CN102519956B - 一种快速检测酚酞的方法及其使用的试纸 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种快速检测酚酞的方法及其使用的试纸，该方法包括以下步骤：(1)取所述制品适量，与乙醇水溶液混合，振摇，得混合试液；(2)取经碳酸氢钠浸渍的酚酞筛查试纸，将该酚酞筛查试纸浸入到步骤(1)所得混合试液中，取出试纸；或者蘸取或吸取少许步骤(1)所得混合试液置于该酚酞筛查试纸上；(3)观察试纸颜色变化并判断检测样品中是否含有酚酞，其中：如果试纸呈玫瑰红色和/或红色，则判定所述制品中可能含有酚酞，否则不含有酚酞。本发明方法操作简便、快速、所用滤纸浸泡液和样品溶剂安全无毒，适合普通消费者对制品中非法添加的酚酞进行检测。

Description

一种快速检测酚酞的方法及其使用的试纸

技术领域

本发明涉及一种药品、保健食品或食品的分析技术领域，尤其涉及一种基于化学反应的快速筛查药品、保健食品或食品中非法添加酚酞的筛查试纸的制备方法及检测方法。

背景技术

随着生活水平的提高，人们意识到肥胖影响自己形象和身体健康，同时也认识到使用西药减肥会带来严重的副作用。但一些不法厂商利用消费者急于减肥和中药无毒副作用的认识误区，在减肥类中成药、保健食品和食品中大量添加法律明令禁止的化学减肥药和泻药以增强其减肥效果，使消费者在不知情的情况下多次服用，对消费者的健康产生了严重危害。

酚酞作为泻药其起效剂量为25mg，是非法厂商经常向减肥药中非法添加的化学药品。但酚酞易引起过敏，瘙瘁等症状，长期服用还会使血糖升高，血钾降低，体内电解质紊乱并诱发心律失常等危害。

近年来药品检验领域针对这种非法添加化学物质的行为进行了许多研究，例如专利申请号为200910192202.X的发明(减肥类中成药、保健品和食品中掺杂酚酞的快速筛查方法)对待测样品采用90％～96％的乙醇溶解，过滤，取滤液2～5滴加入到浓度为0.47～0.53mol/L的氢氧化钠溶液中，根据颜色变化判断样品是否加入酚酞。上述方法操作简单，但样品溶液需要过滤，且使用了强碱氢氧化钠的溶液，实验时需要采取适当防护，否则可能灼伤皮肤，因此该方法更适用于专业药检人员进行快速检验。

专利申请号为200910194192.3的发明(一种酚酞的快速检测试纸及其检测试剂盒和检测方法)对待测样品采用90％～96％的乙醇溶解，并用强碱氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠制备的检测试纸浸入样品溶液，取出后根据颜色判断样品是否加入酚酞。上述方法操作简单，但试纸制备中使用了强碱氢氧化钠或氢氧化钾，使得干燥后的试纸上直接吸附有固态的强碱，皮肤接触后在皮肤表面少量水的溶解下会生成浓度较高的强碱溶液，其对皮肤的刺激性进一步加强，因此实验时需要采取适当防护，否则可能灼伤皮肤，因此该方法更适用于专业药检人员进行快速检验。

因此，本领域需要有一种检测人工制造品(特别是组合物)是否中非法添加酚酞的方法，期待该方法具有以下至少一方面的优点：方法安全，操作简单快速，对操作人员和环境的影响低，普通消费者也能对药品、保健食品和食品中是否非法添加酚酞进行检测。

发明内容

本发明的目的是提供一种能够检测怀疑掺有酚酞的制品中是否含有酚酞的方法。本发明人令人惊奇地发现，采用经碳酸氢钠浸渍的试纸可以方便地在现场对怀疑掺有酚酞的制品进行检查，并且方法快速、简便、安全、和/或低污染。本发明基于以上发现而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了一种检测怀疑掺有酚酞的制品中是否含有酚酞的方法，该方法包括以下步骤：

(1)取所述制品适量，与乙醇水溶液混合，振摇，得混合试液；

(2)取经碳酸氢钠浸渍的酚酞筛查试纸，将该酚酞筛查试纸浸入到步骤(1)所得混合试液中，取出试纸；或者蘸取或吸取少许步骤(1)所得混合试液置于该酚酞筛查试纸上；

(3)观察试纸颜色变化并判断检测样品中是否含有酚酞，

其中：如果试纸呈玫瑰红色和/或红色，则判定所述制品中可能含有酚酞，否则不含有酚酞。

这样，如果步骤(3)结果表明“不含有酚酞”，则可直接认定所检测的制品未掺有酚酞；如果步骤(3)结果表明“可能含有酚酞”，则在必要的情况下可进一步借助其它方法例如仪器分析法作进一步的判定；这样本发明的方法可以大大减少市场监督时检查现场的工作量，依法及时维护市场秩序。

根据本发明第一方面的方法，其中所述制品，或者所述怀疑掺有酚酞的制品，其包括任何欲意给予哺乳动物例如人类的任何人工制成品，特别是人工混合制品，其包括不限于药品、保健食品、食品、食品添加剂等。在一个实施方案中，所述的制品是药品、保健食品或食品。短语“怀疑掺有酚酞的制品”是指一种制品，本领域技术人员(特别是健康/卫生/药监主管部门或者其工作人员)主观上或者客观上认为，该制品中可能有意或者无意地掺入有酚酞，从而使得该制品能够主要或者次要地产生酚酞所具有的生物学效应，例如产生导泄的生物学效应。在本发明中，该制品亦可称为样品、检测样品等，本领域技术人员根据本发明的语境理解指代该制品的不同术语所具有的含义，例如使该制品与提取溶剂振摇后，得到的混合液体可以称为混合试液。在本发明中，该制品可以是固体(例如粉末或块状物或丸状物)、半固体、液体等状态。特别地，本发明所述制品是未标示含有酚酞，但是有可能人为地掺入酚酞的任何人工制成品。

根据本发明第一方面的方法，其中步骤(1)中所述乙醇水溶液是乙醇浓度为20％～80％的乙醇水溶液，优选20-60％的乙醇溶液。更优选的，所述乙醇水溶液的乙醇浓度为30～60％。更优选的，所述乙醇水溶液的乙醇浓度为35～50％。特别优选的，所述乙醇水溶液的乙醇浓度约为40％。根据本发明的方法，在步骤(1)中，所述制品和作为提取溶剂的乙醇水溶液二者的量和比例不必作特别的限制，只要制品和提取溶剂混合后，可能存在的酚酞能够溶解在溶剂中并达到本发明方法检测限即可。例如在一个实施方案中，在步骤(1)中的提取溶剂为1～10ml，例如2～5ml；所取的制品的量例如0.1～10g，例如0.5～5g。

根据本发明第一方面的方法，其中步骤(1)中所述振摇操作是振摇10秒至10分钟；优选是20秒至5分钟；更优选是30秒至2分钟。在本发明第一方面方法的步骤(1)中，振摇操作的时间是可以不作特别限定的，原因在于酚酞在所述乙醇水溶液中的溶解度足够好，能够以较快的速度(例如在30秒钟内即可溶解出相当多的量的酚酞，例如达到检测限以上的量)溶解出来进而满足测定要求。

根据本发明第一方面的方法，其中步骤(1)中所得混合试液不需要过滤，可以直接用于下一步骤。

根据本发明第一方面的方法，其中步骤(2)中所述酚酞筛查试纸是经碳酸氢钠浸渍并干燥后的试纸。在本发明中，如无另外特别说明，术语“酚酞筛查试纸”可以简称为试纸，只要在相应语境下均是指经碳酸氢钠浸渍并可用于本发明方法的试纸，而非其它情况的试纸。根据本发明第一方面的方法，其中步骤(2)中所述酚酞筛查试纸基本上是按包括如下步骤的方法制备的：取中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸泡，取出，烘干，即得。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述碳酸氢钠水溶液浓度为1％～30％；优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为1-15％；更优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为2-10％；更优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为3-8％。特别优选的浓度是约5％。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸渍的时间为10秒至10分钟；优选是20秒至5分钟；更优选是30秒至2分钟，例如约30秒。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述烘干是在80～120℃烘干5～30分钟，例如在90～110℃烘干5～20分钟，例如在100～110℃烘干5～20分钟，例如在约105℃烘干10分钟。

根据本发明第一方面的方法，其中步骤(2)中所述酚酞筛查试纸在步骤(1)所得混合试液中的浸入时间考虑尽量的短，例如1～30秒，例如1～20秒，例如1～10秒，例如2～8秒，例如2～5秒。由于混合试液中可能溶解有酚酞，并可能粘染到试纸上，从而为酚酞产生显色反应提供了机会，因此上述浸入时间可以是较短的。

根据本发明第一方面的方法，其中步骤(2)可以是将酚酞筛查试纸浸入到步骤(1)所得混合试液中，还可以是蘸取或吸取少许步骤(1)所得混合试液置于经碳酸氢钠浸渍的酚酞筛查试纸上，然后再进行观察。由于本发明方法具有良好的鉴别检验性能，因此上述蘸取或吸取的方式以及其所使用的工具，它们可以是例如玻棒、吸管或任何其它可实现蘸取或吸取功能的物品。

根据本发明第一方面的方法，其中步骤(3)中观察试纸颜色变化可以在较短的时间内进行，例如在1秒至2分钟内观察，优选在5秒至1.5分钟内观察，优选在10秒至1分钟内观察，优选在20秒至45秒钟内观察，例如在30秒内观察颜色变化情况。在本发明中，试纸由无色变为玫瑰红色和/或红色，其中玫瑰红色和/或红色可以理解为玫瑰红色至红色，即这类色彩可能是连续的而无法明显区分，因此本发明术语“玫瑰红色和/或红色”与类似于中国药典通常类似表述的术语“玫瑰红色至红色”具有相同含义。

根据本发明第一方面的方法，如果所述制品被判定为其中可能含有酚酞，则该制品可以进一步用其它方法进行检测，例如通过实验室的方法，例如HPLC法等。这样，本发明的方法特别适用于在市场上或者其它检测现场进行更大样本的检测和筛查，并进而减少实验室的工作量。

基于本发明第一方面的方法，本发明第二方面提供了一种检测试剂盒，其用于检测怀疑掺有酚酞的制品中是否含有酚酞，所述试剂盒包括盒体以及：

(i)提取溶剂，其封装于溶剂瓶中；

(ii)经碳酸氢钠浸渍的酚酞筛查试纸；和任选的

(iii)使用说明资料，其上记载有使用该试剂盒检测怀疑掺有酚酞的制品中是否含有酚酞的操作方法。

根据本发明第二方面的试剂盒，其中所述溶剂瓶是可以反复开启和密封的溶剂瓶。该溶剂瓶的材质不作特别限制，例如可以是带有瓶塞、瓶盖等的玻璃瓶、塑料瓶等。在一个优选的实施方案中，所述溶剂瓶内装入的提取溶剂的体积占溶剂瓶容量的1/10～9/10，例如1/10～5/10。在溶剂瓶中预留一定空间是非常有益的，例如可以直接将待检制品直接加入到溶剂瓶中，盖严，然后振摇，使待检制品与提取溶剂充分混合，以尽可能地使可能存在的酚酞溶解在溶液中；这样本发明提供的试剂盒非常简单。

根据本发明第二方面的试剂盒，其中包括有一个以上的所述封装有提取溶剂的溶剂瓶。根据这些实施方案，本发明提供了可以在相同地点或者不同地点检测多个制品所需材料的试剂盒。

根据本发明第二方面的试剂盒，其中所述使用说明资料可以是使用说明书、检测方法说明、检测判定标准等等，其形式可以是印刷有相应信息的纸张、卡片等，该使用说明资料基本上记载了本发明第一方面所述的方法。因此，本发明第一方面任一实施方案中，其中的任一技术特征同样适用于本发明第二方面的试剂盒或者适用于本发明的其它方面。

本发明第三方面提供了一种信息说明资料，其中基本上记载了本发明第一方面任一项所述的方法。

在一个实施方案中，该信息说明资料是呈选自下列的形式：纸质文件(包括但不限于文件单页、小册子、刊物)、磁介质、光盘、软盘、电子出版物、网络出版物等，以及它们的组合。

本发明第四方面提供了根据本发明第三方面信息说明资料检测怀疑掺有酚酞的制品中是否含有酚酞的方法。

本发明第五方面提供了一种制品，其未标示含有酚酞，但是使用本发明第一方面所述方法、第二方面所述试剂盒和/或第三方面所述信息说明资料检测，显示该制品可能或怀疑掺有酚酞。

本发明第六方面提供了一种经碳酸氢钠浸渍的酚酞筛查试纸。在一个实施方案中，所述酚酞筛查试纸基本上是按包括如下步骤的方法制备的：取中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸泡，取出，烘干，即得。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述碳酸氢钠水溶液浓度为1％～30％；优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为1-15％；更优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为2-10％；更优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为3-8％。特别优选的浓度是约5％。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸渍的时间为10秒至10分钟；优选是20秒至5分钟；更优选是30秒至2分钟，例如约30秒。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述烘干是在80～120℃烘干2～30分钟，例如在90～110℃烘干5～20分钟，例如在100～110℃烘干5～20分钟，例如在约105℃烘干10分钟。

本发明第七方面提供了一种制备酚酞筛查试纸的方法，其包括如下步骤：取中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸泡，取出，烘干，即得。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述碳酸氢钠水溶液浓度为1％～30％；优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为1-15％；更优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为2-10％；更优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为3-8％。特别优选的浓度是约5％。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸渍的时间为10秒至10分钟；优选是20秒至5分钟；更优选是30秒至2分钟，例如约30秒。在一个实施方案中，在制备所述酚酞筛查试纸过程中，所述烘干是在80～120℃烘干5～30分钟，例如在90～110℃烘干5～20分钟，例如在100～110℃烘干5～20分钟，例如在约105℃烘干10分钟。

本发明第八方面提供了本发明第六方面所述酚酞筛查试纸用于检测减肥类中成药、保健食品和食品中是否存在酚酞的应用。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

下面对本发明作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

本文使用的术语“掺”、“掺有”、“掺入”等，它们可以是有意或者无意地向所述制品中加入酚酞。

本文使用的术语“半定量”，是指该定量结果是粗略的，不是精确定量。

本文使用的术语“定量限”，是指含量低于该限度时，不能定量。

在本发明的一个实施方案中，所述试剂盒中还可以配备滴管。

另外，本发明第一方面所述方法中，步骤(1)所得混合试液可能是一种混悬液，这种混合试液不必过滤即可用于下一步骤，这大大简化了操作步骤，亦特别适用于极少量样品的处理。由此亦可以理解，本发明的方法及其提供的试剂盒以及本发明的其它各个方面非常适合作为市场监管时对相关产品的预判。

在本发明的一个特别的方面，提供了用于药品和食品中非法添加酚酞的快速筛查试纸的制备方法，具体操作是：取中性滤纸置于一定浓度的碳酸氢钠水溶液中浸泡，取出，烘干，得到酚酞筛查试纸。优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为1％～30％；更优选的，所述碳酸氢钠水溶液的浓度为5％。优选的，所述滤纸在碳酸氢钠水溶液中的浸泡时间为0.2～1分钟；更优选的，所述滤纸在碳酸氢钠水溶液中的浸泡时间为0.5分钟。优选的，所述滤纸的烘干温度为80度～120度；更优选的，所述滤纸的烘干温度为105度。在一个优选的实施方案中，本发明提供的一种检测药品、保健食品和食品中非法添加酚酞的快速筛查试纸的制备方法，其具体操作如下：取中性滤纸置于浓度为5％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡0.5分钟，取出，在105度烘干10分钟，得到酚酞筛查试纸。

在本发明的一个特别的方面，提供了一种使用上述快速检测试纸的检测药品、保健食品和食品中非法添加酚酞的方法，具体操作是：取供试品加入乙醇水溶液中，振摇0.5分钟；将试纸浸入至供试品溶液中2～5秒，取出，若30秒内试纸呈玫瑰红至红色则判断样品中可能含有酚酞，反之，则判断为不合酚酞。优选的，所述乙醇水溶液的浓度为20％～80％；更优选的，所述乙醇溶液的浓度为40％。在一个优选的实施方案中，本发明提供的一种使用上述快速检测试纸的检测药品、保健食品和食品中非法添加酚酞的方法，具体操作如下：取供试品加入至浓度为40％的乙醇水溶液中，振摇0.5分钟；将试纸浸入至供试品溶液中2～5秒，取出，若30秒内试纸呈玫瑰红至红色则判断样品中可能含有酚酞，反之，则判断为不含酚酞。

本发明与其它酚酞的快速检测方法相比，具有如下优点：

(1)灵敏度高：与其他文献所采取的浓度为96％的乙醇相比，本发明采用低浓度的乙醇水溶液作为溶剂，不但可以使酚酞有足够的溶解度，而且检测能力高。与其它文献报道的方法的检测限比较如下：

方法	200910192202.X	200910194192.3	本发明
				检测限	0.1mg/ml	0.25mg/ml	0.025mg/ml

(2)安全性高：本发明采用的是安全无毒的碳酸氢钠(俗称小苏打，面碱)而非其它文献记载的强碱性强腐蚀性的氢氧化钠等物质，因此非常安全，操作无需防护。

(3)快速简便：本方法不需要过滤，整个操作仅需1～2分钟，快速，简便。

(4)适用面广：由于本方法安全无毒，不需要采取防护措施，而且快速，简便，因此与其他已有方法相比，本发明方法的适用对象不只局限于专业技术人员，普通消费者也可采用。

具体实施方式

下面通过具体的实例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

实施例1、酚酞快速筛查试纸的制备

取中性滤纸置于浓度为5％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡0.5分钟，取出，在105度烘干10分钟，得到酚酞筛查试纸，在本发明中可简称为试纸T1。在下文中如无另外说明，使用的是试纸T1进行试验。

取中性滤纸置于浓度为2％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡2分钟，取出，在100度烘干20分钟，得到酚酞筛查试纸，在本发明中可简称为试纸T2。

取中性滤纸置于浓度为10％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡30秒钟，取出，在110度烘干5分钟，得到酚酞筛查试纸，在本发明中可简称为试纸T3。

取中性滤纸置于浓度为8％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡30秒钟，取出，在80度烘干20分钟，得到酚酞筛查试纸，在本发明中可简称为试纸T4。

取中性滤纸置于浓度为3％的碳酸氢钠水溶液中，浸泡30秒钟，取出，在120度烘干2分钟，得到酚酞筛查试纸，在本发明中可简称为试纸T5。

照制备试纸T1的方法，但分别用5％的氢氧化钠和5％的碳酸钠替代碳酸氢钠，得到试纸T6(氢氧化钠)和试纸T7(碳酸钠)。试纸T6和试纸T7粘染在皮肤上并润湿后，有明显的刺激感/灼烧感，特别是氢氧化钠有明显的灼烧感；而试纸T1经同样处理后无刺激感。

实施例2、检测药品/保健品中是否含有酚酞的一般操作条件

1、取样量：

对不同类型样品推荐取样如下：

样品类型	取样量
		片剂	1片(须研碎)
胶囊剂	1粒内容物
		茶剂	1/2袋
小水丸	每次用量的1/2(须研碎)
		单剂量口服液	1/2支
其它固体	0.1～0.5克(须粉碎)

由此可见本发明方法使用的待检品的量非常少，以便尽量少地损害无辜的经营者的利益。

2、供试品溶液制备、显色和结果判断

取供试品加入至浓度为40％的乙醇水溶液2ml中，振摇0.5分钟；将试纸浸入至供试品溶液中5秒，取出。若30秒内试纸呈玫瑰红至红色则判断样品中可能含有酚酞；反之，则判断为不合酚酞。

实施例3、检测药品、保健食品和食品中是否存在酚酞的试验

采用实施例2的方法检测20批市售样品(标示为药品、保健食品或食品)。再依照“国家药品食品监督管理局药品检验补充检验方法和检验项目批准件2006004”采用LCMS方法检测样品。该LCMS方法具体如下：

按下表取固态或液态的药品、保健食品或食品，加浓度为40％的乙醇溶液2ml，振摇0.5分钟。将试纸T1浸入至供试品溶液中5秒，取出，若30秒内试纸呈玫瑰红至红色则判断样品中可能含有酚酞，反之，则判断为不含酚酞。

药品检验补充检验方法和检验项目批准件2006004记载的LCMS的检测方法如下：

液相色谱条件：流动相A为20mmol/L醋酸铵的水溶液(含0.1％冰醋酸)，流动相B为甲醇，按下述梯度表进行洗脱。

时间(min)	A(％)	B(％)
			0.00	80	20
13.00	58	42
			20.00	58	42
23.00	36	64
			33.00	36	64
33.10	5	95
			40.00	5	95
40.10	80	20
			50.00	80	20

质谱条件：ESI源，源电压4.5kV，毛细管温度270℃，毛细管电压20V，鞘气流速50arb，正离子检测，全扫描一级质谱，全扫描二级质谱，扫描范围m/z：100～1000。

结果如下：

#：各制品是从市场上的药店或保健品店获得的不同生产厂商和/或不同规格和/或不同批次的制品(略去生产商和批号)，怀疑可能因掺有酚酞而具有酚酞的生物学作用。

＊：“不含”表示不含酚酞和***；“含酚酞”表示可能含有酚酞，用本发明方法显示可能含有酚酞的这部分样品可以进一步通过其它方法例如HPLC法作进一步验证；“未显红色”表示30种内观察试纸未显示红色或者玫瑰红色。

上述实验结果与二级质谱验证结果表明，本发明检测方法无一例假阳性报告，同时也未漏检任何含酚酞的样品，结果准确可靠。

按本发明方法所描述的取样量取上述酚酞检测呈阴性反应的14个样品，并分别掺入酚酞对照品3mg，按本发明方法进行实验，结果均呈阳性反应，表明本方法有良好的抗干扰能力，专属性强，有良好的准确性。

另外，分别使用实施例1所得试纸T2至试纸T5，针对本实施例上述“制品#”为样品1、样品2、样品7、样品16的试样进行测试。测试方法为：样品加浓度为40％的乙醇溶液2ml，振摇0.5分钟；将试纸浸入至供试品溶液中5秒，取出，在30秒内观察试纸颜色变化。显色结果与使用试纸T1的结果一致。

另外，使用实施例1所得试纸T1，分别针对本实施例上述“制品#”为样品1、样品2的试样进行测试，测试方法为：样品加浓度为40％的乙醇溶液2ml，振摇适当时间；将试纸浸入至供试品溶液中5秒，取出，若30秒内观察试纸颜色变化。以上振摇操作是振摇10秒、2分钟、或10分钟。结果显示，在各种振摇时间处理条件下，均显示出与上文表中相应样品相同的结果。

另外，使用实施例1所得试纸T1，分别针对本实施例上述“制品#”为样品1、样品2的试样进行测试，测试方法为：样品加浓度为40％的乙醇溶液2ml，振摇0.5分钟；蘸取供试品溶液于试纸上，在30秒内观察试纸颜色变化。结果均显示出与上文表中相应样品相同的结果。

另外，分别使用实施例1所得试纸T6和试纸T7，针对本实施例上述“制品#”为样品1、样品2的试样进行测试。测试方法为：样品加浓度为40％的乙醇溶液2ml，振摇0.5分钟；将试纸浸入至供试品溶液中5秒，取出，在30秒内观察试纸颜色变化。显色结果与使用试纸T1的结果一致。

实施例4、本发明方法的性能考察

1、考察不同浓度乙醇溶液对快速筛查试纸显色效果的影响。

向6个试管中分别加入酚酞5.0mg，然后分别用2ml无水乙醇、95％乙醇，80％乙醇，60％乙醇，40％乙醇，30％乙醇，20％乙醇振摇溶解0.5分钟，将试纸T1浸入至供试品溶液中3秒，取出，在30秒内观察试纸显色情况如下：

注：“+”表示所显红色的强度，“+”表示肉眼可见，并且“+”越多表示颜色越深。

根据上述实验结果，可说明在其他条件未变的情况下，溶剂乙醇的浓度对结果有显著影响，用20-60％可以达到令人满意的效果，以40％乙醇作为溶剂可以达到最佳显色效果。

2、考察本发明方法的检测限

取酚酞原料药10mg，加40％乙醇溶解并稀释成每1ml中含0.025mg的酚酞溶液。另取50mg规格的市售酚酞片1片，研细，取细粉适量(约相当于酚酞10mg)加40％乙醇溶解并稀释成每1ml中含0.025mg的酚酞的混悬液，振摇0.5分钟。将试纸T1浸入至以上制备的供试品溶液中2～5秒，取出，在30秒内观察试纸的颜色。结果表明两种试液试验的试纸在30秒内均显红色，根据上述实验结果，可判断本发明方法检测酚酞的灵敏度至少可达到0.025mg/ml。

本发明通过上文对本发明的各个方面作了详细的说明，然而本发明并不限于这述这些具体实施方案，本发明的精神和范围应以所附权利要求书为准。本发明的方法不需要过滤样品溶液，检测全过程仅耗时1～2分钟，具有快速、简便、安全、灵敏度高等优点。

Claims (8)

1.检测怀疑掺有酚酞的制品中是否含有酚酞的方法，该方法包括以下步骤：

(1)取所述制品适量，与40%乙醇水溶液混合，振摇30秒至2分钟，得混合试液；

(2)取经3-8%的碳酸氢钠水溶液浸渍并干燥的酚酞筛查试纸，将该酚酞筛查试纸浸入到步骤(1)所得混合试液中达2～8秒，取出试纸；或者蘸取或吸取少许步骤(1)所得混合试液置于该酚酞筛查试纸上；

(3)在20秒至45秒内观察试纸颜色变化并判断检测样品中是否含有酚酞，

其中：如果试纸呈红色，则判定所述制品中可能含有酚酞，否则不含有酚酞；

步骤(2)中所述酚酞筛查试纸是按包括如下步骤的方法制备的：取中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸泡20秒至5分钟，取出，100～110℃烘干5～20分钟，即得。

2.根据权利要求1的方法，其中步骤(1)中40%乙醇水溶液为2～5ml；所取的制品的量0.5～5g。

3.根据权利要求1的方法，其中步骤(1)中所得混合试液不需要过滤，直接用于下一步骤。

4.根据权利要求1的方法，其中步骤(2)中所述酚酞筛查试纸在混合试液中的浸渍时间是2～5秒。

5.根据权利要求1的方法，其中步骤(2)中所述酚酞筛查试纸是按包括如下步骤的方法制备的：取中性滤纸置于碳酸氢钠水溶液中浸泡30秒至2分钟，取出，105℃烘干10分钟，即得。

6.根据权利要求5的方法，其中步骤(2)中所述酚酞筛查试纸是用5%的碳酸氢钠水溶液浸渍制得的试纸。

7.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中观察试纸颜色变化是在30秒内观察。

8.根据权利要求1的方法，其中步骤(3)中观察试纸颜色时，所述的红色是玫瑰红色。