CN104160264A - 观测设备、观测程序和观测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的是提供适于检测和观测观测目标对象的观测设备、观测程序和观测方法。根据本技术的观测设备包括显微镜光学***、成像单元、分光单元和检测单元。所述成像单元使用所述显微镜光学***拾取图像。所述分光单元使用所述显微镜光学***获取紫外光区域、可见光区域或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱。所述检测单元通过使用所述吸收光谱或所述拉曼光谱检测观测样品中的观测目标。
Description
技术领域
本技术涉及能够经由显微镜光学***观测观测目标对象的观测设备、观测程序和观测方法。
背景技术
当用户经由显微镜观测观测目标对象时，用户想要观测的观测目标对象在许多情况(诸如其中用户观测包括在培养液中的细胞的情况)下仅是观测样品的一部分。在这种情况下，用户需要搜索观测样品中的观测目标对象，其对用户施加了沉重负担。
使用检测观测样品中的观测目标对象的一些分析方法也被启用。例如，通过专利文献1中公开的红外分光分析器，有可能基于测量区域的红外分光光谱确定测量区域是否包含观测目标对象。
专利文献1：日本专利申请公开号07-270311
发明内容
本发明要解决的问题
然而，如果观测样品在分析设备和显微镜设备之间传送时，观测目标对象在观测样品中移动，且有一种可能性，即所检测的观测目标对象的位置没有任何方法。此外，观测目标对象可随时间推移移动或劣化。
鉴于上述情况，本技术的目的是提供适于观测目标对象的检测和观测的观测设备、观测程序和观测方法。
用于解决问题的方法
鉴于如上所述的情况，根据本技术的实施例，提供了一种观测设备，其包括显微镜光学***、成像单元、分光单元和检测单元。
成像单元经由显微镜光学***拍摄图像。
分光单元经由显微镜光学***获取紫外光区域、可见光区域或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱。
检测单元通过使用吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象。
根据该配置，由于分光单元和成像单元使用常用显微镜光学***，所以分光单元获取吸收光谱或拉曼光谱的位置和成像单元的视角之间的相对位置关系被限定。出于这个原因，成像单元可通过使用基于吸收光谱或拉曼光谱由检测单元检测的观测目标对象的位置信息拍摄观测目标对象的图像。这可消除用户通过他/她自己要搜索观测目标对象并允许用户容易地拍摄观测目标对象的显微镜图像的必要性。
观测设备还可包括控制单元，其使成像单元拍摄由检测单元检测的观测目标对象的图像。
根据该配置，控制单元控制显微镜的光学***、照明等以获取由检测单元检测的观测目标对象的图像，并因此观测目标对象的检测和成像可被自动化。
检测单元可基于观测样品的图像检测观测目标对象候选者，图像由成像单元拍摄，并通过使用吸收光谱或拉曼光谱确定观测目标对象候选者是否是观测目标对象。
根据该配置，检测单元仅需要基于先前观测样品的图像通过使用例如像素值对观测目标对象候选者进行由吸收光谱或拉曼的确定。这允许观测目标对象被快速检测。
检测单元可每个预定时间检测观测目标对象，且控制单元可使成像单元每个预定时间拍摄由检测单元检测的观测目标对象的图像。
根据该配置，也当观测目标对象随时间推移移动时，检测单元可跟踪观测目标对象。这允许观测目标对象在一段规定时间(时间推移观测)观测。
检测单元可每个预定时间基于由成像单元拍摄的图像或由分光单元获取的吸收光谱或拉曼光谱确定观测目标对象的状态，并确定观测目标对象是否是观测目标。
根据该配置，在其中观测目标对象进入不适于随时间推移的观测的状态的情况下，观测可终止。
鉴于上述情况，根据本技术的实施例，提供了观测程序，其包括检测单元和控制单元。
检测单元其通过使用紫外光、可见或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象，吸收光谱或拉曼光谱经由显微镜光学***由分光单元获取。
控制单元使成像单元拍摄由检测单元检测的观测目标对象的图像。
鉴于上述情况，根据本技术的实施例，提供了一种观测方法，其包括：通过使用紫外光、可见或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象，吸收光谱或拉曼光谱经由显微镜光学***由分光单元获取；和通过控制单元使成像单元拍摄由检测单元检测的观测目标对象的图像。
鉴于上述情况，根据本技术的另一实施例，提供了观测设备，其包括显微镜光学***、成像单元、紫外光/可见光/红外光分光单元和拉曼分光单元。
成像单元经由显微镜光学***拍摄图像。
紫外光/可见光/红外光分光单元经由显微镜光学***获取紫外光、可见或红外光区域中的吸收光谱。
拉曼分光单元经由显微镜光学***获取拉曼光谱。
本发明的效果
如上所述，根据本技术，可提供适于观测目标对象的检测和观测的观测设备、观测程序和观测方法。
附图说明
图1是示出根据本技术的实施例的观测设备的配置的示意图。
图2是示出观测设备的操作的流程图。
图3示出通过相同观测设备的紫外光/可见光/红外光分光单元获取的紫外光、可见或红外线区域的二维分光图像的实例及其吸收光谱的实例。
图4示出通过相同观测设备的紫外光/可见光/红外光分光单元获取的紫外光、可见或红外线区域的二维分光图像的实例及其吸收光谱的实例。
图5示出由观测设备的拉曼分光单元获取的拉曼光谱的实例。
图6是使用观测设备进行随时间推移观测的流程图。
图7是根据观测目标对象候选者的呈现和使用观测设备在随时间推移观测中的观测条件的设置的流程图。
图8是呈现给用户的观测设备的观测结果的实例。
图9是根据使用观测设备在随时间推移观测中校正观测条件的流程图。
图10是根据使用观测设备在随时间推移观测中搜索观测目标对象的流程图。
图11是根据使用观测设备在随时间推移观测中呈现观测结果和改变观测条件的流程图。
图12是随不同推移时间的观测目标对象的图像的实例，所示图像由观测设备的成像单元拍摄。
图13是由观测设备的紫外光/可见光/红外光分光单元获取的荧光的二维分光图像及其荧光光谱的实例。
具体实施方式
下面将给出根据该实施例的观测设备的描述。图1是示出根据本实施例的观测设备1的配置的示意图。如图1所示，观测设备1包括载物台2、显微镜光学***3、成像单元4、紫外光/可见光/红外光分光单元5、拉曼分光单元6、透射照明单元07、外部照明单元08和控制单元9。此外，容纳观测样品的培养箱S放置在载物台2。
显微镜光学***3被设置为面向载物台2。成像单元4、紫外光线/可见光/红外线分光单元5、拉曼分光单元6和外部照明单元8连接到显微镜光学***3。透射照明单元7相对于载物台2设置在显微镜光学***3的相反侧。控制单元9连接到成像单元4、紫外光/可见光/红外光分光单元5和拉曼分光单元6且根据需要还连接到诸如载物台2和显微镜光学***3的单元。
载物台2支撑培养箱S并限定培养箱S和显微镜光学***3之间的相对距离。载物台2可被配置为可由诸如马达的驱动源在水平方向(X-Y方向)和垂直方向(Z方向)上移动。应指出，代替载物台2，显微镜光学***3可被配置为可相对于载物台2移动。
培养箱S容纳观测目标对象(细胞等)在其中进行培养的培养皿或孔板，且被配置为允许不同观测，同时保持培养环境，即，保持细胞存活。在培养箱S中，在培养基更换或药剂(细胞因子等)添加的情况下或在观测到细胞到药剂的反应的情况下，其盖子打开并关闭多次。在培养环境的维护受到影响的情况下，理想的是覆盖整个观测设备1以保持培养环境。此外，培养箱S可被配置为自动进行介质更换或测试试剂的添加。
显微镜光学***3将光(包含紫外光线和红外线)(其穿透观测样品或已经在观测样品中产生)引导到紫外光/可见光/红外光分光单元5、拉曼分光单元6和成像单元4。虽然将在后面描述显微镜光学***3的详细配置，但是紫外光/可见光/红外光分光单元5经由显微镜光学***3获取观测样品的吸收光谱，且拉曼分光单元6经由显微镜光学***3获取观测样品的拉曼光谱。成像单元4经由显微镜光学***3获取观测样品的显微镜图像。
成像单元4由显微镜光学***3拍摄观测样品的显微镜图像。成像单元4包括成像装置，诸如CCD(电荷耦合器件)图像传感器或CMOS(互补金属氧化物半导体)图像传感器，并且被配置为能够拍摄观测样品的静止图像或运动图像。成像单元4可按照显微镜光学***3、透射照明单元7等的配置拍摄观测样品的明场图像、暗场图像、相位差图像、荧光图像、偏光显微镜图像等中的所有或至少一个。成像单元4将拍摄图像输出到控制单元9、图中未示出的另一信息处理装置等。
紫外光/可见光/红外光分光单元5经由显微镜光学***3生成观测样品的紫外光、可见或红外光区域中的二维分光图像并从二维分光图像获取紫外光、可见或红外光区域中的吸收光谱(紫外光/可见光/红外光分光谱)。
已经从透射照明单元7退出的紫外光光、可见光或红外光穿透观测样品并由显微镜光学***3被引导到紫外光/可见光/红外光分光单元5，并且因此生成二维分光图像。在生成的二维分光图像中，紫外光/可见光/红外光分光单元5提取其中观测目标对象不存在的区域的平坦透射光谱，并随后获得透射光谱与每个像素的透射光谱的比率的常用对数，这允许吸收光谱的获取。紫外光/可见光/红外光分光光谱(参见图3)表示相对于已经穿透观测样品的紫外光光、可见光或红外光的波长的吸光度的图，并包含关于观测样品的特性的信息(分子结构或化学状态)。
应指出，紫外光/可见光/红外光分光单元5可以是任何单元，只要吸收光谱可紫外光、可见和红外光区域的至少一个或紫外光、可见和红外光区域的所有区域中获得即可。此外，紫外光/可见光/红外光分光单元5可预先对观测样品进行荧光标记并因此获得荧光的紫外光/可见光/红外光分光光谱。紫外光/可见光/红外光分光单元5将获得的吸收光谱输出到控制单元9。
拉曼分光单元6经由显微镜光学***3产生观测样品的拉曼散射的二维分光图像。拉曼分光单元6从二维分光图像获取拉曼散射的光谱(拉曼光谱)。拉曼分光单元6经由显微镜光学***3将具有特定波长的观测样品应用于激发光(激光)。从观测样品发射的光(在下文中称为发射光)经由显微镜光学***3相应地被引导到拉曼分光单元6且图像被拍摄。
在产生的二维分光图像中，拉曼分光单元6提取其中观测目标对象不存在的区域的平坦光谱，且随后获得光谱和各像素的光谱之间的差异，这允许拍摄观测目标对象本身的拉曼光谱。拉曼光谱(参见图5)表示相对于波长的发射光的强度的图。发射光包含由拉曼散射的散射光且由拉曼散射进行的散射光的波长转换(拉曼位移)根据检测样品(分子结构或晶体结构)的特性(即拉曼光谱包含观测样品的特性的信息)而不同。拉曼分光单元6将获取拉曼光谱输出到控制单元9
透射照明单元7将照明光应用到观测样品。如上所述，成像单元4被配置为能够拍摄明场图像、暗场图像、相位差图像、荧光图像、偏光显微镜图像等中的所有或至少一个，且透射照明单元7被配置为能够将照明(其对应于被拍摄的图像)应用到观测样品。
具体而言，透射照明单元7在其中成像单元4的成像目标是明场图像的情况下将正常白光应用到观测样品，且在其中成像单元4的成像目标是暗场图像的情况下将照明光应用到观测样品，照明光的数值孔径组件大于物镜的数值孔径(NA)。此外，在其中成像单元4的成像目标是相位差分图像的情况下，透射照明单元7经由按照物镜选择的环孔径将照明光应用到观测样品。对于透射照明单元7，其配置可由控制单元9自动切换的装置是合适的，以便按照这样的各种成像技术或成像放大倍率适当地应用最佳照明光。
外部照明单元8经由显微镜光学***3将各种类型的照明光应用到观测样品。反射照明单元8可相对于外部照明单元7辅助地或者可替代地操作并可根据需要提供。
控制单元9基于紫外光/可见光/红外光分光单元5或拉曼分光单元6的输出控制观测设备1的单元，诸如载物台2和显微镜光学***3，并在成像单元4中拍摄观测样品的显微镜图像。控制单元9是信息处理设备(诸如PC(个人计算机))，并包括作为功能配置的检测单元91和控制单元92。
检测单元91由紫外光/可见光/红外光分光单元5获得的吸收光谱或由拉曼分光单元6获得的拉曼光谱中的任何一个检测观测目标对象中的观测样品。观测目标对象物是例如细胞的质量且包含容纳在培养箱S中的观测样品中。
检测单元91可通过吸收光谱或拉曼光谱的分析确定在其中吸收光谱或拉曼光谱由紫外光/可见光/红外光分光单元5或拉曼分光单元6获得的位置处是否具有观测目标对象。换言之，检测单元91可通过二维或三维扫描其中获取吸收光谱或拉曼光谱的位置检测观测样品中的观测目标对象。将在后面描述由检测单元91检测观测目标对象的方法。
控制单元92使成像单元4拍摄观测样品中的观测目标对象的图像，观测目标对象由检测单元91检测。具体而言，控制单元92可控制载物台2和显微镜光学***3的相对位置，使得观测目标对象被包括在成像装置4的成像范围中，并控制显微镜光学***3的成像倍率和透射照明单元7等的照明时间，以及指示成像单元4拍摄图像。
[显微镜光学***的配置]
将描述显微镜光学***3的配置。如图1所示，显微镜光学***3可包括物镜31、第一光路切换单元32和第二光路切换单元33。物镜31被布置为面对观测样品(即，培养箱S)。第一光路切换单元32设置在物镜31之后，且第二光路切换单元33设置在第一光路切换单元32之后。
物镜31将已经穿透观测样品或已从观测样品射出的光放大到预定放大倍率。物镜31可被配置为可按照明场图像、暗场图像、相位差图像、荧光图像、偏光显微镜图像等的成像技术或成像放大倍率切换。
第一光路切换装置32从物镜31切换入射光的光路。具体而言，在其中外部照明单元8照亮观测样品的情况下，第一光路切换单元32可作为半反镜，且因此可朝向物镜从外部照明单元8反射照明光，同时朝向第二光学路径切换单元33从物镜31传送入射光。
此外，在其中观测样品的荧光由成像单元4或紫外光/可见光/红外光分光单元5观测的情况下，第一光学路径切换单元32可作为分色镜。换言之，从外部照明单元8施加到观测样品的激发光的波长带由分色镜切断，且使仅荧光的波长带朝向第二光路切换单元33穿透。对于第一光路切换装置32，可根据需要切换的装置可是合适的。或者，在光路的这种切换不必要的情况下，可不提供第一光路切换单元32。
第二光路切换单元33从第一光路切换单元32切换入射光的光路。第二光路切换单元33可以预定比例将入射光排序到成像单元4、紫外光/可见光/红外光分光单元5和拉曼分光单元6的方向。此外，第二光路切换单元33可以预定比例将入射光排序到成像单元4、紫外光/可见光/红外光分光单元5和拉曼分光单元6的任何一个或两个方向，所述方向用于观测观测样品。例如，当其中紫外光、可见或红外光区域(或拉曼散射的二维分光图像)中的二维分光图像被测量的情况下，第一光路切换单元32可将所有的入射光排序到紫外光/可见光/红外光分光单元5(或拉曼分光单元6)，且在成像单元4拍摄观测样品的图像的情况下，第一光路切换单元32可将所有的入射光排序到成像单元4。
在本实施例中，成像单元4、紫外光/可见光/红外光分光单元5和拉曼分光单元6使用显微镜光学***3中的共同光路，但本技术不限于此。在显微镜光学***3中，如果独立提供成像单元4、紫外光/可见光/红外光分光单元5和拉曼分光单元6的光路，仅需要指定各自光路的相对位置关系。换言之，仅需要确定由紫外光/可见光/红外光分光单元5或拉曼分光单元6的视场的二维分光图像和成像单元4的视场之间的位置关系。更具体而言，仅需要找出其中观测目标对象的存在位置所对应的成像单元4的视场的位置，基于紫外光/可见光/红外光分光单元5或拉曼分光单元6的光谱检测观测目标对象。
观测设备1可如上所述进行配置，但观测设备1可根据需要具有不同配置。例如，在其中观测样品的偏光显微镜图像被拍摄的情况下，也可能在透射照明单元7中提供偏振器并在显微镜光学***3中提供分析器。
[感测设备的操作]
将描述观测设备1的操作。图2是示出观测设备1的操作的流程图。在载物台2上，包括观测目标对象的观测样品被容纳在其中的培养箱S被预先放置。
首先，观测目标对象候选者被提取是否由用户(St1)指定。用户可通过对控制单元9等的操作输入进行此指定。例如，在其中存在于观测样品中的观测目标对象的量小的情况或其中观测样品中的观测目标对象存在的位置可在一定程度上被预先指定的情况下，用户可选择观测目标候选者的提取。
在其中观测目标对象候选者由用户提取的情况(St1：是)下，提取观测目标对象候选者(St2)。具体而言，检测单元91对观测样品的图像进行图像处理等，由成像单元4以低倍率拍摄图像(在下文中被称为低放大率图像)，因此，观测目标候选者对象可被提取。例如，检测单元91可基于每个预定范围内的像素值的差提取观测目标对象候选者。此外，用户可基于低放大倍率图像提取观测目标对象候选者。检测单元91或者用户可在控制单元92中记录观测目标对象候选者的空间坐标(X、Y、Z坐标)。
随后，紫外光/可见光/红外光分光单元5和拉曼分光单元6中的至少一个对观测目标对象候选者(St3)执行分光扫描。在其中由紫外光/可见光/红外光分光单元5执行分光扫描的情况下，在控制单元92的控制下，使照明光从透射照明单元7出来以经由显微镜光学***3进入紫外光/可见光/红外光分光单元5。响应于此，在紫外光/可见光/红外光分光单元5中，拍摄观测目标对象候选者的位置处的紫外光、可见或红外光区域中的二维分光图像并获取吸收光谱。载物台2和显微镜光学***3的相对位置可由控制单元92调整，且观测目标对象候选者的相邻区域也可被扫描。应指出，此时，显微镜光学***3的较小放大倍率允许更宽视场的高速扫描(这是合适的)。
在其中光谱扫描由拉曼分光单元6执行的情况下，在控制单元92的控制下，使激发光从拉曼分光单元6出来以经由显微镜光学***3被应用到观测样品。从观测样品发射的光(包含拉曼散射光)经由显微镜光学***3进入拉曼分光单元6。响应于此，在拉曼分光单元6中，拍摄观测目标对象候选者的位置处的拉曼散射的二维分光图像并获取拉曼光谱。载物台2和显微镜光学***3的相对位置可由控制单元92调整，且观测目标对象候选者的相邻区域也可被扫描。应指出，此时，显微镜光学***3的较小放大倍率允许更宽视场的高速扫描(这是合适的)。
另一方面，在其中观测目标对象存在的候选者区域的提取不被用户选择(St1：否)的情况下，为观测样品存在的整个空间(样品空间)执行分光扫描(St4)。如在观测目标对象候选者被提取(St2)的情况，载物台2和显微镜光学***3的相对位置可由控制单元92调整，且观测目标对象候选者的相邻区域也可被扫描。
随后，检测单元91确认由紫外光/可见光/红外光分光单元5获得的吸收光谱或由拉曼分光单元6获得的拉曼光谱是否具有特征光谱(St5)。
图3和图4每个都示出由紫外光/可见光/红外光分光单元5获取的紫外光、可见或红外光区域的二维分光图像的实例，和二维分光图像的特定点处的吸收光谱的实例。图3中的观测目标对象是红血细胞，且图4中的观测目标对象是HepG2细胞(人肝癌细胞系)
图3中所示的吸收光谱由观测目标对象(红血细胞)不存在的位置(作为参考)产生。如图3所示，在其中观测目标对象是红血细胞的情况下，在二维分光图像中的红血细胞存在的位置的吸收光谱中，由血红蛋白衍生的强吸收在从约380nm到460nm的范围的波长的Soret带内确认。另一方面，在二维分光图像中的红血细胞不存在的位置处的吸收光谱中，从血红蛋白衍生的强吸收不被确认。换言之，在其中观测目标对象是红血细胞的情况下，可基于Soret带中的吸收检测红血细胞。
图4中所示的吸收光谱由观测目标对象(HepG2)不存在的位置(作为参考)产生。如图4所示，在其中观测目标对象是HepG2的情况下，在二维分光图像中的HepG2存在的位置的吸收光谱中，由血红素衍生的强吸收包括在细胞中的囊泡膜等在Soret带被确认。另一方面，在二维分光图像中的HepG2不存在的位置处的吸收光谱中，从该组分衍生的强吸收不被确认。换言之，在其中观测目标对象是HepG2的情况下，可基于在从400nm到480nm的范围内的吸收检测HepG2。
除此之外，检测单元91可基于观测目标对象特有的吸收光谱检测观测目标对象。由吸收光谱检测的观测目标对象不限于细胞且仅需要具有特征吸收光谱。
图5是由拉曼分光单元获取的拉曼光谱的实例。图5中的观测目标对象是HepG2。
图5示出HepG2存在于由拉曼分光单元6产生的拉曼散射的二维分光图像的位置的拉曼光谱，和HepG2不存在的位置(背景)的拉曼光谱。如图5所示，HepG2存在的位置的拉曼光谱表达不存在于HepG2不存在的位置的拉曼光谱中的峰。这些峰被认为由HepG2的RNA(核糖核酸)或DNA(脱氧核糖核酸)衍生。同样在观测目标对象不是HepG2的情况下，如果从RNA或DNA衍生的峰存在，有可能确定观测目标对象是细胞。
除此之外，检测单元91可基于观测目标对象特有的拉曼光谱检测观测目标对象。由拉曼光谱检测的观测目标对象不限于细胞且仅需要具有特征拉曼光谱。
在其中检测单元91识别如上所述的二维分光图像的特定位置处的吸收光谱或拉曼光谱中的特征光谱(St5：是)的情况下，该位置的坐标(X、Y、Z坐标)被记录为观测位置(St6)。此外，检测单元91可进一步选择是否根据特征光谱被识别的区域的大小记录该位置的坐标，即，区域的大小被假设为观测目标对象。检测单元91可将该位置的坐标提供到控制单元92。
此外，在其中检测单元91识别该位置处的吸收光谱或拉曼光谱中的无特征光谱(St5：否)的情况下，该位置被排除在观测目标之外(St7)。检测单元91可确认二维分光图像的整个区域中是否存在吸收光谱或拉曼光谱的特征光谱，以检测二维分光图像中的观测目标对象。
如上所述，检测单元91可基于由紫外光/可见光/红外光分光单元5获得的吸收光谱或由拉曼分光单元6获得的拉曼光谱检测观测目标对象。该检测结果可被提供到控制单元92，以由控制单元92用于成像顺序，或可被呈现给用户。
使用从检测单元91提供的观测目标对象的位置，控制单元92可调整载物台2和显微镜光学***3的相对位置以对观测目标对象设置成像单元4的视场。此外，控制单元92可控制透射单元7或成像单元4并使成像单元4拍摄观测目标对象的图像。这可消除用户通过他/她自己搜索观测目标对象并允许用户容易获得观测目标对象的高放大率图像的必要性。
[时间推移观测]
下面将给出使用观测设备1的时间推移(时间)观测的描述。在时间推移观测中，观测目标对象在长时期内被成像并观测观测目标对象的时间变化。在这里，在其中观测目标对象是在培养液中的细胞或细胞团的情况下，例如，认为观测目标对象随时间推移被移动或杀死。因此，在其中仅观测样品的一个点继续被成像的情况下，有可能会发生其中成像继续即使当观测目标对象超出视场或已经死亡并因此不值得观测的情况。在这里，这样的问题可通过使用根据本实施例的观测设备1解决。
图6是使用观测设备1的时间推移观测的流程图。如图6所示，当时间推移观测开始时，检测观测目标对象候选者(St11)。如上所述，观测目标对象候选者可通过对观测样品的低放大倍数图像进行图像处理来检测。
随后，进行观测目标对象候选者的呈现和观测条件的设置(St12)。图7是根据观测目标对象候选者的呈现和观测条件的设置的流程图。如图7所示，观测目标对象候选者的观测结果呈现给用户(St121)。观测目标对象候选者是通过对观测样品的低放大倍数图像进行的图像处理提取的对象。在这一点上，不确定观测目标对象候选者是否是观测目标对象或观测目标对象之外的对象(灰尘、死细胞等)。
观测设备1将观测目标对象候选者的观测结果(例如观测目标对象候选者的明场图像、相位差图像、吸收光谱、拉曼光谱等)(其由成像单元4拍摄)呈现给用户。图8是每个都示出作为由观测设备1呈现给用户的观测结果的实例的显示在显示器上的显示图像的示意图。如图8(a)所示，可为每个观测目标对象候选者修整并显示观测目标对象候选者的图像(亮场图象等)。
当用户选择观测目标对象候选者时，如图8(b)所示，可显示所选择的观测目标对象候选者的更详细观测结果。用户可看到观测目标对象候选者的显示观测结果并选择被观测的观测目标对象候选者者作为观测目标对象。
在其中观测目标对象候选者被选择为观测目标对象(St122：是)的情况下，观测目标对象候选者被保持作为观测目标对象(St123)。随后，观测条件(被测量的项目、观测时间间隔等)被设置用于观测目标对象(St124)。另一方面，在其中观测目标对象候选者没有被选择作为观测目标对象(St122：否)的情况下，观测目标对象候选者被从观测目标中排除(St125)。
返回参考图6，显微镜光学***3的视场被移动到观测位置(第一或下一个观测位置)(St13)。随后，观测设备1校正观测位置(St14)。图9是根据观测位置的校正的流程图。如图9所示，当显微镜光学***3的视场被移动到下一个观测位置(St141)时，确认观测目标对象是否存在(St142)。例如，在其中观测目标对象是细胞等的情况下，存在一种可能性，即观测目标对象随时间推移移动且不超出显微镜光学***3的视场。
在其中观测目标对象存在于显微镜光学***3的视场中(St142：是)的情况下，观测目标对象被保持为如其自身那样的观测目标对象(St143)。另一方面，在其中观测目标对象不存在于显微镜光学***3的视场中(St142：否)的情况下，搜索观测目标对象(St144)。图10是根据观测目标对象的搜索的流程图。
如图10所示，在观测位置周围搜索观测目标对象(St151)。根据图2中所示的流程图进行观测目标对象的搜索。在其中检测到一个观测目标对象(St152：是)的情况下，即观测目标对象被看作从最后一个观测位置移动的观测目标对象，并校对观测目标对象的观测位置(St153)。
另一方面，在其中检测到多个观测目标对象的情况下，多个观测目标对象被识别为质量(St154)。这是因为在观测目标对象是细胞的情况下假设细胞***的发生。在这种情况下，观测目标对象的观测位置被校正为观测目标对象(St155)的质量中心。
返回参考图9，在观测目标对象的观测位置被如上所述校正之后(St145)，保持观测目标对象(St143)。返回参考图6，拍摄预定观测的图像，例如，明场图像、相位差图像、荧光图像等(St15)。随后，呈现观测结果且观测条件变化(St16)。图11是根据观测结果的呈现和观测条件的变化的流程图。
如图11所示，观测目标对象的观测结果被呈现给用户(St161)。例如如图8所示，观测结果可被呈现给使用者。随后，确认观测条件是否变化(St162)。例如对于观测条件的变化，在其中作为观测目标对象的细胞物死亡的情况下，观测可终止。此外，在其中作为观测目标对象的细胞未分化的情况下，也可以增加添加药剂(细胞因子等)以用于刺激分化的步骤、缩短观测时间间隔的步骤，或添加要观测的其它项目(例如，吸收光谱)的步骤中。
除了吸收光谱或拉曼光谱之外，也可通过使用明场图像、暗场图像、相位差图像等的图像分析基于观测目标对象的大小变化确定观测目标对象的状态变化。图12示出不同流逝时间的观测目标对象(HeLa细胞)的明场图像。比较图12(a)和图12(b)，可能通过图像分析确定下侧的细胞死亡。此外，也可通过偏光显微镜图像基于作为观测目标对象的细胞的折射率各向异性的变化来确定观测目标对象的状态变化。
此外，在其中作为观测目标对象的细胞分化成特定细胞的情况下，观测可终止。此外，在其中观测目标对象是心肌细胞的情况下，心肌细胞的搏动可通过运动图像、电测量、磁场变化的测量、超声波观测等检测。在其中心肌细胞的搏动达到标准脉动的情况下，也可增加添加药剂的步骤、缩短观测时间间隔的步骤，或者新添加将被测量的其它项目的步骤。
在其中观测条件变化(St162：是)情况下，观测目标对象的观测条件被复位或观测终止(St163)。在其中观测条件不变(St162：否)的情况下，这些观测条件保持(St164)。
返回参考图6，对于下一个观测位置，重复执行上述步骤(St13至St16)。可在预置的每个预定时期进行这些步骤。以如上所述的方式，进行时间推移观测。如上所述，可基于紫外光、可见或红外光区域的吸收光谱或拉曼光谱获得观测目标对象的信息。这允许观测目标对象的跟踪并允许用户容易进行时间推移观测。
本技术不限于上述实施例且可在不脱离本技术的主旨的情况下进行修改。
在其中观测目标对象经受荧光标记的情况下，紫外光/可见光/红外光分光单元5可从二维分光图像获取荧光光谱。图13是荧光的二维光谱图像的实例和荧光光谱的实例。图13(a)示出通过加载RC-1中的羧基-SNARF-1(兔角膜上皮细胞)获得的观测样品的荧光分光图像及其荧光光谱。图13(b)示出背景被去除的相同观测样品的荧光分光图像及其荧光光谱。如这些图所示，在荧光分光图像中，由于荧光光谱根据观测目标对象物的存在/不存在而不同，所以检测单元91还可基于由紫外光/可见光/红外光分光单元5获取的荧光光谱检测观测目标对象。
应指出，本技术可具有以下配置。
(1)一种观测设备，其包括：
显微镜光学***；
成像单元，其经由显微镜光学***拍摄图像；
分光单元，其经由显微镜光学***获取紫外光区域、可见光区域或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱；和
检测单元，其通过使用吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象。
(2)根据(1)所述的观测设备，其还包括
控制单元，其使成像单元拍摄由检测单元检测的观测目标对象的图像。
(3)根据(1)或(2)所述的观测设备，其中
检测单元基于观测样品的图像检测观测目标对象候选者，图像由成像单元拍摄，并通过使用吸收光谱或所述拉曼光谱确定观测目标对象候选者是否是观测目标对象。
(4)根据(1)至(3)中任一项所述的观测设备，其中
检测单元每个预定时间检测观测目标对象，且
控制单元使成像单元拍摄每个预定时间由检测单元检测的观测目标对象的图像。
(5)根据(1)至(4)中任一项所述的观测设备，其中
检测单元基于每个预定时间由成像单元拍摄的图像或由分光单元获取的吸收光谱或拉曼光谱确定观测目标对象的状态，并确定观测目标对象是否是观测目标。
(6)一种观测程序，其使计算机用作：
检测单元，其通过使用紫外光、可见或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象，吸收光谱或拉曼光谱经由显微镜光学***由分光单元获取；和
控制单元，其使成像单元拍摄由检测单元检测的观测目标对象的图像。
(7)一种观测方法，其包括：
通过使用紫外光、可见光或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象，吸收光谱或拉曼光谱经由显微镜光学***由分光单元获取；和
通过控制单元使成像单元拍摄由检测单元检测的观测目标对象的图像。
(8)一种观测设备，其包括：
显微镜光学***；
成像单元，其经由显微镜光学***拍摄图像；
紫外光/可见光/红外光分光单元，其经由显微镜光学***获取紫外光、可见或红外光区域中的吸收光谱；和
拉曼分光单元，其经由显微镜光学***获取拉曼光谱。
附图标记说明
1 观测设备
3 显微镜光学***
4 成像单元
5 紫外光/可见光/红外分光单元
6 拉曼光谱单元
91 检测单元
92 控制单元
Claims (8)
1.一种观测设备，其包括：
显微镜光学***；
成像单元，经由所述显微镜光学***拍摄图像；
分光单元，经由所述显微镜光学***获取紫外光区域、可见光区域或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱；以及
检测单元，通过使用所述吸收光谱或所述拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象。
2.根据权利要求1所述的观测设备，还包括
控制单元，使所述成像单元拍摄由所述检测单元检测出的所述观测目标对象的图像。
3.根据权利要求1所述的观测设备，其中
所述检测单元基于所述观测样品的由所述成像单元拍摄的图像来检测观测目标对象候选者，并通过使用所述吸收光谱或所述拉曼光谱来确定所述观测目标对象候选者是否是所述观测目标对象。
4.根据权利要求2所述的观测设备，其中
所述检测单元针对每个预定时间检测所述观测目标对象，以及
所述控制单元针对每个预定时间使所述成像单元拍摄由所述检测单元检测出的所述观测目标对象的图像。
5.根据权利要求4所述的观测设备，其中
所述检测单元针对每个预定时间基于由所述成像单元拍摄的图像或者由所述分光单元获取的所述吸收光谱或所述拉曼光谱确定所述观测目标对象的状态，并确定所述观测目标对象是否是观测目标。
6.一种观测程序，使计算机用作：
检测单元，通过使用紫外光区域、可见光区域或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象，所述吸收光谱或所述拉曼光谱经由显微镜光学***由分光单元获取；和
控制单元，使成像单元拍摄由所述检测单元检测出的所述观测目标对象的图像。
7.一种观测方法，包括：
通过检测单元使用紫外光区域、可见光区域或红外光区域中的吸收光谱或拉曼光谱检测观测样品中的观测目标对象，所述吸收光谱或所述拉曼光谱经由显微镜光学***由分光单元获取；和
通过控制单元使成像单元拍摄由所述检测单元检测出的所述观测目标对象的图像。
8.一种观测设备，包括：
显微镜光学***；
成像单元，经由所述显微镜光学***拍摄图像；
紫外光/可见光/红外光分光单元，经由所述显微镜光学***获取紫外光、可见光或红外光区域中的吸收光谱；和
拉曼分光单元，经由所述显微镜光学***获取拉曼光谱。
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Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6230957B2 (ja) * | 2014-05-29 | 2017-11-15 | 株式会社日立国際電気 | 検査装置及び検査方法 |
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| US10677722B2 (en) | 2016-04-05 | 2020-06-09 | University Of Notre Dame Du Lac | Photothermal imaging device and system |
| JP6776672B2 (ja) | 2016-07-08 | 2020-10-28 | 住友電気工業株式会社 | 品質評価方法及び品質評価装置 |
| US11280727B2 (en) | 2016-09-27 | 2022-03-22 | Purdue Research Foundation | Depth-resolved mid-infrared photothermal imaging of living cells and organisms with sub-micron spatial resolution |
| CN115096853A (zh) | 2016-11-29 | 2022-09-23 | 光热光谱股份有限公司 | 用于化学成像原子力显微镜红外光谱法的方法和装置 |
| WO2018102467A1 (en) * | 2016-11-29 | 2018-06-07 | Anasys Instruments Corporation | Method and apparatus for enhanced photo-thermal imaging and spectroscopy |
| US10942116B2 (en) * | 2017-10-09 | 2021-03-09 | Photothermal Spectroscopy Corp. | Method and apparatus for enhanced photo-thermal imaging and spectroscopy |
| US11486761B2 (en) | 2018-06-01 | 2022-11-01 | Photothermal Spectroscopy Corp. | Photothermal infrared spectroscopy utilizing spatial light manipulation |
| JP7196640B2 (ja) * | 2019-01-29 | 2022-12-27 | セイコーエプソン株式会社 | 情報システムおよび特定方法 |
| US10845248B1 (en) | 2019-05-01 | 2020-11-24 | Trustees Of Boston University | Systems and methods for bond-selective transient phase imaging |
| JP6777199B2 (ja) * | 2019-07-04 | 2020-10-28 | 住友電気工業株式会社 | 品質評価方法及び品質評価装置 |
| US11480518B2 (en) | 2019-12-03 | 2022-10-25 | Photothermal Spectroscopy Corp. | Asymmetric interferometric optical photothermal infrared spectroscopy |
| US20230129884A1 (en) | 2020-07-20 | 2023-04-27 | Photothermal Spectroscopy Corp. | Fluorescence enhanced photothermal infrared spectroscopy and confocal fluorescence imaging |
| CN117897609A (zh) | 2021-08-31 | 2024-04-16 | 株式会社岛津制作所 | 拉曼红外光谱分析复合机以及利用拉曼分光和红外分光的测定方法 |
| US11619649B1 (en) | 2021-11-26 | 2023-04-04 | Park Systems Corp. | Atomic force microscope equipped with optical measurement device and method of acquiring information on surface of measurement target using the same |
| JP7346778B2 (ja) * | 2021-11-29 | 2023-09-20 | パーク システムズ コーポレーション | 光学測定装置が装着された原子顕微鏡及びこれを利用して測定対象の表面の情報を得る方法 |
| JP2024078849A (ja) | 2022-11-30 | 2024-06-11 | 株式会社島津製作所 | 赤外ラマン装置 |
Family Cites Families (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5845639A (en) * | 1990-08-10 | 1998-12-08 | Board Of Regents Of The University Of Washington | Optical imaging methods |
| JPH04161839A (ja) * | 1990-10-26 | 1992-06-05 | Hitachi Ltd | 分光分析装置 |
| DE4111903A1 (de) | 1991-04-12 | 1992-10-15 | Bayer Ag | Spektroskopiekorrelierte licht-rastermikroskopie |
| JP3212647B2 (ja) * | 1991-10-24 | 2001-09-25 | シスメックス株式会社 | イメージングフローサイトメータ |
| JPH07270311A (ja) | 1994-03-29 | 1995-10-20 | Sony Corp | 赤外分光分析装置 |
| JPH10267845A (ja) * | 1997-03-26 | 1998-10-09 | Kawasaki Steel Corp | 試料表面のその場分析装置ならびに鋼板の酸化皮膜の形態制御装置 |
| US6002476A (en) * | 1998-04-22 | 1999-12-14 | Chemicon Inc. | Chemical imaging system |
| JP3741602B2 (ja) | 1999-11-26 | 2006-02-01 | 日本電子株式会社 | 顕微ラマン分光システム |
| EP1207387A1 (en) | 2000-11-20 | 2002-05-22 | Institut Curie | Multi-photon imaging installation. |
| WO2002097714A1 (en) * | 2001-04-09 | 2002-12-05 | Lifespan Biosciences, Inc. | Computer method for image pattern recognition in organic material |
| US7755757B2 (en) * | 2007-02-14 | 2010-07-13 | Chemimage Corporation | Distinguishing between renal oncocytoma and chromophobe renal cell carcinoma using raman molecular imaging |
| US7428045B2 (en) * | 2002-01-10 | 2008-09-23 | Chemimage Corporation | Raman spectral analysis of pathogens |
| DE10339784B4 (de) * | 2002-08-28 | 2021-09-16 | Carl Zeiss Meditec Ag | Mikroskopiesystem und Mikroskopieverfahren |
| US7046359B2 (en) * | 2004-06-30 | 2006-05-16 | Chemimage Corporation | System and method for dynamic chemical imaging |
| US9131861B2 (en) * | 2004-11-30 | 2015-09-15 | Academisch Medisch Centrum | Pulsed lighting imaging systems and methods |
| EP1865073B1 (en) * | 2005-03-30 | 2015-01-21 | Olympus Corporation | Predermined site luminescence measuring method, predetermined site luminenscence measuring apparatus, expression amount measuring method, and measuring apparatus |
| DE102006053540B3 (de) | 2006-11-14 | 2008-01-31 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Vorrichtung und Verfahren zur Analyse biologischer Proben |
| US20100309464A1 (en) * | 2007-03-26 | 2010-12-09 | Chemimage Corporation | Raman Chemical Imaging of Threat Agents Using Pulsed Laser Excitation and Time-Gated Detection |
| JP5841302B2 (ja) * | 2007-09-10 | 2016-01-13 | オリンパス株式会社 | 遺伝子発現解析方法および遺伝子発現解析システム |
| JP5336772B2 (ja) * | 2008-06-04 | 2013-11-06 | オリンパス株式会社 | 顕微鏡システム、及び、変倍方法 |
| EP2153773A1 (en) * | 2008-08-15 | 2010-02-17 | Technion Research and Development Foundation, Ltd. | Vessel imaging system and method |
| JP5154370B2 (ja) | 2008-11-11 | 2013-02-27 | 株式会社パロマ | 給湯器 |
| US8742351B2 (en) * | 2008-12-02 | 2014-06-03 | Shimadzu Corporation | Spectrophotometer |
| US20100251438A1 (en) * | 2009-03-25 | 2010-09-30 | The Royal College Of Surgeons In Ireland | Microscopy control system and method |
| JP5364535B2 (ja) | 2009-11-02 | 2013-12-11 | 本田技研工業株式会社 | ブレーキペダル支持構造 |
| US20110242533A1 (en) * | 2010-04-05 | 2011-10-06 | Chemimage Corporation | System and Method for Detecting Hazardous Agents Including Explosives |
| JP2011257691A (ja) | 2010-06-11 | 2011-12-22 | Olympus Corp | レーザ顕微鏡装置 |
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