CN103893549B - 一种缓解疲劳的中药组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种缓解疲劳的中药组合物及其制备方法和用途，该中药组合物包括以下重量配比的原料：枸杞子1‑50份、黄精1‑30份、山药1‑30份、菊花1‑30份、甘草1‑15份、乌梅1‑15份和陈皮1‑8份。本发明的制备方法采用水提工艺，应用离心及膜分离等技术，得到中药浓缩液，或经喷雾干燥得到中药浸膏粉，加入辅料，制成饮料、口服液、颗粒剂或片剂。本发明的中药组合物具有缓解体力疲劳和视疲劳、以及有助于改善记忆和性功能的作用，功效明确，安全无毒副作用。

Description

一种缓解疲劳的中药组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种缓解体力疲劳和视疲劳、有助于改善记忆和性功能的中药组合物及其制备方法和用途。

背景技术

随着社会的快速变迁，在信息社会里，计算机、电视机、手机等视频显示终端渗透到日常生活的每个角落，加上工作和生活节奏的加快，越来越多的人处于亚健康状态，主要症状表现为疲劳，包括体力疲劳、脑力疲劳和视疲劳等，影响生活质量。

现代医学认为，疲劳是多种原因所致的局部组织、器官功能减退或全身不适的主观感觉，行为学上表现为劳动能力的减弱。现有的文献中对疲劳的分类主要有以下几种：根据产生的原因分为体力疲劳和脑力疲劳；根据持续时间分为急性疲劳和慢性疲劳；根据产生部位分为全身疲劳和局部疲劳。体力疲劳又称生理疲劳、肌肉疲劳或躯体疲劳。现代医学对生理疲劳的研究时间较早，19世纪80年代开始研究的运动性疲劳就指体力疲劳。1982年在波士顿召开的第5届国际运动生化会议将运动性疲劳定义为：机体生理过程不能持续其机能在特定水平上和(或)不能维持预定的运动强度。脑力疲劳又称主观疲劳、精神疲劳或心理疲劳。《心理学词典》在解释脑力疲劳时指出：心理疲劳是指精神过分集中或困扰所导致的认知疲倦。脑力疲劳主要表现为注意力不易集中，思考困难，警觉性降低，记忆力减退，***减退等。视疲劳一词是由希腊语的表达法衍生而来的，原文意指“weak eye”(眼无力)。现多数眼科学者认为本病是以病人自觉眼的症状为基础，眼或全身器质性因素与精神(心理)因素相互交织的综合征。因而也常被称为眼疲劳综合征。缓解疲劳的营养物质主要有：糖类，脂类，蛋白质，水和电解质，微量元素，抗氧化剂包括超氧化物歧化酶、过氧化氢酶，丙酮酸等，氨基酸包括亮氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、牛磺酸、肌酸等，维生素包括维生素C、维生素E、左旋肉碱、B族维生素如B1、B2、B6、B12等；抗疲劳的化学物质主要为咖啡因等。市场上以营养物质和化学物质配伍的相关保健品主要有红牛、力保健、日加满、启力、乐虎等。

中医经典《黄帝内经》对疲劳有论述，多称为“倦”、“亸”、“解惰”、“困薄”、“身重”、“体重”等。疲劳一词始见于汉张仲景《金匮要略》：“问曰：血痹病从何得之?师曰：夫尊荣人骨弱肌肤盛，重因疲劳汗出，卧不时动摇，加被微风，遂得之。”唐孙思邈《千金方》：“五劳者：一曰志劳，二曰思劳，三曰心劳，四曰忧劳，五曰疲劳……其读书、博弈等过度用目者，名曰肝劳。”中医学认为，体力产生与耐力维持的物质基础是机体内的精气血津液，这些物质的化生与输布与五脏功能密切相关；体力疲劳与肝脾关系密切，视力疲劳与肝肾关系密切，脑力疲劳与心脾关系密切。中医消除疲劳主要原则为补益与调理，补益主要包括滋阴与补阳，补气与补血，滋养肝肾等；调理主要包括健脾活血，疏肝理气等。市场上中药类的相关保健品主要以鹿茸、蜂王浆、人参和西洋参等补阳中药为主。

因此，一方面，虽然现有用于缓解疲劳、改善记忆和性功能的产品的种类繁多，但这些产品普遍存在各种各样的缺点，如长期服用容易引起过度兴奋、激素水平失衡等不良反应，治疗调理的综合效果有限以及价格昂贵等。另一方面，目前对于能够同时缓解体力疲劳和视疲劳，以及改善记忆和性功能且安全无毒副作用的中药产品存在需求。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种温和渐进的缓解疲劳的中药组合物及其制备方法；另外，本发明还提供了该中药组合物的用途。

为了实现上述发明目的，根据一方面，本发明提供了缓解疲劳的中药组合物，其由以下重量份的有效组分组成：枸杞子1-50份、黄精1-30份、山药1-30份、菊花1-30份、甘草1-15份、乌梅1-15份和陈皮1-8份。

根据一个优选实施方案，所述重量配比为：枸杞子2-25份、黄精2-15份、山药2-15份、菊花2-15份、甘草2-9份、乌梅2-9份和陈皮1-5份。根据另一个优选实施方案，所述重量配比为：枸杞子13份、黄精9份、山药9份、菊花9份、甘草4份、乌梅4份和陈皮2份。

在上述组方中，对各原料的来源、性味、归经、功效及有关的现代研究描述如下：

枸杞子：为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实。夏、秋二季果实呈红色时采收，热风烘干，除去果梗，或晾至皮皱后，晒干，除去果梗。味甘，性平。归肝、肾经。功效滋补肝肾，益精明目。”《神农本草经》列为上品，记载：“主五内邪气，热中消渴；周痹，久服坚筋骨，轻身不老。”《本草纲目》记载：“补精气诸不足，易颜色，变白，明目安神，令人长寿。”

枸杞子主要功能成分为甜菜碱、黄酮类、多糖等，营养成分中，脯氨酸和精氨酸含量高，类胡萝卜素含量高，还含有维生素C前体2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2βG)。现代医学证明，枸杞子具有抗氧化，抗衰老，预防黄斑性病变，增强造血功能，抗疲劳等多种生物活性。｛于宏；枸杞子的化学成分与生物活性；《国外医药·植物药分册》，2007，22(2)：51-53｝

黄精：为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll.EtHemsl.、黄精Polygonatum sibiricumRed.或多花黄精Polygonatumcyrtonema Hua的干燥根茎。按形状不同，***。归脾、肺、肾经。功效补气养阴，健脾，润肺，益肾。《本草纲目》记载：“补诸虚，止寒热，填精髓。”

黄精主要功能成分为甾体皂苷类包括薯蓣皂苷元、菝葜皂苷元等，还含有多糖类，生物碱、酮类、粘液质等。营养成分中，精氨酸和苏氨酸含量高。现代研究表明，黄精具有抗疲劳，提高和改善记忆，抗氧化，降血糖，降血脂等作用。｛董治程，谢昭明，黄丹，李顺祥；黄精资源、化学成分及药理作用研究概况；《中南药学》，2012，10(6)：450-453｝

山药：为薯蓣科植物薯蓣Dioscorea opposita Thunb.的干燥根茎。冬季茎叶枯萎后采挖，切去根头，洗净，除去外皮和须根，干燥，或趁鲜切厚片，干燥；也有选择肥大顺直的干燥山药，置清水中，浸至无干心，闷透，切齐两端，用木板搓成圆柱状，晒干，打光，***。归脾，肺，肾经。功效补脾养胃，生津益肺，补肾涩精。《神农本草经》：列为上品，记载:“薯蓣，主伤中，补虚羸，除寒热邪气。补中，益气力，长肌肉。久服耳目聪明，轻身，不饥，延年。”《本草纲目》记载：“益肾气，健脾胃，止泻痢，化痰涎，润皮毛。”

山药主要功能成分为甾体皂苷类、多糖等，还含有尿囊素、粘液质、甾醇、腺苷、胆碱等。营养成分中，谷氨酸、天冬氨酸和精氨酸含量高，含有丰富维生素C、维生素B1和B2。现代药理研究表明，山药具有增强肠道吸收功能，抗氧化，调节免疫，降血糖，降血脂等药理活性。｛杨秀虾；山药化学成分及药理活性研究进展；《亚太传统医药》，2013，9(5)：65-66｝

菊花：为菊科植物菊Chrysanthemum morifolium Ramat.干燥头状花序。9-11月花盛开时分批采收，阴干或焙干，或熏、蒸后晒干。药材按产地和加工方法不同，分为“亳菊”、“滁菊”、“贡菊”、“杭菊”。味甘、苦，性微寒。归肺、肝经。功效散风清热，平肝明目，清热解毒。《神农本草经》列为上品，记载：“主诸风，头眩，肿痛，目欲脱，泪出；皮肤死肌，恶风湿痹。久服利血气，轻身耐老，延年。”《本草纲目》记载：“菊春生夏茂，秋花冬实，备受四气，饱经露霜，叶枯不落，花槁不零，味兼甘苦，性禀平和。杯中体轻，神仙食也。”

菊花主要功能成分为黄酮类包括木犀草苷、密蒙花苷等，酚酸类包括绿原酸，3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸等，挥发油包括樟脑、龙脑、β-榄香烯等，还含有菊苷、多糖等。营养成分中，脯氨酸和谷氨酸含量高。国内外学者研究表明，菊花具有抗氧化，抗菌抗病毒，治疗冠心病，降低血压，预防高血脂等多种药理活性。｛姜保平，许利嘉，王秋玲，肖培根；菊花的传统使用及化学成分和药理活性研究进展；《中国现代中药》，2013，15(6)：523-530｝

甘草：为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根茎。春、秋二季采挖，除去须根，晒干。味甘，性平。归心、肺、脾、胃经。功效补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。《神农本草经》列为上品，记载：“主五脏六府寒热邪气；坚筋骨，长肌肉，倍力；金疮肿；解毒。久服轻身延年。”《本草纲目》记载：“解小儿胎毒惊痫，降火止痛。”

甘草主要功能成分为皂苷类包括甘草甜素、甘草酸、甘草次酸等，黄酮类包括甘草苷、甘草异苷等，还含有香豆素类、生物碱、多糖等。营养成分中，脯氨酸和精氨酸含量高。现代临床研究证实，甘草具有保肝护肝，抗肿瘤，抗菌抗病毒，抗溃疡，止痛等临床作用。｛田武生；甘草的化学成分和临床研究概况；《中医临床研究》，2012，4(16)：31-33｝

乌梅：为蔷薇科植物梅Prunus mume(Sieb.)sieb.et Zucc.的干燥近成熟果实。夏季果实近成熟时采收，低温烘干后闷至色变黑。味酸、涩，性平。归肝、脾、肺、大肠经。功效敛肺，涩肠，生津。《神农本草经》记载：“梅实，主下气，除热烦满，安心，止肢体痛，偏枯不仁，死肌，去青黑痣，恶肉。能益气，不饥。”《本草纲目》记载：“敛肺涩肠，止久嗽泻痢，反胃噎膈，蛔厥吐利，消肿涌痰，杀虫，解鱼毒、马汗毒、硫黄毒。”

乌梅主要功能成分为有机酸包括柠檬酸、苹果酸等，还含有黄酮类、挥发油、生物碱、三萜类、多糖、甾醇等。营养成分中，丙氨酸和脯氨酸含量高，还含有丰富的维生素C、维生素B1和B2。现代医学研究证实，乌梅具有保肝，抗菌，抗过敏，消除疲劳等作用。｛杨莹菲，胡汉昆，刘萍，刘巍，刘薇芝；乌梅化学成分、临床应用及现代药理研究进展；《中国药师》，2012，15(3)：415-417｝

陈皮，又称橘皮，为芸香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培变种的干燥成熟果皮。药材分为“陈皮”和“广陈皮”。采摘成熟果实，剥取果皮，晒干或低温干燥。味苦、辛，性温。归肺、脾经。功效理气健脾，燥湿化痰。《神农本草经》列为上品，记载：“橘柚，主胸中瘕热逆气，利水谷；久服去臭，下气，通神。一名橘皮。”《本草纲目》记载：“黄橘皮，疗呕哕反胃嘈杂，时吐清水，痰痞痎疟，大肠閟塞，妇人乳痈。入食料，解鱼腥毒。”

陈皮的主要功能成分为黄酮类包括橙皮苷、新橙皮苷等，类柠檬苦素包括柠檬苦素、诺米林等，挥发油包括α-柠檬烯、β-月桂烯等，还含有生物碱、酚酸类、香豆素类、果胶、甾醇、肌醇等。营养成分中，含有丰富的类胡萝卜素。现代药理研究表明，陈皮对胃肠道平滑肌有温和的刺激作用，能促进消化液的分泌；同时，还具有消炎杀菌，抗氧化，抗疲劳等作用。｛欧立娟，刘启德；陈皮药理作用研究进展；《中国药房》，2006，17(10)：787-789｝

本发明所提供的中药组合物方中的枸杞子补肾益精，养肝明目，黄精滋养肝肾，健脾润肺；山药补气固肾，健脾养胃，生津益肺；菊花疏散风热，清肝明目；甘草清热解毒，补脾益气，护肝安中，调和药性；乌梅敛阴补肝，生津开胃；陈皮理气健脾，疏肝行气。全方共奏滋阴补肾，益肝养血，补气健脾，清热养心，润肺生津之功效。

为了赋予中药组合物各种性能，例如改善口感、美观性或抗氧化性，除了有效成分之外，其中通常还可以包含一种或多种合乎需要的食品学或药学上可接受的辅料，包括但不限于甜味剂、抗氧化剂、酸味剂、赋形剂和防腐剂，其中甜味剂包括白砂糖、葡萄糖、糖醇类、三氯蔗糖、阿斯巴甜、安赛蜜、甜菊苷等，抗氧化剂包括L-抗坏血酸(维生素C)、L-抗坏血酸钠、异抗坏血酸、异抗坏血酸钠等，酸味剂包括柠檬酸、苹果酸、酒石酸等，赋形剂包括麦芽糊精等，防腐剂包括山梨酸、山梨酸钾等。

本发明的中药组合物可以处于便于口服的液体状态或固体状态，可以制成饮料、口服液、颗粒剂或片剂。饮料、口服液、颗粒剂或片剂可以根据本领域中已知的方法制备。

根据另一方面，本发明提供了上述中药组合物的制备方法。

本发明中药组合物的制备方法包括如下步骤：

(1)按处方比例称取枸杞子、黄精、山药、菊花、甘草、乌梅和陈皮，用5-20倍于药材重量的水，80-100℃提取2-3次，每次时间0.5-2小时；

(2)将步骤(1)的提取液合并，过滤，浓缩，得到浓缩液1；

(3)将所述浓缩液1过滤，然后进行离心分离，弃去沉淀，得到澄清的中药浓缩液。

本发明中药组合物的制备方法优选包括如下步骤：

(1)按处方比例称取枸杞子、黄精、山药、菊花、甘草、乌梅和陈皮，用5-20倍于药材重量的水在80-100℃提取2-3次，每次时间0.5-2小时；

(2)将步骤(1)中的提取液合并，过滤，浓缩，得到浓缩液1，将浓缩液1用乙醇沉淀，得到的上清液回收乙醇，浓缩，得到浓缩液2；

(3)向所述浓缩液2中加入水，进行水沉处理，然后对水沉液进行离心分离，弃去沉淀，得到澄清的中药浓缩液。

本发明中药组合物的制备方法还可以优选包括如下步骤：

(1)按处方比例称取枸杞子、黄精、山药、菊花、甘草、乌梅和陈皮，用5-20倍于药材重量的水在80-100℃提取2-3次，每次时间0.5-2小时；

(2)将步骤(1)中的提取液合并，进行离心处理，上清液采用膜分离法进行过滤，为滤过液1；

(3)将所述滤过液1采用反渗透(RO)膜分离法进行浓缩，得到浓缩液1，然后对浓缩液1再进行二次离心处理，弃去沉淀，得到澄清中药浓缩液。

根据一个优选的实施方案，上述方法进一步包括如下步骤(4)：将步骤(3)的中药浓缩液，喷雾干燥，得到中药浸膏粉。

根据一个优选的实施方案，上述方法进一步包括如下的步骤：向步骤(3)的中药浓缩液或步骤(4)的中药浸膏粉，加入一种或多种合乎需要的食品学或药学上可接受的辅料，按常规工艺制成饮料、口服液、颗粒剂或片剂。所述辅料包括但不限于甜味剂、抗氧化剂、酸味剂、赋形剂和防腐剂。

根据又一个方面，本发明提供了上述组合物的保健功能和医药用途。

本发明中药组合物的原料均属于《***关于进一步规范保健食品原料管理的通知》（卫法监发[2002]51号）中规定的既是食品又是药品的物品。同时又经过保健食品安全性毒理学评价实验证明，本发明中药组合物安全，无任何毒副作用。

本发明中药组合物经保健食品功能学检验，具有缓解体力疲劳和视疲劳的保健功能。

本发明中药组合物经药效学研究，具有改善记忆和性功能作用。

本发明有益效果：

(1)本发明中药组合物均为药食同源的中药原料，安全可靠，无任何毒副作用，口感优良，价廉易得。

(2)本发明以传统中医养生理论和现代医学研究相结合，组方设计合理，配伍严谨，作用温和渐进，具有滋阴补肾，益肝养血，补气健脾，清热养心，润肺生津之功效，能够有效消除疲倦乏力、持续运动后的肌肉疲劳、用眼过度后的视觉疲劳，同时有助于改善记忆和性功能减退。

(3)本发明中药组合物的制备方法以传统水提工艺和现代先进分离技术相结合，体现了中医方剂的特色，极大地保留了原料中的各种活性物质。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作详细说明，但不构成对本发明的任何限制。

实施例1：中药组合物饮料的制备

1.原料准备：称取枸杞子26kg、黄精18kg、山药18kg、菊花18kg、甘草8kg、乌梅8kg和陈皮4kg。

2.提取和精制：将上述原料加入到常规提取装置或常规连续动态提取装置中，加12倍于药材重量的水，90℃提取1.5小时，得到水提液1，药渣加入10倍于药材重量的水，90℃提取1.0小时，得到水提液2，药渣再加入8倍于药材重量的水，90℃提取0.5小时，得到水提液3，合并水提液1、2和3，静置，药液管式连续高速离心(离心机转速15000转/分钟)，上清液管式膜过滤（泵电机频率30-50HZ，透过液流速2-3吨/小时），滤过液采用反渗透(RO)膜浓缩（泵电机频率30-50HZ，透过液流速1-2吨/小时），得到浓缩液，浓缩液再二次管式连续高速离心(离心机转速15000转/分钟)，上清液密闭滤罐过滤除菌，得到中药浓缩液。

3.调配和过滤：将上述中药浓缩液，加入6%葡萄糖、4%白砂糖、0.03%L-抗坏血酸和0.02%柠檬酸，然后加入定量水，过滤。

4.灌装和杀菌：调配好的饮料原液，超高温瞬时灭菌后灌装，即得饮料成品。

实施例2：中药组合物口服液的制备

1.原料准备：称取枸杞子1kg、黄精1kg、山药1kg、菊花1kg、甘草15kg、乌梅15kg和陈皮8kg。

2.提取和精制：将上述原料加入到常规提取装置或常规连续动态提取装置中，加10倍于药材重量的水，90℃提取1.0小时，得到水提液1，药渣加入8倍于药材重量的水，90℃提取0.5小时，得到水提液2，药渣再加入5倍于药材重量的水，90℃提取0.5小时，得到水提液3，合并水提液1、2和3，静置，药液管式连续高速离心(离心机转速15000转/分钟)，上清液管式膜过滤（泵电机频率30-50HZ，透过液流速2-3吨/小时），滤过液RO膜浓缩（泵电机频率30-50HZ，透过液流速1-2吨/小时），得到浓缩液，浓缩液再二次管式连续高速离心(离心机转速15000转/分钟)，上清液密闭滤罐过滤除菌，得到中药浓缩液。

3.调配和过滤：将上述中药浓缩液，加入4%白砂糖和0.03%柠檬酸，然后加入定量水，过滤。

4.灌装和杀菌：调配好的口服液原液灌装后，水浴式高温灭菌（105℃灭菌30分钟），即得口服液成品。

实施例3：中药组合物颗粒剂的制备

1.原料准备：称取枸杞子25kg、黄精15kg、山药15kg、菊花15kg、甘草0.5kg、乌梅0.5kg和陈皮0.5kg。

2.提取和精制：将上述原料加入到常规提取装置或常规连续动态提取装置中，加15倍于药材重量的水，95℃提取2.0小时，得到水提液1，药渣加入12倍于药材重量的水，95℃提取1.0小时，得到水提液2，药渣再加入10倍于药材重量的水，95℃提取1.0小时，得到水提液3，合并水提液1、2和3，静置，减压浓缩至药液比重1.09-1.13(70-80℃测)，板框过滤后，药液管式连续高速离心(离心机转速15000转/分钟)，弃去沉淀，得到上清液，上清液加入20%麦芽糊精，喷雾干燥，收集中药浸膏粉。

3.造粒成型和包装：上述中药浸膏粉，加入40%糖粉，沸腾制粒，过筛，分装，即得颗粒剂成品。

实施例4：中药组合物咀嚼片的制备

1.原料准备：称取枸杞子2kg、黄精15kg、山药15kg、菊花15kg、甘草2kg、乌梅2kg和陈皮1kg。

2.提取和精制：将上述原料加入到常规提取装置或常规连续动态提取装置中，加10倍于药材重量的水，95℃提取1.5小时，得到水提液1，药渣加入8倍于药材重量的水，95℃提取1.0小时，得到水提液2，合并水提液1和2，静置，减压浓缩至药液比重1.10-1.15(70-80℃测)，板框过滤，浓缩液加入95%乙醇进行醇沉(60%)处理，隔夜得到醇上清液；将上述醇液回收乙醇，减压浓缩至药液比重1.20-1.25(70-80℃测)，加入0.5倍量纯净水，冷却到室温，冷藏(4-10℃)隔夜得到水沉液；上述水沉液管式连续高速离心(离心机转速15000转/分钟)，弃去沉淀，得到上清液，上清液加入30%麦芽糊精，喷雾干燥，收集中药浸膏粉。

3.制粒：上述中药浸膏粉，加入30%糖粉、10%预胶化淀粉和0.1%阿斯巴甜，沸腾制粒，过筛，得到颗粒。

4.压片和分装：上述颗粒，加入1.5%微粉硅胶，压片，分装，即得片剂成品。

实施例5：中药组合物小鼠急性经口毒性实验

一、检测依据：***《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)

二、材料和方法

1.受试样品处理：实施例1中步骤2的中药浓缩液（以下简称浓缩液①）和实施例3中步骤2的中药浸膏粉（以下简称浸膏粉③）分别加蒸馏水稀释至1ml样品相当于1g中药原料。

2.试验动物：昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK(沪)2012-0002。饲养室温度20℃-25℃，相对湿度40%-70%。小鼠饲料由苏州双狮实验动物饲料科技服务有限公司提供，登记证号：苏饲审(2009)05032。

3.实验方法：

⑴动物禁食(不禁水)16小时后，按体重要求选用雌、雄小鼠各10只，分放于两鼠笼内，同性别小鼠之间体重之差不超过3g。

⑵将受试样品采用最大耐受量法对实验动物染毒，小鼠逐只称重，灌胃容量按每次0.4ml/20g体重计，在24小时内2次对小鼠灌胃，2次的灌胃间隔时间为6小时。

⑶染毒后，观察动物的一般状态、体重变化、中毒症状和死亡情况等。观察期为二周。

⑷实验末再次对动物称重。对死亡动物及到期处死的动物进行尸体解剖，肉眼观察大体病理改变情况。

⑸实验全过程及观察内容均做详细记录，按最大耐受量法试验结果求得小鼠急性经口MTD。

4.实验结果：

⑴主要体征表现：试验期间各组动物活动正常，毛色光泽度好，未见任何中毒体征和死亡；到期处死动物，大体解剖肉眼观察各脏器情况，未见异常。

⑵雌性小鼠：MTD>40g中药原料/kg；雄小鼠：MTD>40g中药组合物/kg。

5.实验结论：

浓缩液①和浸膏粉③均对雌、雄小鼠急性经口毒性试验的最大耐受剂量MTD均大于40g中药原料/kg，属无毒级。

实施例6：中药组合物缓解体力疲劳功能实验

一、检测依据：***《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)

二、材料和方法

1.试验动物：昆明种小鼠，雄性，体重(20±2)g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK(沪)2012-0002。饲养室温度20℃-25℃，相对湿度40%-70%。小鼠饲料由苏州双狮实验动物饲料科技服务有限公司提供，登记证号：苏饲审(2009)05032。

2.剂量设计：实施例1中步骤2的中药浓缩液（以下简称浓缩液①）和实施例3中步骤2的中药浸膏粉（以下简称浸膏粉③），人体推荐剂量为每日24g中药原料/60kg，本实验设中、高二个剂量组，分别为4g中药原料/kg、8g中药原料/kg，相当于人体推荐剂量的10、20倍，另设蒸馏水空白对照组。

3.受试样品处理：浓缩液①和浸膏粉③分别加蒸馏水稀释至1ml样品相当于0.2g中药原料，1ml样品相当于0.4g中药原料，即为中、高二个剂量组的供试液。

4.给药途径：灌胃，灌胃容量0.4ml/20g体重。

5.统计方法：实验结果均用SPSS13.0版软件进行方差分析。

6.实验方法与结果

取小鼠150只，逐只称重，按体重分层随机分为15组，每组10只。以每5组为一个实验大组，进行一项试验。所有动物按剂量设计连续喂养30天，每周称重，根据体重调整给样量。

6.1负重游泳试验：

于末次灌胃后30分钟，将小鼠放入水中游泳，水深30cm，水温25℃±1℃，小鼠尾根部负荷5%体重铅皮，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。结果见表1。

表1样品对小鼠负重游泳时间的影响

注：*P<0.05，与对照组比较

由上表可见，各组间动物体重在试验初和试验末均无显著性差异；浓缩液①和浸膏粉③高剂量组与对照组相比，负重游泳时间明显延长，有显著性差异。

6.2血清尿素测定：

于末次灌胃后30分钟，将小鼠放入30℃水中不负重游泳90分钟，取出擦干，休息60分钟后采血，离心，取血清测尿素。结果见表2。

表2样品对小鼠运动后血清尿素的影响

注：*P<0.05，与对照组比较

由上表可见，各组间动物体重在试验初和试验末均无显著性差异；浓缩液①和浸膏粉③高剂量组与对照组相比，血清尿素水平明显减少，有显著性差异。

6.3肝糖原测定

于末次灌胃后30分钟处死小鼠，立刻取肝脏，在生理盐水中漂洗后吸干水份，检测肝糖原。结果见表3。

表3样品对小鼠肝糖原的影响

注：*P<0.05，与对照组比较

由上表可见，各组间动物体重在试验初和试验末均无显著性差异；浓缩液①和浸膏粉③高剂量组与对照组相比，肝糖原水平明显增加，有显著性差异。

7.结论：在本次试验条件下，负重游泳试验结果阳性，且血清尿素、肝糖原指标阳性，故认为浓缩液①和浸膏粉③对小鼠具有缓解体力疲劳功能。

实施例7：中药组合物缓解视疲劳功能实验

一、检测依据：《关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知》(国食药监保化[2012]107号)附件4缓解视疲劳功能评价方法。

二、受试者纳入标准：按自愿原则选择年龄为18-65岁，长期用眼，视力易疲劳的受试者120名。

三、受试者排除标准：患有感染性、外伤性眼部疾病者；进行眼部手术不足3个月者；患有角膜、晶体、玻璃体、眼底病变等内外眼疾患者；患有心血管、脑血管、肝、肾、造血***等疾病者；妊娠或哺乳期妇女及过敏体质患者；短期内服用与受试功能有关的物品，影响对结果的判定者；长期服用有关治疗视力的药物、保健食品或使用其他治疗方法未能终止者；不符合纳入标准，未按规定食用受试物者或资料不全等影响功效或安全性判定者。

四、试验方法

1.试验分组：120例受试者采用随机双盲法分为试食组和安慰剂对照组，每组各60例，年龄、性别、视力等因素具有可比性，试验采用自身前后对照和组间对照。

2.试食方法：试食组服用实施例1中饮料（以下简称饮料①），对照组服用安慰剂，均为每日2次，每次1瓶，服用时间为60天。

3.观察指标：各项指标于试食试验开始及结束时各测定1次。

3.1安全性指标：一般体格检查血、尿、便常规，查血生化指标，胸透、心电图、B超检查，不良反应观察。

3.2功效性指标：于试食开始及结束时检查。

3.2.1问卷调查：症状询问、用眼情况。

3.2.2眼科检查：包括眼底检查、视力检查(近视、远视、散光等)。

3.2.3明视持久度：明视时间对注视时间的百分比称为明视持久度。

3.3功效判定标准

3.3.1明视持久度：试食组自身比较或试食组与对照组组间比较，明视持久度差异有显著性(p<0.05)，且平均明视持久度提高大于等于10%为有效。

3.3.2症状平均积分：计算每位试食者试食前后的症状积分，分别计算两组的平均积分值，并进行统计学检验。

表4视疲劳症状判定方法(半定量积分法)

注：“偶感”是指1－2次／2天；“时有”是指1－3次／天；“经常”是指>3次／天

4.统计方法：数据统计均用SPSS13.0版软件包，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验。

五、试验结果

1.受试者实验前的一般资料：共观察120例视疲劳者，随机分为试食组、对照组各60例。试食结束时，试食组7例未按时复查，有3例中途退出；对照组有8例未按时复查，2例中途退出。试食组与对照组各有10例符合受试者排除标准，病例脱失率均为16.67%。符合纳入标准的试食组50例，其中男性12例，女性38例。对照组50例，其中男性11例，女性39例。全部受试者经内眼、外眼检查基本正常。试食前两组各项指标无明显差异(P>0.05)。具体见表5。

表5试食前一般资料比较

组别	有效例数	年龄(岁)	明视持久度(%)	症状积分
					试食组	50	46.50±6.79	56.59±4.59	10.22±2.33
对照组	50	48.32±7.22	57.32±4.48	10.24±2.35

2.明视持久度变化：具体见表6

表6试食前后明视持久度变化统计

组别	有效例数	试食前(%)	试食后(%)	提高(%)
					试食组	50	56.59±4.59	66.96±4.91##**	10.37±3.54**
对照组	50	57.32±4.48	58.84±4.81	1.52±1.98

注：##与试食前自身比较P<0.01，**与对照组比较P<0.01。

3.症状积分变化：具体见表7。

表7试食前后症状积分统计(±SD)

组别	有效例数	试食前	试食后	差值
					试食组	50	10.46±2.42	7.20±2.11##**	3.26±1.63**
对照组	50	10.28±2.27	9.56±1.80	0.72±1.11

注：##与试食前自身比较P<0.01，**与对照组比较P<0.01。

六.结论：

在本次研究下，试食组明视持久度，试食前后自身比较差异有显著性(P<0.01)，试食后明视持久度提高10.37%，大于10%，且与对照组试食后明视持久度比较差异有显著性(P<0.01)；试食组症状积分，试食前后自身比较差异有显著性(P<0.01)，试食后症状积分减分值、与对照组症状积分减分值比较差异有显著性(P<0.01)。故认为饮料①对人体具有缓解视疲劳作用。

实施例8：中药组合物辅助改善记忆功能实验

一、检测依据：***《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)

二、材料和方法

1.试验动物：昆明种小鼠，雄性，体重(20±2)g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK(沪)2012-0002。饲养室温度20℃-25℃，相对湿度40%-70%。小鼠饲料由苏州双狮实验动物饲料科技服务有限公司提供，登记证号：苏饲审(2009)05032。

2.剂量设计：实施例1中步骤2的中药浓缩液（以下简称浓缩液①）和实施例3中步骤2的中药浸膏粉（以下简称浸膏粉③），人体推荐剂量为每日24g中药原料/60kg，本实验设中、高二个剂量组，分别为4g中药原料/kg、12g中药原料/kg，相当于人体推荐剂量的10、30倍，另设蒸馏水空白对照组。

3.受试样品处理：浓缩液①和浸膏粉③分别加蒸馏水稀释至1ml样品相当于0.2g中药原料，1ml样品相当于0.6g中药原料，即为中、高二个剂量组的供试液。

4.给药途径：灌胃，灌胃容量0.4ml/20g体重。

5.统计方法：实验结果均用SPSS13.0版软件进行方差分析。

6.实验方法与结果

取小鼠100只，逐只称重，按体重分层随机分为10组，每组10只。以每5组为一个实验大组，进行一项试验。所有动物按剂量设计连续喂养45天，每周称重，根据体重调整给样量。

6.1跳台实验：

末次灌胃后次日开始训练。将小鼠放入反应箱内适应3分钟，然后将小鼠放置反应箱内的铜栅上，立即通以36伏交流电，小鼠的正常反应是跳回到绝缘平台上。多数动物可能再次或多次跳至铜栅上，受到电击又迅速跳回平台。训练一次后，将动物放在反应箱内的平台上，记录5分钟内各鼠跳下平台的错误次数和第一次跳下平台的潜伏期，以此作为学***台上，记录各鼠第一次跳下平台的潜伏期、各鼠3分钟内电击次数和受电击的动物数总数，同时计算出现错误反应的动物的百分率(受电击的动物数占该组动物总数的百分率)。结果见表8。

表8样品对小鼠跳台实验的影响

注：*P<0.05，与对照组比较

由上表可见，各组间动物体重在试验初和试验末均无显著性差异；浓缩液①和浸膏粉③高剂量组与对照组相比，跳下平台的潜伏期明显延长，有显著性差异。

6.2避暗实验：

末次灌胃后次日开始训练。实验时将小鼠面部背向洞口放入明室，同时启动计时器，小鼠穿过洞口进入暗室受到电击，计时器停止，取出小鼠，记录每鼠从放入明室至进入暗室内遭电击所需的时间，即潜伏期，训练5分钟，并记录5分钟内电击次数。24h后同一时间，进行重复测验，记录每鼠进入暗室的潜伏期和5分钟内的电击次数，并计算5分钟内进入暗室(错误反应)的动物百分率。结果见表9。

表9样品对小鼠避暗实验的影响

注：*P<0.05，与对照组比较

由上表可见，各组间动物体重在试验初和试验末均无显著性差异；浓缩液①和浸膏粉③高剂量组与对照组相比，进入暗室的潜伏期明显延长，有显著性差异。

7.结论：在本次试验条件下，跳台实验和避暗实验结果阳性，故认为浓缩液①和浸膏粉③对小鼠具有辅助改善记忆功能。

实施例9：中药组合物对去势大鼠******功能及生殖器官发育的影响

一、实验依据：陈奇主编《中药药理研究方法学》

二、材料和方法

1.试验动物：Wistar大鼠，雄性，体重100g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK（沪）2012-0002。饲养室温度20℃-25℃，相对湿度40％-70％。大鼠饲料由苏州双狮实验动物饲料科技服务有限公司提供，登记证号：苏饲审（2009）05032。

2.模型的建立：50只雄性大鼠，用***浅麻醉，常规消毒，切除两侧睾丸。于术后第二天随机分组。

3.剂量设计：实施例1中步骤2的中药浓缩液（以下简称浓缩液①）和实施例3中步骤2的中药浸膏粉（以下简称浸膏粉③），人体推荐剂量为每日24g中药原料/60kg，本实验设中、高二个剂量组，分别为2g中药原料/kg、6g中药原料/kg，相当于人体推荐剂量的5、15倍，另设蒸馏水空白对照组。

4.受试样品处理：浓缩液①和浸膏粉③分别加蒸馏水稀释至1ml样品相当于0.4g中药原料，1ml样品相当于1.2g中药原料，即为中、高二个剂量组的供试液。

5.给药途径：灌胃，灌胃容量0.5mL/100g体重。

6.统计方法：实验结果均用SPSS13.0版软件进行方差分析。

7.实验方法与结果

取大鼠50只，逐只称重，按体重分层随机分为5组，每组10只。所有动物按剂量设计连续喂养45天，每周称重，根据体重调整给样量。末次灌胃后1h，将电刺激器的刺激电极放置于大鼠***部位，给予表面部电刺激，记录从刺激开始至******时间（***潜伏期）；再将大鼠处死并解剖各组大鼠，立即称取***腺、***+和***的重量，计算脏器指数。结果见表10。

表10样品对去势大鼠******功能及生殖器官发育的影响

注：*P<0.05，与对照组比较

由上表可见，各组间动物体重在试验初和试验末均无显著性差异；浓缩液①和浸膏粉③高剂量组与对照组相比，能明显缩短去势大鼠******潜伏期，同时能明显促进去势大鼠***腺、***和***囊的生长发育，有显著性差异。

8.结论：在本次试验条件下，去势大鼠******功能实验和生殖器官发育实验的结果阳性，故认为浓缩液①和浸膏粉③能辅助改善去势大鼠性功能。

最后需要说明的是：上述实施例仅仅是为清楚的说明本发明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其他不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。

Claims (8)

1.一种中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，所述中药组合物有效组分由枸杞子、黄精、山药、菊花、甘草、乌梅和陈皮组成，重量配比为：枸杞子13份、黄精9份、山药9份、菊花9份、甘草4份、乌梅4份和陈皮2份。

2.如权利要求1所述的中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，其特征在于，所述中药组合物还包含一种或多种食品学或药学上可接受的辅料。

3.如权利要求1所述的中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，其特征在于所述中药组合物的制备方法包括步骤：

(1)按权利要求1所述的中药组合物中的重量配比称取枸杞子、黄精、山药、菊花、甘草、乌梅和陈皮，用5-20倍于药材重量的水，80-100℃提取2-3次，每次时间0.5-2小时；

(2)将步骤(1)的提取液合并，过滤，浓缩，得到浓缩液1；

(3)将所述浓缩液1过滤，然后进行离心分离，弃去沉淀，得到澄清的中药浓缩液。

4.如权利要求1所述的中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，其特征在于所述中药组合物的制备方法包括步骤：

(1)按权利要求1所述的中药组合物中的重量配比称取枸杞子、黄精、山药、菊花、甘草、乌梅和陈皮，用5-20倍于药材重量的水在80-100℃提取2-3次，每次时间0.5-2小时；

(2)将步骤(1)中的提取液合并，过滤，浓缩，得到浓缩液1，将浓缩液1用乙醇沉淀，得到的上清液回收乙醇，浓缩，得到浓缩液2；

(3)向所述浓缩液2中加入水，进行水沉处理，然后对水沉液进行离心分离，弃去沉淀，得到澄清的中药浓缩液。

5.如权利要求1所述的中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，其特征在于所述中药组合物的制备方法包括步骤：

(1)按权利要求1所述的中药组合物中的重量配比称取枸杞子、黄精、山药、菊花、甘草、乌梅和陈皮，用5-20倍于药材重量的水在80-100℃提取2-3次，每次时间0.5-2小时；

(2)将步骤(1)中的提取液合并，进行离心处理，上清液采用膜分离法进行过滤，为滤过液1；

(3)将所述滤过液1采用反渗透(RO)膜分离法进行浓缩，得到浓缩液1，然后对浓缩液1再进行二次离心处理，弃去沉淀，得到澄清中药浓缩液。

6.如权利要求3-5任意一项所述中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，所述中药组合物的制备方法进一步包括如下步骤(4)：将步骤(3)的中药浓缩液，喷雾干燥，得到中药浸膏粉。

7.如权利要求3-5任意一项所述中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，所述中药组合物的制备方法进一步包括如下步骤：向步骤(3)的中药浓缩液，加入一种或多种食品学或药学上可接受的辅料，按常规工艺制成饮料、口服液、颗粒剂或片剂。

8.如权利要求6所述中药组合物在制备用于缓解视疲劳的保健品或药物中的用途，所述中药组合物的制备方法进一步包括如下步骤：向步骤(4)的中药浸膏粉，加入一种或多种食品学或药学上可接受的辅料，按常规工艺制成饮料、口服液、颗粒剂或片剂。