CN103983495A - 一种河鲀毒素阳性质控样品及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，步骤为将鲜红鳍东方鲀取肌肉组织后均质，测定其中河鲀毒素的含量，验证是否含有河鲀毒素，若为阳性样品，将含有毒素的阳性样品用阴性样品和分散剂稀释混匀，继续测定其中毒素的含量，达到要求后，将样品分装，适当温度下保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析；若为阴性样品，将河鲀毒素标准溶液添加到阴性样品中，加入分散剂混匀，测定其中河鲀毒素的含量，达到要求后，将样品分装，适当温度下保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析。本发明所述的质控样品制备简单，具有足够的稳定性和均匀性；保存时间长，可用于实验室质量控制。

Description

一种河鲀毒素阳性质控样品及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种河鲀毒素(Tetrodotoxin，TTX)阳性质控样品及其制备方法，属于食品安全检测技术领域。

背景技术

东方鲀(包括红鳍东方鲀(Fugu rubripes)和暗纹东方鲀(Fugu obscurus)等)是目前大规模人工养殖鲀类鱼种，鱼肉中的蛋白和脂类含量丰富，去毒处理后即为珍贵的美味佳肴。为了监测不同季节河鲀鱼毒性，快速、准确地测定河鲀鱼组织中TTX含量，区分有毒河鲀和无毒河鲀，实时了解常见河鲀鱼的毒性差异及变化情况，十分必要建立一种快速便捷、灵敏度高、可操作性强的TTX检测方法，而制备实用的河鲀毒素阳性质控样品，可在TTX检测过程中与实际样品同时检测，以衡量河鲀鱼基质中河鲀毒素检测结果的可靠性，对提高河鲀鱼的食用安全性以便打开国内外河鲀鱼市场具有重要意义；也为食品安全、环境监测、卫生检验检疫等方面的测量和研究工作提供技术支撑和量值溯源保障。

河鲀鱼肉味鲜美，营养丰富，生食、烹调、加工皆宜，但由于含有剧毒的河鲀毒素(Tetrodotoxin，TTX)，至今不能成为大众餐桌上的食品。河鲀毒，即河鲀体内含有的一种剧毒神经性毒素，亦存在于蝾螈、斑足蟾以及腹足类动物体内，是目前自然界中发现的最毒非蛋白物质之一，其毒性相当于剧毒药品***的1250倍，只需0.48mg即能致人死命，与石房蛤毒素、肉毒鱼毒素合称海洋三大公害毒素。随着渔业的发展,近年来河鲀鱼中毒事件的屡见报端。在日本、中国大陆、台湾省和一些东南亚国家食用河鲀鱼和腹足类动物的中毒事件时有发生，在中国尤其是食用小型腹足类动物织纹螺等中毒事件多有报道，并导致多人死亡而成为严重的公共卫生问题(P.A.Hwang et al，2007)。欧盟法规《Regulation853/2004/EC》和《Regulation854/2004/EC》规定有毒的河鲀鱼及类似品种禁止在欧盟市场销售。

阳性质控样品是一种与待测样料相同或相似的，但带有溯源性确认并具有规定测量不确定度标准值的材料，在贮存量值和传递量值方面具有实物量具的特性。因而阳性质控样品对于保证检测结果的可靠性和有效性，保证检测标准在实验室间得到有效实施具有重要作用。

目前已有河鲀毒素标准物质，例如国家***第三研究所研制的河鲀毒素标准样品(实为不含河鲀鱼组织基质的提纯标准品),但河鲀毒素的基质标准样品尚未见研究制备的报道，

由于河鲀毒素的性质微溶于水(含在脏器中的毒素能溶于水)、乙醇，浓酸，易溶于稀酸,不溶于任何中性有机溶剂，包括***、甲醇、乙醇、丙酮、N,N’-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、苯、氯仿和乙腈等。这种不易溶于任何一种中性有机溶剂的物理化学特性，以及河鲀鱼组织复杂的基质效应的存在，使得河鲀毒素的定量测定一直是食品检测、生态学以及医学研究领域的一个挑战。为保证检测结果的可靠性和有效性，目前亟待基体TTX阳性质控样品的研制。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种基体TTX阳性质控样品，所述的质控样品具有足够的稳定性和均匀性。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，包括阳性样品稀释和阴性样品标准物质添加两种方案，包括下列步骤：将鲜红鳍东方鲀取肌肉组织后均质，测定其中河鲀毒素的含量，验证是否含有河鲀毒素，若为阳性样品，将含有毒素的阳性样品用阴性样品和分散剂稀释混匀，继续测定其中毒素的含量，达到标识含量要求后，将样品分装，适当温度下保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析；若为阴性样品，将河鲀毒素标准溶液添加到阴性样品中，加入分散剂混匀，测定其中河鲀毒素的含量，达到要求后，将样品分装，适当温度下保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析。

上述所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，具体包括下列步骤：

(1)取鲜红鳍东方鲀取肌肉组织，均质机均质，均质过程中压强为25-35Mpa，均质时间采用梯度时间法，共均质三次，每次的时间分别为15-20min、10-15min、5-10min；

(2)将均质好的样品进行毒素测定，采用常规方法测定即可，根据是否含有毒素，制备方法分为阳性样品稀释和阴性样品标准添加两种；

1.阳性样品稀释：将含有毒素的阳性样品用阴性样品和分散剂稀释混匀，分散剂重量占阳性样品和阴性样品总重量的8-12％，稀释混匀采用分步稀释法，将阴性样品和分散剂平均分成3-5份，加入一份阴性样品和分散剂后均质一次，每次均质时间为3-5min；

2.阴性样品标准添加：将河鲀毒素标准溶液添加到经测定不含河鲀毒素的鲜红鳍东方鲀肌肉组织中，然后平均分3-5次加入分散剂混匀，每加一次分散剂均质一次，每次均质时间为3-5min，加入分散剂的总量占阴性样品总量的8-12％。

(3)测定步骤(2)中样品的毒素含量；

(4)毒素含量达到标识含量要求后，将样品分装，适当温度保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析。

优选的，步骤(1)中，肌肉组织在均质机中均质之前，将肌肉组织加热到40-50℃，均质时均质温度控制在30-40℃。肌肉组织在均质机中均质之前加热和均质过程中保持一定温度，可以更好的将毒素溶出。

所述分散剂为C₁₈，石墨化碳、白炭黑、硅藻土中的一种或二种的组合。加入分散剂可有利于降低样品基质粘度，便于TTX毒素均匀分散在基质中，使样品稳定；也与样品检测过程中前处理过程保持一致，在样品测定过程中具有吸附杂质，净化提取液的特点。(作用原理GCB表面的碳原子之间皆为SP2杂化，有单电子对和活泼离子，并具有六边形的微观结构，使得它对于平面分子或者含有平面芳香环的分子具有强烈的吸附作用，能去除具有共轭结构的苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和组氨酸等杂质；GCB表面总体表现为憎水性，可吸附非极性与弱极性化合物；其次表面存在一些极性位点使它能够作为离子交换剂或吸附极性化合物，在本实验的提取条件下可吸附河鲀鱼风味成分谷氨酸、精氨酸、天门冬酸等，表现为广谱的吸附性能；C₁₈也是一种非极性广谱性净化剂，能够有效吸附提取非极性杂质；而硅藻土则具有筛分作用、深层过滤和通过分子间力(范德华力)、Zeta电位和离子交换作用达到吸附杂质的效果。)

优选的，步骤(4)毒素含量达到标识含量要求后，可继续将样品冷冻干燥或烘干，做成粉状或湿粉状或浆状。

毒素的标识含量可标识为：1～10μg/kg多个含量系列；样品量分别相当于1g样品、2g样品、3g样品、4g样品、5g样品等，以便于与实际操作称样量一致。

优选的，样品保存条件为4℃、低温或超低温保存。

本发明还提供一种利用所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法获得河鲀毒素阳性质控样品。(这一句是什么意思？)

本发明所述质控样品中基质河鲀毒素(TTX)的天然来源包括自然生成的含毒河鲀鱼或织纹螺等生物机体，但不局限于这几种。

所述质控样品中河鲀毒素(TTX)来源为河鲀毒素(TTX)标准物质(包括天然提纯和化学合成)。

本发明的有益效果是：

本发明所述的质控样品制备简单，具有足够的稳定性和均匀性；保存时间长，可用于实验室质量控制。所加入的分散剂具有分散、稳定、有助于分析检测程序中前处理过程的提取净化等功能。

具体实施方式

结合实施例对本发明作进一步具体描述，但不局限于此。

制备和配方实施例1(空白基质标准添加法，配方为C₁₈和石墨化碳粉末，此例中添加剂C₁₈和石墨化碳比例为1:1)

1)取样并初步检测TTX含量取人工养殖的鲜红鳍东方鲀，剪开背部表皮取肌肉部分并避免取到血液和内脏，得到400g肌肉组织，用分析研磨机(IKA A11B25)均质后分析测定，结果为该样品中不含有河鲀毒素；2)加标混匀加入含有20μg TTX的标准溶液,混匀15min；3)加入分散剂和稳定剂平均分3-5次加入分散剂(C₁₈和石墨化碳粉末各20g)混匀，每加一次分散剂均质一次，每次均质时间为3-5min，加入分散剂的总量占阴性样品总量的10％，充分混匀后用HPLC-MS/MS方法测定TTX含量，测定结果在可接受范围内，再测定进行均匀性检查；4)分装、冻存、稳定性检查准确称取1.10g样品于50ml聚丙烯离心管中(相当于1.00g河鲀鱼肉样品)，加盖密封，于-20摄氏度保存，以1个月，2个月，半年，一年为间隔进行稳定性考查。

制备和配方实施例2(空白基质标准添加法，配方为C₁₈和石墨化碳粉末，此例中添加剂C₁₈和石墨化碳比例为2:1)

1)取样并初步检测TTX含量取人工养殖的鲜红鳍东方鲀，剪开背部表皮取肌肉部分并避免取到血液和内脏，得到400g肌肉组织，用分析研磨机(IKA A11B25)均质后分析测定，结果为该样品中不含有河鲀毒素；2)加标混匀加入含有20μg TTX的标准溶液,混匀15min；3)加入分散剂和稳定剂平均分3-5次加入分散剂(C₁₈和石墨化碳粉末分别26.7和13.3g)混匀，每加一次分散剂均质一次，每次均质时间为3-5min，加入分散剂的总量占阴性样品总量的10％，充分混匀后用HPLC-MS/MS方法测定TTX含量，测定结果在可接受范围内，再测定进行均匀性检查；4)分装、冻存、稳定性检查准确称取1.10g样品于50ml聚丙烯离心管中(相当于1.00g河鲀鱼肉样品)，加盖密封，于-20摄氏度保存，以1个月，2个月，半年，一年为间隔进行稳定性考查。

配方实施例3(配方为单一添加剂C18粉末)

1)取样并初步检测TTX含量取人工养殖的鲜红鳍东方鲀，剪开背部表皮取肌肉部分并避免取到血液和内脏，得到400g肌肉组织，用分析研磨机(IKA A11B25)均质后分析测定，结果为该样品中不含有河鲀毒素；2)加标混匀加入含有20μg TTX的标准溶液,混匀15min；3)加入分散剂和稳定剂平均分3-5次加入分散剂(C₁₈40g)混匀，每加一次分散剂均质一次，每次均质时间为3-5min，加入分散剂的总量占阴性样品总量的10％，充分混匀后用HPLC-MS/MS方法测定TTX含量，测定结果在可接受范围内，再测定进行均匀性检查；4)分装、冻存、稳定性检查准确称取1.10g样品于50ml聚丙烯离心管中(相当于1.00g河鲀鱼肉样品)，加盖密封，于-20摄氏度保存，以1个月，2个月，半年，一年为间隔进行稳定性考查。

配方实施例4

添加剂配方为C₁₈粉末，添加剂配方为C₁₈、石墨化碳和硅藻土比例为2：2；1，但不局限于此。

运用实施例1

样品预处理

1)活河鲀鱼冷冻处死，去皮，取其肌肉部分去筋经均质制样机充分粉碎。

2)称取试样(1.00±0.01)g于50mL聚丙烯离心管中，准确加入1％乙酸甲醇(1：99，v/v)溶液5mL，均质30s，于50℃超声提取25min.8000r/min*5min离心，转移上清液至另一洁净离心管中；残渣用4mL1％乙酸甲醇溶液重复提取一次，合并上清液并于4℃12000r/min离心5min，所得上清液待净化；

3)取1.0mL上清液于2mL EP(Eppendorf)管中，加入100mg石墨化碳黑(GCB)和100mg C₁₈粉末剧烈涡旋混合30s，10000r/min离心5min，上层清液经0.22μm聚四氟乙烯-尼龙复合膜过滤后收集于塑料进样小瓶HPLC-MS/MS测定。

阳性质控样测定取50mL聚丙烯离心管包装的河鲀毒素阳性质控样品(相当于河鲀鱼肉基质(1.00±0.01)g)，准确加入1％乙酸甲醇(1：99，v/v)溶液5mL，均质30s，于50℃超声提取25min.8000r/min*5min离心，转移上清液至另一洁净离心管中；残渣用4mL1％乙酸甲醇溶液重复提取一次，合并上清液并于4℃12000r/min离心5min，所得上清液待净化；其余处理同1.23)

均匀性与稳定性检验

均匀性考察

按标准样品工作导则(3)标准样品定值的一般原则和统计方法(GB/T15000.3-2008/ISOGuide35：2006)5.8进行均匀性研究，按总样本单元数N的2×N^1/3随机抽取样本。

按《GB/T5009.206-2007鲜河鲀鱼中河鲀毒素的测定》和《高效液相色谱/串联质谱法测定河鲀组织中TTX》检测，每个样品重复测试2次，；采用方差分析法(F-检验)检验样品的瓶间均匀性。样品均匀性检验结果见表1。

表1 河鲀毒素阳性质控样品均匀性检验结果(μg/kg)

按照样品均匀性检验方法，进行一下计算

m＝13    N＝26

总平均值 $\stackrel{=}{x}=72.85$

组间平方和 $Q_1=\underset{i=1}{\overset{m}{\mathrm{\Σ}}}{n}_i{({\stackrel{\‾}{x}}_i-\stackrel{=}{x})}^2=0.85235$

组内平方和

$Q_2=\underset{i=1}{\overset{m_i}{\mathrm{\Σ}}}\underset{j=1}{\overset{n_i}{\mathrm{\Σ}}}{(x_j-{\stackrel{\‾}{x}}_i)}^2=0.79250$

v₁＝m-1＝12

v₂＝N-m＝13

作统计量F

$F=\frac{\frac{Q_1}{v_1}}{\frac{Q_1}{v_2}}=\frac{0.07103}{0.06096}=1.17$

查附表1F分布临界值表得F_0.05(12,13)＝2.60,F＜F_0.05(12,13)

通过比较组间方差和组内方差，二者比值小于统计检验的临界值，故河鲀毒素阳性质控样品中TTX的含量分布是均匀的。

稳定性考察

JJG1006-1994中规定：

“标准物质应在规定的贮存或使用条件下，定期地进行待定特性量值的稳定性检验。“

“稳定性检验的时间间隔可以按先密后疏的原则安排。在有效期间内应有多个时间间隔的监测数据。”

“选择不低于定值方法精密度和具有足够灵敏度的测量方法进行稳定性检验，并注意操作及实验条件的一致。”

“考察稳定性所用样品应从分装成最小包装单元的样品中随机抽取，抽取的样品数对于总体样品有足够的代表性。”

对河鲀毒素的稳定性进行了监测，在6个月内，分别对河鲀毒素的稳定性测定了4次，每次随机取3支河鲀毒素样品，应用t检验法进行稳定性评价。

t检验法：当标准物质特性量值的标准值已知时，可用t检验法评价标准物质的稳定性，用公式表述为

$|{\stackrel{\‾}{X}}_i-\stackrel{\‾}{X}|\≤t_a(n-1)\·\frac{s}{\sqrt{n}}$

式中，为任一次标准物质稳定性监测的测量平均值；为标准物质特性量值的标准值；t_a(n-1)为t检验临界值；s为测量方法的标准偏差；n为测量次数。

若与t检验临界值t_a(n-1)(见附表2)之间的关系为认为该标准物质的测量值与标准值一致，该标准物质的特性量值没有发生显著性的变化；否则认为该标准物质的特性量值发生了显著性的变化。

河鲀毒素的稳定性考察结果见表2。

表2 河鲀毒素稳定性考察结果(μg/kg)(-20℃)

研制的河鲀毒素阳性质控样经过6个月稳定性考察，在不同时间的测量结果经t检验法分析，其认为该标准物质的测量值与标准值一致，该标准物质的特性量值没有发生显著性的变化。稳定性考察结果表明该阳性质控样在6个月内(4℃)稳定性良好。

5.定值与不确定度评估

定值

JJG1006-1994中规定：

“均匀性合格，稳定性检验符合要求的标准物质方可进行定值。”

“选用下列方式之一对标准物质定值：用高准确度的绝对或权威测量方法定值，用两种以上原理的已知准确度的可靠方法定值，多个实验室合作定值。”

“定值数据的统计处理：

当按《用高准确度的绝对或权威测量方法定值》方式定值时，测量数据可按如下程序处理。

对每个操作者的一组独立测量结果，在技术上说明可疑值的产生并予删除后，可用格拉布斯(Grubbs)法或狄克逊(Dixon)法从统计上再次剔除可疑值。当数值比较分散或可疑值比较多时，应认真检查测量方法、测量条件及操作过程。列出每个操作者测量结果：原始数据、平均值、标准偏差、测量次数。

格拉布斯检验法适用于检验多组测量值均值的一致性和剔除多组测量值中的离群均值；也可用于检验一组测量值一致性和剔除一组测量值中的离群值，方法如下：

有n组测定值，每组测定值的均值分别为其中最大均值记为最小均值记为

计算总均值和标准偏差

$\stackrel{=}{x}=\frac{1}{n}\underset{i=1}{\overset{n}{\mathrm{\Σ}}}{\stackrel{=}{x}}_i,s_{\stackrel{\‾}{x}}=\sqrt{\frac{1}{n-1}\underset{i=1}{\overset{n}{\mathrm{\Σ}}}{({\stackrel{\‾}{x}}_i-\stackrel{=}{x})}^2}$

可疑均值为最小值时，按下式计算统计量(T)：

$T=\frac{\stackrel{=}{x}-{\stackrel{\‾}{x}}_{\min }}{s_{\stackrel{\‾}{x}}}$

可疑均值为最大值时，按下式计算统计量(T)：

$T=\frac{{\stackrel{\‾}{x}}_{\max }-\stackrel{=}{x}}{s_{\stackrel{\‾}{x}}}$

根据测定值组数和给定的显著性水平(α)，从格拉布斯(Grubbs)检验临界值表(见附表3)查得临界值；

若T≤T_0.05，则可疑均值为正常均值；

若T_0.05<T≤T_0.01，则可疑均值为偏离均值；

若T>T_0.01，则可疑均值为离群均值，应予剔除，即剔除含有该均值的一组数据。

表3 河鲀毒素阳性质控样品测定值的均值和标准偏差

可疑均值为最小值时， $T=\frac{\stackrel{=}{x}-{\stackrel{\&OverBar;}{x}}_{\min }}{s_{\stackrel{\&OverBar;}{x}}}=\frac{72.78-72.38}{0.18814}=2.073$

可疑均值为最大值时， $T=\frac{{\stackrel{\&OverBar;}{x}}_{\max }-\stackrel{=}{x}}{s_{\stackrel{\&OverBar;}{x}}}=\frac{73.12-72.78}{0.18814}=1.807$

T≤T_0.05(2.290)，可疑均值为正常均值。

测量结果的不确定度评定

根据ISO、EURACHEM导则、测量不确定度评定与表示(国家计量技术规范)，对研制的河鲀毒素阳性质控样品的不确定度进行了评定。

1.标准物质纯度带来的不确定度u₁

采用液相色谱方法对研制的标准物质进行测定，以目标待测物的峰面积除以目标待测物和杂质的总峰面积获得纯度百分比。

表4 河鲀毒素浓度和纯度

按照惯例，纯度不确定度一般定为0.3％，按照矩形分布，除以包含因子得到纯度引入的相对标准不确定度，记为u₁。

TTX： $u_1=\frac{0.30\%}{98.0\%\&times;\sqrt{3}}=0.18(0.17670\%)$

2.仪器测量带来的不确定度u₂

仪器测量的重复性由仪器多次测量总的相对标准偏差确定，仪器测量带来的不确定度记为u₂。

表5 仪器测量相对标准偏差

3稳定性带来的相对不确定度u₃

稳定性测量结果表明在监测时间内量值是稳定的，四个时间段各毒素测定值的相对标准偏差记为u₃。

表6 稳定性结果相对标准偏差

4不确定度合成

将得到的不确定度的各分量，按下式将4个分量合成，得到河鲀毒素标准物质合成标准不确定度u_c。

$u_c=\sqrt{{u_1}^2+{u_2}^2+{u_3}^2}$

$u_c=\sqrt{{0.18\%}^2+{0.26\%}^2+{0.18\%}^2}=0.36\%$

合成标准不确定度乘以包含因子，得扩展不确定度U，见表7。

表7 微囊藻毒素标准物质标准值和不确定度

置信度为99％时k一般取3

本发明的上述实施例是对本发明的说明而不能用于限制本发明，与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围内。

Claims (8)

1.河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，包括对阳性样品进行稀释和对阴性样品进行标准物质添加两种制备方案，其特征在于，包括下列步骤：将鲜红鳍东方鲀取肌肉组织后均质，测定其中河鲀毒素的含量，验证是否含有河鲀毒素，若为阳性样品，将含有毒素的阳性样品用阴性样品和分散剂进行稀释混匀，继续测定其中毒素的含量，达到标识含量要求后，将样品分装，适当温度下保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析；若为阴性样品，将河鲀毒素标准溶液添加到阴性样品中，加入分散剂混匀，测定其中河鲀毒素的含量，达到标识含量要求后，将样品分装，适当温度下保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析。

2. 根据权利要求1所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，其特征在于，具体包括下列步骤：

（1）取鲜红鳍东方鲀取肌肉组织，均质机均质，均质过程中压强为25-35Mpa，均质时间采用梯度时间法，共均质三次，每次的时间分别为15-20 min、10-15 min、5-10 min；

（2）将均质好的样品进行毒素测定，采用常规方法测定即可，根据是否含有毒素，制备方法分为阳性样品稀释和阴性样品标准物质添加两种；

阳性样品稀释：将含有毒素的阳性样品用阴性样品和分散剂稀释混匀，分散剂重量占阳性样品和隐形样品总重量的8-12%，稀释混匀采用分步稀释法，将阴性样品和分散剂平均分成3-5份，加入一份阴性样品和分散剂后均质一次，每次均质时间为3-5min；

阴性样品标准物质添加：将河鲀毒素标准溶液添加到经测定不含河鲀毒素的鲜红鳍东方鲀肌肉组织中，然后平均分3-5次加入分散剂混匀，每加一次分散剂均质一次，每次均质时间为3-5min，加入分散剂的总量占阴性样品总量的8-12%，

（3）测定步骤（2）中样品的毒素含量；

（4）毒素含量达到标识要求后，将样品分装，适当温度保存，对样品进行均匀性验证和稳定性分析。

3. 根据权利要求2所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，肌肉组织在均质机中均质之前，将肌肉组织加热到40-50℃，均质时均质温度控制在30-40℃。

4. 根据权利要求2所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，其特征在于，所述分散剂为C₁₈，石墨化碳、白炭黑、硅藻土中的一种或多种的组合。

5. 根据权利要求2所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，其特征在于，毒素含量达到标识要求后，将样品冷冻干燥或烘干，做成粉状或湿粉状或浆状。

6. 根据权利要求2所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法，其特征在于：样品保存条件为4℃、低温或超低温保存。

7. 一种利用权利要求2所述的河鲀毒素阳性质控样品的制备方法获得的河鲀毒素阳性质控样品。

8.权利要求7所述的河鲀毒素阳性质控样品在河鲀毒素检测过程中作为检测质量控制应用。