CN104013566A - 一种具有美白功效的中药组合物、其制备方法及其美容应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种具有美白功效的中药组合物,其组方包括白术(5~30重量份)、甘草(1~20重量份)、当归(5~75重量份)、白芍(5~30重量份)及茯苓(5~30重量份)。本发明还提供所述中药组合物的提取物的制备方法及其美白美容用途。本发明提供的中药组合物天然绿色、健康安全;其提取物能有效地抑制酪氨酸酶活性和黑色素的生成,同时具有清除自由基和抗紫外线等多重功效,可作为美白剂应用于制备具有美白功效的化妆品,具有广泛的应用价值。

Description

一种具有美白功效的中药组合物、其制备方法及其美容应用
技术领域
本发明涉及一种护肤组合物,具体地说是一种具有美白功效的中药护肤组合提取物及由该护肤组合提取物制备得到的中药护肤制剂。 
背景技术
一白遮百丑,是中国几千年来不变的传统审美观点。每一个女性都希望自己的肌肤能***,也就是我们所说的白皙无瑕,有血色等等。针对女***美的心理和对于肌肤美白的强烈需求,市面上出现了数之不尽的美白产品。 
针对黑色素生成的途径和影响因素,皮肤美白和皮肤护理的主要途径包括以下几个方面:(1) 通过抑制皮肤黑色素细胞增殖,减少黑色素细胞生成的数量;(2) 通过抑制皮肤黑色素生成的关键酶-酪氨酸酶的催化活性,降低黑色素的生物合成,达到美白的目的;(3) 通过防晒,防止阳光中紫外线对皮肤的伤害(晒黑和晒伤),减缓皮肤老化;(4)是通过使用抗氧剂去除皮肤中的氧自由基,减缓黑色素生成和减缓皮肤老化。 
目前国内外大多数化妆品中的美白剂都是通过抑制酪氨酸酶活性,以减少黑色素的生成而达到美白的效果。虽然一些非天然和天然的美白剂被发现和应用,但它们中很少有既安全,效果又好的产品,如氢醌对皮肤的刺激性非常大;曲酸易变色且对皮肤也有一定的刺激性;熊果苷作用单一和效果不佳等等。 
随着人们对皮肤健康关注度的增高,开发具有安全稳定、效果明显且性价比高的天然美白剂,已成为当前医药和化妆品行业的主要研究方向之一,具有非常好的发展前景。将天然物质应用于化妆品,不仅可达到护肤以及皮肤治疗等多重功效,同时具有功能多样、适用面广、安全性能高等优点,因而日益受到重视。 
本文以我国传统中医学理论为基础,选取白术、甘草、当归、白芍和茯苓等五味中药进行科学组方,验证了其对黑素瘤B16细胞中酪氨酸酶活性及黑色素生成的抑制效应以及对自由基的清除能力等美白功效,研制出了一款同时具有美白功效和预防紫外光刺激的一种中药复方提取物。 
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有美白功效的中药组合物。 
本发明的再一目的在于提供一种上述中药组合物活性成分的制备和纯化方法。 
本发明的第三目的在于提供利用上述中药提取物制备的护肤组合物。 
本发明中药组合物包括白术(Atractylodes macrocephala Koidz. 的干燥根茎)、甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.、Glycyrrhiza inflata Bat. 或 Glycyrrhiza glabra L. 的干燥根或根茎)、当归(Angelica sinensis (Oliv.) Diels的干燥根)、白芍(Paeoniae lactiflora Pall. 的干燥根)和茯苓(Poria cocos (Schw.) Wolf的干燥菌核)五味药物组合,具有补益肝肾、健脾助运、调理气血等多重功效。五味药物的功效简介如下: 
白术:白术性温,味苦、甘,归脾、胃经。具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎等功效。
甘草:甘草性平,味甘,归十二经。具有解毒、祛痰、止痛、解痉等功效。 
当归:当归性温,味甘、辛。归肝、心、脾经。具有补血活血,调经止痛,润肠通便等功效。 
白芍:白芍性凉,味苦酸,归肝、脾经。具有养血柔肝,缓中止痛,敛阴收汗等功效。 
茯苓:茯苓性平,味甘、淡。归心、脾、肺、肾经。具有渗湿利水、健脾和胃、宁心安神等功效。 
在发明中,重量份是指任何重量单位,例如克(g)、公斤(kg)等。 
本发明提供一种具有美白功效的中药组合物,该中药组合物由白术、甘草、当归、白芍和茯苓制成。 
在某些实施方案中,本发明组合物由下列重量份配比的原料药制成: 
白术5~30重量份、甘草1~20重量份、当归5~75重量份、白芍5~30重量份、茯苓5~30重量份。
在某些实施方案中,本发明组合物由下列重量份配比的原料药制成: 
白术15~25重量份、甘草5~15重量份、当归15~75重量份、白芍15~25重量份、茯苓15~25重量份。
在某些实施方案中,所述白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:1.5-6:2:2。 
在某些实施方案中,所述白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:3:2:2。 
在某些实施方案中,本发明组合物由下列重量份配比的原料药制成: 
白术20重量份、甘草10重量份、当归30重量份、白芍20重量份、茯苓20重量份。
本发明提供一种具有美白功效的中药组合提取物,所述提取物由本发明组合物经中药常规提取方法提取得到。 
本发明提供所述中药提取物或者所述中药组合物在制备外用护肤制剂中的应用。 
在某些实施方案中,本发明外用护肤制剂为乳膏、油膏、面霜、精华素或洗面奶。 
本发明提供一种具有美白功效的护肤品添加剂,其包含本发明的中药提取物或者本发明的中药组合物和护肤品领域可接受的辅料。 
一种制备中药组合物的方法,其包括: 
(1) 称取适量重量份所述各中药原料;
(2) 将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,回流提取4小时;
(3) 然后再用8倍重量体积和5倍重量体积的水分别回流提取2小时和1小时,合并三次提取液; 
(4) 冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5) 将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6) 然后再用乙醇洗脱,乙醇的浓度为60%~95%;
(7) 收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥得到中药提取物粉末。
在本发明方法中,所述步骤(4)中药提取浓缩液,需经过大孔树脂吸附纯化。 
在本发明方法中,所述步骤(5)中树脂吸附物,需用乙醇洗脱,乙醇的浓度为60%~95%,最后经冷冻干燥得到提取物粉末。 
本发明方法制备得到的中药提取物可在制备美白功效的外用护肤制剂中应用。 
在本发明的美容美白用途,所述外用护肤制剂为乳膏、油膏、面霜、精华素或洗面奶。 
本发明提供一种具有美白功效的护肤品添加剂,其包含本发明方法制备得到的中药提取物和护肤品领域可接受的辅料。 
本发明提供中药组合物经提取、纯化得到的中药提取物具有很好的美白功效。整个过程制备方法简便,利用其制备得到的护肤制剂,本发明产品安全可靠,功效显著,易吸收。中药提取物本身具有活血理气、活化细胞、抗氧化、延缓衰老等功效,故可将其作为功效性植物添加剂添加到化妆品中,尤其是在制备具有美白活肤抗皱功效的化妆品中,具有广泛应用。 
  
附图说明
图1 为本发明提供的中药提取物对B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性抑制试验图。中药提取物对黑素瘤B16 细胞中酪氨酸酶活性的影响:* p<0.05 相对于空白对照具有显著性差异;** p<0.01 相对于空白对照具有非常显著性差异。 
图2 为本发明提供的中药提取物对B16黑素瘤细胞中黑色素含量的影响试验图。中药提取物对黑素瘤B16 细胞中黑色素生成的影响:* p<0.05 相对于空白对照具有显著性差异;** p<0.01 相对于空白对照具有非常显著性差异。 
图3 为本发明提供的中药提取物抗氧化效果试验图。中药提取物的抗氧化活性评价:* p<0.05 相对于空白对照具有显著性差异;** p<0.01 相对于空白对照具有非常显著性差异。 
图4 为本发明提供的中药提取物紫外吸收效果图。不同浓度中药提取物对紫外线的吸收效果评价:表明了中药复方提取物在0.1 mg/mL和0.25 mg/mL时对200 ~ 400 nm波段的紫外线具有较好的吸收作用,即使中药复方提取物在比较低的浓度下(0.1 mg/mL)仍然具有很好的防紫外线效果。 
  
具体实施方式
本实施例所用药材均从香港浸会大学中医诊所购买得到,质量符合中华人民共和国药典2010年版标准。 
  
实施例1 本发明中药提取物的制备
(1)按照下述组合物称取各中药原料:
白术20g、甘草10g、当归30g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,加热回流提取4小时;
(3)然后再用8倍重量体积和5倍重量体积的水分别回流提取2小时和1小时,合并提取液;
(4)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6)然后用95%乙醇洗脱;
(7)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥,得到本发明提供的中药提取物。
  
实施例2 本发明中药提取物的制备
(1)按照下述组合物称取各中药原料:
白术20g、甘草10g、当归30g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,加热回流提取4小时; 
(3)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(4)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(5)然后用95%乙醇洗脱;
(6)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥,得到本发明提供的中药提取物。
  
实施例3 本发明中药提取物的制备
(1)按照下述组合物称取各中药原料:
白术20g、甘草10g、当归30g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,回流提取4小时;
(3)然后再用8倍重量体积和5倍重量体积的水分别回流提取2小时和1小时,合并提取液;
(4)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6)然后用60%乙醇洗脱;
(7)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥,得到本发明提供的中药提取物。
  
实施例4 本发明中药提取物的制备
(1)按照下述组合物称取各中药原料:
白术20g、甘草10g、当归30g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,回流提取4小时;
(3)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(4)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(5)然后用60%乙醇洗脱;
(6)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥,得到本发明提供的中药提取物。
   
实施例5 本发明中药提取物的制备
(1)按照下述组合物称取各中药原料:
白术20g、甘草10g、当归15g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,回流提取4小时;
(3)然后再用8倍重量体积和5倍重量体积的水分别回流提取2小时和1小时,合并提取液;
(4)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6)然后用95%乙醇洗脱;
(7)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥,得到本发明提供的中药提取物。
  
实施例6 本发明中药提取物的制备
(1)按照下述组合物称取各中药原料:
白术20g、甘草10g、当归40g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,回流提取4小时;
(3)然后再用8倍重量体积和5倍重量体积的水分别回流提取2小时和1小时,合并提取液;
(4)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6)然后用95%乙醇洗脱;
(7)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥,得到本发明提供的中药提取物。
  
实施例7 本发明中药提取物的制备
(1)按照下述组合物称取各中药原料:
白术20g、甘草10g、当归75g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,回流提取4小时;
(3)然后再用8倍重量体积和5倍重量体积的水分别回流提取2小时和1小时,合并提取液;
(4)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6)然后用95%乙醇洗脱;
(7)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥,得到本发明提供的中药提取物。
  
实施例8 本发明护肤乳膏的制备
原料及配比(质量百分比):
1、原料及用量:
中药提取物                                          5~50      g
油 相:              乳化蜡                       90          g
                           白蜡                           150        g
                           液体石蜡                   60          g
水 相:              苯氧乙醇                   10          g
                           去离子水                   700        g
2、制备方法:
(1)按上述的组分及用量称取各原料;
(2)将A相(油相)和B相(水相)分别加热至80℃搅拌使原料溶解完全;
(3)将A相加入乳化锅中搅拌,搅拌速率为100转/分钟,边搅拌边将B相加入乳化锅中,加入的速度以乳化锅中B相原料全部乳化为准,当B相原料全部加入后继续搅拌均质10分钟,搅拌速率为100转/分钟,加热至80℃保温,20分钟后开始降温,当温度降到60℃时加入中药提取物原料,搅拌均匀后继续降温,当温度在20℃时均质1~2分钟出料即可。
  
实施例9 本发明护肤油膏的制备
1、原料及用量:
                            中药提取物              5~50      g
                            乳化蜡                       300        g
                           白蜡                           500        g
                           液体石蜡                   200        g
                           苯氧乙醇                   10         g
2、制备方法:
(1)按上述的组分及用量称取各原料;
(2)将乳化蜡、白蜡、液体石蜡以及苯氧乙醇按比例混合后,加热至80℃使原料溶解完全,搅拌均质10分钟,然后开始降温;
(3)当温度降到60℃时加入中药提取物原料,恒温搅拌使分散均匀,然后缓速降温至20℃出料即可。
  
实施例10 不同制备方法对提取物收率的影响
实验步骤:
(1)按照下述组合物称取各中药原料;
白术20g、甘草10g、当归30g、白芍20g、茯苓20g
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时;
(3)按照实施例1-4的方法份分别提取中药,收集提取液;
(4)提取液冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6)然后用95%或60%的乙醇洗脱;
(7)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,冷冻干燥;
(8)记录提取物经冷冻干燥后得到的粉末的重量,按下列公式计算提取效率:
              提取效率(%)= 提取物粉末的重量/药材的重量×100%
不同制备方法对中药提取效率影响的结果见附表1。虽然提取次数的增加可以略微提高提取效率,但60%乙醇和95%的乙醇洗脱物的收率差别不大。因此,我们选取提取3次,然后用95%的乙醇洗脱的方法来进行样品制备。
表1 不同制备方法的提取物收率 
实施例 药材重量(g) 提取物重量(g) 提取效率(%)
实施例1 25 0.65 2.6
实施例2 25 0.55 2.2
实施例3 25 0.61 2.4
实施例4 25 0.50 2.0
实施例11 提取液对黑素瘤B16细胞中酪氨酸酶活性的影响
黑色素是在黑色素细胞内合成的一种生物色素,其生物合成是一个多步骤的酶促反应,参与的酶主要包括酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白-1和酪氨酸酶相关蛋白-2。在黑色素的形成过程中,酪氨酸酶起了关键酶(限速酶)的作用。因此,皮肤美白剂就是通过作用于皮肤黑色素的生成和代谢过程,抑制黑色素的产生和沉积,并符合安全规范的物质。本试验体系中,通过测定细胞中酪氨酸酶对其底物L-酪氨酸的催化反应,评价中药提取物(实施例1 制备得到)对黑素瘤B16细胞内酪氨酸酶活性的抑制作用。
实验所需溶液配制: 
a :准确称取9.55 g 磷酸缓冲液(DPBS)粉末,溶于950 mL蒸馏水中,用10 N 的盐酸调节至pH = 6.8,然后补加蒸馏水至1,000 mL;
b :0.2% L-酪氨酸溶液:准确称取0.2 g L-酪氨酸,用pH = 6.8的磷酸缓冲溶液(PBS)溶解并定容至100 mL;
c: 1% Triton X-100磷酸缓冲溶液(1% Triton X-100 PBS):准确移取1 mL的Triton X-100,用pH = 6.8的磷酸缓冲溶液(PBS)溶解并定容至100 mL。
  
实验步骤:
(1)选择对数生长期的细胞制成单细胞悬液,以每孔4×104 细胞/1 mL接种于24 孔培养板,于37℃、体积分数为5%CO2的培养箱内培养过夜;
(2)移去培养液后,每孔分别加入含不同浓度提取物(150 μg/mL,200 μg/mL,300 μg/mL,实施例1 制备得到)的培养液 1 mL,同时以不加提取物的培养液作为空白对照,以曲酸(250 μM和500 μM)为阳性对照;
(3)加药后,将细胞在37℃、体积分数为5% CO2的培养箱内培养。48小时后,倾去培养液,用生理盐水洗2 次;
(4)加入150 μL 的1% Triton X-100磷酸缓冲溶液(pH = 6.8),-20℃冻融裂解后,转移至1.5 mL的离心管中,以14, 000 rpm的速度于4℃下离心10分钟;
(5)用卡马斯蓝法测定上清液中的蛋白含量;
(6)同时吸取50 μL的上清液于96孔板中,加入50 μL 2% L-酪氨酸溶液,37 ℃下避光孵育2小时,于475 nm波长下测定吸光度, 用蛋白含量进行校正;
(7)按下列公式计算相对酪氨酸酶活性:
              相对酪氨酸酶活性(%)= 药物处理组/空白对照组×100%。
  
实施例12 提取液对黑素瘤B16 细胞中黑色素生成的影响
实验所需溶液配制:
a :1 N的氢氧化钠溶液:准确称取4 g 氢氧化钠(NaOH)粉末,溶于100 mL蒸馏水中;
b :1% Triton X-100磷酸缓冲溶液(1% Triton X-100 PBS) :准确移取1 mL的Triton X-100,用pH = 6.8的磷酸缓冲溶液(PBS) 溶解并定容至100 mL;
实验步骤:
(1)选择对数生长期的细胞制成单细胞悬液,以每孔4×104 细胞/1 mL接种于24 孔培养板,于37℃、体积分数为5% CO2的培养箱内培养过夜;
(2)移去培养液后,每孔分别加入含不同浓度提取物(150 μg/mL,200 μg/mL,300 μg/mL,实施例1 制备得到)的培养液 1 mL,同时以不加提取物的培养液作为空白对照,以曲酸(250 μM和500 μM)为阳性对照;
(3)加药后,将细胞在37℃、体积分数为5% CO2的培养箱内培养。48小时后,倾去培养液,用生理盐水洗2次;
(4)加入150 μL的1% Triton X-100磷酸缓冲溶液(pH = 6.8),-20℃冻融裂解后,转移至1.5 mL的离心管中,以14,000 rpm的速度于4℃下离心10分钟;
(5)用卡马斯蓝法测定上清液中的蛋白含量;
(6)移除上清液后,加入100 μL 1 N的氢氧化钠溶液,于80℃水浴保温2小时后于405 nm测定吸光度;
(7)以黑色素标准品绘制标准曲线,计算细胞中黑色素的含量,用蛋白含量进行校正;
(8)按下列公式计算相对黑色素合成量:
              相对黑色素合成量(%)= 药物处理组/空白对照组×100%。
  
实施例13 不同比例中药组合提取液对B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性抑制效果及黑色素含量的影响
(1)准确称取中药复方提取物(实施例1及实施例5-7 制备得到)溶解于细胞培养液中配制成10 mg/mL的溶液,经0.2 μm微孔滤膜过滤,用培养液稀释成200 μg/mL的溶液。
(2)根据上述方法2和3的所述,采用固定浓度的提取液(实施例1及实施例5-7 制备得到),比较不同比例的中药组合对B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性抑制效果及黑色素含量的影响。 
比较分析的结果见表2。结果表明,当归所占的重量份在一定的比例范围内影响提取物的美白效果。随当归的重量份在15-75重量份内增加的时候,提取物对酪氨酸酶活性的抑制效果曾先升后降的趋势。同时,细胞中黑色素的含量也呈类似的变化。综合考虑提取液对酪氨酸酶活性的抑制效果及黑色素含量的影响两个方面的作用,我们选取实施例1(即白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:3:2:2)制备得到的提取物进一步评价其美白功效。 
  
表2 不同比例中药组合提取物对B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性影响的比较
提取物 相对酪氨酸酶活性(%) 相对黑色素含量(%)
实施例5 92.7±4.0 100.8±5.3
实施例1 74.9±12.5 * 89.6±6.9 *
实施例6 85.2±0.4 * 89.7±17.5 *
实施例7 85.4±11.3 * 94.8±8.2
相对于空白对照 (100%),* p<0.05具有显著性差异;** p<0.01具有非常显著性差异。
实施例5中,白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:1.5:2:2; 
实施例1中,白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:3:2:2;
实施例6中,白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:4:2:2;
实施例7中,白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:7.5:2:2。
  
实施例14 提取液对黑素瘤B16细胞中酪氨酸酶活性的抑制效果及黑色素含量的影响
(1)准确称取中药复方提取物(实施例1制备得到)溶解于细胞培养液中配制成10 mg/mL的溶液,经0.2 μm微孔滤膜过滤,用培养液稀释成150 μg/mL, 200 μg/mL 和 300 μg/mL 的溶液。
(2)根据上述方法2和3的所述,测定不同浓度的提取液(实施例1 制备得到)对B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性抑制效果及黑色素含量的影响。 
不同浓度的提取液对B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性的抑制实验的结果见图1,其对黑色素合成量实验的结果见图2。结果表明,随着提取液浓度的增加,细胞中酪氨酸酶的活性逐渐降低,黑色素的合成逐渐减少,证明该提取物有明显的美白功效。 
  
实施例15 提取液的抗氧化活性评价
(1)准确称取中药复方提取物(实施例1 制备得到)溶解于甲醇中配制成10 mg/mL的溶液,分别吸取40 μL、70 μL、100 μL,用甲醇定容至1 mL;
(2)准确吸取0.2 mL的测定液或甲醇(空白对照),加入1.8 mL 0.1 mol/L的DPPH甲醇溶液,于25℃避光孵育30 min; 
(3)于517 nm下测定吸光度,按下列公式计算计算中药复方提取物对DPPH自由基的清除能力
公式:自由基清除率(%)= (空白对照组-药物组)/空白对照组 × 100%
抗氧化试验的结果见图3,随着提取液浓度的增加,自由基清除的能力逐渐提高,证明该提取物有明显的抗氧化功效。
  
实施例16 提取液对紫外线的吸收效果评价
阳光中的紫外线是200 ~ 400 nm的电磁波,其中280~320 nm的UVB区和320~400 nm的UVA区的紫外线,能使皮肤晒红、晒黑、晒伤。化妆品中加入一定量的防晒剂,能预防减少紫外线对人体的损伤。
根据紫外线所在波段的范围,测定待测样品于280~400 nm波段的紫外吸光度,评价中药复方提取物(实施例1制备得到)的防紫外线的效果(QBT 2334-1997紫外分光光度计法定性测定化妆品中紫外线吸收剂, 中华人民共和国轻工行业标准)。 
实验步骤: 
(1)称取 1 mg的中药复方提取物(实施例1制备得到),加95%乙醇1 mL溶解,分别取样品0.25 mL、0.1 mL用95% 乙醇稀释定容至1 mL作为待测试样(0.25 mg/mL, 0.1 mg/mL);
(2)以95%乙醇为空白对照,于紫外分光光度计测定中药提取物溶液在200~400 nm波长的吸收;
(3)若仪器在此波长范围内有吸收峰则该样品含紫外吸收剂,无吸收峰则该样品不含紫外吸收剂
实验结果如图4 所示,中药复方提取物(0.1 mg/mL)对200~400 nm波段的紫外线有较好的吸收,说明中药复方提取物在比较低的浓度下仍然具有很好的防晒效果。

Claims (16)

1. 一种具有美白功效的中药组合物,其特征在于,该中药组合物由白术、甘草、当归、白芍和茯苓制成。
2. 根据权利要求1 所述的中药组合物,其特征在于,所述组合物由下列重量份配比的原料药制成:
白术 5~30重量份、甘草 1~20重量份、当归 5~75重量份、白芍 5~30重量份、茯苓 5~30重量份。
3.根据权利要求2所述的中药组合物,其特征在于,所述组合物由下列重量份配比的原料药制成:
白术 15~25重量份、甘草 5~15重量份、当归 15~75重量份、白芍 15~25重量份、茯苓 15~25重量份。
4.根据权利要求1-3任一项所述的中药组合物,其特征在于,所述白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:1.5-6:2:2。
5.根据权利要求4所述的中药组合物,其特征在于,所述白术、甘草、当归、白芍和茯苓的重量配比为2:1:3:2:2。
6.根据权利要求1-3任一项所述的中药组合物,其特征在于,所述组合物由下列重量份配比的原料药制成:
白术 20重量份、甘草 10重量份、当归 30重量份、白芍 20重量份、茯苓 20重量份。
7.一种具有美白功效的中药组合提取物,其特征在于,所述提取物由权利要求1-6任一项所述的组合物经中药常规提取方法提取得到。
8.权利要求7所述的中药提取物或者权利要求1-6任一项所述的中药组合物在制备外用护肤制剂中的应用。
9.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述外用护肤制剂为乳膏、油膏、面霜、精华素或洗面奶。
10.一种具有美白功效的护肤品添加剂,其包含权利要求7所述的中药提取物或者权利要求1-6任一项所述的中药组合物和护肤品领域可接受的辅料。
11.一种权利要求7所述的中药组合物的制备方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)称取所述各中药原料;
(2)将中药用10倍重量体积的水浸泡,浸泡时间为1小时,回流提取4小时;
(3)然后再用8倍重量体积和5倍重量体积的水分别回流提取2小时和1小时,合并三次提取液; 
(4)冷却至室温后,用3~5 μm的滤纸或滤器过滤,取滤液浓缩至适当的体积;
(5)将浓缩液加到大孔树脂柱上静态吸附4小时,先用5~8倍柱体积的水洗脱至洗脱液无色;
(6)然后再用乙醇洗脱,乙醇的浓度为60%~95%;
(7)收集乙醇洗脱液,减压浓缩至完全去除乙醇后,用适量的水溶解提取物,经冷冻干燥得到中药提取物粉末。
12.根据权利要求11所述的方法,其特征在于,所述步骤(4)中药提取浓缩液,需经过大孔树脂吸附纯化。
13.根据权利要求11所述的方法,其特征在于,所述步骤(5)中树脂吸附物,需用乙醇洗脱,乙醇的浓度为60%~95%,最后经冷冻干燥得到提取物粉末。
14.权利要求11至13中任意一项所述方法制备得到的中药提取物在制备美白功效的外用护肤制剂中的用途。
15.根据权利要求14所述的用途,其特征在于,所述外用护肤制剂为乳膏、油膏、面霜、精华素或洗面奶。
16.一种具有美白功效的护肤品添加剂,其包含权利要求11至13中任意一项所述方法制备得到的中药提取物和护肤品领域可接受的辅料。
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