CN103656415A - 一种咽炎片的应用及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供咽炎片在制备抑制L1210小鼠白血病细胞增殖药物中的应用，咽炎片的制备方法为：取玄参120g、百部90g、天冬90g、牡丹皮90g、麦冬90g、款冬花90g、木蝴蝶30g、地黄90g、板蓝根150g、青果90g、蝉蜕30g、薄荷油0.3g，以上十二味，除薄荷油外，款冬花粉碎成细粉，过筛；其余玄参等十味加水煎煮两次，合并煎液，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与款冬花粉末混合，干燥，制成颗粒，喷加薄荷油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。
Description
技术领域
本发明涉及中药制剂技术领域，具体涉及一种咽炎片的应用及制备方法。
背景技术
咽炎片记载于***标准，制备方法为：取玄参120g、百部90g、天冬90g、牡丹皮90g、麦冬90g、款冬花90g、木蝴蝶30g、地黄90g、板蓝根150g、青果90g、蝉蜕30g、薄荷油0.3g，以上十二味，除薄荷油外，款冬花粉碎成细粉，过筛；其余玄参等十味加水煎煮两次，合并煎液，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与款冬花粉末混合，干燥，制成颗粒，喷加薄荷油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得，现有技术中，尚未有其在制备抑制L1210小鼠白血病细胞增殖药物中的应用报道。
发明内容
发明目的：为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种咽炎片的应用及制备方法。
技术方案：本发明的目的是通过如下的方案实现的：
咽炎片在制备抑制L1210小鼠白血病细胞增殖药物中的应用，咽炎片的制备方法为：取玄参120g、百部90g、天冬90g、牡丹皮90g、麦冬90g、款冬花90g、木蝴蝶30g、地黄90g、板蓝根150g、青果90g、蝉蜕30g、薄荷油0.3g，以上十二味，除薄荷油外，款冬花粉碎成细粉，过筛；其余玄参等十味加水煎煮两次，合并煎液，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与款冬花粉末混合，干燥，制成颗粒，喷加薄荷油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。
上述咽炎片在制备抑制L1210小鼠白血病细胞增殖药物中的应用，加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水为药材重量的6-10倍量，煎煮1-2h。
有益效果：咽炎片能抑制L1210小鼠白血病细胞增殖，能用于制备抑制L1210小鼠白血病细胞增殖药物。
具体实施方式
以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
取玄参120g、百部90g、天冬90g、牡丹皮90g、麦冬90g、款冬花90g、木蝴蝶30g、地黄90g、板蓝根150g、青果90g、蝉蜕30g、薄荷油0.3g，以上十二味，除薄荷油外，款冬花粉碎成细粉，过筛；其余玄参等十味加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的8倍量，煎煮1h，第二次加水为药材重量的6倍量，煎煮1h，合并煎液，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与款冬花粉末混合，干燥，制成颗粒，喷加薄荷油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。
实施例2
取玄参120g、百部90g、天冬90g、牡丹皮90g、麦冬90g、款冬花90g、木蝴蝶30g、地黄90g、板蓝根150g、青果90g、蝉蜕30g、薄荷油0.3g，以上十二味，除薄荷油外，款冬花粉碎成细粉，过筛；其余玄参等十味加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的10倍量，煎煮1.5h，第二次加水为药材重量的8倍量，煎煮1.5h，合并煎液，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与款冬花粉末混合，干燥，制成颗粒，喷加薄荷油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。
实施例3
取玄参120g、百部90g、天冬90g、牡丹皮90g、麦冬90g、款冬花90g、木蝴蝶30g、地黄90g、板蓝根150g、青果90g、蝉蜕30g、薄荷油0.3g，以上十二味，除薄荷油外，款冬花粉碎成细粉，过筛；其余玄参等十味加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的12倍量，煎煮2h，第二次加水为药材重量的10倍量，煎煮2h，合并煎液，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与款冬花粉末混合，干燥，制成颗粒，喷加薄荷油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。
实施例4：咽炎片抑制L1210小鼠白血病细胞增殖的实验研究资料
1实验材料
1.1实验用细胞株
L1210小鼠白血病细胞，南京医科大学实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。
1.2实验药物
研究药物：本发明咽炎片：按实施例3方法制备。
药液储液：称取100mg咽炎片，溶于5ml无水乙醇中，0.2μm滤器过滤，500μl doff管分装，-20℃存储，同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
1.3实验试剂
DMEM（GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.No.758137）；胎牛血清（浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419）；NaHCO3（上海久亿化学试剂有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387）；Trypsin（AMRESCO公司批号：2010/04）；EDTA（AMRESCO公司批号：2009/10）；Penicillin G Sodium Salt（AMRESCO公司批号：2010242）；Streptomycin Sulfate（AMRESCO公司批号：2010382）；无水乙醇（南京化学试剂有限公司批号：080310182）；MTT(Biosharp批号：0793);PBS（实验室自配）；
1.4实验器材
莱卡倒置显微镜（德国Leica型号：DM1L）；可见-紫外光微孔板检测仪（美国MD公司型号：SPECTRA MAX190）；CO2培养箱（FORMA型号：3111）；超净台（苏净集团安泰公司制造型号：SW-CJ-ZFD）；纯水仪（美国Spring公司型号：S/N020579）；精密移液器（法国吉尔森公司型号：P2）；电子天平（德国赛多利斯有限公司型号：BT323S）；全自动高压灭菌锅（日本SANYO公司型号：MLS-3020）；台式电热鼓风干燥箱（上海精密实验设备公司型号：DHG9123A）；冰箱（西门子公司型号：KG18V21TI）；液氮罐（CBS型号：2001）；低速离心机（上海安亭科学仪器厂型号：KA-1000）；0.2μm滤器（MILLIPORE型号：SLGP033RB）；10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板（NEST公司）；细胞计数板；离心管、移液管、Tips若干。
2实验方法
1）L1210小鼠白血病细胞用DMEM+10%FBS于37℃、5%CO2进行常规培养（10cm培养皿），当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA，37℃消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，1000rpm离心5min，调整细胞悬液浓度3×104个/ml。
2）将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180μl，培养板放入细胞培养箱中（37℃，5%CO2）常规培养。
3）根据细胞生长情况，一般长至50%-70%，加入咽炎片溶液，继续培养24h。
4）24h后加入20μl MTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。
5）4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
6）同时设置本底（不加细胞，只加培养液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜），每组设定6个复孔。
7）结果以药物对细胞的抑制率表示：
细胞增值抑制率（%）=（对照孔OD值-给药孔OD值）/对照孔OD值×100%。实验重复3次。
3统计处理
采用Microsoft Excel2003软件中的相关分析和Student t检验，数据以mean±S.D.表示。
4实验结果
MTT法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对B16细胞增殖抑制有差异（P<0.05），剂量在10mg/ml时该差异具有显著性（P<0.01），当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异（P<0.001）。
表1咽炎片对L1210小鼠白血病细胞增殖抑制影响研究
注：与对照组比较，*P<0.01；**P<0.001
5实验结论
咽炎片可以抑制L1210小鼠白血病细胞增殖，减少L1210小鼠白血病细胞的细胞生长数目，该作用呈剂量依赖性。
Claims (2)
1.咽炎片在抑制L1210小鼠白血病细胞增殖药物中的应用，其特征在于咽炎片的制备方法为：取玄参120g、百部90g、天冬90g、牡丹皮90g、麦冬90g、款冬花90g、木蝴蝶30g、地黄90g、板蓝根150g、青果90g、蝉蜕30g、薄荷油0.3g，以上十二味，除薄荷油外，款冬花粉碎成细粉，过筛；其余玄参等十味加水煎煮两次，合并煎液，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与款冬花粉末混合，干燥，制成颗粒，喷加薄荷油，混匀，压制成1000片，包糖衣，即得。
2.根据权利要求1所述一种咽炎片在抑制L1210小鼠白血病细胞增殖药物中的应用，其特征在于加水煎煮两次，第一次加水为药材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水为药材重量的6-10倍量，煎煮1-2h。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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Inventor after: Zhao Cuiyan Inventor after: Sun Yanli Inventor after: Zhang Ailing Inventor before: Li Qiang |
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| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: LI QIANG TO: ZHAO CUIYAN SUN YANLI ZHANG AILING |
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Effective date of registration: 20170930 Address after: 226500 Yang Zhuangju, Dong Chen Town, Rugao City, Jiangsu, Nantong Patentee after: RUGAO DINGBEI Hospital Address before: 266000 Shandong city of Qingdao province Zhongshan Road City, No. 10 room 2106 Patentee before: QINGDAO QINGCHEN MEDICAL TECHNOLOGY CO.,LTD. |
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Effective date of registration: 20191223 Address after: 063000 No.75, caoxiqin East Road, Fengrun District, Tangshan City, Hebei Province Patentee after: Hebei Sanshi Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 226500 Yang Zhuangju, Dong Chen Town, Rugao City, Jiangsu, Nantong Patentee before: RUGAO DINGBEI Hospital |
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Effective date of registration: 20211101 Address after: No.75, East CaoXueqin Road, Fengrun District, Tangshan City, Hebei Province 063000 Patentee after: Hebei Huizheng Biotechnology Co.,Ltd. Address before: No.75, East CaoXueqin Road, Fengrun District, Tangshan City, Hebei Province 063000 Patentee before: Hebei Sanshi Pharmaceutical Co.,Ltd. |
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Granted publication date: 20150923 Termination date: 20211220 |