CN103977026A - 丙酸和纳米氧化锌抑菌组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了丙酸和纳米氧化锌抑菌组合物，属于医药领域。抑菌组合物中丙酸和纳米氧化锌两种抑菌剂的合用对抑制大肠杆菌O157、腊样芽孢杆菌、沙门氏菌及金黄色葡萄球菌起到协同抑菌的作用。本发明的丙酸和纳米氧化锌抑菌组合物与现有的技术相比，不仅解决了使用单一丙酸抑菌时高浓度易对人体带来刺激性以及细菌易变异对酸产生耐药性的问题，还解决了常规抑菌方法中纳米氧化锌难溶于水的问题，使两种抑菌剂的生物相容性得到提高以至于能得到更广泛的应用。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，尤其涉及到抑菌组合物。
背景技术
丙酸，又称初油酸，是三个碳的羧酸，化学式为CH3CH2COOH。纯的丙酸是无色、腐蚀性的液体，带有刺激性气味。丙酸呈无色澄清油状液体，稍有刺鼻的恶臭气味，能与水混溶，溶于乙醇、氯仿和***等有机溶剂。丙酸是饲料、 医药、食品工业等的重要原料。丙酸及其盐如丙酸钙、丙酸锌、丙酸钾能有效地抑制霉菌、嗜氧芽孢杆菌等，广泛应用在谷物、饲料和食品中，是良好的防腐保鲜剂。
丙酸在制成药物制剂时，一次用量大、浓度高，有刺激性且长期使用影响人体健康。
发明内容
针对丙酸抑菌制剂一次用量大、浓度高，刺激性和长期使用影响人体健康问题， 本发明人经过大量实验，发现纳米氧化锌能有效增强丙酸溶液抑菌性能，减少丙酸的用量，降低丙酸的浓度，且采用两种低剂量的抑菌组合物，降低微生物产生耐药性的几率，更加的安全高效。本发明的目的在于提供一种乳酸-纳米氧化锌抑菌复合物，减少和降低丙酸抑菌剂一次的用剂量及浓度和降低药品对人体的毒性。
本发明提供如下的技术方案：
丙酸和纳米氧化锌抑菌组合物，其特征在于含有丙酸，纳米氧化锌。
抑制大肠杆菌O157时，丙酸的浓度为0.0074mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
抑制腊样芽孢杆菌时 ，丙酸的浓度为0.0065mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
抑制沙门氏菌时，丙酸的浓度为0.011mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
抑制金黄色葡萄球菌时，丙酸的浓度为0.013mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
本发明还涉及，
所述抑菌组合物在制备抑制大肠杆菌O157药物中的应用。
所述抑菌组合物在制备抑制腊样芽孢杆菌药物中的应用。
所述抑菌组合物在制备抑制沙门氏菌药物中的应用。
所述抑菌组合物在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用。
本发明的有益效果是：纳米氧化锌能有效增强丙酸溶液抑菌性能，减少丙酸的用量，降低丙酸的浓度，且采用两种低剂量的抑菌组合物，降低微生物产生耐药性的几率，更加的安全高效。
具体实施方式
实施例1
1，低浓度丙酸稀释液制备包括如下步骤：取分析纯丙酸作为原始液，用灭菌后的蒸馏水连续稀释,依次得到不同浓度丙酸溶液。丙酸的原始浓度为13.36mol/L。
2，纳米氧化锌胶体溶液的制备：取上海阿拉丁有限公司生产的纳米氧化锌0.01g溶于1mL的蒸馏水中，震荡混匀得到10mg/mL的纳米氧化锌胶体溶液，粒径为200nm。
3，丙酸和纳米氧化锌的联合抑菌作用
a 细菌的培养
挑取LB 琼脂培养基上的大肠杆菌O157的单菌落于10mL LB肉汤培养基中，置于37℃培养箱中培养12 h，再按1％的接种量接种于5 mL的LB肉汤培养基中，37℃培养5h后，取1 mL上述菌液用1xPBS水连续稀释2个梯度，最终的菌液大约为106CFU/mL。
b 丙酸与纳米氧化锌在抑菌性能上的联合作用
分别取900μL上述已稀释好的菌液于1.5mL离心管中，分别加入100μL不同的抑菌剂（具体见表一）。置于37℃下培养5h,每组平行3次。
C 平板计数
将各组待测液用1xPBS连续稀释4个梯度，10-2、10-3、10-4各取出10μL于LB平板上。平板吹干后，37℃下倒置培养12h，长出菌落后计数，以30-300个菌落形成单位（CFU）为有效的计数范围。
实验结果如下：
表一
| 序号 | 抑菌剂（均为100μL） | 加入抑菌剂后的菌落数 |
| 1 | 0.148mol/L的丙酸 | 34x106 |
| 2 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.148mol/L的丙酸 体积比1:1的混合液 | 142x104 |
| 3 | 0.13mol/L的丙酸 | 66x107 |
| 4 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.13mol/L的丙酸 体积比1:1混合液 | 132x106 |
| 5 | 0.11mol/L的丙酸 | 37x108 |
| 6 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.11mol/L的丙酸 体积比1:1混合液 | 89x107 |
| 7 | 浓度为10 mg/mL 的纳米氧化锌胶体溶液 | 78x108 |
| 8 | 1xPBS | 102x108 |
实验表明：本发明提供的抑菌复合物不仅具有促进纳米氧化锌溶解作用，同时通过降低丙酸的抑菌浓度，大大减少对人体的刺激，而且两种抑菌物质的合用对抑制大肠杆菌O157起到联合的作用。编号2，丙酸的浓度为0.0074mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL抑菌效果最好。
实施例2
1，低浓度丙酸稀释液制备包括如下步骤：同实施例1
2，纳米氧化锌胶体溶液的制备：同实施例1
3，丙酸和纳米氧化锌的联合抑菌作用
a 细菌的培养
挑取LB 琼脂培养基上的腊样芽孢杆菌的单菌落于10mL LB肉汤培养基中，置于37 ℃培养箱中培养12 h，再按1％的接种量接种于5 mL 的LB 肉汤培养基中，37 ℃培养5h后，取1 mL 上述菌液用1xPBS水连续稀释2个梯度，最终的菌液大约为106CFU/mL。
b 丙酸与纳米氧化锌在抑菌性能上的联合作用
分别取900μL上述已稀释好的菌液于1.5mL离心管中，分别加入100μL不同的抑菌剂（具体见表二）。置于37℃下培养5h,每组平行3次
C 平板计数
将各组待测液用1xPBS连续稀释4个梯度，10-2、10-3、10-4各取出10μL于LB平板上。平板吹干后，37℃下倒置培养12h，长出菌落后计数，以30-300个菌落形成单位（CFU）为有效的计数范围。
实验结果如下：
表二
| 序号 | 抑菌剂（均为100μL） | 加入抑菌剂后的菌落数 |
| 1 | 0.13mol/L的丙酸 | 154x106 |
| 2 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.13mol/L的丙酸 体积比1:1的混合液 | 62x106 |
| 3 | 0.11mol/L的丙酸 | 132x107 |
| 4 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.11mol/L的丙酸 体积比1:1混合液 | 54x107 |
| 5 | 0.087mol/L的丙酸 | 79x108 |
| 6 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.087mol/L的丙酸 体积比1:1混合液 | 40x108 |
| 7 | 浓度为10 mg/mL 的纳米氧化锌胶体溶液 | 111x108 |
| 8 | 1xPBS | 143x108 |
实验表明：本发明提供的抑菌组合物不仅具有促进纳米氧化锌溶解作用，同时通过降低丙酸的抑菌浓度，大大减少对人体的刺激，而且两种抑菌物质的合用对抑制蜡样芽胞杆菌起到联合的作用。编号2，抑制腊样芽孢杆菌时 ，丙酸的浓度为0.0065mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，效果最好。
实施例3
1，低浓度丙酸稀释液制备包括如下步骤：同实施例1
2，纳米氧化锌胶体溶液的制备：同实施例1
3，丙酸和纳米氧化锌的联合抑菌作用
a 细菌的培养
挑取LB琼脂培养基上的沙门氏菌的单菌落于10mL LB肉汤培养基中，置于37℃培养箱中培养12 h，再按1％的接种量接种于5 mL的LB肉汤培养基中，37℃培养5h后，取1 mL上述菌液用1xPBS水连续稀释2个梯度，最终的菌液大约为105CFU/mL。
b 丙酸与纳米氧化锌在抑菌性能上的联合作用
分别取900μL上述已稀释好的菌液于1.5mL离心管中，分别加入100μL不同的抑菌剂（具体见表三）。置于37℃下培养5h,每组平行3次。
C 平板计数
将各组待测液用1xPBS连续稀释3个梯度，10-1、10-2、10-3各取出10μL于LB平板上。平板吹干后，37℃下倒置培养12h，长出菌落后计数，以30-300个菌落形成单位（CFU）为有效的计数范围。
实验结果如下：
表三
| 编号 | 抑菌剂（均为100μL） | 加入抑菌剂后的菌落数 |
| 1 | 0.22mol/L的丙酸 | 176x105 |
| 2 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.22mol/L的丙酸 体积比1:1的混合液 | 87x104 |
| 3 | 0.148mol/L的丙酸 | 163x106 |
| 4 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.148mol/L的丙酸 体积比1:1混合液 | 76x106 |
| 5 | 0.13mol/L的丙酸 | 87x107 |
| 6 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.13mol/L的丙酸 体积比1:1混合液 | 47x107 |
| 7 | 浓度为10 mg/mL 的纳米氧化锌胶体溶液 | 119x107 |
| 8 | 1xPBS | 156x107 |
实验表明：本发明提供的抑菌组合物不仅具有促进纳米氧化锌溶解作用，同时通过降低丙酸的抑菌浓度，大大减少对人体的刺激，而且两种抑菌物质的合用对抑制沙门氏菌起到联合的作用。编号2，抑制沙门氏菌时，丙酸的浓度为0.011mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，效果最好。
实施例4
1，低浓度丙酸稀释液制备包括如下步骤：同实施例1
2，纳米氧化锌胶体溶液的制备：同实施例1
3，丙酸和纳米氧化锌的联合增效抑菌作用
a 细菌的培养
挑取LB 琼脂培养基上的金黄色葡萄球菌的单菌落于10mL LB肉汤培养基中，置于37℃培养箱中培养12 h，再按1％的接种量接种于5 mL的LB肉汤培养基中，37℃培养5h后，取1 mL上述菌液用1xPBS水连续稀释2个梯度，最终的菌液大约为106CFU/mL。
b 丙酸与纳米氧化锌在抑菌性能上的联合作用
分别取900μL上述已稀释好的菌液于1.5mL离心管中，分别加入100μL不同的抑菌剂（具体见表四）。置于37℃下培养5h,每组平行3次。
C 平板计数
将各组待测液用1xPBS连续稀释4个梯度，10-2、10-3、10-4各取出10μL于LB平板上。平板吹干后，37℃下倒置培养12h，长出菌落后计数，以30-300个菌落形成单位（CFU）为有效的计数范围。
实验结果如下：
表四
| 编号 | 抑菌剂（均为100μL） | 加入抑菌剂后的菌落数 |
| 1 | 0.26mol/L的丙酸 | 187x106 |
| 2 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.26mol/L的丙酸 体积比1：1的混合液 | 77x105 |
| 3 | 0.22mol/L的丙酸 | 178x107 |
| 4 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.22mol/L的丙酸 体积比1：1混合液 | 52x107 |
| 5 | 0.148mol/L的丙酸 | 62x108 |
| 6 | 10 mg/mL纳米氧化锌胶体溶液和0.148mol/L的丙酸 体积比1：1混合液 | 132x107 |
| 7 | 浓度为10 mg/mL 的纳米氧化锌胶体溶液 | 86x108 |
| 8 | 1xPBS | 137x108 |
实验表明：本发明提供的抑菌组合物不仅具有促进纳米氧化锌溶解作用，同时通过降低丙酸的抑菌浓度，大大减少对人体的刺激，而且两种抑菌物质的合用对抑制金黄色葡萄球菌起到联合的作用。编号2，抑制金黄色葡萄球菌时，丙酸的浓度为0.013mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，效果最好。
Claims (9)
1.丙酸和纳米氧化锌抑菌组合物，其特征在于含有丙酸，纳米氧化锌。
2.如权利要求1 所述的抑菌组合物，其特征在于抑制大肠杆菌O157时，丙酸的浓度为0.0074mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
3.如权利要求1 所述的抑菌组合物，其特征在于抑制腊样芽孢杆菌时，丙酸的浓度为0.0.0065mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
4.如权利要求1 所述的抑菌组合物，其特征在于抑制沙门氏菌时，丙酸的浓度为0.011mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
5.如权利要求1 所述的抑菌组合物，其特征在于抑制金黄色葡萄球菌时 ，丙酸的浓度为0.013mol/L，纳米氧化锌的浓度为0.5mg/mL，纳米氧化锌颗粒粒径为200nm。
6.如权利要求1~5 任一所述抑菌组合物在制备抑制大肠杆菌O157药物中的应用。
7.如权利要求1~5 任一所述抑菌组合物在制备抑制腊样芽孢杆菌药物中的应用。
8.权利要求1~5 任一所述抑菌组合物在制备抑制沙门氏菌药物中的应用。
9.如权利要求1~5 任一所述抑菌组合物在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用。
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| EP1452188A1 (en) * | 2001-11-26 | 2004-09-01 | Yugen Kaisha Okada Giken | Deodorant and cosmetic shampoo preparation containing the same |
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2014
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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