CN104292366A - 从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法 - Google Patents

Abstract

从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法，其特征在于：以落叶松为原料，用乙醇溶液超声提取，过滤使固液分离得提取液，将无水乙醇加入提取液中至多糖充分沉降后高速离心，沉淀冷冻干燥，为落叶松***半乳聚糖粗提物；将上清液中乙醇浓缩至干得固形物，热水将固形物溶解后用大孔吸附树脂富集，洗脱后重结晶得到二氢槲皮素提取物。本操作工艺的主要特点为原料不需干燥直接使用，能耗少，通过调节提取用乙醇溶液中乙醇的含量，同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素，生产成本低，节约能耗，产物得率高；大孔吸附树脂纯化过程无污染，所有溶剂均可回收使用，便于工业规模化生产。

Description

从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法

所属技术领域：

本发明涉及天然产物化学领域，特别是涉及从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法。 

背景技术：

***半乳聚糖是一类长的、高度支链的由***糖和半乳糖组成的半纤维素，其主链是半乳聚糖，分支主要是***糖侧链，通过β-1,3键或β-1,6键与半乳糖链连接。在落叶松中的含量为10％-30％。***半乳聚糖在食品和日用化学工业中用作勃合剂，乳化剂，稳定剂、甜味剂，调味剂以及印刷和采矿业。近年来落叶松木材中***半乳聚糖在疑难病、常见病治疗药物方面的独特作用与宽范围的生物活性，无任何毒害作用(已于1974年通过美国FDA认证可用于食品)，可以静脉给药，其药物和保健功能主要集中在多糖的促进免疫、抗肿瘤、抗突变、降血脂、抗病毒等方面。 

二氢槲皮素是自然界中存在的一种重要的二氢黄酮醇类化合物，亦称维生素P，具有多种重要的生物学活性的林源活性物质。二氢槲皮素在落叶松中的含量约在0.3～5.7％左右，二氢槲皮素最早由日本学者Fukui从针叶植物Chamaecyparis obtusa(Sieb.et Zucc.)Endl.叶中提取出来，纯品为淡黄色粉末，具有超强的抗氧化能力，在维持人体循环***功能方面起着特殊的作用，它因具有抑制癌细胞、降低血脂、保护心脑血管，肝脏，视力功能，以及、抗氧化、延缓衰老、消除炎症和抗糖尿病等一系列的功效而备受关注。既可作为食品抗氧化剂和饲料添加剂，又可作为营养品，在制药工业往往用槲皮素代替二氢槲皮素，其效果有明显差别，所以二氢槲皮素的国际和国内的市场需求量逐年增长。 

美国专利(US2744919A)介绍了用水或极性稍大的醇或酮从树皮中提取二氢槲皮素，减压浓缩溶剂得到一种含有单宁、糖类和有色物质的粗提物，然后用低极性的醇、酮或醚萃取，脱除溶剂后的膏状物用热水进行结晶纯化制得二氢槲皮素粗品。此法溶剂萃取后得到的浸膏溶液含有较多杂质，在结晶的过程中纯度提高不明显且结晶次数较多，而且糖类被视作杂质造成资源的浪费。 

加拿大专利(CA532804A)介绍了用热水从树皮中提取二氢槲皮素，冷却离心后过滤，浓缩得到一种含有单宁、糖类和有色物质的粗提物，然后用低极性的醇、酮或醚萃取，脱除溶剂后的膏状物用热水进行结晶纯化制得二氢槲皮素粗品。由于此法采用热水提取，所以溶剂回收成本较高，而且提取液中的***半乳聚糖被视作杂质造成资源的浪费。 

俄罗斯专利(RU2184561C1)介绍了一种以落叶松木粉为原料提取二氢槲皮素的方法，将木粉与有机溶剂混合加热到110～120℃提取，冷却后过滤，减压浓缩溶剂直10％，调节滤液PH值直5～6，90～98℃加热使苷水解为苷元的形式，然后在酸性条件下结晶得到粗产品。此方法虽然提高了二氢槲皮素的收率，但没有经过富集纯化，很难提高结晶后的纯度，而且糖类水溶性成分在非极性有机溶剂中很难溶解并提出。 

公开号为CN1844095的中国专利介绍了一种从落叶松中提取二氢槲皮素的方法，该方法以水为提取剂，对含有二氢槲皮素的兴安落叶松进行提取，对所得的水性提取液以甲基叔丁基醚为萃取剂进行液液萃取，采用活性炭或活性白土对甲基叔丁基醚萃取液进行吸附脱色，对脱色后甲基叔丁基醚萃取液在真空条件下进行溶剂的脱除，脱除溶剂后的膏状物用水进行结晶纯化制得二氢槲皮素粗制品。此法以水为提取溶剂可同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素，但未对***半乳聚糖进行沉降，造成资源大量浪费，而且所用的萃取溶剂为甲 基叔丁基醚，价格较昂贵；而且活性炭或活性白土的脱色过程为非封闭式操作过程，不便于连续性生产。 

公开号为CN1858046的中国专利介绍了一种采用吸附法从落叶松中提取二氢槲皮素的方法，该方法以水为提取剂，对含有二氢槲皮素的兴安落叶松进行提取，采用活性炭或活性白土对提取液进行脱色，其后，对所得的水性提取液先用聚酰胺粉末为吸附剂进行吸附，再用解吸溶剂进行解吸，所得解吸液在真空条件下进行溶剂脱除，得到的白色或微黄色粉状的二氢槲皮素粗制品。此法以水为提取溶剂可同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素，但未对***半乳聚糖进行沉降，造成资源大量浪费，而且在提取过程中采用两次吸附操作，一次脱色一次富集，不但增加了吸附剂的成本，也加长了生产周期，增加了提取成本。 

公开号为CN101333203和CN101333204的中国专利介绍了一种从落叶松木屑中制备二氢槲皮素的方法，将落叶松木屑和乙醇溶液加入到提取罐中充分搅拌混合，两者的加入量为落叶松木屑50公斤、50％乙醇溶液500～800升，提取后过滤，经第二次提取，合并滤液，萃取，收集有机溶液，用真空蒸发器减压蒸馏有机相至干，按重量份数10∶1用热水溶解残留物，用活性炭脱色，在3-5℃温度下结晶，析出二氢化槲皮素产品，再经真空干燥、粉碎为成品。此法所用的落叶松木屑由于颗粒较小且不均匀，造成过滤操作的诸多不便；由于木屑质量较轻，浮于溶剂上方，在搅拌和浸泡过程中需要消耗大量的溶剂，给后续减压蒸馏增加了溶剂回收的负担。 

公开号为CN101054369的中国专利介绍了一种从黄杞叶中提取分离二氢槲皮素的方法，以黄杞叶为原料，通过提取、浓缩、柱层析、结晶、水解，得到一种针状结晶，类白色的二氢槲皮素。此法所用柱层析成本高，生产周期长。 

专利号为200710144650的中国专利介绍一种从落叶松及其加工剩余物中提取二氢槲皮素和***半乳聚糖的方法，以落叶松及其加工剩余物为原料，通过对原料粉碎，浸泡，以及分别水提和醇提，提取***半乳聚糖和二氢槲皮素。此法所用两步提取法可依次获得***半乳聚糖和二氢槲皮素，但两步提取法溶剂消耗量大，成本高，浪费操作时间与能耗，生产周期长。 

综上所述，目前提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的原料主要为落叶松，抽提溶剂多为热水(提取***半乳聚糖和二氢槲皮素)或极性较大的醇溶剂(提取二氢槲皮素)，然后通过萃取结晶等操作得到粗品。这种方法具有如下缺陷：用木粉做原料虽然抽提充分，但溶剂消耗量大，残渣难以回收利用；***半乳聚糖和二氢槲皮素不能一步提取得到，不但增加了成本也加长了生产周期；不经过富集纯化，粗品纯度较低，使结晶操作次数较多。 

发明内容：

本发明的目的在于提供从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法。 

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案包括：以落叶松为原料，用乙醇溶液超声提取，过滤使固液分离得提取液，将无水乙醇加入提取液中至多糖充分沉降后高速离心，沉淀冷冻干燥，为落叶松***半乳聚糖粗提物；将上清液中乙醇浓缩至干得固形物，热水将固形物溶解后用大孔吸附树脂富集，洗脱后重结晶得到二氢槲皮素提取物。 

本发明的优点是： 

1、避免传统工艺溶剂消耗量大的问题。 

2、本发明改变了传统的生产工艺，使用乙醇溶液取代传统的纯水(提取***半乳聚糖)或正己烷等烃类作为提取溶剂(提取二氢槲皮素)，同时提取阿 拉伯半乳聚糖和二氢槲皮素，一步完成，操作简便，能耗少，***半乳聚糖和二氢槲皮素得率高。 

3、大孔吸附树脂纯化二氢槲皮素浸膏溶液过程封闭，无污染，所有溶剂均可回收使用，便于工业规模化生产。 

具体实施方式：

下面对本发明实施作进一步详细描述： 

以落叶松为原料，用乙醇溶液超声提取，过滤使固液分离得提取液，将无水乙醇加入提取液中至多糖充分沉降后高速离心，沉淀冷冻干燥，为落叶松***半乳聚糖粗提物；将上清液中乙醇浓缩至干得固形物，热水将固形物溶解后用大孔吸附树脂富集，洗脱后重结晶得到二氢槲皮素提取物。 

下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。 

实施例1： 

100.0g含水9.83％的落叶松粉碎，加入40％乙醇溶液1000mL，250W超声提取60min，冷却过滤，滤液中二氢槲皮素的浓度约为0.013mg/mL，加入无水乙醇至溶液中乙醇体积分数为80％，10000r/min离心5min，沉淀冷冻干燥得***半乳聚糖粗提物14.34g。减压浓缩上清液至无醇味，加热水充分溶解，此时水相中二氢槲皮素的浓度约为0.055mg/mL，用AB-8大孔吸附树脂富集水相中的二氢槲皮素，80％乙醇溶液洗脱，回收乙醇溶液得液态粘稠物2.11g，二氢槲皮素含量为30.8％，加热水充分溶解后，4℃冷藏析晶，重结晶3次得二氢槲皮素晶体0.638g，二氢槲皮素含量为92.3％。 

实施例2： 

10.0g含水9.53％的落叶松粉碎，加入20％乙醇溶液100mL，450W超声提 取45min，冷却过滤，在原料中再加入20％乙醇溶液100mL，450W超声提取45min，冷却过滤合并滤液，滤液中二氢槲皮素的浓度约为0.014mg/mL，加入无水乙醇至溶液中乙醇体积分数为70％，10000r/min离心5min，沉淀冷冻干燥得***半乳聚糖粗提物1.44g。减压浓缩上清液至无醇味，加热水充分溶解，此时水相中二氢槲皮素的浓度约为0.057mg/mL，用AB-8大孔吸附树脂富集水相中的二氢槲皮素，80％乙醇溶液洗脱，回收乙醇溶液得液态粘稠物0.261g，二氢槲皮素含量为31.6％，加热水充分溶解后，4℃冷藏析晶，重结晶3次得二氢槲皮素晶体0.070g，二氢槲皮素含量为91.4％。 

Claims (6)

1.从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法，其特征在于：以落叶松为原料，用乙醇溶液超声提取，过滤使固液分离得提取液，将无水乙醇加入提取液中至多糖充分沉降后高速离心，沉淀冷冻干燥，为落叶松***半乳聚糖粗提物；将上清液中乙醇浓缩至干得固形物，热水将固形物溶解后用大孔吸附树脂富集，洗脱后重结晶得到二氢槲皮素提取物。

2.按照权利要求1所述的从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法，其特征在于：落叶松含水率为20％以下，不必经过任何干燥过程处理。

3.按照权利要求1所述的从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法，其特征在于：超声提取用乙醇溶液的体积分数为10％～40％。

4.按照权利要求1所述的从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法，其特征在于：超声提取温度低于60℃，超声功率250～450W，提取时间30～60min，料液比1:10～1:20g/mL，提取2～4次。

5.按照权利要求1所述的从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法，其特征在于：沉降用乙醇溶液的体积分数为70％～90％。

6.按照权利要求1所述的从落叶松中同时提取***半乳聚糖和二氢槲皮素的方法，其特征在于：大孔吸附树脂富集操作封闭，上样浓度0.3～1.0mg/mL。