CN104030844B - 一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基 - Google Patents
一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，由下述重量份的原料制成：木屑35-70份、辅料25-60份、石膏0.5-1.5份、糖0.1-1份、穿心莲1-5份，料水比为1：1.3-1.5。采用本发明的灵芝代料栽培培养基，可以很好的在灵芝的栽培过程中抑制杂菌的生长，具有显著的效果，同时能增强灵芝的抗肿瘤能力。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌栽培领域，尤其涉及一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基。
背景技术
灵芝(学名：GanodermaLucidumKarst)，又称灵芝草、仙草，别称赤芝、红芝、木灵芝、菌灵芝、万年蕈、灵芝草，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株，为多孔菌科真菌灵芝的子实体。外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形。灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍贵药材，具有补气安神，止咳平喘的功效，用于眩晕不眠，心悸气短，虚劳咳喘。灵芝具备很高的药用价值，经过科研机构数十年的现代药理学研究证实，灵芝对于增强人体免疫力，调节血糖，控制血压，辅助肿瘤放化疗，保肝护肝，促进睡眠等方面均具有显著疗效。灵芝多糖是灵芝药用功能的主要有效成分之一，主要存在于灵芝细胞壁内壁，大部分为β-葡聚糖，其单糖组成除含有大量葡萄糖外，还含有少量***糖、木糖、岩藻糖，鼠李糖，半乳糖和甘露糖等，它们大多以(1-3)、(1-4)和(1-6)等糖苷键连接，具有广泛的生物活性，如增强免疫力、清除人体自由基、保护心血管、抗辐射、保护肝脏、抗肿瘤等作用。三萜类也是灵芝的有效成分之一，灵芝所含三萜类不下百余种，其中以四环三萜类为主，灵芝的苦味与所含三萜类有关，对人体肝癌细胞具有细胞毒作用，也能抑制组织胺的释放，具有保肝和抗过敏等作用。
由于自然生长的灵芝少，且含有大量的粗纤维及其它杂质，而灵芝多糖含量不高(通常为2-5％)，不便于直接作为保健食品或药品原料，因此，许多科学工作者开展灵芝的人工培养及栽培技术研究。目前，灵芝的人工代(瓶)料栽培、发酵生产等技术相继取得成功，其中，发酵生产对设备要求高，投资大，不利于广泛推广应用；人工栽培灵芝在我国由来已久，从椴木栽培到代料栽培技术的发展，促进了灵芝大范围人工栽培。如中国专利CN103724115A，公开了一种灵芝袋栽菌包，主要采用以下原料按重量百分比配制而成：桑木屑75-80％、棉籽壳10-16％、麦麸3-5％、石膏粉0.8-1.2％、含水量55-65％,pH值6.5-7.5，装袋。灵芝生长所需要的营养物质与其它食用菌从总体上来说大体一致，如碳素营养、氮素营养、维生素及矿物质等，在灵芝代料栽培培养培养基的配比中，传统主料有棉籽壳、杂木屑、农作物秸秆等，辅料有麦麸、木糠、玉米粉等，另有石膏、过磷酸钙、白糖等添加料。人工代料栽培主要以木屑、棉籽壳、蔗渣、作物秸秆等农林下脚料及废渣废料作栽培原料，操作简便，投资少，易于普遍推广应用，但废渣废料成分复杂，有的可能含有有害成分，对灵芝产品品质控制不利。因此寻找新型的代料栽培培养基是灵芝栽培产业化的关键。
穿心莲(学名：Andrographispaniculata(Burm.f.)Nees)，又名春莲秋柳，一见喜，榄核莲、苦胆草、金香草、金耳钩、印度草，苦草等。一年生草本植物，长4-8厘米，宽1-2.5厘米。药用植物，有清热解毒、消炎、消肿止痛作用。我国福建、广东、海南、广西、云南常见栽培，江苏、陕西亦有引种。将穿心莲应用在灵芝的代料栽培培养基中具有广阔的市场前景和经济价值。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种成本低廉、效果明显的添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基。
本发明是通过如下技术方案来实现的：
一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，由下述重量份的原料制成：木屑35-70份、辅料25-60份、石膏0.5-1.5份、糖0.1-1份、穿心莲1-5份，料水比为1：1.3-1.5。
优选的，由下述重量份的原料制成：木屑42份、辅料53份、石膏1份、糖1份、穿心莲3份，料水比为1：1.3-1.5。
所述的灵芝包括优选鹿角灵芝、平盖灵芝。
所述的木屑优选来源枫木和椎木。
所述的辅料为棉籽壳、麦麸、玉米粉中的一种或几种组成，当混合使用时，可以是任意比例。
所述的穿心莲为新鲜或干制后的穿心莲、或者生产中成药后获得的残渣、或者经过提取穿心莲活性成分后得到的穿心莲残渣。
所述的提取穿心莲活性成分工艺包括提取、分离、纯化等工艺。
一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)木屑前期加工：将砍伐后树木的主干及枝条去皮后粉碎至粒径为0.5-1.0cm，晒干备用；
(2)配料：按照培养基的配方进行配料；
(3)拌料：首先将木屑、辅料、石膏、糖、穿心莲混匀形成干料，然后加水充分拌匀形成培养基基质，加水量以手抓紧握指缝见水但不形成水珠即可，料水比1:1.3-1.5；
(4)装袋：拌料结束后，堆料1-2小时，使水分被培养基基质充分吸收，即可装袋。
优选17X35X0.05规格聚丙烯塑料出菇袋，装料约400克，装料不宜太满，料包两头扎口，袋口注意清洁，防止后期杂菌污染；
(5)灭菌：将料包放入灭菌设备，高压蒸汽(121℃)灭菌1.5-2小时，或常压(100℃)灭菌10-12小时，灭菌结束后将料包移入冷却室，待温度降至30℃以下，即可接种。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
1、穿心莲，含二萜内酯化合物：穿心莲甲素即去氧穿心莲内酯、穿心莲乙素即穿心莲内酯、穿心莲丙素即新穿心莲内酯及高穿心莲内酯，潘尼内酯。还含穿心莲烷，穿心莲酮，穿心莲甾醇，β-谷甾醇-D-葡萄糖甙等。穿心莲内酯、新穿心莲内酯均具有很强的抑制和延缓肺炎双球菌和溶血性乙型链球菌的能力。而且穿心莲喜高温湿润气候，喜阳光充足、喜肥，这样的条件正是杂菌适宜的环境，本发明通过在灵芝代料栽培培养基加入穿心莲，可以充分发挥穿心莲的抑菌功能，减少培养基被杂菌污染的危害。
2、穿心莲中的成分对肿瘤有抑制作用，而灵芝在传统中就是作为抗癌的中药在使用，本发明通过在灵芝代料栽培培养基加入穿心莲，可以充分加强灵芝的抗肿瘤效果。
3、穿心莲是广西的道地药材，一般都是通过提取获取活性成分，或者在中成药的制备中应用，实际生产中，一个生产工艺只是针对穿心莲中的一个或几个成分，而其他的成分并没用充分利用，穿心莲的使用量巨大，工业上作为生产的残渣、或者经过提取穿心莲活性成分后得到的穿心莲残渣一般都是作为废弃物放弃，本发明可充分利用穿心莲使用后的废弃物，变废为宝，增加了穿心莲的附加值。
具体实施方式
下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1：
一种添加了穿心莲的平盖灵芝代料栽培培养基，由下述原料制成：枫木木屑35kg、棉籽壳60kg、石膏0.5kg、糖0.1kg、生产中成药后获得的穿心莲残渣5kg，料水比为1：1.3。
灵芝代料栽培培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)木屑前期加工：将砍伐后树木的主干及枝条去皮后粉碎至粒径为0.5-1.0cm，晒干备用；
(2)配料：按照培养基的配方进行配料；
(3)拌料：首先将木屑、辅料、石膏、糖、穿心莲残渣混匀形成干料，然后加水充分拌匀形成培养基基质，加水量以手抓紧握指缝见水但不形成水珠即可；
(4)装袋：拌料结束后，堆料1-2小时，使水分被培养基基质充分吸收，即可装袋。
选用17X35X0.05规格聚丙烯塑料出菇袋，装料约400克，装料不宜太满，料包两头扎口，袋口注意清洁，防止后期杂菌污染；
(5)灭菌：将料包放入灭菌设备，高压蒸汽(121℃)灭菌1.5-2小时，灭菌结束后将料包移入冷却室，待温度降至30℃以下，即可接种。
实施例2：
一种添加了穿心莲的平盖灵芝代料栽培培养基，由下述原料制成：椎木木屑70kg、棉籽壳10kg、玉米粉15kg、石膏1.5kg、糖1kg、经过提取穿心莲活性成分后得到的穿心莲残渣1kg，料水比为1：1.5。
灵芝代料栽培培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)木屑前期加工：将砍伐后树木的主干及枝条去皮后粉碎至粒径为0.5-1.0cm，晒干备用；
(2)配料：按照培养基的配方进行配料；
(3)拌料：首先将木屑、辅料、石膏、糖、穿心莲残渣混匀形成干料，然后加水充分拌匀形成培养基基质，加水量以手抓紧握指缝见水但不形成水珠即可；
(4)装袋：拌料结束后，堆料1-2小时，使水分被培养基基质充分吸收，即可装袋。
选用17X35X0.05规格聚丙烯塑料出菇袋，装料约400克，装料不宜太满，料包两头扎口，袋口注意清洁，防止后期杂菌污染；
(5)灭菌：将料包放入灭菌设备，常压(100℃)灭菌10-12小时，灭菌结束后将料包移入冷却室，待温度降至30℃以下，即可接种。
实施例3：
一种添加了穿心莲的鹿角灵芝代料栽培培养基，由下述原料制成：枫木木屑42kg、麦麸53kg、石膏1kg、糖1kg、新鲜的穿心莲3kg，料水比为1：1.4。
灵芝代料栽培培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)木屑前期加工：将砍伐后树木的主干及枝条去皮后粉碎至粒径为0.5-1.0cm，晒干备用；
(2)配料：按照培养基的配方进行配料；
(3)拌料：首先将木屑、辅料、石膏、糖、打碎后的穿心莲混匀形成干料，然后加水充分拌匀形成培养基基质，加水量以手抓紧握指缝见水但不形成水珠即可；
(4)装袋：拌料结束后，堆料1-2小时，使水分被培养基基质充分吸收，即可装袋。
选用17X35X0.05规格聚丙烯塑料出菇袋，装料约400克，装料不宜太满，料包两头扎口，袋口注意清洁，防止后期杂菌污染；
(5)灭菌：将料包放入灭菌设备，高压蒸汽(121℃)灭菌1.5-2小时，灭菌结束后将料包移入冷却室，待温度降至30℃以下，即可接种。
实施例4：
一种添加了穿心莲的鹿角灵芝代料栽培培养基，由下述原料制成：椎木木屑40kg、麦麸55kg、石膏1kg、糖0.8kg、干制后的穿心莲3.2kg，料水比为1：1.3。
灵芝代料栽培培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)木屑前期加工：将砍伐后树木的主干及枝条去皮后粉碎至粒径为0.5-1.0cm，晒干备用；
(2)配料：按照培养基的配方进行配料；
(3)拌料：首先将木屑、辅料、石膏、糖、打碎后的穿心莲混匀形成干料，然后加水充分拌匀形成培养基基质，加水量以手抓紧握指缝见水但不形成水珠即可；
(4)装袋：拌料结束后，堆料1-2小时，使水分被培养基基质充分吸收，即可装袋。
选用17X35X0.05规格聚丙烯塑料出菇袋，装料约400克，装料不宜太满，料包两头扎口，袋口注意清洁，防止后期杂菌污染；
(5)灭菌：将料包放入灭菌设备，常压(100℃)灭菌10-12小时，灭菌结束后将料包移入冷却室，待温度降至30℃以下，即可接种。
对比例
一种鹿角灵芝代料栽培培养基，由下述原料制成：杨树木屑42kg、麦麸56kg、石膏1kg、糖1kg，料水比为1：1.4。
灵芝代料栽培培养基的制备方法，包括如下步骤：
(1)木屑前期加工：将砍伐后树木的主干及枝条去皮后粉碎至粒径为0.5-1.0cm，晒干备用；
(2)配料：按照培养基的配方进行配料；
(3)拌料：首先将木屑、辅料、石膏、糖混匀形成干料，然后加水充分拌匀形成培养基基质，加水量以手抓紧握指缝见水但不形成水珠即可；
(4)装袋：拌料结束后，堆料1-2小时，使水分被培养基基质充分吸收，即可装袋。
选用17X35X0.05规格聚丙烯塑料出菇袋，装料约400克，装料不宜太满，料包两头扎口，袋口注意清洁，防止后期杂菌污染；
(5)灭菌：将料包放入灭菌设备，高压蒸汽(121℃)灭菌1.5-2小时，灭菌结束后将料包移入冷却室，待温度降至30℃以下，即可接种。
通过对实施例和对比例得到的灵芝代料栽培培养基，在相同的条件下
进行灵芝栽培实验，并统计被杂菌污染的情况：
表1：杂菌污染情况单位：％
通过对比，本发明一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，可以很好的在灵芝的栽培过程中抑制杂菌的生长，具有显著的效果。
表2：菌丝生长情况
本发明的培养基经过菌丝发育试验后，其菌丝伸展速度快速，菌丝健壮，后期出芝试验中也表明本发明的培养基用于栽培灵芝，栽培周期适中，灵芝产量和品质相对于现有技术有明显的提高。本发明的培养基所含的营养物质能够充分满足灵芝营养生长和生殖生长的基本要求，且经上述配方栽培出的灵芝子实体硕大美观，品质优越。
实验例：通过本发明得到的灵芝对癌细胞的抑制作用
1、实验材料：本发明实施例3、对比例制备的灵芝，通过相同的制备方法得到的灵芝提取物。
实验地点：广西桂林医学院。
2、肿瘤细胞株：人肺源腺癌细胞SPCA-1，用RPMI-1649培养液，37℃，5％CO2，相对湿度100％培养，贴壁细胞0.25％胰蛋白酶消化传代。
3、方法MTT比色法测定提取物对肿瘤细胞生长的抑制作用。取对数生长期细胞，用新鲜的RPMI-1640培养液配制成细胞悬液，悬浮细胞1X105个/ml贴壁细胞0.8X105个/ml。悬浮细胞分别加入不同浓度实验药物后接种于96孔培养板中；贴壁细胞先接种于96孔培养板中，每孔90μl，24h后分别加入不同浓度实验药物。终体积为每孔100μl且每组设3个平行孔，共设4组：受试药组T(培养液+细胞悬液+不同浓度受试药)、阴性对照组N(培养液+细胞悬液)、药物颜色对照组TC(培养液+不同浓度受试药)、空白对照组B(培养液+生理盐水)。受试药浓度依次为10μ份/m1,30μ份/m1,50μ份/ml。置37℃，5％CO2培养箱中培养72h后，向每孔加入MTT溶液10μl震荡混匀后，继续培养4h，加入SDS90μl终止培养，37℃过夜，然后室温下在微量振荡器上震荡10min,酶标仪测定570nm波长处的吸光度(OD值)，实验重复3次。
按以下公式计算生长抑制率:
生长抑制率(％)＝[(N组OD均值-B组OD均值)-(T组OD均值-TC组OD均值)]/[N组OD均值-B组OD均值]X100％。
4、药物对人肺源腺癌细胞SPCA-1的抑制率结果见表3。
表3：对SPCA-1的抑制率结果
结果表明，实施例3、对比例制备的灵芝提取物对SPCA-l细胞的增殖有抑制作用，实施例3疗效好于对比例。
Claims (5)
1.一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，其特征在于：由下述重量份的原料制成：木屑35-70份、辅料25-60份、石膏0.5-1.5份、糖0.1-1份、穿心莲1-5份，料水比为1：1.3-1.5；
所述的辅料为棉籽壳、麦麸、玉米粉中的一种或几种组成，当混合使用时，可以是任意比例。
2.根据权利要求1所述的一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，其特征在于：由下述重量份的原料制成：木屑42份、辅料53份、石膏1份、糖1份、穿心莲3份，料水比为1：1.3-1.5。
3.根据权利要求1或2所述的一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，其特征在于：所述的灵芝为鹿角灵芝、平盖灵芝。
4.根据权利要求1或2所述的一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，其特征在于：所述的木屑来源枫木和椎木。
5.根据权利要求1或2所述的一种添加了穿心莲的灵芝代料栽培培养基，其特征在于：所述的穿心莲为新鲜或干制后的穿心莲、或者生产中成药后获得的残渣、或者经过提取穿心莲活性成分后得到的穿心莲残渣。
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