CN104193840B - 一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法 - Google Patents
一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104193840B CN104193840B CN201410374769.XA CN201410374769A CN104193840B CN 104193840 B CN104193840 B CN 104193840B CN 201410374769 A CN201410374769 A CN 201410374769A CN 104193840 B CN104193840 B CN 104193840B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- spore powder
- polysaccharide
- lucid ganoderma
- ganoderma spore
- precipitation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
本发明提供了一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法,该灵芝孢子粉多糖是由如下方法制备得到的:灵芝孢子粉用无水乙醇提取,收集沉淀再用沸水提取,收集上清液;上清液减压浓缩后进行醇沉,即得到灵芝孢子粉多糖。本发明得到的灵芝孢子粉多糖具有很好的保湿效果。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌提取领域,具体的说涉及一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法。
背景技术
灵芝(Ganoderma lucidum)为多孔菌科灵芝属真菌,是一种具有扶正固本的传统珍贵药材。灵芝孢子粉是灵芝生长成熟期,从灵芝菌褶中弹射出来的极其微小的卵形生殖细胞。随着灵芝栽培技术的发展,灵芝孢子粉的产量越来越高,甚至超过子实体的产量。多糖是孢子粉中的主要活性成分之一,近十几年对灵芝孢子粉的功效也进行了大量的研究,发现具有多种生物活性,如提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤、抗辐射等。
发明内容
本发明首先提供了一种灵芝孢子粉多糖的制备方法,该方法包括如下步骤:
灵芝孢子粉用无水乙醇提取,收集沉淀再用沸水提取,收集上清液;上清液减压浓缩后进行醇沉,即得到灵芝孢子粉多糖。
具体的说,本发明的一种灵芝孢子粉多糖的制备方法,包括如下步骤:
1)灵芝孢子粉粗多糖的提取:灵芝孢子粉中加入8-12倍重量的无水乙醇中,煮沸并保持微沸1-3h,离心收集沉淀;沉淀加入8-12倍重量的蒸馏水,煮沸并保持微沸1-3h,离心,收集上清液;
2)多糖粗提液的浓缩:上清液减压浓缩至料液比(质量/体积)为1:0.5-1.5;
3)乙醇沉淀:向浓缩液中加入无水乙醇,至乙醇与浓缩液体积比达到56%-57%,室温静置1小时,离心,收集沉淀,加蒸馏水溶解冻干,即得粗多糖。
本发明还提供了由上述方法制备得到的灵芝孢子粉多糖。
本发明制备得到的粗多糖得率约为1.5%,多糖含量达到79%以上,蛋白质含量低。HPSEC-MALLS-RI分析显示粗多糖主要有一个糖峰,单糖分析结果显示粗多糖主要由葡萄糖组成。制备得到的灵芝孢子粉多糖具有高的保湿活性,具体可用于保湿的化妆品类和改善老年人体质的保健品类等。本发明的灵芝孢子粉多糖的制备方法是一种简便、高效、成本低、多糖得率及含量高、适合规模化生产的方法。
附图说明
图1 HPSEC-MALLS-RI分析图谱
图2 高效阴离子色谱检测结果
图3 保湿率测定效果(其GLW1代表实施1制备得到的灵芝孢子粉多糖;GLW2代表实施2制备得到的灵芝孢子粉多糖;HyaluronateAcid代表透明质酸。)
具体实施方式:
灵芝孢子粉来源:浙江龙泉基地的沪农灵芝1号采收的孢子粉。
实施例1:
1、灵芝孢子粉多糖的提取:称取200.9g灵芝孢子粉,加入2000mL无水乙醇,加热至沸腾,保持微沸120分钟,9700g离心20min。沉淀重复上述步骤,再提取1次,9700g离心20min。沉淀加入2000mL蒸馏水,加热至沸腾,保持微沸120分钟,9700g离心20min,沉淀重复上述步骤,再提取1次,9700g离心20min,合并上清液。
2、多糖粗提液的浓缩:上清液浓缩至220mL。
3、乙醇沉淀:向浓缩液中缓慢加入无水乙醇,边加边搅拌,至乙醇含量达到56%,室温静置1小时,离心去除醇沉上清,收集沉淀,蒸馏水溶解后放入冷冻干燥机中冷冻干燥,即得多糖干品。
制备所得多糖得率为1.51%,多糖含量为79.79%。
分析天平称量多糖干品的重量。按以下公式计算粗多糖得率。
多糖含量的检测:
多糖含量测定:用苯酚-硫酸法测定,精密称取本品5mg置2ml离心管中,加蒸馏水1ml,溶解后,离心。上清液稀释50倍,精密吸取样品1.0m1,置15ml试管中,分别加入苯酚、硫酸试剂,充分反应后在490nm处测定吸光度值,以葡聚糖为标准品计算样品的多糖含量。本工艺所得灵芝破壁孢子粉多糖含量达到79%以上。
实施例2:
1、灵芝孢子粉多糖的提取:称取90.17g灵芝孢子粉,加入900mL无水乙醇,加热至沸腾,保持微沸120分钟,9700g离心20min。沉淀重复上述步骤,再提取1次,9700g离心20min。沉淀加入2000mL蒸馏水,加热至沸腾,保持微沸120分钟,9700g离心20min,沉淀重复上述步骤,再提取1次,9700g离心20min,合并上清液。
2、多糖粗提液的浓缩:上清液浓缩至65mL。
3、乙醇沉淀:向浓缩液中缓慢加入无水乙醇,边加边搅拌,至乙醇含量达到56%,室温静置1小时,离心去除醇沉上清,收集沉淀,蒸馏水溶解后放入冷冻干燥机中冷冻干燥,即得多糖干品。
制备所得多糖得率为1.56%,多糖含量为79.67%。
实施例3
1、样品制备:称取实施例2中多糖2mg,加入1mLHPLC流动相,充分溶解,13200r/min离心15min,上清液经0.25μm的水相微孔膜过滤后进行HPSEC-MALLS-RI分析。
2、色谱分析条件:分析柱选日本东洋曹达TOSOH TSK PWXL6000和TSKPWXL3000凝胶色谱柱串联后分析,流动相为含0.05mol/L的NaH2PO4和0.15mol/L的NaNO3溶液(pH=7,0.02%叠氮钠),流速为0.5mL/min,色谱柱温用柱温箱恒定在35℃;激光检测器光源波长选用623.8nm。多糖在溶液中的折光指数增量(dn/dc)按照0.146mL/g计算。
3、分子量计算:使用Astra(version6.1.1,Wyatt Technology,Santa Barbara,CA)数据分析软件对光散射数据进行采集和分析,计算分子量和其他多糖分子特性。
HPSEC-MALLS-RI分析图谱如图1所示,实施例1的灵芝孢子粉多糖组分主要含有1个大峰,这个峰的重均分子量7.312×105Da。
实施例4:
1、样品制备:称取实施2中的孢子粉多糖2mg加入带盖玻璃瓶,加入3mL 2mol/L的三氟乙酸,110℃油浴4h,冷却至室温,50℃氮吹仪吹干,再加甲醇吹干,重复两次至无酸味,用2mL超纯水冲洗玻璃瓶于离心管中,13200r/min离心10min,对上清液上高效阴离子色谱(HPAEC)分析。
2、色谱条件:Dionex公司色谱柱CarboPacTMPA20(3×150nm);流动相0.8%NaOH溶液(pH=12);时间30min;柱温30℃;流速0.45mL/min;进样量25ul。
经高效阴离子色谱检测所得单糖组成如图2所示。多糖组分由海藻糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖四种单糖组成,其中葡萄糖所占比例最高,百分摩尔比为94.53%,而海藻糖、半乳糖和甘露糖糖比例很低。
实施例5:
体外保湿功效测定:通过测定物质的保湿效果来测定实施例1和实施例2的灵芝破壁孢子粉多糖的保湿效果,以透明质酸为对照。将由饱和(NH4)2SO4水溶液作为相对湿度(R.H.)为81%的干燥器和由饱和K2CO3水溶液作为R.H.=43%的干燥器置于20℃恒温环境中,精确称取1.0g各种提取物干燥试样置于直径为3cm的结晶皿中,放在81%的干燥器内,48h后吸湿后的试样继续放置43%的干燥器中24h,测定放置前后试样的重量差,由式(1)求出保湿率,H0为试样含水重量,Hn为放置后试样含水重量。
保湿率(%)=100Hn/H0 (1)
结果显示实施例1和实施例2的灵芝破壁孢子粉多糖均具有较好的保湿效果。
Claims (2)
1.一种灵芝孢子粉多糖的制备方法,包括如下步骤:
1)灵芝孢子粉粗多糖的提取:灵芝孢子粉中加入8-12倍重量的无水乙醇中,煮沸并保持微沸1-3h,离心收集沉淀;沉淀加入8-12倍重量的蒸馏水,煮沸并保持微沸1-3h,离心,收集上清液;
2)多糖粗提液的浓缩:上清液减压浓缩至料液比为1:0.5-1.5;
3)乙醇沉淀:向浓缩液中加入无水乙醇,至乙醇含量达到56%,室温静置1小时,离心,收集沉淀,加蒸馏水溶解冻干,即得粗多糖。
2.根据权利要求1的制备方法制备得到的灵芝孢子粉多糖。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410374769.XA CN104193840B (zh) | 2014-07-31 | 2014-07-31 | 一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410374769.XA CN104193840B (zh) | 2014-07-31 | 2014-07-31 | 一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104193840A CN104193840A (zh) | 2014-12-10 |
CN104193840B true CN104193840B (zh) | 2016-08-31 |
Family
ID=52079233
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410374769.XA Active CN104193840B (zh) | 2014-07-31 | 2014-07-31 | 一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104193840B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR3110413A1 (fr) * | 2020-04-20 | 2021-11-26 | L'oreal | Composition de soin de la peau |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105175564B (zh) * | 2015-08-21 | 2018-01-16 | 仙芝科技(福建)股份有限公司 | 灵芝孢子多糖的产业化提取分离方法和分离装置 |
CN105266139A (zh) * | 2015-10-10 | 2016-01-27 | 上海市农业科学院 | 一种保健凝胶食品 |
CN107556393A (zh) * | 2017-08-07 | 2018-01-09 | 华南理工大学 | 一种灵芝药渣的热水除糖方法及产品 |
CN108623703B (zh) * | 2018-05-29 | 2020-12-11 | 金华寿仙谷药业有限公司 | 一种利用辐照制备灵芝孢子粉壁壳粗多糖的方法 |
CN110183522B (zh) * | 2019-05-29 | 2020-09-18 | 北京市农林科学院 | 一种具有抗抑郁功能的糖肽及其制备方法与应用 |
CN111269954B (zh) * | 2020-03-17 | 2022-05-31 | 浙江中医药大学 | 一种利用酶法辅助超声制备灵芝孢子粉壁壳粗多糖的方法 |
CN113912751A (zh) * | 2021-12-01 | 2022-01-11 | 上海市农业科学院 | 一种富含半乳糖的灵芝孢子粉多糖及其制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101434662A (zh) * | 2008-12-29 | 2009-05-20 | 河南工业大学 | 一种制备真菌多糖的方法 |
CN101693745A (zh) * | 2009-09-01 | 2010-04-14 | 广东神农烟科技术有限公司 | 灵芝多糖及其提取方法、添加灵芝多糖的卷烟及其制备方法 |
CN102295709A (zh) * | 2011-07-02 | 2011-12-28 | 上海市农业科学院 | 一种浅色高分子量灵芝多糖及其制备方法 |
-
2014
- 2014-07-31 CN CN201410374769.XA patent/CN104193840B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101434662A (zh) * | 2008-12-29 | 2009-05-20 | 河南工业大学 | 一种制备真菌多糖的方法 |
CN101693745A (zh) * | 2009-09-01 | 2010-04-14 | 广东神农烟科技术有限公司 | 灵芝多糖及其提取方法、添加灵芝多糖的卷烟及其制备方法 |
CN102295709A (zh) * | 2011-07-02 | 2011-12-28 | 上海市农业科学院 | 一种浅色高分子量灵芝多糖及其制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Physicochemical characterization of a high molecular weight bioactive β-D-glucan from the fruiting bodies of Ganoderma lucidum;Yanfang Liu et al.;《Carbohydrate Polymers》;20140130;第101卷;第969页第2.1节、第970页第3.1节 * |
刘英梅 等;灵芝孢子粉中多糖提取工艺的研究;《中成药》;20060331;第28卷(第3期);第332页第1.3.1节 * |
离子色谱法测定灵芝孢子粉中多糖的含量;于青 等;《中国药学杂志》;20140228;第49卷(第4期);第345页第2.2.2节 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR3110413A1 (fr) * | 2020-04-20 | 2021-11-26 | L'oreal | Composition de soin de la peau |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104193840A (zh) | 2014-12-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104193840B (zh) | 一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法 | |
CN104059161A (zh) | 一种杏鲍菇下脚料粗多糖及其制备方法 | |
Godínez-Hernández et al. | Extracción y caracterización de fructanos de Agave salmiana Otto ex Salm-Dyck | |
CN110438180A (zh) | 灵芝液体发酵胞外活性多糖的制备及其增强免疫用途 | |
CN104987427B (zh) | 利用响应曲面法优化黑果枸杞多糖的复合酶微波提取方法 | |
CN109651532A (zh) | 一种铁皮石斛葡甘聚糖 | |
CN109400741A (zh) | 一种灵芝孢子多糖的分离纯化方法 | |
CN103239467B (zh) | 姬松茸多糖及其制备方法 | |
CN104059160B (zh) | 一种猴头菌细胞壁多糖及其制备方法 | |
CN106124640A (zh) | 一种用半粒测定水稻直链淀粉和支链淀粉含量的方法 | |
CN103091409B (zh) | 一种低聚果糖菊粉纯度的鉴定方法 | |
CN106589152A (zh) | 新疆阿拉套番红花球茎多糖的提取工艺 | |
CN109613138A (zh) | 一种利用pmp-hplc-内标标准曲线法同时测定太子参中葡萄糖和半乳糖含量的方法 | |
CN104059162B (zh) | 一种灵芝多糖及其制备方法 | |
CN104877037B (zh) | 一种蝙蝠草多糖分离纯化方法及其产品和应用 | |
CN106750429B (zh) | 一种洋葱多糖-明胶复合膜的制备工艺 | |
CN102669320A (zh) | 一种甜灵芝发酵茶的制备方法及甜灵芝发酵茶 | |
CN104725521B (zh) | 一种皱盖假芝单峰多糖f212及其制备方法和应用 | |
CN114272327B (zh) | 一种石斛发酵制品及其制备方法与应用 | |
CN104983836B (zh) | 一种从复方血脂宁的原料药中提取活性成分的方法 | |
CN108948223A (zh) | 桃金娘多糖p1及其分离方法和在制备降血脂药物中的应用 | |
CN106177499A (zh) | 一种铁皮石斛总黄酮提取方法 | |
CN104910285B (zh) | 一种鹿角海萝多糖 | |
CN109206532A (zh) | 一种从桃金娘果实中提取并分离纯化多糖的方法 | |
CN104710543A (zh) | 一种高分子量杏鲍菇多糖及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |