CN104435283A - 一种添加有益生元的益生菌微胶囊及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种添加有益生元的益生菌微胶囊，所述益生菌微胶囊由壁材包裹芯材而成；所述壁材为海藻酸钠与蛋白质壁材的混合物，比例为2∶1，终浓度为3％-5％，蛋白质壁材为大豆蛋白或乳清蛋白。本发明还公开了添加有益生元的益生菌微胶囊的制备方法。本发明的壁材包裹益生菌，海藻酸钠可以提高益生菌对胃蛋白酶等的耐受能力，蛋白质壁材可以提高益生菌对胃酸等的耐受能力，两者结合大大提高进入肠道的活菌数。芯材中的脱脂奶粉可以提高益生菌对环境的耐受力，减少生产加工和运输贮藏中益生菌的损失。芯材中的益生元可以刺激有益菌群的生长。该益生菌微胶囊可以改善宿主肠道微环境，增强宿主的抗病能力。

Description

一种添加有益生元的益生菌微胶囊及制备方法
技术领域
本发明涉及一种微胶囊的制备方法，属于生物医药领域，具体地说是一种添加有益生元的益生菌微胶囊及制备方法。
背景技术
微胶囊是指一种具有聚合物壁壳和微型容器或包装物。微胶囊造粒技术就是将固体、液体或气体包埋、封存在一种微型胶囊内成为一种固体微粒产品的技术。具体来说是指将某一目的物(芯或内相)用各种天然的或合成的高分子化合物连续薄膜(壁或外相)完全包覆起来，而对目的物的原有化学性质丝毫无损，然后逐渐地通过某些外部刺激或缓释作用使目的物的功能再次在外部呈现出来，或者依靠囊壁的屏蔽作用起到保护芯材的作用，微胶囊的直径一般为1～500μm，壁的厚度为0.5～150μm，已开发了粒径在1μm以下的超微胶囊。微胶囊粒子在某些实例中扩大到0.25～1000μm。当微胶囊粒径小于5μm时，因布朗运动加剧而不容易收集；当粒径大于300μm时，其表面摩擦系数会突然下降而失去微胶囊作用。一般胶囊膜壁厚度为1-30μm。化妆品中用的多为32μm和180μm。超薄壁微胶囊膜壁厚度为0.01μm。国外微胶囊已用于遮盖霜、保湿剂、口红、眼影、香水、浴皂、香粉等中。微胶囊能够提高产品的稳定性，防止各种组分之间的相互干扰。
发明内容
发明目的：针对现有技术存在的不足，本发明的第一个目的是提供一种添加有益生元的益生菌微胶囊。本发明的第二个目的是提供了上述益生菌微胶囊的制备方法。
技术方案：为实现上述发明的目的，本发明采用的技术方案是：本发明提供了一种添加有益生元的益生菌微胶囊，所述益生菌微胶囊由壁材包裹芯材而成；所述壁材为海藻酸钠与蛋白质壁材的混合物，比例为2:1，终浓度为3％-5％，蛋白质壁材为大豆蛋白或乳清蛋白。
进一步地，按重量份数，所述芯材由70-85％混合益生菌菌剂、5-10％益生元、5-10％中药提取液和5-10％脱脂奶粉混合组成。
进一步地，所述混合益生菌菌剂组成成分包括酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、蜡 样芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、嗜酸乳杆菌中的一种或多种。
进一步地，按重量份数，所述中药提取液含有石榴皮60～70％、杨树花20～30％、鸡内金10～20％。
进一步地，所述益生元为寡糖，包括果寡糖、甘露寡糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低聚壳聚糖、壳寡糖、菊粉中的一种或多种。
上述的一种添加有益生元的益生菌微胶囊的制备方法，包括以下步骤：
1)混合益生菌菌剂的制备：将各种益生菌各自接种、发酵培养，使其发酵液活菌浓度达到108cfu/g获得菌液；将上述菌液按一定比例混合，离心后得到菌体沉淀，用5倍灭菌蒸馏水重悬菌体备用；
2)中药提取液的制备：按石榴皮60～70％、杨树花20～30％、鸡内金10～20％粉碎并混合均匀，加入10倍的水，煎煮浓缩至1g中药1ml，降温过滤待用；
3)益生菌微胶囊的制备：按70-85％混合益生菌菌液、5-10％益生元、5-10％中药提取液和5-10％脱脂奶粉混合，高速均质器进行混匀，得到芯材；将4％海藻酸钠、2％大豆蛋白或乳清蛋白加入蒸馏水中混合，加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加CaCl2，固化30-40min，过滤收集微胶囊。
有益效果：本发明中壁材包裹益生菌，海藻酸钠可以提高益生菌对胃蛋白酶等的耐受能力，蛋白质壁材可以提高益生菌对胃酸等的耐受能力，两者结合大大提高进入肠道的活菌数。芯材中的脱脂奶粉可以提高益生菌对环境的耐受力，减少生产加工和运输贮藏中益生菌的损失。芯材中的益生元可以刺激有益菌群的生长。该益生菌微胶囊可以改善宿主肠道微环境，增强宿主的抗病能力。
具体实施方式
实施例1：含益生元和中药提取物的嗜酸乳杆菌与酿酒酵母混合微胶囊的制备
按石榴皮700g、杨树花200g、鸡内金100g粉碎并混合均匀，加入10L水，煎煮浓缩至1L，降温过滤待用。将嗜酸乳杆菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min条件下，培养活菌浓度达到108cfu/g，将酿酒酵母种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min培养活菌浓度达到108cfu/g，按1:1的比例将两种菌液混合离心，用5倍灭菌蒸馏水将所得菌体沉淀重悬。将7.5L混合益生菌菌液(终浓度为75％)、1L中药提取液(终浓度为10％)、1L浓度为1Kg/L的果寡糖的悬浊液(终浓度为10％)和0.5L浓度为1Kg/L 脱脂奶粉的悬浊液(终浓度为5％)混合,高速均质器进行混匀，得到芯材；将1200g海藻酸钠(终浓度为4％)、600g大豆蛋白(终浓度为2％)溶于30L蒸馏水中,加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化35min，过滤收集微胶囊。
对比例1：不含益生元和中药提取物的嗜酸乳杆菌与酿酒酵母混合微胶囊的制备
将嗜酸乳杆菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min条件下，培养活菌浓度达到108cfu/g，将酿酒酵母种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min培养活菌浓度达到108cfu/g，按1:1的比例将两种菌液混合离心，用5倍灭菌蒸馏水将所得菌体沉淀重悬。将10L混合益生菌菌液、500g脱脂奶粉混合,高速均质器进行混匀，得到芯材；将1200g海藻酸钠(终浓度为4％)、600g大豆蛋白(终浓度为2％)溶于30L蒸馏水中,加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化35min，过滤收集微胶囊。
实施例2 含益生元和中药提取物的嗜酸乳杆菌与屎肠球菌混合微胶囊的制备
按石榴皮700g、杨树花200g、鸡内金100g粉碎并混合均匀，加入10L水，煎煮浓缩至1L，降温过滤待用。将嗜酸乳杆菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min条件下，培养活菌浓度达到108cfu/g；将屎肠球菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min培养活菌浓度达到108cfu/g，按1:1的比例将两种菌液混合离心，用5倍灭菌蒸馏水将所得菌体沉淀重悬。将8L混合益生菌菌液(终浓度为8％)、0.75L中药提取液(终浓度为7.5％)、0.75L浓度为1Kg/L的果寡糖悬浊液(终浓度为7.5％)和0.5L浓度为1Kg/L脱脂奶粉悬浊液(终浓度为5％)混合,高速均质器进行混匀，得到芯材；将1200g海藻酸钠(终浓度为4％)、600g大豆蛋白(终浓度为2％)溶于30L蒸馏水中,加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化40min，过滤收集微胶囊。
对比例2 不含益生元和中药提取物的嗜酸乳杆菌与屎肠球菌混合微胶囊的制备
将嗜酸乳杆菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min条件下，培养活菌浓度达到108cfu/g；将屎肠球菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min培养活菌浓度达到108cfu/g，按1:1的比例将两种菌液混合离心，用5倍灭菌蒸馏水将所得菌体沉淀重悬。将10L混合益生菌菌液、500g脱脂奶粉混合,高速均质器进行混匀，得到芯材；将1200g海藻酸钠(终浓度为4％)、600g大豆蛋白(终浓度为2％)溶于30L蒸馏水中,加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化40min，过滤收集微胶囊。
实施例3含益生元和中药提取物的枯草芽孢杆菌和屎肠球菌混合微胶囊的制备
按石榴皮600g、杨树花200g、鸡内金200g粉碎并混合均匀，加入10L水，煎煮浓缩至1L，降温过滤待用。将枯草芽孢杆菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min条件下，培养活菌浓度达到108cfu/g，将屎肠球菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min培养活菌浓度达到108cfu/g，按1:1的比例将两种菌液混合离心，用5倍灭菌蒸馏水将所得菌体沉淀重悬。将8L混合益生菌菌液(终浓度为8％)、0.5L中药提取液(终浓度为5％)、0.5L浓度为1Kg/L的果寡糖悬浊液(终浓度为5％)和1L浓度为1Kg/L脱脂奶粉悬浊液(终浓度为10％)混合,高速均质器进行混匀，得到芯材；将1200g海藻酸钠(终浓度为4％)、600g大豆蛋白(终浓度为2％)溶于30L蒸馏水中,加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化40min，过滤收集微胶囊。
对比例3 不含含益生元和中药提取物的枯草芽孢杆菌和屎肠球菌混合微胶囊的制备
将枯草芽孢杆菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min条件下，培养活菌浓度达到108cfu/g；将屎肠球菌种子液按1％的接种量接种发酵培养基，在37℃、100r/min培养活菌浓度达到108cfu/g，按1:1的比例将两种菌液混合离心，用5倍灭菌蒸馏水将所得菌体沉淀重悬。将10L混合益生菌菌 液、500g脱脂奶粉混合,高速均质器进行混匀，得到芯材；将1200g海藻酸钠(终浓度为4％)、600g大豆蛋白(终浓度为2％)溶于30L蒸馏水中,加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加0.4mol/L CaCl2，固化40min，过滤收集微胶囊。
实施例4：
对实施例1～3和对比例1～3的微囊化产品进行对动物生长性能影响的评定测试。
以实施例1～3和对比例1～3的微胶囊作为饲料添加剂，以日粮重量的0.1％-0.2％添加到饲料中，以不加微胶囊的饲料作为空白对照。选择10公斤左右断奶杜长大三元杂交小猪70头，经10天保育过渡，随机分为7组，每组10头，其中1-3组对应实施例1-3，4-6组对应对比例1-3，第7组为空白对照组。日常管理按照常规方式进行，各组实验猪均自由采食，自由饮水，至第30天后停止，统计各项数据。结果如下：
表1 微胶囊对动物生长性能的影响
结果显示：益生菌微胶囊制剂作为饲料添加剂添加到饲料中，可以提高仔猪的日增重，提高仔猪的免疫力，降低腹泻的发病率。在芯材中添加益生元和中药提取物，提高益生菌微胶囊制剂的效果。

Claims (6)

1.一种添加有益生元的益生菌微胶囊，其特征在于：所述益生菌微胶囊由壁材包裹芯材而成；所述壁材为海藻酸钠与蛋白质壁材的混合物，比例为2:1，终浓度为3％-5％，蛋白质壁材为大豆蛋白或乳清蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种添加有益生元的益生菌微胶囊，其特征在于：按重量份数，所述芯材中由70-85％混合益生菌菌剂、5-10％益生元、5-10％中药提取液和5-10％脱脂奶粉混合组成，上述各组分含量百分数之和为100％。
3.根据权利要求2所述的一种添加有益生元的益生菌微胶囊，其特征在于：所述混合益生菌菌剂组成成分包括酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、嗜酸乳杆菌中的一种或多种。
4.根据权利要求2所述的一种添加有益生元的益生菌微胶囊，其特征在于：按重量份数，所述中药提取液含有石榴皮60～70％、杨树花20～30％、鸡内金10～20％，上述各组分含量百分数之和为100％。
5.根据权利要求2所述的一种添加有益生元的益生菌微胶囊，其特征在于：所述益生元为寡糖，包括果寡糖、甘露寡糖、低聚半乳糖、低聚木糖、低聚壳聚糖、壳寡糖、菊粉中的一种或多种。
6.权利要求1～4任一项所述的一种添加有益生元的益生菌微胶囊的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
1)混合益生菌菌剂的制备：将各种益生菌各自接种、发酵培养，使其发酵液活菌浓度达到108cfu/g获得菌液；将上述菌液按一定比例混合，离心后得到菌体沉淀，用5倍灭菌蒸馏水重悬菌体备用；
2)中药提取液的制备：按石榴皮60～70％、杨树花20～30％、鸡内金10～20％粉碎并混合均匀，加入10倍的水，煎煮浓缩至1g中药1ml提取液，降温过滤待用；
3)益生菌微胶囊的制备：按70-85％混合益生菌菌液、5-10％益生元、5-10％中药提取液和5-10％脱脂奶粉混合，高速均质器进行混匀，得到芯材；将4％海藻酸钠、2％大豆蛋白或乳清蛋白加入蒸馏水中混合，加入芯材充分混匀，通过Equl微胶囊发生器，并滴加CaCl2，固化30-40min，过滤收集微胶囊。
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