CN104297242B - 快速检测维生素e或含维生素e制剂的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及快速检测维生素E或含维生素E制剂的方法。具体地说，本发明属于医药技术领域，特别是属于医药分析测试领域。本发明涉及一种检测维生素E的方法，特别是涉及一种使用显色法能够快速检测以鉴别维生素E或者含维生素E制剂中是否含有维生素E的方法。本发明方法特别适用于药品、保健品等销售市场上的快速检测和查验。特别地，本发明提供一种适合现场监测使用、干扰少、准确、快速、简单和安全的鉴别制剂中是否含有维生素E的方法或者进一步地甚至是可以对据信含维生素E的制剂中维生素E进行初步定量的方法，本发明方法特别适合于对市场监管执法现场的被监管制剂进行维生素E定性或初步定量。

Description

快速检测维生素E或含维生素E制剂的方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别是属于医药分析测试领域。本发明涉及一种检测维生素E的方法，特别是涉及一种能够快速检测以鉴别维生素E或者含维生素E制剂中是否含有维生素E的方法。本发明方法特别适用于药品、保健品等市场销售的制剂中维生素E的快速检测和查验。

背景技术

维生素E(Vitamin E)化学结构如下：

维生素E是一种微黄色至黄色或黄绿色澄清的粘稠液体，几乎无臭，遇光色渐变深，天然型放置会固化，25℃左右熔化。

维生素E是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。生育酚能促进性激素分泌，使男子***活力和数量增加；使女子***浓度增高，提高生育能力，预防流产，还可用于防治***、烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面。近来还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末梢血管扩张，改善血液循环，预防近视眼发生和发展。

维生素E能促进生殖，还能保护T淋巴细胞、保护红细胞、抗自由基氧化、抑制血小板聚集从而降低心肌梗死和脑梗塞的危险性。还对烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等方面有很好的疗效。还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末梢血管扩张，改善血液循环。

含有丰富维生素和矿物质的食物能构成一顿营养均衡的膳食，而维生素E，则代表卓越的抗氧化作用和对年龄的挑战。维生素E可有效对抗自由基，抑制过氧化脂质生成，祛除黄褐斑；抑制酪氨酸酶的活性，从而减少黑色素生成。酯化形式的维生素E还能消除由紫外线、空气污染等外界因素造成的过多的氧自由基，起到延缓光老化、预防晒伤和抑制日晒红斑生成等作用。

维生素E的主要功效有：延缓衰老，有效减少皱纹的产生，保持青春的容貌。减少细胞耗氧量，使人更有耐久力，有助减轻腿抽筋和手足僵硬的状况。抗氧化保护机体细胞免受自由基的毒害。改善脂质代谢，预防冠心病、动脉粥样硬化。后来2000年新英格兰医学杂志上就有文章用超过9000人的严格随机实验证明维生素E根本不能降低冠心病风险，这一结论从此之后再也没被推翻过。预防癌症，有效抑制肿瘤生长；预防多处慢性疾病；预防炎症性皮肤病、脱发症；预防溶血性贫血、保护红血球使之不容易破裂；预防治疗甲状腺疾病；改善血液循环、保护组织、降低胆固醇、预防高血压。维生素E是一种很重要的血管扩张剂和抗凝血剂；预防与治疗静脉曲张；防止血液的凝固，减少斑纹组织的产生。强化肝细胞膜、保护肺泡细胞，降低肺部及呼吸***遭受感染的几率。保护皮肤免受紫外线和污染的伤害，减少疤痕与色素的沉积；加速伤口的愈合。促进性激素分泌，使男子***活力和数量增加；使女子***浓度增高，提高生育能力，预防流产。还发现维生素E可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末稍血管扩张，改善血液循环，预防近视发生和发展。

目前，实验室也开发了关于维生素E检测的实用高效的方法，这些方法中既有物理和化学方法，也有仪器分析方法(HPLC、GC、UV和IR等)，既有VE的总含量检测，也有各异构体含量的检测，既有常量检测也有微量检测，方法的灵敏度，准确度和适用情况各不相同。

CN101320015A(200810116941.6，中国农大)公开了一种快速检测维生素E含量的方法，该发明具体涉及一种掺杂对甲苯磺酸的聚吡咯修饰电极，并提供了利用此修饰电极快速检测维生素E含量的方法，包括1)应用与样品检测条件相同的实验条件，绘制维生素E含量和氧化峰电流的的标准曲线；2)将样品溶于乙醇-1，2二氯乙烷的混合溶剂中，调节PH值为2-5，制得样品溶液；3)将修饰电极置于样品液中，用微分脉冲伏安法检测氧化峰电流，根据标准曲线计算出样品中的维生素E浓度。此方法可用于快速检测植物油中的维生素E含量，样品制备简单，方便快速，抗干扰强，检测结果准确，与液相色谱法的检测结果一致。

CN101865888A(201010191832.8，黑龙江大豆技术中心)公开了一种植物营养成分含量的快速提取检测法，该发明提供一种植物，尤指大豆多基因聚合育种杂交后代营养成分含量快速检测法，包括水溶性物质异黄酮和脂溶性物质维生素E、叶黄素、胡萝卜素等物质的一次取样同时提取，以及HPLC两步分析法，实现了“一次取样，多种功能性营养成分可同步分析检测”，进而加快育种后代选拔进程，培育高附加值大豆新品种，同时也可以缩短检测时间，降低人力、物力、财力的投入，减少检测废弃物的对环境的污染。

中国药典2010年版二部收载的维生素E使用红外法和气相色谱法对维生素E进行鉴别，还使用气相色谱法对维生素E进行含量测定。还使用化学显色法对维生素E原料进行鉴别。

在中国药典2010年版二部中，还收载了包含维生素E的制剂有片剂、软胶囊剂、注射液和粉剂。对于这些添加了药用辅料的制剂，使用了化学显色法、气相色谱法进行鉴别，并使用气相色谱法进行含量测定。

随着社会的发展，人们对自身保健意识逐渐加强，越来越多的人选择购买、食用保健品，特别是含有维生素E的保健品。含维生素E类的保健品在市场上的占有率较高，但假冒伪劣产品充斥市场的现象屡有发生，对公众的健康产生危害，也是食品药品监管部门亟需解决的问题之一。但是上述检验方法离不开实验室场所，不利于执法人员的现场检验与执法。

特别是，由于保健品的销售渠道比药品宽泛，对其监管自然更为薄弱，并且目前保健品市场上据信包含维生素E的保健品，发挥的是人们日常保健的功能，而非治疗疾病的功能，因此这些产品通常在安全性是没有问题的，但是对于产品的生物学有效性，人们并没有急迫的需求，这就为不法分子以可乘之机，例如在标示有维生素E的保健食品中，少加甚至不加维生素E，这种假冒伪劣产品尽管不能发挥药物功效或者发挥不足，却并不会对人们的健康产生损害，但是这严重地损害了消费者的利益，对于市场经济是一种不良冲出。这种现象客观上造成了假冒伪劣维生素E保健品鱼目混珠充斥市场的现实。

鉴于这种维生素E保健品是巨大的，典型的是这类产品的市场覆盖面广。而要对它们进行检测，以现有的实验室方法是不现实的，一方面工作量会非常巨大、耗时长，需要从市场取样带回实验室，再用例如气相色谱法、或化学显色法等方法进行检测；另一方面不利于现场取证、现场处理不法市场行为；再一方面取用量可能会比较大，可能对正常销售的正规产品带来不利的影响。

因此，建立一种适合现场监测使用、干扰少、准确、快速、简单和安全的鉴别维生素E制剂的方法，甚至是可以对维生素E进行初步定量的方法，为市场监管的执法人员的现场执法提供技术保障，提高执法监管效率，仍是本领域技术人员极期期待的。

发明内容

本发明的目的是提供一种适合现场监测使用、干扰少、准确、快速、简单和安全的鉴别制剂中是否含有维生素E的方法或者进一步地甚至是可以对据信含维生素E的制剂中维生素E进行初步定量的方法。本发明人令人惊奇地发现，当使用适当的操作条件时，可以使用简易、安全、快速、低污染的方法对市场监管执法现场的被监管制剂进行维生素E定性或初步定量的方法。本发明基于以上发现而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了一种检测制剂中维生素E的方法，该方法包括以下步骤：

(1)向一支具塞试管中加入维生素E对照品5～200mg(或者其中事先已加入相应量的维生素E对照品)(典型的测定时可以是30mg)，向另一具塞试管中添加标示包含5～200mg(典型的测定时可以是标示包含30mg)维生素E的所述待测制剂；

(2)对于每支试管，分别向其中加入无水乙醇0.5～1.5ml(例如0.8～1.2ml，典型的为1ml)，充分振摇，再向其中加入硝酸0.5～1.5ml(例如0.8～1.2ml，典型的为1ml)，密塞，立即振摇10～60秒左右，然后加入饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液4～6ml(例如4.5～5.5ml，典型的为5ml)，将试管静置，观察；

(3)对照品试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色；使待测制剂试管的显色情况与对照品试管进行比较。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品的加入量为10～150mg，例如20～100mg，例如20～70mg，例如约30mg。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，待测制剂加入量以其中所标示含有的维生素E计是维生素E对照品加入量的50％～200％，例如是75％～150％，例如是80％～120％，例如是约100％。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，如果加入的待测制剂中所含维生素E量与维生素E对照品加入量的相当(例如，待测制剂加入量以其中所含维生素E计是维生素E对照品加入量的80％～120％)，则待测制剂试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且颜色深度与对照品试管相当(例如相同或接近)。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，如果待测制剂试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且颜色深度与对照品试管相当(例如相同或接近)，则可判定加入的待测制剂中所含维生素E量与维生素E对照品加入量的相当(例如，待测制剂加入量以其中所含维生素E计是维生素E对照品加入量的80％～120％)。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，其中对照品试管中，显橙色至橙红色的顶层液体与该试管中总液体的体积比为1：5～10，例如1：6～10，例如1：6～9。

如果能确定所述制剂的基本配方，则可确定该制剂的空白处方，即除了不含有维生素E之外的配方，其在本领域通常亦可称为空白辅料、空白制剂等，它们均具有相同含义。由此，根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中还包括向一支试管中加入相当于待测制剂用量的空白制剂，并将该试管平行地执行后续步骤的操作，结果在步骤(3)中显示，该空白制剂试管的顶层液体显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中在步骤(1)及后续的处理步骤中，平行地处理1-5支对照品的试管和/或平行地处理1-5支待测制剂的试管和/或平行地处理1-5支空白制剂的试管。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂中包含维生素E或者标示包含维生素E，并且该制剂中还任选地包含维生素A或者标示包含维生素A，并且该制剂中还任选地包含维生素D或者标示包含维生素D。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供哺乳动物使用的。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供人使用的。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供人经口服使用的。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是药品、保健品、食品、或保健食品。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是选自下列的制剂形态：片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、注射液、粉剂、颗粒剂等。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，并且每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-500mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-250mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为2-100mg。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，该制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～25％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～20％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～15％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～10％。

进一步地，本发明第二方面提供了一种检测并判定标示含有维生素E的待测制剂中是否含有维生素E的方法，该方法包括以下步骤：

(1)向一支具塞试管中加入维生素E对照品5～200mg(或者其中事先已加入相应量的维生素E对照品)(典型的测定时可以是30mg)，向另一具塞试管中添加标示包含5～200mg(典型的测定时可以是标示包含30mg)维生素E的所述待测制剂；

(2)对于每支试管，分别向其中加入无水乙醇0.5～1.5ml(例如0.8～1.2ml，典型的为1ml)，充分振摇，再向其中加入硝酸0.5～1.5ml(例如0.8～1.2ml，典型的为1ml)，密塞，立即振摇10～60秒左右，然后加入饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液4～6ml(例如4.5～5.5ml，典型的为5ml)，将试管静置，观察；

(3)对照品试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色；使待测制剂试管的显色情况与对照品试管进行比较：

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比对照品试管顶层液体更深，则可判定加入的待测制剂中含有维生素E并且其量比测试中相应对照品的量更多；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且颜色深度与对照品试管相当(例如相同或接近)，则可判定加入的待测制剂中含有维生素E并且其量与相应对照品的量相当(例如，待测制剂加入量以其中所含维生素E计是维生素E对照品加入量的80％～120％)；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比对照品试管顶层液体更浅，则可判定加入的待测制剂中含有维生素E并且其量比测试中相应对照品的量更少；

如果待测试管的顶层液体显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色，则可判定加入的待测制剂中不含有维生素E或相对于其标示量而言含有极微量的维生素E。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品的加入量为10～150mg，例如20～100mg，例如20～70mg，例如约30mg。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，待测制剂加入量以其中所标示含有的维生素E计是维生素E对照品加入量的50％～200％，例如是75％～150％，例如是80％～120％，例如是约100％。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，其中对照品试管中，显橙色至橙红色的顶层液体与该试管中总液体的体积比为1：5～10，例如1：6～10，例如1：6～9。

如果能确定所述制剂的基本配方，则可确定该制剂的空白处方，即除了不含有维生素E之外的配方，其在本领域通常亦可称为空白辅料、空白制剂等，它们均具有相同含义。由此，根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中还包括向一支试管中加入相当于待测制剂用量的空白制剂，并将该试管平行地执行后续步骤的操作，结果在步骤(3)中显示，该空白制剂试管的顶层液体显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色。

根据本发明第一方面任一实施方案的方法，其中在步骤(1)及后续的处理步骤中，平行地处理1-5支对照品的试管和/或平行地处理1-5支待测制剂的试管和/或平行地处理1-5支空白制剂的试管。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂中包含维生素E或者标示包含维生素E，并且该制剂中还任选地包含维生素A或者标示包含维生素A，并且该制剂中还任选地包含维生素D或者标示包含维生素D。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供哺乳动物使用的。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供人使用的。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供人经口服使用的。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是药品、保健品、食品、或保健食品。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是选自下列的制剂形态：片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、注射液、粉剂、颗粒剂等。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，并且每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-500mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-250mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为2-100mg。

根据本发明第二方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，该制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～25％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～20％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～15％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～10％。

进一步地，本发明第三方面提供了一种检测并判定标示含有维生素E的待测制剂中含有维生素E粗略量的方法，该方法包括以下步骤：

(1)提供至少4支具塞试管，向其中三支中分别加入维生素E对照品(或者事先已加入)5mg、30mg和200mg，向另外一支或多支试管中分别加入维生素E对照品10～150mg，使这些试管中的维生素E对照品添加量均匀分散于5～30mg和/或30～200mg之间，并以从少到多的量排列；向另一具塞试管中添加标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂；

(2)对于每支试管，分别向其中加入无水乙醇0.5～1.5ml(例如0.8～1.2ml，典型的为1ml)，充分振摇，再向其中加入硝酸0.5～1.5ml(例如0.8～1.2ml，典型的为1ml)，密塞，立即振摇10～60秒左右，然后加入饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液4～6ml(例如4.5～5.5ml，典型的为5ml)，将试管静置，观察；

(3)对照品试管的顶层液体呈现色泽深度与维生素E对照品添加量呈正相关性的橙色至橙红色(即维生素E对照品添加量越大则颜色越深)，其下部液体呈无色或微弱黄色；使待测制剂试管的显色情况与对照品试管进行比较：

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比添加30mg维生素E的对照品试管顶层液体更深，则可判定标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂中实际含有大于30mg的维生素E；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比添加5mg维生素E的对照品试管顶层液体更浅，则可判定标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂中实际含有小于5mg的维生素E；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度居于添加5mg和200mg维生素E的两支对照品试管之间，并且颜色深度居于其中某两支维生素E添加量相邻的对照品试管之间，则可判定标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂中实际含有的维生素E介于所述两支维生素E添加量相邻的对照品试管中的维生素E量之间。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为4支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、30mg、50mg、200mg。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为5支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、30mg、50mg、100mg、200mg。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为6支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、20mg、30mg、40mg、50mg、200mg。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为6支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、15mg、30mg、50mg、100mg、200mg。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为7支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、10mg、20mg、30mg、50mg、100mg、200mg。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为7支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、15mg、30mg、50mg、80mg、120mg、200mg。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(3)中，其中对照品试管中，显橙色至橙红色的顶层液体与该试管中总液体的体积比为1：5～10，例如1：6～10，例如1：6～9。

如果能确定所述制剂的基本配方，则可确定该制剂的空白处方，即除了不含有维生素E之外的配方，其在本领域通常亦可称为空白辅料、空白制剂等，它们均具有相同含义。由此，根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中步骤(1)中还包括向一支试管中加入相当于待测制剂用量的空白制剂，并将该试管平行地执行后续步骤的操作，结果在步骤(3)中显示，该空白制剂试管的顶层液体显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中在步骤(1)及后续的处理步骤中，平行地处理1-5份对照品的试管和/或平行地处理1-5支待测制剂的试管和/或平行地处理1-5支空白制剂的试管。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂中包含维生素E或者标示包含维生素E，并且该制剂中还任选地包含维生素A或者标示包含维生素A，并且该制剂中还任选地包含维生素D或者标示包含维生素D。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供哺乳动物使用的。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供人使用的。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是供人经口服使用的。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是药品、保健品、食品、或保健食品。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是选自下列的制剂形态：片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、注射液、粉剂、颗粒剂等。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，并且每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-500mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-250mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为2-100mg。

根据本发明第三方面任一实施方案的方法，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，该制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～25％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～20％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～15％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～10％。

进一步地，本发明第四方面提供了一种制剂，其标示含有维生素E，但是：

根据本发明第二方面任一实施方案测定，相对于该制剂所标示的维生素E量而言，其中不含有微生素E或者仅含有极微量的微生素E；或者，

根据本发明第三方面任一实施方案测定，相对于该制剂所标示的维生素E量而言，其中所含微生素E量低于标示量的50％，例如低于40％，例如低于30％，例如低于20％，例如低于10％。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂中包含维生素E或者标示包含维生素E，并且该制剂中还任选地包含维生素A或者标示包含维生素A，并且该制剂中还任选地包含维生素D或者标示包含维生素D。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是供哺乳动物使用的。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是供人使用的。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是供人经口服使用的。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是药品、保健品、食品、或保健食品。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是选自下列的制剂形态：片剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、注射液、粉剂、颗粒剂等。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，并且每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-500mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为1-250mg，例如每个单位制剂中标注含有的维生素E的量为2-100mg。

根据本发明第四方面任一实施方案的制剂，其中所述制剂是标示含有维生素E的制剂，该制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～25％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～20％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～15％，例如制剂中维生素E占该制剂重量的0.1～10％。

基于本发明以上各方面的方法，本发明第五方面提供了一种检测试剂盒，其用于检测标示含有维生素E的制剂中所含有的维生素E，所述检测试剂盒包括：

(i)至少一个内置有5～50mg维生素E对照品的具塞试管，至少一个空的具塞试管；

(ii)一个包含至少2ml无水乙醇的溶剂瓶(其例如50ml、100ml、200ml、250ml)，并且其可通过适当的量器以每次1ml的量分取；

(iii)一个包含至少2ml硝酸的溶剂瓶(其例如50ml、100ml、200ml、250ml)，并且其可通过适当的量器以每次1ml的量分取；

(iv)一个包含至少10ml饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液的溶剂瓶(其例如100ml、250ml、500ml、1000ml)，并且其可通过适当的量器以每次5ml的量分取；和任选的

(v)使用说明资料，其上记载有使用该检测试剂盒以检测标示含有维生素E的制剂中的维生素E的方法。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中所述的使用说明资料可以是置于所述检测试剂盒中；亦可以不置于检测试剂盒中而另外放置；还可以在所述检测试剂盒中不包括该使用说明资料(因为本发明方法相对于本领域技术人员而言是极其简单的，对于本领域技术人员操作而言在阅读到本发明之后，完全可以不借助该使用说明资料而直接执行本发明相关方法)。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中所述溶剂瓶是可以反复开启和密封的溶剂瓶。该溶剂瓶的材质不作特别限制，例如可以是带有瓶塞、瓶盖等的玻璃瓶、塑料瓶等。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中所述至少一个空的具塞试管用于处理待测制剂或者空白制剂。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中所述适当的量器选自：吸管、刻度吸管、注射器、移液管、移液器、移液枪等。通常是可以分取1ml和/或5ml量的量器。总体上讲，本发明方法中取用的无水乙醇量、硝酸量、饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液量可以是相对较粗略的，例如当要求取无水乙醇1ml时，取用量在0.95～1.05范围内甚至更宽的范围内都是可以接受的，硝酸和饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液的取用量亦如此。因此，上述的量器是可以相对粗略的，例如吸管、刻度吸管、移液器等都可满足要求。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中根据本发明第一方面任一实施方案方法、本发明第二方面任一实施方案方法、或本发明第三方面任一实施方案方法，设置维生素E对照品试管的数量或重复量。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中根据本发明第一方面任一实施方案方法、本发明第二方面任一实施方案方法、或本发明第三方面任一实施方案方法，设置空具塞试管的数量或重复量。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中根据本发明第一方面任一实施方案方法、本发明第二方面任一实施方案方法、或本发明第三方面任一实施方案方法，设置可供测试样品的数量的部件。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中根据本发明第一方面任一实施方案方法、本发明第二方面任一实施方案方法、或本发明第三方面任一实施方案方法，设置可供测试样品的次数的部件。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中所述使用说明资料可以是使用说明书、检测方法说明、检测判定标准等等，其形式可以是印刷有相应信息的纸张、卡片、小册子、光盘等，该使用说明资料基本上记载了本发明第一方面所述的方法。因此，本发明第一方面任一实施方案中，其中的任一技术特征同样适用于本发明第五方面的检测试剂盒或者适用于本发明的其它方面。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中所述使用说明资料可以是使用说明书、检测方法说明、检测判定标准等等，其形式可以是印刷有相应信息的纸张、卡片、小册子、光盘等，该使用说明资料基本上记载了本发明第二方面所述的方法。因此，本发明第二方面任一实施方案中，其中的任一技术特征同样适用于本发明第五方面的检测试剂盒或者适用于本发明的其它方面。

根据本发明第五方面任一实施方案的检测试剂盒，其中所述使用说明资料可以是使用说明书、检测方法说明、检测判定标准等等，其形式可以是印刷有相应信息的纸张、卡片、小册子、光盘等，该使用说明资料基本上记载了本发明第三方面所述的方法。因此，本发明第三方面任一实施方案中，其中的任一技术特征同样适用于本发明第五方面的检测试剂盒或者适用于本发明的其它方面。

进一步地，本发明第六方面提供了一种信息说明资料，其中基本上记载了本发明第一方面任一项所述的方法、本发明第二方面任一项所述的方法、和/或本发明第三方面任一项所述的方法。

根据本发明第六方面任一实施方案的信息说明资料，该信息说明资料是呈选自下列的形式：纸质文件(包括但不限于文件单页、小册子、刊物)、磁介质、光盘、软盘、电子出版物、网络出版物等，以及它们的组合。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

在本发明中，本发明的方法通常亦可称为快检方法或快检法或者其它类似称谓。

鉴于本发明在一些方面或一些实施方案中，总体上提供的是对待测制剂中的维生素E的量进行粗略判断的方法，通常亦称为或理解为定性分析的方法，因此就本领域技术人员特别是药品食品分析检测领域的技术人员而言，某些看似含糊的术语在本发明中、在本发明条件下是清楚的，例如“约”、“相当”、“更多”、“更少”、“更浅”、“更深”、“微量”、“极微量”等。这些本领域常用术语是区别于精细的分析方法例如高效液相色谱法、气相色谱法的，并且是本领域技术人员通常理解并能接受的。

另外，在本发明的各个方面，每个待测制剂每次测试的量以约5～50mg维生素E计是合适的，特别是以约10～40mg维生素E计是合适的，在此情况下，步骤(2)中无水乙醇的量为1ml，硝酸的量为1ml，饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液的量为5ml，这种测试加样比例是合适的，并且最终的总体积约6～10ml，这对样的量是非常方便的，因为食指大小的试管的容量就大约为10ml，这种检测量是非常适合的，并且制剂的取用量也是非常合适的，例如进行一次检测，通常1粒制剂或数粒制剂就可以满足检测要求，并且不会浪费而给商家造成不必要的损失。当然，根据本发明对现有技术的贡献，本发明方法显然不限于本发明各方面及其各实施方案的加液量比，例如在上文所规定的制剂取用量情况下，无水乙醇、硝酸和饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液的加入量可以同步地增加或减少(例如同步减少至0.1倍至0.9倍，或者例如同步增加至2-20倍)。或者，无水乙醇、硝酸或饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液的加入量可以各自独立地偏离，例如在上述规定量的50％～200％范围内例如50％～150％范围内偏离。而这些实施方案自然地包括在本发明精神和范围内。

本发明方法特别适合市场现场监测使用，完全避免常规实验室检测(例如常规化学显色法、红外法、气相色谱法)的设备复杂、麻烦的特点，并且完全能够满足执法人员的现场快速检测。例如2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)，需要使用75℃的加热条件，这对于行政执法人员去市场作查检而言是极其不方便的。而红外法、气相色谱法等更加是难以实现的。

另外，本发明方法干扰少，即使是添加了辅料的制剂，亦能有效地检测，辅料不会对检测有影响。

另外，本发明方法准确可靠、分辨率高，本发明方法中，显橙色或橙红色仅局限于试管顶层液体，约相当于总液体体积的1/5～10量，下层基本不呈色，相当于显色层颜色有富集；而使用2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)，其在整个试管中均显现基本一致的颜色，并且在相当加样量下颜色明显地本发明浅。

另外，本发明方法具有快速、简单的特点。一般而言，本发明方法每个试样可以在2分钟内完全，并且可以同时执行多个样品的检测；而使用2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)，其每个试样至少需要17分钟，并且由于需要加热操作，无法或者不便同时执行多个样品的检测。

另外，本发明方法具有安全的特点。已经发现，本发明方法处理过程中以及在观察显色后，即使使试管一直密塞，亦不会喷瓶。然而，使用2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)，在处理过程中以及在观察显色后，如果密塞，经常会有喷瓶的问题，可以将密封严实的试管塞喷出，甚至里面的液体亦会喷出。另外，出人意料的是，使用2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)处理完毕的液体，其酸性仍然非常强，对皮肤明显有灼烧感，而本发明方法处理完毕的液体，其酸性已经很弱，皮肤接触无任何灼烧感。

附图说明

图1是本发明快检方法测定空白辅料及对照品显色结果的照片或图片；

图2是本发明快检方法测定空白辅料及样品显色结果的照片或图片；

图3是采用药典方法测定空白辅料及对照品显色结果的照片或图片；

图4是采用药典方法测定空白辅料及样品显色结果的照片或图片；

图5是采用本发明快检方法与药典方法显色结果对比的照片或图片；

图6是采用本发明快检方法测试含1％维生素快检对照样品与气相检测方法结果对比的照片或图片；

图7是采用本发明快检方法测试含2％维生素快检对照样品与气相检测方法结果对比的照片或图片；

图8是采用本发明快检方法测试含5％维生素快检对照样品与气相检测方法结果对比的照片或图片；

图9是采用本发明快检方法测试含10％维生素快检对照样品与气相检测方法结果对比的照片或图片；

图10是采用本发明快检方法测试含20％维生素快检对照样品与气相检测方法结果对比的照片或图片；

图11是采用本发明快检方法测试供试品与气相检测方法结果对比的照片或图片。

图12是采用本申请涉及的试剂盒的一个实例的示意图。

具体实施方式

下面通过具体的实例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

一、本发明用到的一些典型仪器、样品与试剂

下面列出了一些本发明用到的一些典型仪器、样品与试剂，当然本发明试验中不限于使用这些仪器、样品与试剂，如有未列明的，它们当然是本领域技术人员常规使用的仪器、样品与试剂。

1、仪器

Agilent 7890A气相色谱仪，Agilent 7693自动进样***；BP211D电子天平(德国Sartorius公司)。

2、样品与试剂

无水乙醇(来源国药集团化学试剂有限公司，批号：20140509，纯度≥99.7％)；

乙酸钠(来源北京现代东方精细化学品有限公司，批号：20080102，纯度≥99.0％)；

正己烷(来源北京现代东方精细化学品有限公司，批号：20110111，纯度≥95.0％)；

正三十二烷(来源中国上海试剂一厂，批号：79-06-01，纯度≥99.0％)；

甘油(来源北京现代东方精细化学品有限公司，批号：20130622，纯度≥99.0％)；

大豆油(秦皇岛金海食品工业有限公司，批号：2359181)；

维生素E(来源中国食品药品检定研究院，批号100062-201110，纯度：98.6％)；

养生堂天然维生素E软胶囊4批(海南养生堂药业有限公司，批号分别为：20140305B、20140508B、20140423C、20140305A，规格：0.25g)；

总统牌维生素E软胶囊(北京同仁堂健康药业股份有限公司，批号：3203018，规格：0.4g)；

天然维生素E软胶囊5批(汤臣倍健股份有限公司，批号分别为：20140406E、20140404E、20140401E、20140403E、20140206E，规格：0.5g)，

康力士牌三文鱼油维生素E软胶囊2批(广州市康力士保健品有限公司，批号分别为：20120718、20140118，规格：1.45g)；

金奥力牌葡萄籽维生素E软胶囊2批(威海紫光科技园有限公司，批号分别为：14030701、14050701，规格：0.5g)；

金奥力牌大豆异黄酮维E软胶囊1批(威海紫光科技园有限公司，批号分别为：14040301，规格：0.5g)；

威莱斯牌大豆异黄酮维E胶囊1批(北京万康保健品有限公司，批号分别为：20130301，规格：0.48g)。

二、本发明用到的方法(与结果)

1、气相色谱法及其实验条件

在本发明中，使用到气相色谱法，从更精确的角度测定待测试样中维生素E的含量，以此验证本发明的快检法、药典2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)的可靠性。

在此处，气相色谱法所使用的方法是参照2010年版中国药典二部所记载维生素E含量测定方法。

(1)气相色谱法的实验条件：

色谱柱为DB-1毛细管柱(30m×0.53mm×0.5μm，J&W Scientific)，恒温：柱初温265℃，保持25min；进样口温度为300，载气为氦气，流量3.0mL/min；分流比20:1，进样量1μl；检测器：FID，温度300℃，氢气40mL/min，空气350mL/min，氮气25mL/min。

(2)气相色谱样品制备

气相色谱法对照品制备：精密称取维生素E对照品适量，加内标液(含正三十二烷1mg/ml的正己烷溶液)稀释成每1ml约含维生素E为2mg的溶液；

气相色谱法样品制备：精密称取快检对照品维生素E油状物和样品各200mg，置10ml量瓶中，加内标液稀释至刻度，摇匀，作为供试品；

气相色谱法空白辅料制备：精密称取快检空白辅料200mg，置10ml量瓶中，加内标液稀释至刻度，摇匀，作为空白辅料溶液。

2、本发明快检方法及其实验条件和试验结果

(1)快检空白辅料制备：称取大豆油和甘油各50g，置同一烧瓶中，混匀(这是本发明所检测的各试样厂家所用的最典型的空白辅料组成)；称取空白辅料1.0g，置10ml离心管中；

(2)快检对照品制备：称取维生素E对照品适量，置10ml离心管中，加入空白辅料1.0g，制成含维生素E约为0.5％(5mg/1g)、1.0％(10mg/1g)、2.0％(20mg/1g)、3.0％(30mg/1g)、5.0％(50mg/1g)、10.0％(100mg/1g)、20.0％(200mg/1g)的维生素E油状物[亦可以是其它浓度，这样设置可以容易地实现本发明第三方面所述方法的系列标准对照品；另外，当检测的试样根据其标示量可以分取标示的30mg维生素E时，可以仅设置一个3.0％(30mg/g)对照品试管，即本发明第一方面或第二方面所述方法的标准对照品]；

(3)快检样品制备：称取待检测的维生素E软胶囊内容物或其它剂型适量(这些待检样品标示含有的维生素E在20～40mg范围内[本试验中典型地取标示含有维生素E为30mg的待检样品]，通常对于软胶囊而言辅料加上维生素E的总重量约0.5～2g[本试验中典型地总重量1g])，分别置10ml离心管中。

(4)本发明快检方法的样品显色处理

取装有空白辅料、对照品和样品的离心管，分别加入无水乙醇1ml，充分振摇后加入1ml的硝酸，立即振摇30秒左右，加入饱和的乙酸钠溶液5ml，观察试管中的显色情况，并将待测样品与对照品、空白辅料比较，以判定待测样品中维生素E的含量。

(5)本发明快检方法的一般显色情况

在本发明上述快检方法中，通常而言：

空白辅料(在本发明中亦称为空白制剂或其它类似称谓)试管的顶层液体通常显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色；

对照品试管的顶层液体显橙色至橙红色，并且它们的色泽深度与维生素E对照品添加量呈明显的正相关性，即维生素E对照品添加量越大则颜色越深)，其下部液体呈无色或微弱黄色；

观察待测制剂试管的显色情况并与对照品试管进行比较：对于经气相色谱法验证含有维生素E且含量与其标示量基本一致的待测制剂，其在本快检方法中，顶层液体显橙色至橙红色且其色泽深度与对照品相应量试管的色泽深度相当，或者色泽深度位于与其相邻两个浓度对照品试管的色泽深度之间；其下部液体呈无色或微弱黄色。

(5)本发明快检方法的典型试验结果

图1提供了空白辅料试管以及部分对照品试管[维生素E含量1.0％(10mg/1g)、2.0％(20mg/1g)、5.0％(50mg/1g)、10.0％(100mg/1g)、20.0％(200mg/1g)]的照片。图中显示，空白辅料试管在液体顶部呈现一层褐色，该层体积约点液体总体积的1/9，而下部液体基本无色。另外，对照品试管亦呈现类似于空白辅料试管的液体分布，不同的是它们的顶层是橙色至橙红色，下部液体呈无色或微弱黄色，并且各试管中顶层液体的色泽深度与维生素E添加量呈正相关性，添加量越大色泽越深。

图2提供了空白辅料试管以及部分待测制剂试管[图中两个市售软胶囊样品2和样品3试验添加样中均标示含有维生素E30mg]的照片。图中显示，空白辅料试管与图1中的基本相同，两个样品管的液体显色分布与对照品管相同，但是两个管的色泽浓度介于10％对照品管和20％对照品管之间(即测得在100～200mg之间)，即经本发明快检法测定，不但能够判断其中确实含有维生素E，甚至实际含有量远大于其标示量30mg。另外，这两个样品经气相色谱法验证，显示样品2和样品3每标示含有30mg维生素E的药液中GC法测得实际分别含有143mg和127mg，表明本发明方法与GC法相当。

3、药典化学显示法及其实验条件和试验结果

参照药典2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)进行，以进行对比试验，验证快检方法的可行性和优势。

测试用的空白辅料、对照品和样品的制备分别参见本发明上文“2、本发明快检方法及其实验条件和试验结果”之(1)～(3)所列的。

取装有空白辅料、对照品和样品的离心管，分别加入无水乙醇10ml，充分振摇后加入2ml的硝酸，在75℃水浴中加热15分钟，即得。

图3提供了采用药典方法测试的空白辅料及对照品的显色结果，如图所示，空白辅料管中整管液体呈现均匀的黄色，而含维生素E1％(10mg)和维生素E2％(20mg)对照品显微黄色(整管基本均匀)，含维生素E5％(50mg)至20％(200mg)对照品显浅橙色至浅橙红色整管色泽分布基本均匀，但总体上讲与相应添加对照品量的本发明方法结果(见图1)相比明显地更浅，特别是维生素E1％(10mg)和维生素E2％(20mg)两管显色完全不典型，在此情况下甚至可能造成误判。

图4提供了空白辅料试管以及部分待测制剂试管[图中两个市售软胶囊样品2和样品3试验添加样中均标示含有维生素E30mg，它们与图2中的两个软胶囊样品2和样品3相同]的照片。图中显示，空白辅料试管与图3中的基本相同，两个样品管的液体显色分布与对照品管相同，但是两个管的色泽浓度介于2％对照品管和5％对照品管之间(即测得在20～50mg之间)。可见，尽管经药典方法测定，能够判断其中确实含有维生素E，但是其所判断的含量远小于用GC法准确验证的含量(如上文所述的，样品2和样品3用GC法验证的含量分别为143mg和127mg)，表明药典方法不能用于粗略地判断含量。

4、快检方法与药典鉴别方法显色结果对比

通过上面的对比试验，本发明快检方法有诸多方面的优点：首先解决了维生素E显色反应需要加热的问题，本发明方法无需要加热，通过调整溶剂与硝酸的比例，即可很好的解决此方面的问题，作为市场监管人员在执法时，不用带加热设备即可容易的执法。

此外，与药典方法相比，本发明方法提高了检验的灵敏度。图5是使用上文方法，在另外一个比较试验中使用对照品进行的比较试验结果的照片，图中左侧三个试管是使用本发明方法测得的结果，右侧三个试管是使用药典方法测得的结果。显然，即使维生素E添加量相同并且相对量较少(10mg和20mg)，但本发明测试管的颜色显著地比药典方法典型，并且容易判断。

5、气相色谱验证快检方法的可靠性分析结果

此外，本发明快检方法是相对比较准确性，不但可以定性，还可以半定量，即进行粗略的定量。上文，以及下文通过与气相色谱法检验结果对比，表明本发明快检方法具有较好的准确性和可靠性。示意性的结果如图6-11。其中显示了快检对照品显色结果与气相色谱检测结果对比：快检发现空白辅料显灰色、对照品显橙色至橙红色、样品显橙红色；气相色谱检测结果发现空白辅料无干扰，制备的快检对照品与测试样品均能检测到相应的维生素E色谱峰。其中，图6显示了采用本发明快检方法测试含1％维生素E对照品与气相检测方法结果对比；图7显示了采用本发明快检方法测试含2％维生素E对照品与气相检测方法结果对比；图8显示了采用本发明快检方法测试含5％维生素E对照品与气相检测方法结果对比；图9显示了采用本发明快检方法测试含10％维生素E对照品与气相检测方法结果对比；图10显示了采用本发明快检方法测试含20％维生素E对照品与气相检测方法结果对比；图11显示了采用本发明快检方法测试供试品(试样2、试样3)与气相检测方法结果对比。

三、对若干市售品进行检测

根据上面“二、本发明用到的方法(与结果)”的本发明快检方法，测定一些从市场获得的标示含有维生素E的软胶囊，对它们进行显色测定，首先确定是否确实含有维生素E、其次以半定量的方式确定其中维生素E的大致含量、再通过气相色谱法测定各试样中维生素E的确切含量、最后比较本发明快检法与气相法结果的吻合度。

在本发明中，考虑标示量、含量、实际含量时，是以标示每粒所含维生素E量以及软胶囊内容物总重量、以及实际测定的含量进行计算的。例如，如果每粒标示含量为50mg(GC测定结果是准确的，并且GC实测结果可能与此实际标示含量不一致，如果实测结果远低于标示量则这是一种伪劣产品)，每粒软胶囊内容物即胶囊皮内的全部药液(包括辅料、其它药物和维生素E)总重量为1g，则要取标示30mg维生素E的量时，取600mg药液即可，这600mg药液中即认为标示含有30mg维生素E。如果产品实际药物含量与标示含量一致，则此600mg药液经GC测定时含维生素E应大约有30mg左右。由此可以通过GC法判断本发明方法的准确性(特别是在半定量时)以及产品的真伪优劣。

我们通过快检方法显色，结合气相色谱法验证，对12批维生素E制剂进行质量评价，评价结果见(表1)，结果显示这些产品标示维生素E含量与发明人采用GC法测定的结果一致。另外还有4批样品从市场上抽查到的样品(生产商和批号未在此提供)，结果发现其GC法实测量均不到标示含量的20％，甚至个别根本没有维生素E。

表1：维生素E制剂快检显色结果

No.	检品名称	厂家	批号	显色结果*	气相
						1	天然维生素E软胶囊	汤臣倍健	20140401E	阳性(橙红色)	检出
2	天然维生素E软胶囊	汤臣倍健	20140403E	阳性(橙红色)	检出
						3	天然维生素E软胶囊	汤臣倍健	20140404E	阳性(橙红色)	检出
4	天然维生素E软胶囊	汤臣倍健	20140406E	阳性(橙红色)	检出
						5	天然维生素E软胶囊	汤臣倍健	20140206E	阳性(橙红色)	检出
6	天然维生素E软胶囊	养生堂	20140305A	阳性(橙红色)	检出
						7	天然维生素E软胶囊	养生堂	20140305B	阳性(橙红色)	检出

8	天然维生素E软胶囊	养生堂	20140308B	阳性(橙红色)	检出
						9	天然维生素E软胶囊	养生堂	20140423C	阳性(橙红色)	检出
10	总统牌维生素E软胶囊	同仁堂	3203018	阳性(橙红色)	检出
						11	三文鱼油维生素E软胶囊	康力士	20140118	阳性(橙色)	检出
12	三文鱼油维生素E软胶囊	康力士	20120718	阳性(橙色)	检出

*指上层液体的颜色。

编号1-12各试样上层液体呈现典型的对照品的颜色和色泽，而下层液体均基本上无色。另外，上表中编号1-12各试样采用本发明方法进行半定量地估算，估算其显色法检出量与标示量的差异，以及它们与GC法结果的差异。结果显示，这些试样显色法半定量方法检出量与标示量的差异无显著差别，并且半定量方法检出量与GC法基本相符，GC法实测结果与显色法结果和标示含量三者均落在上文“(2)快检对照品制备”中同一个相邻两加样量管范围内。

另外，测定的4批样品从市场上抽查到的不合格样品，它们的GC法实测结果与显色法结果均远远低于标示含量，特别是它们的GC法实测量均不到标示含量的20％，甚至个别根本没有维生素E。

四、方法学考察

1、方法适应性考察

如上文所述的，本发明方法的一个典型方法如下：

快检空白辅料制备：称取大豆油和甘油各50g，置同一烧瓶中，混匀，称取空白辅料1.0g，置10ml离心管中；

快检对照品制备：称取维生素E对照品适量，置10ml离心管中，加入空白辅料1.0g，制成含维生素E约为0.5％(5mg/1g)、1.0％(10mg/1g)、2.0％(20mg/1g)、3.0％(30mg/1g)、5.0％(50mg/1g)、10.0％(100mg/1g)、20.0％(200mg/1g)的维生素E油状物；

快检样品制备：称取待检测的维生素E软胶囊内容物或其它剂型适量，其中标示含有维生素E为30mg，分别置10ml离心管中；

显色处理：取装有空白辅料、对照品和样品的离心管，分别加入无水乙醇1ml，充分振摇后加入1ml的硝酸，立即振摇30秒左右，加入饱和的乙酸钠溶液5ml，观察试管中的显色情况，并将待测样品与对照品、空白辅料比较，以判定待测样品中维生素E的含量。

以上典型方法的效果已在本发明上下文中得以验证，现提供以下变换形式以考察方法的适应性。

(1)仅仅在显色处理时，将无水乙醇的添加量改为0.5ml、1.5ml、0.8ml和1.2ml，其它操作条件不变，结果在处理3.0％(30mg/1g)对照品和标示含量30mg软胶囊时，均与使用乙醇量1ml显色结果相同；

(2)仅仅在显色处理时，将硝酸的添加量改为0.5ml、1.5ml、0.8ml和1.2ml，其它操作条件不变，结果在处理3.0％(30mg/1g)对照品和标示含量30mg软胶囊时，均与使用硝酸量1ml显色结果相同；

(3)仅仅在显色处理时，将饱和乙酸钠添加量改为4ml、6ml、4.5ml、和5.5ml，其它操作条件不变，结果在处理3.0％(30mg/1g)对照品和标示含量30mg软胶囊时，均与使用饱和乙酸钠量5ml显色结果相同。

(4)仅仅在显色处理时，将饱和乙酸钠溶液改为饱和乙酸钾溶液并且添加量改为4ml、5ml、6ml，其它操作条件不变，结果在处理3.0％(30mg/1g)对照品和标示含量30mg软胶囊时，均与使用饱和乙酸钠量5ml显色结果相同。

(5)仅仅在显色处理时，将饱和乙酸钠溶液分别改为饱和氢氧化钠溶液、饱和碳酸氢钠溶液、饱和碳酸钠溶液，其它操作条件不变，结果在处理3.0％(30mg/1g)对照品和标示含量30mg软胶囊时，均不能形成典型的约占总液体体积1/5～10的顶层液体是橙色至橙红色，而下部液体呈无色或微弱黄色的本发明典型现象，而是与药典2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)所得结果接近并且颜色更浅。

2、本发明方法与药典显色法的安全性考察

使用本发明的快检方法，在处理数十次样品的试验中，将处置妥当的液体在试管中密塞，放置5小时以上，从未见有喷瓶的现象发生。并且这些测试完的废液在与皮肤接触时无任何灼烧感。这表明本发明方法是安全的。

但是使用2010年版中国药典二部所记载维生素E【鉴别】项下的方法(1)时，在处理数十次样品的试验中，将处置妥当的液体在试管中密塞，即使放置1小时以内，都有至少30％以上的喷瓶现象发生，液体将瓶塞冲开而向外喷出。此外，这些测试完的废液在与皮肤接触时对皮肤明显有灼烧感，这是非常不安全的。

3、其它药物的干扰

参照上文“二、本发明用到的方法(与结果)”的方法，对同时包含维生素A、维生素D、维生素E的市售软胶囊制剂进行检测，并使用GC法进行验证，结果发现，本发明方法检测维生素E时不会受到维生素A、维生素D的干扰，并且其半定量结果与GC法基本吻合。因此，在本发明任一方面的一个实施方案中，所述制剂中包含维生素E或者标示包含维生素E，并且该制剂中还任选地包含维生素A或者标示包含维生素A，并且该制剂中还任选地包含维生素D或者标示包含维生素D。

五、本发明的检测试剂盒

一般地讲，本发明提供了以下示例模式的检测试剂盒，其用于检测标示含有维生素E的制剂中所含有的维生素E。具体的如图12，其是采用本申请涉及的试剂盒的一个实例的俯视的示意图，如图所示，所述检测试剂盒1在盒子内(这个盒子可以使用盖子在平时将其盖上)包括：

(i)至少一个内置有5～50mg维生素E对照品的具塞试管2(它们汇集在一个矩形区域中)，至少一个空的具塞试管3(它们汇集在一个矩形区域中)；

(ii)一个包含至少2ml无水乙醇的溶剂瓶5，并且其可通过适当的量器4(可以使用吸管)以每次1ml的量分取；

(iii)一个包含至少2ml硝酸的溶剂瓶6，并且其可通过适当的量器4以每次1ml的量分取；

(iv)一个包含至少10ml饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液的溶剂瓶7，并且其可通过适当的量器4以每次5ml的量分取；

(v)存在或不存在的使用说明资料8(图中示意性地绘出，表示其存在于该试剂盒中；亦可在试剂盒中不存在)，其上记载有使用该检测试剂盒以检测标示含有维生素E的制剂中的维生素E的方法。

在一个实例中，所述溶剂瓶5、6、7是可以反复开启和密封的溶剂瓶。该溶剂瓶的材质不作特别限制，例如可以是带有瓶塞、瓶盖等的玻璃瓶、塑料瓶等。

在一个实例中，所述至少一个空的具塞试管3用于处理待测制剂或者空白制剂。

在一个实例中，所述适当的量器4是吸管，其还可以使用刻度吸管、注射器、移液管、移液器、移液枪等，通常是可以分取1ml和/或5ml量的量器。

在一个实例中，所述存在或不存在的使用说明资料8可以是使用说明书、检测方法说明、检测判定标准等等，其形式可以是印刷有相应信息的纸张、卡片、小册子、光盘等，该使用说明资料基本上记载了本发明第一方面、第二方面、或第三方面所述的方法。

2、本发明的检测试剂盒的典型示例

现提供一种典型的根据本发明的检测试剂盒，该检测试剂盒包括以下部分：

(i)20个内置有30mg维生素E对照品(可以加有500mg大豆油和500mg甘油，本质上讲，试验亦发现，本发明方法中对照品管中可以不加空白辅料，加空白辅料与不加的显色结果一致)的具塞试管，100个空的具塞试管；

(ii)一个可重复开取并吸取其中液体的溶剂瓶，装有100ml无水乙醇，并配有可吸取1ml乙醇的吸管；

(iii)一个可重复开取并吸取其中液体的溶剂瓶，装有100ml硝酸，并配有可吸取1ml硝酸的吸管；

(iv)一个可重复开取并吸取其中液体的溶剂瓶，装有500ml饱和乙酸钠溶液，并配有可吸取5ml饱和乙酸钠溶液的吸管；

(v)使用说明资料，其上记载有使用该检测试剂盒以检测标示含有维生素E的制剂中的维生素E的方法，该检测方法如本发明第一方面任一实施方案所述或者如本发明第二方面任一实施方案所述。

现提供另一种典型的根据本发明的检测试剂盒，该检测试剂盒包括以下部分：

(i)20组内置有维生素E对照品的具塞试管，每组包括7个试管，分别装有5mg、10mg、20mg、30mg、50mg、100mg、200mg维生素E；200个空的具塞试管；

(ii)一个可重复开取并吸取其中液体的溶剂瓶，装有200ml无水乙醇，并配有可吸取1ml乙醇的吸管；

(iii)一个可重复开取并吸取其中液体的溶剂瓶，装有200ml硝酸，并配有可吸取1ml硝酸的吸管；

(iv)一个可重复开取并吸取其中液体的溶剂瓶，装有1000ml饱和乙酸钠溶液，并配有可吸取5ml饱和乙酸钠溶液的吸管；

(v)使用说明资料，其上记载有使用该检测试剂盒以检测标示含有维生素E的制剂中的维生素E的方法，该检测方法如本发明第一方面任一实施方案所述或者如本发明第二方面任一实施方案所述或者如本发明第三方面任一实施方案所述。

产业适用性

本发明维生素E快检方法是一种简便的方法，该方法以气相色谱对结果进行了验证，结果表明方法准确。方法准确性好、灵敏且操作安全，特别适用于在执法现场的快速检测。

Claims (25)

1.检测制剂中维生素E的方法，该方法包括以下步骤：

(1)向一支具塞试管中加入维生素E对照品5～200mg，向另一具塞试管中添加标示包含5～200mg维生素E的待测制剂；

(2)对于每支试管，分别向其中加入无水乙醇0.5～1.5ml，充分振摇，再向其中加入硝酸0.5～1.5ml，密塞，立即振摇10～60秒，然后加入饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液4～6ml，将试管静置，观察；

(3)对照品试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色；使待测制剂试管的显色情况与对照品试管进行比较。

2.根据权利要求1的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品的加入量为30mg。

3.根据权利要求1的方法，其中步骤(1)中，还包括向另外一支试管中加入相当于待测制剂用量的空白制剂，并将该试管平行地执行后续步骤的操作，结果在步骤(3)中显示，该空白制剂试管的顶层液体显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色。

4.根据权利要求3的方法，其中在步骤(1)及后续的处理步骤中，平行地处理1-5支对照品的试管、平行地处理1-5支待测制剂的试管、平行地处理1-5支空白制剂的试管。

5.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中，如果加入的待测制剂中所含维生素E量与维生素E对照品加入量相当，则待测制剂试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且颜色深度与对照品试管相当。

6.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中，如果待测制剂试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且颜色深度与对照品试管相当，则可判定加入的待测制剂中所含维生素E量与维生素E对照品加入量相当。

7.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)的对照品试管中，显橙色至橙红色的顶层液体与该试管中总液体的体积比为1：5～10。

8.根据权利要求1的方法，所述制剂是药品、保健品、或食品。

9.检测并判定标示含有维生素E的待测制剂中是否含有维生素E的方法，该方法包括以下步骤：

(1)向一支具塞试管中加入维生素E对照品5～200mg，向另一具塞试管中添加标示包含5～200mg维生素E的待测制剂；

(2)对于每支试管，分别向其中加入无水乙醇0.5～1.5ml，充分振摇，再向其中加入硝酸0.5～1.5ml，密塞，立即振摇10～60秒，然后加入饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液4～6ml，将试管静置，观察；

(3)对照品试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色；使待测制剂试管的显色情况与对照品试管进行比较：

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比对照品试管顶层液体更深，则可判定加入的待测制剂中含有维生素E并且其量比对照品的量更多；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度与对照品试管相当，则可判定加入的待测制剂中含有维生素E并且其量与对照品的量相当；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比对照品试管顶层液体更浅，则可判定加入的待测制剂中含有维生素E并且其量比对照品的量更少；

如果待测试管的顶层液体显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色，则可判定加入的待测制剂中不含有维生素E或相对于其标示量而言含有极微量的维生素E。

10.根据权利要求9的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品的加入量为30mg。

11.根据权利要求9的方法，其中步骤(1)中，还包括向另外一支试管中加入相当于待测制剂用量的空白制剂，并将该试管平行地执行后续步骤的操作，结果在步骤(3)中显示，该空白制剂试管的顶层液体显棕色或褐色，其下部液体呈无色或极微弱黄色。

12.根据权利要求11的方法，其中在步骤(1)及后续的处理步骤中，平行地处理1-5支对照品的试管、平行地处理1-5支待测制剂的试管、平行地处理1-5支空白制剂的试管。

13.根据权利要求9的方法，其中步骤(3)中，如果加入的待测制剂中所含维生素E量与维生素E对照品加入量相当，则待测制剂试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且颜色深度与对照品试管相当。

14.根据权利要求9的方法，其中步骤(3)中，如果待测制剂试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且颜色深度与对照品试管相当，则可判定加入的待测制剂中所含维生素E量与维生素E对照品加入量相当。

15.根据权利要求9的方法，其中步骤(3)的对照品试管中，显橙色至橙红色的顶层液体与该试管中总液体的体积比为1：5～10。

16.根据权利要求9的方法，所述制剂是药品、保健品、或食品。

17.检测并判定标示含有维生素E的待测制剂中含有维生素E量的方法，该方法包括以下步骤：

(1)提供至少4支具塞试管，向其中三支中分别加入维生素E对照品5mg、30mg和200mg，向另外一支或多支试管中分别加入维生素E对照品10～150mg，使这些试管中的维生素E对照品添加量均匀分散于5～30mg和/或30～200mg之间，并以从少到多的量排列；向另一具塞试管中添加标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂；

(2)对于每支试管，分别向其中加入无水乙醇0.5～1.5ml，充分振摇，再向其中加入硝酸0.5～1.5ml，密塞，立即振摇10～60秒，然后加入饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液4～6ml，将试管静置，观察；

(3)对照品试管的顶层液体呈现色泽深度与维生素E对照品添加量呈正相关性的橙色至橙红色，即维生素E对照品添加量越大则颜色越深，其下部液体呈无色或微弱黄色；使待测制剂试管的显色情况与对照品试管进行比较：

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比添加30mg维生素E的对照品试管顶层液体更深，则可判定标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂中实际含有大于30mg的维生素E；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度比添加5mg维生素E的对照品试管顶层液体更浅，则可判定标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂中实际含有小于5mg的维生素E；

如果待测试管的顶层液体显橙色至橙红色，其下部液体呈无色或微弱黄色，并且顶层液体的颜色深度居于添加5mg和200mg维生素E的两支对照品试管之间，并且颜色深度居于其中某两支维生素E添加量相邻的对照品试管之间，则可判定标示包含相当于30mg维生素E的所述待测制剂中，实际含有的维生素E介于所述两支维生素E添加量相邻的对照品试管中的维生素E量之间。

18.根据权利要求17的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为4支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、30mg、50mg、200mg。

19.根据权利要求17的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为5支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、30mg、50mg、100mg、200mg。

20.根据权利要求17的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为6支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、20mg、30mg、40mg、50mg、200mg。

21.根据权利要求17的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为6支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、15mg、30mg、50mg、100mg、200mg。

22.根据权利要求17的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为7支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、10mg、20mg、30mg、50mg、100mg、200mg。

23.根据权利要求17的方法，其中步骤(1)中，维生素E对照品试管为7支，各支添加的维生素E对照品量分别为5mg、15mg、30mg、50mg、80mg、120mg、200mg。

24.根据权利要求17的方法，所述制剂是药品、保健品、或食品。

25.一种检测试剂盒，其用于检测标示含有维生素E的制剂中所含有的维生素E，所述检测试剂盒包括：

(i)至少一个内置有5～50mg维生素E对照品的具塞试管，至少一个空的具塞试管；

(ii)一个包含至少2ml无水乙醇的溶剂瓶，并且其可通过适当的量器以每次1ml的量分取；

(iii)一个包含至少2ml硝酸的溶剂瓶，并且其可通过适当的量器以每次1ml的量分取；

(iv)一个包含500ml饱和乙酸钠溶液或饱和乙酸钾溶液的溶剂瓶，并且其可通过适当的量器以每次5ml的量分取；

(v)使用说明资料，其上记载有使用该检测试剂盒以检测标示含有维生素E的制剂中的维生素E的方法，该方法如权利要求1-24任一项所述。