CN104055882B - 复方斯亚旦生发剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生发剂技术领域，是一种复方斯亚旦生发剂及其制备方法；该复方斯亚旦生发剂，原料按重量份数包括黑种草子1份、桃仁0.5份和石榴子0.1份。本发明复方斯亚旦生发剂在正常模型和病理模型下均表现了优于现有复方斯亚旦生发油的生发效果，与市售药品米诺地尔或非那雄胺的生发效果相当，说明本发明复方斯亚旦生发剂的生发效果显著；安全性试验表明，本发明复方斯亚旦生发剂未表现出皮肤刺激性和过敏性，说明本发明复方斯亚旦生发剂具有较高的安全性；同时药渣能够回收利用，提高了资源利用率。

Description

复方斯亚旦生发剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及生发剂技术领域，是一种复方斯亚旦生发剂及其制备方法。

背景技术

脱发是指头发病理性脱落而致头发稀疏或形成脱发斑块，严重的可致毛发全部脱落，发病原因不清楚。维吾尔医学认为，脱发是指头发脱落、发生减少和头皮部突然发生斑状秃发为主要特征的病证，可分为全脱和斑脱两种，病因多由在各种体内外不良因素影响下，体液失衡，气质失调，被烧焦黏液质和黑胆质或烈性胆液质和过浓腐败血液质凝结于皮肤或毛根，导致其局部营养力（吸收力、摄住力和成形力）的减弱，影响毛发生长所致。

脱发是皮肤科的常见病、多发病。在西方，30岁男性发病率约为30%、40岁时为40%、50岁时为50%，而70岁的白人至少80%患有脱发。在中国，脱发患病率约30.29%，其中25岁至55岁男性中25%有雄激素源性脱发。随着社会压力的增加，脱发向低龄化发展，且患病人群逐年上升。脱发虽然不会危及人的生命，但却明显影响美观，给患者带来很大的精神压力和心理负担，尤其对于生长期的儿童。

近30年来，美国药监局仅批准米诺地尔和非那雄胺两种治疗脱发药物。自批准后一直为一线药物，对大多数患者有较好生发效果。两种药物在长期的应用中，逐渐暴露了一些不足的地方，如对少部分患者无效、起效缓慢、停药后易复发等。更让患者困扰的是两种药物的副作用，米诺地尔有高发的皮肤过敏现象，严重的会造成心跳加快，血压升高等副作用，也有报道与使用的因果关系尚不明确的非特异性过敏反应如风团、过敏性鼻炎、面部肿胀、过敏气短、头痛、神经炎等不良反应。非那雄胺治疗雄激素性脱发仅适用于男性患者，长期服用常见性功能障碍（阳痿、***减退、***障碍）、***不适（乳腺增大、乳腺疼痛）和皮疹，尚有其它不良反应包括：瘙痒感、风疹及面唇部肿胀等过敏反应和睾丸疼痛。部分患者在药物治疗效果不满意情况下，采用费用昂贵的毛囊移植手术，但是毛囊移植对于本身头发稀少的患者，手术难以实施，易于出现感染、表皮囊肿等并发症，而且外观往往不自然。

维吾尔药物具有2000多年的历史，具有独特医药理论体系，在治疗皮肤病等疑难杂症方面独具特色，越来越受到人们的青睐。维药复方斯亚旦生发油为维吾尔族习用治疗脱发药物，具有长期的应用历史并收载于《中华人民共和国***药品标准（维吾尔药分册）》国家药品标准。复方斯亚旦生发油由黑种草子、桃仁、石榴子三味药材按照1:0.5:0.1组方，经压榨取油制成。外涂于患病部位，治疗秃发，斑秃，头皮瘙痒等疾病。多年的临床应用表明，该产品具有一定的疗效，在新疆地区具有很高的知名度。

复方斯亚旦生发油作为民族药物具有长期的临床应用历史、疗效独特等很多优点，但是也存在产品基础研究非常薄弱的问题，在产品生产和应用中暴露了一些不足之处。①药效方面：现有复方斯亚旦生发油具有一定的疗效，但尚不能与米诺地尔和非那雄胺媲美，若能进一步提高药效作用将能更好的发挥其价值。②资源利用方面：现有复方斯亚旦生发油制备方法为将黑种草子、桃仁和石榴子三味药材压榨取油制成，药材经压榨取油后药渣即作为废物弃去；作为资源非常有限的中药材这是一种较低效率的资源利用方式，重要的是，压榨取油后药渣中存在大量的治疗疾病的活性成分，若作为废物弃去是不合理的，因此，增加现有复方斯亚旦生发油的药效作用和提高资源利用率成为亟需解决的难题。

发明内容

本发明提供了一种复方斯亚旦生发剂及其制备方法，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有脱发药物药效差和药渣不能有效利用的问题。

本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种复方斯亚旦生发剂，原料按重量份数包括黑种草子1份、桃仁0.5份和石榴子0.1份。

下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：

上述复方斯亚旦生发剂按下述方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子进行压榨，压榨后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的溶剂进行提取，溶剂为水或体积百分比为10%至70%的乙醇水溶液，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入吐温80或聚氧乙烯40 氢化蓖麻油混匀后得到复方斯亚旦生发剂，吐温80或聚氧乙烯40 氢化蓖麻油在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

上述复方斯亚旦生发剂按下述方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用体积百分比为95%至99%的乙醇水溶液进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至2小时，提取后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行提取，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入蓖麻油聚烃氧酯35混匀后得到复方斯亚旦生发剂，蓖麻油聚烃氧酯35在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

上述复方斯亚旦生发剂按下述方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用粉碎机粉碎后得到粉末；第二步，按原料重量份数计在粉末中加入10份至30份的正己烷进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至1.5小时，提取后得到正己烷提取液和药渣，正己烷提取液经减压浓缩挥发正己烷后得到脂溶性部分；第三步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的水，煮沸进行提取，提取两次，每次提取0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第四步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第五步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯混匀后得到复方斯亚旦生发剂，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

上述复方斯亚旦生发剂按下述方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用粉碎机粉碎后得到粉末；第二步，粉末用CO₂超临界萃取仪进行萃取，萃取压力为10MPa至70 MPa、萃取温度为20℃至60℃、萃取时间为1小时至3小时，萃取后得到脂溶性部分和药渣；第三步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的水，煮沸进行提取，提取两次，每次提取0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第四步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第五步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯混匀得到复方斯亚旦生发剂，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

上述减压浓缩的压力为-0.04MPa至-0.09MPa，减压浓缩的温度为50℃至95℃。

本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种复方斯亚旦生发剂的制备方法，按下述步骤进行：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子进行压榨，压榨后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的溶剂进行提取，溶剂为水或体积百分比为10%至70%的乙醇水溶液，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入吐温80或聚氧乙烯40 氢化蓖麻油混匀后得到复方斯亚旦生发剂，吐温80或聚氧乙烯40 氢化蓖麻油在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种复方斯亚旦生发剂的制备方法，按下述步骤进行：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用体积百分比为95%至99%的乙醇水溶液进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至2小时，提取后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行提取，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入蓖麻油聚烃氧酯35混匀后得到复方斯亚旦生发剂，蓖麻油聚烃氧酯35在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种复方斯亚旦生发剂的制备方法，按下述步骤进行：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用粉碎机粉碎后得到粉末；第二步，按原料重量份数计在粉末中加入10份至30份的正己烷进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至1.5小时，提取后得到正己烷提取液和药渣，正己烷提取液经减压浓缩挥发正己烷后得到脂溶性部分；第三步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的水，煮沸进行提取，提取两次，每次提取0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第四步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第五步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯混匀后得到复方斯亚旦生发剂，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

本发明的技术方案之五是通过以下措施来实现的：一种复方斯亚旦生发剂的制备方法，按下述步骤进行：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用粉碎机粉碎后得到粉末；第二步，粉末用CO₂超临界萃取仪进行萃取，萃取压力为10 MPa至70 MPa、萃取温度为20℃至60℃、萃取时间为1小时至3小时，萃取后得到脂溶性部分和药渣；第三步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的水，煮沸进行提取，提取两次，每次提取0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第四步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第五步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯混匀得到复方斯亚旦生发剂，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

本发明复方斯亚旦生发剂在正常模型和病理模型下均表现了优于现有复方斯亚旦生发油的生发效果，与市售药品米诺地尔或非那雄胺的生发效果相当，说明本发明复方斯亚旦生发剂的生发效果显著；安全性试验表明，本发明复方斯亚旦生发剂未表现出皮肤刺激性和过敏性，说明本发明复方斯亚旦生发剂具有较高的安全性；同时药渣能够回收利用，提高了资源利用率。

具体实施方式

本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。

实施例1，该复方斯亚旦生发剂，原料按重量份数包括黑种草子1份、桃仁0.5份和石榴子0.1份。

实施例2，该复方斯亚旦生发剂按下述制备方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子进行压榨，压榨后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的溶剂进行提取，溶剂为水或体积百分比为10%至70%的乙醇水溶液，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入吐温80或聚氧乙烯40 氢化蓖麻油混匀后得到复方斯亚旦生发剂，吐温80或聚氧乙烯40 氢化蓖麻油在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

实施例3，该复方斯亚旦生发剂按下述制备方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用体积百分比为95%至99%的乙醇水溶液进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至2小时，提取后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行提取，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入蓖麻油聚烃氧酯35混匀后得到复方斯亚旦生发剂，蓖麻油聚烃氧酯35在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

实施例4，该复方斯亚旦生发剂按下述制备方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用粉碎机粉碎后得到粉末；第二步，按原料重量份数计在粉末中加入10份至30份的正己烷进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至1.5小时，提取后得到正己烷提取液和药渣，正己烷提取液经减压浓缩挥发正己烷后得到脂溶性部分；第三步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的水，煮沸进行提取，提取两次，每次提取0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第四步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第五步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯混匀后得到复方斯亚旦生发剂，辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。粉末的粒径为10目至40目。

实施例5，该复方斯亚旦生发剂按下述制备方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用粉碎机粉碎后得到粉末；第二步，粉末用CO₂超临界萃取仪进行萃取，萃取压力为10 MPa至70 MPa、萃取温度为20℃至60℃、萃取时间为1小时至3小时，萃取后得到脂溶性部分和药渣；第三步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的水，煮沸进行提取，提取两次，每次提取0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第四步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第五步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯混匀得到复方斯亚旦生发剂，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。粉末的粒径为10目至40目。

实施例6，作为上述实施例的优化，实施例6中减压浓缩的压力为-0.04MPa至-0.09MPa，减压浓缩的温度为50℃至95℃。

本发明上述实施例得到的复方斯亚旦生发剂与现有复方斯亚旦生发油进行安全性和有效性对比

1、药效学试验

1.1 本发明复方斯亚旦生发剂对脱毛C57BL/6小鼠的作用

雄性C57BL/6小鼠（上海杰思捷实验动物有限公司，许可证号码SCXK（沪）2012-0006），6周龄，毛发处于休止期（皮肤呈粉红色），适应饲养一周。背部用松香石蜡（1: 1）脱毛，随机分为7组，每组10只；空白组，不给于任何受试物；辅料组，给予70%乙醇，每次用量为0.1mL/只；复方斯亚旦生发油组，给予现有产品复方斯亚旦生发油（批号为0131101，新疆维吾尔药业有限责任公司），每次给药量为0.1mL/只；本发明复方斯亚旦生发剂（低剂量）组、本发明复方斯亚旦生发剂（中剂量）组和本发明复方斯亚旦生发剂（高剂量）组，分别每次给药量为0.05mL/只、0.1mL/只和 0.2mL/只；现有米诺地尔酊剂组，给予市售米诺地尔酊剂（规格为5%，批号为131101，浙江万马药业有限公司），每次给药量为0.1mL/只。

各组小鼠每日早晚给药一次，取适量均匀涂抹于脱毛区域，连续用药至皮肤进入休止期（观察终点）。记录每只小鼠由静止期进入生长期的转变时间和观察终点时间，于观察终点时间，小鼠断颈处死，取背部相同部位面积为2.5cm×2.5cm的新生毛发，称重。统计分析各受试物小鼠转变时间、观察终点时间和毛重差异，结果见表1。

转变时间为静止期转变为生长期的时间，时间越短表明诱导作用越强，促进毛发向生长期的转变能力越强。由表1可知，本发明复方斯亚旦生发剂与现有复方斯亚旦生发油组比较，转变时间显著缩短（P＜0.05），与米诺地尔酊剂组效果基本一致（P＞0.05）。

观察终点时间与毛发生长期的时间密切相关，时间愈长毛发生长时间越长，促进生长作用越强；表1表明，除现有复方斯亚旦生发油组外其余组与辅料组和空白组比较，观察终点时间均显著长于辅料组（P＜0.05）；本发明复方斯亚旦生发剂（低剂量）组、本发明复方斯亚旦生发剂（中剂量）组和本发明复方斯亚旦生发剂（高剂量）组时间有增加趋势，但无显著性差异（P＜0.05）；各剂量组与现有米诺地尔酊剂组效果基本一致（P＞0.05），高剂量组时间明显长于现有复方斯亚旦生发油组（P＜0.05）；其中本发明复方斯亚旦生发剂（高剂量）组时间长于现有米诺地尔酊剂组（P＜0.05）。

毛重指标衡量毛发生长质量情况，表1表明，试验中空白组和辅料组无显著区别，除现有复方斯亚旦生发油组外其余组与辅料组比较，观察毛重均显著高于辅料组/空白组（P＜0.05）；本发明复方斯亚旦生发剂各剂量组均高于现有复方斯亚旦生发油组毛发重量，与米诺地尔酊剂组效果无区别（P＞0.05）；本发明复方斯亚旦生发剂各剂量组毛重呈增加趋势，但无统计学差异（P＞0.05）。

1.2 本发明复方斯亚旦生发剂对雄激素脱发模型小鼠的作用

6周龄雄性C57BL/6小鼠（上海杰思捷实验动物有限公司，许可证号码SCXK（沪）2012-0006），18 g 至22g，随机分为6组，每组10只；氯化钠溶液组，给于0.9％氯化钠溶液（批号为20111202，江苏亚邦药业集团有限公司），每次给用量为0.1mL/只；现有复方斯亚旦生发油组，给予市售产品复方斯亚旦生发油（批号为0131101，新疆维吾尔药业有限责任公司），每次给药量为0.1mL/只；本发明复方斯亚旦生发剂（低剂量）组、本发明复方斯亚旦生发剂（中剂量）组和本发明复方斯亚旦生发剂（高剂量）组，每次给药量分别为0.05mL/只、0.1mL/只和 0.2mL/只；非那雄胺组，给予非那雄胺片水混悬液（批号为314322，杭州默沙东制药有限公司）。

各组小鼠每次肌注0.1mL丙酸睾酮注射液（上海通用药业股份有限公司产品，批号100602，规格1 mL:25mg），每日1次，造雄激素性脱发模型；非那雄胺片组，按照0.17mg/kg非那雄胺剂量灌胃给予非那雄胺混悬液，每日1次；其余组取各样品均匀涂抹于小鼠背部，每日早晚给药一次，连续给药12周；于观察终点时间，小鼠断颈处死，剪取用药部位面积为2.5cm×2.5cm的皮肤毛发，称重毛发重量。小鼠去毛皮肤用剪刀剪碎，加入PBS用组织匀浆机高速匀浆，匀浆液于3000rpm离心20min，收集上清液，按试剂盒说明书测定二氢睾酮（DHT）含量，各组小鼠于观察终点时间毛重测定结果见表2。

由表2可知，小鼠给予现有复方斯亚旦生发油及本发明复方斯亚旦生发剂后皮肤内DHT含量显著下降，毛发重量高，有较好的防脱作用（P＜0.05）；本发明复方斯亚旦生发剂各剂量组降低皮肤DHT及增加毛重效果均优于现有复方斯亚旦生发油组（P＜0.05）；本发明复方斯亚旦生发剂组随剂量增加毛重呈显著增强（P＜0.05），皮肤内DHT含量随剂量增加而降低；本发明复方斯亚旦生发剂中高剂量组与阳性药非那雄胺组作用接近（P＞0.05）。

1.3 本发明复方斯亚旦生发剂对环磷酰胺脱发模型小鼠的作用

雄性C57BL/6小鼠（上海杰思捷实验动物有限公司，许可证号码SCXK（沪）2012-0006），6周龄至8周龄，毛发处于休止期（皮肤呈粉红色），适应饲养一周。用松香石蜡（1: 1）脱毛，随机分为6组，每组10只；辅料组，给予70%乙醇，每次用量为0.1mL/只；现有复方斯亚旦生发油组，给予市售产品复方斯亚旦生发油（批号为0131101，新疆维吾尔药业有限责任公司），每次给药量为0.1mL/只；本发明复方斯亚旦生发剂（低剂量）组、本发明复方斯亚旦生发剂（中剂量）组和本发明复方斯亚旦生发剂（高剂量）组，每次给药量分别为0.05mL/只、0.1mL/只和 0.2mL/只；环孢素组，给予0.5%环孢素0.15mL/只（台山市化学制药有限公司，10%溶液）。

小鼠拔毛后拔毛区毛囊由静止期向生长期转变，当脱毛区域毛发接近生长IV期前两日，取适量各受试物均匀涂抹于脱毛区域，每日早晚给药一次，连续用药至皮肤进入休止期（观察终点）。各组小鼠于生长IV期时一次性按150mg/kg剂量腹腔注射环磷酰胺（江苏恒瑞医药股份有限公司，批号为20100218，0.2g/瓶）。于观察终点时，断颈处死小鼠，取背部相同部位面积为2.5cm×2.5cm的新生毛发，称重，结果见表3。

小鼠毛囊处于生长期时给予环磷酰胺会阻止毛发的生长，毛重会显著下降。由表3可以看出，小鼠给予本发明复方斯亚旦生发剂、现有复方斯亚旦生发油及环孢素均能提高新生毛发量，有较好的防脱作用（P＜0.05）；本发明复方斯亚旦生发剂组随剂量增加毛重增加，中剂量组和高剂量组效果优于现有复方斯亚旦生发油组，与环孢素效果相当（P＜0.05）。

为全面评价本发明复方斯亚旦生发剂药效作用采用3种模型进行了研究：采用正常C57BL/6小鼠用松香石蜡脱毛，诱导其毛发进入新的生长循环周期，考察本发明复方斯亚旦生发剂对其生长的作用。试验结果表明本发明复方斯亚旦生发剂能够缩短由静止期向生长期的转变，延长生长期时间从而有效增加了新生毛发重量；为考察病理模型下的作用，建立了雄激素脱毛模型和环磷酰胺脱毛模型，本发明复方斯亚旦生发剂表现了在两种病理模型下的抑制脱毛和促进毛发生长作用；本发明复方斯亚旦生发剂总体呈剂量依赖性，随剂量的增加药效作用增强，效果优于现有复方斯亚旦生发油。

2、旦生发剂安全性评价

本发明复方斯亚旦生发剂参照国家药品安全性评价研究规定，采用家兔考察对皮肤的刺激性，利用豚鼠考察其对皮肤的过敏反应。

2.1 试药

复方斯亚旦生发油，(批号为0131101，新疆维吾尔药业有限责任公司)；

本发明复方斯亚旦生发剂；

0.9％氯化钠溶液，批号为20111202，江苏亚邦药业集团有限公司；

2，4-二硝基氯苯(DNCB)，天津市光复精细化工研究所，批号为20091223；

2.2动物与分组

雄性新西兰白兔（南京市青龙山动物繁殖场提供，动物许可证号为SCXK(苏)2012-0008），体重2.0 kg 至3.0kg，随机分为0.9%氯化钠溶液组、本发明复方斯亚旦生发剂组、现有复方斯亚旦生发油组，每组5只；于实验前24h，选取脊柱中部两侧对称部位，用理发剪小心去毛，每侧为10cm×10cm，脱毛部位应无红斑、水肿及破损。

豚鼠(南京市青龙山动物繁殖场提供，动物许可证号为SCXK(苏)2012-0008)，体重250g至300g，随机分为0.9%氯化钠溶液组、本发明复方斯亚旦生发剂组、现有复方斯亚旦生发油组和2,4-二硝基氯苯阳性对照组，每组6只；于实验前24h，选取脊柱中部两侧对称部位，用理发剪小心去毛，每侧为3cm×3cm，脱毛部位应无红斑、水肿及破损。

2.3方法与结果

2.3.1单次给药皮肤刺激性试验

采用同体左右侧自身对比法，每只家兔背部左侧去毛区涂本发明复方斯亚旦生发剂0.5mL，右侧去毛区涂0.9%氯化钠溶液0.5mL作为对照，给药后用消毒纱布覆盖，胶带固定；4小时后，用温水清洗去除残留涂抹物，于去除药物后1小时、24小时、48小时和72小时分别观察局部反应，结果表明，各组动物的受试部位均无红斑、水肿等刺激症状，实验中各动物的一般状态、行为、体征正常，说明本发明复方斯亚旦生发剂对皮肤无刺激性。

多次给药皮肤刺激性试验

采用同体左右侧自身对比法，每组家兔背部左侧去毛区涂各组对应受试药物0.5mL，右侧去毛区涂0.9%氯化钠溶液0.5 mL作为对照，给药后用消毒纱布覆盖，胶带固定；每天2次，早晚各1次，每次给药时间相同，连续涂抹4周；于第7天、第14天和第21天的每次去除药物后1小时、每次给药前，以及末次用药去除药物后1小时、24小时、48小时和72小时，观察可知，0.9%氯化钠溶液组、本发明复方斯亚旦生发剂组和现有复方斯亚旦生发油组未见红斑、水肿等刺激症状。实验中各动物的一般状态、行为、体征无异常；说明本发明复方斯亚旦生发剂对皮肤多次给药无刺激性。

皮肤过敏性试验

致敏接触：分别于第0天、第7天和14天在各组豚鼠左侧脱毛区均匀涂抹0.9%氯化钠溶液、各组对应受试药物和1%的2,4-二硝基氯苯0.5 mL/只，给药后用消毒纱布覆盖，胶带固定，每次接触6 h；激发接触：于末次给药后14 d，在豚鼠背部右侧脱毛区均匀涂抹0.9%氯化钠溶液、本发明复方斯亚旦生发剂和0.1%的2,4-二硝基氯苯0.5mL/只，进行激发，6 h后去除受试物，即刻观察，并于24h、48h、72h再次观察皮肤过敏反应情况；结果表明，0.9%氯化钠溶液组、本发明复方斯亚旦生发剂组和现有复方斯亚旦生发油组对豚鼠皮肤未见有水肿、红斑等皮肤***反应，也未见豚鼠哮喘、站立不稳或休克等全身***反应现象发生，即无致敏作用；阳性对照2,4-二硝基氯组豚鼠皮肤出现中度红斑或水肿现象，致敏率为100%。

本发明复方斯亚旦生发剂未表现出皮肤刺激性和过敏性，从产品处方分析，处方中黑种草子、桃仁和石榴子的药效缓和，不具有强烈的刺激性和过敏性，处方中药材多具有保护皮肤抗过敏的作用；本发明复方斯亚旦生发剂中所选用表面活性剂亦为非离子表面活性剂，不具有常规表面活性剂所常见的刺激性；因此，实验中本发明复方斯亚旦生发剂未见有红肿、水肿等皮肤反应，说明本发明复方斯亚旦生发剂具有较高的安全性。

综上所述，本实验采用3种模型全面评价了本发明复方斯亚旦生发剂药效作用，结果表明，本发明复方斯亚旦生发剂在正常模型和病理模型下均表现了优于现有复方斯亚旦生发油的生发效果，与市售药品米诺地尔或非那雄胺的生发效果相当，说明本发明复方斯亚旦生发剂的生发效果显著；安全性试验表明，本发明复方斯亚旦生发剂未表现出皮肤刺激性和过敏性，说明本发明复方斯亚旦生发剂具有较高的安全性；同时药渣能够回收利用，提高了资源利用率。

以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。

表1各受试物小鼠转变时间、观察终点时间和毛重（n=10，X±SD）

^*与辅料组/空白组比较，⁺与现有复方斯亚旦生发油组比较时差异显著（P＜0.05）

表2雄激素模型小鼠毛重和DHT含量测定结果（n=10，X±SD）

注：^*与氯化钠溶液组比较，⁺与现有复方斯亚旦生发油组比较，^△与非那雄胺组比较时差异显著（P＜0.05）

表3小鼠观察终点时毛重（n=10，X±SD）

注：^*与辅料组比较，⁺与现有复方斯亚旦生发油组比较，^△与环孢素组比较时差异显著（P＜0.05）

Claims (4)

1.一种复方斯亚旦生发剂，其特征在于原料按重量份数包括黑种草子1份、桃仁0.5份和石榴子0.1份；其中：该复方斯亚旦生发剂按下述方法得到：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用体积百分比为95%至99%的乙醇水溶液进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至2小时，提取后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行提取，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入蓖麻油聚烃氧酯35混匀后得到复方斯亚旦生发剂，蓖麻油聚烃氧酯35在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

2.根据权利要求1所述的复方斯亚旦生发剂，其特征在于减压浓缩的压力为-0.04MPa至-0.09MPa，减压浓缩的温度为50℃至95℃。

3.一种复方斯亚旦生发剂的制备方法，其特征在于按下述步骤进行：原料按重量份数包括黑种草子1份、桃仁0.5份和石榴子0.1份；该复方斯亚旦生发剂的制备方法按下述方法进行：第一步，将所需量的黑种草子、桃仁和石榴子用体积百分比为95%至99%的乙醇水溶液进行提取，提取温度为20℃至80℃，提取时间为0.5小时至2小时，提取后得到脂溶性部分和药渣；第二步，按原料重量份数计在药渣中加入8份至15份的体积百分比为30%的乙醇水溶液进行提取，提取两次，每次提取温度为80℃至100℃，每次提取时间为0.5小时至2小时，两次提取后合并提取液得到混合提取液；第三步，混合提取液经减压浓缩后得到浓缩液，浓缩液在温度为25℃时的密度为1.05g/mL至1.25g/mL；第四步，把脂溶性部分和浓缩液混合后，再加入蓖麻油聚烃氧酯35混匀后得到复方斯亚旦生发剂，蓖麻油聚烃氧酯35在复方斯亚旦生发剂中的质量百分含量为10%至60%。

4.根据权利要求3所述的复方斯亚旦生发剂的制备方法，其特征在于减压浓缩的压力为-0.04MPa至-0.09MPa，减压浓缩的温度为50℃至95℃。