CN102000016A - 玉容散复方提取物及其制备方法与用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种玉容散复方提取物及其制备方法与用途,该提取物是由甘草10%~20%、白芨10%~20%、白莲子10%~20%、白术10%~20%、当归10%~20%、白茯苓5%~10%、百合5%~10%按以上重量份数组成的玉容散复方通过粉碎、离心、萃取等步骤提取制得,提取物中总黄酮含量≥10.6%。采用增溶剂复配潜溶剂的增溶技术成功将该提取物增溶成纳米乳液,添加到水剂类的化妆品配方中,拓展了其使用范围。本发明在玉容散复方的组方上将中医学原理与现代生物技术的科学原理相结合,摒弃了传统医学中的不合理因素,优化后的组方具有较原古方更好的活性、安全性。
Description
技术领域
本发明涉及一种玉容散复方提取物及其制备方法与用途。
背景技术
中国有着悠久的中药美容的历史,中医理论认为风邪热毒聚于颜面常可导致面部粗黑失于白净,有记载的各类宫廷玉容散配方不胜其数,主治黧黑皯黯,其中比较著名的有《医宗金鉴》卷六十三玉容散,其组成为白牵牛、团粉、白蔹、白细辛、甘松、鸽条白、白芨、白莲蕊、白芷、白术、白僵蚕、白茯苓各30克,荆芥、独活、羌活各15克,白附子、鹰条白、白扁豆各30克,防风15克,白丁香30克。
另外《慈禧光绪御用秘方》记载的玉容散,为慈禧太后使用的宫廷御方,可以治疗颜面的黑斑、粗糙、保持美白年轻的肌肤,具有温经、驱风、活络经脉、美白去粉刺促进脸部血液循环的作用。其主要成分为:白牵牛、白蔹、白细辛、甘松、白芨、白莲蕊、白茯苓、白芷、白术、白僵蚕各1两、荆芥、独活、羌活、檀香各五钱,白附子、白扁豆各1两,防风5钱,白丁香1两,珍珠2分,绿豆粉1两。
经验证,此二方确实具有一定疗效,然而其中白牵牛、白芷、白附子等均为《化妆品卫生规范》中所禁用的有毒植物,鹰条白、鸽条白、白丁香则为禽类粪便,其来源不易取得,经过试验验证,这三种禽类粪便具有较高的抗氧化活性,其清除自由基的能力为VC乙基醚的4倍,但其对小鼠黑色素瘤细胞B16具有明显促黑作用,且细胞毒性明显高于其他药材,因此不建议添加入美白类护肤产品中。本发明***研究了此二方中所述及的各单味药材的细胞毒性和对B16细胞黑色素含量抑制作用的影响,筛选出其中毒性较小,活性较好的白芨、白莲子、白术、白茯苓等四味中药。同时依据原古方中的配方机理,复配以甘草、当归、百合以增强美白功效。
白芨具有爽滑滋润、消肿生肌,疗面上皯疱,令人肌滑的功效,白术、白茯苓有祛风散结,利水除湿,祛斑泽面的功效。白莲子、百合具有清热凉血的功效。甘草具有润肺解毒消肿的功效,且具有较强的抑制酪氨酸酶的功效。当归具有补血活血的功效,可以促进脸部血液循环。
本专利通过对古方的解构,并利用生化检测技术,细胞培养技术,非创性皮肤评测技术,全面研究了玉容散复方在生化水平、细胞水平和人体水平上的美白、抗氧化作用,发现玉容散复方具有显著的美白和抗氧化作用。然而作为黄酮类玉容散复方提取物,其在化妆品中的应用一直受其溶解度的限制,本专利通过对玉容散复方的增溶实现了其在化妆品中的应用,尤其是水剂类产品中的应用。
发明内容
本发明的目的在于解决上述的技术问题,提供一种含有人参提取物和灵芝提取物的组合物及其用途。
本发明的目的通过以下技术方案来实现:
玉容散复方提取物,其特征在于:该提取物总黄酮含量≥10.6%。
以上所述玉容散复方提取物的制备方法,包括如下步骤,
步骤一:按照:甘草10%~20%、白芨10%~20%、白莲子10%~20%、白术10%~20%、当归10%~20%、白茯苓5%~10%、百合5%~10%的重量份数,配成玉容散复方,混合之后粉碎;
步骤二:在粉碎后的玉容散复方中加入50%~75%的乙醇水溶液,料液质量体积比(g/ml)为1∶10~1∶20,在50℃~95℃下搅拌加热0.5小时~4小时;
步骤三:离心,收集步骤二所得上清液,并向沉淀中加入50%~75%的乙醇水溶液,在50℃~95℃下搅拌提取0.5小时~4小时,重复提取一次;
步骤四:离心,收集步骤三所得上清液,将步骤二与步骤三收集的上清液合并;
步骤五:旋转蒸发,浓缩至1/4体积,依次用石油醚和乙酸乙酯萃取,石油醚为去杂萃取溶剂,乙酸乙酯为纯化萃取溶剂,将乙酸乙酯萃取部分,旋转蒸发至干,出料干燥,所得固体干燥物即玉容散复方提取物,其中总黄酮含量≥10.6%。
进一步地,所述的玉容散复方提取物的用途,其中,制备美白化妆品过程中,加入权利要求1所述玉容散复方提取物,添加的质量百分比问0.001%~1%。
更进一步地,以上所述的玉容散复方提取物的用途,其中所述美白化妆品的剂型是膏霜、乳液或洁面乳,制备过程中,先将玉容散复方提取物用丙二醇或者甘油溶解,然后再与该美白化妆品的其它组分混合、制取。
更进一步地,以上所述的玉容散复方提取物的用途,其中所述美白化妆品剂型是水剂类,制备过程中,先将玉容散复方提取物通过增溶剂配合多元醇类潜溶剂将其制备成纳米乳液,然后再与该美白化妆品的其它组分混合、制取。
更进一步地,以上所述的玉容散复方提取物的用途,其中所述美白化妆品剂型是水剂类,制备过程中,先将玉容散复方提取物与潜溶剂按照质量比(g/g)10∶1~100∶1的比例混合,加热至80℃,加速其溶解,将增溶剂与用潜溶剂溶解的玉容散复方提取物按质量比(g/g)1∶1~10∶1搅拌均匀,然后再与该美白化妆品的其它组分混合、制取。
更进一步地,以上所述的玉容散复方提取物的用途,其中所述增溶剂是氢化蓖麻油40、氢化蓖麻油60、吐温80中的一种,所述潜溶剂是丙二醇、甘油、1,3丁二醇、1,2戊二醇中的一种。
本发明的有益效果主要体现在:
1)、采用增溶的方法,解决了黄酮类中药活性提取物在配方应用上的限制,通过增溶剂配合多元醇类潜溶剂对玉容散复方提取物进行增溶,使其适用于各类化妆品剂型,大大拓宽了黄酮类等中等极性玉容散复方提取物在化妆品中的使用范围。
2)、在玉容散复方的组方上将中医学原理与现代生物技术的科学原理相结合,并摒弃传统医学中的不合理因素。优化后的组方具有较原古方更好的活性、安全性。
附图说明
图1:玉容散复方提取物对B16细胞存活率的影响示意图。
图2:玉容散复方提取物对B16细胞存活率的影响示意图。
图3:玉容散复方提取物对B16细胞黑色素生成的抑制率示意图。
图4:玉容散复方提取物经过一个月的稳定性考察结果示意图。
图5:玉容散复方提取物6周人体美白测试结果示意图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。
玉容散复方提取物的制备方法,包括以下步骤:
步骤一:将玉容散复方粉碎至100目,所述玉容散复方由甘草10%~20%、白芨10%~20%、白莲子10%~20%、白术10%~20%、当归10%~20%、白茯苓5%~10%、百合5%~10%组成;
步骤二:在粉碎的玉容散复方中加入50%~75%的乙醇水溶液,料液质量体积比为1∶10~1∶20,在85℃下搅拌加热2小时;
步骤三:离心,收集步骤二所得上清液,并向沉淀中加入50%~75%的乙醇水溶液,在85℃下搅拌提取2小时,重复提取一次;
步骤四:离心,收集步骤三所得上清液,将步骤二与步骤三收集的上清液合并;
步骤五:可以旋转蒸发,浓缩至1/4体积,依次用石油醚和乙酸乙酯萃取,石油醚为去杂萃取溶剂,乙酸乙酯为纯化萃取溶剂,将乙酸乙酯萃取部分,旋转蒸发至干。也可以旋转蒸发,浓缩至干,用20%乙醇溶液溶解后,用D101大孔树脂分离纯化,先用水洗脱,再用50%乙醇洗脱,收集50%乙醇洗脱部分,旋转蒸发至干。
步骤六:用乙醇出料,真空干燥,或者转为水溶液后出料,喷雾干燥。
步骤七:所得干燥物即玉容散复方提取物,其中总黄酮含量≥10.6%。
玉容散复方提取物性能检测
(一)玉容散复方提取物的活性检测
将上述方法制备所得干燥物用多元醇类,如丙二醇、1,3丁二醇、聚乙二醇(PEG)、甘油、1,2戊二醇等溶解成1%~20%的溶液备进行酪氨酸酶活性的检测。采用本发明的制备方法所制得的玉容散复方提取物具有较高的抑制酪氨酸酶活性和清除DPPH自由基的活性,其IC50分别为0.0364mg/ml和0.015mg/ml。
采用本发明的制备方法所制得的玉容散复方提取物对细胞毒性较小,在100μg/ml以下时对细胞没有毒性。采用MTT法测细胞增殖率,所测得玉容散复方提取物对B16细胞和HaCat细胞的毒性结果分别如表1、图1和表2、图2所示。
表1玉容散复方提取物对B16细胞存活率的影响
如表1和图1得知,玉容散复方提取物浓度<100μg/ml时,B16细胞存活率均在84.7%以上,玉容散复方提取物对Hacat细胞存活率几乎无影响,t检验,P<0.05。
表2玉容散复方提取物对HaCat细胞存活率的影响
由表2和图2得知,玉容散复方提取物浓度<100μg/ml时,Hacat细胞存活率均在85%以上,玉容散复方提取物对Hacat细胞存活率几乎无影响,t检验,P<0.05。
采用本发明的制备方法制得的玉容散复方提取物能够明显抑制B16细胞中黑色素的生成,其实验结果如表3、图3所示,当玉容散复方提取物浓度在20μg/ml时,对黑色素瘤细胞分泌黑色素的抑制率为38%。
表3:玉容散复方提取物经过一个月的稳定性考察结果:
(二)玉容散复方提取物的原料稳定性测试及配方稳定性测试
采用本发明的制备方法所制得的玉容散复方提取物具有较高原料稳定性。其具体试验方法为:将玉容散复方提取物配制成1%的丙二醇溶液,采用耐寒(-20℃)、耐热(50℃)、高低温循环,光照等条件考察,并在考察一个月时,测其清除自由基和抑制酪氨酸酶等生化活性。实验结果如图4所示,在光照一个月后,其清除DPPH自由基和抑制酪氨酸酶活性均有所下降,活性分别为考察前的79.3%和76.4%,其他考察条件下的活性均保持良好,均维持在90%以上。
采用本发明的制备方法所制得的玉容散复方提取物加入配方中具有较高的稳定性。其具体试验方法为将所制得的玉容散复方提取物高温80℃或低温40℃时加入配方中,或将玉容散复方提取物增溶后加入水剂类配方中,考察配方的耐寒(-20℃)、耐热(50℃)、高低温循环,光照,4℃条件下的稳定性,各考察条件下配方的物理状态均保持稳定,未见变色、析出、分层等现象,该玉容散复方提取物与化妆品基质的配伍性较好。
(三)玉容散复方提取物的原料安全性测试
经由上海医药工业研究院实验表明,将原料配制成20%的丙二醇溶液,经过急性经口毒性试验、急性经皮毒性试验、皮肤刺激性/腐蚀性实验,急性眼刺激性/腐蚀性实验,皮肤***反应、皮肤光毒性实验测试,证明玉容散复方提取物无任何毒性,对皮肤无任何刺激。
(四)玉容散复方提取物在化妆品配方中的应用及人体功效测试
玉容散复方提取物在美白化妆品中的添加比例为0.001%~1%,其剂型包含并不限于膏霜、水剂、乳液、洁面类等。
作为本发明应用的典型基质,涉及的已知物质有:动植物油、矿物油、蜡、高级醇、脂肪醇、硅油、表面活性剂、磷脂、醇类、多元醇类、水溶性聚合物、油溶性聚合物类、矿物质、去离子水等,另外,根据需要可适当加入PH调节剂、抗氧化剂、螯合剂、颜料、防腐剂和香精等。此外,也可以与具有美白作用、抗衰老作用或者护肤功效性作用的其它活性成分结合使用,如防晒剂、血液循环促进剂、消毒剂、消炎剂、细胞活化剂、维生素类、氨基酸类、润湿剂、角质层分离剂。
实施例
产品配料,如表4所示,是添加有玉容散复方提取物的化妆品的具体配料组成。配制时,将表中组分A加热至85℃,溶化搅拌均匀,作为油相原料,将组分B放入容器加热至85℃,搅拌溶解成水相原料,将油相原料加入水相原料中搅拌,乳化均质1min后,继续搅拌,冷却至45℃时,加入香精、防腐剂等,搅拌均匀,陈化24小时后,即可灌装、包装、检验,制得本发明的实例产品。
表4:添加有玉容散复方提取物的化妆品的具体配料表
以不添加玉容散复方提取物的产品为空白对照,将产品进行美白效果测试。
简要实验方法如下:
1、筛选30名18~50岁之间的健康志愿者,选定产品测试部位,每个测试部位面积为2×(2~3)×3cm2,产品使用量为2mg/cm2,约为半粒绿豆大小。
2、志愿者清洗测试部位,在恒温恒湿实验室静坐30分钟,运用皮肤测试仪测定受试部位的黑色素含量值(mexameter)和皮肤亮度值(colorimeter),作为使用前的基础值。
3、产品发放给志愿者,早晚在固定部位涂抹一次,实验期间实验部位不得使用其他化妆品。
4、测试周期6周,每两周在恒温恒湿环境中测定一次测定受试部位的黑色素含量值和皮肤亮度值的变化情况。
5、统计数据,分析使用前后黑色素含量值和皮肤亮度值变化及其与空白膏霜的差别。
玉容散复方提取物产品的美白效果如图5所示,玉容散复方提取物浓度在0.1mg/ml时,其美白活性优于10mg/ml的熊果苷,t检验,P<0.05,玉容散复方提取物具有一定的美白作用,可以提升皮肤亮度,降低皮肤黑色素含量,且比阳性对照熊果苷好。
本发明方法制得的玉容散复方提取物优点体现为:经体外酪氨酸酶活性检测,测得其酪氨酸酶抑制活性的IC50为0.0364mg/ml,是熊果苷的4倍;经DPPH自由基清除试验检测,测得其清除DPPH自由基活性的IC50为0.015mg/ml,与维生素C乙基醚相当。
利用小鼠黑色素瘤细胞(B16-F1)模型,人永生化角质形成细胞(HaCat)模型检验新编玉容散在抑制黑色素生成以及细胞毒性方面的作用。实验结果表明,玉容散复方提取物在100μg/ml浓度以下对这两种细胞均无细胞毒性,并有抑制B16细胞中黑色素产生的作用,当玉容散复方提取物浓度在20μg/ml时,对黑色素瘤细胞分泌黑色素的抑制率为38%。
将玉容散复方提取物添加到化妆品中配制成具有美白淡斑作用的功能化妆品,通过无创性皮肤测试模型研究玉容散复方提取物对皮肤黑色素含量,皮肤光亮度的影响。通过30人28天临床研究表明玉容散复方提取物可明显减少皮肤黑色素的含量,并提高皮肤的光亮度。
当然,本发明尚有多种具体的实施方式,凡采用等同替换或者等效变换而形成的所有技术方案,均落在本发明要求保护的范围之内。
Claims (7)
1.玉容散复方提取物,其特征在于:该提取物总黄酮含量≥10.6%。
2.权利要求1所述玉容散复方提取物的制备方法,其特征在于:包括如下步骤,
步骤一:按照:甘草10%~20%、白芨10%~20%、白莲子10%~20%、白术10%~20%、当归10%~20%、白茯苓5%~10%、百合5%~10%的重量份数,配成玉容散复方,混合之后粉碎;
步骤二:在粉碎后的玉容散复方中加入50%~75%的乙醇水溶液,料液质量体积比(g/ml)为1∶10~1∶20,在50℃~95℃下搅拌加热0.5小时~4小时;
步骤三:离心,收集步骤二所得上清液,并向沉淀中加入50%~75%的乙醇水溶液,在50℃~95℃下搅拌提取0.5小时~4小时,重复提取一次;
步骤四:离心,收集步骤三所得上清液,将步骤二与步骤三收集的上清液合并;
步骤五:旋转蒸发,浓缩至1/4体积,依次用石油醚和乙酸乙酯萃取,石油醚为去杂萃取溶剂,乙酸乙酯为纯化萃取溶剂,将乙酸乙酯萃取部分,旋转蒸发至干,出料干燥,所得固体干燥物即玉容散复方提取物,其中总黄酮含量≥10.6%。
3.权利要求1所述的玉容散复方提取物的用途,其特征在于:制备美白化妆品过程中,加入权利要求1所述玉容散复方提取物,添加的质量百分比问0.001%~1%。
4.根据权利要求3所述的玉容散复方提取物的用途,其特征在于:所述美白化妆品的剂型是膏霜、乳液或洁面乳,制备过程中,先将玉容散复方提取物用丙二醇或者甘油溶解,然后再与该美白化妆品的其它组分混合、制取。
5.根据权利要求3所述的玉容散复方提取物的用途,其特征在于:所述美白化妆品剂型是水剂类,制备过程中,先将玉容散复方提取物通过增溶剂配合多元醇类潜溶剂将其制备成纳米乳液,然后再与该美白化妆品的其它组分混合、制取。
6.根据权利要求5所述的玉容散复方提取物的用途,其特征在于:所述美白化妆品剂型是水剂类,制备过程中,先将玉容散复方提取物与潜溶剂按照质量比(g/g)10∶1~100∶1的比例混合,加热至80℃,加速其溶解,将增溶剂与用潜溶剂溶解的玉容散复方提取物按质量比(g/g)1∶1~10∶1搅拌均匀,然后再与该美白化妆品的其它组分混合、制取。
7.根据权利要求5或6所述的玉容散复方提取物的用途,其特征在于:所述增溶剂是氢化蓖麻油40、氢化蓖麻油60、吐温80中的一种,所述潜溶剂是丙二醇、甘油、1,3丁二醇、1,2戊二醇中的一种。
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