CN103497897B - 一株拟茎点霉属真菌及其在制备菌纹木中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株拟茎点霉属菌株(<i>Phomopsis</i>?sp.)J9GAN及其在制备菌纹木中的应用,属于微生物技术领域。所述菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC?No:7108。所述菌株对木质基材料具有优良的浸染能力,浸染时间短且深度大,在材料表面能形成美观的色泽及纹理,且对物理力学强度无影响。用所述菌株制备菌纹木的方法包括菌株活化、扩繁与接菌培养步骤,首先将菌株接种到活化与扩繁培养基上,在22~30℃下活化与扩繁7~15天,然后将木质基材料灭菌,与扩繁菌株充分接触,在22~30℃下培养4~8周即可。本发明所述方法工艺合理,操作简单,所制得的菌纹木具有很好的装饰效果,且对基材的物理力学性质无影响,有利于大规模生产和推广应用。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一种侵染时间短且深度大,色泽及纹理美观,对木质基材料物理力学强度无影响的拟茎点霉属真菌菌株及其在制备菌纹木中的应用。
背景技术
木材的真菌色变长期以来被视为木材的缺陷,降低了木材的价值,实际上真菌的色变,如线条、染色等,具有自然天成、独一无二的特点,当腐朽不严重时可以作为木材的一种奇妙的修饰。若利用这种带有自然线条或色彩的木材制作工艺品,如花瓶、耳环、钢笔、贴木单板等,可提高木材的附加价值。带有天然花纹和色泽的菌纹木在市场,尤其装饰、装修、工艺品市场将会受到欢迎。
但是天然获得的菌纹木仍存在以下不足:1、原料不易获得,带有很强的偶然性,因为天然菌纹木在自然界中只有在具有可形成菌纹木的菌种存在时才有可能形成,所以只有少部分林中的枯枝倒木中能找到少量菌纹木;2、天然菌纹木形成的时间长,受到很多气候、环境因素的影响,如干燥、寒冷、缺氧等或其他微生物干扰等;3、天然菌纹木在自然条件下形成,常常存在某些菌种对木质基材料侵染过度的问题,导致材料的强度损失严重,无法进行加工使用,或者渗透性明显增加,在进行防腐、阻燃等后处理时会吸入过多的药剂,导致成本成倍增加;4、天然菌纹木在自然条件下形成,木材大小、形态不可预见,加工时或将损失美观线条的部分;5、天然菌纹木在自然条件下形成,易受到虫害或其他真菌侵染,使木材不完整或形成不美观的腐朽或变色。
因此,有必要分离、改良一种侵染时间短且深度大,色泽及纹理美观,对木质基材料物理力学强度无影响的菌株,用其对木质基材料进行侵染处理制备菌纹木,以满足装饰、装修、工艺品制作的需要。
发明内容
本发明要解决的第一技术问题在于提供一种侵染时间短且深度大,色泽及纹理美观,对木质基材料物理力学强度无影响的真菌菌株。
本发明要解决的第二技术问题在于提供所述真菌菌株在制备菌纹木中的应用。
为解决上述技术问题,本发明采用如下技术方案。
除非另有说明外,本发明中所采用的百分数均为体积百分数。
一株拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.),命名为J9GAN,经鉴定为拟茎点霉属的一种真菌(Phomopsissp.)的一个株系,是从腐朽的树桩、倒木或枯枝中分离得到,已于2013年1月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100080),其保藏编号为CGMCCNo:7108。
一种用所述拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.)J9GAN制备菌纹木的方法,包括菌株扩繁、接菌培养工序,具体包括以下步骤:
A、菌株扩繁:将拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.)J9GAN接种到扩繁培养基上,在22~30℃下黑暗培养7~15天,得扩繁菌株;活化与扩繁培养基为PDA培养基、PDA液态培养基、MA培养基、OA培养基任一种;
B、接菌培养:将待接种的木质基材料灭菌后,与扩繁菌株充分接触,在22~30℃下培养4~8周,即得菌纹木。
本发明的有益效果包括以下几个方面。
1、本发明所述菌株对木质基材料的侵染效果好,在非常短的时间内即可在木质基材料表面及内部产生美丽的花纹和颜色。采用固体接菌法,在处理后的第5~6周,基材表面即有纹理和色斑产生,处理后的第6~8周,处理深度在横向及纵向方向上均可达0.2~0.7cm。采用液体接菌法,在处理后的第4~6周,基材表面即有纹理和色斑产生,处理后的第6~8周,处理深度在横向及纵向方向上均可达0.3~0.8cm。
2、本发明所述菌株对木质基材料的侵染方式非常多样,能够形成不同效果的花纹,适用于不同的处理对象。采用固体接菌法,有利于形成生动多变的具有圈状图案的花纹,更有利于按照装饰设计的需求形成局部的纹理。而采用液体接菌法,更有利于形成长而弯曲的细线状线条,更迅速地在木块内部形成花纹,更有利于处理形体不规则的样品,消除处理死角,使处理效果事半功倍。
3、本发明所述菌株及菌纹木的制备方法对木质基材料的物理力学性能,如质量、密度、强度,均无影响。接菌处理后的第8周,电镜扫描结果显示真菌的菌丝体主要位于木质基材料的细胞腔中,对细胞壁几乎无损伤。由于菌丝没有对木质基材料的细胞壁形成明显的破坏,所制备的菌纹木在吸湿性、密度与强度方面的性能与健康材无明显差别。
4、本发明所述菌纹木的制备方法技术路线合理、操作流程简单、原料易得、成功率高,有利于大规模生产和推广应用。
附图说明
图1为实施例2中处理后毛白杨切面的表面的花纹。
图2为实施例2中毛白杨处理后纵切面的表面的花纹。
图3为实施例3中毛白杨处理后横切面的表面的花纹。
图4为实施例3中毛白杨处理后纵切面的表面的花纹。
图5为实施例3中毛白杨处理后纵剖面的花纹。
图6为实施例4中毛白杨处理后横切面的表面的花纹。
图7为实施例4中毛白杨处理后纵切面的表面的花纹。
图8为实施例4中毛白杨处理后纵剖面的花纹。
图9为实施例5中思茅松木处理后横切面的表面的花纹。
图10为实施例5中思茅松木处理后纵切面的表面的花纹。
图11为实施例5中思茅松木处理后纵剖面的花纹。
图12为实施例7中毛白杨处理后横切面的表面的扫描电镜图。
图13为实施例7中毛白杨处理后具花斑纹处的弦切面的扫描电镜图。
图14为实施例7中毛白杨处理后具花斑纹处的径切面的扫描电镜图。
具体实施方式
下面对本发明作进一步的说明,但不以任何方式对本发明加以限制,基于本发明教导所作的任何变换,均落入本发明的保护范围。
一株拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.)J9GAN,于2013年1月21日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100080),其保藏编号为CGMCCNo:7108。
所述菌株能够在木质材料表面形成黑色、灰色、褐色的线状、带状、块状、团状、点状花纹中任一种或几种。
所述菌株在接种到木质基材料后的第4~6周即能在木质基材料的表面产生花纹,接种6~8周,木质基材料中的花纹深度可达0.3~0.8cm。
所述菌株是通过下述具体步骤获得的:
A、标本采集:在腐朽树桩、倒木或枯枝中,采集具有黑色、灰色、褐色的线状、带状、块状、团状或点状花纹中的任一种或几种的木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体,保存备用;
B、菌株分离与筛选:将采集的木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体破碎、消毒后,置于富集培养基中在22~30℃黑暗中静置培养7~15天至长出菌丝;富集培养基为PDA培养基、MA培养基、OA培养基任一种;
将菌落正面白色,背面浅黄褐色,圆周状发散生长,气生菌丝不发达,毛毡状,边缘不平整,在与周围菌丝体之间的培养基上形成黑色线条的菌落挑取,接种至增殖培养基中22~30℃黑暗中静置培养5~12天至菌落长出;增殖培养基为PDA培养基、MA培养基、OA培养基任一种;
C、菌种保存:挑取增殖培养基中菌落周围形成线条者接种至保存培养基中,于恒温箱中温度22~30℃,黑暗静置培养5~10天,于4℃冰箱中保存;保存培养基为PDA培养基、MA培养基、OA培养基的任一种;
PDA培养基成分以g/L计为:马铃薯160~240、葡萄糖10~20、琼脂14~20、自然pH;
PDA培养基成分以g/L计优选为:马铃薯200、葡萄糖15、琼脂17、pH6.5~7.0;
MA培养基成分以g/L计为:麦芽膏21~30、琼脂14~20、PH6.0~7.5;
MA培养基成分以g/L计优选为:麦芽膏25、琼脂17、PH6.5~7.0;
OA培养基成分以g/L计为:燕麦片27~33、琼脂14~20、PH6.0~7.5;
OA培养基成分以g/L优选为:燕麦片30、琼脂17、PH6.5~7.0。
步骤A所述的标本采集是在温暖潮湿的阔叶林、针叶林或针阔叶混交林中进行。
步骤A所述的标本采集优选在温暖潮湿的阔叶林中进行。
步骤A所述的木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体采集后需冷藏保存备用,冷藏温度为4℃。
步骤A所述的标本采集优选在杨柳科杨属、桦木科桤属、桦木属、蔷薇科樱桃属、杉科杉木属、木棉科轻木属、壳斗科栎属树种的腐朽树桩、倒木或枯枝中,采集具有黑色、灰色、褐色的线状、带状、块状、团状或点状花纹中的任一种或几种的木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体,保存备用。
所述杨属树种优选毛白杨。
所述桦木属树种优选西南桦。
所述桤属树种优选西南桤木。
步骤B所述的破碎,是用解剖刀将木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体切成0.3~0.8cm×0.3~0.8cm×0.3~0.8cm的小块。
步骤B所述的消毒,是用75%酒精浸泡消毒10~15s,再用0.1%升汞浸泡消毒3~7min,再用灭菌蒸馏水清洗3次。
步骤B所述的富集培养的条件优选:26℃黑暗静置培养9天。
步骤B所述的菌株分离与筛选是从富集培养基中将菌落正面白色,背面浅黄褐色,圆周状发散生长,气生菌丝不发达,毛毡状,边缘不平整,在与周围菌丝体之间的培养基上形成黑色线条的菌落挑取,接种至增殖培养基中。
步骤B所述的增殖培养的条件优选:22~30℃黑暗中静置培养10天。
步骤C所述的保存培养的条件优选:22~30℃黑暗中静置培养8天。
一种用所述的拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.)J9GAN制备菌纹木的方法,包括菌株活化、接菌培养工序,具体包括以下步骤:
A、菌株活化与扩繁:将拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.)J9GAN接种到活化培养基上,在22~30℃下培养7~15天,得活化与扩繁菌株;
活化与扩繁培养基为PDA培养基、PDA液态培养基、MA培养基、OA培养基任一种;
PDA液态培养基成分以g/L计为:马铃薯160~240、葡萄糖10~20、自然PH;
PDA液态培养基成分以g/L计优选为:马铃薯200、葡萄糖15、PH6.5~7.0;
B、接菌培养:将待接种的木质基材料灭菌后,与活化菌株充分接触,在22~30℃下培养4~8周,即得菌纹木。
所述的制备方法,还可以包括后处理步骤,将接菌培养后得到的菌纹木刮去表面的菌丝,洗净干燥至含水率8~10%。
步骤B所述的木质基材料为原木、实木块、木板、木皮、木薄片、木棒、异形木制品中的任一种或几种。
步骤B所述的木质基材料的树种可以为任意树种。
步骤B所述的木质基材料的树种优选毛白杨、西南桦、西南桤木、思茅松。
步骤B所述的木质基材料在接种前,可根据需要加工成任意的形状。
步骤B所述的灭菌,是将木质基材料在高压蒸汽式灭菌器中,在121℃下灭菌处理20分钟以上。
步骤B所述的灭菌,是将木质基材料置于培养瓶中,将蛭石倒入培养瓶中至覆盖木块,加少量水使木块及蛭石湿润,盖上瓶盖,置于高压蒸汽式灭菌器中,在121℃灭菌60分钟。
步骤B所述的将待接种的木质基材料与活化菌株充分接触,在固体接菌时是将含有菌落的培养基切成与待接种木质基材料大小、形状相近的菌块,将至少一块菌块贴在木质基材料表面。
所述菌块的尺寸和形状优选为边长1~4cm的三角形、方形、多边形或面积相近的圆形。
所述菌块的总面积在2cm2以上。
步骤B所述的将待接种的木质基材料与活化菌株充分接触,在液体接菌时,是将待接种的木质基材料浸入含有菌落的培养液中,且/或将成团的菌丝体夹取置于木质基材料的表面或附近。
所述菌丝体的夹取量与木质基材料的体积比为0.1~0.5:1。
所述菌丝体的夹取量的总体积在1cm3以上。
实施例1:
——拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN的获得、鉴定与保藏。
(1)拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN的获得与鉴定。
本发明所述的拟茎点霉属真菌,是从活立木的枯枝中分离得到。样品采自云南省昆明市金殿公园,采集阔叶材活立木上枯枝部分且具有带线花纹的树枝,长约3cm,直径约1.5cm,在4℃冷藏保存备用。
将采集的已腐朽枯枝样品,以解剖刀切成0.3~0.5cm×0.3~0.5cm×0.2~0.4cm的小块,用75%酒精浸泡消毒10~15s,再用0.1%升汞浸泡消毒4~6min,再用灭菌蒸馏水清洗3次。置于PDA培养基中在28℃黑暗中静置培养10天至长出菌丝;然后将菌落正面白色,背面浅黄褐色,圆周状发散生长,气生菌丝不发达,毛毡状,边缘不平整,在与周围菌丝体之间的培养基上形成黑色线条的菌落挑取,接种至PDA培养基中在28℃黑暗静置培养8天,至菌落长出。
待菌落长出后,挑取长势旺盛者保存培养,保存培养的条件为在28℃黑暗静置培养8天,于4℃冰箱中保存;保存培养基为PDA培养基;PDA培养基成分以g/L计为:马铃薯200、葡萄糖18、琼脂17、pH6.5~7.0。
对上述分离的菌株J9GAN,通过生物学特性观察,进行进一步的形态鉴定,实验结果记录如下:
A、形态特征:在PDA培养基上培养7天,菌落直径约8.3cm,生长较快,菌落正面白色,背面浅黄褐色,圆周状发散生长,气生菌丝不发达,毛毡状,边缘不平整。后期形成黑色块状子座,直径0.1-0.4cm,子座内形成具孔口分生孢子器,产生两种孢子,一种卵圆形至纺锤形,一种线型。
B、培养特征:在PDA液态培养基上7天左右形成的菌丝体呈团块状,表面不平整,培养液清澈,初期无可溶性色素。在木块上接种培养期间可形成黑色块状子座,直径0.1-0.4cm。
C、菌株的稳定性:该菌生长温度范围在6~35℃,适宜生长温度为22~30℃,生长PH值在4.5~7.2,最适宜PH值在6.5~7.2。
D、5.8SrDNA序列分析:对该菌株进行5.8SrDNA序列测定,以菌株J9GAN的总DNA为模板,在引物ITS1(5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)和ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)的引导下PCR扩增该菌株的5.8SrDNA序列,PCR反应体系为:2μlDNA模版、1.5μl引物ITS1、1.5μl引物ITS4、Taqmix22μl、去离子水20μl,共50ul。PCR反应程序:a、94℃4min;b、94℃1min,50℃45s,72℃1min,35个循环;c、72℃10min。
将PCR反应产物送到生物公司测序得ITS序列,经复检,在美国国家生物技术信息中心(NCBI)中比对,比对结果表明,菌株J9GAN与拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)的5.8SrDNA序列的相似性达到了98%。通过序列比对和形态特征将菌株J9GAN鉴定为拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)。
(2)拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN的保藏。
通过上述鉴定结果,确认菌株J9GAN为拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)的一个株系,命名为J9GAN,于2013年1月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100080),其保藏编号为CGMCCNo:7108。
实施例2:
——拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN制备菌纹木。
(1)菌纹木制备。
首先,将拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN接种到PDA液态培养基上,在26℃下黑暗摇床培养9天,形成直径1~3cm的菌丝体及其菌丝体孢子悬浮液。PDA液态培养基成分以g/L计为:马铃薯200、葡萄糖18、pH6.5-7.0。
然后,将待接种的毛白杨原木切成2cm×2cm×3cm的小木块,装在底面直径6cm高11cm的培养瓶中。接着,将蛭石倒入培养瓶中至覆盖木块,加少量水使木块及蛭石湿润,但无多余水分溢出盖上瓶盖,置于高压蒸汽式灭菌器中,在121℃灭菌60分钟。
夹取木块放入菌悬液中沾上菌丝或孢子后,放入一并经过消毒的蛭石中,并将成团的菌丝体夹取置于木块表面,所夹菌丝体积与木块体积的比值为0.3:1。在26℃下黑暗培养4周。最后,将木块刮去表面的菌丝,洗净后干燥至含水率10%,得菌纹木。
(2)结果观察。
接种4周,将木块刮去表面的菌丝,洗净后干燥至含水率10%,然后将表面图案扫描后劈开木块观察。
侵染深度:到4周,侵染深度达0.1cm。
纹理的颜色和类型:木块表面形成细线状、弯曲的黑色线条,大部分闭合成圈,及少量带状、块状、团状、点状的染色。
实施例3:
——拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN制备菌纹木。
(1)菌纹木制备。
具体步骤与实施实例2相同,将培养时间延长至6周。
(2)结果观察。
接种6周,将木块刮去表面的菌丝,洗净后干燥至含水率10%,然后将表面图案扫描后劈开木块观察。
侵染深度:到6周,侵染深度达0.6cm。
纹理的颜色和类型:木块表面形成细线状、弯曲的黑色线条,部分闭合成圈,及少量带状、块状、团状、点状的染色。花纹数量较实施例2多,颜色较深。纵向劈开,花纹深入木块达0.6cm。
实施例4:
——拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN制备菌纹木。
(1)菌纹木制备。
具体步骤与实施实例2相同,将培养时间延长至8周。
(2)结果观察。
接种8周,将木块刮去表面的菌丝,洗净后干燥至含水率10%,然后将表面图案扫描后劈开木块观察。
侵染深度:到8周,侵染深度达0.8cm。
纹理的颜色和类型:木块表面形成细线状、弯曲的黑色线条,部分闭合成圈,及少量带状、块状、团状、点状的染色。花纹数量较实施例3多,颜色较深。纵向劈开,花纹深入木块达0.8cm。
实施例5:
——由拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN制备菌纹木。
(1)菌纹木制备。
首先,将拟茎点霉属真菌(Phomopsissp.)J9GAN接种到PDA固体培养基上,在28℃下黑暗静置培养12天,菌丝体几乎布满平板,制成平板菌落。PDA培养基成分以g/L计为:马铃薯200、葡萄糖20、琼脂17、pH6.5-7.0。
然后,将待接种的思茅松原木切成2cm×2cm×3cm的小木块,装在底面直径6cm高11cm的培养瓶中。接着,将蛭石倒入培养瓶中至覆盖木块,加少量水使木块及蛭石湿润,但无多余水分溢出。盖上瓶盖,置于高压蒸汽式灭菌器中,在121℃灭菌60分钟。
用解剖刀将菌落及其培养基切成边长2cm的方形菌块,用镊子将3块菌块夹取,贴在灭菌木块的表面,在28℃下黑暗培养8周。最后,将木块刮去表面的菌丝,洗净后干燥至含水率10%,得菌纹木。
(2)结果观察。
接种8周,将木块刮去表面的菌丝,洗净后干燥至含水率10%,然后将表面图案扫描后劈开木块观察。
侵染深度:到8周,木块花纹深度在纵向及横向方向上均可达0.7cm。
花纹的颜色和类型:木块表面形成细线状,弯曲的黑色、深褐色、灰色线条,其中大部分闭合成圈状,同时兼有带状、块状、团状、点状的花纹。纵向劈开,剖面可见闭合的圈状细线状的图案,深度达0.7cm。
实施例6:
——菌纹木的质量损失率。
实验材料:接种前后的实施例4中的木块。
实验方法:实施例4中,将原木切成小木块后,按照GB1931-1991的方法将木块烘至绝干,用精确到0.001的电子天秤称木块质量,为接菌处理前原木绝干质量M1。接菌处理8周后,刮去木块表面菌丝,洗净后按照GB1931-1991的方法将木块烘至绝干,用精确到0.001的电子天秤称木块质量,为接菌处理后原木绝干质量M2。按下式计算原木的质量损失率C。本实验重复3次,以3次的质量损失率平均值为菌纹木的质量损失率。
C=(接菌处理前原木绝干质量-接菌处理后原木绝干质量)÷接菌处理前原木绝干质量×100%。
实验结果:平均质量损失率为3.8%。
实施例7:
——菌纹木微观结构观察。
实验材料:接种前后的实施例4中的木块。
实验方法:将菌纹木锯成约为0.6cm×0.6cm×0.6cm的方形,方形至少一个表面含花纹,置于恒温水浴锅中80℃水煮至木块下沉。以切片机削平含花纹的表面,在真空装置中对含花纹的表面及其垂直面实施喷金,置于扫描电镜下观察拍照。
实验结果:菌丝体分布于菌纹木形成花纹的区域,在黑色、深褐色、蓝灰色线条之外无菌丝分布;从菌丝体分布情况来看,菌丝主要位于毛白杨基材的细胞腔中,通过细胞壁上的纹孔出入胞腔,而基材的各类细胞尤其木纤维的细胞壁结构完整,与无菌丝体分布区域未有明显差别。由于基材的细胞壁结构完整无损,基材的物理力学性质受到的影响极其轻微,与健康材几无差别。
GCGCACCCAGAAACCCTTTGTGAACTTATACCTTTTGTTGCCTCGGCGCTAGCTGGTCCTTCGGGGCCCCTCTTCGGAGGAGCAGGCACGCCGGCGGCCAAGTTAACTCTTGTTTTTACACTGAAACTCTGAGAAATAAAACATAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCTCTGGTATTCCGGAGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTCAAGCCTGGCTTGGTGATGGGGCACTGCTTCTCCCCCGAGAAGCAGGCCCTGAAATTCAGTGGCGAGCTCGCCAGGACCCCGAGCGCAGTAGTTAAACCCTCGCTCTGGAAGGCCCTGGCGGTGCCCTGCCGTTAAACCCCCAACTTTTGAAAATTTGACCTCGGATCAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATG
Claims (10)
1.一株拟茎点霉属真菌菌株Phomopsissp.J9GAN,已于2013年1月21日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100080),其保藏编号为CGMCCNo:7108。
2.如权利要求1所述的菌株,其特征在于,所述菌株能够在木质材料表面形成黑色、灰色、褐色的线状、带状、块状、团状、点状花纹中任一种或几种。
3.如权利要求1或2任一项所述的菌株,其特征在于,所述菌株在接种到木质基材料后的第4~6周即能在木质基材料的表面产生花纹,接种6~8周,木质基材料中的花纹深度达0.3~0.8cm。
4.如权利要求1所述的菌株,其特征在于,所述菌株是通过下述具体步骤获得的:
A、标本采集:在腐朽树桩、倒木或枯枝中,采集具有黑色、灰色、褐色的线状、带状、块状、团状或点状花纹中的任一种或几种的木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体,保存备用;
B、菌株分离与筛选:将采集的木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体破碎、消毒后,置于富集培养基中在22~30℃黑暗中静置培养7~15天至长出菌丝;富集培养基为PDA培养基、MA培养基、OA培养基的任一种;
将菌落正面白色,背面浅黄褐色,圆周状发散生长,气生菌丝不发达,毛毡状,边缘不平整,在与周围菌丝体之间的培养基上形成黑色线条的菌落挑取,接种至增殖培养基中在22~30℃黑暗静置培养5~12天至菌落长出;增殖培养基为PDA培养基、MA培养基、OA培养基任一种;
C、菌种纯化:挑取增殖培养基中菌落周围形成线条者接种至纯化培养基中,纯化培养1~2次,温度22~30℃,黑暗静置培养5~10天;挑取长势旺盛者编号并保存;纯化培养基为PDA培养基、MA培养基、OA培养基的任一种。
5.如权利要求4所述的菌株,其特征在于,步骤A所述的标本采集是在温暖潮湿的阔叶林、针叶林或针阔叶混交林中进行。
6.如权利要求4或5任一项所述的菌株,其特征在于,步骤A所述的标本采集优选在杨柳科杨属、桦木科桤属、桦木属、蔷薇科樱桃属、杉科杉木属、木棉科轻木属、壳斗科栎木属树种的腐朽树桩、倒木或枯枝中,采集具有黑、灰色、褐色的线状、带状、块状、团状或点状花纹中的任一种或几种的木质材料组织,连带其上面生长的真菌子实体,保存备用。
7.一种用权利要求1所述的拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.)J9GAN制备菌纹木的方法,包括菌株活化与扩繁、接菌培养工序,其特征在于,包括以下具体步骤:
A、菌株活化与扩繁:将拟茎点霉属真菌菌株(Phomopsissp.)J9GAN接种到活化与扩繁培养基上,在22~30℃下黑暗培养7~15天,得扩繁菌株;活化与扩繁培养基为PDA培养基、PDA液态培养基、MA培养基、OA培养基任一种;
B、接菌培养:将待接种的木质基材料灭菌后,与扩繁菌株充分接触,在22~30℃下培养4~8周,即得菌纹木。
8.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,后处理步骤,将接菌培养后得到的菌纹木刮去表面的菌丝,洗净后干燥至含水率8~10%。
9.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤B所述的将待接种的木质基材料与活化菌株充分接触,在固体接菌时是将含有菌落的培养基切成与待接种木质基材料大小、形状相近的菌块,将至少一块菌块贴在木质基材料表面。
10.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤B所述的将待接种的木质基材料与活化菌株充分接触,在液体接菌时,是将待接种的木质基材料浸入含有菌落的培养液中,且/或将成团的菌丝体夹取置于木质基材料的表面或附近。
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