给出下列实施例只是为了进一步说明本发明,而不能认为是对本发明的限制。
实施例1
N-[1(R)-[(2′,3′-二氢-2-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-喹啉]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:1′-(叔丁氧羰基)-3,4-二氢-3-氧代螺[1H-茚-1,4′-哌啶]
向661mg(2.31mmol)1′-(叔丁氧羰基)螺[1H-茚-1,4′-哌啶][按Chambers等人,J.Med.Chem.,1992,35,2036的方法制备]的5.0mlTHF溶液中加入5.8ml(1.0M THF,2.9mmol)9-BBN。将反应混合物在70℃下加热直至TLC分析表明起始原料已消耗完。浓缩溶液并将剩余物溶于二氯甲烷中。将溶液冷却至0℃并在15分钟内缓慢加入4.1g(19.2mmol)PCC。将反应混合物温热至室温然后回流30分钟。然后将溶液用***稀释,通过硅藻土和硅酸镁载体的滤垫过滤。用快速色谱法纯化(硅胶,己烷/乙酸乙酯,4∶1)得到326mg(47%)标题化合物。
1H NMR(200MHz,CDCl3):7.75-7.60(m,2H),7.50-7.44(m,2H),
4.30-.4.15(m,2H),2.85(dt,2H),2.63(s,2H),1.98(dt,2H),1.53-
1.40(m,2H),1.49(s,9H).步骤B:螺[1H-茚-1,4′-哌啶]-3(2H)-酮三氟乙酰胺
将步骤A的中间体在1∶1∶0.5的三氟乙酸、二氯甲烷和苯甲醚的混合物中的溶液搅拌1小时,然后浓缩并与甲苯共沸,得到标题化合物,
1H NMR(200MHz,CDCl3):7.81-7.70(m,1H),7.62-7.45(m,2H),
7.22-7.15(m,1H),3.72-3.58(m,2H),3.29-3.04(m,2H),2.70(s,2
H),2.47(dt,2H),1.85-1.75(m,2H).步骤C:三氟乙酰胺-2,3-二氢螺[茚-1,4′-哌啶]
向1.0g(3.21mmol)步骤B中所得中间体的3.0ml二氯甲烷中加入0.945ml(6.74mmol)三乙胺和50mg DMAP,最后加入0.501ml(3.53mmol)三氟乙酸酐。将反应混合物搅拌3小时,然后用20二氯甲烷稀释,溶液用水洗涤,用硫酸镁干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶,己烷/乙酸乙酯2∶1)纯化得到568mg(1.91mmol)。
1H NMR(200MHz,CDCl3):7.79-7.64(m,2H),7.52-7.41(m,2H),
4.75-4.65(m,1H),4.22-4.08(m,1H),3.37(dt,1H),2.92(dt,1H),
2.70(s,2H),2.08(dt,2H),1.71-1.62(m,2H).步骤D:三氟乙酰胺-3′,4′-二氢-2-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-喹啉]
在0℃下,向218mg(3.36mmol)叠氮化钠在0.285ml水和1.5ml氯仿中的溶液中加入0.105ml硫酸。将反应混合物搅拌2.5小时,然后分离各层,用硫酸钠干燥氯仿层。然后将叠氮酸加到400mg(1.34mmol)步骤A所得中间体的溶液中,5分钟内向此溶液中加入0.400ml硫酸。将反应混合物搅拌20分钟,然后在45℃下搅拌45分钟,最后在室温下搅拌16小时。将硫酸层加至冰中,然后用50%氢氧化钠碱化,水层用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯萃取液用硫酸钠干燥并浓缩。通过快速色谱法(硅胶,二氯甲烷/乙酸乙酯1∶1,然后1∶2)纯化100mg粗产物得到50mg(0.160mmol)高RF值的物质和16mg(0.051mmol)低RF值的物质。
1H NMR(200MHz,CDCl3,高RF):8.9-8.7(bs,1H),7.40-7.21(m,
2H),7.18-7.04(m,1H),6.90-6.86(m,1H),4.52-4.36(m,1H),3.97-
3.83(m,1H),3.52(dt,1H),3.22(dt,1H),2.79(s,2H),2.12-1.66
(m,4H).1HNMR(200MHz,CDCl3,低RF):8.12(dd,1H),7.60-
7.52(m,1H),7.45-7.35(m,2H),6.95(bs,1H),4.56-443(m,1H),
4.03-3.96(m,1H),3.64-3.62(m,2H),3.49-3.35(m,1H),3.11(dt,1H),
2.20-1.80(m,4H).步骤E:3′,4′-二氢-2-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-喹啉]
将49mg(0.157mmol)步骤B中得到的高RF值的物质的甲醇/水4∶1溶液和过量的氢氧化钾搅拌过夜。浓缩溶液并将水和乙酸乙酯加到剩余物中,分离各层,用乙酸乙酯萃取水层。合并的有机层用硫酸钠干燥并浓缩,得到31mg(0.143mmol)标题化合物。步骤F:N-[1(R)-[(2′,3′-二氢-2-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-喹啉]-1′-
基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[1,1-二甲基乙氧羰基]氨
基]-2-甲基丙酰胺
向29mg(0.134mmol)步骤C中得到的中间体、65mg(0.167mmol)2-氨基-N-[1(R)-[2′,3′-二氢-2-氧代螺[哌啶-4,4′(1′H)-喹啉]-1-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基-2-甲基丙酰胺和24mg(0.174mmol)HOBT的二氯甲烷溶液中加入33mg(0.174mmol)EDC。将反应混合物搅拌过夜,然后处理,并按实施例1(步骤A)所述进行色谱纯化,唯一不同的是用二氯甲烷/丙酮洗脱,得到34.8mg(0.059mmol)标题化合物。步骤G:N-[1(R)-[(2′,3′-二氢-2-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-喹啉]-1′-
基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
按照实施例1(步骤C)所述的方法,由步骤D得到的中间体(14mg,0.023mmol)得到标题化合物(7.2mg,0.013mmol),只唯一不同的是在此情况下通过向纯化的游离胺中加入4N HCl的二噁烷溶液得到其盐酸盐。
1H NMR(400MHz,CD3OD,2∶1旋转异构体的混合物):8.34(d,2/3
H),8.27(d,1/3H),7.59(d,2/3H),7.55(d,1/3H),7.38(d,1/3H),
7.33(d,2/3H),7.25(d,1/3H),7.18-6.98(m,4H),6.85(d,1/3H),6.80(d,2/3H),6.68(d,2/3H),5.23-5.17(m,1H),4.22-4.19(m,2/3H),4.09-3.95(m,1/3H),3.62-3.59(m,1/3H),3.36-3.17(m.22/3H),3.08(dt,1/3H),2.75(dt,1/3H),2.69(dt,2/3H),2.48(dd,2H),1.93-1.75(m,2/3H),1.60(s,3H),1.58(s,2H),1.40-1.32(m,1H),1.51(s,1H),1.10(m,1/3H),1.02(m,2/3H),0.90(dt,2/3H),0.22(dt,2/3H).FAB-MS:m/e 490(m+1).
实施例2
N-[1(R)-[(2′,3′-二氢-1-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-异喹啉]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:[3′,4′-二氢-1-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-异喹啉]
按照实施例13(步骤D)所述方法,由实施例1(步骤D)的低RF值的中间体(16.0mg,0.051mmol)制得标题化合物(11.3mg,0.036mmol)。
1HNMR(200MHz,CDCl3):8.12(dd,1H),7.60-7.52(m,1H),7.45-
7.35(m,2H),6.95(bs,1H),4.56-4.43(m,1H),4.03-3.96(m,1H),
3.64-3.62(m,2H),3.49-3.35(m,1H),3.11(dt,1H),2.20-1.80(m,4
H).步骤B:N-[1(R)-[(2′,3′-二氢-1-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-异喹啉]
-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[1,1-二甲基乙氧羰
基]氨基]-2-甲基丙酰胺
按照实施例13(步骤D)所述的方法,由步骤A的中间体(10.0mg,0.032mmol)和2-氨基-N-[1(R)-[2′,3′-二氢-2-氧代螺[哌啶-4,4′(1′H)-喹啉]-1-基)羰基]-2-(1H-吲哚-3-基)乙基-2-甲基丙酰胺(21.6mg,0.055mmol),制得标题化合物(13.6mg,0.023mmol)。步骤C:N-[1(R)-[(2′,3′-二氢-1-氧代螺[哌啶-4,4′(1H)-异喹啉]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
将10.1mg(0.017mmol)由步骤B得到的中间体在1.5N HCl的乙酸乙酯溶液中的溶液搅拌过夜,然后浓缩并与甲醇共沸,得到8.3mg(0.015mmol)标题化合物。
1H NMR(400MHz,CD3OD,2∶1旋转异构体的混合物):7.94(d,1/3
H),7.87(d,2/3H),7.62-7.53(m,2H),7.40-7.33(m,21/3H),7.18-
7.10(m,3H),6.75(d,2/3H),5.22-5.18(m,2/3H),5.15(t,1/3H),
4.27-4.23(m,2/3H),4.14-4.10(m,1/3H),3.68-3.61(m,1H),3.25-
3.18(m,4H),3.10(dt,2/3H),2.87(dt,1/3H),2.70(dt,1/3H),2.65
(dt.2/3H),1.88(dt,1/3H),1.75(dt,1/3H),1.62+1.61+1.59+1.51
(s,共计6H),1.57-1.44(m,1H),1.38-1.35(m,1/3H),1.15-1.10(m,
1/3H),0.929(dt,2/3H),0.19(dt,2/3H).FAB-MS:m/e 490(m+1).
实施例3
N-[1(R)-[(4H-1-氧代螺[3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
步骤A:螺[3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶]-1(4H)-酮
向10%钯/炭(5mg)的乙醇(5ml)悬浮液中加入1′-苄基螺[3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶]-1(4H)-酮(20mg,0.058mmol)(Hashigaki等人,Chem.Pharm.Bull.32pg 3561-3568(1984))。在1个大气压室温下进行氢化。将反应混合物在氢气氛下搅拌2小时,直至TLC分析表明反应已完成。用硅藻土545真空过滤除去催化剂,浓缩滤液得到所需产物(12.4mg,98.5%)。
FAB-MS计算值C13H15NO2 217;实测值218(M+H,100%)。步骤B:N-[1(R)-[(4H-1-氧代螺[3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
将步骤A的中间体(12mg,0.055mol)和α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(27mg,0.058mmol)的二氯甲烷溶液冷却至0℃,然后加入HOBT(2mg,0.015mmol)、N-甲基-吗啉(8.8mg;0.084mmol)和EDC(22mg,0.12mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时直至用TLC分析判断反应已完全。然后用饱和氯化钠溶液洗涤该溶液并用无水硫酸镁干燥。然后将溶液过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化,得到标题化合物(15mg,47%)。FAB-MS计算值C33H40N4O6 588;实测值589(M+H,39%)[489(M+H-100,42%)去掉t-Boc基团]。步骤C:N-[1(R)-[(4H-1-氧代螺[3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶]-1′-基)
羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
将步骤B的中间体(12mg,0.02mmol)的甲醇(3ml)溶液冷却至0℃。然后在搅拌下将浓盐酸(3ml)缓慢加到混合物中。将反应混合物搅拌30分钟直至TLC分析表明反应已完全。然后溶液经甲苯浓缩数次。无需纯化即可使用该盐酸盐(10.15mg,96%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):产物以两种构象异构体(2∶1)的混合物存在:
δ7.977,7.905(2d,2/3H),7.604-6.994(m,8H),
5.134-5.093(m,12/3H),遮盖5.025-4.715(m,2H),4.191-4.114
(m,1/3H),3.637-3.587(m,1H),3.344-3.299(m,1H),3.188-3.124
(m,1H),3.030(s,2/3H),(dt,2.81Hz,9.4Hz,1/3H),2.536(q,1H),
2.301(t,1/3H),1.590,1.571(2s,6H),1.539-1.483(m,2/3H),1.275
(s,6H),1.259-1.206(m,2/3H),(m,1H),0.633-0.545(m,1/3H),
-0.277-0.361(m,1/3H).
FAB-MS 计算值C28H32N4O4 488;实测值489(M+H,65%).
实施例4
N-[1(R)-[(4′,5′-二氢-4′-氧代螺[哌啶-4,6′-[6H]噻吩并[2,3-b]噻喃]-1-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(4′,5′-二氢-4′-氧代螺[哌啶-4,6′-[6H]噻吩并
[2,3-b]噻喃]-1-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-
二甲基乙氧基)羰基]氨基)-2-丙酰胺
标题化合物的制备是用实施例3步骤B所述的方法,原料:螺[哌啶-4,6′-[6H]噻吩并[2,3-b]噻喃]-4′(5′H)-酮盐酸盐(10mg,0.044mmol)(EP公开No.90313262.9),α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(20mg,0.051mmol),HOBT(1相当量),N-甲基吗啉(0.01ml,0.093mmol)和EDC(20mg,0.10mmol)。反应时间:5小时。产量:22mg,(98%)。
1H MNR(400MHz,CDCl3):产物以两种构象异构体(2∶1)的混合物存在:
δ8.240(s,2/3H),8.063(s,1/3H),7.680(d,2/3H),
7.628(d,1/3H),7.416-6.962(m,5H),5.279-5.162(m,1H),4.878-
4.763(m,1H),4.285(d,2/3H),3.376(d,2/3H),3.342-3.196(m,1
H),3.129-2.973(m,12/3H),2.715-2.662(m,1H),2.285(d,2/3H),
2.139(d,2/3H),1.683-1.567(m,81/3H),1.503,1.454,1.427,1.409
(4s,12H),1.278-1.217(m,2H),0.708-0.628(m,2/3H).
FAB-MS计算值C31H38N4O5S2 610;实测值611(M+H,32%).步骤B:N-[1(R)-[(4′,5′-二氢-4′-氧代螺[哌啶-4,6′-[6H]噻吩并
[2,3-b]噻喃]-1-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-
丙酰胺盐酸盐
标题化合物的制备是用实施例15步骤C所述的方法,原料:上面步骤的中间体(200mg,0.033mmol)和甲醇(3ml)。反应时间:1.5小时。产量:12.2mg(69%)。
1H NMR(400MRz,CD3OD):产物以两种构象异构体(2∶1)的混合物存在:
δ7.562-7.022(m,6H),5.513-5.446(m,62/3H),
5.099-5.003(m,1H),遮盖4.914-4.726(m,2/3H),4.178(d,1H),
3.624(d,1H),3.33/-3.043(m,22/3H),2.760-2.660(m,1H),2.324
(d,1H),2.234(d,1H),1.597,1.587,1.574,1.510(4s,4H),1.364-1.225
(m,3H),0.562-0.482(m,2/3H),-0.311-0.391(m,2/3H).
FAB-MS计算值C26H30N4O3S2 510;实测值511(M+H,51%).
实施例5
N-[1(R)-[(3-氢螺[1H-异苯并呋喃-1,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(3-氢螺[1H-异苯并呋喃-1,4′-哌啶]-1′-基)羰基]
-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]
-2-甲基丙酰胺
标题化合物的制备是用实施例3步骤B所述的方法,原料:3-氢螺[1H-异苯并呋喃-1,4′-哌啶]盐酸盐(10mg,0.044mmol)(Bauer等人,US3985889),α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(20mg,0.051mmol),HOBT(1相当量),N-甲基吗啉(0.01ml,0.093mmol)和EDC(20mg,0.10mmol)。反应时间:5小时。产量:21mg(81%)。
产物以两种构象异构体(1∶1)的混合物存在:
(1H NMR CDCl3):δ8.096(s,1H),7.689(t,1H),7.341(d,1H),
7.244-6.611(m,6H),5.288-5.202(m,1/2H),4.945(br.s,1/2H),
4.161(d,1/2H),4.003(d,1/2H),3.338(d,1/2H),3.280-3.115(m,2
H),3.005-2.861(m,1H),2.751(d,1/2H),2.416(d,1/2H),1.787-
1.549(m31/2H),1.491,1.461,1.421,1.410(4s,12H),1.281-1.212
(m,3H),0.857(t,6H).
FAB-MS计算值C32H40N4O5 560;实测值561(M+H,33%).步骤B:N-[1(R)-[(3-氢螺[1H-异苯并呋喃-1,4′-哌啶]-1′-基)羰基]
-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
标题化合物的制备是用实施例3步骤C所述的方法,原料:上面步骤的中间体(20mg,0.04mmol)和甲醇(3ml)。反应时间:1小时,产量:18.2mg(93.5%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):产物以两种构象异构体(1∶1)的混合物存在:
δ7.621-6.568(m,8H),5.198-5.136(m,1H),
遮盖4.856(宽.s,1H),4.0984.045(m,1H),3.611-3.499(m,1H),
3.348-3.110(m,51/2H),2.987-2.903(m,21/2H),2.618(d,1/2H),
2.508(d,1/2H),1.691-1.473(m,8H),1.271(br.s,21/2H),0.081-
-0.006(m,1/2H).
FAB-MS计算值C27H32N4O3 460;实测值461(M+H,96%).
实施例6
N-[1(R)-[(3,4-二氢-6-甲基-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(3,4-二氢-6-甲基-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,
4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲
基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
标题化合物的制备是用实施例3步骤B所述的方法,原料:3,4-二氢-6-甲基螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-4-酮盐酸盐(20mg,0.058mmol)(Hashigaki等人,Chem.Pharm.Bull.32 pg 3561-3568(1984)),α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(32mg,0.082mmol),HOBT(1相当量),N-甲基吗啉(0.03ml,0.28mmol)和EDC(40mg,0.21mmol)。反应时间:8小时,产量:34mg(86%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):产物以两种构象异构体(2∶1)的混合物存在:
δ8.154(s,2/3H),8.088(s,1/3H),7.626(d,2/3
H),7.591-7.060(m,6H),6.725-6.688(m,2/3H),5.265-5.168(m,
2/3H),4.9854.900(m,2/3H),4.289-4.178(m,2/3H),3.469(s,2/3.
H),3.229-3.064(m,22/3H),2.730(t,2/3H),2.562(s,21/3H),2.251
(d,21/3H),2.158(d,2/3H),2.068(d,2/3H),1.680-1.541(m,3H),
1.502,1.475,1.454,1.427,1.402(5s,15H),1.292-1.226(m,3H),
0.616-0.532(m,1/3H),-0.495-0.590(m,1/3H).
FAB-MS计算值C34H42N4O6 602;实测值603.(M+H,37%).步骤B:N-[1(R)-[(3,4-二氢-6-甲基-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,
4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基
丙酰胺盐酸盐
标题化合物的制备是用实施例3步骤C所述的方法,原料:上面步骤的中间体(20mg,0.029mmol)和甲醇(3ml)。反应时间:3小时,产量:17.5mg(96.5%).
1H NMR(400MHz,CDCl3):产物以两种构象异构体(2∶1)的混合物存在:
δ7.550-6.768(m,71/3H),5.089-5.016(m,2H),
遮盖4.872-4.679(m,1H),4.144-4.093(m,1H),3.569-3.485(m,1
H),3.321-3.081(m,21/3H),2.716-2.600(m,11/3H),2.253,2.236,
2.222,2.196,2.190,2.155(6s,4H),1.569,1.541,1.475(3s,7H),
1.388-1.237(m,32/3H),0.881-0.808(m,2H),0.434-0.420(m,2/3
H),0.427-0.436(m,2/3H).
FAB-MS计算值C29H34N4O4 502;实测值503(M+H,97%).
实施例7
N-[1(R)-[(3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-4-苯基丁基-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基
-1-氧代乙基]氨基]-4-苯基丁酸苯甲酯
将2(R)-氨基-4-苯基丁酸苯甲酯甲苯磺酸盐(6.0g,13mmol)的二氯甲烷溶液用稀氢氧化钠溶液萃取。用MgSO4干燥有机层并蒸发得到剩余物。向该剩余物的溶液中加入N-叙丁氧羰基-α-甲基丙氨酸(3.21g,15.8mmol),HOBT(1.7g,13mmol)的二氯甲烷溶液和EDC(5.1g,26mmol),将该混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合物倾入盐水和3N HCl的混合物中并用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液干燥、蒸发,通过快速柱色谱法纯化,用40%乙酸乙酯的己烷溶液洗脱,得到所需的产物(5.47g,91%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.34-7.07(m,10H),5.15(d,JAB=12
Hz,1H),5.08(d,JBA=12Hz,1H),4.86(br.s,1H),4.67-4.62(m,1
H),2.61-2.53(m,2H),2.18-2.14(m.1H),2.01-1.96(m,1H),1.47
(s,3H),1.43(s,3H),1.41(s,9H).步骤B:α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基
-1-氧代乙基]氨基]-4-苯基丁酸
用10%钯/炭作为催化剂(0.5g),在室温和1大气压氢气下氢化上面步骤的中间体(5.37g,11.8mmol)2小时。通过硅藻土滤除催化剂并蒸发得到标题化合物(4.22g,100%)。
1H NMR(200MHz,CD3OD):δ7.804-7.143(m,5H),4.402-4.359(m,
1H),2.672(dt,2Hz,6Hz,2H),2.126-2.004(m,2H),1.483,1.444
(2s,5H),1.423(s,9H),1.412(s,3H).步骤C:N-[1(R)-[(3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-4-苯基丁基-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨
基]-2-甲基丙酰胺
将螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-4(3H)-酮(20mg,0.776mmol)和上面步骤的中间体(31mg,0.085mmol)的二氯甲烷溶液冷却至0℃,然后加入HOBT(1相当量),N-甲基吗啉(0.1ml,0.90mmol)和EDC(33mg,0.17mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时直至用TLC分析判断反应已完全。然后溶液用饱和氯化钠溶液洗涤、用无水硫酸镁干燥。接着将溶液过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化,得到标题化合物(41.6mg,95.5%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3):产物以两种构象异构体(1∶1)的混合物存在:
δ7.853-6.925(m,9H),4.936-4.868(m,2H),
4.355-4.265(mt,1H),3.605-3.565(m,1/2H),3.388-3.318(m,1H),
3.022-2.965(m,1H),2.686-2.608(m,3H),2.067-1.948(m,21/2H),
1.871-1.810(m,1H),1.580(宽.s,2H),1.503,1.488,1.455,1.411,
1.403(5s,15H),1.292-1.227(m,2H).步骤D:N-[1(R)-[(3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-4-苯基丁基-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
将上面步骤的中间体(40mg,0.071mmol)的乙酸乙酯溶液冷却至0℃。然后向溶液中鼓泡通入氯化氢气体2分钟。将反应混合物搅拌15分钟直至TLC分析表明反应已完全。浓缩溶液,无需纯化即可使用该盐酸盐(33.8mg,95.5%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):产物以两种构象异构体(1∶1)的混合物存在:
δ8.271-8.229(m,1H),7.799(dd,13/4Hz,7.84
Hz,1H),7.545(q,1H),7.289-7.006(m,7H),4.737-4.703(m,1H),
4.277(d,1/2H),4.186(d,1/2H),3.555-3.292(m,11/2H),3.187-
3.068(m,1H),2.809-2.724(2m,2H),2.633-2.563(m,1H),2.085-
1.927(m,31/2H),1.645,1.639,1.616(3s,6H),1.677-1.603(m,3H)
1.316-1.279(m,2H).
FAB-MS计算值C27H33N3O4 463;实测值464(M+H,54%).
实施例8
N-[1(R)-[(3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
将螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-4(3H)-酮(20mg,0.776mmol)和α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-3-(苯基甲氧基)-3-丙酸(32mg,0.085mmol)的二氯甲烷溶液冷却到0℃,然后加入HDBT(1相当量),N-甲基吗啉(0.1ml,0.90mmol)和FDC(33mg,0.171mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4小时直至通过TLC分析判断反应已完全。然后用饱和氯化钠溶液洗涤该溶液并用无水硫酸镁干燥。接着将溶液过滤并浓缩。通过硅胶色谱法纯化得到标题化合物(40.8mg,91%)。
FAB-MS:计算值C32H41N3O7 579;实测值580(M+H,23%);[去掉t-Boc保护基的实测值480(M+H-100,57%)]。步骤B:N-[1(R)-[(3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
盐酸盐
标题化合物的制备是用实施例3步骤D所述方法,原料:上面步骤的中间体(35mg,0.061mmol)和乙酸乙酯(10ml)。反应时间:1小时。产量:30.2mg(97%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):产物以两种构象异构体(1∶1)的混合物存在:
δ7.800-7.792-(m,1H),7.533-7.578(m,1H),
7.395-7.285(m,5H),7.088-7.015(m,2H),5.551-5.107(m,1H),
遮盖4.921-4.816(m,1H),4.535-4.518(2s,11/2H),4.295(d,1H),
3.911-3.803(m,1H),3.717-3.703(2s,11/2H),3.499-3.400(m,1H),
3.309-3.291(4s,31/2H),3.211-3.051(m,1H),2.789(q,1/2H),
2.633-2.513(ABq,1H),2.060(t,1H),1.897(d,1/2H),1.821-1.725
(m,1/2H),1.626-1.567(6s,6H),1.564-1.410(m,1/2H),1.301(宽.s,
11/2H).FAB-MS计算值C27H33N3O5 479;实测值480(M+H,
100%).
实施例9
N-[1(R)-[(6-氯-3H-4-氧代螺[1H-喹唑啉-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(6-氯-3H-4-氧代螺[1H-喹唑啉-2,4′-哌啶]-1′-
基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰
基]氨基]-2-甲基丙酰胺
标题化合物的制备是用实施例3步骤B所述的方法,原料:6-氯螺(哌啶-4,2(1′H)-喹唑啉)-4(3H)-酮盐酸盐(50mg,0.17mmol),α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(81mg,0.21mmol),HOBT(1相当量),N-甲基吗啉(1相当量)和EDC(B0mg,0.42mmol)。反应时间:3小时。产量:64.5mg(60%)。
FAB-MS计算值C32H39N6O5Cl 623;实测值624(M+H,29%)。步骤B:N-[1(R)-[(6-氯-3H-4-氧代螺[1H-喹唑啉-2,4′-哌啶]-1′-
基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
用实施例7步骤D所述的方法,由上面步骤的中间体(50mg,0.08mmol)制备标题化合物。反应时间:1小时,产量:40mg(89.5%)。
FAB-MS计算值C27H31N7O3Cl 523;实测值523(M+H,71%)。
实施例10
N-[1(R)-[(1,4-二氢-4-苯基-1-氧代螺[3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:1,4-二氢-4-苯基螺(3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶)-1-酮
用实施例3步骤A所述的方法,由1′-苄基-1,4-二氢-4-苯基螺(3H-2-苯并吡喃-3,4′-哌啶)-1-酮盐酸盐(8mg,0.019mmol)和乙醇(5ml)制备标题化合物。反应时间:45分钟。产量:5.5mg(98.5%)。
FAB-MS计算值C19H19NO2 293;实测值294(M+H,93%)。步骤B:N-[1(R)-[(1,4-二氢-4-苯基-1-氧代螺[3H-2-苯并吡喃-3,
4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲
基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
标题化合物的制备是用实施例3步骤B所述的方法,原料:上面步骤的中间体(5mg,0.017mmol),α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(12mg,0.030mmol),HOBT(1相当量),N-甲基吗啉(1相当量)和EDC(12mg,0.060mmol)。反应时间:5小时,产量:9.2mg(86%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):产物以两种构象异构体(1∶1)的混合物存在:
δ8.185-8.072(m,11/2H),7.885(s,1/2H),7.710-
6.813(m;12H),5.331-5.309(m;1/2H),5.198-5.111(m,1/2H),
4.710-4.605(m,1/2H),4.300-4.235(m,1/2H),3.876(d,1/2H),
3.719-3.617(m,1H),3.355.-3.046(m;11/2H)2.746(q,1/2H),
2.006-1.960(m,1H),1.678-1.574(m,2H),1.438,-1.368(m,6H),
1.257,1.240,1.227,1.208,1.186(5s,5H).步骤C:N-[1(R)-[(1,4-二氢-4-苯基-1-氧代螺[3H-2-苯并吡喃-3,
4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基
丙酰胺盐酸盐
用实施例7步骤D的方法,由上面步骤的中间体(9mg,0.015mmol)和乙酸乙酯(10ml)制备标题化合物。反应时间:1小时。产量:8mg(97%).
1H NMR(400MHz.CDCL3):产物以两种构象异构体(2∶1)的混合物存在:
δ8.347-8.333(m,1H),8.043(t,1/2H),7.662-
6.869(m,121/2H),5.355-5.315(m,1/2H),5.108-5.061(m,1/2H),
遮盖4.897-4.768(m,1/2H),4.174-4.103(m,1/2H),3.717-3.526
(m,1H),3.387-3.237(m,2H),3.179-3.067(m,1H),2.660(q,1/2H),
2.044-1.981(m,1H),1.655-1.212(m,11H),0.964-0.820(m,21/2
H),0.575-0.423(m,1/2H),-0.271--0.448(m,1/2H).
FAB-MS计算值C34H36N4O4 564;实测值565(M+H,25%).
实施例11
N-[1(R)-[3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基)-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
用实施例25步骤A所述的方法,由α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(903mg,2.3mmol)和螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-4(3H)-酮盐酸盐(535mg,2.11mmol)(Elliott,J.等人,J.Med.Chem.1992,35,3973-3976)制得该中间体(1.25g,100%)。
1H NMR(400MHz,CDCL3):化合物以构象异构体(比例2∶1)的混合物存在:
δ8.42,8.31(2s,1H),7.79,7.75(2dd,1.6Hz,
7.8Hz,1H),7.66,7.56(2d,8.0Hz,7.6Hz,1H),7.47-6.78(m,8H),
5.37-5.15(m,1H),4.98,4.94(2br.s,1H),4.24,4.18(2br.d,1H),
3.40,3.32(2br.d,2H),3.23-3.02(m,3H),2.73(dt,3 Hz,13Hz,1
H),2.47(d,2Hz,1/3H),2.17(d,16.6Hz,2/3H),2.08(d,16.7Hz,2/3
H),1.84(宽.s,2H),1.70-1.60(br,dd,1H),1.3-1.2(宽.dd,1H),0.56
(dt,4.6,13.8Hz,2/3H),-0.55(dt,4.6,13.8Hz,2/3H).FAB-MS:
计算值C33H40N4O6,588;实测值595(M+Li,100%).步骤B:N-[1(R)-[(3,4-二氢-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐
酸盐
向搅拌着的步骤A中所制得的中间体(1.0g,1.7mmol)的甲醇(5ml)溶液中加入浓盐酸(5ml)。将反应混合物在室温下搅拌1小时,加入20ml甲苯,并将混合物真空蒸发,该步骤重复两次,得到标题化合物(0.87g,98%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):化合物以构象异构体(比例2∶1)的混合物存在:
δ7.76-6.90(m,10H),5.11(dd,5,11Hz,1H),
4.16,4.11(2td,2.0Hz,14Hz,1H),3.60,3.33(2md,14Hz,1H),
3.25-3.10(m,2H),2.92-2.67(m2H),2.30-2.17(AB,中心在
w.23,16.7Hz,2H),2.85-2.80(br.d,1/3H),1.60,1.59(2s,6H),
1.70-1.50(m,遮盖),1.40-1.30(md,1H),0.47(dt,5.5,13.5Hz,2/3
H),-0.38(dt,5.5,13.5Hz,2/3Hz).FAB-MS:计算值C28H32N4O4,
488;实测值489(M+H,100%).
实施例11A
N-[1(R)-[(3,4-二氢-4(RS)-羟基螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
在0℃下,向搅拌着的实施例11中的标题化合物(55mg,0.09mmol)的甲醇(5ml)溶液中分数批加入硼氢化钠(16mg,0.4mmol)。在0℃搅拌30分钟后将混合物蒸发至干并溶于二氯甲烷中,通过快速柱色谱法纯化,用10%甲醇的二氯甲烷溶液洗脱,得到标题化合物(35mg,78%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):化合物以2种非对映体(1∶1)的混合物存在,并且每一异构体以两种种构象异构体(比例2∶1)形式存在:
δ7.89-6.66(m,9H),5.14-5.06(m,1H),4.52-4.45(2dd,1H),4.22-4.10(2md,1H),3.58-3.44(2md,1H),3.25-3.14(m,2H),3.10-2.59(4dt,1H),2.02(dd,6.2,14.7Hz,1/3H),1.79-1.74(dd,1/3H),1.60-1.40(m,3H),1.37,1.31,1.28,1.28,1.26(4s,6H),1.3-1.05(m,遮盖),0.71,0.49(2dt,5.6,13.5Hz,2/3H),-0.20,-0.47(2dt,4.6,13.5Hz,2/3H).FAB-MS.计算值C28H34N4O4,490;实测值491(M+H,100%).
实施例12
N-[1(R)-[(3,4-二氢-螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:3,4-二氢螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]
在0℃下,向搅拌着的螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-4(3H)-酮盐酸盐(53mg,0.21mmol)的甲醇(5ml)溶液中分数批加入硼氢化钠(38mg,1mmol)。30分钟后,将混合物蒸发,然后用浓盐酸(2ml)处理30分钟。蒸发得到剩余物,然后用在乙醇中的钯/炭(10%,10mg),H2(1个大气压)氢化两小时。过滤除去催化剂得到粗中间体(89mg),该中间体无需进一步纯化即可使用。
1H NMR(400MHz,CD3OD):7.07(表现为d,5Hz,2H),6.84
(表现为t,7Hz,2H),7.07-7.08(m,4H),2.82(t,7Hz,2H),2.02
(宽.d,14.5Hz,2H),1.90-1.85(m,4H).EI-MS:计算值C13H17NO,
203;实测值203(M+,45%)步骤B:N-[1(R)-[(3,4-二氢螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)
羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]
氨基]-2-甲基丙酰胺
按照标准肽偶合方法,由步骤A的产物和α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸制得该中间体。
1H NMR(400MHz,CDCl3):化合物以构象异构体(比例2∶1)的混合物存在:
δ8.04,8.02(2s,1H),7.70,7.61(2d,8Hz,1H),7.49-6.66(m,1H),4.92(宽.s,1H),4.30-4.20(m,1H),3.4-3.1(m,4H),2.85-2.45(m,3H),1.68(t,7.6Hz,1H),1.49,1.45,1.44,1.43,1.41(5s,12H),1.30-1.21(m,3H)1.11-1.07(dd,2.5,14Hz,1/3H),0.68(dt,4.5Hz,13Hz,1/3H),-0.33--0.43(dt,1/3H).FAB-MS:计算值C33H42N4O5,574;实测值575(M+H,35%).步骤C:N-[1(R)-[(3,4-二氢螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)
羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
按照实施例11步骤B所述方法,由步骤B的中间体制得标题化合物(90%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):化合物以构象异构体(比例2∶1)的混合物存在:
δ8.31,3.21(2d,6.6Hz,2/3H),7.58,7.52(2
d,7.8Hz,1H),7.7(d,8.Hz,1H),7.15-6.60(m,61/3H),5.17-5.13
(m,1H),4.14(宽.d,13.2Hz,1H),3.35-3.10(m3H),2.90-2.45(m,3
H),1.70(t,6.9Hz,1H),1.60(s,6H),1.60-1.40(m,遮盖),1.40-
1.20(m,2H),1.11(宽.d,12.7Hz,2/3H),0.57(dt,4.3,13Hz,2/3H),
-0.31(dt,4.3,13,2/3H).FAB-MS:计算值C28H34N4O3,474;
实测值475(M+H,60%).
实施例13N-[1(R)-[(3,4-二氢-6-甲磺酰氨基-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
按照实施例10步骤A和B所述的方法,由α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸和3,4-二氢-6-甲磺酰氨基-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]制得标题化合物。
N-[1(R)-[(3,4-二氢-6-甲磺酰氨基-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
1H NMR(400MHz,CDCl3):化合物以构象异构体(比例2∶1)的混合物存在:
δ8.60,8.36(2宽、s,1H),7.63-6.81(m,8H),
5.20(宽s,1H),5.10-5.02(宽m,1H),3.45-3.30(宽m,1H),3.25-
3.10(宽m,2H),2.97,2.95(2s,3H),2.75-2.56(m,1H),2.28(v.宽.
s,1H),2.18(d,16.6Hz,1H),2.05(d,16,6Hz,1H),1.86-1.45(m,
遮盖),1.51,1.46,1.44,1.43,1.42,1.39(6s,12H),1.30-1.20(m,2
H),0.55-0.45(m,2/3H),-0.55--0.65(m,2/3H).FAB-MS:计算值
C34H43N5O8S,681;实测值688(M+Li,40%).
N-[1(R)-[(3,4-二氢-6-甲磺酰氨基-4-氧代螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
1H NMR(400MHz,CD3OD):化合物以构象异构体(比例2∶1)的混合物存在:
δ7.63-6.92(m,8H),5.14-5.08(m,1H),4.18-
4.08(2md,1H),3.62-3.51(2md,1H),3.25-3.10(m,2H),2.91,2.89
(2s,3H),2.78-2.67(2dd,2Hz,15Hz,2H),2.27(d,16.7Hz,1H),
2.19(d,16.6Hz,1H),1.86-1.80(m,1/3H),
1.80-1.50(m,遮盖),
1.60,1.59,1.48(3s,6H),1.40-1.30(m,1H),0.47(dt,4.8Hz.13Hz,
2/3H),-0.39(dt,4.8Hz,13Hz,2/3H).FAB-MS:计算值
C29H35N5O6S,581;实测值582(M+H,75%).
实施例14
N-[1(R)-[3,4-二氢-4(RS)-羟基-6-甲磺酰氨基螺[2H-1-苯并吡喃-2,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
按照实施例11A所述的方法,由实施例13的标题化合物制得该标题化合物。
1H NMR(400MHz,CD3OD):化合物以2种非对映体(1∶1)的混合物存在,每一异构体以两种构象异构体存在:
δ7.62-
7.50(m,1H),7.42-7.29(m,2H),7.17-6.98(m,4H),6.68(d,8.7Hz,
1H),5.15-5.05(m,1H),4.75-4.65(m,1/3H),4.57(dd,7Hz,9Hz,
1/3H),4.44(dd,6.5Hz,9.0Hz,1/3H),4.21-4.07(m,1H),3.56-3.44
(m,1H),3.28-3.12(m,3H),3.08-3.01(m,2/3H),2.89,2.86(2s,3
H),12.82-2.55(m,1H),2.03(dd,6.0Hz,13.8Hz,1/2H),1.86(dd,
6.0,13.7,1/2H),1.70-1.35(m,3H),1.33、1.32,1.31,1.28,1.24(5s,6
H),1.33-1.29(m,遮盖),1.06(br.d,13Hz,1/3H),0.71(dt,4.6Hz,
13Hz,1/3H),0.49(dt,4.6Hz,13Hz,1/3H),-0.21(dt,4.6Hz,13Hz,
1/3H),-0.49(dt,4.6Hz,13Hz,1/3H).FAB-MS:计算值
C29H37N5O6S,583;实测值584(M+H,20%).
实施例15
N-[1(R)-[(2-乙酰基-1,2,3,4-四氢螺[异喹啉-4,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:1,3-二氢-1,3-二羟基螺[4H-2-苯并呋喃-4,4′-哌啶]-1′-羧
酸1,1-二甲基乙酯
在-78℃下,向搅拌着的螺[1H-茚-1,4′-哌啶]-1′-羧酸1,1-二甲基乙酯(800mg,2.8mmol)的甲醇(50ml)溶液鼓泡通入臭氧,直至溶液变蓝。将混合物室温下放置20分钟,然后用氮气清洗。加入二甲硫(3ml),将混合物温热至室温并搅拌2小时,蒸发溶剂得到粗产物(940mg),无需纯化即可使用。步骤B:1,2,3,4-四氢螺[异喹啉-4,4′-哌啶]-1′-羧酸1,1-二甲基乙
酯
将步骤A的中间体(100mg)在用氨饱和了的甲醇(2ml)中搅拌一天,蒸发除去氨。剩余物再溶于甲醇(3ml)中,加入氰基硼氢化钠(50mg,过量)。将混合物搅拌过夜。蒸发并纯化得到胺。
1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.35-6.96(m,4H),4.00(s,2H),
3.14
(s,2H),3.90(宽s,2H),2.05(br.s,2H),1.95(宽.t,2H),0.69(d,2
H),1.49(s,9H).步骤C:2-乙酰基-1,2,3,4-四氢螺[异喹啉-4,4′-哌啶]-1′-羧酸1,1-
二甲基乙酯
用吡啶(2ml)和乙酸酐(2ml)处理步骤A的中间体(16mg)2小时,将反应混合物真空蒸发得到所需的化合物(12mg)。
1H NMR(400MHz,CDCl3),化合物3∶1的旋转异构体的混合物存在:
δ7.36-7.05(m,4H),4.72(s,2/4H),4.65(s,6/4H),4.10-
4.00(宽d,12.8Hz,2H),3.85(宽s,3/4H),3.65(s,1/4H),3.11(t,
13.1Hz,3/4H),3.00(t,13.1Hz,1/4H),2.19(s,3/4H),2.18(s,9/4H)
2.00-1.80(m,2H),1/65-1.47(m,2H,遮盖),1.47(s,9/4H),1.45(s,
27/4H).步骤D:2-乙酰基-1,2,3,4-四氢螺[异喹啉-4,4′-哌啶]
在0℃下,向步骤C的中间体(12mg)的乙酸乙酯(5ml)溶液中鼓泡通入HCl(气体)直至溶液饱和。30分钟后,真空蒸发反应混合物得到所需中间体。
1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.47-7.19(m,4H),4.79(s,2H),
3.96(s,2H),3.36(宽.d,6.7Hz,2H),2.30-2.24(m,1H),2.21(s,3
H),1.76(d,13Hz).FAB-MS:计算值C15H20N2O,244;实测值245
(M+1,100%)步骤E:N-[1(R)-[(2-乙酰基-1,2,3,4-四氢螺[异喹啉-4,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
按照上面所述的方法,由步骤D的中间体制得标题化合物。
实施例16
N-[1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(2′,6′-二氟苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基
-1-氧代乙基]氨基]-3-[(2′,6′-二氟苯基)甲氧基]丙酸甲酯
在室温下,将无油氢化钠(通过用己烷(3X)洗涤60%氢化钠的油分散体制备,1.2g,30.0mmol)的30ml N,N-二甲基甲酰胺悬浮液加到N-叔丁氧羰基-(D)-丝氨酸(3.07g,15.0mmol)的10ml N,N-二甲基甲酰胺溶液中。当不再有气体放出时,加入2,6-二氟苄基溴(2.68g,12.9mmol)。在室温下搅拌18小时后,将碘甲烷(1.0ml,16.0mol)加到反应混合物中。将混合物再搅拌1小时,然后倾入水中,用***萃取。有机层依次用水(5X)、盐水洗涤,用硫酸钠干燥,过滤并浓缩。剩余物溶于20ml氧仿中,室温下加入BOC-α-甲基丙氨酸,EDC,HOBT和Et3N。3小时后,将反应混合物倾入水中,用二氯甲烷萃取。用硫酸钠干燥有机层并浓缩。通过色谱法纯化(己烷/乙酸乙酯:3/1)后得到标题化合物2.37g(35%)。
1H NMR(300MHz,CDCl3旋转异构体的混合物):
7.27(m,1H),7.02-
6.88(m,2H),4.95(m,1H),4.72(dt,8,3Hz,1H),4.58(宽s,2H),
3.90(m,1H),3.78(s,1H),3.69(s,3H),1.48(s,3H),1.45(s,3H),
1.41(s,9H).步骤B:N-[1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-
基)羰基]-2-(2′,6′-二氟苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基
丙酰胺盐酸盐
将本实施例步骤A所得的中间体(2.37g,5.29mmol)的30ml甲醇溶液加到在3ml水中的氢氧化锂(340mg,8.1mmol)中。室温下搅拌2小时后,将反应混合物浓缩,然后用水稀释,用***萃取。去掉有机层。水层用1N盐酸酸化至pH=1.5,用***萃取(3×)。将有机层用硫酸钠干燥、过滤并浓缩得到2.18g(95%)酸。用实施例20步骤B所述方法(用盐酸的***溶液代替三氟乙酸),由上面的酸(78mg,0.18mmol)和1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐(50mg,0.165mmol)制得标题化合物48mg(44%)。
1H NMR(400MHz,CD3OD旋转异构体的混合物):
7.39(m,2H),7.22
(m,11/2H),7.03(m,31/2H),5.14(dd,13.7Hz,1H),4.66(d,16
Hz,2H),4.49(m,1H),4.09(m,1H),3.92(宽s,2H),3.76(m,2H),
3.25(m,1H),2.97(s,3/2H),2.96(s,3/2H),2.87(m,1H),1.95(m,1
H),1.76(m,3H),1.61(s,3/2H),1.57(s,33/2H),FAB-MS:565
(M+1).
实施例17
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-3-环己基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:叔丁氧羰基-(D)-六氢高苯丙氨酸
将叔丁氧羰基-(D)-高苯丙氨酸(100mg,0.358mmol)的1ml乙酸溶液用PtO2于1个大气压下氢化16小时。用硅藻土过滤混合物,浓缩滤液并与甲苯共沸。
1H NMR(400MHz,CDCl3):5.03(d,8Hz,1H),4.22(m,1H),1.82
(m,1H),1.64(m,6H),1.41(s,9H),1.20(m,6H),0.84(m,2H).步骤B:α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基
-1-氧代乙基]氨基]-4-环己基丁酸苄酯
将BOC-D-高苯丙氨酸的乙酸溶液用PtO2于1个大气压下氢化16小时。用硅藻土过滤混合物并浓缩。在室温下向该剩余物(44mg)的15mol DMF液中加入苄基溴(198ml)和K2CO3(970mg)。搅拌过夜后,将混合物倾入200ml***中,用水洗涤。将有机相用MgSO4干燥、过滤并浓缩。剩余物用快速色谱法纯化(硅胶,75%乙酸乙酯的己烷溶液)得到534mg(95%)该中间体。将534mg该物质的10ml 1∶1TFA/CH2Cl2溶液搅拌1小时,然后剥离并与甲基共沸。剩余物溶于10ml CH2Cl2中,冷却至0℃。加入BOC-α-甲基丙氨酸(362mg),EDC,HOBT和NMM并搅拌过夜。将溶液倾入250ml乙酸乙酯中,依次用1NHaHSO4(aq.),水和饱和NaHCO3水溶液洗涤。将有机相干燥、过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化(硅胶,乙酸乙酯/己烷)得到638mg标题化合物。1HNMR(200MHz,CDCl3):8-.95(m,3H),1.05-1.3(m,7H),1.4-1.9(m,19H),2.15(m,2H),4.59(m,1H),4.87(m,1H)5.18(m,2H),6.96(m,1H),7.35(m,5H).FAB-MS计算值C26H40N2O5460;实测值461.5(M+H).
步骤C:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′基)羰基]-3-环己基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
将638mg步骤B得到的中间体和100mg10%Pd/c的混合物在含有H2的气球下搅拌4小时。通过硅藻土过滤混合物,浓缩滤液。将一部分该剩余物(87mg)溶于2mlCH2Cl2中,加入49.8mg 1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′哌啶]盐酸盐,EDC和HOBT,并搅拌16小时。将该溶液倾入200ml乙酸乙酯中,并依次用1NNaHSO4(aq.),水和饱和NaHCO3水溶液洗涤。将有机相干燥、过滤并浓缩。通过快速色谱法纯化(硅胶,60%乙酸乙酯/己烷)得到55mg(47%)该中间体。将所有的该中间体物质溶于2ml1∶1TFA/CH2C2中,搅拌1/2小时。剥离溶液,剩余物通过快速色谱法纯化(硅胶,甲醇,NH4OH(aq.),CH2Cl2。然后将化合物溶于CH2Cl2中,用HCl的***溶液处理并浓缩,得到标题化合物。
1HNMR(400MHz,CD3OD):93(m,2H),1.15-1.3(m,6H),1.55-1.3(m,1H),2.06(dt,15,4Hz,1H),2.88(m,1H),2.97(m,1H)3.35(m,2H),3.8-4.1(m,3H),4.51(m,1H)4.83(m,1H),7.06(q,7Hz,1H),7.22(m,2H),7.37(d,8Hz,1H).
FAB-MS计算值C27H42N4O4S518;实测值519.7(M+H)
实施例18(方法1)
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酯盐
在0℃下,向1.20g(5.8mmol)1′-甲基-1,2-二氢螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶](按H.Ong等人,J.Med.Chem.1993,23,981-986所述方法制备)的20ml无水二氯甲烷溶液中加入三乙胺(0.90ml;6.4mmol)和甲磺酰氯(0.4gml;6.35mmol)并搅拌30分钟。将反应混合物倾人15ml饱和碳酸氢钠水溶液中,用二氯甲烷萃取(2×10ml)。合并的有机液用盐水(20ml)洗涤,用无水碳酸钾干燥,过滤,减压下除去溶剂,得到1.44g甲磺酰胺衍生物,为浅黄色油状物,无需纯化即可使用。
在0℃下,向上述粗产物的20ml无水1,2-二氯乙烷溶液中加入1.0ml(9.30mmol)氯甲酸1-氯乙酯,然后在室温下搅拌30分钟,最后回流1小时。浓缩反应混合物至大约三分之一体积,然后用20ml无水甲醇稀释并回流1.5小时。将反应混合物冷却至室温并浓缩至大约二分之一体积。过滤沉淀,用少量体积的冷的甲醇洗涤。得到1.0g哌啶盐酸盐,为白色固体。浓缩滤液,加入少量体积的甲醇,接着加入***。再将沉淀的物质过滤,用冷甲醇洗涤并干燥,得到另外的0.49g所需产物,总产量:1.49g(70%)。
1H NMR(CDCl3,200MHz)δ7.43-7.20(m,3H),7.10(dd,1H),3.98
(bs,2H),3.55-3.40(bd,2H),3.35-3.10(m,2H),2.99(s,3H),2.15(t,
2H),2.00(t,2H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
向在13ml二氯甲烷中的0.35g(1.15mmol)(2R)-2-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基-3-[2-(苯基甲氧基)乙基]-1-丙酸中加入1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐(0.325g;1.07mmol)、0.18ml(1.63mmol)N-甲基吗啉、0.159g(1.18mmol)1-羟基苯并***(HOBT),并搅拌15分钟。加入EC(0.31g,1.62mol)并继续搅拌1小时。加入另外60μl N-甲基吗啉并搅拌45分钟。将反应混合物倾入5ml水中,分离有机层。用5ml 0.5N盐酸水溶液和5ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤机层。合并的有机液用无水硫酸镁干燥并浓缩,得到0.627g产物,为黄色泡沫状物,无需纯化即可使用。
向0.627g(1.07mmol)上述产物的5ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸,并在室温下搅拌75分钟,加入另外1.00ml三氟乙酸并搅拌10分钟。浓缩反应混合物,用5.0ml二氯甲烷稀释,通过倾入10ml10%碳酸钠水溶液中小心进行碱化,分离有机层,水层用2×15ml二氯甲烷进一步萃取。合并的有机液用5ml水洗涤,用碳酸钾干燥,过滤并浓缩,得到0.486g胺,为浅黄色泡沫状物,无需纯化即可使用。
向0.486g(1.01mmol)胺和10ml二氯甲烷中加入0.26g(1.28mmol)2-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基-2-甲基-丙酸、0.173g(1.28mmol)1-羟基苯并***(HOBT)和EDC(0.245g;1.28mmol),并在室温下搅拌过夜。将反应混合物倾入5.0ml水中,分离有机层。用5ml二氯甲烷反萃取水层,合并的有机液用5.0ml 0.5N盐酸水溶液、5ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤,用无水硫酸镁干燥并浓缩得到0.751g粗产物,为黄色泡沫状物。将此粗产物的二氯甲烷溶液用25g硅胶进行色谱纯化,首先用己烷/丙酮/二氯甲烷(70/25/5)洗脱,,然后用己烷/丙酮/二氯甲烷(65/30/5)洗脱,得到0.63g标题化合物,为白色固体。
1H NMR(CDCl3,400MHz)化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
δ7.40-7.10(m,6H),7.06(d,1/3H),7.02(t,1/3H),6.90(t,
1/3H),6.55(d,1/3H),5.15(m,1H),4.95(bs,1H),4.63(bd,1/3H),
4.57-4.40(m,22/3H),4.10(bd,1/3H),4.00(bd,1/3H),3.82(t,1H),
3.78-3.62(m,2H),3.60-3.50(m,1H),3.04(q,1H),2.87(s,1H),2.86
(s,2H),2.80-2.60(m,1H),1.90(bs,1H),2.85-2.75(m,1H),1.82-1.60
(m,3H),1.55-1.45(m,1H),1.45(s,4H),1.42(s,2H),1.39(s,9H).步骤C:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
盐酸盐
向0.637g(0.101mmol)步骤B的中间体的5ml二氯甲烷溶液中加入2.5ml三氟乙酸并在室温下搅拌30分钟。浓缩反应混合物得到油状物,然后将其溶于10ml乙酸乙酯中,用8ml 10%碳酸钠水溶液洗涤。用5ml乙酸乙酯进一步萃取水层。合并的有机液用10ml水洗涤,用硫酸镁干燥,过滤并浓缩,得到0.512g游离碱,为白色泡沫状物。
在0℃下,向0.512g游离碱在5ml乙酸乙酯中的溶液中加入0.2ml饱和盐酸的乙酸乙酯溶液,并搅拌1.5小时。在氮气中过滤该白色沉淀,用***洗,干燥得到0.50g标题化合物,为白色固体。
1H NMR(400MHz,CD3OD),化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
δ7.40-7.28(m,4H),7.25-7.17(m,2H),7.08(t,1/3H),7.00
(t,1/3H),6.80(d,1/3H),5.16(ddd,1H),4.60-4.42(m,3H),4.05(t,
1H),3.90(bs,2H),3.83-3.70(m,2H),3.30-3.15(m,1H0,2.97(s,1H),
2.95(s,2H),2.90-2.78(m,1H),1.96(t,1/3H),1.85-1.65(m,4H),1.63
(s,2H),1.60(s,4H).
实施例19(方法2)
N-[1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:(2R)-[[[-2-(1,1-二甲基乙氧基)羰基)氨基]-2,2-二甲基-1-
氧代乙基]氨基-2-(苯基甲氧基)乙基]-1-丙酸烯丙基酯
将(2R)-2-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基-3-(苯基甲氧基)乙基丙酸和烯丙醇在CH2Cl2中在EDC和DMAP存在下进行偶合反应,制得标题化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.25(s,5H),5.8(m,1H),5.2(dd,2H),
5.0(bs,1H),4.7(m,1H),4.6(m,2H),4.4(dd,2H),3.9(dd,1H),3.6
(dd,1H),1.45(d,6H),1.39(s,9H).步骤B:(2R)-[[[-2-(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-
氧代乙基]-氨基-2-(苯基甲氧基)乙基)-1-丙酸
向搅拌着的步骤A中得到的粗中间体(6.7g,15.9mol)、四(三苯基膦)钯(1.8g,0.1当量)和三苯基膦(1.25g,0.3当量)溶液中加入2-乙基己酸钾(35ml,0.5M的EtOAc溶液)溶液。将反应混合物在室温氮气氛下搅拌1小时,然后用***(100ml)稀释,倒入冰水中。分离有机层,含水部份用柠檬酸(20%)酸化,然后用EtOAc萃取。EtOAc萃取液用盐水洗涤,用硫酸镁干燥,过滤并蒸发,得到固体标题化合物。
1H NMR(400Hz,CD3OD)δ7.3(s,5H),4.7(m,1H),4.5(s,2H),4.0
(m,1H),3.6(m,1H),1.4(d,6H),1.3(s,9H).步骤C:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基-2-甲基丙酰胺
向1.0g(3.44mmol)1-甲磺酰基螺[二氢吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐、1.44g(3.78mmol)(2R)-[[-2-(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]-氨基-2-(苯基甲氧基)乙基)-1-丙酸、N-甲基吗啉(0.58ml;5.20mmol)和1-羟基苯并***(HOBT)(0.58g;3.78mmol)的50ml二氯甲烷溶液中加入EDC(1.03g;5.20mmol),并在室温下搅拌16小时。将反应混合物用另外的50ml二氯甲烷稀释,用碳酸氢钠水溶液(50ml)洗涤,用无水硫酸镁干燥、过滤并浓缩。粗油状剩余物通过快速色谱法(50g硅胶)纯化得到2.148g(90%)所需物质,为无色泡沫状物。
1H NNR(CDCl3,400MHz),化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
δ7.40-7.10(m,6H),7.06(d,1/3H),7.02(t,1/3H),6.90(t,
1/3H),6.55(d,1/3H),5.15(m,1H),4.95(bs,1H),4.63(bd,1/3H),
4.57-4.40(m,22/3H),4.10(bd,1/3H),4.00(bd,1/3H),3.82(t,1H),
3.78-3.62(m,2H),3.60-3.50(m,1H),3.04(q,1H),2.87(s,1H),2.86
(s,2H),2.80-2.60(m,1H),1.90(bs,1H),2.85-2.75(m,1H),1.82-1.60
(m,3H),1.55-1.45(m,1H),1.45(s,4H),1.42(s,2H),1.39(s,9H).步骤D:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐
酸盐
向2.148g(3,41mmol)步骤C的中间体的10ml二氯甲烷溶液中加入5ml三氟乙酸并搅拌1小时。浓缩反应混合物,用100ml 5%碳酸钠水溶液碱化并用二氯甲烷(3×50ml)萃取。合并的有机液用盐水(50ml)洗涤,用无水碳酸钾干燥,过滤并浓缩,得到无色泡沫状物。0℃下,向泡沫状物的25ml乙酸乙酯溶液中加入4ml 1M盐酸的乙酸乙酯溶液。过滤沉淀,首先用乙酸乙酯洗涤,然后用乙酸乙酯-***(1∶1)洗涤,干燥得到1.79g(93%)标题化合物,为无色固体。
1H NMR(400MHz,CD3OD),化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
δ7.40-7.28(m,4H),7.25-7.17(m,2H),7.08(t,1/3H),7.00
(t,1/3H),6.80(d,1/3H),5.16(ddd,1H),4.60-4.42(m,3H),4.05(t,
1H),3.90(bs,2H),3.83-3.70(m,2H),3.30-3.15(m,1H0,2.97(s,1H),
2.95(s,2H),2.90-2.78(m,1H),1.96(t,1/3H),1.85-1.65(m,4H),1.63
(s,2H),1.60(s,4H).
实施例20
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基-5-溴-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基-5-溴-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基-2-甲基丙酰胺
向300mg(1.03mmol)1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐的5ml冰醋酸溶液中加入0.28g(2.06mmol)溴,并在室温下搅拌1小时。将反应混合物浓缩至干,用10ml 5%碳酸钠水溶液碱化,用二氯甲烷(3×10ml)萃取,合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用无水碳酸钾干燥,过滤并浓缩,得到0.25g粗产物,为黄色油状物,无需纯化即可使用。步骤B:
向上面粗产物的10ml二氯甲烷溶液中加入0.43g(1.13mmol)实施例19步骤B的中间体、0.17g(1.13mmol)HOBT和0.34g(1.70mmol)EDC,并在室温下搅拌16小时,反应混合物用15ml***稀释,用10%柠檬酸水溶液(15ml)、饱和碳酸氢钠水溶液(15ml)洗涤,用无水硫酸镁干燥,过滤并浓缩,得到粗油状产物,该剩余物通过快速色谱法纯化(15g SiO2;CH2Cl2-丙酮(10∶1)作为洗脱剂),得到0.184g(26%两步)偶合物质,为无色泡沫状物。
向0.184g(0.26mmol)上面产物的2ml二氯甲烷溶液中加入2ml三氟乙酸,并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干,得到0.146g(93%)标题化合物,为白色固体。FAB-MS计算值C27H36BrN4O5S 608:实测值609.5。
实施例21
N-[1(R)-[(1,2-二氢-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺二盐酸盐步骤A:螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
在室温下,向1.0g(5.0mmol)1′-甲基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶](按H.Ong等人在J.Med.Chem.1983,23,981-986中所述方法制备)和1.0g粉状碳酸钾的30ml无水二氯甲烷溶液中加入0.50g溴化氰,并搅拌1小时。通过硅藻土滤板过滤反应混合物,用氯仿-甲醇(95∶5)洗涤。浓缩滤液,剩余物通过硅胶滤板,用氯仿-甲醇(95∶5)作为洗脱剂冲洗,得到大约1.2g黄色油状物,无需纯化即可使用。
在0℃下,向上面化合物的30ml无水DME悬浮液中加入0.30g氢化铝锂,并温热至室温,最后回流1小时。将反应混合物冷却至0℃,用0.3ml水、0.30ml 15%氢氧化钠水溶液和0.90ml水使反应中止。通过硅藻土滤板过滤出固体,用氯仿-甲醇(10∶1)充分洗涤。浓缩滤液得到0.74g化合物,为黄色泡沫状物。该物质是标题化合物和1′-甲基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]的1∶1的混合物。步骤B:(2R)-[[-2-[[1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-
氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸苄酯
向5.0g(16.5mmol)市场上可买到的N-t-BDC-D-色氨酸的100ml氯仿溶液中加入1.80ml(16.5mmol)苄醇、0.20g(1.65mmol)4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)和3.20gEDC,并搅拌16小时。将反应混合物倾入100ml水中,分离有机层。用2×100ml氯仿进一步萃取水层。合并的有机液用50ml 10%柠檬酸水溶液、100ml 10%碳酸氢钠水溶液洗涤,用无水硫酸镁干燥,过滤并浓缩,得到粘稠油状物。
向上面油状物的10ml二氯甲烷溶液中加入20ml三氟乙酸并搅拌1小时。浓缩反应混合物,用饱和碳酸氢钠水溶液小心碱化,用氯仿(2×100ml)萃取。合并的有机液用盐水(100ml)洗涤,用碳酸钾干燥,过滤并浓缩,得到5.46g胺,为棕色油状物,无需纯化即可使用。
向5.46g上面产物的100ml氯仿溶液中加入3.40g(22.2mmol)HOBT、4.60g(22.2mmol)N-BOC-α-甲基-丙氨酸和5.32g(28.0mmol)EDC,并搅拌16小时。将反应混合物倾入100ml水中,分离有机层。用2×100ml氯仿进一步萃取水层。合并的有机液用50ml 10%柠檬酸水溶液、100ml 10%碳酸氢钠水溶液洗涤,用无水硫酸镁干燥,过滤并浓缩,得到6.94g产物,为粘稠油状物。快速色谱法纯化(200gSiO2;己烷-乙酸乙酯作为洗脱剂)得到4.75g所需物质,为无色泡沫状物。
1H NMR(CDCl3,200MHz)δ8.48(bs,1H),7.54(bd,1H),7.38-7.23
(m,3H),7.19(bd,2H),7.15-7.00(m,1H),6.90(d,1H),6.86(d,1H),
5.06(bs,2H),4.95(ddd,1H),3.30(2dd,2H),1.40(s,15H)步骤C:(2R)-[[-2-[[1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-
氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸
向4.75g步骤B的物质的100ml乙醇溶液中加入1.0g 10%Pd/C,并在室温氢气球下搅拌18小时。通过硅藻土滤板滤除催化剂,并用乙酸乙酯洗涤。浓缩滤液得到2.96g所述酸,为无色泡沫状物。
1H NMR(CDCl3,200MHz)δ8.60(bs,1H),7.55(d,1H),7.26-6.90
(m,3H),6.88(bd,1H),4.80(m,1H),3.32(2dd,2H),1.37(s,3H),1.35
(s,12H)步骤D:N-[1(R)-[(1,2-二氢-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]
-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基-2-
甲基丙酰胺
于室温下,向0.122g(0.542mmol)1∶1的步骤A的中间体和1′-甲基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]的混合物的5ml无水氯仿溶液中加入0.105g(0.271mmol)步骤C的中间体、41mg(0.271mmol)HOBT和80mg(0.41mmol)EDC,并在室温下搅拌2小时。反应混合物用10ml氯仿稀释,用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)和10ml盐水洗涤,用无水碳酸钾干燥,过滤并浓缩。快速色谱法纯化(10g SiO2;2% MeOH-CHCl3)剩余物,得到94mg所需产物,为黄色泡沫状物。
化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
1H NMR
(CDCl3,400MHz)δ8.37(d,1/3H),8.35(d,2/3H),8.19(d,1H),7.72
(d,2/3H),7.60(d,1/3H),7.38(d,2/3H),7.32(d,1/3H),7.22-7.08(m,
3H),7.00(2t,1H),6.93(d,1/3H),6.69(t,1H),6.60(d,1/3H),6.56(d,
2/3H),6.50(d,2/3H),5.30-5.15(m,1H),5.00(bs,1H),4.34(m,1H),
3.62-3.50(m,1H),3.30-3.11(m,4H),2.90(dt,1H),2.40(dt,1/3H),
1.70-1.55(m,12/3H),1.34(s,2H),1.31(s,4H),1.28(s,1H),1.31(s,
9H),1.20-1.11(m,1H),0.32(dt,1/3H)步骤E:N-[1(R)-[(1,2-二氢-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]
-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺二盐酸盐
向27.5mg步骤D的中间体中加入1.0ml甲醇和1.0ml浓盐酸,并在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物,用5ml 10%碳酸钠水溶液碱化,用氯仿(3×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤、用碳酸钾干燥,过滤并浓缩得至粘稠油状物。制备型TLC(0.50mm板,氯仿-甲醇96∶5+1%NH4OH)得到12mg所需产物,为黄色固体。
该化物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
1H NMR(CDCl3,400
MHz)δ8.37(d,1/3H),8.35(d,2/3H),8.19(d,1H),7.72(d,2/3H),
7.60(d,1/3H),7.38(d,2/3H),7.32(d,1/3H),7.22-7.08(m,3H),7.00
(2t,1H),6.93(d,1/3H),6.69(t,1H),6.60(d,1/3H),6.56(d,2/3H),
6.50(d,2/3H),5.30-5.15(m,1H),4.34(m,1H),3.62-3.50(m,1H),
3.30-3.11(m,4H),2.90(dt,1H),2.40(dt,1/3H),1.70-1.55(m,12/3H),
1.34(s,2H),1.31(s,4H),1.28(s,1H),1.20-1.11(m,1H),0.32(dt,
1/3H).
实施例22
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲基羰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
在0℃下,向26mg实施例21步骤D的中间体的1.0ml 1,2-二氯乙烷和55μl(0.14mmol)N-甲基吗啉溶液中加入6.6μl(0.93mmol)乙酰氯,并搅拌1小时。将反应混合物用5ml***稀释,用5ml 10%柠檬酸水溶液、5ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤,用无水硫酸镁干燥、过滤并浓缩,得到浅黄色泡沫状物,无需纯化即可使用。
向上面产物的1.0ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸并在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物,用5ml 10%碳酸钠水溶液碱化,用氯仿(3×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用碳酸钾干燥,过滤并浓缩得到粘稠油状物,向此物质的1.0ml甲醇溶液中加入1.0ml 4N盐酸的二噁烷溶液并浓缩至干,得到16mg标题化合物,为浅黄色固体。
该化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
1H NMR(CD3OD,
400MHz)δ 8.43(d,1H),8.35(t,1H),7.72(d,2/3H),7.61(d,1/3H),
7.40-7.25(m,2H),7.20-7.08(m,3H),7.05-6.95(m,22/3H),6.50(d,
1/3H),5.25-5.10(m,1H),5.00-4.84(2bd,1H),3.68-3.45(m,3H),3.20
(m,2H),2.60-2.48(m,11/3H),2.30(dt,1/3H),2.00(s,1H),1.98(s,
2H),1.81-1.40(m,4H),1.35(s,2H),1.33(s,2H),1.32(s,1H),1.30(s,
1H),1.25-1.15(m,1H),1.10-1.00(m,1H),0.20(dt,1/3H)
实施例23
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-苯磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
在0℃下,向26mg(0.050mmol)实施例21步骤D的中间体的1.0ml1,2-二氯乙烷和5μl N-甲基吗啉溶液中加入7.5μl苯磺酰氯,并搅拌1小时,反应混合物用10ml***稀释,用5ml 10%柠檬酸水溶液、5ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤,用无水硫酸镁干燥,过滤并浓缩得到29.8mg粗产物,为浅黄色泡沫状物。向此物质的2ml甲醇的溶液中加入1.0ml浓盐酸并搅拌1小时。减压除去溶剂得到棕色固体标题化合物。
此化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
1H NMR(CDCl3,
400MHz)δ8.30(bs,1/3H),8.20(bs,2/3H),8.05(bs,2/3H),7.88(d,
1/3H),7.72-7.45(m,5H),7.43-7.30(m,4H),7.20-7.05(m,2H),7.00-
6.90(m,22/3H),6.35(d,1/3H),5.25-5.10(m,1H),4.90(bs,1H),4.30
(dt,1H),4.15(dt,1H),3.95(dd,1H),3.60-3.40(m,3H),3.25-3.20(m,
2H),2.90(dt,1H),2.73(dt,22/3H),2.35(m,11/3H),1.80(m,1H),
1.50(s,1H),1.43(s,2H),1.39(s,3H),1.30-1.20(m,2H),1.00(bd,
1/3H),0.90-0.70(m,2H),0.55(bd,1/3H),0.48(dd,2/3H),-0.90(dt,
1/3H)
实施例24
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
在0℃下,向0.258g(0.50mmol)实施例21步骤D的中间体的10ml无水二氯甲烷溶液中加入0.39ml(1.00mmol)N-甲基吗啉和45μl(0.60mmol)甲磺酰氯并搅拌30分钟。反应混合物用10ml***稀释,用饱和碳酸氢钠溶液(5ml)、盐水(5ml)洗涤,用无水硫酸镁干燥,过滤并浓缩得到浅黄色泡沫状产物,无需纯化即可使用。向该物质的3.0ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸并在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物,用5ml 10%碳酸钠水溶液碱化,用氯仿(3×15ml)萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用碳酸钾干燥,过滤并浓缩得到粘稠油状物。向此物质的3.0ml甲醇溶液中加入200μl 4M盐酸的二噁烷溶液,并浓缩至干,得到98mg所需物质,为浅黄色固体。
该化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
1H NMR(CD3OD,
400MHz)δ8.43(d,1H),8.35(t,1H),7.72(d,2/3H),7.61(d,1/3H),
7.40-7.25(m,2H),7.20-7.08(m,3H),7.05-6.95(m,22/3H),6.50(d,
1/3H),5.25-5.10(m,1H),5.00-4.84(2bd,1H),3.68-3.45(m,3H),3.20
(m,2H),2.82(s,1H),2.80(s,2H),2.60-2.48(m,11/3H),2.30(dt,
1/3H),1.81-1.40(m,4H),1.35(s,2H),1.33(s,2H),1.32(s,1H),1.30
(s,1H),1.25-1.15(m,1H),1.10-1.00(m,1H),0.20(dt,1/3H)
实施例25
N-1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-[3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨
基-2-甲基丙酰胺
用实施例18步骤B所述的偶合方法,由(2R)-2-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基-4-苯基-1-丁酸和1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐,制备标题化合物。用硅胶纯化粗产物,用5%丙酮的CH2Cl2溶液洗脱。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.2(m,9H),4.9(m,1H),4.5(m,1H),
3.8(m,2H),3.2(m,2H),2.9(s,3H),2.7(m,2H),2.3(s,2H),2.0(m,
2H),1.7(m,4H),1.5(s,6H),1.4(s,9H).步骤B:N-1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-3-苯基丙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
用实施例18步骤C所述的去保护方法,由步骤A得到的中间体制备标题化合物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.3(m,9H),4.5(m,1H),3.9(m,2H),
3.5(m,2H),3.2(m,2H),2.9(s,3H),2.7(m,4H),2.0(m,4H),1.6(s,
6H).
实施例26
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-三氟甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:1,2-二氢-1-苄氧羰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
向7.82g 60%氢化钠中加入己烷,然后滗析液体。向其中加入11.10ml(89mmol)2,5-二氟苯基乙腈的150ml DMSO溶液,并搅拌30分钟。然后滴加入15.10g 1-氯甲基乙胺盐酸盐的150ml DMSO溶液,并在75℃下加热4小时。将反应混合物倾入600g冰中,用***(5×200ml)萃取。合并的有机液用3×100ml 2N盐酸洗涤。合并的水萃取液用50%氢氧化钠水溶液碱化至pH=9,用***(3×200ml)萃取。合并的有机液用盐水(100ml)洗涤,用碳酸钾干燥并浓缩得到15.54g粘稠油状物。
在0℃下,将乙醇(24ml)以滴加的方式加入到在250ml DME中的9.90g氢化铝锂中,然后温热至回流。加入上面化合物的250ml DME溶液并回流72小时。然后将反应混合物冷却至0℃,用水(10ml)、10ml 15%NaOH和30ml水使反应中止。将浆状液用K2CO3干燥,过滤并浓缩得到13.6g粘稠油状物。用己烷研制该粗产物,滤出固体,再用己烷洗涤。固体(2.6g)的200MHz NMR(CDCl3)表明有大约75%所需的螺二氢吲哚。
在0℃下,向1.02g上面混合物的50ml CH2Cl2溶液中加入1.0ml三乙胺和0.80ml CBZ-Cl,并在室温上搅拌1小时。将反应混合倾入50ml 5% HCl中,分离水层。水层用50% NaOH碱化至pH=10,用CH2Cl2(3×25ml)萃取。合并的有机液用盐水(50ml)洗涤,用K2CO3干燥并浓缩,得到1.26g粘稠油状的化合物。
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ7.7-7.90(m,1H),7.50-7.15(m,6H),
6.95-6.60(m,2H),5.28(bs,2H),3.90(bs,2H),2.85(bd,2H),2.30(s,
3H),2.20-1.80(m,4H),1.65(bd,2H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-苄氧羰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
在0℃下,向1.62g(4.62mmol)上面步骤A的中间体的10ml 1,2-二氯乙烷溶液中加入0.65ml AGE-Cl,并回流1小时。浓缩反应混合物至三分之一体积,用10ml甲醇稀释并加热回流1小时。浓缩反应混合物至干,用***研制得到棕色固体。将此物质溶于饱合碳酸氢钠溶液(25ml)中,用二氯甲烷(2×25ml)萃取。合并的有机液用K2CO3干燥并浓缩得到0.384g游离碱。
向0.384g上述物质的15ml CH2Cl2溶液中加入0.483g实施例21步骤C中得到的酸中间体、0.189g HOBT和0.34g EDC,并搅拌18小时。将反应混合物倾入10ml水中,用CH2Cl2(2×10ml)萃取。合并的有机液用20ml 10%柠檬酸、20ml饱和NaHCO3溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。剩余物用25g硅胶进行快速色谱法纯化,用己烷-丙酮(1∶1)作为洗脱剂,得到0.389g所需物质。
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ7.7-7.90(m,1H),7.50-7.15(m,6H),
6.95-6.60(m,2H),5.28(bs,2H),3.90(bs,2H),2.85(bd,2H),2.30(s,
3H).2.20-1.80(m,4H),1.65(bd,2H).步骤C:N-[1(R)-[(1,2-二氢-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)
羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]
-2-甲基丙酰胺
向0.363g步骤B得到的中间体的5ml乙醇溶液中加入0.10g 20%氢氧化钯/炭,并在氢气球下氢化1小时,滤除催化剂,用较多的甲醇洗涤。浓缩滤液得到0.262g所需物质。
1H NMR(400MHz,CDCl3),该物质为2∶1的旋转异构体的混合物。δ8.85-8.60(2bs,1H),7.70(d,2/3H),7.55(d,1/3H),7.38(d,2/3H),
7.30(d,1/3H),7.28-7.15(m,4H),7.13-7.02(m,2H),6.65(dt,2H),
6.50(dd,1/3H),6.45(dd,2/3H),6.14(dd,2/3H),5.30-5.13(m,1H),
5.10(bs,1H),4.30(bd,2/3H),422(bd,1/3H),3.50-3.30(m,1H),3.30-
3.00(m,4H),.00-2.80(m,1H),2.73(t,1H),2.53-2.40(m,11/3H),
2.20(t,1/3H),1.49(s,3H),1.45(s,3H),1.41(s,9H)1.20(dt,1/3H),
0.95(bd,2/3H),0.90(dt,2/3H),-0.05(dt,1/3H).步骤D:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-三氟甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,
4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[[(1,1-二甲基
乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
在0℃下,向30mg步骤C所得的中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入0.050ml三乙胺和0.020ml三氟甲磺酸酐并搅拌5分钟。滤除催化剂,用较多的甲醇洗涤。将反应混合物倾入5ml 5%碳酸钠水溶液中并搅拌5分钟。用CH2Cl2(2×5ml)萃取水层,合并的有机液用MgSO4干燥,过滤并浓缩。将剩余物用3g硅胶进行快速色谱法纯化,用CH2Cl2-丙酮(4∶1)作为洗脱剂,得到21mg产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3),该物质是2∶1的旋转异构体的混合物。
δ8.40(bs,2/3H),8.25(bs,1/3H),7.70(d,2/3H),7.60(d,1/3H),7.40
(d,2/3H),7.35-7.10(m,5H),6.90-6.80(m,2H),6.18(dd,1H),5.30-
5.13(m,1H),4.95(bs,2/3H),4.90(s,1/3H),4.45(bd,2/3H),4.35(bd,
1/3H),385-3.70(m,2H),3.70-3.55(m,2H),3.30-3.10(m,2H),2.70(t,
1H),2.45(t,1/3H),2.35(t,2/3H),1.49(s,3H),1.45(s,3H),1.41(s,
9H),1.20(dt,1/3H),0.95(bd,2/3H),0.90(dt,2/3H),-0.05(dt,1/3H).步骤E:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-三氟甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,
4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙酰胺三
氟乙酸盐
将21mg步骤D得到的中间体的1ml二氯甲烷和1ml三氟乙酸溶液在室温下保持30分钟。将挥发物蒸发至干,用***研制,得到黄色固体。
1H NMR(400MHz,CD3OD),该物质是2∶1的旋转异构体的混合物。
δ7.65(d,2/3H),7.60(d,1/3H),7.42(d,2/3H),7.35-7.10(m,
5H),6.93-6.80(m,2H),6.24(dd,1H),5.30-5.13(m,1H),4.95(bs,
2/3H),4.90(s,1/3H),4.45(bd,2/3H),4.35(bd,1/3H),385-3.70(m,
2H),3.70-3.55(m,2H),3.30-3.10(m,2H),2.70(t,1H),2.45(t,1/3H),
2.35(t,2/3H),1.49(s,3H),1.45(s,3H),0.93(bd.2/3H),0.90(dt,
2/3H),-0.05(dt,1/3H).
实施例27
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[甲氧羰基]甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[甲氧羰基]甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲
哚-3,4′-哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙
酰胺三氟乙酸盐
在0℃下,向77mg实施例26步骤C得到的中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入0.30ml N-甲基吗啉和0.024ml 2-甲氧羰基甲磺酰氯并搅拌1小时。将反应混合物倾入5ml 5%碳酸钠水溶液中并搅拌5分钟。用CH2Cl2(2×5ml)萃取水层,合并的有机液用盐水(5ml)洗涤,用MgSO4干燥,过滤并浓缩。剩余物用5g硅胶快速色谱法纯化,用CH2Cl2-丙酮(4∶1)作为洗脱剂,得到64mg产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3),该物质是2∶1的旋转异构体的混合物。
δ8.48(bs,2/3H),8.35(bs,1/3H),7.70(d,2/3H),7.60(d,1/3H),7.40
(d,2/3H),7.32(d,1/3H),7.25-7.00(m,4H),6.90-6.78(m,2H),6.18
(dd,1H),5.30-5.20(m,1H),4.97(bs,2/3H),4.91(s,1/3H),4.50-4.35
(2bd,1H),4.02(s,2/3H),3.99(s,1/3H),3.76(q,2H),3.58(s,1H),3.56
(s,2H),3.08-3.07(m,2H),2.72(t,1H),2.50-2.30(2t,1H),1.65(t,
1/3H),1.50(s,2H),1.46(s,4H),1.40(s,9H),1.30(m,1/3H),1.10(bd,
2/3H),0.88(dt,2/3H),-0.13(dt,1/3H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[甲氧羰基]甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲
哚-3,4′-哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-甲基丙
酰胺三氟乙酸盐
将24mg步骤A得到的中间体在1ml二氯甲烷和1ml三氟乙酸中的溶液在室温下保持30分钟,将挥发物蒸发至干,用***研制,得到23mg无色固体。
1H NMR(400MHz,CD3OD),该物质是2∶1的旋转异构体的混合物。
δ8.70(bs,1/3H),8.60(bs,2/3H),7.60(m,2/3H),7.50(d,
2/3H),7.48(m,1/3H),7.40(d,2/3H),7.31(d,1/3H),7.25-7.00(m,
4H),6.95-6.85(m,1H),6.70(dd,1/3H),6.15(dd,2/3H),5.20-5.10(m,
1H),4.38(bd,1/3H),4.28(bd,2/3H),4.02(s,2/3H),3.99(s,1/3H),
3.76(q,2H),3.58(s,1H),3.56(s,2H),3.08-3.07(m,2H),2.72(t,1H),
2.50-2.30(2t,1H),1.65(t,1/3H),1.65(s,2H),1.60(s,4H),1.30(m,
1/3H),1.00(bd,2/3H),0.88(dt,2/3H),-0.10(dt,1/3H).
实施例28
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-苄氧羰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
在室温下,向0.330g实施例26步骤A得到的1,2-二氢-1-苄氧羰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]的10ml 1,2-二氯乙烷溶液中加入0.35g N-tBOC-O-苄基-D-丝氨酸、0.195g HOBT和0.30gEDC并搅拌18小时。将反应混合物倾入10ml水中,用CH2Cl2(2×10ml)萃取。合并的有机液用20ml 10%柠檬酸、20ml饱和NaHCO3溶液洗涤。用MgSO4干燥并浓缩。
向步骤A得到的中间体的5ml CH2Cl2溶液中加入5ml三氟乙酸,并在室温下搅拌30分钟。浓缩反应混合物,用5.0ml二氯甲烷稀释,用10ml 10%碳酸钠水溶液小心碱化。分离有分机层,用2×15ml二氯甲烷进一步萃取水层。合并的有机液用5ml水洗涤,用碳酸钾干燥,过滤并浓缩,得到0.39g粘稠油状的胺。
在室温下,向0.39g上面中间体的10ml 1,2-二氯乙烷溶液中加入0.24g N-tBOC-α-甲基丙氨酸、0.195g HOBT和0.30g EDC,并搅拌18小时。将反应混合物倾入10ml水中,用CH2Cl2(2×10ml)萃取。合并的有机液用20ml 10%柠檬酸、20ml饱和NaHCO3溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。用30g硅胶快速色谱法纯化剩余物,用己烷-乙酸乙酯(2∶1)作为洗脱剂,得到0.33g产物。
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ7.80(bs,1H),7.50-7.15(m,5H),7.10(bd,
1H),6.90-6.70(m,1H),6.27(bd,1H),7.35-7.10(m,5H),5.35-5.10(m,
3H),4.99(s,1H),4.704.40(m,3H),3.90-3.50(m,4H),3.15-2.90(m,
2H),2.80-2.50(m,2H),1.80-1.40(m,2H),1.50(3H),1.42(s,6H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)
羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨
基]-2-甲基丙酰胺
向0.330g步骤A得到的中间体的5ml乙醇溶液中加入1滴三乙胺,并用氢气球氢化3小时。通过硅藻土滤板过滤出催化剂,用乙酸乙酯洗涤,浓缩滤液得到0.269g无色泡沫状产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.20(m,4H),7.17-7.08(m,2H),
6.80-6.65(m,2/2/3H),6.27(dt,1/3H),5.20-5.10(m,1H),4.90(s,1H),
4.60-4.40(m,3H),4.00(bt,1H),3.75-3.60(m,1H),3.55-3.40(m,3H),
3.18-3.30(m,2H),2.90-2.65(m,1H),1.83-1.50(m,4H),1.48(s,4H),
1.42(s,2H),1.39(s,9H).步骤C:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
向0.134g步骤B的中间体的5ml二氯甲烷溶液中加入0.080ml N-甲基吗啉和0.022ml甲磺酰氯并在0℃下搅拌30分钟。反应混合物用另外的5ml二氯甲烷稀释,用5ml饱和碳酸氢钠溶液、盐水(5ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。用20g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.101g所需产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40-7.20(m,5H),7.08(d,1H),6.95-
6.80(m,2/1/3H),6.23(dd,2/3H),5.20-5.10(m,1H),4.90(bs,1H),
4.60(bd,2/3H),4.58-4.40(m,3/1/3H),4.10-4.00(m,1H),3.388-3.70
(m,21/3H),3.66-3.60(m,1/2H),3.60-3.50(m,1H),3.10-2.95(m,1H),
2.86(s,1H),2.84(s,2H),2.80(t,1/3H),2.65(t,2/3H),2.90-2.50(m,
4H),1.45(s,4H),1.44(s,2H),1.42(s,3H),1.40(s,6H).步骤D:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰
胺盐酸盐
向0.101g步骤C的中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸并在室温下保持30分钟。将反应混合物蒸发至干,用10%碳酸钠水溶液(10ml)碱化,用二氯甲烷(3×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(5ml)洗涤,用碳酸钾干燥并浓缩。将该物质溶于2ml乙酸乙酯中,在0℃下加入0.10ml 4M HCl的EtDAc溶液。在氮气氛下滤出沉淀,用Et0Ac/***(1∶1)洗涤并干燥得到62mg白色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.20(m,5H),7.08(d,1H),6.95-
6.80(m,2/1/3H),6.23(dd,2/3H),5.20-5.10(m,1H),4.60(bd,2/3H),
4.58-4.40(m,3/1/3H),4.10-4.00(m,1H),3.388-3.70(m,21/3H),3.66-
3.60(m,1/2H),3.60-3.50(m,1H),3.10-2.95(m,1H),2.86(s,1H),
2.84(s,2H),2.80(t,1/3H),2.65(t,2/3H),2.90-2.50(m,4H),1.45(s,
4H),1.44(s,2H).
实施例29步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-苯磺酰基-5-氟-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰
胺三氟乙酸盐
向0.026g实施例27步骤B的中间体的2ml二氯甲烷溶液中加入0.020ml N-甲基吗啉和0.012ml苯磺酰氯,并在0℃下搅拌1小时。将反应混合物倾入10ml***中,用5ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,用CH2CH2-***(2∶1)作为洗脱剂,得到0.019g产物。
将上述物质用1ml二氯甲烷和1ml三氟乙酸处理1小时。将反应混合物蒸发至干,剩余物用***研制,得到18mg白色固体的所需产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.80(d,2H),7.70-7.55(m,2H),7.55-
7.50(m,2H),7.40-7.20(m,42/3H),7.03-6.92(m,1H),6.82(dt,2/3H),
6.4.7(dt,2/3H),5.08(dt,1H),4.60-4.48(m,2H),4.33(bt,1H),3.94-
3.85(m,3H),3.75-3.65(m,2H),3.10(dt,1H),2.80(dt,1H),1.73(dt,
1H),1.58(s,4.H),1.56(s,2H),1.50(dt,1H),1.38(dt,1H),1.10(dt,
2H).
实施例30
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-乙磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-苄氧羰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧基)
羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
在室温下,向5g 1,2-二氢-1-苄氧羰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐的100ml二氯甲烷溶液中加入3.64g N-tBOC-O-苄基-D-丝氨酸、1.83g HOBT,2.60mlN-甲基吗啉和3.70g EDC并搅拌18小时。将反应混合物倾入100ml水中,用CH2Cl2(2×100ml)萃取。合并的有机液用100ml 10%柠檬酸、100ml饱和NaHCO3溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。
向步骤A得到的中间体的20ml CH2Cl2溶液中加入20ml三氟乙酸并在室温下搅拌30分钟,浓缩反应混合物,用50ml二氯甲烷稀释,用100ml 10%碳酸钠水溶液小心碱化。分离有机层,用2×50ml二氯甲烷进一步萃取水层,合并的有机液用50ml水洗涤,用碳酸钾干燥,过滤并浓缩得到粘稠油状的胺。
在室温下,向上述中间体的50ml二氯甲烷溶液中加入2.50gN-tBOC-α-甲基丙氨酸、1.83g HOBT和3.70g EDC并搅拌18小时。将反应混合物倾入10ml水中,用CH2Cl2(2×10ml)萃取。合并的有机液用20ml 10%柠檬酸、20ml饱和NaHCO3溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。用己烷-乙酸乙酯(2∶1)作为洗脱剂,通过300g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到8.1g产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85(bs,1H),7.45-7.20(m,10H),7.20-
7.05(m,22/3H),6.95(t,1/3H),6.88(t,1/3H),6.53(dd,2/3H),5.35-
5.20(m,2H),5.20-5.10(m,1H),4.92(bs,1H),4.65-4.20(m,4H),4.05
(bd,2/3H),4.00-3.80(m,1,1/3H),3.80-3.60(m,1H),3.10(t,2/3H),
3.00-2.85(m,1/3H),2.82-2.60(2t,1H),1.90-1.55(m,5H),1.49(s,
4H),1.42(s,2H),1.40(s,9H),步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]
-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-
甲基丙酰胺
向8.10g步骤A得到的中间体的80ml乙醇溶液中加入1g 20%氢氧化钯/炭,并用氢气球氢化1小时。通过硅藻土滤板滤出催化剂,用乙酸乙酯洗涤,浓缩滤液得到4.69g产物,为无色泡沫状物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35-7.20(m,5H),7.18(d,1/2H),7.10
(d,1/2H),7.04-6.98(m,2H),6.75-6.60(m,2H),5.20-5.10(m,1H),
4.97(bs,1H),4.55-4.40(m,3H),3.95(dd,1H),3.73-3.61(m,1H),
3.60-3.50(m,1H),3.50-3.33(m,3H),3.10(dt,1H),2.83(dt,1H),
1.85-1.559m,5H),1.47(s,4H),1.42(s,2H),1.39(s,9H).步骤C:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-乙磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
向0.158g步骤B的中间体的5ml二氯甲烷溶液中加入0.053ml N-甲基吗啉和0.034ml乙磺酰氯,并在0℃下搅拌30分钟,在室温下搅拌1小时。反应混合物用另外5ml二氯甲烷稀释,用5ml饱和碳酸氢钠溶液、盐水(5ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以CH2Cl2-***(3∶1)作为洗脱剂,用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.057g所需产物。
向0.057g上面中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸并在室温下保持30分钟。将反应混合物浓缩至干,用***研制,得到0.034g黄色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.25(m,5H),7.25-7.13(m,
21/2H),7.03(t,1/2H),6.95(t,1/2H),6.80(d,1/2H),5.18(dt,1H),
4.60-4.42(m,3H),4.08(t,1H),3.96(s,2H),3.83-3.70(m,2H),3.29-
3.15(m,3H),2.84(dt,1H),1.90(dt,1H),1.74-1.62(m,4H),1.62(s,
2H),1.60(s,4H),1.33(dt,3H).
实施例31
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[2-甲基-2-丙磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
向0.212g实施例29步骤8的中间体的2ml 1,2-二氯乙烷溶液中加入0.083ml三乙胺和0.054ml异丙基磺酰氯,并在0℃下搅拌30分钟,在室温下搅拌3小时。反应混合物用5ml二氯甲烷稀释,用5ml饱和碳酸氢钠溶液、盐水(5ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以CH2Cl2-***(3∶1)作为洗脱剂用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.113g所需产物。
向0.101g上面中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸并在室温下保持30分钟。将反应混合物蒸发至干,用10%碳酸钠水溶液(10ml)碱化,用二氯甲烷(3×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(5ml)洗涤,用碳酸钾干燥并浓缩。将该物质溶于2ml乙酸乙酯中,在0℃下加入0.10ml 4M HCl的EtOAc溶液。在氮气氛下滤出沉淀,用EtOAc/***(1∶1)洗涤并干燥,得到88mg白色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.20(m,5H),7.08(d,1H),6.95-
6.80(m,2/1/3H),6.23(dd,2/3H),5.20-5.10(m,1H),4.60(bd,2/3H),
4.58-4.40(m,3/1/3H),4.10-4.00(m,1H),3.388-3.70(m,21/3H),3.66-
3.60(m,1/2H),3.60-3.50(m,1H),3.10-2.95(m,1H),2.86(s,1H),
2.84(s,2H),2.80(t,1/3H),2.65(t,2/3H),2.90-2.50(m,4H),1.45(s,
4H),1.44(s,2H).
实施例32步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[2-甲氧羰基甲磺酰基-螺[3H-吲哚
-3,4′-哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二
甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺盐酸盐
向0.50g实施例29步骤B的中间体的10ml二氯甲烷溶液中加入0.21ml N-甲基吗啉和0.10ml 2-甲氧羰基甲磺酰氯,并在0℃下搅拌30分钟。反应混合物用10ml二氯甲烷稀释,用5ml饱和碳酸氢钠溶液、盐水(5ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以CH2Cl2-***(3∶1)作为洗脱剂,用20g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.529g所需产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.39-7.20(m,5H),7.20-7.10(m,
21/2H),7.08(dt,1H),6.92(t,1/2H),6.55(d,1/2H),5.20-5.10(m,1H),
4.94(bs,1H),4.60(bd,1H),4.53-4.40(m,2H),4.10(2bs,2H),4.05-
3.90(m,2H),3.70(dt,1H),3.63(s,11/2H),3.61(s,11/2H),3.59-3.50
(m,1H),3.05(dt,1H),2.70(dt,1H0,1.90-1.50(m,4H),1.49(s,4H),
1.44(s,2H),1.39(s.9H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[2-甲氧羰基甲磺酰基-螺[3H-吲哚
-3,4′-哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-
甲基丙酰胺盐酸盐
向0.113g上面中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸,并在室温下保持30分钟。将反应混合物蒸发至干,用10%碳酸钠水溶液(10ml)碱化,用二氯甲烷(3×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用碳酸钾干燥并浓缩。将该物质溶于2ml乙酸乙酯中,在0℃下加入0.20ml 4M HCl的EtOAc溶液。加入***,在氮气氛下滤出沉淀,用***洗涤并干燥,得到0.108g白色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.20(m,5H),7.08(d,1H),6.95-
6.80(m,2/1/3H),6.23(dd,2/3H),5.20-5.10(m,1H),4.60(bd,2/3H),
4.58-4.40(m,3/1/3H),4.10-4.00(m,1H)),3.388-3.70(m,21/3H),3.66-
3.60(m,1/2H),3.60-3.50(m,1H),3.10-2.95(m,1H),2.86(s,1H),
2.84(s,2H),2.80(t,1/3H),2.65(t,2/3H),2.90-2.50(m,4H),1.45(s,
4H),1.44(s,2H).
实施例33步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[2-羧基甲磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-
哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙
氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐
在0℃下,向0.126g实施例32步骤A的中间体的3ml甲醇和1ml水的溶液中加入2滴5N氢氧化钠水溶液并搅拌30分钟。反应混合物用0.50N盐酸水溶液酸化至pH=2,用盐水(5ml)稀释,用CH2Cl2(2×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩,得到0.098g白色泡沫状物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.80(bs,1H),7.45(d,1/2H),7.40-7.13
(m,7H),7.02(t,1/2H),6.90(t,1/2H),6.50(d,1/2H),5.22-5.10(m,
1H),4.60-4.40(m,3H),4.20-4.00(m,3H),3.92(d,1H),3.70-5.50(m,
2H),3.04(dt,1H),2.70(dt,H),1.93-1.50(m,4H),1.42(s,6H),1.33
(s,9H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[2-羧基甲磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-
哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙
酰胺
向0.098g步骤A的中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入1ml三氟乙酸并搅拌30分钟。将反应混合物蒸发至干,用***研制得到0.096g白色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.28(m,6H),7.24-7.15(m,
21/2H),7.00(dt,1H),6.80(d,1/2H),5.17(dt,1H),4.60-4.45(m,2H),
4.22(d,2H),4.14-4.00(m,3H),3.81-3.70(m,2H),3.22(dt,1H),2.83
(dt,1H),1.96(dt,1/2H),1.80-1.64(m,41/2H),1.62(s,1H),1.60(s,
5H).
实施例34步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[2-羟基乙磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-
哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙
氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐
在室温下,向0.222g实施例32步骤A的中间体的2ml无水四氢呋喃溶液中加入0.48ml 2M硼氢化锂的四氢呋喃溶液,并搅拌3小时。反应混合物用0.5ml丙酮使反应中止,用15ml水稀释,用CH2Cl2(2×15ml)萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩得到0.27g白色泡沫状物。以CH2Cl2-丙酮(2∶1)作为洗脱剂用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.129g粘稠油状的所需物质。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32-7.20(m,6H),7.20-7.10(m,2H),
7.09(d,1/2H),6.98(t,1/2H),6.90(t,1/2H),6.54(d,1/2H),5.17-5.10
(m,1H),5.00(bs,1H),4.61-4.39(m,3H),4.10-3.95(m,5H),3.93-
3.74(m,2H),3.66(ddd,1H),3.53(dt,1H),3.27(dt,2H),3.00(dt,
1H),2.70(dt,1H),1.90-1.50(m,4H),1.43(s,4H),1.41(s,2H),1.36
(s,9H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[2-羟基乙磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-
哌啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙
酰胺三氟乙酸盐
向0.129g步骤A的中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入1ml三氟乙酸并搅拌30分钟。将反应混合物蒸发至干,用***研制得到0.113g白色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.25(m,6H),7.25-7.13(m,
21/2H),6.98(dt,1H),6.80(d,1/2H),5.20-5.10(m,1H),4.60-4.43(m,
3H),4.10-3.90(m,5H),3.81-3.70(m,2H),3.40-3.33(dt,2H),3.20(dt,
1H),3.82(dt,1H),2.00-1.63(m,4H),1.61(s,1H),1.58(s,5H).
实施例35步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-三氟甲磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺盐酸盐
向0.150g实施例29步骤B的中间体的5ml二氯甲烷溶液中加入0.10ml N-甲基吗啉和0.057ml三氟甲磺酸酐,并在0℃下搅拌15分钟。反应混合物用5ml饱和碳酸氢钠水溶液稀释,用2×5ml二氯甲烷萃取。合并的有机液用盐水(5ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以己烷-丙酮(3∶1)作为洗脱剂用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.136g所需产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40-7.15(m,6H),7.15-6.93(m,
21/2H),6.53(d,1/2H),5.20-5.10(m,1H),4.90(bs,1H),4.70-4.60(m,
3H),4.15-3.90(m,3H),3.70(ddd,1H),3.60-3.50(m,1H),3.00(dt,
1H),2.70(dt,1H),1.93-1.55(m,4H),1.46(s,4H),1.43(s,2H),1.40
(s,9H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-三氟甲磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌
啶]]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰
胺盐酸盐
向0.136g上面中间体的1ml二氯甲烷溶液中加入1.0ml三氟乙酸并在室温下保持30分钟。将反应混合物蒸发至干,用10%碳酸钠水溶液(5ml)碱化,用乙酸乙酯(2×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(5ml)洗涤,用碳酸钾干燥,并浓缩。将所得物质溶于2ml乙酸乙酯中,在0℃下加入0.20ml 4M HCl的EtOAc溶液。加入***,在氮气氛下滤出沉淀,用***洗涤并干燥得到0.94g白色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.15(m,6H),7.15-6.93(m,
21/2H),6.53(d,1/2H),5.20-5.10(m,1H),4.90(bs,1H),4.70-4.60(m,
3H),4.15-3.90(m,3H),3.70(ddd,1H),3.60-3.50(m,1H),3.00(dt,
1H),2.70(dt,1H),1.93-1.55(m,4H),1.46(s,4H),1.43(s,2H).
实施例36步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-苯磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐
酸盐
向0.148g实施例29步骤B的中间体的3ml二氯甲烷溶液中加入0.30ml N-甲基吗啉和0.022ml苯磺酰氯,并在室温下搅拌1小时。反应混合物用10ml二氯甲烷稀释,用10ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以己烷-丙酮(3∶1)作为洗脱剂用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.190g所需产物。
向0.190g上面中间体的3ml二氯甲烷溶液中加入3ml三氟乙酸并在室温下保持30分钟。将反应混合物蒸发至干,用10%碳酸钠水溶液(5ml)碱化,用乙酸乙酯(2×5ml)萃取。合并的有机液用盐水(5ml)洗涤,用碳酸钾干燥并浓缩。将所得物质溶于2ml乙酸乙酯中,在0℃下加入0.40ml 4M HCl的EtOAc溶液。加入***,在氮气氛下滤出沉淀,用***洗涤并干燥得到0.136g白色固体产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.82(d,2H),7.67-7.58(m,2H),7.52(t,
2H),7.40-7.20(m,6H),7.10-6.90(m,11/2H),6.68(d,1/2H),5.10(dt,
1H),4.53(ABq,2H),4.35(t,1H),4.00-3.80(m,3H),3.75-3.65(m,
2H),3.10(dt,1H),2,73(dt,1H),1.75(dt,1/2H),1.48(m,11/2H),
1.20-1.05(m,2H).
实施例37步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-[1-脲基甲基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三
氟乙酸盐
向0.148g实施例29步骤B的中间体的5ml 1,2-二氯乙烷溶液中加入0.10ml异氰酸甲酯并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发至干。以CH2Cl2-丙酮(2∶1)作为洗脱剂用15g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.137g所需产物。
在室温下,用3ml二氯甲烷和3ml三氟乙酸处理上面物质30分钟。将反应混合物蒸发至干,用***研制,得到0.126g浅黄色固体。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.82(dd,1H),7.42-7.35(m,5H),7.30-
7.20(m,21/2H),6.75(d,1/2H),5.19(dt,1H),4.60-4.50(m,3H),4.13
(bd,1H),3.90-3.68(m,4H),3.25(t,1H),2.90-2.70(2s,4H),1.98(dt,
1/2H),1.85-1.65(m,31/2H),1.62(s,2H),1.59(s,4H).
实施例38
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-[1-甲氧羰基-1-甲基-乙磺酰基-螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:1,2-二氢-1-[1-甲氧羰基-1-甲基-乙磺酰基]-螺[3H-吲哚-3,
4′-哌啶]
向5.06g 1,2-二氢-1-苄氧羰基-螺[3H-吲哚-3,4-哌啶]盐酸盐的50ml二氯甲烷溶液中加入3.0ml三乙胺和3.40g碳酸二叔丁酯,并在室温下搅拌3小时。将反应混合物蒸发至干,用100ml***稀释,用50ml 0.50N盐酸水溶液、50ml盐水洗涤,用MgSO4干燥并浓缩,向所得粗产物的50ml乙醇溶液中加入1g 20%氢氧化钯/炭,并用氢气球氢化过夜。在0℃下,向0.506g所得化合物的15ml二氯甲烷溶液中加入0.74ml三乙胺和0.41ml甲氧羰基甲磺酰氯并搅拌1小时。反应混合物用25ml***稀释,用饱和碳酸氢钠溶液(20ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以己烷-乙酸乙酯4∶1作为洗脱剂用25g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到1.79g粘稠油状的所需物质。
用己烷洗涤氢化钠(0.102g,60%矿物油液),然后悬浮于5ml无水0MF中。加入0.158g上面中间体的1ml DMF溶液并搅拌30分钟。加入甲基碘(1.85mmol)并搅拌3小时。将反应混合物倾入15ml饱和氯化铵水溶液中,用***(2×15ml)萃取。合并的有机液用水(15ml)、盐水(15ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩,得到0.179g所需物质。
1H NMR(200MHz,CDCl3)δ7.32(d,1H),7.20-6.90(m,3H),4.13
(bd,2H),2.83(bt,2H),1.85-1.70(m,4H),1.69(s,6H),148(s,9H).步骤B:N-[1(R)-[(1,2-二氢-[1-甲氧羰基-1-甲基乙磺酰基-螺[3H-
吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[[(1,1-
二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
向0.179g步骤A的中间体溶液中加入1ml二氯甲烷和1ml三氟乙酸并搅拌30分钟。将反应混合物蒸发至干,用10ml 10%碳酸钠水溶液碱化,用2×10ml二氯甲烷萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用碳酸钾干燥,过滤并浓缩得到0.120g粘稠油状的哌啶。向所得化合物的5ml二氯甲完溶液中加入0.132g实施例21步骤B制得的酸中间体、0.055g HOBT,0.102gEDC并搅拌18小时。反应混合物用25ml***稀释,用15ml 0.05N HCl饱和碳酸氢钠溶液(15ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以CH2Cl2-丙酮(5∶1)作为洗脱剂用20g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.094g所需产物。
1H NMR(CDC13,400MHz)δ8.60(s,2/3H),8.50(s,1/3H),7.70(d,
2/3H),7.60(d,1/3H),7.35(d,2/3H),7.30(d,1/3H),7.26-7.00(m,
5H),6.90(t,11/3H),6.40(d,2/3H),5.28-5.16(m,1H),5.05(bs,1H),
4.41(bd,2/3H),4.32(bd,1/3H),3.78-3.65(m,2H),3.56(s,2H),3.55
(s,1H),3.50(bd,1H),3.20(dt,1H),3.15(ddd,1H),2.75(t,1H),2.42
(m,1H),1.18(d,2H),1.24(s,4H),1.50(s,2H),1.48(s,4H),1.42(s,
9H),1.30-1.18(m,1H),1.10-0.90(m.11/3H),0.03(dt,2/3H).步骤C:N-[1(R)-[(1,2-二氢-[1-甲氧羰基-1-甲基乙磺酰基]-螺[3H-
吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基
-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐
用1ml二氯甲烷和1ml三氟乙酸处理0.094g步骤C的中间体溶液30分钟,蒸发至干,用***研制,得到0.082g所需产物。
1H NMR(CD3OD,400)MHz)δ7.70(d,2/3H),7.60(d,1/3H),7.35(d,
2/3H),7.30(d,1/3H),7.26-7.00(m,5H),6.90(t,11/3H),6.40(d,
2/3H),5.28-5.16(m,1H),5.05(bs,1H),4.41(bd,2/3H),4.32(bd,
1/3H),3.78-3.65(m,2H),3.56(s,2H),3.55(s,1H),3.50(bd,1H),3.20
(dt,1H),3.15(ddd,1H),2.75(t,1H),2.42(m,1H),1.18(d,2H),1.24
(s,4H),1.50(s,2H),1.48(s,4H),1.30-1.18(m,1H),1.10-0.90(m,
11/3H),0.03(dt,2/3H).
实施例39
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-3-氨基-3-甲基丁酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-3-氨基-3-甲基丁酰胺
向1.14g 1,2-二氢-1-甲磺酰基螺-[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐(按实施例18(方法1)步骤A所述方法制备)的50ml二氯甲烷悬浮液中加入0.80ml N-甲基吗啉、1.00g N-tBOC-D-色氨酸、0.80g HOBT和1.20gEDC并在室温下搅拌18小时。将反应混合物用100ml***稀释,用50ml 0.05N HCl、50ml饱和碳酸氢钠溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。
在0℃下用HCl(g)处理上面所得的中间体的50ml乙酸乙酯溶液2分钟,然后搅拌1小时。加入无水***(50ml),然后过滤收集沉淀出的固体。产量为1.44g。
向0.86g所述胺盐酸盐的30ml二氯甲烷溶液中加入0.24ml N-甲基吗啉、0.36g HOBT,0.56gEDC,并搅拌过夜。反应混合物用100ml***稀释,用0.05N HCl(50ml)、50ml饱和NaHCO3溶液洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以CH2Cl2-丙酮(5∶1)作为洗脱剂用20g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.74g所需产物。
在0℃下,向0.74g上面中间体的5ml乙酸乙酯溶液中鼓泡通入无水HCl气体2分钟,并搅拌30分钟。加入***至完全沉淀出产物。滤出固体,在氮气氛下用***洗涤并干燥,得到0.57g所需产物。
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ7.69(d,2/3H),7.55(d,1/3H),7.37-
6.90(m,5H),6.82(bt,11/3H),6.43(d,2/3H),5.31-5.18(m,1H),4.40
(bd,2/3H),4.30(bd,1/3H),3.63-3.38(m,4H),3.22-3.05(m,2H),
2.83-2.75(m,1H),2.80(s,1H),2.74(s,2H),2.63(dd,1H),2.55-2.43
(m,2H),2.20(bd,1H),1.70-1.53(m,1H),1.38(2H),1.36(s,2H),1.35
(s,1H),1.34(s,1H),1.18(bd,1H),1.20-0.94(m,11/3H),0.03(dt,
2/3H).
实施例40
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[3-[2(R)-3-二羟基丙基]氨基]-3-甲基丁酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[3-[2(R)-3-二羟基丙
基]氨基]-3-甲基丁酰胺盐酸盐
向0.30g实施例39步骤B得到化合物的5ml无水甲醇溶液中加入1.5g无水乙酸钠、0.30g(R)-1,2-亚异丙基甘油醛(Tetrahedron1985,41,3117),并搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(8.7ml,1M溶液)的THF溶液并搅拌18小时。反应混合物用20ml水稀释,用二氯甲烷(3×10ml)萃取。合并的有机液用饱和碳酸氢钠溶液(10ml)洗涤,用K2CO3干燥并浓缩。以CH2Cl2-甲醇(98∶2)作为洗脱剂用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.146g还原氨化的化合物。
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.70-8.40(m,2H),7.63(d,2/3H),7.55
(d,1/3H),7.37(t,1H),7.32(d,1/3H),7.28(d,2/3H),7.20-6.95(m,
41/3H),6.52(d,2/3H),5.20-5.08(m,1H),4.55-4.24(m,3H),4.10(t,
2/3H),4.05(t,1/3H),3.80-3.70(m,1H),3.70-3.50(m,4H),3.30-3.10
(m,2H),2.84(s,1H),2.80(s,2H),2.80-2.70(m,2H),2.68-2.45(m,
1H),2.37(s,2H),1.70(t,2/3H),1.52(bd,1/3H),1.44(s,2H),1.43(s,
1H),1.35(s,2H),1.33(s,1H),1.25(s,3H),1.33(s,6H),1.20-1.05(m,
2H),0.90-0.65(m,1/3H),0.30(dt,2/3H).步骤B:
将0.146g上面中间体在3ml甲醇和0.100ml浓盐酸中搅拌30分钟。将反应混合物蒸发至干,用***洗涤固体并干燥得到0.109g所需物质。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.63(d,2/3H),7.55(d,1/3H),7.41(d,
2/3H),7.38(d,1/3H),7.32(d,1/3H),7.26(d,2/3H),7.21-7.10(m,
4H),7.08-7.00(m,21/3H),6.63(d,2/3H),5.25(dd,2/3H),5.19(dd,
1/3H),4.36(bd,2/3H),4.30(bd,1/3H),3.92-3.83(m,1H),3.80-3.50
(m,6H),3.28-3.10(m,3H),3.05-2.95(m,2H),2.90(s,1H),2.86(s,
2H),2.78-2.55(m,4H),1.83-1.65(m,1H),1.43(s,2H),1.39(s,2H),
1.37(s,1H),1.32(s,1H),136-1.20(m,1H),0.04-0.18(m,22/3H),
-0.08(dt,2/3H).
实施例41
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[3-[2(R)-羟基丙基]氨基]-3-甲基丁酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-[3-[2(R)-羟基丙基]氨
基]-3-甲基丁酰胺盐酸盐
向0.26g实施例39步骤B的中间体中加入5ml无水甲醇、1.5g无水乙酸钠、新制得的0.10g 2(R)-(四氢吡喃基)氧基丙醛,并在室温下搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠的THF溶液(8.5ml 1M溶液)并搅拌18小时。反应混合物用10ml饱和碳酸氢钠溶液稀释,用二氯甲烷(2×15ml)萃取。合并的有机液用盐水(10ml)洗涤,用K2CO3干燥并浓缩。以CH2Cl2-甲醇(98∶2)作为洗脱剂,用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.219g所需产物。
将上面物质在3ml无水甲醇和0.10ml浓盐酸中搅拌,蒸发至干,用***研制剩余物,得到0.174g标题化合物,为浅黄色泡沫状物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.63(d,2/3H),7.55(d,1/3H),7.41(d,
2/3H),7.38(d,1/3H),7.32(d,1/3H),7.26(d,2/3H),7.21-7.10(m,
4H),7.08-7.00(m,21/3H),6.63(d,2/3H),5.25(dd,2/3H),5.19(dd,
1/3H),4.36(bd,2/3H),4.30(bd,1/3H),3.92-3.83(m,1H),3.80-3.50
(m,4H),3.28-3.10(m,3H),3.05-2.95(m,2H),2.90(s,1H),2.86(s,
2H),2.78-2.55(m,4H),1.83-1.65(m,1H),1.43(s,2H),1.39(s,2H),
1.37(s,1H),1.32(s,1H),1.36-1.20(m,1H),1.28(d,3H),0.04-0.18
(m,22/3H),-0.08(dt,2/2H).
实施例42
N-[1(R)-[[3-氧代螺[异苯并呋喃-1(3H),4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:
向0.165g按实施例19步骤B所述制得的酸中间体的10ml CH2Cl2溶液中加入0.095g 3-氧代螺[异苯并呋喃-1(3H),4′-哌啶]、0.067gHOBT和0.110g EDC,并在室温下搅拌4小时。将反应混合物倾入10mlCH2Cl2中,用20%柠檬酸水溶液(5ml)、饱和碳酸氢钠溶液(5ml)洗涤,用MgSO4干燥并浓缩。以己烷-丙酮(3∶1)作为洗脱剂用10g硅胶快速色谱法纯化剩余物,得到0.234g偶合产物。
向0.024g上面中间体的1ml CH2Cl2溶液中加入1.0ml三氟乙酸,并在室温下保持30分钟。蒸发挥发物,用***研制剩余物,得到21mg固体标题化合物。
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ7.85(d,1/2H),7.80(d,1/2H),7.63(t,
1/2H),7.54-7.40(m,21/2H),7.35-7.20(m,51/2H),7.06(d,1H),6.58
(d,1/2H),5.25-5.15(m,1H),4.93(s,1H),4.69(bd,1H),4.55-4.40(m,
2H),4.14(bd,1H),3.70-3.40(m,2H),3.18-3.10(m,1H),2.13(dt,
1H),2.90-2.75(m,2H),2.70-2.50(m,2H),1.47(s,1.5H),1.46(s,
1.5H),1.44(s,1.5H),1.43(s,1.5H),
实施例43
N-[1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-4-苯基丁基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-4-苯基丁基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
用制备实施例18化合物所述的化学方法,由2(R)-N-叔丁氧羰基-5-苯基戊酸和1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐,制得该标题化合物。
FAB-MS计算值C28H38N4O4S:MW=526.2;实测值m/e=(m+1)527.9。
实施例44
N-[1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-苯基甲硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:N-[1(R)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-苯基甲硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三
氟乙酸盐
用制备实施例18化合物所述的化学方法,由市场上可买到的N-t-BOC-S-苄基-D-半胱氨酸和1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐,制得标题化合物。
FAB-MS计算值C27H36N4O4S2:MW=544.7;实测值m/e=(m+1)548.5。
实施例45
N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(2′-吡啶甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-羟基-2-氨基甲酸1,1-二甲基乙酯
在室温下,向N-t-BOC-(D)-丝氨酸(56mg,274mmol)的2.5ml THF溶液中加入1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐(由实施例18步骤A制得,83mg,0.274mmol)、三乙胺(45ml,0.33mmol)、HOBt(44mg,0.33mmol)和EDC(63mg,0.33mmol)。3小时后,混合物用乙酸乙酯稀释,然后依次用水、盐水洗涤。将有机层用硫酯钠干燥、过滤并浓缩。通过MPLC(硅胶,100%乙酸乙酯)纯化剩余物,得到112mg(90%)标题化合物。步骤B:N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(2′-吡啶甲氧基)乙基]氨基甲酸1,1-二甲基
乙酯
向在0.3ml THF中的无油氢化钠(用己烷(3×)洗涤60%氢化钠的油分散体来制备,9mg,0.21mmol)中加入2-吡啶甲基氯(16mg,0.1mmol)的0.3ml DMF溶液。5分钟后,将步骤A所得的中间体(45mg,0.1mmol)加到反应混合物中,将混合物在室温下搅拌两小时,然后用***稀释,***层用水(5×)、盐水洗涤,用硫酸钠干燥。纯化(制备型TLC,硅胶,100%乙酸乙酯)后,分离得到16mg标题化合物(29%)。
1H NMR(400Mz,CDCl3,旋转异构体的混合物):8.53(m,1H),7.77-
6.83(m,7H),5.75(m,1/2H),4.98 (m,2H),4.67(m,21/2H),4.25
(m,1/2H),4.10(m,1/2H),3.91-3.67(m,4H),3.17(m,1H),2.91(s,
3/2H),2.89(s,3/2H),2.79(m,1H),1.95-1.69(m,4H),1.42(s,9/2
H),1.41(s,9/2H).步骤C:N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(2′-吡啶甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰
胺三氟乙酸盐
将步骤B得到的中间体(16mg,0.029mmol)的0.5ml三氟乙酸溶液在室温下搅拌半小时,然后浓缩。向该剩余物的1ml氯仿溶液中加入叔丁氧羰基-α-甲基丙氨酸(6.5mg,0.032mmol)、HOBt(4.3mg,0.032mmol),三乙胺(10ml,0.064mmol)和EDC(6mg,0.032mmol)。在室温下12小时后,混合物用二氯用烷稀释,然后用水和盐水洗涤,将有机层用硫酸钠干燥,过滤并浓缩。通过制备型TLC纯化(硅胶,100%乙酸乙酯)剩余物。浓缩纯化的化合物。室温下向剩余物中加入三氟乙酸。1小时后,浓缩该混合物得到标题化合物(5.3mg)。
1H NMR(400MHz,CD3OD,旋转异构体的混合物):
8.70(宽.s,1H),
8.30(m,1H),7.84(m,1H),7.77(m,1H),7.36(m,1H),7.24(m,1
1/2H),7.06(m,11/2H),5.24(t,6Hz,1H),4.86(m,2H),4.56(d,13
Hz,1H),4.08(m,1H),3.95(m,4H),3.36(m,1H),2.97(s,3/2H),
2.96(s,3/.2H),2.01-1.78(m,4H),1.63(s,3/2H),1.61(s,3/2H),
1.59(s,3/2H),1.58(s,3/2H).
实施例46
N-[1(R,S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(2′-吡啶硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(2′-吡啶硫基)乙基]氨基甲酸1,1-二甲基乙
酯
在-10℃下,向无油的氢化钠(600mg,7.5mmol)的20ml DMF悬浮液中加入N-t-BOC-D-半胱氨酸(1.2g,5.4mmol)的20ml DMF溶液。将混合物温热至室温并再搅拌1小时。向反应混合物中加入2-溴吡啶(0.514ml,5.4mmol)的10ml DMF溶液。在80℃下加热20小时后,向该反应混合物中加入CuI(1.03g,5.4mmol),并在同样温度下再搅拌20小时。将混合物冷却至室温,并倾入0.5N盐酸中,用***萃取。通过硅藻土过滤***层,用硫酸钠干燥并浓缩。通过MPLC(硅胶,二氯甲烷/甲醇=10/1)纯化剩余物。向纯化的化合物(170mg,0.57mmol)的二氯甲烷溶液中加入1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]盐酸盐(由实施例18步骤A制得,172mg,0.57mmol)、三乙胺(95ml,0.68mmol)、HOBt(92mg,0.68mmol)和EDC(130mg,0.68mmol),并按照实施例45步骤A所述方法进行反应,得到标题化合物(310mg,99%)。步骤B:N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(2′-吡啶硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
三氟乙酸盐
用TFA去保护方法,由步骤A得到的中间体(290mg,0.53mmol),制得标题化合物(102mg)。
1H NMR(400MHz,CD3OD,旋转异构体的混合物):8.45(dd,5,1Hz,1
H),7.61(m,1H),7.39-7.05(m,6H),5.27(m,1H),4.52(t,12Hz,
2H),4.01(m,3H),3.80(m,1H),3.45(m,1H),2.98(s,3H),2.90
(m,1H),2.10-179(m,4H),1.63(s,3/2H),1.60(s,3/2H),1.59(s,
3/2H),1.58(s,3/2H).FAB-MS:532.7(M+1).
实施例47
N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(环己基硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺三氟乙酸盐步骤A:N-t-Boc-环己基半胱氨酸
在室温下,向环己基硫醇(1ml,8.18mmol)和2-乙酰氨基丙烯酸甲酯(1.29g,9mmol)的THF溶液中加入催化剂量的氢化钠。7天后,浓缩反应混合物。将剩余物的20ml 6N盐酸溶液回流4小时并冷却至室温。将所得溶液放置12小时并过滤。真空干燥固体,向此盐酸盐在1N氢氧化钠溶液(15ml)中的混合物中加入连二碳酸二叔丁酯(1.68g,7.7mmol)的15ml 1,4-二噁烷溶液。12小时后,将混合物倾入0.5N盐酸中,用乙酸乙酯萃取。有机层用水、盐水洗涤,用硫酸钠干燥、过滤并浓缩后,分离得到标题化合物,产率92%(2.23g)。步骤B:N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(环己基硫基)乙基]氨基甲酸1,1-二甲基乙
酯
用实施例45步骤A所述方法,由步骤A得到的中间体(303mg,1.0mmol),制得标题化合物(420mg),产率76%。步骤C:N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(环己基硫基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧
基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺
将步骤B得到的中间体(420mg,0.76mmol)的5ml三氟乙酸溶液在室温下搅拌半小时,然后浓缩并干燥。向该剩余物的10ml氯仿溶液中加入叔丁氧羰基-α-甲基丙氨酸(170mg,0.84mmol)、HOBT(113mg,0.84mmol)、三乙胺(116ml,0.84mmol)和EDC(160mg,0.84mmol)。室温下12小时后,混合物用二氯甲烷稀释,用水和盐水洗涤。有机层用硫酸钠干燥,过滤并浓缩。剩余物通过MPLC纯化(硅胶,己烷/乙酸乙酯=1/1),得到标题化合物(430mg),产率89%。步骤D:N-[1(R,S)-[1.2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(环己基硫基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
三氟乙酸盐
将步骤C得到的中间体(35mg,0.055mmol)的0.5ml三氟乙酸溶液在室温下搅拌半小时,然后浓缩,得到标题化合物(33mg)。
1H NMR(400MHz,CD3OD,旋转异构体的混合物):7.38(d,8Hz,1
H),7.25-7.17(m,2H),7.06(m,IH),5.02(m,1H),4.52(m,1H),
4.11(m,1H),3.97(m,2H),3.39(m,1H),3.02(m,1H),2.98(s,3
H),2.90-2.71(m,3H),2.05-1.74(m,9H),1.62(s,3/2H),1.61(s,3/2
H),1.60(s,3/2H),1.57(s,3/2H),1.32(m,5H).FAB-MS:537.9
(M+1).
实施例48
N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(环己基亚磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
在室温下,向实施例47步骤C得到的中间体(35mg,0.055mmol)的1ml甲醇溶液中加入高碘酸钠的1ml水溶液。两小时后,反应混合物用乙酸乙酯稀释,用亚硫酸钠水溶液洗涤。有机层用硫酸钠干燥,过滤并浓缩。用三氟乙酸方法(实施例47、步骤D)使剩余物去保护,得到粗产物,将其通过制备性TLC纯化(硅胶,二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵=10/1/0.1)。用HCl的***溶液再酸化纯化了的产物得到标题化合物(21mg)。
1H NMR(400MHz,CD3OD,非对映异构体和旋转异构体的混合物):
7.38-7.04(m,4H),5.43(m,1H),4.50(m,1H),4.05(m,1H),3.96
(m,2H),3.38(m,1H),3.13(m,1H),2.98(s,3H),2.90-2.71(m,3
H),2.05-1.74(m,9H),1.62(m,6H),1.51-1.32(m,5H).FAB-MS:
553.9(M+1).
实施例49
N-[1(R,S)-[1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(环己基磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
在室温下,向实施例47步骤C得到的中间体(35mg,0.055mmol)的1ml甲醇溶液中加入过硫酸氢钾制剂的1ml水溶液。两小时后,反应混合物用乙酸乙酯稀释,用亚硫酸钠水溶液洗涤。有机层用硫酸钠干燥,过滤并浓缩。用实施例47步骤D所述方法,向剩余物中加入三氟乙酸,得到粗产物,将其通过制备性TLC纯化(硅胶,二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵=10/1/0.1)。用HCl的***溶液再酸化纯化了的产物得到标题化合物(12mg)。
1H NMR(400MHz,CD3OD.旋转异构体的混合物):7.36(dd,7,2Hz,
1H),7.22(m,2H),7.06(m,1H),5.53(m,1H),4.51(m,1H),4.11
(m,1H),3.95(m,2H),3.49(m,2H),3.38(m,1H),3.10(m,1H),
2.98(s,3/2H),2.97(s,3/2H),2.91(m,1H),2.20-1.74(m,9H),1.62
(s,3/2H),1.61(s,3/2H),1.58(s,3/2H),1.57(s,3/2H),1.51-1.32(m,
5H).FAB-MS:569.9(M+1).
实施例50
N-[1(R)-[螺[苯并[b]噻吩-3(2H),4′-哌啶]-1′-基羰基-2-吲哚-3-基)乙基-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-3-羟基-4-亚甲基-1,2,5,6-四
氢吡啶
在0℃下,向碘化甲基三苯基鏻(30g,74mmmol)的150ml THF悬浮液/溶液中缓慢加入丁基锂(2.5N,25.5ml,63.7mmol)。在室温下搅拌1小时后,将N-t-BOC保护的4-哌啶酮(按Protective Groups inOrganic Synthesis T.W.Greene,John Wiley and Sons,NY.1981.中所述方法,由4-哌啶酮一水合物盐酸盐制备)的50ml THF溶液在室温下缓慢加入到反应混合物中。将反应混合物搅拌2小时并过滤,浓缩滤液并纯化(MPLC,硅胶,己烷/乙酸乙酯=10/1),得到Wittig产物(7.9g),产率82%。
向二氧化硒/硅胶(按Chem、Lett.1981,1703中所述方法制备)的30ml二氯甲烷悬浮液中加入叔丁基氢过氧化物(1.23ml)。15分钟后,加入Wittig产物(0.72g,3.69mmol)的5ml二氯甲烷溶液。将该混浊的溶液搅拌3小时,通过硅藻土过滤。滤液用水、盐水洗涤,用硫酸钠干燥。将有机层浓缩,通过快速色谱法纯化(己烷/乙酸乙酯=4/1),得到标题化合物,产率52%(0.41g)。步骤B:1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-4-氯甲基-1,2,5,6-四氢吡啶
将步骤A得到的中间体(400mg,1.88mmol)溶于10ml苯中,加入亚硫酰氯(165ml,2.26mmol)并加热至60℃,在此温度下保持25分钟。将所得混合物倾入NaHCO3(aq.)中,用***萃取。用硫酸镁干燥***层并浓缩,得到标题化合物(333mg,77%)。步骤C:1-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-4-[[(2-溴苯基)硫基]甲基-1,
2,5,6-四氢吡啶
将步骤B得到的中间体(330mg,1.43mmol)溶于10ml丙酮中,加入2-溴苯硫酚(172ml,1.43mmol)和碳酸钾(390mg,2.86mmol)。将反应混合物加热至60℃并保持1小时,然后通过硅胶(100%***)过滤。浓缩有机层,通过快速色谱法纯化(硅胶,己烷/乙酸乙酯=10/1),得到标题化合物(460mg),产率84%。步骤D:1′-[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]-螺[苯并[b]噻吩-3-(2H),y′-
哌啶
将步骤C所得的中间体(450mg,1.17mmol)溶于60ml苯中,加入AIBN(10mg)和氢化三丁基锡(644ml,2.3gmmol)。将该混合物回流2小时并浓缩。将剩余物溶于***中,加入溴直至反应溶液变成棕色。在室温下以滴加方式向该棕色溶液中加入DBU(650ml)。通过硅胶过滤所得的混浊溶液,并用***洗涤。浓缩***溶液,剩余物通过径向色谱法纯化(硅胶,己烷/乙酸乙酯=10/1),得到标题化合物(157mg),产率43%。步骤E:N-[1(R)-[螺[苯并(b)噻吩-3(2H),y′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-
(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
将步骤D得到的中间体(50mg,0.164mmool)的0.5ml TFA溶液在室温下搅拌半小时,然后浓缩。剩余物用氯仿稀释,用NaHCO3(aq.)洗涤。有机层用硫酸钠干燥、过滤并浓缩得到游离胺(32mg),产率95%。在室温下,向游离胺(5.1mg,0.025mmol.)的1ml氯仿溶液中加入实施例21步骤C所得到的中间体(9.2mg,0.0246mmol)、HOBt(4.0mg,0.0295mmol)和EDC(5.6mg,0.0295mmol)。12小时后,将反应混合物倾入水中,用氯仿萃取。氯仿层用硫酸钠干燥、过滤并浓缩。剩余物通过制备性-TLC纯化(硅胶,己烷/乙酸乙酯=1/1)得到无色泡沫状物(13mg,94%)。按实施例18步骤C所述方法,由该元色泡沫状物得到标题化合物。
1H NMR(400MHz,CD3OD)旋转异构体的混合物:δ7.62(d,8Hz,2/3
H),7.54(d,8Hz,1/3H),7.39(d,8Hz,2/3H),7.35(d,8Hz,1/3H),
7.19-7.00(m,61/3H),2.62(m,1H),1.72-1.65(m,21/3H),1.61(s,
4H),1.50(s,2H),0.94.(m,1H),0.10(m,2/3H).FAB-MS 477(m+1).
实施例51步骤A:1′,2-二甲基螺[异二氢吲哚-1-酮-3,4′-哌啶]
在0℃氩气氛下,向搅拌着的2-甲基异二氢吲哚-1-酮(1.47g,10mmol,从Aldrich Chemical Company购买)和甲基二氯乙基胺盐酸盐(2.9g,15mmol)的DMF(50ml)溶液中缓慢加入氢化钾(35%矿物油液,4.5g,40mmol)。然后将反应混合物缓慢温热至室温,再搅拌3小时。TLC分析(60%乙酸乙酯的己烷溶液)表明反应已完全。将混合物慢慢倾入冰中,用乙酸乙酯萃取六次。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。剩余物通过快速色谱法纯化,用梯度溶剂5-10%甲醇的二氯甲烷液洗脱,得到1.17g产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.85(dd,J=1.5Hz,6.5Hz,1H),7.81
(d,J=7.1Hz,1H),7.50-7.40(m,2H),3.03(s,3H),2.95-2.90(m,2H),
2.71(dt,J=26Hz,11.4Hz,2H),2.46(s,3H),2.31(dt,J=4.7Hz,13
Hz,2H),1.44(dd,J=1.6Hz,13Hz,2H).
FAB-MS计算值C14H18N2O,230;实测值231(M+H).步骤B:2-甲基螺[异二氢吲哚-1-酮-3,4′-哌啶]
按照Tidwell和Buchwald,J.Org.Chem.1992,57,6380-6832的脱甲基化方法,在0℃下,向搅拌着的步骤A产物(1.0g,4.35mmol)的1,2-二氯乙烷(10ml)溶液中加入氯甲酸1-氯乙酯(0.56ml,5.2mmol),将混合物搅拌20分钟。加入甲醇(10ml),将所得混合物回流1小时。蒸发并用快速柱色谱法纯化,用10-20% NH4OH-MeOH(1∶10)的氯仿液洗脱,得到0.639产物。
1H NMR(400MHz,CD3OD):δ8.02(d,J=8Hz,1H),7.85(d,J=8Hz,
1H),7.70(t,J=8Hz,1H),7.60(t,J=8Hz,1H),3.75-3.60(m,4H),
3.10(s,3H),2.60-2.51(m,2H),1.72(宽.d,J=14Hz,2H).
EIMS计算值C13H16N2O,216;实测值301(M+,5%),216(M+),
185,160.步骤C:2-甲基螺[异二氢吲哚-1-酮-3,4′-哌啶]-1′-羧酸1,1-二甲基
乙酯
在0℃氩气氛下,向搅拌着的2-甲基异二氢吲哚-1-酮(100mg)的DMF(2ml)溶液中加入过量的KH的矿物油液。5分钟后,加入氨基甲酸双(2-溴乙基)叔丁基酯(300mg),将混合物在室温下搅拌1小时,在80℃下加热过夜。将混合物倾入冰中,用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液干燥(Na2SO4)并蒸发。剩余物通过制备性-TLC纯化,用60%乙酯乙酯的己烷溶液洗脱,得到16mg产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.89(dd,J=1.3Hz,5.8Hz,1H),7.75
(d,J=6.5Hz,1H),7.54-7.40(m,2H),4.35-4.10(br.m,2H),3.02(s,
3H),2.14(dt,J=5.3Hz,13Hz,2H),1.49(s,9H),1.46-1.40(m,2H).
FAB-MS计算值C18H24N3O3,316;实测值317(M+H,100%).步骤D:2-甲基螺[异二氢吲哚-1-酮-3,4′-哌啶]
在室温下,用浓HCl和MeOH处理步骤C的中间体(16mg)2小时并蒸发得到所需产物。
该化合物的所有光谱数据与步骤B中的化合物相同。步骤E:N-[1(R)-[(2-甲基螺[异二氢吲哚-1-酮-3,4′-哌啶]-1′-基)
羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]
氨基]-2-甲基丙酰胺
按照常规肽偶合技术,由α(R)-[[2-[[(1,1-二甲基乙氧基]羰基]氨基]-2,2-二甲基-1-氧代乙基]氨基]-1H-吲哚-3-丙酸(25mg)和步骤B的产物制得标题化合物。
1H NMR(400MHz.CDCl3):δ8.58,8.44(2br.s,1H),7.80-7.15,6.44
(m,d,J=7.6Hz,总共10H),5.43-5.36,5.22-5.15,(2m,1H),4.98(宽.
s,1H),4.60-4.50(宽.m,1H),3.64-3.50(宽.m,1H),3.40-3.05,2.72-
2.64,(2m,4H),2.88,2.51(2s,3H),2.00-1.90(m,2H),1.52,1.51(2s,
3H),1.49(s,3H),1.45,1.44(2s,9H),1.40-0.40(几个m,2H).
FAB-MS计算值C33H41N5O5,587;实测值588(M+H),532,488.步骤F:N-[1(R)-[(2-甲基螺[异二氢吲哚-1-酮-3,4′-哌啶]-1′-基)
羰基]-2-(吲哚-3-基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
由步骤E的产物,用HCl的乙酸乙酯溶液制备标题化合物。
1H NMR(400MHz,CD3OD):δ7.84-6.89(m,9H),5.30,5.15(2dd,
1H),4.50-4.40(m,1H),3.85-3.77(m,1H),3.65-3.50(m),3.40-3.15
(m),2.95,2.58(2s,3H),2.95-2.85(m),2.55-2.47(m),2.22-2.15(m),
2.09-2.00(m),1.65,1.64,1.60(3s,6H),1.50-1.20(m),1.15-1.05(m),
0.9-0.8(m),0.61-0.52(m).
FAB-MS计算值C28H33N5O3,471;实测值472(M+H).
实施例52
N-[1(R)-[[1-[[[[[6-[[[4-叠氮基-2-羟基-5-碘苯基]羰基]氨基]己基]氨基]羰基]甲基]磺酰基]-2,3-二氢螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基]羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐
向可从市场上买到的N-羟基琥珀酰亚氨基-4-叠氮基-2-羟基-苯甲酸酯的5ml CH2Cl2溶液中加入6-N-叔丁氧羰基-正己胺盐酸盐和0.10ml Hunig碱,并搅拌4小时。将反应混合物蒸发至干并通过15g硅胶色谱法纯化,用己烷-乙酸乙酯(2∶1)洗脱,得到0.229g酰化产物。向29mg上面产物中加入2ml THF和2ml 0.01M NaOH水溶液、25mg碘化钾。加入氯胺T(15mg)并搅拌30分钟。反应用2ml饱和硫代硫酸钠溶液中止,用5ml 0.05N HCl稀释,并用乙酸乙酯(2×5ml)萃取。合并的有机相用盐水(5ml)洗涤,经MgSO4干燥并浓缩。剩余物用快速色谱法(5g硅胶)纯化,用己烷-***(3∶1)洗脱,得到26mg碘化物质。用4M HCl的乙酸乙酯溶液进行N-叔丁氧羰基的去保护,得到21.4mg盐酸盐。
向该物质的5ml CH2Cl2溶液中加入49mg实施例33步骤A的酸中间体、0.016mml NMM、19.8mg HOBT和29mg EDC,并搅拌18小时。按常规方法处理反应混合物并纯化。
再用4MHCl的乙酸乙酯溶液进行N-叔丁氧羰基的去保护。得到黄棕色固体标题化合物。将该物质通过溶于2ml饱和NaHCO3溶液中进行碱化,并用CH2Cl2(2×3ml)萃取。合并的有机相经Na2SO4干燥,并浓缩为标题化合物。
1H NMR(CDCl3,400MHz)化合物以3∶2的旋转异构体的混合物存在:
δ8.40-8.20(m,1H),7.95(s,2/3H),7.90(s,1/3H),7.40-
6.90(m,91/3H).6.70(s,2/3H),6.55(m,1H),5.20-5.10(m,1H),
4.70-4.40(m,4H),4.10-3.80(m,5H),3.80-3.50(m,4H),3.40-3.10
(m,4H),3.10-3.00(m,1H),2.70(dt,1H),1.90-1.20(m,14H),1.30(s,
6H).
实施例53
N-[1(S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐步骤A:N-[1(S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺
将试样N-[1(S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲硫基)乙基]-2-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-2-甲基丙酰胺(实施例44,步骤C)72mg溶于0.5ml甲醇中,并在冰浴中冷却。搅拌下向其中滴加101mg OXONE(TM)的0.5ml水溶液。通过在硅胶GF板上用2∶1 EtOAc:己烷展开的TLC对反应监测数小时;通过消耗起始原料观察到逐渐又形成两个极化点。当起始原料基本用完时,在氮气流下使反应混合物接近干燥,剩余物用氯仿萃取。MgSO4干燥过的萃取液经过制备性TLC,在8M×8M×1,000μ硅胶GF板上用EtOAc:己烷展开;分离出两个谱带。将极性较小的组分溶于0.5ml苯甲醚中,在冰浴中冷却,并用0.5ml TFA处理。将反应物塞好并移出冷浴。30分钟后,用抽气泵抽真空的条件下除去大部分TFA,在氮气流下蒸发出大部分剩余的苯甲醚。剩余物溶于氯仿中并与1M K2HPO4一起震荡,向其中加入足够的NaOH使PH>9。然后除去氯仿,水相用氯仿萃取数次,合并的有机相用MgSO4干燥,减压浓缩得到胶状物。通过制备性TLC纯化,在硅胶GF板上用0.5∶5∶95浓NH4OH∶MeOH∶CHCl3展开,得到标题化合物的游离碱。
C27H36N4O6S2计算值:MW=576.7;实测值m/e=(m+1)577.5。步骤B:N-[1(S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰
胺盐酸盐
用上述标准方法制备上面步骤A化合物的盐酸盐,得到标题化合物。
实施例54
两种N-[1(S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲亚磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺盐酸盐的制备步骤A:N-[1(S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲亚磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙
酰胺
使实施例53步骤A的极性较大的谱带经过所述的TFA/苯甲醚去保护步骤,然后用同样的制备性TLC处理,分离出两个谱带,它们相应于预期的两个非对映的亚砜。对极性较小的非对映体:C27H36N4O5S2计算值:MW=560.7;实测值m/e=(m+1)561.7。对极性较大的非对映体:C27H36N4O5S2计算值:MW=560.7;实测值m/e=(m+1)561.7。步骤B:N-[1(S)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]
-1′-基)羰基]-2-(苯基甲亚磺酰基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙
酰胺盐酸盐
用上面步骤A分离出的两种化合物之一代替用于制备实施例53步骤B的化合物的实施例53步骤A中制备的化合物,得到标题化合物。
实施例55
N-[1(R)-[(1,2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺甲磺酸盐
该化合物的制备是用甲磺酸处理实施例18步骤C中得到的游离碱。将该化合物经乙酸乙酯-乙醇-水重结晶,得到标题化合物。m.p.=166-168℃。
实施例56
2,3,3a,4,6,6a,-六氢-2-氧代-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4(S)-戊酸-6-[[[[[1′-[[(29R)-[[2-氨基-2-甲基-1-氧代丙基]氨基]-3-(苯基甲氧基)-1-氧代丙基]-2,3-二氢螺[3H-吲哚-3,4′-哌啶]-1′-基]磺酰基]甲基]羰基]氨基]己基酯三氟乙酸盐
向0.108g实施例33步骤A中制备的中间体的5ml CH2Cl2溶液中加入20mg 6-氨基己醇、28mg HOBT和42mg EDC,并搅拌4小时。反应混合物用10ml CH2Cl2稀释,用0.5N HCl(5ml)、饱和NaHCO3水溶液(5ml)洗涤,经MgSO4干燥并浓缩。以CH2Cl2-丙酮(1∶1)作洗脱剂通过快速色谱法(10g硅胶)纯化剩余物。
向56.2mg上面中间体的2ml CH2Cl2和2ml DMF溶液中加入23mg生物素、14mg DMAP、28mg EDC,并搅拌18小时。按常规方法处理反应混合物。剩余物通过硅胶(5g)快速色谱法以CH2Cl2-丙酮(1∶1)作洗脱剂进行纯化,得到22mg生物素轭合物。在CH2Cl2-TFA中进行N-叔丁氧羰基的去保护,得到18.9mg标题化合物,为白色固体。
1H NMR(CDCl3,400MHz)化合物为3∶2的旋转异构体的混合物。
d 8.45-8.23(m,1H),7.9(s,1H),7.40-7.28(m,4H),7.25-
7.17(m,2H),7.00(dt,2/3H),6.80(d,1/3H),5.21-5.14(m,1H),4.60-
4.42(m,4H),4.28(bt,1H),4.15-4.00(m,6H),3.85-3.70(m,2H),
3.20-3.10(m,3H),2.90(dd,1H),2.83(dt,1H),2.70(d,1H),2.40-2.25
(m.2H),2.00-0.60(m,18H),1.62(s,3H),1.60(s,3H).