CN103893822A - 一种胶原多肽烧伤修复膜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种胶原多肽烧伤修复膜的制备方法，属于生物医学材料领域。本发明的胶原多肽烧伤修复膜是以胶原多肽、羧甲基纤维素钠、戊二醛、淀粉形成膜的基本骨架结构，加入丙三醇作为保湿剂，控制膜的湿度，再加入黄芩提取物。最后将混合均匀的糊状混合液倒入模具中成型，在烘箱中恒温干燥。揭膜即得具有良好生物相容性和抗菌性的胶原多肽烧伤修复膜。

Description

一种胶原多肽烧伤修复膜及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种胶原蛋多肽烧伤修复膜及其制备方法，属于生物医学材料领域。

背景技术

皮肤修复材料的研究是皮肤替代材料( skin substitute) 的探索。皮肤替代材料的研究又可分为暂时性皮肤替代材料( temporary skin substitute)和永久性皮肤替代材料( permanent skin substitute) 两条探索主线，在修复材料上可分自体皮片、自体皮瓣、自体复合组织瓣等。皮肤修复的每次里程碑式的突破，无不是以认识理念的更新为开始，以技术手段的革新为标志，以修复材料成分或结构的日趋完善而成熟。

真皮的主要成分是胶原, 而胶原中含有大量的氨基酸, 在大面积创伤及烧伤治疗中越来越引起人们的关注。胶原类修复材料是目前研究的焦点。其原因是Ⅰ型胶原是构成皮肤的主要结构蛋白，通过自聚和交联重建的胶原可形成具有一定强度和稳定性的结构材料，具有高亲水性、无毒、体内生物相容性、降解性良好等生物特性。以胶原为主体材料，发展出以组织学工程学技术为特征的人工皮肤替代材料，可以向创面分泌生长因子和基质蛋白。但其抗感染能力十分脆弱，要求必须被移植于新鲜、清洁创面，并且严密观察感染迹象。因此如何解决普遍存在的抗感染能力弱的缺陷，赋予材料更多的生物功能，是一大研究方向。

黄芩其主要成分黄芩苷具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、清除氧自由基、等作用。黄芩体内过氧化物酶能够催化黄芩有效成分黄芩苷与过氧化氢反应生成黄芩素。过氧化物酶还可以清除脂类氢过氧化物，减轻有机氢过氧化物对机体的损伤，防御活性氧等自由基对细胞膜的损伤。

烧伤后的皮肤表层受到损伤，抑菌的天然屏障皮肤失去作用，因此烧伤处难以愈合的一个主要原因就是伤口易感染。研究表明，黄芩苷是一种广谱抗生素，具有良好的抗菌作用。胶原多肽本身能促进损伤组织修复，并且胶原多肽与皮肤有很好的生物相容性能吸收伤口处的渗出液，保持伤口干燥。

发明内容

本发明用戊二醛将胶原多肽和羧甲基纤维素钠等交联为大分子材料，让黄芩苷等药物固定在大分子结构中，把烧伤修复药物制成水凝胶膜状，使药物能更好的释放在创面处。能及时封闭创面、减少感染、防止大量体液丢失, 为创面康复提供了良好的条件。这种材料在新鲜切除全层皮肤烧伤的创面的治疗、烧伤后疤痕挛缩治疗中将发挥着重要作用，本产品增加了烧伤修复材料的多样性。

  本发明的目的是提供一种新的胶原多肽烧伤修复膜，通过胶原多肽和黄芩苷的释放而达到促进伤口愈合的作用，以解决现在烧伤伤口处理上的问题，本发明的胶原多肽烧伤修复膜具有良好的生物相容性、透气性、能吸收伤口的渗出液，保持伤口干燥，防止感染从而达到促进伤口愈合以及减小疤痕的作用。

本发明的另一个目的是提供一种上述组合物的制备方法。

本发明的胶原多肽烧伤创面膜，它是由下述重量配比的原料制成的膜：

 胶原多肽                                      0.1~0.7份

 丙三醇                                        0.6~5.2份

 戊二醛                                        1.0~4.8份

 淀粉                                          0.1~1.0份

 羧甲基纤维素钠                                0.5~3.0份

 去离子水                                      5.0~40.0份

 黄芩提取物                                     0.1~1.5份

 在上述的胶原多肽烧伤修复膜中，胶原多肽粉末和中药活性成分黄芩苷是自主提取的。胶原多肽具有促进细胞再生，淡化疤痕的作用，中药活性成分黄芩苷具有抗菌、抗病毒、抗炎的作用；交联剂戊二醛交联丙三醇和羧甲基纤维素钠形成生物大分子，确保膜具有一定的湿度和韧性。淀粉作为膜的定型剂加入其中。胶原多肽和黄芩苷被固定在骨架结构中，药物随着吸收伤口渗出液而缓慢释放出来，从而增加膜的药效。这些组分的组合以及各组分的上述混合范围，是通过大量实验确定的，上述在份数范围内的组合是本发明胶原多肽烧伤创面膜具有上述的抗菌性，透气性，与皮肤相容性、有效吸收伤口渗出液、保持伤口干燥、促进伤口愈合以及淡化疤痕的特点。

本发明的抗菌成分黄芩苷的提取工艺是：先将黄芩干燥粉碎至120目细粉，用55％~75％（重量）的乙醇水溶液提取，在85℃下恒温搅拌回流1~3小时，减压抽滤取滤液，往滤渣中加入55％~75％（重量）的乙醇水溶液，进行第二次回流，1~3小时后，抽滤，弃去残渣，将2次的滤液收集到一起。通过旋转蒸发仪减压蒸馏1.5~3小时，将提取液浓缩，并回收尽乙醇，将蒸馏后的剩余物放入烘箱里。在60℃下恒温干燥即得黄芩提取物。

胶原多肽烧伤修复膜的制备方法包括下述顺序的步骤：

 （1）选取新鲜猪皮，物理方法猪皮上多余的脂肪，将猪皮洗净切成3mm³~5mm³颗粒置于反应瓶中。以新配置的浓度为10％的Na₂CO₃溶液作为脱脂剂，加入到反应瓶中直至淹没猪皮颗粒。在45℃水浴中脱脂70分钟，并且不断搅拌，抽滤。讲抽滤后的猪皮颗粒置于另一反应瓶中，加入蒸馏水，调节PH为8，加入猪皮重量6％~12％的胰蛋白酶。于40℃水浴中酶解2~6小时。最后离心机离心分离上诉混合液，吸取含胶原多肽的中间层溶液，丢弃上层脱脂未净的脂肪和下层不溶的根毛、弹性纤维等物质。再在60℃烘箱中烘干，研磨得到胶原多肽粉末。

（2）将羧甲基纤维素钠与水混合，于30℃~60℃的恒温水浴中搅拌均匀成透明胶装物。

（3）将戊二醛、丙三醇、淀粉、与胶原多肽加入到搅拌均匀的羧甲基纤维素钠溶液中，搅拌均匀。

（4）在恒温30~60℃的水浴中，将黄芩提取物加入到（3）中，将其混合并搅拌均匀。平铺在干燥洁净的模板上，形成表面光洁均与的液层，在30℃~80℃烘箱中恒温干燥0.5~6小时，揭膜得胶原多肽烧伤修复膜。

具体实施方式

下列经过实施例的方式进一步说明本发明，本发明的范围并不因此局限于下列实施例，而是由本发明的说明书和权利要求书限定。以下实施例中的胶原多肽的重均分子量为7933 ，分子量分布1.1。

实施例1

  在一个洁净干燥的烧杯中，加入0.1份胶原多肽，0.1份可溶性淀粉，0.5份黄芩提取物，加入2份水，搅拌均匀，使其溶解。在另一烧杯中加入0.5份羧甲基纤维素钠，再往其中加入10份离子水，在40℃的水浴中机械搅拌，直至混合均匀，形成透明的胶状溶液，然后加入2份戊二醛，3份丙三醇，搅拌5分钟，使其混合均匀。

将第一个烧杯中的混合溶液，倒入第二个烧杯中，继续在40℃的水浴中机械搅拌，直到得到均匀粘稠的胶状物为止。

将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上，形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层，用恒温烘箱60℃烘1.5小时，揭膜，即得胶原多肽烧伤修复膜。

实施例2

 在一个洁净干燥的烧杯中，加入0.3份胶原多肽，0.5份可溶性淀粉，0.2份黄芩提取物，加入3份水，搅拌均匀，使其溶解。在另一烧杯中加入2份羧甲基纤维素钠，再往其中加入15份离子水，在35℃的水浴中机械搅拌，直至混合均匀，形成透明的胶状溶液，然后加入2份戊二醛，3份丙三醇，搅拌5分钟，使其混合均匀。

将第一个烧杯中的混合溶液，倒入第二个烧杯中，继续在35℃的水浴中机械搅拌，直到得到均匀粘稠的胶状物为止。

将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上，形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层，用恒温烘箱60℃烘1.8小时，揭膜，即得胶原多肽烧伤修复膜。

实施例3

 在一个洁净干燥的烧杯中，加入0.5份胶原多肽，0.3份可溶性淀粉，0.1份黄芩提取物，加入2份水，搅拌均匀，使其溶解。在另一烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠，再往其中加入10份离子水，在45℃的水浴中机械搅拌，直至混合均匀，形成透明的胶状溶液，然后加入1份戊二醛，3份丙三醇，搅拌5分钟，使其混合均匀。

将第一个烧杯中的混合溶液，倒入第二个烧杯中，继续在45℃的水浴中机械搅拌，直到得到均匀粘稠的胶状物为止。

将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上，形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层，用恒温烘箱60℃烘1.5小时，揭膜，即得胶原多肽烧伤修复膜。

实施例4

 在一个洁净干燥的烧杯中，加入0.7份胶原多肽，0.1份可溶性淀粉，1.0份黄芩提取物，加入2份水，搅拌均匀，使其溶解。在另一烧杯中加入2份羧甲基纤维素钠，再往其中加入25份离子水，在42℃的水浴中机械搅拌，直至混合均匀，形成透明的胶状溶液，然后加入3份戊二醛，4份丙三醇，搅拌5分钟，使其混合均匀。

将第一个烧杯中的混合溶液，倒入第二个烧杯中，继续在42℃的水浴中机械搅拌，直到得到均匀粘稠的胶状物为止。

将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上，形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层，用恒温烘箱60℃烘2.2小时，揭膜，即得胶原多肽烧伤修复膜。

实施例5

在一个洁净干燥的烧杯中，加入0.3份胶原多肽，0.5份可溶性淀粉，0.5份黄芩提取物，加入2份水，搅拌均匀，使其溶解。在另一烧杯中加入1.5份羧甲基纤维素钠，再往其中加入20份离子水，在40℃的水浴中机械搅拌，直至混合均匀，形成透明的胶状溶液，然后加入4份戊二醛，1份丙三醇，搅拌5分钟，使其混合均匀。

将第一个烧杯中的混合溶液，倒入第二个烧杯中，继续在40℃的水浴中机械搅拌，直到得到均匀粘稠的胶状物为止。

将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上，形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层，用恒温烘箱60℃烘2小时，揭膜，即得胶原多肽烧伤修复膜。  

实施例6

在一个洁净干燥的烧杯中，加入0.4份胶原多肽，0.7份可溶性淀粉，0.3份黄芩提取物，加入2份水，搅拌均匀，使其溶解。在另一烧杯中加入0.9份羧甲基纤维素钠，再往其中加入10份离子水，在37℃的水浴中机械搅拌，直至混合均匀，形成透明的胶状溶液，然后加入3份戊二醛，5份丙三醇，搅拌5分钟，使其混合均匀。

将第一个烧杯中的混合溶液，倒入第二个烧杯中，继续在37℃的水浴中机械搅拌，直到得到均匀粘稠的胶状物为止。

将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上，形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层，用恒温烘箱60℃烘1.5小时，揭膜，即得胶原多肽烧伤修复膜。

Claims (4)

1.一种胶原多肽烧伤修复膜，其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的膜：

胶原多肽                                      0.1~0.7份

丙三醇                                        0.6~5.2份

戊二醛                                        1.0~4.8份

淀粉                                          0.1~1.0份

羧甲基纤维素钠                                0.5~3.0份

去离子水                                      5.0~40.0份

黄芩提取物                                    0.1~1.5份。

2.根据权利要求1所述的胶原多肽烧伤修复膜，其特征在于胶原多肽的重均分子量为7800~8000，分子量分布1~3。

3.制备权利要求1中所述制备胶原多肽烧伤修复膜的方法，其特征在于该方法由以下步骤组成：

   ( 1 ) 将0.5~3.0份重量份羧甲基纤维素钠与5.0~40.0份重量去离子水混合，在30℃~50℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物；

  （2）将1.0~4.8份重量份戊二醛、0.6~5.2份重量份丙三醇、0.1~1.0份重量份淀粉、0.1~0.7份重量份胶原多肽、0.1~1.5份重量份的黄芩提取物加入（1）中，混合搅拌均匀；   

  （3）将（2）制得的混合物均匀的平铺在干燥、洁净的模板上，形成厚薄均匀、表面光洁平整的液层，在55℃～65℃的烘箱中干燥，干燥时间0.6～3小时，揭膜即得胶原蛋白创伤修复膜。

4.根据权利要求3所述的胶原蛋多肽烧伤修复膜制备方法，其特征在于所述胶原多肽的重均分子量为7933，分子量分布1.1。