CN103933156A - 抑菌性植物活性组合物及其提取制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种抑菌性植物活性组合物及其提取制备方法，其主要使用金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草等药材，经过水、乙醇及乙酸乙酯溶剂各进行一次提取，再经浓缩混合后可以得到每一药材的提取物，这些药材可以先混合后再提取，或是先提取后再混合，以获得植物活性组合物。另外，也可搭配白头翁、半枝莲使用。本发明利用抑菌的植物活性成分，并通过提取后的植物活性组合物的组合比例具有的协同增效的效应，以提高动物的免疫力，达到抗菌抑菌的功效而避免使用抗生素或药物，以提供天然无药健康的安全养殖条件。

Description

抑菌性植物活性组合物及其提取制备方法

技术领域

本发明涉及一种植物活性提取物，特别是涉及一种在养殖过程中，可以增加养殖动物抑菌或抗菌效果的抑菌性植物活性组合物及其提取制备方法。

背景技术

养殖业涵盖范围甚广，它不但为食品、制药、油脂等产业提供原料，也为人们生活提供肉、乳、蛋、禽等丰富的食物。然而，在动物养殖的过程中，为避免其不致感染病源菌，养殖业者普遍都习惯于饲养过程中使用抗生素，甚至是一些化学品，通过添加至饲料中喂食养殖动物，以此提高动物抵抗力；或是在动物感染病源菌而生病后，直接采取药物治疗。

在养殖动物中，常见的病源菌有副猪嗜血杆菌、沙门氏杆菌、链球菌、仔猪副伤寒菌、魏氏梭菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、胸膜肺炎放射杆菌等病源菌，当动物不幸感染这些病源菌后，养殖业者会直接采取给药方式，例如氯霉素来治疗这些动物。然而，这些养殖动物不管是吃了抗生素或是药物，就很容易产生抗药性，经过食物链，我们人类吃进了这些养殖动物或是其产物，同样会在人体产生抗药性，进而导致有超级细菌的产生；这中间的食物链关系，就是这样产生的。且长期食用药物残留量超过法定容许标准的畜禽产品，对人体伤害甚大，届时所产生的超级细菌将没有任何的抗生素或药品可以抵抗，这将会是人类公共卫生上的一大浩劫。

为了良好的养殖条件，并符合绿色环保，最好是不要使用任何抗生素或药物。然而，回归到养殖业却可能因为不使用抗菌剂或药物而影响畜禽的养殖或其产品，导致其价格不断上扬。有鉴于此，本发明遂提出一种抑菌性植物活性组合物及其提取制备方法，以取代养殖时所使用的药物，进而解决目前养殖业所面临的窘境。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种抑菌性植物活性组合物，其以能够抑菌的植物活性提取成分取代养殖时所需使用的抗生素及药物，并通过植物活性组合物的组合比例具有的强力协同增效的效应，来提高动物的免疫力，有效达到抗菌抑菌的功效，进而提供天然无药健康养殖的禽畜产品。

提取提取为达到上述目的，本发明提出一种抑菌性植物活性组合物，此植物活性组合物包括以下各药材的提取物：金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草；

所述植物活性组合物通过以下两种方法任意一种制备得到：

第一种方法：将金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草分别先以水、乙醇及乙酸乙酯为溶剂进行提取后，浓缩干燥，分别得到金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物，再将金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物按照重量比为1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5的重量比例混合，得到所述的植物活性组合物；或

第二种方法：将金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草按照重量比为1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5的重量比例混合再将混合后的药材分别以水、乙醇及乙酸乙酯为溶剂进行提取后，浓缩干燥，得到含有金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物的植物活性组合物。

另外，本发明也提出一种抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，通过以下两种方法任意一种制备得到：

第一种方法：

分别提供以下各药材：包括金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草；

将各药材分别以其重量的3～10倍的水浸泡后，先经第一次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第一滤液及第一残渣，该第一滤液经减压浓缩后形成第一浓缩液；

将该第一残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙醇浸泡后，先经第二次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第二滤液及第二残渣，该第二滤液经减压浓缩后形成第二浓缩液；

将该第二残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙酸乙酯浸泡后，先经第三次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以取得第三滤液，该第三滤液经减压浓缩后形成第三浓缩液；以及

将该第一浓缩液、该第二浓缩液及该第三浓缩液混合后进行干燥，以取得各药材的提取物，按照以上方法分别制得金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物；

将制备得到的金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物按比例混合得到植物活性组合物；

第二种方法：

分别提供以下各药材：包括金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草，将各药材按比例混合；

将混合后的药材以其重量的3～10倍的水浸泡后，先经第一次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第一滤液及第一残渣，该第一滤液经减压浓缩后形成第一浓缩液；

将该第一残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙醇浸泡后，先经第二次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第二滤液及第二残渣，该第二滤液经减压浓缩后形成第二浓缩液；

将该第二残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙酸乙酯浸泡后，先经第三次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以取得第三滤液，该第三滤液经减压浓缩后形成第三浓缩液；

将该第一浓缩液、该第二浓缩液及该第三浓缩液混合后进行干燥，即得植物活性组合物。提取

以下通过具体实施例配合所附的图式详加说明，当更容易了解本发明的目的、技术内容、特点及其所达成的功效。

附图说明

第1图为本发明的植物活性组合物使用的药材提取流程示意图。

附图标记说明：10-第一滤液；12-第一残渣；14-第一浓缩液；16-第二滤液；18-第二残渣；20-第二浓缩液；22-第三滤液；24-第三浓缩液；26-提取物。

具体实施方式

以下是实施例及其试验数据等，但本发明的内容并不局限于这些实施例的范围。

为了减少目前养殖业用药之问题，本发明以能够抑菌的植物活性成分的组合物来取代养殖时所用的抗生素及药物，并通过植物活性组合物的组合比例具有的强力协同增效的效应，来有效提高动物的免疫力，避免感染病源菌，例如副猪嗜血杆菌、沙门氏杆菌、链球菌、仔猪副伤寒菌、魏氏梭菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、胸膜肺炎放射杆菌等病源菌，以提供天然无药健康养殖的禽畜产品。

为了达到抗菌暨抑菌的效果，本发明所提出的植物活性组合物，主要包括有金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草五种药材，其组成重量比例为金银花：板蓝根：黄耆：山楂：甘草﹦1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5，并以此组成比例混合成植物活性组合物，其中每一药材已分别依序以水、乙醇及乙酸乙酯三种溶剂进行提取后浓缩干燥所生成者。即金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草分别经过高极性的水、中极性的乙醇以及低极性的乙酸乙酯进行提取后，再浓缩干燥而分别生成金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物，再将这些药材的提取物以上述比例混合成本发明的植物活性组合物；抑或是，先将金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草混合后，再经过水、乙醇及乙酸乙酯三种溶剂进行提取后浓缩干燥直接生成本发明的植物活性组合物。再者，不管是先提取后混合，还是先混合后提取，皆可以通过这些药材的特定组合比例，其中，在上述的植物活性组合物，还可添加有1～1.5重量比例的白头翁或其提取物及/或1～1.5重量比例的半枝莲或其提取物，来使此植物活性组合物发挥协同增效的效应，达到抑菌抗菌的功效。使整个实际养殖过程中，均不用添加任何的抗生素、化学杀菌剂或是药物，可以达到没有任何药物残留的健康肉品。

提取提取在说明完本发明的植物活性组合物的组成药材后，接续针对药材所需要的提取方法进行说明，并配合图式详细说明如后。

请同时参阅图1所示，首先，如步骤S10所示，分别提供药材金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草，以准备进行药材的提取程序；接着开始进行步骤S12～步骤S16的第一阶段提取，如步骤S12所示，将药材，以金银花为例，使用其重量的3～10倍的水浸泡1～5小时后，先如步骤S14所示进行第一次加热回流1～5小时，此第一次加热回流温度可为100℃，再经过如步骤S16的冷却、过滤步骤后，以分别取得第一滤液10及第一残渣12；接着如步骤S18所示，此第一滤液10经减压浓缩至原本体积的三分之一后即形成第一浓缩液14。接着进行步骤S20～S24的第二阶段提取，如步骤S20所示，将第一残渣12以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙醇浸泡1～5小时后，先经步骤S22的第二次加热回流1～5小时后，此第二次加热回流温度可为78℃，经过步骤S24的冷却、过滤步骤后，以分别取得第二滤液16及第二残渣18，此第二滤液16经步骤S26的减压浓缩回收乙醇至无乙醇存在后即可形成第二浓缩液20。然后，第二残渣18再继续进行步骤S28～S32的第三阶段提取，如步骤S28所示，将第二残渣18以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙酸乙酯浸泡1～5小时，先经过步骤S30的第三次加热回流1～5小时，此第三次加热回流温度可为77℃，再经过步骤S32的冷却、过滤步骤后，以取得第三滤液22，此第三滤液22经步骤S34减压浓缩回收乙酸乙酯至无乙酸乙酯存在后形成第三浓缩液24。最后如步骤S36及步骤S38所示，将前述依序获得的第一浓缩液14、第二浓缩液20及第三浓缩液24先混合后继续进行干燥，此干燥步骤可以使用直接喷雾干燥或冷冻干燥，抑或是先加入植物活性组合物重量的5～80%的赋型剂后再进行直接喷雾干燥或冷冻干燥，以取得药材的提取物26，也就是金银花提取物。同理可证，本发明可以通过上述步骤S10～步骤S38之流程分别提取出板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物；在取得所有药材的提取物之后，即可依据前述的重量比例，将金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物等所有药材提取物混合成植物活性组合物。

再者，若欲添加白头翁或半枝莲，或是二者一起添加，则也通过上述步骤S10～步骤S38的流程分别提取出白头翁提取物、半枝莲提取物，之后再与前述各种提取物依比例混合在一起即可。

当然，前述实施例的说明是先将每一种药材分别先以水、乙醇及乙酸乙酯溶剂进行提取提取后经浓缩干燥所生成后，再以上述的重量比例混合成植物活性组合物。除此之外，本发明也可以先将金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草先行以上述的1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5的重量比例混合后，再将此混合药材依序以水、乙醇及乙酸乙酯溶剂进行提取后浓缩干燥来直接提取出植物活性组合物，详细的提取流程也与图1及其对应说明相同，故于此不再赘述。

接续以实际的实验进行试验，以证明本发明使用的植物活性组合物确实具有显著的抗菌或抑菌效果。

以纸锭扩散法（抑菌圈）进行试验，首先，制备有各组试验样品，包括：

(1)A组：先提取再混合的植物活性组合物，由金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物以1.2：1.2：1.3：1.1：1.1的重量比例混合成的植物活性组合物。

(2)B组：先混合再提取的植物活性组合物，先将金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草以1.2：1.2：1.3：1.1：1.1的重量比例的药材混合后，再经过前述提取过程后，获得的植物活性组合物。

(3)C组：A组+白头翁提取物及半枝莲提取物，其由金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物、甘草提取物、白头翁提取物及半枝莲提取物以1.2：1.2：1.3：1.1：1.1：1.2：1.2的重量比例混成而成。

(4)D组：先将金银花、板蓝根、黄耆、山楂、甘草、白头翁、半枝莲，以1.2：1.2：1.3：1.1：1.1：1.2：1.2的重量比例的药材混合后，再经过前述提取过程后，获得的植物活性组合物。

(5)对照组：氯霉素(chloramphenicol)。

将这三组试验样品配制成100mg/ml的浓度。依照副猪嗜血杆菌、沙门氏杆菌、链球菌、仔猪副伤寒菌、魏氏梭菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、胸膜肺炎放射杆菌等各种菌种来配制不同的琼酯培养基；病源菌微生物接种量约5×10⁶菌落数/毫升（cfu/ml），0.1ml/plate。琼酯纸锭扩散测试纸锭加入含20ul的试验样品。接续，在无菌操作台中，放入含检测微生物0.1ml的琼酯培养基于培养盘中，涂布均匀，再将加入试验样品的纸锭放入已经植菌的琼酯盘中。依所需温度让病源菌生长18～24小时，当纸锭中的含药成分慢慢扩散到琼酯中，即会抑制微生物的生长。其中，由抑菌圈（Zoneof inhibition）的大小，可知道纸锭中试验样品的抗微生物强度，观察各试验样品的抑菌圈大小，抑菌圈愈大，即抗菌力愈佳。试验结果如下面表1所示。

表1抑制圈大小       单位：mm

由表1的试验结果，可以发现，在各组菌种中，作为对照组的氯霉素表现最好，具有最大的抑菌圈，此乃因氯霉素系为一种常见的抑菌类抗生素；反观A组和B组的植物活性组合物，二者的抑菌圈相同或相当接近，表示二者的抗菌效果相当，虽然表现没有对照组好，但确实仍存在着有效的抗菌或抑菌效果；另外，于A组和B组中添加白头翁及半枝莲的C组和D组，其抗菌效果也与A组和B组接近或相同。由此可知，对养殖业者来说，能够使用更安全无虞，无抗生素的养殖条件更具意义，因此在养殖过程中可以直接使用植物活性组合物来取代抗生素，以在养殖过程中提高动物的抗菌或抑菌的免疫力，进而达到绿色养殖之目的者。

综上所述，本发明提出的植物活性组合物，不管是先分别提取后再依比例混合，或是先依比例混合后再行提取，二者皆可有效提高动物的免疫力，具有良好的抗菌、抑菌效果，进而提供天然无药健康养殖的禽畜产品。

以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (11)

1.一种抑菌性植物活性组合物，其特征在于包括以下各药材的提取物：金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草；

所述植物活性组合物通过以下两种方法任意一种制备得到：

第一种方法：将金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草分别先以水、乙醇及乙酸乙酯为溶剂进行提取后，浓缩干燥，分别得到金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物，再将金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物按照重量比为1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5的重量比例混合，提取得到所述的植物活性组合物；或

第二种方法：将金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草按照重量比为1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5的重量比例混合再将混合后的药材分别以水、乙醇及乙酸乙酯为溶剂进行提取后，浓缩干燥，得到含有金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物的植物活性组合物。

2.如权利要求1所述的抑菌性植物活性组合物，其特征在于更包括有1～1.5重量比例的白头翁或其提取物。

3.如权利要求2所述的抑菌性植物活性组合物，其特征在于更包括有1～1.5重量比例的半枝莲或其提取物。

4.一种抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于通过以下两种方法任意一种制备得到：

第一种方法：

分别提供以下各药材：包括金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草；

将各药材分别以其重量的3～10倍的水浸泡后，先经第一次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第一滤液及第一残渣，该第一滤液经减压浓缩后形成第一浓缩液；

将该第一残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙醇浸泡后，先经第二次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第二滤液及第二残渣，该第二滤液经减压浓缩后形成第二浓缩液；

将该第二残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙酸乙酯浸泡后，先经第三次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以取得第三滤液，该第三滤液经减压浓缩后形成第三浓缩液；以及

将该第一浓缩液、该第二浓缩液及该第三浓缩液混合后进行干燥，以取得各药材的提取物，按照以上方法分别制得金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物；

将制备得到的金银花提取物、板蓝根提取物、黄耆提取物、山楂提取物及甘草提取物按比例混合得到植物活性组合物；

第二种方法：

分别提供以下各药材：包括金银花、板蓝根、黄耆、山楂及甘草，将各药材按比例混合；

将混合后的药材以其重量的3～10倍的水浸泡后，先经第一次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第一滤液及第一残渣，该第一滤液经减压浓缩后形成第一浓缩液；

将该第一残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙醇浸泡后，先经第二次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以分别取得第二滤液及第二残渣，该第二滤液经减压浓缩后形成第二浓缩液；

将该第二残渣以其重量的3～10倍且浓度为50～95%的乙酸乙酯浸泡后，先经第三次加热回流后，依序经过冷却、过滤后，以取得第三滤液，该第三滤液经减压浓缩后形成第三浓缩液；

将该第一浓缩液、该第二浓缩液及该第三浓缩液混合后进行干燥，即得植物活性组合物。

5.如权利要求4所述的抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于在第一种方法中提取该金银花、该板蓝根、该黄耆、该山楂及该甘草的提取物是按照重量比为1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5的比例混合成该植物活性组合物。

6.如权利要求4所述的抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于第二种方法中在进行水浸泡之前，将该金银花、该板蓝根、该黄耆、该山楂及该甘草按照重量比为1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5：1～1.5的比例混合。

7.如权利要求5或6所述的抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于其中该药材更包括重量比为1～1.5的白头翁或/及半枝莲。

8.如权利要求4所述的抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于该水浸泡、该乙醇浸泡以及该乙酸乙酯浸泡的时间分别为1～5小时。

9.如权利要求4所述的抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于该第一次加热回流、第二次加热回流及第三次加热回流的时间分别为1～5小时。

10.如权利要求4所述的抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于该干燥为直接喷雾干燥或冷冻干燥。

11.如权利要求10所述的抑菌性植物活性组合物的提取制备方法，其特征在于：该干燥步骤之前先加入植物活性组合物重量的5～80%的赋型剂后再进行该直接喷雾干燥或该冷冻干燥。