CN104042516A - 一种具有美白功效中草药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有美白功效中草药组合物,由以下重量份数的组分制成的:白芨8~40、川芎8~40、葛根8~40、绿茶8~40、甘松5~20。本发明还公开所述具有美白功效中草药组合物的制备方法和在化妆品中的应用。本发明的有益效果是:可以侧重地抑制黑色素的合成及相关mRNA的表达,协同加强皮肤的新陈代谢,促进血液循环的中草药组合物,可有效预防及减少皮肤黑色素的合成;且是纯中草药提取物,使用安全,符合化妆品卫生规范,可用于美白化妆品配方中,如美白润肤霜、美白洁面乳等;通过生物化学、细胞生物学和分子学三大机制进行研究证明:具有明显的抑制酪氨酸酶,抑制黑色素及抑制黑色素相关因子mRNA的基因合成,多层次达到美白效果。
Description
技术领域
本发明涉及一种供皮肤美白的中草药提取物,特别是一种具有美白功效中草药组合物及其制备方法和应用。
背景技术
人皮肤的颜色主要是由黑色素的量决定,黑色素是动物皮肤或者毛发中存在的一种黑褐色的色素。黑色素的产生与内分泌失调、日光照射有关;紫外线、遗传、炎症介质、饮食不当等因素导致黑素代谢异常,皮肤黑素过快增长和分布不均,造成局部皮肤过黑及色素沉着。祛斑美白仍是亚洲女性最关注的话题。
现有皮肤美白剂,往往采用过氧化氢、氢化氨基汞以及其各种酚类衍生物。这些化合物虽然能够使黑色素迅速瓦解,达到快速美白的功效;但因其对皮肤的腐蚀性、细胞毒性和过敏性,使其具有极大的危险性,在许多国家的卫生规范中已被禁用。为了开发符合″绿色、天然″的化妆品,一些具有较好美白效果的中草药越来越受到消费者的青睐。
中医认为,黑色素的产生与肝、脾、肾三脏关系甚密,选用药物主要以活血化瘀为先导,疏通瘀阻,使气机得以流畅,促进面部血液循环,改善面部皮肤代谢,使面部色素逐渐消散。中草药应用于美容临床已有二干多年的历史,具有高度的安全性和实效性。
《中国中西医结合皮肤性病学杂志》表明绿茶的茶多酚可有效吸收紫外线,抑制黑素细胞的活化,抑制酪氨酸酶的活性,具有明显美白作用。《天然产物研究与开发》研究发现葛根中葛根素对酪氨酸酶有明显抑制作用。白芨,《药性论》云其:治面上疮,令人肌滑;《本草纲目》云其″洗面黑,祛斑″。
《中草药》杂志总结了近几年来发现的具有美白功能或具有潜在美白功能的天然植物成分。公开号为CN1493270A中国专利申请公开了一种皮肤美白用化妆品成分的组合物,是从川芎中分离出6,7-二氢-3-丁基酞内酯A,作为有效成分抑制促黑激素活性的组成成分及皮肤美白用化妆品的组成成分。公开号为CN1947696A的中国专利申请公开一种具有美白功效的中药配方,由白术、白茯苓、白蔹、白芍、白芨、岩白菜及甘草组成,有效改善肌肤质地,具有保湿美白,延缓肌肤衰老的神奇效果。公开号为CN102028752A中国专利申请提供一种中草药复方祛斑美白组合物及外用制剂,具有去除或淡化黄褐斑、肝斑、蝴蝶斑、晒斑、老年斑等色斑色素的效果,可改善暗哑及不均匀肤色,同时营养润泽肌肤,使肌肤富有弹性,与熊果苷、Vc及其衍生物等配合使用,可增强祛斑美白效果。
根据以上分析,现有美白相关研究发现,无论是单方还是复方美白中草药,其研究主要集中在对酪氨酸酶的抑制作用或对黑色素的抑制或清除作用上。
发明内容
本发明的目的是针对以上所述现有技术存在的不足,提供一种安全有效的抑制黑色素生成和减少黑色素沉积的具有美白功效中草药组合物。
本发明的另一目的是提供所述具有美白功效中草药组合物的制备方法。
本发明的第三目的是提供所述具有美白功效中草药组合物的应用。
为了实现上述发明目的,本发明通过以下技术方案实现:具有美白功效中草药组合物,由以下重量份数的组分制成的:
具有美白功效中草药组合物的制备方法,其包括的步骤如下:
(1)将上述组分粉碎,加入总质量10~30倍体积浓度为35-70%乙醇水溶液浸泡30~60min;
(2)温度控制在15~30℃,压力控制0.2~70mpa进行高压差提取,收集提取液离心分离取上清液;
(3)上清液经过微滤膜分离,收集滤液进行反渗透膜浓缩。
具有美白功效中草药组合物在化妆品中的应用,其添加量为0.5-20%。
一种美白组合物,其包括以下重量份数组分:
一种美白面膜,其包括以下重量份数组分:
与现有技术相比,本发明的有益效果是:可以侧重地抑制黑色素的合成及相关mRNA的表达,协同加强皮肤的新陈代谢,促进血液循环的中草药组合物,可有效预防及减少皮肤黑色素的合成;且是纯中草药提取物,使用安全,符合化妆品卫生规范,可用于美白化妆品配方中,如美白润肤霜、美白洁面乳等;通过生物化学、细胞生物学和分子学三大机制进行研究证明:具有明显的抑制酪氨酸酶,抑制黑色素及抑制黑色素相关因子mRNA的基因合成,多层次达到美白效果。
附图说明
图1为B16细胞增值率:表示皮肤美白用中草药组合物对B16细胞的增值作用。
图2为B16细胞药物敏感性抑制率:表示B16细胞对各类待测物的敏感结果。
图3为高压差提取器的结构示意图。
具体实施方式
为了更好地阐述本发明的技术内容,现举较佳具体实施例说明如下。
实施例1
具有美白功效中草药组合物,由以下重量份数的组分制成:
实施例2
具有美白功效中草药组合物,由以下重量份数的组分制成:
实施例3
具有美白功效中草药组合物,由以下重量份数的组分制成:
实施例4
具有美白功效中草药组合物,由以下重量份数的组分制成:
上述具有美白功效中草药组合物的制备方法,其包括的步骤如下:
(1)将上述组分粉碎,混合均匀,加入上述组分混合后总质量10倍的体积浓度为35%乙醇水溶液浸泡35min,可以是在投料罐中进行,需要进行搅拌;
(2)温度控制在15℃,压力控制0.2~70mpa进行高压差提取,收集提取液离心分离进行固液分离后取上清液;
(3)上清液经过微滤膜分离,收集滤液进行反渗透膜浓缩。
上述具有美白功效中草药组合物的制备方法,其包括的步骤如下:(1)将上述组分粉碎,混合均匀,加入上述组分混合后总质量30倍体积浓度为70%乙醇水溶液浸泡60min;
(2)温度控制在30℃,压力控制0.2~70mpa进行高压差提取,收集提取液离心分离取上清液;
(3)上清液经过微滤膜分离,收集滤液进行反渗透膜浓缩。
优选的,上述具有美白功效中草药组合物的制备方法,其包括的步骤如下:(1)将上述组分粉碎,混合均匀,加入上述组分混合后总质量25倍体积浓度为50%乙醇水溶液浸泡50min;
(2)温度控制在30℃,压力控制0.2~70mpa进行高压差提取,收集提取液离心分离取上清液;
(3)上清液经过微滤膜分离,收集滤液进行反渗透膜浓缩。
其中,上述组分可以粉碎至30-150目,可以提高提取效率。所述微滤膜可以选用陶瓷膜,其滤孔径在0.1-1微米之间。所述反渗透膜可以优选陶氏反渗透膜,故障率低且使用寿命长。
所述高压差提取是在0.1-0.3S瞬间的0.2~70mpa压差变化产生的强大机械力并形成高速流,使待提取物料在机械和渗透压差条件下使内容物与溶剂相混合,从而使细胞内的有效成分提取出来。
优选的,高压差提取是在0.S瞬间的0.5~50mpa压差变化产生的强大机械力并形成高速流进行提取;这样可以提高效率且可以保持提取物活性
其中,高压差提取可在高压差提取器中进行。所述高压差提取器如图3所示,由提取室1、收料室2、提取液储罐组3、压缩空气站4、投料口5、搅拌器6、溶媒喷雾器7、冷凝器8、冷冻水站9、溶媒储罐10、冷凝缓冲罐11、真空站12、调温液站13、提取渣储罐14、温度测控器20、压力测控器30组成;所述提取室1和所述收料室2共用一个带保温夹层的压力容器并通过板式过滤器间隔,所述提取室1内置所述搅拌器6;所述提取室1和所述收料室2可以是分体的也可以是连体的单机式,所述提取室1和所述收料室2之间以过滤器分割,所述过滤器是板式的或卷式、填充式、柱式或不同型式过滤器的组合;所述提取室1的上部设有所述投料口5,并安装所述溶媒喷雾器7,溶媒喷雾器7通过管道连通溶媒储罐10;所述收料室2通过管道连通提取液储罐组3所述提取室1底部通过管道连通提取渣储罐14;所述冷凝缓冲罐11与真空站12通过管道连通;所述提取室1顶部与压缩空气站4的压缩空气储罐通过管道连通;压力容器夹层与调温液站13的调温液储罐建立循环管道连接;所述提取室1安装有温度测控器20和压力测控器30。通过冷凝缓冲罐11上的抽真空口与真空站12的真空缓冲罐建立管道连接,使操作时根据需要可以使收料室2内的真空度最高达到50Pa;通过提取室顶部的压缩空气进口与压缩空气站4的压缩空气储罐建立管道连接,使操作时根据需要可以使收料室内的压力最高达到35MPa;通过夹层的调温液进出口与调温液站13的调温液储罐建立循环管道连接,调温液温度一般控制在-35℃~50℃,使操作时根据需要可以使提取室和收料室内的温度控制在-25℃~40℃;通过提取室1顶部的压力测控器30、温度测控器20及管道上的阀门建立控制***的信息采集及传递通路,这些信息将有利于自动控制操作的流程化设计与应用。高压差提取器附配有清洗、消毒***。
操作时步骤如下:
1.加料:开启投料口5,启动搅拌装器6,将待提取的干物料通过加料口投入提取室中。
2.抽真空:物料投完后,关闭投料口5,启动冷冻水站9使冷冻水进入冷凝器8并循环,启动真空站,通过冷凝缓冲罐11将提取室1内抽成真空,达到需要的真空度后,保持一定时间。
3.加溶媒:通过溶媒喷雾器7将溶媒储罐10内的溶媒按需要量定量喷入提取室内1,保持一定时间。
4.减真空:启动压缩空气站4,通压缩空气入提取室1内,使室内真空度逐渐下降至0.0MPa。
5.加压:继续通入压缩空气,使提取室1内压力逐渐上升至最高35MPa,使提取液进入收料室2内。
6.反复进行操作步骤2~5,直至提取液不显示选定的指标成分鉴别反应。
7.开启提取室底阀将提取渣排出至提取渣储罐14中。
实施例5
(1)按照比例复配好上述原料,将其粉碎,粉碎后的粉末置于200L投料罐中,再加入10~20倍纯水,在温度控制在90℃左右搅拌提取60~120min;
(2)上述提取液通过离心机进行固液分离。上清进行微滤浓缩,离心渣再加入10~20倍纯水,在温度控制在90℃左右的条件下搅拌提取60~120min;
(3)上述提取液再通过离心机进行浓缩,使其固液分离;
(4)离心液再通过微滤膜进行澄清分离处理;
(5)微滤分离出的上清液通过管道连接到反渗透膜***,对其进行浓缩处理,即可得到提取物。
本发明得到的具有美白功效中草药组合物,按照《2010版化妆品卫生规范》的标准,进行了美白复方组合物的多次皮肤刺激性试验、急性眼刺激性试验和卫生理化检测,各项指标结果均符合化妆品规范的要求。
一种具有美白功效中草药组合物在膏霜、水剂、乳液等化妆品中的应用,其优选的添加量为1-10%。最优选的,具有美白功效中草药组合物的添加量为5%。
实施例6
一种美白组合物,其包括以下重量份数组分:
实施例7
一种美白组合物,其包括以下重量份数组分:
实施例8
一种美白组合物,其包括以下重量份数组分:
上述一种美白组合物的制备方法如下:
(1)先将乙二胺四乙酸二钠加入水相中搅拌,同时加热升温至80-90摄氏度后保温半小时;
(2)在(1)步骤水相中依次加入聚甘油、氢化淀粉水解物、卡拉胶和透明质酸钠、搅拌至完全溶解后开始降温;
(3)待温度降到45-55摄氏度后加入芦荟提取物、海藻糖、维生素E和萄聚糖,搅拌均匀;
(4)将温度降至35-45摄氏度后加入具有美白功效中草药组合物和,搅拌均匀;
(5)最后加入用氢氧化钠调节好PH值为7-8,搅拌均匀。
实施例9
一种美白面膜,其包括以下重量份数组分:
实施例10
一种美白面膜,其包括以下重量份数组分:
实施例11
一种美白面膜,其包括以下重量份数组分:
上述一种美白面膜的制备方法如下:
(1)在水中加入乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)搅拌,同时加热升温至80-90摄氏度后保温半小时;
(2)依次加入聚甘油、氢化淀粉水解物、卡拉胶和透明质酸钠,以20-50rpm的转速搅拌至完全溶解后开始降温;
(3)待温度降到45-55摄氏度后加入防腐剂、芦荟提取物、海藻糖、维生素E和萄聚糖,充分搅拌均匀;
(4)在温度降至35-45摄氏度后加入具有美白功效中草药组合物,以20-50rpm的转速搅拌均匀;
(5)最后加入用氢氧化钠调节好PH值为7-8,10-20rpm的转速搅拌均匀。
效果实验
1、生化水平:对上述实施例进行效果实验,运用生化酶学法进行体外酪氨酸酶抑制率的测定
实验方法:照下表加样,混匀,37℃水浴保温37℃,在C1和T1管中加入浓度为100U/mL的L-多巴混匀。10min后用C2作参比测C1在475nm处的吸光值,同T2作参比测T1在475nm处的吸光值。每组实验平行3次,计算平均值,利用公式计算样品对酪氨酸酶的抑制率。
酪氨酸酶抑制率=(C1-T1)/C1
表1 为实施例3的体外生化酶法检测酪氨酸酶
实验结果:生化酶学法使用的阳性对照品为β-熊果苷,该美白抑制剂作为常规美白添加剂广泛使用在美白化妆品中。实验数据显示2%含量的皮肤美白用中草药组合物对酪氨酸酶的抑制率为54.1%,2%含量的β-熊果苷对酪氨酸酶的抑制率为34.8%,其他实施例也具有类似检测结果,说明本发明的皮肤美白用中草药组合物具有一定的美白效果。
2、细胞水平:对上述实施例进行效果实验,通过对小鼠黑色素瘤B16细胞内黑色素的含量进行检测,如图1和图2所示。
实验方法如下:
(1)对B16细胞进行复苏和培养,检测前一天对细胞进行传代,使其汇合度为30%-50%,检测时使用DMEM-高糖完全培养基。
(2)第二天加药浓缩,看到培养基有明显颜色变化,及显微镜观察到细胞内有黑色沉淀时,收集细胞。
(4)收获1×106的细胞,PBS洗两次,加入200uL重蒸水使沉淀悬浮,加入1mL的乙醇:***(1∶1)混合液,室温下静置20min,3000r/min离心5min。
(6)沉淀加入1mol/L NaOH lml(含10%DMSO),在80℃水浴中孵育30min后在415nm的分光光度计上测吸光度。
黑色素合成抑制率=(1-药物浓缩组值/空白对照组值)×100%
实验结果:
表2 为实施例3的黑色素抑制率
具有美白功效中草药组合物黑色素检测与实验对照组正常培养cell相比较,P<0.05有统计学差异,证明美白复方浓缩相对cell分泌黑色素有明显影响作用;与阳性对照组相比较,P<0.05有统计学差异,证明具有美白功效中草药组合物浓缩B16细胞能明显抑制黑色素分泌。
3、人体水平:对上述实施例进行人体皮肤测试,通过德国皮肤黑色素测试仪Mexameter MX18测试皮肤黑色素在使用前后的含量变化。
(1)测试部位:志愿受试者的双侧前臂屈侧区域,
(2)实验分组:将志愿受试者的双侧前臂屈侧的皮肤随机分为试验侧和空白对照侧。
(3)实验步骤:首先是收集每一位受试者前臂屈侧的照片和测定受试前的黑色素含量,把受试产品发给受试者,使每一位受试者都明白产品的使用方法(在前臂选定2*2cm的区域,每次涂抹1g原料至吸收完全,每天早晚两次)。在测试开始后第1天、第8天、第12天、第17天、第21天和第25天,使用德国COURAGE+KHAZAKA electronic GmbH(CK)公司生产的皮肤黑色素和血红素测试仪Mexameter MX18测定靶部位皮肤的血红素和黑色素值。靶部位皮肤黑色素测量3次,取其平均值,通过测量产品使用前后皮肤黑色素值的变化来评估该产品对皮肤美白的作用。
实验结果:
表3 为实施例3的人体黑色素含量检测结果
实验结果:生化酶学法使用的阳性对照品为β-熊果苷,该美白抑制剂作为常规美白添加剂广泛使用在美白化妆品中。实验数据显示2%含量的皮肤美白用中草药组合物对酪氨酸酶的抑制率为54.1%,2%含量的β-熊果苷对酪氨酸酶的抑制率为34.8%,其他实施例也具有类似检测结果,说明本发明的皮肤美白用中草药组合物具有一定的美白效果。
本发明对黑色素相关合成因子mRNA进行检测,分别从生化水平、细胞水平、分子水平和人体水平进行美白功效评价。该中草药组合物原料纯天然,安全无刺激,具有广泛的市场潜力。
本发明上述其他实施例经上述方法检测,也具有如上所述有益效果类似的数据,再次不再累赘。
上述实施例为本发明较佳的实施方式,但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制,其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化,均应为等效置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.具有美白功效中草药组合物,其特征在于,由以下重量份数的组分制成的:
2.如权利要求1所述的具有美白功效中草药组合物,其特征在于,其包括的步骤如下:
(1)将上述组分粉碎,加入总质量10~30倍体积浓度为35-70%乙醇水溶液浸泡30~60min;
(2)温度控制在15~30℃,压力控制0.2~70mpa进行高压差提取,收集提取液离心分离取上清液;
(3)上清液经过微滤膜分离,收集滤液进行反渗透膜浓缩。
3.具有美白功效中草药组合物在化妆品中的应用,其添加量为0.5-20%。
4.一种美白组合物,其特征在于,其包括以下重量份数组分:
5.一种美白面膜,其特征在于,其包括以下重量份数组分:
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