制体系pH7.0～9.0，搅拌反应；所述水或含低级醇、或乙腈、或丙酮的水的量为头孢硫脒的2.5～4.0倍；

步骤(2)：反应结束后，过滤，调节pH至5.0～5.5，减压浓缩，用二氯甲烷或丙酮洗涤，过滤，真空干燥，即得去乙酰头孢硫脒固体；

合成路线如下：

2.根据权利要求1所述的一种去乙酰头孢硫脒的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中低级醇为甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇。