CN104099023A - 一种海松酸型树脂酸产品及从香榧假种皮提取该产品的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种海松酸型树脂酸产品及从香榧假种皮提取该产品的方法。以香榧假种皮精油提取残渣为原料，用乙醇、甲苯、或己烷为溶剂，经过回流提取，分离除去溶剂后得到一种膏状提取物。将所得浸膏溶于水中，加入氢氧化钠或者氢氧化钾水溶液进行皂化反应，将树脂酸等酸类物质及其酯类物质转化成为可溶于水的树脂酸盐类物质，经过有机溶剂萃取将其与非酸性物质进行分离，得到的水溶液用盐酸、或者硫酸将树脂酸盐转化为游离的树脂酸并从溶液中析出，得到的游离树脂酸再经过柱层析分离和纯化后得到一种海松酸型树脂酸混合物产品，该产品的主要成分为海松酸型树脂酸，同时还含有少量次要成分枞酸型树脂酸。

Description

一种海松酸型树脂酸产品及从香榧假种皮提取该产品的方法

技术领域

本发明涉及植物提取物领域，特别是一种从香榧假种皮中提取得到的海松酸型树脂酸混合物产品以及从香榧假种皮中提取这种海松酸型树脂酸混合物产品工艺技术方法。 

背景技术

香榧为红豆杉科属植物，主产于中国，在我国栽培历史达到1300之久，浙江省诸暨、东阳一带是其主要种植区。目前浙江省的香榧产量大约在1000吨～1500吨。香榧营养丰富，富含脂肪、蛋白质及多种维生素，具有很高的药用价值，其种子作为名贵坚果干果有着上千年的食用历史。香榧果实外层包裹有一层肉质假种皮，约占其种子鲜重的50％～60％。与香榧果广受青睐不同，香榧假种皮部分长期被当作加工废弃物处理，并未得到应有的有效利用，不仅造成资源浪费，而且还污染了环境。 

香榧假种皮中富含多种被认为具有明显生物活性的物质，如挥发油类、倍半萜类、二萜类、木脂素类和黄酮类化合物等，而且后续研究也证明香榧提取物在抗氧化方面具有一定的功效(王焕弟，博士学位论文，上海交通大学，2008年；鲍建峰，浙江大学硕士论文，2010)。就香榧假种皮而言，目前最重要的用途是提取香榧精油，其工艺也相对比较成熟，常用的提取方法主要是水蒸气蒸馏法(冯涛，等.CN101550378A，2009-10-07公开)，以及超临界萃取法(王贝贝，等.南京林业大学学报(自然科学版)，2008,32(4):94-97)等。此外，以香榧假种皮或者香榧树、叶等为原料，从中提取功能性组分的研究也取得了一些成果。袁伟(CN1517342A，2004-08-04公开)发明了一种据说有抗癌和防衰老作用的香榧紫杉醇，实际上这仅仅只是一种从香榧树皮、针假种皮等磨成的粉末经有机溶剂提取获得的初级提取物浸膏，并且为其取名为香榧紫杉醇；何关福等(何关福等.植物学报，1985,27(3):300-303)利用甲醇提取与柱层析分离相结合的方法从香榧叶中分离得到一个二萜烯组分，并命名为香榧酯；周大铮等(周大铮，等.中草药，2002,33(10):877-879)以香榧假种皮为原料，首先用乙醇提取得浸膏，而后依次用石油醚、二氯甲烷、正丁醇各萃取5次，所得二氯甲烷部分再经中性氧化铝柱层析以及多次硅胶柱、Sephadex LH-20柱层析，最后得到5种二萜类组分，分别为香榧酯、18-氧弥罗松酚、1-羟基弥罗松酚、花柏酚、4-epiagathadia；易杨华等(易杨华，周大铮，吴久鸿，等.ZL01113390.2，CN1139381C，2004-02-25授权)提出了一种从香榧中提取具有抗艾滋病毒作用的香榧酯的方法，即先采用85％乙醇、石油醚、二氯甲烷等有机溶剂提取，再用柱层析分离(以4∶1的***-乙酸乙酯为洗脱剂)及甲醇重结晶的方法得到香榧酯。以上几种方法的共同特点就是原料经溶剂提取后，经多次柱层析分离或者重结晶最终得到产品，这些方法存在的一个突出问题就是由于经过多次重复分离，操作烦琐，物料损失大，提取率都非常低，从10kg～15kg香榧原料最终只能得到以毫克计的产品，因此成本很高，不适用于较大量生产和应用。 

有关海松酸型树脂酸生物活性及应用的研究结果(陈玉湘，赵振东，李兴迪，等.林产化学与工业，2008,28(4):118-122；陈玉湘，博士学位论文，中国林科院，2009年)表明，海松酸型树脂酸及其衍生物具有较好的抗菌、杀虫、抗炎、降胆固醇、抗癌、抗艾滋病等活性，在生物农药、医药和医药中间体等领域具有极大的开发潜力。如果能以香榧假种皮精油提取残渣为原料分离得到海松酸型树脂酸类混合物产品并进行有效利用，不仅可拓展海松酸型树脂酸的原料来源，还可以在一定程度上解决目前所面临的香榧假种皮资源没有得到有效利用且污染环境的问题，从长远来看，更可以扩大香榧资源的利用领域，提升香榧资源的附加利用价值。 

松香或者松脂中含有少量的海松酸型树脂酸，香榧假种皮也存在较多的海松酸型树脂酸，但是，二者所含海松酸型树脂酸的化学组分构成却具有很大不同，所含有的其他化学成分也不一样，提取 制备相关海松酸型树脂酸混合物产品方法也完全不一样。松香或松脂中主要含有枞酸型树脂酸，海松酸型树脂酸只是其中的少量成分，从中制备海松酸型树脂酸的方法首先需要考虑如何除去大量的枞酸型树脂酸，赵振东等发明了从松香或松脂中制备海松酸型树脂酸的方法(赵振东，陈玉湘，毕良武，等.ZL200910030374.7；Zhao Zhendong，Chen Yuxiang，Bi Liangwu，et al.WO2010105574(A1)、US8680232(B2)、特許(JP)5414882(B2)、EP10753141.0、KP2011-7021799、IN1554/MUMNP/2011、US2014148572(A1))，该方法主要利用枞酸型树脂酸与马来酸酐反应形成马来海松酸而海松酸型树脂酸则不会发生相关反应的特性，实现了海松酸型树脂酸与枞酸型树脂酸的相互分离，从而制备得到了松香源海松酸型树脂酸。然而，对于香榧假种皮而言，其化学物质组成与松香或松脂完全不一样，香榧假种皮虽然含有较多的海松酸型树脂酸类物质，但同时还含有木质素、单宁质、多糖、果胶等水不溶性或水溶性物质，还含有叶绿素、树脂酸酯类酯类、蜡质、其他中性物质等较多的油溶性物质，在提取制备油溶性浸膏时不可避免地会夹杂一些果胶、多糖等杂质成分，因此以香榧假种皮及其精油提取残渣为原料制备海松酸型树脂酸时，这些性质各不相同的杂质成分对于分离和提纯具有非常严重地干扰和阻碍作用，也就是说，排除这些复杂成分的干扰，从香榧假种皮有效提取香榧源海松酸型树脂酸是非常困难的。 

发明内容

本发明的目的是从目前利用价值很低的香榧假种皮精油提取残渣中分离提纯一种富含海松酸型树脂酸的树脂酸混合物产品。本发明提供了一种海松酸型树脂酸产品及从香榧假种皮提取该产品的方法，本发明对于提升我国香榧资源的利用价值具有明显的促进作用。 

本发明的技术方案为：一种海松酸型树脂酸产品，以香榧假种皮精油提取残渣为原料，用有机溶剂，经过回流提取，分离除去溶剂后得到褐色浸膏，将所得浸膏溶于水中，加入碱液进行皂化反应，将酸类物质及其酯类物质转化成为可溶于水的酸盐类物质，经过有机溶剂萃取与非酸性物质进行分离，得到的水溶液用稀酸将树脂酸盐转化为游离的树脂酸并从溶液中析出，得到的游离树脂酸再经过柱层析分离和纯化后得到一种海松酸型树脂酸混合物产品，该海松酸型树脂酸混合物产品的主要成分为海松酸型树脂酸，同时还含有少量次要成分枞酸型树脂酸；主要成分海松酸型树脂酸包括：8,15-海松酸、海松酸、山达海松酸、异海松酸；少量成分枞酸型及其他型树脂酸包括：枞酸、8,13(15)-枞二烯酸、7,13,15-枞三烯酸以及去氢枞酸、湿地松酸。 

所述海松酸型树脂酸混合物中海松酸型树脂酸，含量超过70％wt，树脂酸总含量大于90％wt。 

一种从香榧假种皮提取海松酸型树脂酸产品的方法，以香榧假种皮精油提取残渣为原料，用有机溶剂经过回流提取，分离除去溶剂后得到褐色浸膏，将所得浸膏溶于水中，加入碱液进行皂化反应，将酸类物质及其酯类物质转化成为可溶于水的酸盐类物质，经过有机溶剂萃取与非酸性物质进行分离，得到的水溶液用稀酸将树脂酸盐转化为游离的树脂酸并从溶液中析出，得到的游离树脂酸再经过柱层析分离和纯化后得到一种海松酸型树脂酸混合物产品。 

回流提取使用的有机溶剂包括乙醇、甲苯、己烷中的任一种，有机溶剂与原料的质量比为1～5∶1，提取温度为回流温度，提取次数为1～5次，提取时间为1～10h。 

所述柱层析分离，所用固定相为柱层析用硅胶，淋洗剂为苯与乙酸乙酯混合物，二者体积比为5∶1～20∶1，淋洗剂的流动速率为0.5mL/min～1.5mL/min。 

皂化过程所用碱液为KOH水溶液或NaOH水溶液，质量百分比浓度为5％～20％，使用量保证其中所含碱与皂化原料中树脂酸的摩尔比为1.3～2∶1，皂化温度为60℃～80℃，皂化时间为1～3h。 

萃取所用溶剂为***，萃取次数为1～3次；所用稀酸为HCl或硫酸水溶液，质量百分比浓度为5％～20％。 

皂化法分离制备海松酸型树脂酸原理 

(1)皂化反应使树脂酸、脂肪酸以及相应的酯类物质转化形成可水溶性盐类，对水溶液产生盐析作用，可降低诸如多糖类、叶绿素等具有一定水溶性或亲水性的物质在水中的溶解度，从而使得水溶液易于变得澄清透明而便于分离提纯，从而可以提高产品的品质； 

(2)通过皂化处理使提取物中的酸性成分转化成为水溶性的盐类物质，而源于香榧假种皮精油提取残渣中的中性物质、以及不能被皂化的物质如叶绿素等，油溶性中性物质可以通过有机溶剂萃取的方式加以去除，水溶性及油溶性都差的中性物质可以从体系中析出，从而实现酸性成分与非酸性成分的分离，所得酸性粗产物为黄色粉末状物质，其中主要含有树脂酸，其次还含有脂肪酸； 

(3)经过皂化处理所得的酸性粗产品经硅胶柱层析时，由于树脂酸和脂肪酸这两类组分极性相差较大，分离过程用时比较短，且由于树脂酸的极性小于脂肪酸，在进行柱色谱分离过程中极性小的物质能够率先被洗脱流出，从而使树脂酸与脂肪酸之间能得以较好的实现相互分离。 

有益效果 

1.本发明提供了一种从香榧假种皮中提取得到的二萜化合物海松酸型树脂酸混合物产品，以及该产品的提取方法，所得海松酸型树酸混合物产品中海松酸型树脂酸含量大于70％，总树脂酸含量大于90％； 

2.本发明依据原料新鲜程度的差异，可制备两种类型的海松酸型树脂酸混合物产品，分别是以海松酸为主成分的A型产品和以异海松酸为主成分的B型产品。 

3.本发明提供了一种新型的香榧源海松酸型树脂酸产品； 

4.本发明提供了一种新型的植物中可利有组分的提取方法及提取理念，采用皂化与柱层析相结合的工艺从香榧假种皮精油提取残渣中提取海松酸型树脂酸的工艺方法，本发明的工艺具有如下优点： 

(1)酸性成分与不皂化中性成分易于实现分离； 

(2)海松酸型树脂酸与脂肪酸成分易于实现分离； 

(3)柱层析时间比较短； 

(4)海松酸型树脂酸混合物产品为淡黄色结晶状物质，产品颜色比较浅，品质较高； 

(5)操作简便，提取成本低，提取率高。 

附图说明

图1为本发明实施例1所得树脂酸的典型气相色谱图(类型A，主成分为海松酸，是以新鲜香榧假种皮为原料经提取精油、溶剂提取、皂化、柱层析分离所得的产品)，图中气相色谱峰编号对应的化合物名称为：(1)8,15-海松酸，(2)海松酸，(3)山达海松酸，(4)异海松酸；(5)枞酸，(6)8,13(15)-枞二烯酸，(7)7,13,15-枞三烯酸，(8)去氢枞酸，(9)湿地松酸。 

图2为本发明所得实施例2海松酸型树脂酸混合物产品的典型气相色谱图(类型B，主成分为异海松酸，是以工业生产精油后的干燥残渣为原料经溶剂提取、皂化、柱层析分离所得的产品)。图中气相色谱峰编号对应的化合物名称为：(1)8,15-海松酸，(2)海松酸，(3)山达海松酸，(4)异海松酸；(5)枞酸，(6)8,13(15)-枞二烯酸，(7)7,13,15-枞三烯酸，(8)去氢枞酸，(9)湿地松酸。 

图3为本发明的工艺流程图。 

具体实施方式

本发明所得海松酸型树脂酸混合物产品中，除含量一般超过70％的主要成分海松酸型树脂酸以外，还含有少量的枞酸型树脂酸以及少量的去氢枞酸和湿地松酸，树脂酸总含量大于90％。主要成分为海松酸型树脂酸，主要包括：(1)8,15-海松酸、(2)海松酸、(3)山达海松酸、(4)异海松酸； 少量成分为枞酸型树脂酸及其他树脂酸，主要包括：(5)枞酸、(6)8,13(15)-枞二烯酸、(7)7,13,15-枞三烯酸以及(8)去氢枞酸、(9)湿地松酸等。 

本发明是以香榧假种皮精油提取后所得残渣为原料，加有机溶剂进行充分回流提取，固液分离后，液体部分去除溶剂，得到褐色浸膏；所得浸膏溶于水中，经碱水溶液皂化，皂化液用有机溶剂萃取，分出水相层，往水层中滴加酸水溶液，直至上层悬浮物不再增加，分出悬浮物层，去除溶剂，得黄绿色粉末；所得粉末经柱层析分离和纯化，得淡黄色结晶状产物，即为海松酸型树脂酸混合物产品。 

所用残渣可以是以新鲜香榧假种皮为原料经精油提取所得的未干燥残渣，也可以是工业上提取精油后经过干燥的残渣；所用有机溶剂包括乙醇、甲苯、己烷等常用溶剂，溶剂与原料质量比为1∶1～5∶1，提取温度为所用溶剂的回流温度，提取次数为1～5次，提取时间为1～10h；皂化过程所用碱-水溶液为KOH-水溶液或NaOH-水溶液，浓度为5％～20％，使用量应保证其中所含碱与皂化原料中树脂酸的摩尔比为1.3∶1～2∶1，皂化温度为60℃～80℃，皂化时间为1～3h；萃取所用有机溶剂为***，萃取次数为1～3次；所用酸-水溶液为HCl-水溶液，浓度为5％～20％；柱层析分离过程所用固定相为柱层析用硅胶，淋洗剂为苯与乙酸乙酯混合物，二者体积比为5∶1～20∶1，淋洗剂的流动速率为0.5mL/min～1.5mL/min；收取得到海松酸型树脂酸混合物产品。 

海松酸型树脂酸混合物产品的主要组成及其化学结构式 

所得海松酸型树脂酸混合物产品中，除含量一般超过70％的主要成分海松酸型树脂酸以外，还含有少量的枞酸型树脂酸以及少量的去氢枞酸和湿地松酸，树脂酸总含量大于90％。主要成分海松酸型树脂酸主要包括：8,15-海松酸(1)、海松酸(2)、山达海松酸(3)、异海松酸(4)；少量成分枞酸型树脂酸主要包括：枞酸(5)、8,13(15)-枞二烯酸(6)、7,13,15-枞三烯酸(7)以及去氢枞酸(8)、湿地松酸(9)。 

海松酸型树脂酸混合物产品中各主要海松酸型树脂酸成分的化学结构如下式所示： 

海松酸型树脂酸混合物产品中各主要少量组分枞酸型及其他型树脂酸的化学结构如下式所示： 

本发明制取海松酸型树脂酸混合物产品主要操作步骤为： 

第一步：称取一定量香榧假种皮精油提取残渣，置于烧瓶中，加入一定量溶剂，连接回流冷凝管，回流3h，抽滤分离固相和液相，所得固体再重复提取2次，将3次所得滤液合并，旋蒸除去溶剂即得到浸膏； 

第二步：称取一定量浸膏于烧杯中，加入蒸馏水，充分搅拌，此时浸膏无法充分溶解。将烧杯放热水浴中搅拌加热到60℃左右，滴加KOH水溶液，此时浸膏完全溶解，滴加完毕后，继续搅拌2h后停止。所得溶液转入分液漏斗中，加入适量***萃取3次，下层水溶液再次转入烧杯中，滴加HCl水溶液直至析出的漂浮物不再增加。分取漂浮物，加适量***溶解去除里面包裹的少量水，去除***，得固体物； 

第三步：称取一定量柱层析用硅胶(用量取决于所用层析柱体积)，加入适量淋洗剂浸泡过夜。将充分浸泡后的硅胶装入层析柱中，装好的柱子应均匀、无断层、无气泡。称取一定量第二步所得固体物(称取量以所填硅胶量决定，一般为硅胶质量的3％左右)，加少量淋洗剂溶解，加入层析柱顶部，加入过程应保证不影响硅胶面的水平。控制淋洗剂流动速率，分段收集流出液，回收溶剂，得树脂酸。 

实施例1 

称取约200g新鲜香榧假种皮，剪碎置于1000mL烧瓶中，加入约300mL～400mL蒸馏水及几粒沸石，连接好挥发油测定器及蒸馏水发生器，加热烧瓶，直至冷凝管壁上基本无油状物为止，关闭热源，冷却至室温，得到精油2.0mL；烧瓶内剩余物，采用先离心(4000r/min，5min)再抽滤的方法，将水溶液与固体物分离开，所得固体物即为精油提取残渣，重复上述过程直至得到足量的精油提取残渣。 

称取上述精油提取残渣350g，粉碎后加入2000mL烧瓶中，加入约1000mL无水乙醇，连接回流冷凝管，回流3小时，通过抽滤将固液分离，所得固体再重复提取两次，共用乙醇约3000mL；将三次所得滤液合并后置于茄形瓶中，旋转蒸发除去溶剂，得褐色浸膏87.4g，GC分析结果显示，浸膏中所含组分达160多种，其中树脂酸的总含量大于55％，但是后期试验证明，浸膏中含有较大量的叶绿素及多糖类物质，含量可能大于浸膏质量的1/3，而这两类物质在GC分析过程中不能出峰，所以实际的树脂酸含量要小于分析值，估计约为35％左右。 

称取所得浸膏44.0g，置于烧杯中，加入60mL水，充分搅拌，此时浸膏无法全部溶解，将烧杯放热水浴中搅拌加热到60℃～70℃，滴加50mL质量分数为15％的KOH水溶液，此时浸膏完全溶解，滴加完毕后，继续搅拌2h后停止，所得溶液转入分液漏斗中，加入150mL***萃取3次，下层水溶液再次转入烧杯中，滴加质量分数为20％HCl-水溶液直至上层悬浮物不再增加。分出上层悬浮物，加适量***溶解去除里面包裹的少量水，***挥发后得黄色粉末状物质29.6g，GC分析结果显示，所含组分约为90种，其中树脂酸的总含量大于75％，从产品的颜色及粘度与浸膏对比可知，其中所含的叶绿素及多糖类物质大部分已被去除。 

称取75g柱层析用硅胶，加入200mL淋洗剂(苯∶乙酸乙酯＝8∶1)浸泡湿润。将充分浸泡后的硅胶装入层析柱(50cm×2.5cm)中，称取上述粉末状物质3.53g，用少量淋洗剂溶解，加入层析柱顶部，滴入淋洗剂，控制其流出速度约为1mL/min，收集流出液体，回收溶剂后得淡黄色结晶状固体海松酸型树脂酸混合物产品1.33g，总提取率为6.3％(总提取率以海松酸型树脂酸混合物产品质量与精油提取残渣质量的比值百分数计算，下同)。 

海松酸型树脂酸混合物产品的GC分析结果表明：海松酸型树脂酸含量71.44％，总树脂酸含量为97.92％。该海松酸型树脂酸混合物产品的主要组成为：(1)8,15-海松酸0.29％、(2)海松酸43.65％、(3)山达海松酸5.12％、(4)异海松酸22.38％、(5)枞酸7.95％、(6)8,13(15)-枞二烯酸12.06％、(7)7,13,15-枞三烯酸4.51％、(8)去氢枞酸1.38％、(9)湿地松酸0.58％。 

实施例2 

称取工业提取精油后经干燥的残渣(由浙江省诸暨市丰日香料科技有限公司提供)350g，加入无水乙醇1000mL，进行3次提取，共用乙醇3000mL，得褐色浸膏96.1g，GC分析结果显示，浸膏中所含组分达200种之多，其中树脂酸的总含量约为50％，除去在GC分析过程中不出峰的叶绿素及多糖类物质，估计实际树脂酸含量约为30％左右。称取所得浸膏45.2g，置于烧杯中，加入60mL水，置于热水浴中搅拌加热到60℃～70℃，滴加100mL质量分数为10％的KOH水溶液进行皂化2h，加入150mL***萃取3次，滴加质量分数为10％的HCl水溶液进行酸化，收集得到黄绿色固体产物23.6g，GC分析结果显示，所含组分约为70种，其中树脂酸的总含量大于65％，从产品的颜色及粘度与浸膏对比可知，其中所含的叶绿素及多糖类物质大部分已被去除。称取此固体物3.20g，经柱层析分离得海松酸型树脂酸混合物产品1.51g，总提取率为6.8％。其余没有表述的操作过程与实施例1相同。海松酸型树脂酸混合物产品的GC分析结果表明：海松酸型树脂酸含量为87.29％，树脂酸总含量为96.04％。 

该海松酸型树脂酸混合物产品的主要组成为：(1)8,15-海松酸2.19％、(2)海松酸18.09％、(3)山达海松酸12.25％、(4)异海松酸54.76％、(5)枞酸1.64％、(6)8,13(15)-枞二烯酸0.44％、(7)7,13,15-枞三烯酸1.18％、(8)去氢枞酸4.77％、(9)湿地松酸0.72％。 

实施例3 

称取实施例2所得浸膏38.0g置于烧杯中，加入60mL水，置于热水浴中搅拌加热到60℃～70℃，滴加40mL质量分数为15％的KOH水溶液进行皂化，加入150mL***萃取3次，并滴加质量分数为20％的HCl水溶液进行酸化，收集析出的固体物质得黄绿色固体产物17.2g。称取此固体产物3.53g，采用苯∶乙酸乙酯＝10∶1的淋洗剂进行硅胶柱层析分离，得海松酸型树脂酸混合物产品0.85g，总提取率为3.2％。其余没有表述的操作过程与实施例1相同。海松酸型树脂酸混合物产品的GC分析结果表明：海松酸型树脂酸含量为89.45％，总树脂酸含量为98.15％。 

该海松酸型树脂酸混合物产品的主要组成为：(1)8,15-海松酸2.78％、(2)海松酸27.36％、(3)山达海松酸9.53％、(4)异海松酸49.78％、(5)枞酸3.00％、(6)8,13(15)-枞二烯酸0.21％、(7)7,13,15-枞三烯酸2.39％、(8)去氢枞酸3.10％。 

对比例1 

称取实施例1所得浸膏3.48g，用少量淋洗剂溶解，直接采用与实施例1相同的工艺进行柱层析分离，柱层析的操作过程与工艺参数与实施例1相同，得褐色块状固体产物1.15g，总提取率为8.0％。该产品的GC分析结果表明：海松酸型树脂酸含量为66.27％，总树脂酸总含量为91.87％。该产物主要组成为：(1)8,15-海松酸0.24％、(2)海松酸40.0％、(3)山达海松酸4.11％、(4)异海松酸21.92％、(5)枞酸9.87％、(6)8,13(15)-枞二烯酸9.42％、(7)7,13,15-枞三烯酸5.25％、(8)去氢枞酸1.03％、(9)湿地松酸0.03％。 

对比例2 

称取实施例2所得浸膏3.30g，用少量淋洗剂溶解，直接采用与实施例1相同的工艺及条件进行柱层析分离，得黄绿色块状固体产物1.01g，总提取率为8.4％。该产物的GC分析结果表明：海松酸型树脂酸含量为68.31％，树脂酸总含量为87.11％。该产物主要组成为：(1)8,15-海松酸1.77％、(2)海松酸10.03％、(3)山达海松酸11.35％、(4)异海松酸45.16％、(5)枞酸3.71％、(6)8,13(15)-枞二烯酸8.32％、(7)7,13,15-枞三烯酸1.06％、(8)去氢枞酸5.10％、(9)湿地松酸0.61％。 

实施例与对比例结果汇总见表1。 

表1提取浸膏是否经过皂化分离的结果对比 

通过上述实施例和对比实施例的结果对比，根据表1所示的提取浸膏经过皂化反应后进行硅胶柱层析分离的结果与未经皂化反应直接进行硅胶柱层析的结果可以看出：1)皂化过程虽然对于树脂酸的总提取率造成一定的不利影响，但是对于提高海松酸型树脂酸以及总树脂酸的纯度具有明显的促进作用；2)皂化过程对树脂酸产品的外观具有明显的有益作用，皂化过程及其后处理使得原料浸膏中的叶绿素及多糖等成分基本被去除，有利于柱层析分离得到含量高且颜色浅的海松酸型树脂酸产品；3)由新鲜香榧假种皮为原料先提取精油，再经溶剂提取、皂化、柱层析所得海松酸型树脂酸混合物产品，与以企业提取精油后干燥的工业残渣为原料经溶剂提取、皂化、柱层析所得海松酸型树脂酸混合物产品相比，新鲜原料所得产品中的海松酸型树脂酸含量稍低一些，且含量最高的组分为海松酸，而工业生产精油残渣所得产品含量最高的组分为异海松酸；4)柱层析过程中使用极性较低一些的淋洗剂有利于树脂酸产品纯度的提高，但是相应提取率会有所降低。 

Claims (7)

1.一种海松酸型树脂酸产品，其特征在于，以香榧假种皮精油提取残渣为原料，用有机溶剂，经过回流提取，分离除去溶剂后得到褐色浸膏，将所得浸膏溶于水中，加入碱液进行皂化反应，将酸类物质及其酯类物质转化成为可溶于水的酸盐类物质，经过有机溶剂萃取与非酸性物质进行分离，得到的水溶液用稀酸将树脂酸盐转化为游离的树脂酸并从溶液中析出，得到的游离树脂酸再经过柱层析分离和纯化后得到一种海松酸型树脂酸混合物产品，该海松酸型树脂酸混合物产品的主要成分为海松酸型树脂酸，同时还含有少量次要成分枞酸型树脂酸；主要成分海松酸型树脂酸包括：8,15-海松酸、海松酸、山达海松酸、异海松酸；少量成分枞酸型及其他型树脂酸包括：枞酸、8,13(15)-枞二烯酸、7,13,15-枞三烯酸以及去氢枞酸、湿地松酸。

2.如权利要求1所述的海松酸型树脂酸产品，其特征在于，所述海松酸型树脂酸混合物中海松酸型树脂酸，含量超过70％wt，树脂酸总含量大于90％wt。

3.一种从香榧假种皮提取权利要求1所述的海松酸型树脂酸产品的方法，其特征在于，以香榧假种皮精油提取残渣为原料，用有机溶剂经过回流提取，分离除去溶剂后得到褐色浸膏，将所得浸膏溶于水中，加入碱液进行皂化反应，将酸类物质及其酯类物质转化成为可溶于水的酸盐类物质，经过有机溶剂萃取与非酸性物质进行分离，得到的水溶液用稀酸将树脂酸盐转化为游离的树脂酸并从溶液中析出，得到的游离树脂酸再经过柱层析分离和纯化后得到一种海松酸型树脂酸混合物产品。

4.如权利要求3所述的从香榧假种皮提取权利要求1所述的海松酸型树脂酸产品的方法，其特征在于，回流提取使用的有机溶剂包括乙醇、甲苯、己烷中的任一种，有机溶剂与原料的质量比为1～5∶1，提取温度为回流温度，提取次数为1～5次，提取时间为1～10h。

5.如权利要求3所述的从香榧假种皮提取权利要求1所述的海松酸型树脂酸产品的方法，其特征在于，所述柱层析分离，所用固定相为柱层析用硅胶，淋洗剂为苯与乙酸乙酯混合物，二者体积比为5∶1～20∶1，淋洗剂的流动速率为0.5mL/min～1.5mL/min。

6.如权利要求3所述的从香榧假种皮提取权利要求1所述的海松酸型树脂酸产品的方法，其特征在于，皂化过程所用碱液为KOH水溶液或NaOH水溶液，质量百分比浓度为5％～20％，使用量保证其中所含碱与皂化原料中树脂酸的摩尔比为1.3～2∶1，皂化温度为60℃～80℃，皂化时间为1～3h。

7.如权利要求3所述的从香榧假种皮提取权利要求1所述的海松酸型树脂酸产品的方法，其特征在于，萃取所用溶剂为***，萃取次数为1～3次；所用稀酸为HCl或硫酸水溶液，质量百分比浓度为5％～20％。