CN104255498A - 一种楤木的种苗快速繁殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种楤木的种苗快速繁殖的方法,涉及一种生物技术应用领域,具体方法如下:第一步是取楤木的顶端休眠芽为外植体,先用自来水冲洗干净,再用70%酒精浸泡,再放入0.1%升汞的溶液中消毒,最后用无菌水冲洗干净;第二步是将消毒好的外植体切成0.5~1cm的小块,接种在准备好的诱导培养基上培养,培养条件为:光强1500~20001x,温度(25±1℃),12h光照,待分化出不定芽;第三步是将诱导出的不定芽转接到继代培养基上进行增殖培养,使芽苗长得更加健壮;第四步是将分化的不定芽接种到生根培养基中,待有不定根生出即可准备移栽,移栽后成活率可达80%以上。本发明方法简单易行,操作简单,且繁殖速度快,适合工厂化育苗。
Description
技术领域:
本发明涉及一种生物技术应用领域,是一种利用植物组织离体培养技术,用于一种楤木的种苗快速繁殖的方法。
背景技术:
楤木别鸟不宿、百鸟不栖、刺桐,为五加科落叶灌木获小乔木。小枝疏生细刺,被黄绒毛。2~3回羽状复叶互生;羽片有小叶5~13枚,基部有小叶一对;小叶片卵形、宽卵形或卵状椭圆形,先端渐尖或短渐尖,基部圆形或近心形缘具细锯齿。伞形花序再组成顶生大型圆锥花序,主轴长30cm以上,一级分枝在主轴上总状排列,花梗明显,花白色;果球形,具5棱,熟时黑色或紫黑色。花期6-8月,果期9-10月。产于全国各地,生于向阳坡、沟谷中、林缘或路边旷地,灌丛中。我国华北、华中、华东、华南、西南等地均有分布。楤木具有食用和药用价值,富含蛋白质、脂肪、还原糖、维生素及15种氨基酸和多种矿物质;有滋阴润燥、补中益气、祛风湿、散瘀结、消肿毒、健胃、活血等功效。
近年来,受生态环境的变化和市场需求增加等因素的影响,现有的野生楤木的资源存量正在迅速减少,已引起人们的普遍关注。楤木自然繁殖率较低,再生能力差。楤木虽能开花结籽,可以进行有性繁殖,但种子繁殖变异率较大,商品性降低,且繁殖率很低。生产上主要采用无性繁殖,枝条或根段进行扦插繁殖,但往往造成资源的浪费与植被的破坏,且扦插育苗成活率低,成本高。
发明内容:
本发明的目的就是针对现有技术的不足,而提供一种楤木的种苗快速繁殖的方法。本发明具有简单易行,操作简单,且繁殖速度快,适合工厂化育苗的优点。
本发明的技术解决措施如下:
一种楤木的种苗快速繁殖的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)小块茎尖的备用;(2)外植体诱导和继代培养;(3)芽苗接种生根培养基。
所述小块茎尖备用的方法为:于2~3月取楤木的顶端的休眠芽为外植体,先将嫩枝芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡30s~1min,再用0.1%升汞消毒5~10min,用无菌水冲洗4~5次,用无菌干滤纸吸去残留水分,在超净工作台上用无菌解剖刀剥去茎尖外面的芽鳞片,并切成0.5~1cm的小块备用。
所述外植体诱导和继代培养的方法为:将上述的外植体接种到附加(1.0~2.0)mg/L 6-BA、(0.01~0.1)mg/L NAA、0~0.5mg/L IBA、0~0.5mg/L 2-4D的MS培养基上进行诱导、分化和继代培养基,四周左右就可以形成不定芽,待苗长到2~3cm时,将苗分成单株,转接到培增殖培养基上;蔗糖的质量分数为30克每升,琼脂的质量分数为7克每升,pH为5.8。
所述芽苗接种生根培养基的方法为:将诱导出的芽苗接种到附加(0~0.5)mg/L6-BA、(0~0.5)mg/L IBA、(0~0.5)mg/L NAA、(0~0.5)mg/LIBM、(0~3g/L)活性炭的1/2MS的生根培养基上,一个月可分化出1~3条粗壮的不定根,即可移栽。
所述培养基的培养条件为:光强1500~20001x,温度(25±1℃),12h光照;各阶段的培养基附加物质,不同浓度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM组合,形成一套快繁体系,同时在生根培养基中加入了IBM和活性炭物质。
具体实施方式:
以下结合具体实施例来对本发明作进一步的描述,但本发明所要求保护的范围并不局限于实施方式所涉及之范围。
实例1:
将楤木的休眠芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡1min,再用0.1%升汞消毒5min,用无菌水冲净外植体表面,在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5~1cm左右的小块,置于培养基MS+1.5mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA上进行培养,再将诱导出的不定芽接种在1/2MS+0.5mg/L IBA+0.01mg/L NAA的生根培养基上,经过4周左右,会长出1~3条左右的新根,即可移栽。
实例2:
将楤木的嫩枝芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡1min,再用0.1%升汞消毒8min,用无菌水冲净外植体表面,在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5~1cm左右的小块,置于培养基MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA上进行培养,再将诱导的不定芽接种在1/2MS+0.5mg/L IBM+0.2mg/L NAA+2g/L活性炭的生根培养基上进行生根,经过4周左右,幼苗会长出1~3条左右的新根,即可移栽。
实例3:
将楤木的嫩芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升汞消毒10min,用无菌水冲净外植体表面,在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5~1cm左右的小块,置于培养基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2-4D上进行培养,再将诱导的不定芽接种在1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培养基上进行生根,经过一个月左右,幼苗会长出1~3条左右的新根,即可移栽。
实例4:
将楤木的嫩芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升汞消毒7min,用无菌水冲净外植体表面,在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5~1cm左右的小块,置于培养基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L IBA+0.2mg/L 2-4D上进行培养,再将诱导的不定芽接种在1/2MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培养基上进行生根,经过一个月左右,幼苗会长出1~3条左右的新根,即可移栽。
Claims (5)
1.一种楤木的种苗快速繁殖的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)小块茎尖的备用;(2)外植体诱导和继代培养;(3)芽苗接种生根培养基。
2.根据权利要求1所述的一种楤木的种苗快速繁殖的方法,其特征在于:所述小块茎尖备用的方法为:于2~3月取楤木的顶端的休眠芽为外植体,先将嫩枝芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡30s~1min,再用0.1%升汞消毒5~10min,用无菌水冲洗4~5次,用无菌干滤纸吸去残留水分,在超净工作台上用无菌解剖刀剥去茎尖外面的芽鳞片,并切成0.5~1cm的小块备用。
3.根据权利要求1所述的一种楤木的种苗快速繁殖的方法,其特征在于:所述外植体诱导和继代培养的方法为:将上述的外植体接种到附加(1.0~2.0)mg/L 6-BA、(0.01~0.1)mg/L NAA、0~0.5mg/L IBA、0~0.5mg/L 2-4D的MS培养基上进行诱导、分化和继代培养基,四周左右就可以形成不定芽,待苗长到2~3cm时,将苗分成单株,转接到培增殖培养基上;蔗糖的质量分数为30克每升,琼脂的质量分数为7克每升,pH为5.8。
4.根据权利要求1所述的一种楤木的种苗快速繁殖的方法,其特征在于:所述芽苗接种生根培养基的方法为:将诱导出的芽苗接种到附加(0~0.5)mg/L6-BA、(0~0.5)mg/L IBA、(0~0.5)mg/L NAA、(0~0.5)mg/L IBM、(0~3g/L)活性炭的1/2MS的生根培养基上,一个月可分化出1~3条粗壮的不定根,即可移栽。
5.根据权利要求3或4所述的一种楤木的种苗快速繁殖的方法,其特征在于:所述培养基的培养条件为:光强1500~20001x,温度(25±1℃),12h光照;各阶段的培养基附加物质,不同浓度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM组合,形成一套快繁体系,同时在生根培养基中加入了IBM和活性炭物质。
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